UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA
FILHO”
FACULDADE DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E VETERINÁRIAS
CAMPUS DE JABOTICABAL
AVALIAÇÃO TOXICOLÓGICA DA
Ipomoea asarifolia
(SALSA) EM RATOS.
Evaldo Augusto Salomão Monteiro
Médico Veterinário
JABOTICABAL – SÃO PAULO – BRASIL
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO” FACULDADE DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E VETERINÁRIAS
CAMPUS DE JABOTICABAL
AVALIAÇÃO TOXICOLÓGICA DA
Ipomoea asarifolia
(SALSA) EM RATOS
Evaldo Augusto Salomão Monteiro
Orientador: Prof. Dr. Antonio de Queiroz Neto
Tese apresentada à Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias – UNESP, Campus de Jaboticabal, com parte das exigências para obtenção do título de Doutor em Medicina Veterinária - área de concentração em Clínica Veterinária.
JABOTICABAL – SÃO PAULO – BRASIL
Monteiro, Evaldo Augusto Salomão
M775a Avaliação toxicológica da Ipomoea asarifolia (salsa) em ratos./ Evaldo Augusto Salomão Monteiro – – Jaboticabal, 2010
vii, 102 f. il; 28 cm
Tese (doutorado) - Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, 2010
Orientador: Antonio de Queiroz Neto
Banca examinadora: Maria Isabel Mataqueiro, Juliana Corrêa Borges Silva, Maria do Carmo de Souza Batista, Fabiana Garcia Chistovão
Bibliografia
1. Ipomoea asarifolia. 2. Ratos. 3. Toxicidade. I. Título. II. Jaboticabal-Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias.
CDU 619:615:599.323.0
DADOS CURRICULARES DO AUTOR
A minha esposa Isanilde, pelo seu amor, apoio, companheirismo e acima de tudo compreender minha ausência durante a realização do experimento.
Aos meus filhos Iago e Caio porseu amor incondicional sendo eles meu principal elo com a vida.
Aos meus pais Olinda e Raimundo por seu exemplo de vida, principalmente na educação dos filhos.
AGRADECIMENTOS
A Universidade Estadual do Maranhão – UEMA, pelo apoio e incentivo em prol da qualificação dos docentes.
Ao prof. Dr. Antonio de Queiroz Neto, pela firmeza na orientação, o meu agradecimento sincero.
Aos amigos e funcionários do Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal, Sr. Euclídes, William, Talita, Analuê, Aline, Michael, Marcela e Damares, todos imprescindíveis para o desenvolvimento de todas as etapas desta pesquisa.
A profª. Drª. Rosângela Zacarias Machado, pela amizade e apoio em todos os momentos.
A colega profª. Drª. Francisca Neide Costa, pela luta para implantação do DINTER entre a UNESP e a UEMA e pelo apoio durante a realização deste trabalho.
A CAPES, pela concessão da bolsa de estudos durante o período de agosto de 2009 a abril de 2010.
Aos professores do DINTER pelo exemplo de profissionalismo, pela palavra permanente de incentivo e pela postura acadêmica exemplar.
A todos os colegas do DINTER, em especial a Antônia, Cristiane, Daniel, Zé Filho e Júnior pelo companheirismo nos momentos de angústia, de aflição e de alegria.
Ao colega Prof. Dr. Fábio Evangelista pelo incentivo e auxílio na pesquisa laboratorial deste experimento.
A aluna de graduação da UEMA Odinéia, por me acompanhar na realização do início da pesquisa.
Aos colegas do Departamento das Clínicas da Universidade Estadual do Maranhão – UEMA, pelo apoio e incentivo.
Ao amigo Prof. Gustavo Pereira da Costa, pelo apoio e por fazer-me acreditar no significado da amizade.
A Profª Maridalva Varão Ribeiro pela oportunidade e apoio na carreira do magistério superior.
A Educadora Leutres Zaqueu Monte (D. Moreninha), pelo apoio e incentivo no início da minha vida estudantil, minha eterna gratidão.
Aos amigos Gilson, Itaan, Alana, Nestor e José Benedito pelo apoio constante em toda minha vida.
A todos aqueles que contribuíram direta ou indiretamente para o êxito de minha caminhada, meu justo agradecimento.
SUMÁRIO
Página
Resumo . ... 1
Capítulo I - Considerações Gerais ... 3
1. Efeitos tóxicos em animais ... 5
2. Métodos de avaliação da toxicidade ... 8
3. Objetivo Geral ... 11
3.1. Objetivos Específicos ... 11
Referências ... 12
CAPÍTULO II - AVALIAÇÃO TOXICOLÓGICA AGUDA E SUBAGUDA DE EXTRATOS AQUOSO E HIDROALCOÓLICO DE IPOMOEA ASARIFOLIA (SALSA) EM RATOS ... 17
Resumo ... 17
1. Introdução ... 19
2. Material e Método ... 22
2.1. Local do Experimento ... 22
2.2. Material Botânico e preparação dos extratos ... 22
3. Delineamento Experimental ... 23
3.1. Extrato Aquoso ... 23
3.1.1. Avaliação da toxicidade aguda ... 23
3.1.2. Avaliação da toxicidade subaguda ... 24
3.2. Resultados e Discussão ... 25
3.3. Extrato Hidroalcoólico ... 35
3.3.1. Avaliação da toxicidade aguda ... 35
3.3.2. Avaliação da toxicidade subaguda ... 36
3.4. Resultados e discussão ... 37
4. Conclusões ... 49
CAPÍTULO III - AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE PERINATAL EM FILHOTES DE RATAS, SUBMETIDAS A ADMINISTRAÇÃO DA IPOMOEA ASARIFOLIA EM
FORMA DE RAÇÃO DURANTE A GESTAÇÃO ... 56
Resumo ... 56
1. Introdução ... 58
2. Material e Métodos ... 61
2.1. Local do experimento ... 61
2.2. Material botânico e preparação das rações ... 61
2.3. Preparo da ração de salsa ... 62
2.4. Preparo da ração de feno ... 62
2.5. Análise das rações ... 62
2.6. Análise química e bioquímica da ração de feno e de salsa ... 63
3. Delineamento experimental ... 64
3.1. Avaliação da toxicidade perinatal ... 64
3.1.1 Animais ... 64
3.1.2. Fases ... 65
3.1.2.1. Pré-acasalamento ... 65
3.1.2.2. Acasalamento... 65
3.1.2.2.1. Acasalamento Pré-experimento ... 66
3.1.2.3. Gestação ... 67
3.1.2.4. Nascimento ... 67
3.1.2.5. Pós-desmame ... 67
3.2. Avaliação comportamental da prole ... 68
3.2.1. Desenvolvimento físico da prole ... 68
3.2.2. Avaliação neurocomportamental da prole ... 68
4. Resultados e discussão ... 76
4.1. Avaliação do desenvolvimento físico da prole ... 78
4.2. Avaliação comportamental da prole ... 79
LISTA DE ILUSTRAÇÕES
Página Capítulo I – Considerações Gerais
Quadro1. Classificação botânica da Ipomoea asarifolia ... 4
Figura 1. Ipomoeaasarifolia ... 5
Capítulo II - Avaliação Toxicológica Aguda e Subaguda de Extratos Aquoso e Hidroalcoólico de Ipomoeaasarifolia (Salsa) em Ratos. Tabela 1. Análise de Variância das variáveis de Hemograma ... 27
Tabela 2. Análise de Variância dos Valores Bioquímicos ... 28
Tabela 3. Análise de Variância dos Valores Bioquímicos ... 29
Tabela 4. Análise de Variância das variáveis de Hemograma ... 30
Figura 1. Fotomicrografia de ratos intoxicados com I. asarifolia extrato aquoso -Microvacuolização do neurópilo adjacente aos neurônios de Purkinje no encéfalo, objetiva de 40X ... 33
Figura 2. Fotomicrografia de fígado, hepatócitos tumefeitos da região centrololubular com pobre evidenciação dos sinusóides (degeneração hidrópica), objetiva de 40X ... 33
Figura 3. Fotomicrografia do rim de rato com túbulos contornados proximais tumefeitos (degeneração hidrópica), objetiva de 40X ... 34
Tabela 6. Análise de Variância das variáveis de Hemograma ... 40
Tabela 7. Análise de Variância dos Valores Bioquímicos ... 42
Tabela 8. Análise de Variância das variáveis de Hemograma ... 44
Figura 4. Fotomicrografia de cérebro de rato intoxicado com I. asarifolia extrato hidroalcoólico. Severa microvacuolização segmentar do neurópilo adjacente aos neurônios de Purkinje no encéfalo, objetiva de 40X ... 47
Figura 5. Fotomicrografia de fígado de rato intoxicado com I. asarifolia extrato hidroalcoólico acentuada tumefação de hepatócito, discretos focos com infiltrado inflamatório linfocitário na Região Portal, objetiva de 40X ... 47
Figura 6. Fotomicrografia do rim de rato com intoxicado com I. asarifolia extrato hidroalcoólico com túbulos contornados proximais tumefeitos (degeneração hidrópica) , objetiva de 40X ... 48
CAPÍTULO III - Avaliação da toxidade perinatal em filhotes de ratas, submetidas a administração da Ipomoea asarifolia em forma de ração durante a gestação.
Tabela 1. Valores obtidos através da análise das rações de feno e de salsa a fim de que as ratas gestantes do grupo controle e do grupo tratado obtivessem o mesmo ganho protéico ... 63
Figura 1. Arena de Campo Aberto: avaliação da atividade exploratória ... 70
Figura 3. Tambor Giratório (Rota-rod): avaliação da coordenação motora e equilíbrio ... 73
Figura 4. Labirinto Aquático de Morris: modelo experimental para avaliação da aprendizagem e memória ... 75
Tabela 2. Tabela do consumo de ração do grupo tratado durante a gestação ... 76
Tabela 3. Tabela de ganho de peso de fêmeas gestantes dos grupos Tratado ... 77
Figura 5. Ganho de peso em gramas de ratas alimentadas com ração de salsa (50%) e ração de feno (50%) durante período de gestação ... 78
Figura 6. Representação gráfica do desenvolvimento físico da prole (esquiva ao abismo) ... 79
Figura 7. Representação gráfica do tempo médio para a localização da plataforma ... 81
Figura 8. Representação gráfica no teste de Labirinto em Cruz Elevado ... 85
Figura 9. Representação gráfica no teste de Rota-rod ... 86
Figura 10. Representação gráfica do tempo médio para a localização da plataforma ... 87
Apêndice B. Estatística análise de variância pelo delineamento fatorial das variáveis bioquímicas de ratos submetidos à intoxicação subaguda tratamento X tempo com I. asarifolia em extrato aquoso ... 96
Apêndice C. Teste de Brown and Forsy the (bf) para homogeneidade de variâncias (homocedasticidade) das variáveis do hemograma de ratos submetidos à intoxicação subaguda com I. asarifolia em extrato aquoso ... 97
Apêndice D. Estatística análise de variância pelo delineamento fatorial das variáveis do hemograma de ratos submetidos à intoxicação subaguda tratamento X tempo com I. asarifolia em extrato aquoso ... 98
Apêndice E. Teste de Brown and Forsy the (bf) para homogeneidade de variâncias (homocedasticidade) das variáveis bioquímicas de ratos submetidos à intoxicação subaguda com I. asarifolia em extrato hidroalcoólico ... 99
Apêndice F. Estatística análise de variância pelo delineamento fatorial das variáveis bioquímicas de ratos submetidos à intoxicação subaguda tratamento X tempo com I. asarifolia em extrato hidroalcoólico ... 100
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