Sociedade Brasileira de Química ( SBQ)
33a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química
Estudos dos efeitos biológicos da adição do ligante 8- oxiquinolinacalix[4]areno (1) em sangue humano
Marcos Nunes (IC)2, Thais M. Gáscon(PG)1, Fernando L. A. Fonseca(PQ)1,2, Izilda A. Bagatin(PQ)2*
*ibagatin@unifesp.br.
1Fundação do ABC- Faculdade de Medicina, Av. Príncipe de Gales, 821, CEP 09060-650, Santo André - SP
2Universidade Federal de São Paulo – campus Diadema, Rua Prof. Arthur Riedel, 275, CEP 09972-270, Diadema - SP
Palavras Chave: 8-oxiquinolinacalixareno, anti-coagulante, fotofisica, hematocitopoese
Introdução
Sabe-se que a progressão do ciclo celular é dependente do nível de Fe intracelular e seu excesso está associado ao aumento da síntese de DNA, além do risco de crescimento de células tumorais1. Agentes quelantes como a 8- hidroxiquinolina (8HQ) e seus derivados são bons quelantes para Fe, e estudos têm mostrado que a 8HQ e derivados suprimem o crescimento de melanoma, tumor de Ehrlich e leucemia2. Os calixarenos modificados têm apresentado bons resultados em estudos biológicos1. Com o objetivo de verificar a atividade citotóxica do ligante 8- oxiquinolinacalix[4]areno (1) e sua relação com o Fe, ensaios preliminares de atividade anticoagulante e alteração da forma eritrocitária foram feitos com sangue humano.
Resultados e Discussão
Atividade anti-coagulante: 100,0 uL de sangue total colhido sem aditivo foi adicionado a 100,0 uL da solução 0,01 % de 1 em 5% DMSO (Solução A).
Após adição foi verificado o tempo de coagulação com auxilio de banho-maria a 37°C. Os resultados mostram que não houve alteração no tempo de coagulação com a adição do ligante 1.
Série vermelha: 100,0 uL de sangue colhido em um tubo com EDTA foi adicionado a 100,0 uL da solução de A. Após adição, se realizou esfregaço de sangue com auxilio de lâmina extensora. O esfregaço foi verificado em microscópio ótico comum para verificação dos elementos sanguíneos. Na presença do ligante 1, ocorre alteração da forma eritrocitária e diminuição de hemoglobina.
Prova de Falcização: 100,0 uL de sangue colhido em tubo com EDTA foi adicionado à solução A e essa mistura foi incubada em preparo lâmina- lamínula a 37°C por 1 hora. O ensaio seguiu as especificações da prova de Falcização que utiliza o bissulfito de sódio como reagente padrão. Observa- se, neste caso, a presença de cerca de 20% das hemácias alteradas.
Nota: Todos os ensaios foram feitos em prova em branco(sem adição de 1), e realizados seguindo o
Manual de Operações e as Boas práticas em análises clínicas3.
Medidas de fluorescência em acetonitrila mostram que a emissão do ligante livre (λem = 394 nm, λexc = 315 nm) é suprimida pela adição de Fe3+ coerente com a coordenação de um íon de metal de transição d5.
Tabela 1.
Prova Laboratorial
Sangue normal Sangue + Sol. A
Tempo de coagulação
3 min 3 min
Série vermelha Sem alteração Poiquilocitose, hipocromia e empilhamento
eritrocitário Prova de
Falcização
negativa ++
Ferro 59 ug/dL 67 ug/dL
Transferrina 270 ug/dL 282 ug/dL
Conclusões
O ligante 1, na concentração de 0,01%, não influi no tempo de coagulação do sangue, no entanto, provoca a poiquilocitose, hipocromia e empilhamento eritrocitário, além de alterações físicas nas hemácias. Considerando esses dados, o ligante 1 possui atividade citotóxica expressiva para as células vermelhas.
Agradecimentos
Renami-CNPq, UNIFESP-Diadema e ao LQSN.
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1 Pires, V. S., Gaboriau, F., Guillon, J. Nascimento, S., Dassonville, A., Lescoat, G., Desplat, V., Rochette, J., Jarry, C., e Sonnet, P., J. Enzyme Inhib. Med. Chem.., 2006, 21, 261.
2 Shen, A.Y. Chen, C. P. e Roffler, S., Life Sci., 1999,64, 813.
3 National Committee for Clinical Laboratory Standards.
Procedures for the collection of diagnostic; approved standard.
4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, 1998.
