2. Material e Métodos
2.4. Tratamento estatístico
Inicialmente, realizou-se o cálculo das médias ± desvio padrão das áreas obtidas. Para o tratamento estatístico dos dados procedeu-se à comparação de médias pelo teste de Tukey, recorrendo ao software estatístico SPSS versão 23. A análise em componentes principais – PCA, foi realizada com recurso ao Statistica 6.1 software (StatSoft, Tulsa, OK, USA).
Capítulo III
Capítulo III – Resultados e Discussão
24
3. Resultados e Discussão
3.1. Perfil das antocianinas individuais dos clones da casta Tinta Roriz
Neste trabalho foram extraídas as antocianinas das películas das uvas de 20 clones da casta Tinta Roriz. Procedeu-se a uma análise cromatográfica por HPLC dos extratos de cada clone, o que permitiu fazer a deteção e identificação das antocianinas individuais, e desta forma, obter o perfil antociânico de cada clone. Para esta identificação, recorreu-se aos tempos de retenção médios obtidos, apresentados na tabela 6, assim como aos espectros UV- visível e a dados referenciados na literatura (Alcalde-Eon et al., 2014; Cruz et al., 2012; Revilla et al., 2001; Revilla et al., 1999). Na identificação individual das antocianinas deparamo-nos com a co-eluição das antocianinas peonidina-3-glucósido e malvidina-3- glucósido, bem como da peonidina-3-acetilglucósido e da malvidina-3-acetilglucósido. Nestes casos foi necessário recorrer aos espectros UV - visível para garantir que se tratava de uma sobreposição de picos. Assim, nas tabelas de resultados referentes às percentagens de área das antocianinas individuais, a peonidina-3-glucósido e a malvidina-3-glucósido são designadas como pe+mv-3-gluc, tal como para a peonidina-3-acetilglucósido e a malvidina-3- acetilglucósido, como pe+mv- 3- acetilgluc.
Tabela 6. Identificação das antocianinas e respetivos tempos de retenção (média ±desvio padrão).
Antocianinas Tempo de retenção (min)
dl-3-gluc 18,41 ± 0,07 ci-3-gluc 19,30 ± 0,06 pt-3-gluc 19,53 ± 0,05 pe+mv-3-gluc 20,61 ± 0,04 dl-3-acetilgluc 21,08 ± 0,08 pt-3-acetilgluc 22,14 ± 0,07 pe+mv-3-acetilgluc 23,33 ± 0,03 pt-3- cumarilgluc 24,28 ± 0,02 pe-3- cumarilgluc 24,70 ± 0,02 mv-3- cumarilgluc 25,23 ± 0,02
Na tabela 7 está apresentada a análise detalhada de cada uma das antocianinas, verificando-se que as antocianinas glucosiladas maioritárias são a peonidina-3-glucósido e malvidina-3-glucósido, sendo a cianidina-3-glucósido a antocianina minoritária; esta não é
Capítulo III – Resultados e Discussão
25 mesmo detetada em alguns clones. Este resultado é concordante com os obtidos por Alcalde – Eon et al. (2014), Jordão et al. (2012) e Revilla et al. (2001),
Ao analisarmos as antocianinas glucosiladas de forma individual podemos verificar que os teores oscilam entre 2,36 ± 0,25 (clone 7) e os 19,51 ± 0,44 (clone 10), para a delfinidina-3-glucósido; 0,30 ± 0,12 (clone 2) e os 2,89 ± 0,13 (clone 10) para a cianidina-3- glucósido; 3,70 ± 0,33 (clone7) e os 14,06 ± 0,41 (clone 11) relativamente à petunidina-3- glucósido; 39,40 ±3,66 (clone 13) e os 53,34 ± 1,20 (clone 2) no que diz respeito à peonidina malvidina-3-glucósido. A delfinidina-3-glucósido do clone 7 apresenta % de área que não é significativamente diferente do clone 2 Esta antocianina apresenta uma variação na sua percentagem de área considerável, por tal facto temos clones cujas percentagens de área são concordantes aos resultados obtidos por Alcalde- Eon et al. (2014), como é o caso dos clones 1, 4 e 9, nos restantes clones apresentam percentagens de área completamente diferentes das descritas pelos autores anteriormente referidos, como é o caso dos clones 7 e 10, que apresentam percentagens de área muito inferiores e muito superiores ao descrito na literatura para a casta Tinta Roriz, respetivamente.
A cianidina-3-glucósido é a antocianina que apresenta uma maior variação entre os clones estudados. Não foi detetada no clone 7, sendo o clone 2 o que apresentou uma menor percentagem de área, é ainda de salientar que o clone 10 é o que apresenta a percentagem de área significativamente superior para esta antocianina. A maioria dos clones (3, 4, 6, 12, 15, 16, 17, 18 e 19), apresentam percentagens de área de acordo com os resultados apresentados por Alcalde – Eon et al. (2014). Por outro lado, todos os resultados obtidos para esta antocianina são diferentes dos descritos por Revilla et al. (2001).
Podemos destacar o clone 7, relativamente à petunidina-3-glucósido, pois é o clone que apresenta o valor de percentagem de área significativamente mais baixo em relação aos outros clones. Os clones 1, 4, 9, 13, 16 e 18, apresentam percentagens de área concordantes com Revilla et al. (2001), pelo contrário todos os clones apresentam percentagens de área menores relativamente aos referidos por Alcalde-Eon et al. (2014) para esta antocianina.
Capítulo III – Resultados e Discussão
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Tabela 7. Análise individual das percentagens de área das antocianinas individuais presentes nos clones em estudo
Clone dl- 3-gluc ci-3-gluc pt -3-gluc pe+mv- 3-gluc dl-3-acetilgluc pt-3-acetilgluc pe+mv-3-acetilgluc pt-3-cumarilgluc pe-3-cumarilgluc mv-3-cumarilgluc
1 13,20 ± 0,25 c,d 0,86 ± 0,05 a,b,c 11,00 ± 0,34 c,d 42,92 ± 1,01 a,b,c 0,36 ± 0,03 d,e,f 1,70 ± 1,16 a 6,22 ± 0,11 b,c 3,28 ± 0,15 a,b,c,d 4,79 ± 0,17 f 15,66 ± 0,34 c,d,e
2 4,29 ± 1,44 a,b 0,3 ± 0,12 a 6,02 ± 0,61 b 53,34 ± 1,20 f nd nd 5,35 ± 0,12 a,b,c 2,41 ± 0,07 a 3,13 ± 0,18 d,e 25,15 ± 1,01 h
3 15,35 ± 0,17 d,e 1,25 ± 0,22 b,c,d,e 12,72 ± 0,30 d,e,f,g 43,03 ± 0,39 a,b,c 0,11 ± 0,03 a 0,46 ± 0,07 a 4,85 ± 0,31 a,b 4,84 ± 0,12 e 1,20 ± 0,08 a,b 16,19 ± 0,33 d,e
4 13,07 ± 0,49 c,d 1,13 ± 0,16 b,c,d 11,20 ± 0,71 c,d 43,12 ± 1,86 a,b,c 0,14 ± 0,04 a,b 0,48 ± 0,07 a 5,29 ± 0,34 a,b,c 4,77 ± 0,41 e 1,00 ± 0,17 a 19,79 ± 0,43 f
5 17,35 ± 0,54 e,f 2,08 ± 0,12 f,g,h 13,20 ± 0,10 e,f,g 43,35 ± 0,47 a,b,c 0,39 ± 0,04 d,e,f 0,84 ± 0,08 a 4,67 ± 0,09 a 2,80 ± 0,08 a,b,c 3,14 ± 0,23 d,e 12,17 ± 0,23 a,b
6 17,00 ± 0,27 e,f 1,72 ± 0,14 d,e,f,g 13,40 ± 0,26 f,g 44,18 ± 0,56 a,b,c,d 0,35 ± 0,06 d,e,f 0,77 ± 0,01 a 4,75 ± 0,21 a,b 3,15 ± 0,12 a,b,c,d 2,37 ± 0,34 b,c,d,e 12,31 ± 0,15 a,b
7 2,36 ± 0,25 a nd 3,70 ± 0,33 a 45,79 ± 1,00 b,c,d nd nd 6,47 ± 0,54 c 2,49 ± 0,11 a 4,75 ± 0,52 f 34,44 ± 0,36 i
8 17,34 ± 0,68 e,f 2,15 ± 0,31 f,g,h 13,11 ± 0,37 e,f,g 42,92 ± 0,73 a,b,c 0,38 ± 0,03 d,e,f 0,81 ± 005 a 4,94 ± 0,44 a,b 3,00 ± 0,19 a,b,c 2,14 ± 0,50 c,d,e 12,61 ± 0,82 a,b,c
9 13,78 ± 0,56 c,d 2,19 ± 0,28 g,h 11,15 ± 0,28 c,d 46,98 ± 0,42 c,d 0,26 ± 0,04 b,c,d 0,68 ± 0,14 a 4,85 ± 0,39 a,b 3,24 ± 0,13 a,b,c,d 2,08 ± 0,65 a,b,c,d,e 14,78 ± 0,06 b,c,d
10 19,51 ± 0,44 f 2,89 ± 0,13 i 13,78 ± 0,13 g 42,61 ± 0,44 a,b,c 0,38 ± 0,02 d,e,f 0,75 ± 0,05 a 4,33 ± 0,10 a 2,85 ± 0,11 a,b,c 2,19 ± 0,25 a,b,c,d,e 10,71 ± 0,25 a
11 19,03 ± 0,50 f 1,85 ± 0,15 e,f,g 14,06 ± 0,41 g 40,76 ± 1,95 a,b 0,41 ± 0,03 e,f 0,80 ± 0,02 a 5,42 ± 0,24 a,b,c 3,72 ± 0,27 c,d 1,12 ± 0,10 a,b 12,81 ± 0,49 a,b,c
12 14,71 ± 0,88 d,e 1,50 ± 0,20 c,d,e,f 12,34 ± 0,03 d,e,f,g 42,82 ± 0,62 a,b,c 0,44 ± 0,05 e,f 0,96 ±0,04 a 5,63 ± 0,13 a,b,c 3,60 ± 0,06 b,c,d 2,77 ± 0,22 c,d,e 15,22 ± 0,60 b,c,d,e
13 11,50 ± 0,74 c 0,65 ± 0,13 a,b 9,91 ± 0,71 c 39,40 ± 3,66 a 0,48 ± 0,02 f 1,21 ± 0,11 a 9,47 ± 1,17 d 4,90 ± 0,87 e 1,72 ± 0,21 a,b,c 20,77 ± 0,94 f,g
14 18,08 ± 1,34 f 2,61 ± 0,37 h,i 13,32 ± 0,48 e,f,g 43,81 ± 1,82 a,b,c,d 0,38 ± 0,02 d,e,f 0,79 ± 0,03 a 4,50 ± 0,07 a 2,82 ± 0,12 a,b,c 2,85 ± 0,35 c,d,e 10,85 ± 0,46 a
15 14,66 ± 1,18 d,e 1,55 ± 0,21 d,e,f,g 11,95 ± 0,78 d,e,f 46,31 ± 1,21 c,d 0,34 ± 0,05 d,e,f 1,71 ± 1,22 a 5,03 ± 0,18 a,b,c 3,09 ± 0,18 a,b,c,d 1,98 ± 0,27 a,b,c,d,e 13,39 ± 1,37 a,b,c,d
16 14,05 ± 0,7 c,d 1,66 ± 0,12 d,e,f,g 11,65 ± 0,51 c,d,e,f 48,73 ± 1,20 d,e,f 0,29 ± 0,04 c,d,e 0,69 ± 0,006 a 4,62 ± 0,13 a 2,67 ± 0,09 a,b 2,16 ± 0,26 a,b,c,d,e 13,47 ± 0,20 a,b,c,d
17 14,92 ± 0,48 d,e 1,53 ± 0,05 c,d,e,f,g 12,40 ± 0,23 d,e,f,g 45,95 ± 1,82 b,c,d 0,35 ± 0,06 d,e,f 0,85 ± 0,04 a 5,09 ± 0,55 a,b,c 2,79 ± 0,30 a,b,c 2,71 ± 0,22 c,d,e 13,39 ± 1,13 a,b,c,d
18 13,43 ± 0,31 c,d 1,73 ± 0,02 d,e,f,g 11,58 ± 0,06 c,d,e 43,93 ± 1,23 a,b,c,d 0,15 ± 0,06 a,b,c 0,61 ± 0,04 a 4,65 ± 0,50 a 4,10 ± 0,31 d,e 1,69 ± 0,44 a,b,c 18,14 ± 1,11 e,f
19 15,02 ± 0,81 d,e 1,58 ± 0,10 d,e,f,g 11,92 ± 0,31 d,e,f 47,20 ± 1,24 c,d,e 0,32 ± 0,03 d,e 0,81 ±0,04 a 4,60 ± 0,15 a 2,77 ± 0,13 a,b,c 2,11 ± 0,27 a,b,c,d,e 13,68 ± 0,16 a,b,c,d
Capítulo III – Resultados e Discussão
27 Ainda em termos de análise individual das antocianinas glucosiladas, verifica-se que as antocianinas peonidina e malvidina-3-glucósido que coeluem, são as presentes em maiores percentagens de área para todos os clones em estudo, não se verificando diferenças significativas para um número considerável de clones avaliados. O clone que apresenta maior percentagem de área destas duas antocianinas é o clone 2 (53,34% ± 1,20) e o que apresenta menores percentagens de área é o clone 13 (39,40% ± 3,66) sendo este valores significativamente diferentes entre si. Estes resultados estão de acordo quer com Alcalde-Eon et al. (2014) quer com Revilla et al. (2001).
Da análise individual das antocianinas de cada série, observando os valores referentes às médias das percentagens de área dos picos de cada uma das antocianinas acetiladas, apresentadas na tabela 7, podemos verificar que os seus teores oscilam entre: 0,11 ± 0,03 (clone 3) e 0,48 ± 0,02 (clone 13) para a delfinidina-3-acetilglucósido; 0,46 ± 0,07 (clone 3) e 1,71 ± 1,22 (clone 15) para a petunidina-3-acetilglucósido; 4,33 ± 0,10 (clone 10) e 9,47 ± 1,17 (clone 13) para peonidina e malvidina-3-acetilglucósido.
Tal como já tinha sido referido anteriormente e como seria de esperar, esta é a série menos representativa na casta Tinta Roriz, estando assim de acordo com os resultados referidos por Alcalde-Eon et al. (2014) e Revilla et al. (2001) É ainda de salientar, que nesta análise não foram detetadas as antocianinas delfinidina-3-acetilglucósido e petunidina-3- acetilglucósido nos clones 2, 7 e 20. Em oposição ao que está descrito por Jordão et al. (2012) assim como por Revilla et al. (2001), que verificaram a presença de delfinidina-3- acetilglucósido em amostras da mesma casta.
A inexistência, ou pelo menos a sua não deteção, de cianidina-3-acetilglucósido em todos os clones estudados da casta Tinta Roriz está de acordo com os resultados apresentados por Revilla et al. (2001) mas não com os resultados apresentados por Jordão et al. (2012), que identificaram esta antocinanina na casta Tinta Roriz.
No que diz respeito à petunidina-3-acetilglucósido esta antocianina não apresenta diferenças significativas na percentagem de área entre os clones. A sua presença não foi detectada nas amostras analisadas por Revilla et al. (2001), mas detetada nas amostras analisadas por Alcalde-Eon et al. (2014) e com percentagens de área semelhante às obtidas no presente estudo.
Capítulo III – Resultados e Discussão
28 A peonidina-3-acetilglucósido e malvidina-3-acetilglucósido é a que apresenta maior percentagem de área, sendo assim a antocianina maioritária, contudo apresenta alguma variação entre os clones estudados, podendo-se destacar o clone 13, por apresentar o valor significativamente mais elevado de percentagem de área.
Relativamente às antocianinas cumariladas, apresentadas na tabela 7, verifica-se que os seus teores oscilam entre: 2,36 ± 0,23 (clone 20) e 4,90 ± 0,87 (clone 13), para a petunidina-3-cumarilglucósido; 1,00 ± 0,17 (clone 4) e 4,75 ± 0,52 (clone 7), para a peonidina-3-cumarilglucósido; 10,71 ± 0,25 (clone 10) e 34,44 ± 0,36 (clone 7), para a malvidina-3-cumarilglucósido. Como espectável e descrito por Revilla et al. (2001), esta série é a que apresenta os valores intermédios das três séries analisadas. No que diz respeito às antocianinas presentes nesta serie, constatou-se que os resultados são concordantes com os apresentados por Alcalde-Eon et al. (2014) e diferentes dos apresentados por Jordão et al. (2012) e Revilla et al. (2001), pelo facto de estes não detetarem nas suas amostras a petunidina-3-cumarilglucósido. Como se pode observar na tabela 7, a antocianina maioritária desta série é a malvidina-3-cumarilglucósido, que contrariamente ao que acontecia nas outras 2 séries, neste caso elui individualmente, tal como descrito por Alcalde-Eon et al. (2014), Jordão et al. (2012) e Revilla et al. (2001).
Em relação à petunidina-3-cumarilglucósido, esta foi identificada e quantificada em todos os clones por nós analisados em percentagens de área, em muitos casos superiores à peonidina-3-cumarilglucósido, tendo a presença desta antocianina apenas sido descrita por Alcalde-Eon et al. (2014) não tendo sido detetada nas amostras analisadas quer por Jordão et al. (2012) quer por Revilla et al. (2001).
Os clones 1 e 7 são significativamente diferentes dos restantes clones analisados relativamente à antocianina peonidina-3-cumarilglucósido, sendo os que apresentam percentagens de área superiores relativamente a todos os outros.
A antocianina que apresenta mais diferenças significativas entre os clones, é a malvidina-3-cumarilglucósido, sendo a única antocianina desta série onde podemos distinguir um clone, pois o clone 7 é o que apresenta o valor mais elevado de percentagem de área, significativamente diferentes em relação aos restantes clones. Tal como referido por Alcalde- Eon et al. (2014) Jordão et al. (2012) e Revilla et al. (2001), esta antocianina é a mais representativa desta série.
Capítulo III – Resultados e Discussão
29
3.2. Perfil das séries das antocianinas dos clones da casta Tinta Roriz
Na tabela 8, estão apresentadas as médias dos somatórios das percentagens de área das antocianinas de cada uma das séries dos diferentes clones da casta Tinta Roriz. É possível constatar, tal como anteriormente referido, que as antocianinas mais representativas são as antocianinas da série das glucosiladas, seguida das cumariladas e sendo as acetiladas as menos representativas, estando estes resultados de acordo com o descrito por Alcalde-Eon et al. (2014) e Revilla et al. (2001).
Tabela 8 Somatório das percentagens de área das antocianinas de cada uma das séries dos diferentes clones da casta Tinta Roiz em estudo (média ±desvio padrão).
Clones ∑ %área das antocianinas
glucosiladas
∑ %área das antocianinas acetiladas
∑ %área das antocianinas cumariladas 1 67,99 ± 1,49 a 8,28 ± 1,06 b 23,73 ± 0,45 e,f,g,h 2 63,95 ± 1,27 a 5,35 ± 0,12 a 30,69 ± 1,18 h 3 72,35 ± 0,86 a 5,42 ± 0,40 a 22,23 ± 0,50 b,c,d,e,f 4 68,51 ± 0,94 a 5,91 ± 0,42 a 25,56 ± 0,65 d,e,f,g,h, 5 75,98 ± 0,54 a 5,90 ± 0,17 a 18,11 ± 0,41 a,b 6 76,30 ± 0,13 a 5,87 ± 0,28 a 17,83 ± 0,36 a,b 7 51,85 ± 0,91 a 6,47 ± 0,54 a,b 41,68 ± 0,63 i 8 75,52 ± 1,96 a 6,13 ± 0,51 a,b 18,35 ± 1,44 a,b,c 9 74,10 ± 1,18 ª 5,80 ± 0,58 a 20,10 ± 0,59 a,b,c,d 10 78,79 ± 0,51 a 5,46 ± 0,14 a 15,75 ± 0,43 a 11 75,70 ± 0,91 a 6,64 ± 0,25 a,b 17,66 ± 0,67 a,b 12 71,38 ± 0,80 a 7,03 ± 0,19 a,b 21,59 ± 0,82 b,c,d,e 13 61,46 ± 2,33 a 11,17 ± 126 c 27,38 ± 1,26 f,g,h 14 77,81 ± 0,36 a 5,67 ± 0,10 a 16,51 ± 0,45 a,b 15 74,46 ± 3,16 a 7,08 ± 1,35 a,b 18,46 ± 1,82 a,b,c 16 76,10 ± 0,17 a 5,60 ± 0,22 a 18,30 ± 0,36 0 a,b,c 17 74,81 ± 2,08 a 6,29 ± 0,60 a,b 18,81 ± 1,48 a,b,c 18 70,67 ± 1,39 a 5,41 ± 0,55 a 23,93 ± 0,97 c,d,e,f,g 19 75,71 ± 0,23 a 5,73 ± 0,17 a 18,56 ± 0,37 a,b,c 20 65,68 ± 2,21 a 5,27 ± 0,48 a 29,05 ± 1,90 g,h
(Letras diferentes na mesma coluna indicam diferenças significativas entre os clones da casta Tinta Roriz (p<0,05); teste de Tukey).
No somatório da série das antocianinas glucosiladas não existem diferenças significativas entre os clones. Já no somatório da série das antocianinas acetiladas o clone 13, é significativamente diferentes de todos os outros. Por fim no que diz respeito ao somatório da série das antocianinas cumariladas, é onde existem mais diferenças significativas entre os
Capítulo III – Resultados e Discussão
30 clones. Nesta série podemos destacar o clone 7 por apresentar um somatório de antocianinas cumariladas significativamente superior aos dos outros clones. Podemos ainda verificar, que tal como referido por Alcalde-Eon et al. (2014), Jordão et al. (2012) e Revilla et al. (2001), as antocianinas glucosiladas são as que têm maior percentagem de área, seguidas das antocianinas cumariladas, e sendo as antocianinas acetiladas as que apresentam menores percentagens de área.
3.3. Análise em componentes principais das antocianinas individuais dos
clones da casta Tinta Roriz
A análise em componentes principais é um dos métodos quimiométricos mais utilizado para a redução de dados (Jollife, 1986; Brereton, 2003).
Assim, foi efetuada uma análise em componentes principais, Figura 10 dos dados das percentagens de áreas das antocianinas individuais dos vinte clones estudados com o objetivo de extrair as principais fontes de variabilidade no conjunto de dados originais e estudar a relação das antocianinas individuais com os clones analisados.
Figura 10: Projeção da Cov-da análise em componentes principais das antocianinas individuais e dos diferentes clones em estudo
Capítulo III – Resultados e Discussão
31 Na figura 10 esta representado a projeção das variáveis em estudo que correspondem aos 20 clones da casta Tinta Roriz. Verificou-se que a análise da percentagem de área das antocianinas individuais permitiuexplicar 76,62% da variabilidade entre os clones. Através de uma análise de Clusters foi possível agrupar os clones em estudo em quatro grupos distintos. Sendo um dos grupos formado pelo clone 7, destacando-se pela variável malvidina-3- cumarilglucósido. O segundo grupo formado pelo clone 13, destacando-se pelas variáveis peonidina-3-acetilglucósido e malvidina-3-acetilglucósido e petunidina-3-cumarilglucósido. O terceiro grupo é formado pelos clones 2 e 20, destacando-se pelas variáveis peonidina e malvidina-3-glucósido e peonidina-3-cumarilglucósido. Por fim, o quarto grupo engloba os restantes dezasseis clones em estudo, tendo em conta todas as outras variáveis. É de realçar a importâncias das antocianinas cumariladas, pois são elas que permitem a diferenciação dos clones em estudo.
Capítulo IV
Conclusões e Perspetivas
Capitulo IV – Conclusões e Perspetivas futuras
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4. Conclusões e perspetivas futuras
Uma vez avaliado o perfil de antocianinas dos clones da casta Tinta Roriz, foi possível concluir que para todas as amostras em estudo, as antocianinas glucosiladas são as que apresentam maior percentagem de área, seguidas das antocianinas cumariladas e por último das antocianinas acetiladas. Verificou-se ainda a existência de uma variabilidade no perfil antociânico dos clones da casta Tinta Roriz em estudo, sendo as antocianinas individuais da série das antocianinas cumariladas as que mais contribuíram para a diferenciação dos clones.
Os resultados referentes às antocianinas individuais mostram que o clone 7 se destaca dos restantes por apresentar percentagem de área da petunidina-3-glucósido e peonidina 3- glucósido e malvidina-3-cumarilglucósido significativamente diferente, assim como a não deteção de cianidina-3-glucósido. Podemos também diferenciar o clone 13 pela percentagem de área da peonidina-3-acetilglucósido e malvidina-3-acetilglucósido, bem como o clone 2 pela percentagem de área da peonidina-3-cumarilglucósido.
Pela análise em componentes principais da percentagem de área das antocianinas individuais detectadas nos 20 clones da casta Tinta Roriz em estudo, verificou-se que estas permitemexplicar 76,62% da variabilidade entre os clones e agrupa-los em quatro grupos. É notório que as antocianinas da série das antocianinas cumariladas são das mais importantes para a diferenciação dos diferentes clones.
Numa perspetiva futura, com vista a melhorar e complementar este trabalho podemos realizar a quantificação das antocianinas identificadas, alargar o estudo a outras regiões do país, e verificar se existem variações no perfil antociânico dos vinhos produzidos tendo como matéria-prima estes clones.
Capítulo V
Referências
Captítulo V – Referências 35
5. Referências
http://segredosdeviagem.com.br/site/wp-content/uploads/2014/11/mapa.gif, consultado em Março de 2015. ADVID a. 2015. http://www.advid.pt/.ADVID b, 2015 – Associação para o Desenvolvimento da Viticultura Duriense “Prospecção das castas antigas da Região Demarcada do Douro, Região Demarcada Távora-Varosa e Região Vitivinícola de Trás-os-Montes”.
Alcalde-Eon, C., García-Estévez, I., e Martín-Baz, A., (2014), “Anthocyanin and flavonol profiles of Vitis vinifera L. cv Rufete grapes.” Biochemical Systematics and Ecology
53, 76 - 80.
Brereton, R., (2003), Chemometrics: Data analysis for the laboratory and chemical plant, John Wiley & Sons Ltd, UK.
Barbosa, D., (2006), “O sistema de infromação geográfica e a atribuição do beneficio, A vinha da região demarcada do douro.” Dissertação de Mestrado em Ciências e sistemas de informação geográfica - Instituto Superior de Estatística e Gestão de Informação da Universidade Nova de Lisboa.
Borges, P., (2012) “Estudo comparativo das castas tintas.” Dissertação de Mestrado em Qualidade e tecnologia alimentar - Instituto Politecnico de Viseu.
Boss, P. K., Christopher D., e Simon P. R., (1996), “Expression of anthocyanin biosynthesis pathway genes in red and white.” Plant Molecular Biology 32, 565 - 569.
Bravo, L., (1998), “Polyphenols: Chemistry, Dietary Sources, Metabolism, and Nutritional Significance.” Nutrition Reviews 56, 317 - 333.
Castañeda-Ovando, A., Pacheco-Hernández, M. L., Páez-Hernández, M. E., Rodríguez, J. A., e Galán-Vidal, C. A., (2009), “Chemical studies of anthocyanins: A review.” Food Chemistry 113, 859 - 871.
Cruz, A., Hilbert, G., Riviére, C., Mengin, V., Ollat, N., Bordenave, L., Decroocq, S., Delaunay, J., Delrot, s., Mérillon, J., Monti, J., Gomes, E., e Richard, T., (2012),
Captítulo V – Referências
36 “Anthocyanin identification and composition of wild Vitis spp. accessions by using LC–MS and LC–NMR.” Analytica Chimica Acta 732, 145 - 152.
Dimitrovska, M., Bocevska, M., Dimitrovski, D., e Murkovic, M., (2011), “Anthocyanin composition of Vranec, Cabernet Sauvignon, Merlot and Pinot Noir grapes as indicator of their varietal differentiation.”, Europe Food Research Technologic. 232,. 591–600.
Fernandes, I., Faria, A., Calhau, C., Freitas, V., e Mateus, N., (2014) “Bioavailability of anthocyanins and derivatives.” Journal of Functional Foods 7, 54 - 66.
Flamini, R., e Traldi, P., (2010), “Mass spectrometry in grape and wine chemistry.” Italia, wiley,.
Gouveia, C., Liberato, M. L. R, Camara, C. C., Trigo, R. M., e Ramos A. M., (2011), “Modelling past and future wine production in the Portuguese Douro Valley.” Climate Research 48, 346 - 362.
Guerra, J., e Abade, E., (2008) “Castas do Douro - Caraterização enológica de castas tintas .” Centro de estudos vitivinicolas do Douro.
IVDP . Fevereiro de 2015. https://www.ivdp.pt/.
IVDP, Manual de boas práticas vitícolas - “Manual de boas práticas vitícolas,” s.d. IVV . Fevereiro de 2015. http://www.ivv.min-agricultura.pt/np4/home.html.
Jaakola, L., (2013), “New insights into the regulation of anthocyanin biosynthesis in fruits.” Trends in Plant Science 18, 477 - 483.
Jackson, S., Wine Science - principles and applications.,third ed. Cd. Elsevier, San Diego, California, 2008.
Jolliffe, I.T., Principal Component Analysis, second ed. Springer, New York, 1986.
Jones, G., (2012), “Uma Avaliação Do Clima Para A Região Demarcada Do Douro.” ADVID. Jordão, A.M., Simões, S., Correia, A.C., e Gonçalves, F.J., (2012), “Antioxidant activity evolution during portuguese red wine vinification and their relation with the
Captítulo V – Referências
37 proanthocyanidin and anthocyanin composition.” Journal of food processing and presenvation 36, 298 - 309.
Magalhães, N. P. , 2003 “Caracterização e condução das castas tintas na região demarcada do Douro.” Douro - Estudos & Documentos.
Ministério da Agricultura, do Desenvolvimento Rural e das Pescas. “Decreto-Lei n.o 194/2006.” 27 de Setembro de 2006.— “Portaria n.o 413/2001.” 18 de Abril de 2001.
Perestrelo, R., Lu, Y., Santos, S., Silvestre, A., e Neto, C., (2012), “Phenolic profile of Sercial and Tinta Negra Vitis vinifera L. grape skins by HPLC–DAD–ESI-MS Novel phenolic compounds in Vitis vinifera L. grape.” Food Chemistry 135, 94 - 104.
PORVID – Associação portuguesa para a diversidade da videira, “SELECÇÃO DA VIDEIRA - Guia para escolha de materiais (clones) a plantar” 2015.
PROCIV- Autoridade Nacional de Proteção Civil “Avaliação Nacional de Risco”, Abril de 2014.
Revilla, E., García-Beneytez, E., Cabello, F., Martín-Ortega, G., e Ryan, J., (2001), “Valeu of high-performance liquid chromatographic analysis of anthocyanins in the diffferentiation of red grape cultivars and red wines made from them.” Journal of Chromatography A 915, 53 - 60 .
Revilla, I., Pérez-Magariño, S., González-SanJosé, M.L., e Beltrán, S., (1999), “Identification of anthocyanin derivatives in grape skin extracts and red wine by liquid chormatography whit diode array and mass spretrometric detection.” Journal of Chormatography A 847, 83 - 90.
Ribeiro, A., (2013), “Statistical downscaling of air temperature in the Douro Valley for agronomic applications.” Dissertação de Mestrado em Ciências Geofísicas - Universidade de Lisboa Faculdade de Ciências.
Roby, J.; Leeuwen, C.; Gonçalves, E.; Graça, A.; Martins, A. “The preservation of genetic resources of the vine requires cohabitation between institutional clonal selection, mass selection and private clonal selection” 37th World Congress of Vine and Wine and 12th General Assembly of the OIV, 2015.
Captítulo V – Referências
38 Schieberle, H.D., Belitz, W., e Grosch, P. Food Chemistry. Alemanha : Springer-Verlag
Berlin Heidelberg, 2009.
Skoog, West, Holler, e Crouch. Fundamentos de quimica analitica. 8ª. América do Norte : Thomson, 2006.
Sousa, M., Pereira, C., Guerra, J., e Abade, E.. Caracterização de Castas Cultivadas na Região Vitivinícola de Trás-os-Montes. Portugal : Direcção Regional de Agricultura e Pescas do Norte, 2007.
Stewart, G., Schweigert, B. e Hawthorn, J. Anthocyanins as food colors, capítulo 7, Pericles Markakis, 1982.
Teixeira, A., Baenas, N., Perles, R., Barros, A., Rosa, E., Moreno, D., Viguera, C., (2014), “Natural bioactive compounds from winery by - products as health promoters: A review.” International Journal of Molecular Sciences 15, 15638 - 15678.
Tente, R., (2010), “Potêncial produtivo e enológico de clones admitidos à certificação da casta Aragonez Vitis vinifera L.” Dissertação de Mestrado Viticultura e Enologia - Instituto Superior de Agronomia / Universidade do Porto.
ViniPortugal. Março de 2015. http://www.viniportugal.pt/.
Zhang, Y., Butelli, E., e Martin, C., (2014), “Engineering anthocyanin biosynthesis in plants.” Current opinion in Plant Biology 19, 81 - 90 .