RESSALVA
Atendendo solicitação da autora, o texto
completo desta dissertação será
Carolina dos Santos Santinoni
Cicatrização óssea de defeitos de tamanho crítico
tratados com aspirado de medula óssea, laser em
baixa intensidade ou a associação de ambas as
terapias. Estudo histológico e histométrico em
calvárias de ratos.
ARAÇATUBA
–
SP
Carolina dos Santos Santinoni
Cicatrização óssea de defeitos de tamanho crítico
tratados com aspirado de medula óssea, laser em
baixa intensidade ou a associação de ambas as
terapias. Estudo histológico e histométrico em
calvárias de ratos.
Dissertação aprese ntada à Fac uldade de Odontologia
do Câmpus de Araçatuba
–
UNESP, para a obtenção do
Grau de “MESTRE EM ODONTOLOGIA” –
Área de
Periodontia
Orientadora: Professora Adjunto Maria José Hitomi Nagata
ARAÇATUBA
–
SP
Catalogação na Publicação (CIP)
Serviço Técnico de Biblioteca e Documentação – FOA / UNESP
Santinoni, Carolina dos Santos.
S235c Cicatrização óssea de defeitos de tamanho crítico tratados com Aspirado de Medula Óssea, Laser em Baixa Intensidade ou a associação de ambas as terapias : estudo histológico e histométrico em calvárias de ratos / Carolina dos Santos Santinoni. - Araçatuba : [s.n.], 2012
90 f. : il. ; tab. + 1 CD-ROM
Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual Paulista,
Faculdade de Odontologia de Araçatuba
Orientadora: Profa. Dra. Maria José Hitomi Nagata
1. Células-tronco 2. Medula óssea 3. Lasers 4. Terapia a laser de baixa intensidade 5. Regeneração óssea
Black D6
D
ados Curriculares
Carolina dos Santos Santinoni
Nascimento: 27.04.1987 – Dracena/SP
Filiação: Vanderlei Santinoni
Ana Alice dos Santos Santinoni
2006-2009: Curso de Graduação em Odontologia
Faculdade de Odontologia do Campus de Araçatuba – Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”- UNESP
2010-2012: Curso de M estrado do Programa d e Pós -Graduação em Od ontologia,
Área de Periodontia
D
edico este trabalho...
A
D
eus
Neste momento tão especial, volvo a Ti o meu olhar e elevo o meu louvor.
Não f oram as idéias, a paixão pela pesquisa ou o ref erencial teó rico que me
ajudaram a c hegar até aqui , mas si m S ua p resença cons tante e m minha vida .
Como Pai ze loso, s eguiu ao meu lado durante toda
minha caminhada,
carregando-me e m Teus braços no momento do d esmaio e d o desâni mo.
Obrigada por poder exercer a profissão que amo.
Agradeço por ta nto a mor e por ter -me p ermitido chegar a té aqu i.
Quero hoje, entrela çando as minhas mãos em Suas mãos, pedi r que
continue a ca minhar comigo por toda minha vida. Teu am or é o q ue me
faz seguir em frente.
“D
eu-me serenidade para aceitar tudo aquilo que não poderia ser mudado;Deu-me força para mudar tudo o que pôde ser mudado;
À
minha família,
M
eus pais,
V
anderlei e
A
na
Jamais conseg uirei de monstrar toda minha gratidão por vocês ter em me
presenteado co m a r iqueza do es tudo. E stimuladores supremos de minhas
vontades para a ca minhada do a manhã, vo cês nunca questi onaram os meus
sonhos e me apoiaram em todo caminho que escolhi seguir, mesmo sem entender
ao certo para qual destino ele me levaria.
Muitas vezes deixaram de seguir seus sonhos para tornar os nossos
realidade. Mãe, agradeço por ter se d edicado a nossa família todos esses
anos. Pai, obrigada por ser esse exemplo de alegria e dignidade.
M
inha irmã,
J
uliana
Desde criança, sempre tive grande admiração por sua sede inesgotável por
conhecimentos e por sua inteligênc ia. Essa adm iração despe rtou em mim o
interesse e m quer er aprender se mpre mais e certa mente me d irecionou ao
caminho das pes quisas que hoje sigo. Agr adeço por respeitar minha ausência
quando não pude estar ao seu lado e pelos momentos de apoio incondicional!
A
o meu namorado,
D
aniel
Descrever aqui os motivos pelos quais eu dedico este trabalho a você seria
descrever cada minuto desde o dia em
que nos conhece mos. Por tanto
companheirismo, por t anto amor, pelo si mples fato de estarmos juntos... Se hoje
estou realizando meus sonhos, certamente, também devo isso a você que esteve
ao meu lado em cada momento.
Você f oi um presente de Deus para com pletar m inha vida e m e
fazer mais feliz! Um anjo que, desde o princípio, esteve presente em cada
momento importante para mim, compartilhando os momentos de alegria e
me ajudando a crescer nos momentos de dificuldade.
Agradeço por ter c
ompartilhado sua ex periência, por
compreender minhas ausências, pela paciência e por querer sem pre
o melhor de mim, pela Fé que compartilhamos e por estar a o meu
lado SEMPRE. Agradeço, também, a Deus por ter a oportunidade
de ter alguém tão especial em minha vida.
“O
amor é perfeito quando encontramos alguém que nosAgradecimentos
P
ela realização do sonho...
À
minha Orientadora,
M
M
aria
J
osé
H
itomi
N
agata
Sempre fui admiradora da prática da Ciência. Quando a conheci, ainda na
Graduação, passei a ad mirá-la por ser essa professora e pesq uisadora com tanto
prestígio. Surgiu, então, a op ortunidade de ser sua e stagiária e pas sei a acred itar
que o sonho de ser pesquisadora p udesse se tornar real. A minha e scolha pela
carreira acadêmica certamente foi encorajada pelas oportunidades qu e a senhora
me ofereceu. E meu sonho tem se conc retizado da melhor maneira que poderia
ser: aprendendo co m um a pesqui sadora d e excelê ncia, de prof issionalismo
inquestionável. Qua nto m ais nós con vivemos, mais cresce m a a dmiração e o
respeito que tenho pela senhora.
Além de ser u ma excelente orientadora, sempre ressaltando o melhor de
seus orientad os e resp eitando a indiv idualidade de cada u m, a se nhora é u ma
verdadeira a miga, se mpre disposta a o uvir e compartilhar u ma pala vra sincera.
Obrigada pela oportunidade de realização desse curso e pelo orgulho de dizer que
sou sua orientada. Espero continuar aprendendo muito caminhando ao seu lado.
P
ela contribuição em minha formação e
no desenvolvimento desse trabalho
A
o Professor Dr.
Alvaro Francisco Bosco
,
Exemplo de profissional, professor e pesquisado r, re conhecido por sua
extrema competência. Fonte de sabedoria, mans idão e humildade . Com tanta
generosidade, o senhor nos presenteia compartilhando o conhecimento adquirido
com tantos anos de experiência. Agradeço imensamente por toda ajuda durante o
curso de Mestrado e por me permitir ter o orgulho de dizer que sou sua aluna. O
senhor me faz amar cada dia mais a Periodontia.
A
os Professores
Dr.
Valdir G. Garcia
e Dra.
Letícia H. Theodoro
,
Sinto-me muito honra da em poder diz er que faço parte d e uma equipe
com professores tão competentes e tão importantes para a Periodontia mundial.
Agradeço infinitamente por toda ajuda dispens ada e por sempre me receberem
com tanto carinho nos momentos de dúvida. Vocês nos permitiram compartilhar
com vocês momentos de muita alegria. Desejo continuar a aprender sempre mais
A
o Prof. Dr.
Stephen E. Fucini
Agradeço pelos momentos em que compartilhamos seu conhecimento e
sua ex periência p rofissional; pelas traduçõ es e pelas aulas d e Periodo ntia e
Implantodontia in english; pela doação d e equipamentos e materi ais para nosso melhor aprendizado durante o curso; por compartilhar nossas conquistas sempre
com entusiasmo e alegria.
A
o Prof. Dr.
Edilson Ervolino
O senhor tem o verdadeiro dom de ser Mestre! O amor que o senhor tem
pela profissão que exerce é nítido e admirável e o carinho que o senhor tem para
ensinar seus alunos será lembrado para sempre por mim como um exemplo a ser
seguido n a carreira acadêmica. Muito obri gada por seus ensinamentos, sua
dedicação e por sua contribuição na análise histológica deste trabalho.
À
Profa. Dra.
Suely R. Mogami Bomfim
e sua equipe do Curso de Medicina Veterinária
Agradeço infinitamente pelo aux ílio profissional, sem o qual esse
trabalho não se ria real izado. Sempre disposta a nos ajudar, disponibilizo u sua
equipe incontáv eis vez es para realização dos n ossos ex perimentos. Por várias
vezes nos incluiu nos seus inúmeros afazeres e dividiu o tempo que dedica a sua
A
P
ela possibilidade de realização deste curso,
À
F aculdade d e Odo ntologia do Ca mpus d e Araçatuba d a Univer sidadeEstadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” – UNESP, nas pessoas d e sua Dire tora
Professora Dra . Ana M aria Pires Soubhia e Vice -Diretor Prof essor Dr. Wilson Roberto Poi,
A
o Prog rama de Pós -Graduação em Odontolog ia, nas pesso as de suaCoordenadora Professora Dra Maria José Hitomi Nagata e Vice-Coordenador
Celso Koogi Sonoda, por trabalharem com g arra, determinação e generosidade
em busca do bem comum aos pesquisadores de nosso Programa.
À
FAPESP, pela concessão da Bolsa de Mestrado (Processo №2010/04450-2) a pós-graduanda Carolina dos Santos Santinoni.
A
todos os funcionários de todos os setores da Faculdadede Odontolog ia de A raçatuba – UNESP , por p roporcionarem o
P
ela amizade incondicional,
A
os meus
familiares,
A
A
vó
Maria,
T
ios e Tias,
P
rimos e Primas...
Os anos passaram e a infância ficou na lembrança...
Hoje, os caminhos seguidos por cada um de nós foram diferentes e
tantas vezes nos impediram de nos encontrar. Mas permanecemos sempre
juntos, compartilhando o amor fraterno que nos une e fazendo com que em
cada reencontro, as horas que f oram roubadas de no sso convívio fossem
esquecidas e recompensadas pela alegria de estarmos juntos.
D
ona
Cida e
S
r. Argeu,
T
hiago,
R
aquel e
A
rthur,
C
arol
e familiares...
Agradeço por terem me acolhido como membro de uma família tão bonita.
Pela a mizade, pel o c arinho e por co mpartilharem minhas vitóri as. Ta mbém
agradeço pelo bem precioso que uniu nossas vidas.
A
amiga,
B
B
runa Soares
Como nossa amizade é importante para mim!
Aprendemos a viver sem cobranças, aproveitando a liberdade para
nutrir a sau dade qu e torna nos sa a mizade tão especia l! Aind a que
estivéssemos distante s, você se f ez presente em todo s os momentos
importantes da minha vida, co memorou minhas vitórias e me deu apoio
nos momentos de dif iculdade. As cir cunstâncias da vida me f izeram ter
poucos, mas verdadeiros amigos como você, com quem eu sei que sempre
posso contar. A ale gria co m que você c ompartilha co migo minhas
conquistas é rara.
Peço desculp as pelas l ongas ausênc ias e m q ue eu tive que
me d edicar inte gralmente ao
meu c urso e agradeço p
or
compreender que iss o f azia parte da m
inha ca minhada para
realização de um sonho.
"E
, às vezes, quando os procuro,Noto que eles não têm noção de como me são necessários,
De como são indispensáveis ao meu equilíbrio vital,
Porque eles fazem parte do mundo que eu tremulamente construí
E se tornaram alicerces do meu encanto pela vida..."
À
s amigas
N
N
atália M. Pola
e
N
N
atália de Campos
Minhas queridas, eu não pode ria fa zer o ag radecimento a vocês de forma
individual, pois separá-las até mesmo nesse momento seria um equívoco irreparável...
Com o ingresso na Pós-Graduação, pude conhecer melhor as autênticas Natália’s
da Periodontia de A raçatuba. Com pouco te mpo de convivên cia perc ebi o motivo de
andarem sempre juntas: vocês se completam... Cada uma com seus traços característicos
que juntos for mam essa dupla dinâmica , competente e maravilhosa qu e só poderi a
resultar em bons momentos.
Desde o come ço vocês me acolh eram com o m aior carinho, me inserir am na
vida pessoal e na amizade de você s. Nossos encontros for am mais fr eqüentes, a
convivência se tornou mais intensa, os laços se tornaram mais estreitos e eu descobri em
vocês novas amigas, com as quais eu pude contar em TODOS os momentos até aqui.
Não houve sit uação em que eu tenha ouvido “não” de vocês! Diante dos momentos de
angústia, vocês sempre compartilharam uma palavra de apoio e a certez a de que tud o
ficaria bem. T ambém di vidimos nessa cami nhada, juntas, muitos momentos fe lizes e
inesquecíveis. Sempre superamos nossas dificuldades, nossas diferenças e nos tornamos
verdadeiras mosqueteiras: uma por todas e todas por uma!
Com vocês, todo o tra balho dispensado pa ra realiz ação dessa Dissertação
tornou-se muito mais s imples e fe liz. Ag radeço infinitamente toda a ajuda, tod o
conhecimento compartilhado, toda paciênc ia e t odo o tempo que vo cês dedica ram a
mim. Não poderia terminar esse agradecimento sem re conhecer a entrada de vocês em
minha vida pelas mãos de Deus e, por esse feito, também serei eternamente grata a Ele.
A
os Pós-Graduandos da Periodontia,
E
E
rivan
, M
ariéllen
, P
aula
e V
ivian
Durante esse curso, passamos a maior p arte dos nossos dias juntos.
Compartilhamos tantos sentimentos, tantos bon s mom entos que, de fa to, vocês se
tornaram minha segunda família. Nossa amizade é muito especial para mim! Os levarei
para sempre na lembrança e no coração. Obrigada pelos bons momentos de convivência
e por cada minuto que passaram comigo!
Erivan
, sua GENEROSIDADE reflete como uma luz própria que te faz brilharde maneira tão especial! Obrigada pelos conhecimentos compartilhados. Sua companhia
é sempre muito agradável.
Mari
, sua ALEGRIA contag iante f az nosso s dias mais fe lizes! S e naGraduação não tivemos oportunidade para nos aproximar, na Pós-Graduação, a amizade
construída será lembrada para sempre!
Paulinha
, nossa PEQUENA G IGANTE! Su a for ça e seu p rofissionalismofazem de vo cê um a pess oa com poten cial para brilhar muito mais do qu e você possa
imaginar! Obrigada pela convivência agradável. Você é uma amiga muito especial...
Vivian
, você chegou à Periodontia de mansinho e surpreendeu a todos com suaEXPERIÊNCIA e capacidade de ir al ém! Torn ou-se uma verd adeira amiga, sempr e
nos incentivando a seguir em frente! Muito obrigada pela amizade incondicional...
A
os Professores e Amigos,
D
r.
M
ichel R. Messora
e
D
ra.
F
lávia A. C. Furlaneto
Pela grande admiração que tive qua ndo conheci um pouquinho da história e d a
determinação de vocês, eu me dei à liberda de de conside rá-los grandes amigos! Vocês
são exemplos de companheirismo, competência, persistência e garra!
Agradeço por toda contribuição para minha formação, por toda ajuda dispensada
para que esse trabalho fosse re alizado e pela confi ança depositad a. A gradeço a
oportunidade de te r pessoas como vocês em minha vida, que hoje colhem os fr utos de
sua intensa dedicação, renovando nossas esp eranças no futuro e assim nos ajudam a
manter vivos os nossos sonhos.
“A
amizade é uma predisposição recíproca que torna dois seres igualmente ciosos da felicidade um do outro.”Platão
A
os agregados da família Periodontia,
A
lberto,
A
rtur,
C
aril,
S
amuel e
P
edro
A vocês cabe ag radecer pelo c ompanheirismo aos amig os da Periodontia.
Certamente é o apoio de vocês qu e os impulsiona a sup erar limites e alcançar vitórias.
Obrigada p elos momen tos de c onvivência agradável e d e dive rsão! Voc ês são
A
os amigos
JJ
oão Guilherme
Nossa amizade me f az lembrar o início desse caminho que perc orri para chegar
até aqui... Você foi u ma das primei ras pessoas com qu em tive co ntato quando
começamos a Graduação e por ess e e outros tantos motivos, é tão espec ial para mim!
Obrigada por su a amizade sincer a em todos e sses anos e pel os momentos de diversão
em sua rara companhia.
R
enata Reis
Sempre disposta a re novar o astral com momentos de muitas risadas qua ndo o
trabalho interminável d a Pós -Graduação esg ota nossas energias! A sua amizade é
especial demais para mim! Obrigada pela convivência agradável e pela disponibilidade
incansável.
“N
ão importa quanta seriedade a vida exija de você, cada um de nós precisade um amigo brincalhão para se divertir.”
William Shakespeare
A
na Carolina,
J
osecarlos e
D
avi
Amigos que conheci por intermédio do Da niel, mas que se tornaram tão
especiais para mim! Vocês são exemplo de que o amor que supera tudo. Obrigada pela
amizade sincera, por dividirmos momentos tão especiais e alegres juntos.
A
o Dr.
Mario Nagata
e a Sra.
Hermínia Nagata
,
Pelo carinho e pela atenção que sempre tiveram conosco. Que Deus os abençoe.
À
Médica Veterinária
Vanessa Borges
Agradeço po r seu aux ílio profissional d e duas d iferentes for mas: pelo s erviço prestado sem o qual e sse trabalho não seri a re alizado e pela amizade foi construída graças a ele. Muito obri gada pel a dispo nibilidade e p elos momentos de convivência agradável.
A
o Prof. Dr.
Juliano Milanezi de Almeida
Pela amizade incondicional, por estar sempre disposto a nos ajudar, po r ser para nós exemplo de dedicação e competência. Obrigada pela convivência que nos possibilita compartilhar todo seu conhecimento.
A
o Prof. Dr.
Leandro Araújo Fernandes
Em cada contato, a certeza de poder contar com você em todos os mom entos! Compartilhando seus conhecimentos, mesmo distan te, você contribuiu muito para que eu concluísse as etapas necessárias para chegar até aqui. Ob rigada pela generosidade e pela amizade sincera.
A
os Professores e funcionários do
D
D
epartamento de Materiais Odontológicos e Prótese
A
os
funcionários
J
oilson de Barr os Lelis,
do Departamento de Cirurg ia e Clínica Integrada, pela contribuição direta ou indireta para realização do meu trabalho, aux iliando nosafazeres do dia-a-dia do laboratório, da Graduação ou da Pós-Graduação.
O
dair V icente,
do Departamento de Cirurg ia e Clínica Integrada, pela contribuição na fase experimental desse trabalho. Sempre pronto para ajudar com muitaalegria. Muito obrigada por sua eficiência, dedicação e preocupação com nossas tarefas.
A
rnaldo
, por ter cuidado com tanto carinho e eficiência dos animai s, sua colaboração foi muito importante para a realização desse trabalho.Da
S
eção de
P
ós-
G
raduação
da F aculdade de Odontologia de Araçatuba - UNESP, pelo e xcelente trabalho, atenção dispensada, grande disposição em atender eótimo relacionamento.
Da
B
iblioteca
da F aculdade de Odontolo gia d e Araçatuba – UNESP , minhasincera gratidão po r se mpre atend erem meus pedidos com carinho, paciên cia e
principalmente eficiência.
Do
B
iotério
da F aculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP. ObrigadaA
os Professores do
Programa de Pós-Graduação em Odontologia
Por dividirem seu conhecimento e sua experiência, contribuindo para minha
formação e de todos os colegas do Curso de Mestrado em Odontologia.
A
os
colegas de Pós-Graduação
,
Pela troca d e conhecimento e am izade dem onstrados ao lon go do C urso.
Obrigada a todos pela ajuda e companheirismo.
A
os
pacientes
Que nos depositando confiança, d eram-nos a oportunidade de ap render e a
satisfação de tratá-los no decorrer deste curso.
A
os
animais
Por servirem à humanidade com suas vidas.
À
queles que contribuíram direta ou indiretamente para realização desse trabalho...A
os amigos não tenham sido mencionados de maneira individual, mas que torcem por mim e que compartilham minhas vitórias...A
todos que, de alguma forma, tenham feito parte da minha vida, enriquecendo o caminho trilhado em minha jornada...Epígrafe
R
esumo
SANTINONI C S. Cicatrização óssea de def eitos de ta manho crítico tratados co m
aspirado de medula óssea, laser em baixa intensidade ou a associação de ambas as
terapias. Estudo histológico e histom étrico em calvárias de ratos. [Mestrado em
Periodontia]. Araçatuba: Faculdade de Odontologia da Universidade Estadual Paulista;
2012.
O propósito deste estudo foi avaliar, hist ologicamente e hist ometricamente, o processo
de cicatrização óssea em defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em
calvárias d e ra tos e trat ados com aspirado de medula óssea (AMO), laser em baix a
intensidade (LLLT) ou a associação de ambas as terapias. 40 ratos foram divididos em 4
grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi
criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o def eito foi pr eenchido com co águlo
sangüíneo somente. No Grupo AMO, o defe ito foi preenchido com AMO. Nos g rupos
LLLT e AMO/ LLLT, o defeito receb eu apli cação da LLLT ( InGaAlP laser), foi
preenchido com coágulo sanguíneo e AMO, respectivamente, e recebeu novamente a
aplicação da LLLT. Todos os animais foram submetidos à eutaná sia aos 30 dias pós
-operatórios. Aná lises hi stomorfométrica, usando software de análise de imag em, e histológica foram realizadas. A Área de Osso Neoformado (AON) foi cal culada como
uma porc entagem da áre a total do def eito orig inal. Os dados foram analisados
estatisticamente ( ANOVA, Tuke y, p<0,05). O Grupo AMO/ LLLT (38, 92 ± 7,12%) apresentou AON significativamente maior que os g rupos C (13,75 ± 4 ,32%), AMO
significativamente maior que o controle. Não foram observadas diferenças significativas
na AON dos grupos LLLT e C. Dentro dos limites desse estudo, pode-se concluir que a
associação AMO/ LLLT produziu for mação óssea sig nificativamente m aior em DTC
cirurgicamente criados em calvárias de r atos quando comparada ao contr ole ou a cada
tratamento isoladamente.
Palavras-chave: Células-tronco, medula óssea, lasers, terapia a l aser de baixa intensidade,
A
bstract
SANTINONI C S. Bone healing i n critical -size def ects tr eated w ith either bone marrow aspirate, low -level laser ther apy or a com bination of both ther apies: a histologic and h istometric study in rat calv aria [dissertation]. Araçatuba: Univ Estadual Paulista; 2012.
The purpose of this stud y w as to anal yze, hi stologically and histometrica lly, the
influence o f bone m arrow aspirate ( BMA), lo w-level las er the rapy (LLLT) or th eir
combination on bone h ealing in sur gically created critical -size de fects (CSD) in rat
calvaria. 40 rats were divided into 4 groups: C (control), BMA, LLLT and BMA/LLLT.
A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the
defect was filled b y blood clot onl y. In Group BMA, the defect wa s filled with bone
marrow aspirate. In groups LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation
(InGaAlP lase r), wa s fil led with blood clot or B MA re spectively, and th en irradiated
again. All animals were euthanized at 30 days postoperatively. Histometric, using image
analysis software , and h istologic an alyses w ere performed. Amount of n ewly formed
bone (NFB) was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Data
were statisticall y an alyzed (ANOVA, Tuke y p<0.05). Group B MA/LLLT (38.92 ± 7.12%) had si gnificantly greater NFB than groups C (13.75 ± 4.32%), BMA (28.71 ±
10.42%) and LLLT (18.40 ± 7.41%). Group BMA presented significantly greater NFB
than control, while group LLLT did not. Within the li mits of this stu dy, it can be
concluded that the co mbination of B MA/LLLT yielded si gnificantly greater bon e
formation in surgically created CSD in rat calvaria when compared to control, or either
treatment alone.
44
1. Introdução
A reg eneração de def eitos ósseos tem atraído o intere sse de pesquisado res de várias
áreas da saúde. Atualmente, a re construção óssea pode ser obtida , basicamente, com a
aplicação de estímulos químicos, biomateriais, proteínas ósseas morfogenéticas (BMPs)
ou físicos, tais como ultr assom, campos eletromagnéticos e, mais r ecentemente, o laser
em baixa intensidade [1].
Vários estudos têm dem onstrado que a te rapia com laser em baix a intensidade ( LLLT)
promove a regeneração óssea [2-7]. Estudos in vitro têm sugerido que a LLLT poderia promover a form ação d e novo osso por induz ir a p roliferação e dif erenciação de
osteoblastos [ 8-10]. Além disso, a LLLT, quan do aplicada dura nte a fase inicial do
processo de cica trização, pode interf erir positivamente na an giogênese, que é um
componente-chave da regeneração óssea [ 11,12]. Contudo, outros estudos não
confirmaram o efe ito positivo da LLL T na reg eneração óssea [ 13,14]. Tais
controvérsias podem se r atribuídas a v ariações nos protocolos de irradia ção e modelos
experimentais utilizados [9,15].
A en genharia d e tec idos, um dos principa is co mponentes da medicina reg enerativa,
segue os p rincípios do t ransplante d e células p ara o desenvolvimento d e substitutos
biológicos que possam restaurar e manter a função normal de tecidos [16]. Nos últimos
anos, tem-se obser vado um in teresse cre scente no potenc ial ter apêutico de células
derivadas da medul a ó ssea pa ra aplicações d a en genharia te cidual [ 17]. Estudos
recentes têm av aliado a terapia envolvendo cultivo de células -tronco mesenquimais
(CTMs) derivadas da medula óssea com objetivo de promover o reparo ósseo [18-23].
O cultivo das CTMs é u ma abordagem promissora, porém requer instalações especiais,
consome tempo e é oneroso, o que poderia torná-lo desvantajoso na prática clínica. Com
45
ser melhor explorado, o aspirado de medula óssea (AMO) tem sido proposto como uma
fonte viáve l d e CTMs [24-26]. O AMO contém uma porcenta gem de células
hematopoiéticas, endoteliais e CTMs significativamente maior que o sang ue periférico
[27]. O transplante de CTMs autógenas para o sítio da injúria tecidual é um instrumento
promissor para estr atégias base adas em c élulas necessárias p ara a regeneração ósse a,
reparo tecidual e cicatrização [27].Poucos estudos in vivo foram realizados para avaliar o uso isolado do AMO [25] ou sua associa ção a enx ertos ósseos ou bi omateriais no
reparo ósseo [24-30] e estes demonstra ram resultados promissores. Contudo, como os
enxertos ósseos e biomateriais são geralmente osteocondutor es, eles poderiam
potencialmente obscurecer o ef eito genuíno do A MO. Até a pr esente data, a influência
do uso isolado do AMO no reparo ósseo foi avaliada somente em um estudo [25].
Estudos in vitro que av aliaram a ação da LLLT sobr e as CTMs têm demonstrado resultados promissores. Tem sido demonstrado que a LLLT promoveu aumento da
proliferação de CTMs [31] e induziu sua diferenciação em osteoblastos [32].Contudo, é
importante ressaltar que, até a presente data, os efeitos desta associação ainda não foram
avaliados in vivo.
O propósito deste estudo foi avaliar, hist ologicamente e histometrica mente, o processo
de cicatriz ação ósse a e m de feitos de tamanho crí tico, criados cirur gicamente em
calvárias d e ra tos e trat ados com aspirado de medula óssea (AMO), laser em baixa
