Aplicação: O diagnóstico laboratorial da tuberculose, rápido e eficaz, é uma das condições
base para o sucesso do controle da doença, que atualmente ainda continua a ser um dos maiores problemas de saúde pública no mundo. Segundo a Organização Mundial de Saúde um terço da população mundial está infectada com Mycobacterium tuberculosis (cerca de 2 bilhões de pessoas) e destes, até 50 milhões de pessoas podem estar infectadas com cepas resistentes a antibióticos. A cultura para micobactérias tem como objetivo realizar o isolamento, identificação e teste de susceptibilidade aos antimicrobianos em diferentes amostras clínicas. É uma metodologia considerada o padrão-ouro para o diagnóstico de infecções causadas por espécies do gênero Mycobacterium, uma vez que apresenta sensibilidade superior à da microscopia direta após coloração de Ziehl.
Metodologia: Cultura em meio de Lowenstein-Jensen, Ogawa e sistema automatizado
BactAlert 3D (bioMerieux).
Material: a) Biópsias
Coleta realizada pela equipe médica especializada.
Colocar os fragmentos em recipiente estéril com solução salina estéril.
O material é estável por 2 horas à temperatura ambiente (20 a 25°C) e por 72 horas quando mantido sob refrigeração (2 a 8°C).
b) Escarro
Recipiente estéril de boca larga com tampa de rosca: coletar a amostra após tosse profunda, de forma a garantir que a amostra seja proveniente da mucosa respiratória das vias aéreas inferiores.
Preferencialmente deve ser a primeira amostra da manhã em jejum. Número de colheitas – 3 amostras em dias consecutivos.
Idealmente a colheita deve ser realizada antes da instituição prévia de terapêutica, mas, o seu início não impede a aceitação da amostra pelo Laboratório.
c) Lavado brônquico e broncoalveolar
Recipiente estéril de boca larga com tampa de rosca e/ou seringas de aspiração. Coleta da responsabilidade do clínico.
Infectoµ
Numerar os coletores de acordo com a ordem da colheita e enviar de imediato ao Laboratório.
d) Líquidos biológicos (LCR, pleural, ascítico, sinovial, pericárdico e outros)
Recipiente estéril de boca larga com tampa de rosca. Punção após desinfeção da pele.
Enviar a maior quantidade de amostra possível – a concentração de grande volume de amostra aumenta a sensibilidade da pesquisa e cultura.
LCR – a coleta de 20mL é recomendada em doentes com derivação ventricular externa (DVE).
O volume mínimo é de 1 mL e o ideal 10 mL.
A amostra é estável por até 2 horas em temperatura ambiente (20 a 25°C) e por 72 horas sob refrigeração (2 a 8°C).
e) Medula óssea
Garrafa de hemocultura MB-tampa preta: Coletar de 0,5 a 3 mL de sangue. Fazer assepsia da tampa da garrafa com álcool a 70% e deixar secar. Inocular a garrafa com a amostra.
f) Secreções purulentas diversas
Coletor ou tubo estéril seco: puncionar a lesão e aspirar com agulha e seringa.
Evitar a coleta com swab, devido à possibilidade de ressecamento e quantidade insuficiente da amostra.
O material é estável por 2 horas à em temperatura ambiente (20 a 25°C) e por 72 horas sob refrigeração (2 a 8°C).
g) Abscesso aberto ou fechado
Puncionar com a seringa e agulha do fundo da lesão. Colher no mínimo 1mL.
Retirar a agulha e adaptar plug para vedar.
O material é estável por 2 horas à temperatura ambiente (20 a 25°C) e por72 horas quando mantido sob refrigeração (2 a 8°C).
h) Sangue
Frasco de hemocultura MB-tampa preta.
Coletar de 0,5 a 2mL em crianças e 3 a 5 ml de sangue em adultos, por punção de veia periférica, após assepsia da pele.
Fazer assepsia da tampa da garrafa com álcool a 70% e deixar secar. Inocular a garrafa com o sangue.
i) Lavado gástrico
Coletar em coletor estéril com boca larga.
Esta amostra é usada para pesquisa de micobactérias em crianças incapazes de expectorar.
Deve ser efetuada de manhã ao acordar (em jejum). Amostra coletada pela equipe médica especializada.
A pesquisa de BAAR nesta amostra tem baixa sensibilidade e especificidade, sugere- se sempre que possível, coletar secreções brônquicas.
j) Urina
Coletar em coletor estéril com boca larga.
Colher a primeira urina da manhã em três dias consecutivos sem desprezar o 1° jato
urinário.
Coletar cerca de 40mL no adulto.
k) Outras amostras biológicas
Consultar o setor de microbiologia antes da coleta.
Volume: Variável conforme a amostra. Preparo do paciente:
Orientar o paciente sobre a coleta.
Em caso de suspeita de tuberculose, coletar três amostras em dias consecutivos (colher apenas uma amostra por dia).
Paciente sem expectoração pode ser realizado:
Identificar a amostra no rótulo colocado na parede do frasco e nunca na tampa. Enviar ao laboratório acompanhado da solicitação de exame.
A coleta deve ser feita, de preferência, antes da terapia antimicrobiana.
Observações:
Em caso de suspeita de micobacteriose intestinal recomenda-se a biópsia e coleta de hemoculturas.
A pesquisa de micobactérias nas fezes não tem indicação e é absolutamente desaconselhada.
É importante realçar que o exame direto e cultural de micobactérias não deve ser efetuado a partir de um produto colhido em swab.
Garrafas de hemoculturas MB (tampa preta) preferencialmente são validadas para sangue periférico e medular, evitar utilizar com outras amostras biológicas, mesmo que de sítios estéries.
Infectoµ
No caso de uso prévio ou atual de antimicrobianos, anotar na solicitação o nome do medicamento.
A administração de antimicrobianos não impede a realização da cultura, mas pode interferir no resultado, em algumas situações.
Armazenamento: Temperatura ambiente (20 a 25°C) ou refrigerada (2 a 8°C).
Estabilidade: Temperatura ambiente (20 a 25°C): 2 horas; refrigerado (2 a 8 °C): 72 horas. Prazo para resultado: 45 dias (amostras cultivadas em garrafa de hemocultura – sangue,
medula) e 65 dias (amostras cultivadas em meios sólidos).
Transporte: Devem ser transportadas acondicionadas em caixas térmicas a temperatura
ambiente (20 a 25°C).
Valor de Referência: Cultura negativa. Prazo para recebimento:
Recomendações para outros laboratórios: Identificar a amostra e enviar ao Laboratório de microbiologia em temperatura ambiente (20 a 25°C): 2 horas; refrigerado (2 a 8°C) até 72 horas.
Tempo de transporte ambulatorial: Identificar a amostra e enviar ao Laboratório de microbiologia em temperatura ambiente (20 a 25°C): 2 horas; refrigerado (2 a 8°C) até 72 horas.