Desenvolvimento de uma carta de controle para monitorar o uso da vacina de referência em ensaios de potência vacinal contra a Covid-19. INCQS – Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde pares kb – kilobase.
INTRODUÇÃO
COVID-19
- Estrutura do SARS-CoV-2
- Epidemiologia
- Sintomatologia da COVID-19
- Transmissão
- Diagnóstico
Esse processo é usado pelo SARS-CoV-2 para invadir células humanas e é desencadeado quando os domínios de ligação viral se ligam aos receptores da célula hospedeira (SUNGNAK et al., 2020). Uma das principais vias endocíticas do SARS-CoV-2 é através dos receptores da enzima conversora de angiotensina II (ACE2), que se ligam à proteína Spike do vírus (PAWLOS et al., 2021).
Vacinas
- Vacinas contra COVID-19 no Brasil
- Plataformas Tecnológicas Das Vacinas
- Vacina COVID-19 AZD-1222
- Cobertura vacinal e seu impacto na população
Em 17 de janeiro de 2021, a Anvisa aprovou as vacinas Coronavac (Sinovac) e AstraZeneca AZD1222 (Oxford/Astrazeneca/Serum Institute of India/Bio-Manguinhos) para uso emergencial, e em 18 de janeiro a campanha nacional de vacinação contra a Covid-19 no Brasil, com trabalhadores de saúde, a população de origem e os idosos como grupos prioritários. No caso da vacina COVID-19, a proteína escolhida para gerar uma resposta imune é a proteína Spike(S) do SARS-CoV-2. A produção de vacinas pelos fabricantes Oxford/Astrazeneca/Serum Institute of Indias/Bio-Manguinhos e Janssen é baseada nesta tecnologia, portanto a vacina contra COVID-19 AZD1222 é produzida utilizando esta plataforma (MOURA et al., 2021).
A vacinação contra a COVID-19 no Brasil, juntamente com as medidas preventivas, tem sido uma estratégia eficaz para mitigar a pandemia. A campanha nacional de vacinação contra a COVID-19 iniciou em janeiro de 2021 de forma lenta e progressiva, em decorrência da falta de imunizantes e alojamento no início da vacinação (BRANDÃO; CRISTALDO, 2021). No entanto, o início e o avanço da vacinação da população contra a COVID-19 causaram uma queda acentuada no número de casos confirmados no ano de 2021 (Figura 5) e principalmente no número de óbitos por COVID-19 (Figura 6). .
No entanto, apesar do início da imunização no Brasil, o número de mortes diárias por COVID-19 continuou aumentando (VICTORA et al., 2021).
Programa Nacional de Imunizações
- Controle da qualidade de vacinas
- Papel do INCQS no controle da qualidade das vacinas
Outro fator que dificultou o avanço da vacinação no Brasil foi a falta de confiança na eficácia das vacinas contra a COVID-19 e a onda de desconfiança na ciência que apareceu em alguns países, movimentos anti-vacinação e negação fragilizaram a campanha de vacinação no Brasil ( HALAL, 2021) . Um grande desafio na produção de vacinas é estabelecer padrões de qualidade quanto à eficácia e segurança dos imunobiológicos, cabendo aos fabricantes o cumprimento desses critérios. Desde 1973, o Ministério da Saúde, de acordo com suas atribuições, fiscaliza o controle de qualidade dos imunobiológicos disponíveis no país (PONTE, 2003).
O controle de qualidade na fabricação de vacinas baseia-se no controle dos processos produtivos, das matérias-primas e do produto final. A verificação do controle de qualidade é utilizada em diversas etapas da produção de vacinas, nas etapas de expansão celular para inoculação de antígenos, no isolamento de antígenos, nas etapas de purificação a granel (produto a granel) e no produto final antes da comercialização, com o objetivo de certificar a segurança e eficácia de acordo às especificações do produto (LUSKY, 2005; GOMEZ; ROBINSON; ROGALEWICZ, 2013). De acordo com a RDC nº 73/2008, que dispõe sobre o regulamento técnico para o procedimento de liberação de lotes de vacinas para consumo no Brasil, para fins de controle de qualidade de imunobiológicos aprovados pelo mercado privado e pelo Programa Nacional de Imunizações (PNI). adquirido, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) delega a responsabilidade pelo Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde da Fundação Oswaldo Cruz (INCQS/Fiocruz).
Os lotes de vacinas fornecidos pelos fabricantes são encaminhados para análise documental e/ou laboratorial ao INCQS/Fiocruz, onde são avaliados os indicadores de eficácia do produto (testes de identidade, estabilidade e potência) e segurança (testes ou testes de esterilidade, toxicidade e pirogênio). endotoxina bacteriana) (CARVALHO, 2014; NETTO, 2010).
Ensaios de potência
O resultado do teste é analisado em relação ao número médio de células infectadas por adenovírus presentes na cultura celular (INCQS, 2022a). Embora possa ser importante controlar o número de partículas fornecidas para garantir a segurança, esse valor por si só não é muito informativo, pois apenas os vírus viáveis contribuem para a potência.
Gráfico de controle
Como controle de precisão e reprodutibilidade, cada teste deve conter muito material de referência, que possui um valor de potência pré-definido, além de um limite superior e inferior de controles (ARTE, 2019; DOS SANTOS et al., 2011). Na prática dos gráficos de controle, duas fases distintas são utilizadas na literatura: fase I e fase II (WOODALL, 2000; VINING, 2009). A Fase I visa determinar se os dados coletados de um processo estão sob controle ou não.
Na fase II, o objetivo básico é testar dados futuros para especificar se o processo permanece sob controle ou mudou para o estado fora de controle, a fim de avaliar continuamente o processo e suas variações. Portanto, o gráfico de controle de Shewhart é uma representação gráfica da qualidade do produto e/ou processo (BERSIMIS; PSARAKIS; PANARETOS, 2007). Dessa forma, uma observação fora de controle é interpretada como evidência de que o processo está fora de controle, uma causa atribuível está presente e, portanto, uma intervenção de melhoria do processo é necessária.
O Diagrama de Ishikawa e a Metodologia de Análise e Solução de Problemas (MASP) estão entre as ferramentas e metodologias utilizadas para identificação e solução de problemas e melhoria contínua (MORAES et al., 2018).
JUSTIFICATIVA
OBJETIVOS
Objetivo Geral…
Objetivos Específicos
MATERIAIS E MÉTODOS
- Amostras da vacina candidata à material de referência
- Cultura de células
- Manutenção da linhagem HEK-293
- Preparo e fornecimento da suspensão celular
- Preparo do meio de diluição da vacina
- Revestimento das placas com Poli D-Lisina
- Plaqueamento de células
- Preparação da diluição seriada em megaplaca
- Infecção das células
- Fixação das células
- Imunocoloração
- Leitura da placa
- Análise dos resultados
- Critérios de aceitação do ensaio
- Construção do gráfico controle pelo software SPC-PC IV EXPLORER
Em seguida, os poços foram lavados três vezes com 1 ml de água destilada ultrapura (Sigma). Após a incubação, o líquido de cada poço foi removido por inversão da placa em um recipiente descartável, ou por aspiração, e então os poços foram lavados três vezes com 1 ml de água destilada ultrapura (Sigma). Para a leitura da placa, foi utilizado um microscópio invertido (Nikon Eclipse TS100) (aumento de 100x), equipado com uma ocular de 22 mm e uma objetiva de 10X, para contagem de células.
A Tabela 1 foi usada para determinar o intervalo de números de células e o número total de campos por poço. Gráfico 1 - Faixa de contagens de células e campos totais por poço por lente ocular. A análise dos resultados baseia-se no cálculo do número médio de células coradas dos cinco campos.
Número recomendado de células coradas de acordo com o número de campo e diâmetro da lente do olho.
RESULTADOS
Ensaio de potência
Além disso, todas as monocamadas de células do controle negativo permaneceram bem definidas e inalteradas após o período de incubação nas placas, conforme ilustrado na Figura 10. Os resultados nas tabelas acima correspondem ao número de partículas infecciosas por ml obtido pela contagem de células infectadas por vírus viáveis partículas coloridas por cromogênio líquido que produz uma mancha marrom.
Construção do gráfico controle
O presente estudo visa desenvolver o primeiro gráfico de controle da vacina de referência para uso em futuros testes de potência da vacina contra COVID-19 (AZD1222), realizados no DI. Avaliação rápida da eficácia da vacina COVID-19 contra infecção sintomática com variantes de SARS-CoV-2 por análise de distância genética. A triste história do “Kit Covid” e do “Tratamento Precoce da Covid-19” no Brasil.
Alvos das respostas das células T ao coronavírus SARS-CoV-2 em humanos com doença de COVID-19 e indivíduos não expostos. Transmissão comunitária por mídia indireta para pessoa: um elo perdido na rápida disseminação do COVID-19. Avaliar a consistência da produção de vacinas contra a Covid-19 em 2021, usando como indicador o teste de força dos fabricantes.
Available at: https://www.who.int/director-general/speeches/detail/who-director-general-s-opening-remarks-at-the-media-briefing-on-covid-19---11 -March- 2020.
Controle estatístico e acompanhamento do processo utilizando gráfico
DISCUSSÃO
Com a institucionalização do PNI, esses imunobiológicos passaram a passar por um rigoroso controle de qualidade no Brasil por determinação do Ministério da Saúde com o objetivo principal de estimular e ampliar o uso de imunizantes, tanto nacional quanto internacionalmente, buscando integridade e uniformidade de ações relacionado a ele. às imunizações realizadas no país (NETTO et al., 2010). O processo de controle de qualidade de imunobiológicos visa avaliar as especificações definidas em normas oficiais e/ou dados de saúde, e as ferramentas aqui apresentadas podem subsidiar o INCQS com dados relevantes relacionados ao monitoramento da consistência da produção, eventuais mudanças nos processos e até mesmo auxiliar na percepção de necessidades e/ou na realização de auditorias em laboratórios fabris (NETTO et al., 2011). O material de referência é utilizado como amostra controle para verificar se os resultados obtidos em um determinado teste são consistentes com os resultados obtidos nos testes de validação do procedimento analítico.
A utilização de material de referência em conjunto com gráficos de controle permite a avaliação do processo de controle de qualidade de um imunobiológico, além disso, permite a identificação de causas específicas de variação do processo (NETTO et al., 2011). Também é possível observar variações naturais do processo, também chamadas de causas comuns de variação, que estarão presentes mesmo que todas as operações sejam realizadas por métodos padronizados. Quando ocorrem apenas causas comuns de variação, todos os valores estão dentro dos limites de controle (Figuras 12 e 13).
De acordo com os gráficos, os testes realizados não apresentaram nenhum valor acima ou abaixo dos limites permitidos, além disso, os valores de potência passaram com competência nos testes de desempenho aplicados ao gráfico de controle, apresentando flutuações dentro dos limites esperados para um biológico produtos. ensaio avaliado por um bioensaio.
CONCLUSÕES
PERSPECTIVAS
Dissertação (Mestrado em Vigilância em Saúde) - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2014. Mortalidade por COVID-19 em idosos no estado do Paraná: análise de indicadores com a promoção da COVID -19 cobertura vacinal 19 óbitos em idosos no estado do Paraná: análise de indicadores com cobertura vacinal progressiva. Consequências de longo prazo do COVID-19: uma revisão sistemática e meta-análise de estudos de acompanhamento de um ano sobre sintomas pós-COVID.
Surtos de COVID-19 em serviços de saúde no município de Porto Alegre: caracterização dos serviços e dados clínico-epidemiológicos dos trabalhadores de saúde acometidos. Uma revisão atualizada da associação de fatores genéticos do hospedeiro com suscetibilidade e resistência ao COVID 19. A pegada global do COVID-19: uma reflexão teórica sobre as consequências da pandemia e suas consequências para a saúde dos profissionais de saúde.
Estimating the Early Impact of Vaccination Against COVID-19 on Mortality Among the Elderly in Brazil: Analyzes of Routinely Collected Data on Vaccine Coverage and Mortality.
