Essas abordagens incluem manipulação pós-natal, enriquecimento ambiental e treinamento baseado na reabilitação motora (Hannigan et al., 2007). As ações da nicotina no sistema nervoso central (SNC) são mediadas por receptores colinérgicos nicotínicos (nAChRs) (Dani e Bertrand, 2007), que são canais de cátions pentaméricos amplamente expressos em locais pré e pós-sinápticos no sistema nervoso central (SNC) . periférico (SNP) (Leonard et al., 2001).
Objetivos específicos
Dadas as evidências de que o ambiente enriquecido (AE) desempenha um papel na regulação do comportamento e nos efeitos de diversas drogas, o objetivo deste estudo em camundongos suíços é avaliar o efeito da exposição ao ambiente enriquecido durante a infância sobre os efeitos produzidos pela nicotina. exposição durante a adolescência sobre parâmetros comportamentais relacionados à atividade locomotora, comportamento relacionado à busca de novos estímulos, comportamento relacionado à ansiedade, bem como sobre parâmetros neuroquímicos do sistema dopaminérgico e noradrenérgico, em duas fases da vida do animal, adolescência e idade adulta.
Animais e grupos experimentais
Exposição ao Ambiente Enriquecido
Tratamento com nicotina
A incisão foi então suturada (catgut simples 3.0) e os animais foram devolvidos aos seus currais para recuperação da anestesia.
Desenvolvimento somático dos animais
Testes comportamentais
Teste do Campo Aberto
Os retângulos que confinavam com as paredes do CA foram considerados pertencentes à borda do equipamento (Br, n = 12) e aqueles que não encostavam nas paredes foram considerados centrais (C, n = 4). Os tempos de residência na borda e no centro também foram registrados pelo programa utilizado para contagem. A percentagem de internamentos no centro [internações C / (internações C + Br)] e o tempo de permanência no centro foram utilizados como indicadores de ansiedade.
Teste do Campo Vazado
Análise neuroquímica
Quantificação da cotinina plasmática
Desenho global do experimento
Análise quantitativa
- Aspectos preliminares
- Análise da evolução da massa corporal
- Parâmetros comportamentais
- Parâmetros neuroquímicos
- Aspectos complementares
Os dados de massa corporal dos descendentes do PN1 ao PN30 foram analisados por meio de ANOVAr de dois fatores, onde GRUPO e SEXO (M ou F) foram considerados como fatores e a variável utilizada foi a massa corporal em gramas. Para interações entre fatores, nos casos em que P < 0,10 (bicaudal) os fatores interagentes foram separados e as ANOVAs foram repetidas para verificar se os efeitos foram mantidos.
Massa Corporal
Progenitoras
Filhotes
Testes comportamentais
Campo Aberto
- Entradas Totais
- Entradas Centro
- Entradas Borda
- Tempo Centro
- Autolimpezas
- Levantamentos
- Correlações entre os dados do campo aberto
CONT-SAL: animais expostos a ambiente padrão e tratados com solução salina; CONT-NIC: animais expostos a ambiente padrão e tratados com nicotina; AE-SAL: animais expostos a ambiente enriquecido e tratados com solução salina; AE-NIC: animais expostos a ambiente enriquecido e tratados com nicotina. Por outro lado, nos machos PN45 (C), houve um aumento no tempo gasto no centro do campo nos animais controle expostos ao ambiente e tratados com nicotina em comparação aos tratados com solução salina. CON- SAL: animais expostos a ambiente padrão e tratados com solução salina; CONT-NIC: animais expostos a ambiente padrão e tratados com nicotina; AE-SAL: animais expostos a ambiente enriquecido e tratados com solução salina; AE-NIC: animais expostos a ambiente enriquecido e tratados com nicotina.
KONT-SAL: animais expostos ao ambiente padrão e tratados com solução salina; CONT-NIC: animais expostos ao ambiente padrão e tratados com nicotina; AE-SAL: animais expostos ao ambiente enriquecido e tratados com soro fisiológico; AE-NIC: animais expostos ao ambiente enriquecido e tratados com nicotina. KONT-SAL: animais expostos ao ambiente padrão e tratados com solução salina; CONT-NIC: animais expostos ao ambiente padrão e tratados com nicotina; AE-SAL: animais expostos ao ambiente enriquecido e tratados com soro fisiológico; AE-NIC: animais expostos ao ambiente enriquecido e tratados com nicotina.
Campo Vazado
- Orifícios Totais
- Orifícios Centro
- Orifícios Borda
- Tempo Centro e Tempo Borda
- Autolimpezas
- Levantamentos
- Correlações entre os dados do campo vazado
Para animais adultos, nas fêmeas observamos efeito significativo do TRATAMENTO (F = 4,4; gl = 1; P = 0,045) (Figura 15B): assim como observado para a variável Furos Totais, o número de furos explorados na borda, maior em naqueles tratados com nicotina do que naqueles tratados com solução salina. Em relação aos machos adultos, identificamos primeiro um efeito significativo de EXPOSIÇÃO (F = 4,8; df = 1; P = 0,038) (Figura 15C): os animais expostos ao ambiente enriquecido exploraram mais buracos na borda do que aqueles expostos ao ambiente enriquecido. gerenciamento. O número total (A) e o número na borda (B) aumentaram em resposta ao tratamento com nicotina em mulheres PN75, sem que o resultado fosse afetado pela exposição ou não ao ambiente enriquecido.
Em contrapartida, nos machos PN75 (C), houve aumento no número de buracos explorados na borda nos animais expostos ao ambiente enriquecido, e o resultado independe do tipo de tratamento que o animal recebeu. Legenda: Dados referentes ao número total de furos explorados no campo vazado (CV) da PN45 (A) e PN75 (B).
Análise Neuroquímica
Dopamina
DOPAC
Razão DOPAC/Dopamina
Noradrenalina
Verificou-se (A) que homens PN75 expostos a ambiente enriquecido e tratados com nicotina apresentaram menor concentração de DOPAC do que aqueles tratados com solução salina. Além das interações entre ambiente e nicotina, também avaliamos separadamente os efeitos da exposição a um ambiente enriquecido e do tratamento com nicotina nas duas idades analisadas (PN45 e PN75). Curiosamente, esta redução não foi mantida quando estes animais foram tratados com nicotina após exposição ao ambiente enriquecido.
Portanto, a avaliação do comportamento de busca por novidades tornou-se de interesse, pois a exposição a um ambiente enriquecido e o tratamento com nicotina podem modificar esse comportamento. Nos adolescentes, observamos um efeito da exposição a um ambiente enriquecido que aumenta o número de buracos explorados na borda. Nestes animais, a exposição a um ambiente enriquecido e/ou ao tratamento com nicotina não alterou o comportamento de procura de novidades.
Em geral, a exposição ao ambiente enriquecido e o tratamento com nicotina geraram alterações comportamentais e nos níveis de neurotransmissores na idade adulta.
Correlação entre os dados neuroquímicos
Via de administração, doses e idades
Massa corporal
Nossos resultados não mostram alterações na massa corporal de mães e filhotes, indicando que a exposição ao ambiente enriquecido de acordo com o protocolo utilizado neste estudo não foi capaz de alterar este parâmetro durante o período de exposição ao EA. Alguns autores demonstraram, em animais adultos, um maior aumento de massa em animais que foram expostos ao ambiente enriquecido (Van de Weerd et al., 2002), outros uma diminuição (Monleon et al., 2008) e ainda existem estudos que relataram a ausência de alterações significativas (Benaroya-Milshtein et al., 2004). Estudos que constataram aumento de peso em animais transferidos para ambiente enriquecido relacionaram essa mudança a um aumento no consumo alimentar, o que também é geralmente observado nesses animais (Van De Weerd et al., 2002).
Por outro lado, estudos que mostram diminuição do peso de animais expostos a ambiente enriquecido estão relacionados a possíveis alterações na taxa metabólica, uma vez que animais em ambientes enriquecidos são mais ativos do que animais mantidos em ambiente padrão (Monleon et al., 2008). ). Pode-se especular também que a falta de alterações somáticas em alguns estudos (Benaroya-Milshtein et al., 2004) seja resultado de um equilíbrio entre fatores anabólicos e catabólicos relacionados às diferentes configurações de EA utilizadas.
Testes comportamentais
Campo aberto
Estudos anteriores já demonstraram que a exposição a um ambiente enriquecido aumenta a exploração dos animais no teste de campo aberto, tanto na movimentação total quanto no tempo gasto no centro do aparelho (o que não observamos em nossos animais) ( Brenes et al ., 2008). É interessante ressaltar que, em geral, trabalhos que duram no total 5 minutos como protocolo de testes em campo aberto resultam em aumento da exploração. Por outro lado, foi observada redução na exploração em trabalhos onde foi utilizado o protocolo de 10 minutos (Kazlauckas et al., 2011).
No que diz respeito à nicotina, o seu efeito é bem conhecido: redução da exploração global, que geralmente é acompanhada por uma diminuição do comportamento de procura de novidades (Vaglenova et al., 2004), o que não observámos nos nossos resultados com animais adolescentes, embora tenhamos recebeu tratamento com nicotina que resultou em níveis plasmáticos satisfatórios de cotinina (média: 68 ng/ml).No entanto, neste estudo, a nicotina foi injetada em mães lactantes, em contraste com o nosso estudo, onde o tratamento foi administrado cronicamente, diretamente foi administrado ao filhos. Curiosamente, o tratamento com nicotina a longo prazo (PN75) causou um aumento na atividade exploratória em animais adultos.
Campo vazado
Nas fêmeas, os animais expostos apenas ao tratamento com nicotina apresentaram um aumento no número de aberturas exploradas, o que foi significativamente diferente do controle e de outros grupos desenhados. Estudos envolvendo tratamento com nicotina geralmente relatam uma redução nesse tipo de comportamento de busca por novidades (Vaglenova et al., 2004). Um fato interessante a considerar é que quando os animais foram testados imediatamente após o término do tratamento com nicotina, eles não apresentaram maior busca por novidades.
Diante disso, duas hipóteses podem ser levantadas: a primeira é que no PN45 os animais ainda estão sob efeito da droga, o que naturalmente reduz ou não altera esse comportamento de busca pela novidade, e que no PN75 trinta dias após o término do tratamento com a nicotina, esses animais apresentam comportamentos decorrentes da abstinência da droga, e voltam a apresentar comportamentos considerados importantes para avaliar a predisposição ao uso de drogas. A segunda hipótese está relacionada ao fato de o tratamento com nicotina ter sido realizado durante a adolescência, o que é considerado uma janela crítica de desenvolvimento, sendo razoável sugerir que esses animais possam ter sido programados para apresentar esse tipo de comportamento na idade adulta.
Avaliação neuroquímica
Dopamina e DOPAC
Environmental enrichment reduces dopamine D1 receptor function in the rat prefrontal cortex. The golden-mantled ground squirrel (Spermophilus lateralis) as a model for the effects of environmental enrichment in solitary animals. Environmental enrichment blocks ethanol-induced locomotor sensitization and decreases BDNF levels in the prefrontal cortex in rats.
Environmental enrichment increases the in vivo extracellular concentration of dopamine in the nucleus accumbens: A microdialysis study. The interactive effects of environmental enrichment and extinction interventions to attenuate cue-induced cocaine-seeking behavior in rats.
Noradrenalina
Considerações gerais
Short-term environmental enrichment improves adult neurogenesis, vascular network, and dendrite complexity in the hippocampus of type 1 diabetic mice. Environmental enrichment induces a behavioral phenotype mediated by low cyclic adenosine monophosphate response element binding (CREB) activity in the nucleus accumbens. Differential effects of nicotine and complex enclosure on subsequent experience-dependent structural plasticity in the nucleus accumbens.
Social and environmental enrichment enhances sensitivity to the effects of kappa opioids: studies on antinociception, diuresis, and conditioned place preference. Environmental enrichment during early life stages reduces the behavioral, neurochemical and molecular effects of cocaine.
