Darüber hinaus sind die Ergebnisse von Studien zum Phosphorgehalt im Myzel von Pilzen und im Stickstoffhaus enthalten. Es stellte sich heraus, dass C.graniforme möglicherweise mit dem von Hatch (1934) isolierten Mycelium nigrostrigoeum identisch ist. Lihnell (1942) zeigte experimentell, dass C.graniforme mit Pinus silvestris L., Picea abies (L.) Karst., Betula verrucosa Ehrh., Populus tremula L.
In Reinkultur auf einem flüssigen oder festen Substrat bildet C.graniforme eine dicke Myzelschicht aus stark verfilzten Hyphen. Auf festen Medien dringt C.graniforme in das Substrat ein und entwickelt ein starkes, untergetauchtes Myzel. In Röhrchen mit einer hohen Schicht Glucose-Agar wuchs der oberflächlich inokulierte Pilz in 100 Tagen 2,3 cm tief in das Kulturmedium hinein.
Die Unzuverlässigkeit der Ergebnisse liegt darin begründet, dass diese Methode keinen Einblick in den Wachstumsverlauf erlaubt. Die Gestaltung der hier beschriebenen Testmethodik hängt entscheidend davon ab, wie die Wachstumsgeschwindigkeit am besten beurteilt werden kann.
Kulturgefässe,etc
Malzextrakt) an. Später wiesen Melin und Nyman (1940) nach, dass in sythetischen Nährlösungen das Wachstum dieses
Interessant ist auch, dass die Pyrimidinkomponente von Aneurin (2-Methyl-4-amino-5-aminomethylpyrimidin-dihydrochlorid) die gleiche Wirkung auf den Erwachsenen hat. Eine Erweiterung des Substrats wurde von Melin und Mikola (1948) vorgenommen, um den Einfluss der Stickstoffquelle auf das Wachstum von C.graniforme zu untersuchen. Es wurde festgestellt, dass Kaseinhydrolysat („N-Z-case“, Sheffield. Farms Co., N.Y.) ein weitaus besseres Wachs als Stickstoffquelle ist.
Aus einer weiteren Reihe von Experimenten schlossen Melin und Mikola dann, dass es sich um eine Mischung bestimmter Aminosäuren handelte.
Eine Zusammenstellung verschiedener Wachstumskurven zeigte, dass das Wachstum auf Saccharose, der besten Kohlenstoffquelle, typisch war. Mizellenstücke mit einem durchschnittlichen Trockengewicht von 1,2 mg beJmpi Da es nicht mehr übersichtlich wäre, alle Messwerte in einer Tabelle zusammenzufassen, erfolgte die Gruppierung. Obwohl der Pilz bei 179,0 mg MTG pro Tag weiter wächst, ist die Wachstumsrate pro mg in diesem Zeitraum dieselbe, wie die abgeflachte halblogarithmische Kurve zeigt.
Das spätere Wachstum von 67,2 mg Myzel verursacht nur eine unbedeutende pH-Verschiebung von 2,97 auf 2,92. Diese Zahlen, die das Wachstum charakterisieren, stimmen sehr gut mit den entsprechenden Werten für Glukose überein, sodass D-Mannose als gute Kohlenstoffquelle bezeichnet werden kann. Im Gegensatz dazu ist die pH-Änderung nicht so groß wie bei Fruktose; für 71,7 mg Myzel sind das nur 1,36 Einheiten, im Vergleich zu 1,82 für Fruktose.
Der relativ starke Anstieg des Myzels während der letzten Testperiode deutet jedoch darauf hin, dass das Wachstum auf Stärke und Inulin über einen längeren Zeitraum sogar noch besser ist. Der Anstieg verläuft parallel zur Myzelentwicklung, sodass beim Wachstum auf Inulin mit 14,1 mg Myzel 2,20 ml 0,1 N NaOH zur Injektion des Treibmittels erforderlich sind.
Abgeschlossen am Tag nach der Impfung, - in dieser Zeit¬. In dieser Zeitspanne betrug das Gewicht des Myzels nur etwa 0,6 mg, oder es bildet sich zweimal eine exponentielle Phase, wobei die zweite unmittelbar auf die erste folgt. Glukosephase“ gebildet; der weitere Anstieg von 15 auf 87,4 mg, also der Großteil der Myzelproduktion, charakterisiert Maltose als mittelmäßige Kohlenstoffquelle.
Die scheinbare Verengung der Wachstumskurve muss durch die Kohlenstoffquelle verursacht worden sein. Im Vergleich zu Glucose beginnt das Wachstum bei Raffinose (m, Abb. 8), einem Trisaccharid aus Fructose, Glucose und Galactose, etwas später. Gemäß dem Wachstumskoeffizientenwert <*,- 0,15 nimmt Raffinose eine Zwischenposition zwischen guten und durchschnittlichen Kohlenstoffquellen ein.
Die im Gewicht des Myzels enthaltenen Kohlenhydrate lassen darauf schließen, dass das Trisaccharid nur teilweise verwertet werden kann (1/3 des Gewichts). Wie im Versuch 1 erfolgt die Säuerung parallel zu den Myzelgewichten, sodass sie von der Verwendbarkeit der einzelnen Holzkohlen abhängt. 1-Sorbose(n) wird von C.graniforme nicht zur Myzelbildung verwendet, es werden jedoch nur 0,3 mg Myzel in 42 Tagen gebildet.
Der allmähliche Abfall des pH-Werts weist jedoch darauf hin, dass unter dem Einfluss des Samenmyzels gewisse Veränderungen im Substrat stattfinden.
Dass die pH-Verschiebung auf das Inokulum zurückzuführen ist und nicht auf die Flüssigkeit, die notwendigerweise mit dem Inokulum hinzugefügt wird. Um den tatsächlichen Sachverhalt aufzuklären, sollten natürlich auch die Ergebnisse einer chemischen Analyse der bewachsenen Nährlösungen berücksichtigt werden.
B, Fig.11) dagegen erlaubt am Anfang ein gutes Wachs¬
Versuchstag mit 34.6 mg Glucose vor der Hydrolyse ungefähr die Hälfte der noch vorhandenen Kohlenstoffquelle (73.6 mg
Daher kann der Anstieg durch das durch den Pilz verursachte übermäßige Auftreten von freier Glukose erklärt werden. Beim Wachstum entstehen giftige Substanzen, die entweder die Pilze in der Produktion im Allgemeinen entscheidend beeinträchtigen.
Glycogen kann durch die Carbohydrasen von C.graniforme
Die 1#-Kohlenstoffquellenbrühe wurde mit 1 ml Hyphensuspension, hergestellt aus einer 27 Tage alten Kultur, beimpft.
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Abb.19 Oben: Wachstum von C.graniforme auf Maltose Unten: Freie Glucose in Nährlösung in mg pro Kultur. gegebene Wachstumskurve; Der Bruchpunkt gibt einen kritischen Wert des Myzelgewichts an, der im Durchschnitt bei 17,7 mg liegt. Bevor das kritische Myzelgewicht erreicht ist, ist die junge Kultur in der Lage, mehr Glukose zu bilden, als sie aufnehmen kann, und diese reichert sich in der Nährlösung an.
Um den „Glukosetyp“ während des Wachstums aufrechtzuerhalten (c*.=0,2), benötigt die erhöhte Myzelmenge mehr freie Glukose, als anschließend zugeführt wird. Um den beschriebenen Effekt hervorzurufen, reicht es aus, dass die Enzymproduktion mit zunehmendem Myzelgewicht im Verlauf des Experiments zunimmt. 6, VI) Es ist bekannt, dass junge Kulturen besser für die Enzymproduktion geeignet sind als alte); der Gesamtenzymgehalt der Nährlösung kann dennoch ansteigen.
Die gute Übereinstimmung erstreckt sich nicht nur auf die einzelnen Abschnitte der Wachstumskurve und auf die Wachstumsratenkoeffizienten = 0,15, sondern auch auf den zeitlichen Verlauf des Monosaccharidgehalts der Nährlösung und den Polymerisationsgrad des Restzuckers. Wenn 5 % der Kohlenstoffquelle als Maltose (^-Dextrin + Maltose, 19:1; IX, Abb. 28) hinzugefügt werden, entsteht eine geringe Menge mäßig nützlicher Saccharide aus Ver¬. 24 Oben: Wachstum von O.graniforme auf Stärke Unten: Freie Glukose in der Brühe in mg pro Kultur.
Basierend auf der Glukose-supplementierten Serie wurde erwartet, dass sich das Gesamtgewicht bei Verwendung von 100 mg Glukose um 50–60 mg erhöht, wenn die Zellulose nicht angegriffen wird. Kargtröm (1938) stellte in seiner Grundlagenforschung zur enzymatischen Adaptation von Mikroorganismen fest, dass adapt¬. Die Anpassung von C.graniforme an Stärke könnte auch durch weiteres Wachstum des Pilzes in einer stärkehaltigen Nährlösung erreicht werden.
Zur Beimpfung wurden 2 ml einer gewaschenen Hyphensuspension (Trockengewicht der beimpften Menge ca. 0,4 mg) pro Kultur verwendet.
S-OutHü
Zucker und freie Glukose in den Nährlösungen weisen darauf hin, dass C.graniforme auch hydrolytische Enzyme an das Medium abgab. Um die überwucherte Nährlösung auf Enzymgehalt zu prüfen, wurden 1200 ml ölige Stärke-Nährlösung in drei Fernbach-Kol¬ len gegeben.
200 ml Kulturflüssigkeit mit Zusatz von 10 ml sterilem Wasser, pH 3.5
200 ml Kulturflüssigkeit wurden in einem der ur¬
Die klare Lösung wurde auf pH 7 neutralisiert, im Vakuum bei 35 °C konzentriert und mittels Ionenaustauschern von den Anionen und Kationen der Nährlösung befreit (Kontrollbestimmungen zeigten, dass es bei der Perkolation an den Ionenaustauschern zu keiner messbaren Hydrolyse der zusammengesetzten Saccharide kam) . Eine Probenlösung wurde gleichzeitig mit zwei reinen Glucose-Kontrollen auf Whatman-Papier Nr. 1 chromatographiert. 1 (Jermin und Ifherwood 1949), mit a.
- Organische Säuren als Kohlenstoff- und Energiequellen
- Abhängigkeit des Phosphorgehalts von der Art des Kohlenhydrats
- mg P als KHgPO
Um das Verhalten von C.graniforme gegenüber verschiedenen Glukosekonzentrationen zu untersuchen, verwendeten wir vier Wachstypen. In Serie D zeigten weder der pH-Wert noch die Titrationssäure eine erhöhte Ansäuerung der Kulturflüssigkeit im Vergleich zur Serie A. Nun zeigen die Wachstumsexperimente, dass in der normalen Nährlösung mit Ammoniumtartrat der pH-Wert nie unter 2,6 fällt, so dass eine hemmende Die Wasserstoffionenkonzentration kann noch höher sein.
Das Wachstum in den Serien b und c mit unterschiedlichen Ammoniumnitratkonzentrationen zeigt keine Unterschiede, die auf eine Verwertung des Nitratstickstoffs hinweisen. Der Prozess wird möglicherweise dadurch erschwert, dass die Fruktose in der Saccharose in Form von Furanose vorliegt. In der Reihe: Stärke, ß-Dextrin und <*-Dextrin steigt die Verwendbarkeit mit abnehmender Molekülgröße.
Der Gesamtphosphorgehalt im Myzel von C. graniforme wurde in Abhängigkeit von der Glukosekonzentration und der Art der Bindung von Glukosebausteinen in Di- und Polysacchariden untersucht. Wir untersuchten den Einfluss der Glukosekonzentration auf den Stickstoffgehalt von C. graniforme und ermittelten Stickstoffbilanzen in Experimenten mit verschiedenen Kohlenhydraten. Glukose wächst in einem ausgewogenen Medium, in anderen Serien wird Stickstoff vor Kohlenstoff minimiert.
Der verbleibende Ammoniumstickstoff in der Kulturbrühe wurde bei jeder Ernte gemessen; Der entsprechende Myzelstickstoff wird anhand von Tabelle 26 berechnet. Ammoniak verschwindet jedoch weiterhin aus den Stärkesubstraten und das Bilanzdefizit deutet darauf hin, dass dieser Stickstoff wahrscheinlich in organisch gebundener Form in der Kulturflüssigkeit verbleibt.
Versuchstag; korrigierte Stickstoffbilanz
- Anfangsgehalt der Nährlösungen
- Zusammenhang zwischen Acidität der Kulturflüsaig- keit und Stickstoffverbrauch der wachsenden Myoelien
Zusammenhang zwischen dem Säuregehalt der Kulturbrühe und dem Stickstoffverbrauch wachsender Myoelien. In Experiment 1 wurde festgestellt, dass Kulturflüssigkeiten nur dadurch angesäuert werden, dass die Pilze Kationen aus der Stickstoffquelle aufnehmen, während Anionen in der Nährlösung angereichert werden. Vergleicht man die Ansäuerung mit dem Ammoniakverlust, so stellt man fest, dass bei allen Kohlenstoffquellen ein Basenüberschuss in der Kulturbrühe vorliegt.
Aber auch wenn nur der Stickstoff aus dem Myzel für die Ansäuerung der Kulturflüssigkeiten verantwortlich ist, verbleibt ein Überschuss an Base. Dies liegt vermutlich daran, dass der Pilz im Mineralstoffwechsel mehr Anionen (Phosphat, Sulfat etc.) als Kationen (Na+, K+, Ca++ etc.) aufnimmt. Die Bildung von Säuren durch Filzeinwirkung auf die Kohlenstoffquelle kann nicht festgestellt werden.
D-Sorbitol, D-Galactose, hochpolymere ß-Dextrine, Stärke und Inulin sowie Gluconsäure-f-lacton und Glucosid Salicin sind von schlechtem Nutzen. Zu denjenigen, die nicht verwendet werden können, gehören 1-Arabinose, D-Xylose, D-Lyxose, 1-Arabin, 1-Sorbose, Lactose, Xylan und Cellulose in der angegebenen Form. Dieser Wert hängt von der Art der Kohlenstoffquelle und, wie das Experiment mit Glucose zeigt, auch von deren Konzentration ab.
Diese Versauerung erfolgt durch Nutzung der Stickstoffquelle (Ammoniumtartrat) durch Absorption der Ammoniumionen aus dem Pilz. Phosphor basierend auf dem Trockengewicht. Es wurde festgestellt, dass der Phosphorgehalt von der Art der Kohlenstoffquelle abhängt. Der Stickstoffgehalt des Myzels hängt auch vom Alter der Kulturen ab; das Alter der Kulturen nimmt unter den verwendeten Kultivierungsbedingungen ab; Unter den verwendeten Kulturbedingungen erreicht sie mit zunehmendem Myzelgewicht ihren Höhepunkt.
Kenntnisse der Physiologie von Mycelium radicis atrovirens Melin unter besonderer Berücksichtigung der Nutzung verschiedener Kohlenstoffquellen.
