3.3.1 Primeira Geração
Com o objetivo de diminuir o tempo de trabalho e acelerar o processo de seleção, foram disponibilizadas um total de 50 colmeias, as quais formaram o grupo inicial de colmeias que foi utilizado para a avaliação e primeira seleção das linhagens genéticas deste programa de melhoramento genético.
Estas colmeias foram escolhidas durante a safra de produção de própolis que foi desde novembro de 2010 até maio de 2011. Estas colmeias foram selecionadas diretamente pelos apicultores responsáveis pela coleta e manejo contínuo destes apiários comerciais localizados na região de produção. Para que uma colmeia fosse escolhida, deveria ter apresentado uma boa coleta de própolis verde durante a fase de produção, ou seja, selecionaram-se colmeias que sempre tivessem produzido lâminas de própolis completas e com qualidades típicas da própolis verde.
Posteriormente, as colmeias selecionadas foram individualmente transportadas e redistribuídas em cinco apiários contendo cada um somente dez colmeias para facilitar o manejo e a coleta de dados. Estas colmeias foram monitoradas, passando por observações e testes para a avaliação das características utilizadas para a primeira seleção: Comportamento higiênico, taxa de infestação de Varroa e incidência de Nosema.
De acordo com os dados obtidos nestes cinco apiários, foram selecionadas as colmeias que apresentaram os melhores indicadores das diferentes características selecionadas, baseando-se no seguinte critério:
• Comportamento higiênico > 90%
• Porcentagem de infestação de Varroa < 5%
• Ausência de esporos de Nosema ou baixa incidência
Assim, a partir do grupo inicial de colmeias selecionadas na primeira geração, nove colmeias foram escolhidas e estabelecidas como linhagens genéticas. Essas
colmeias tiveram suas respectivas rainhas retiradas e transportadas para a Universidade de São Paulo (USP) de Ribeirão Preto, onde foram identificadas e introduzidas em núcleos de cinco favos no apiário experimental, para assim dar inicio à produção controlada de rainhas.
A introdução destas rainhas foi realizada por meio de telas para aumentar a aceitação nos núcleos. Após 48 horas da introdução estas telas foram removidas e as rainhas ficaram livres ao interior de cada colmeia. Estes núcleos foram semanalmente alimentados e inspecionados para se acompanhar o crescimento individual e mantê-los nas melhores condições. Assim que estas rainhas iniciaram postura foi iniciado o processo de produção de rainhas virgens destas colmeias.
Devido à falta de padronização de algumas práticas de manejo realizadas nos apiários comerciais de produção de própolis e falta de tempo disponível para realizar os cruzamentos controlados entre as linhagens maternas e paternas (inseminação), foi determinado que a partir deste grupo inicial de colmeias selecionadas, somente utilizaríamos rainhas filhas de três rainhas do total das nove rainhas selecionadas. Para esta primeira parte determinamos que seria inviável trabalhar nos cruzamentos por meio do uso da inseminação devido, principalmente, ao tempo disponível para o envio das rainhas virgens. Desta forma o material selecionado foi utilizado como material genético base para a produção das rainhas no apiário experimental da USP campus Ribeirão Preto e imediatamente enviadas e testadas em campo. Assim, foram estabelecidas três linhagens genéticas as quais seriam testadas na próxima safra de produção de própolis.
3.3.2 Segunda Geração
Aproximadamente mais de 100 rainhas virgens (F1) foram produzidas a partir das três diferentes linhagens genéticas. Estas rainhas foram respectivamente marcadas e engaioladas individualmente com o objetivo de serem transportadas e introduzidas em colmeias previamente divididas nos apiários de produção localizadas na região de estudo.
Após a introdução destas rainhas nas colmeias produtivas, a sua aceitação foi confirmada visualmente pela presença da marca no tórax da rainha. As colmeias nas quais não observamos rainhas marcadas foram consideradas como colmeias com rainhas não selecionadas. As rainhas enviadas foram divididas nos diferentes grupos de trabalho de campo, fator que impossibilitou a avaliação de cada uma destas colmeias. Entretanto, durante a fase deste trabalho tentamos avaliar o maior número destas rainhas (F1).
Na segunda seleção do material parental foi avaliado um número maior de colmeias. Foram escolhidos 10 apiários em produção (com um total de 263 colmeias), durante esta fase, a seleção inicial do material se baseou principalmente na produção individual de própolis de cada colmeia. Estes apiários eram formados tanto de colmeias com rainhas filhas da primeira seleção (F1= 34 colmeias), como também de colmeias com rainhas de origem desconhecida (229 colmeias). A avaliação foi realizada após o estabelecimento do material selecionado (rainhas F1) e durante o mês de dezembro de 2011 ao mês de junho de 2012, que corresponde à seguinte safra produtiva.
Das colmeias monitoradas nos dez apiários de produção foi selecionado um total de 60 colmeias, pela normalização dos valores de produção aos valores Z. Segundo, as respostas individuais de cada colmeia estas podem então ser transformadas em unidades de desvio padrão e comparadas, com o objetivo de selecionar as matrizes. O valor Z foi calculado como:
=
−
Onde:
X = quantidade de própolis coletada por cada colmeia; M = média de produção de própolis por apiário e S = desvio padrão por apiário.
As 60 colmeias selecionadas segundo a produção de própolis foram avaliadas individualmente com o objetivo de conhecer as características de seleção que foram utilizadas para a seleção inicial das matrizes (Comportamento higiênico, porcentagem de infestação de Varroa e incidência de Nosema).
A partir deste grupo de colmeias foram selecionadas 10 colmeias com o objetivo de estruturar cinco linhas genéticas as quais serão testadas na próxima safra de produção de própolis (Dezembro 2012 até junho 2013). A seleção destas colmeias teve o seguinte critério:
• Comportamento higiênico > 95%
• Porcentagem de infestação de Varroa < 5%
• Ausência de esporos de Nosema ou baixa incidência
Assim como na primeira geração, as rainhas provenientes do material selecionado foram transportadas e instaladas no apiário experimental da USP. Para a segunda geração esperamos poder realizar os devidos cruzamentos entre as linhagens selecionadas utilizando a inseminação. Isto nos permitirá estabelecer as matrizes de seleção. Esperamos para esta fase criar cinco linhas genéticas. Este material será mantido no apiário da USP campus Ribeirão Preto e serão replicadas com o objetivo de realizar as devidas substituições das rainhas menos produtivas nos apiários de produção.
Já foi determinado que para esta fase serão produzidas um total de 400 rainhas (F2), filhas das cinco linhas genéticas. Ao longo do tempo esperamos adicionar novos parâmetros de seleção, os quais serão determinados e estipulados durante reuniões diretas com a parte interessada deste programa de melhoramento genético.
3.4 AVALIAÇÃO DE MATERIAL NÃO SELECIONADO E PADRONIZAÇÃO DE