PROSPECÇÃO FITOQUÍMICA PRELIMINAR DAS RAÍZES, CAULES E FOLHAS DE ADENOCALYMMA IMPERATORIS-MAXIMILIANII (WAWRA) L.

G. LOHMANN, BIGNONIACEAEA.

Os resultados da prospecção fitoquímica mostraram que a raíz de Adenocalymma imperatoris-maximilianii, apresentaram açucares redutores, flavonóides, taninos condensados, triterpenos/esteróides e heterosídeos saponínicos. O caule apresentou: cumarinas, taninos hidrolisáveis, açúcares redutores, derivados cinâmicos, flavonóides, triterpenos/esteróides. Foram evidenciados nas folhas: açúcares redutores, derivados cinâmicos, flavonóides, taninos condensados, triterpenos/esteroides (Quadro 3). Os cromatogramas da prospecção fitoquímica prelinar dos extratos brutos de raíz, caule e folhas estão representados na figura 19, e a figura 20 representa o teste de afrogenicidade.

Quadro 3 – Análise fitoquímica preliminar dos extratos brutos da raiz, caule e folhas de A.

imperatoris maximilianii (Wawra) L. G. Lohmann, Bignoniaceae.

Classe de Metabólitos Parte Vegetal

Raiz Caule Folha

Cumarinas (Figura 19 A) - + -

Taninos hidrolisáveis (Figura 19 B)

- ---- -

Açúcar (Figura 19 C) + + +

Derivados cinâmicos (Figura 19 E)

- + +

Flavonóides (Figura 19 E) + + +

Taninos condensados (Figura 19 D)

+ - +

Triterpernóides e Esteróides (Figura 19 F)

Fonte: Elaborada pelo autor.

Figura 19– Cromatogramas dos constituintes químicos evidenciados nos extratos brutos metanólicos da raiz, caule e folhas de A. imperatoris-maximilianii (Wawra) L. G. Lohmann, Bignoniaceae. Cumarinas (A), taninos hidrolisáveis (B), açúcares (C), proantocianidinas e leucoantocianidinas (D), derivados cinâmicos e flavonóides (E) e Triterpenos e esteróides (F). (1) raiz, (2) caule, (3) folha e (P) padrão.

Fonte: Acervo do Autor

Figura 20– (A) Tubo de ensaio contendo extrato bruto da raiz de A. imperatoris- maximilianii (Wawra) L. G. Lohmann, Bignoniaceae. Apresentando espuma persistente após 2 horas. (B) Capilares contendo água e o extrato bruto da raiz, respectivamente, demonstrando a presença de saponinas no extrato por diminuir a tensão superficial e aumentar o escoamento. Seta amarela: nível da água; seta vermelha: nível do extrato.

Fonte: Acervo do Autor

Os resultados da prospecção fitoquímica da espécie em estudo corroboram com os descritos por Cipriani et al. (2007) os quais relatam que a família Bignoniaceae é caracterizada quimicamente pela presença de flavonóides, terpenóides, quinonas, principalmente naftoquinonas e compostos aromáticos tais como: lignanas, cinamoil, benzoil e derivados acetofenônicos.

A prospecção fitoquímica de A. imperatoris-maximilianii, evidenciou um perfil semelhante aos encontrados nas espécies Adenocalymma peregrinum e Adenocalymma nodosum. Entre as substâncias encontradas para as duas espécies, Tresvenzol et al. (2005) destacam as seguintes classes de metabólitos secundários: flavonóides, carboidratos, iridóides e heterosídeos saponínicos.

Metabólitos secundários como flavonóides e ácidos fenólicos, foram evidenciados após fitoquímica preliminar da espécie Oroxylum indicum (Bignoniaceae) os quais têm sido testados para diferentes fins, evidenciando múltiplos efeitos

biológicos incluindo, atividade antioxidante (CONFORTI et al., 2008); bem como antiinflamatório, diuréticos, antiartríticos, antifúngicos e antibacterianos (MAITREYI et al., 2008).

Os extratos metanólicos das folhas de Newbouldia leavis (Bignoniaceae) foram submetidos a uma triagem fitoquímica preliminar, revelando a presença de flavonóides, taninos, terpenos, esteróides e glicosídeos cardiacos, os mesmos foram testados em ensaios antibacterianos in vitro (USMAN; OSUJI, 2007).

Autores destacam a utilização de extratos contendo taninos, amplamente empregados no tratamento de entorses, contusões e feridas superficiais e são também responsáveis por propriedades antidesintéricas e antidiarréicas (HUSMAN; OSUJI, 2007; GALVEZ et al., 1991, 1993; LOGANGA et al., 2000).

Estudos revelaram que os esteróides são em parte responsáveis por atividades antidiarreicas e também antifúngicas (HANWA et al., 2007).

5.3 PURIFICAÇÃO DE METABÓLITOS SECUNDÁRIOS

5.3.1 CROMATOGRAFIA EM COLUNA

Foram realizadas, duas colunas da partição aquosa do extrato metanólico da raiz (6 g), obtendo-se uma fração enriquecida com flavonóides (Figura 21), oriunda da junção das frações 13 a 23 (cerca de 900 mL da fase móvel metanol/água 1:1 – 987 mg após rotaevaporação).

Figura 21– Cromatograma de CCD dos constituintes químicos presente em Adenocalymma

imperatoris-maximilianii (Wawra) L. G. Lohmann, Bignoniaceae (Fase

estacionária: silica; fase móvel: Acetato de etila - ácido acético - ácido fórmico - água 100:11:11:27, v/v). (987 mg) Frações da coluna.

Fonte: Acervo do Autor

5.3.2 CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA PREPARATIVA (CCDP)

A fração enriquecida da raíz foi submetida à cromatografia em camada delgada preparativa (Figura 22) utilizando-se como fase estacionária celulose, e ácido acético: água (15:85 v:v) como fase móvel. Após migração das substâncias do ponto de aplicação, surgiram varias bandas, as quais foram raspadas e ressuspendidas em solvente específico e filtrada, obtendo assim várias amostras contendo de 1 a 3 substâncias (Figura 23).

Figura 22 – Cromatograma da CCDP da fração enriquecida da raíz evidenciando várias bandas dos constituintes químicos da espécie Adenocalymma imperatoris-maximilianii (Wawra) L. G. Lohmann

Fonte: Acervo do Autor

Figura 23– Cromatograma da CCD análitica das frações da raíz, obtidas em CCDP anteriores da fração enriquecida evidenciando várias bandas dos constituintes químicos de Adenocalymma imperatoris-maximilianii (Wawra) L. G. Lohmann, Bignoniacaea.

Fonte: Acervo do Autor

Depois de seguidas CCDPs, foram obtidos 98 mg da substância G1 (G 1) e 30 mg substância G2 (G 2) (Figura 24). 25 mg de G1 foi usados para elucidação, por dados espectrais de ressonância magnética nuclear (RMN) de prótons e carbono 13 e cromatografia gasosa acoplado a massa de alta resolução.

Figura 24 – Cromatograma evidenciando as substâncias purificadas G1 e G2 da raíz de A.

imperatoris-maximilianii (Wawra) L. G. Lohmann.

Embora, muitas plantas têm sido avaliadas do ponto de vista farmacoquímico, há a necessidade de mais abordagens para encontrar compostos fitoquímicamente eficazes. Assim, devemos investigar desde plantas sem ou com conhecimento tradicional etnobotânico, para que se possa chegar à descoberta de drogas utilizando abordagens altamente sofisticadas as quais possam ser úteis neste campo do conhecimento.

As classes de metabólitos secundários encontrados neste estudo são amplamente utilizadas como alternativa terapêutica para várias patologias anticâncer, anti- inflamatório, antioxidante e antibacteriano, destacando assim a espécie Adenocalyma imperatoris-maximilinii (Wawra) L. G. Lohmann, como uma fonte natural na busca de novos constituintes químicos que possam se tornar possíveis fármacos. Estes resultados são as primeiras contribuições químicas para a espécie em estudo.