Visando responder ao segundo objetivo específico

a) Moradores: Os moradores e líderes comunitários Kalungas compuseram a amostra do estudo tanto nas atividades do grupo de trabalho (oficinas) por intermédio das entrevistas coletivas nas quais foram identificados, por meio de relato, quais eram os problemas de saúde mais prevalentes que ocorriam na população, quanto na etapa das visitas domiciliares, quando foram coletados os dados acerca da caracterização socioeconômica, demográfica, epidemiológica e sanitário-ambiental por meio de questionário semiestruturado.

A justificativa para a inclusão de entrevistas individuais com as lideranças comunitárias se alicerça na busca de maior fidedignidade, especialmente na leitura dos dados estatísticos, haja vista que estes líderes se destacam pelo conhecimento amplo acerca das condições de vida da comunidade. Também se destacam pela proximidade com que se relacionam com as demais famílias quilombolas e pelo modo com que operam, constantemente, enquanto mediação entre suas comunidades e as instâncias de poder e governo.

b) Abastecimento de água: Foram identificadas as diferentes fontes de abastecimento de água utilizada pelos moradores, bem como suas formas de acondicionamento e tratamento. c) Análise microbiológica da água para consumo: Foram coletadas amostras de água para consumo humano em diferentes locais de cada município. Os pontos de coleta foram

selecionados a partir de uma análise primeira dos dados obtidos nas oficinas de trabalho e entrevistas realizadas com os líderes comunitários e moradores das regiões de Cavalcante, Teresina de Goiás e Monte Alegre.

Para a seleção dos locais de coleta de amostra da água de consumo (fontes, rios, poços), levou-se em consideração critérios ambientais e sanitários: aglomerados de domicílios; áreas próximas a esgotamento in natura; e, áreas próximas a lavouras. A sistemática de coleta e de preservação das amostras de água seguiu a metodologia proposta no

Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater(199), no que tange aos parâmetros para a realização de análise microbiológica.

A análise microbiológica da água foi realizada segundo Técnica de Tubos Múltiplos. Os testes foram realizados em parceria com o Instituto de Biologia da Universidade de Brasília – Laboratório de Microbiologia Molecular. A realização das análises buscou estudar a ocorrência de microrganismos em amostras da água para consumo humano, utilizada pela comunidade Kalunga. Para tanto, foi determinado o NMP (número mais provável) de coliformes totais e coliformes termotolerantes, de acordo com três etapas:

1ª Etapa – Análise Presuntiva: Foram semeados em triplicata 10 mL da amostra em tubo de

ensaio (20x200) contendo 10 mL de caldo lauril sulfato na concentração dupla, ou seja, duas vezes a mesma medida do caldo para cultivo (71,2 g/1 L), com tubo de Duhran invertido (boca para baixo), permitindo a visualização dos gases emitidos pelos possíveis microrganismos.

Em seguida, foi semeado em triplicata 1 mL da amostra em tubo de ensaio (18x150) contendo 9 mL de caldo lauril sulfato com concentração simples (35,6 g/1 L), com tubo de Duhran também invertido. Por fim, foi semeado em triplicata 0,1 mL da amostra em tubo de ensaio (18x150) contendo 9,9 mL de caldo lauril sulfato com concentração simples, com o tudo de Duhran também invertido.

Após todas as amostras serem semeadas, estas foram incubadas em estufa de cultura a 37º C, por 24 horas. Aguardado o primeiro crescimento bacteriano, foi realizada leitura, na qual se observou a presença de turvação no meio e gás nos tubos de Duhran, indicativos da presença de coliformes totais. Foram efetuados registros de quais tubos houve o crescimento, e quais as diluições.

2ª Etapa – Análise Confirmatória – NMP de coliformes totais: Foram inoculadas as amostras

que tiverem crescimento bacteriano (uma amostra de cada diluição). Para tanto, foram utilizadas alças de platina em tubo de ensaio (18x150) contendo 10 mL em triplicata do caldo verde brilhante bile (40 g/1 L) e também tubo de Durhan e, depois de entubada, em estufa a 37º C por 24h. A leitura do crescimento foi analisada, anotando-se quantos tubos apresentaram crescimento, em cada diluição utilizando-se, para tal, a tabela própria para NMP.

3ª Etapa – Análise Confirmatória – NMP de coliformes termotolerantes: Foi realizada no

mesmo dia, seguindo a segunda etapa na qual foram incubadas amostras que tiveram crescimento bacteriano (uma amostra de cada diluição). Utilizou-se alça de platina, em tubo de ensaio (18x150) contendo 10 mL em triplicata EC (Escherichia coli) (37 g/1 L), e também tubo de Durhan. Em seguida, as amostras foram incubadas em banho-maria a 44,5º C por 24h. A leitura do crescimento foi analisada, anotando-se quantos tubos apresentaram crescimento, em cada diluição e utilizando-se a tabela própria para NMP.

d) Amostras de tecido muscular estriado esquelético de peixes consumidos na região: As espécies analisadas foram coletadas nos três municípios – Cavalcante, Teresina de Goiás e Monte Alegre – em pontos identificados, de acordo com os resultados das oficinas. A captura foi realizada com anzóis nos locais onde os moradores costumam desenvolver suas atividades pesqueiras cotidianas. Os peixes coletados foram mantidos em tanques com água até o momento da retirada dos tecidos. Contou-se com o apoio de moradores kalungas, em cada município, para a realização desta etapa. Dos exemplares, foram anotados dados referentes ao comprimento total, comprimento padrão e peso total.

As amostras de tecido muscular retiradas dos espécimes de peixes capturados foram armazenadas em sacos plásticos devidamente etiquetados e mantidos congelados, até o momento da análise junto ao Laboratório de Química Analítica e Ambiental, da Universidade de Brasília. As análises foram realizadas no período de janeiro a maio de 2013. A metodologia de análise laboratorial utilizada foi baseada na técnica de Deitz, Sell e Bristol(200), com pequenas modificações.

A determinação do mercúrio total requer um processo prévio de digestão ou mineralização com destruição da matéria orgânica das amostras, em que se consegue

transformar os compostos de mercúrio para a forma inorgânica (Hg+2), eliminando interferências na análise por absorção atômica.

Assim, na preparação das amostras de tecido muscular para análise química propriamente dita, foi utilizada digestão ácida em todas as amostras. O processo de digestão foi realizado utilizando-se 0,4 g de amostra, 4,0 mL de HNO3 concentrado (65%) e 2,0% de

H2O2 (30%). Após a digestão, o material foi resfriado por quinze minutos em capela e, em

seguida, em água e gelo por mais vinte minutos. Após o completo resfriamento das amostras digeridas, cada uma foi transferida para um balão volumétrico de 25 mL.

As determinações de mercúrio foram inferidas por meio de Espectroscopia de Absorção Atômica de Vapor Frio CV-AAS, utilizando monitor de mercúrio modelo MM 3200, da Thermo Separation Products. Essa técnica de análise permite a detecção de teores de mercúrio entre parte por bilhão (ng/L) até parte por milhão (mg/L).

e) Amostras de cabelo humano: A concentração de mercúrio no cabelo é frequentemente usada como um marcador biológico para exposição ao metilmercúrio, porque reflete a concentração no sangue na ocasião em que o cabelo foi formado(201). No estudo em questão, tal abordagem é apropriada, já que, em caso de não haver exposição ao mercúrio inorgânico externo ou vapor de mercúrio, quase todo o mercúrio no cabelo está na forma de metilmercúrio. Desta forma, o nível de exposição ao metilmercúrio da dieta pode ser avaliado medindo-se o mercúrio total, nos cabelos. Além disso, as amostras de cabelo provêm de um método de amostragem não invasivo. A concentração de mercúrio detectada no cabelo é geralmente 250-300 vezes a concentração no sangue. Uma vez que o cabelo cresce a uma taxa de aproximadamente um centímetro por mês, é possível a avaliação da exposição passada e acumulada ao longo da vida, levando-se em consideração os períodos no qual ocorreram de cortes do cabelo(202).

Nesta fase da pesquisa e com a finalidade de garantir o rigor metodológico no desenvolvimento das análises, foram seguidas as recomendações da International Atomic Energy(203). Assim, as amostras de cabelo foram obtidas da área occipital da cabeça, cortados rente ao couro cabeludo e incluindo pelo menos vinte fios de cabelo e aproximadamente 10 mg ao todo. Os fios do cabelo amostrado foram amarrados juntos pelo final da raiz com uma linha de algodão, de forma que este ponto pudesse ser identificado. Em seguida, cada amostra foi armazenada em um saco de polietileno à temperatura ambiente e devidamente identificada.

Para a etapa de análise laboratorial, propriamente dita, as amostras de cabelo foram previamente lavadas e homogeneizadas. O mercúrio total foi analisado por espectrometria de absorção atômica por vapor frio utilizando monitor de mercúrio modelo MM 3200 da Thermo Separation Products. Em espectrometria de absorção atômica por vapor frio, o mercúrio é convertido em vapor de mercúrio elementar, o qual é introduzido em uma célula de absorção e a absorção é medida a 253,7 nm para determinação da quantidade. Este método é muito mais sensível quando comparado ao convencional, a espectrometria de absorção atômica por chama.

f) Exame parasitológico de fezes: Foi realizado com os membros das famílias residentes nas localizações referidas como área de grande número de casos de doenças. Esta identificação foi o resultado do cruzamento dos dados referentes às oficinas de trabalho com as entrevistas e as análises das amostras da água de consumo da população Kalunga.

Os recipientes para coleta das fezes foram entregues nos respectivos domicílios, após explicação sobre o projeto e orientação de como proceder a coleta. As matérias fecais foram conservadas em potes contendo MIF (Merthiolate-Iodo-Formol). As amostras foram recolhidas na semana seguinte à realização da visita domiciliar e acondicionadas em depósito próprio para transporte, e encaminhadas ao Laboratório de Análises Clínicas do Curso de Farmácia da Faculdade Sena Ayres para realização do exame coproscópico.

O diagnóstico parasitológico foi realizado de maneira apropriada, com maior sensibilidade e especificidade para a detecção dos parasitas intestinais, uma vez que dele depende o tratamento específico(204). Neste sentido, durante as análises do material fecal, primeiramente foi utilizado o método de Hoffman–Pons–Janer(205). Para tanto, as amostras foram homogeneizadas e filtradas para cálices de sedimentação, sendo completado o volume com água e deixado a sedimentar por vinte e quatro horas. Cada sedimento foi examinado microscopicamente por dois observadores de forma independente.

Nos casos em que os resultados do teste de Hoffman indicaram a existência de grande quantidade de ovos de helmintos, também foi utilizado o método parasitológico de Kato-Katz (três lâminas), que se caracteriza por seu componente quali-quantitativo. Tal método é muito usado para o diagnóstico de helmintos, uma vez que, neste tipo de teste, alguns helmintos como Schistosoma mansoni, Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura e ancilostomatídeos podem ter sua carga parasitária avaliada(206). A aplicação de diferentes métodos de exames de

fezes tornou-se necessária tendo em vista a variabilidade morfológica e biológica apresentada pelos parasitas(204).

Aos membros da Comunidade Kalunga que apresentaram resultado negativo, foi facultada a realização de um novo ciclo de exame, como objetivo confirmatório. Após isto, e por meio de parceria estabelecida previamente com os agentes comunitários de saúde das comunidades, todos os moradores com resultado positivo foram encaminhados à unidade de saúde local. Foi disponibilizada, junto aos ambulatórios das localidades, medicação específica para tratamento tanto dos moradores infestados quanto dos demais residentes por unidade domiciliar com caso positivo para infestação parasitológica. Destaca-se ainda que as unidades de saúde de referência das comunidades foram informadas sobre os resultados, com vistas a contribuir com futuras orientações sobre a prevenção das parasitoses e com a supervisão e acompanhamento do tratamento antiparasitário.

g) Produção e destinação do lixo domiciliar: A questão dos resíduos sólidos demanda atenção pela sociedade contemporânea, pois estes, além de se caracterizar em um dos principais problemas ambientais da atualidade, seu acúmulo também é capaz de se consolidar em um grave problema de saúde pública(207).

Com o objetivo de melhor conhecer a realidade à qual a população Kalunga se insere, é de suma importância a produção de dados acerca da composição e qualidade do resíduo gerado, e suas formas coleta e disposição, visando minimizar os impactos na saúde e no meio ambiente e, por conseguinte, contribuir com a qualidade de vida da comunidade. Vale ressaltar que a abordagem qualitativa sobre os resíduos gerados pela comunidade Kalunga foi utilizada objetivando a caracterização desse material em relação aos tipos produzidos e proporções.

Assim, para a captação dos dados relativos à produção e destinação do lixo, foram considerados tanto fatores que influenciam na origem desses resíduos sólidos domiciliares, quanto os que dizem respeito a sua formação propriamente dita: número de habitantes, área relativa de produção, hábitos e costumes da população, grau de escolaridade, poder aquisitivo, entre outros.

Os resíduos sólidos domiciliares foram avaliados diretamente no entorno da moradia de cada família Kalunga selecionada para esta etapa do estudo, sendo a área de abrangência determinada pela própria especificação dos moradores. Tais observações estão de acordo com

a NBR n.º 10.007/2004, que propõe que a amostra de resíduo sólido a ser estudada deve ser obtida por meio de um processo de amostragem que garanta as mesmas características e propriedades da massa total do resíduo(208)

Inicialmente, realizou-se a caracterização visual dos materiais encontrados nos locais de estudo. Em seguida, com a finalidade de estimar a porcentagem existente de cada constituinte, procedeu-se a análise qualitativa das amostras. Os resíduos foram separados manualmente e selecionados os subtipos constituintes da amostra de acordo com os componentes mais comumente encontrados como: matéria orgânica, metal ferroso, borracha, papel, metal não ferroso, couro, papelão, alumínio, pano/trapo, plástico rígido, vidro, madeira, ossos, plástico mole, cerâmica e agregados finos(209). Os achados foram registrados em formulário específico (Apêndice C).

h) Destinação dos dejetos humanos: Foi verificada, junto aos moradores, a existência ou não de instalações destinadas para os dejetos humanos, considerando os tipos existentes nas localidades ou mesmo se os dejetos são lançados diretamente ao meio ambiente. Para tanto, os dados foram coletados com a utilização de questionário com itens específicos para essa finalidade.