A poliploidia artificial na obtenção de melancia sem sementes.

A POLIPLOIDIA ARTIFICIAL NA OBTENÇÃO DE

MELANCIA SEM SEMENTES (*)

D I X I E R M . MEDINA, engenheiro-agrônomo, Seção de Citologia, O L Í M P I O T . PRADO, engenheiro-agrônomo, Seção de Olericultura e Floricultura, A . J . T . M E N D E S , enge-nheiro-agrônomo, Seção de Citologia e CARLOS ROESSING, engenheiro-agrônomo,

Estação Experimental de Limeira, Instituto Agronômico

RESUMO

Frutos desprovidos de sementes apresentam não só o interesse de estudos cien-tíficos sôbre partenocarpia como t a m b é m constituem u m característico desejável para o consumidor.

Tendo-se planejado a obtenção de melancias ( C i t r u l l u s vulgaris Shrad.) sem se-mentes, da variedade Keckley Sweet, executaram-se os trabalhos de laboratório e de campo de acordo com o esquema seguinte:

a) obtenção de plantas tetraplóides;

b) cruzamentos entre tetraplóides e diplóides; c) plantio das sementes triplóides.

A primeira parte consistiu de tratamentos de sementes diplóides (2n = 2 2 ) recém-germinadas, por solução de colquicina ( 0 , 1 % durante 8 - 1 2 horas), tendo-se conseguido mais de duas dezenas de plantas duplicadas ( 2 n = 4 4 ) . Diferençam-se estas plantas das diplóides normais, pelo modo de ramificação bem menos intenso, e por apresentarem folhas maiores e menos recortadas e flores t a m b é m maiores. Os frutos produzidos pelas plantas tetraplóides são menores, arredondados, contendo poucas sementes.

N a segunda parte f o r a m efetuados cruzamentos entre tetraplóides e diplóides,

só se obtendo frutos no sentido @ 4 n x @ 2 n ; quando o cruzamento efetuado foi inverso, isto é, @ 2 n x @ 4 n não houve f e r t i l i z a ç ã o .

Na terceira e t a p a , semeadas as sementes triplóides, com algumas linhas de diplóides entremeadas, conseguiram-se os esperados frutos sem sementes. Êstes se most r a m , exmosternamenmoste, inmostermediários enmostre os diplóides, que são alongados, e os most e most r a -plóides, arredondados; internamente, os frutos triplóides contêm apenas sementes atrofiadas, flácidas e que podem ser comidas j u n t a m e n t e com a polpa, sem necessidade de separação.

No decorrer da investigação f o r a m realizados alguns estudos comparativos do pólen, dos estornas e das sementes, nos três tipos de plantas.

O t r a b a l h o c o n t i n u a no sentido de remover dificuldades encontradas t a n t o na multiplicação das sementes tetraplóides como na germinação das sementes triplóides e tetraplóides.

(*) Os autores agradecem ao E n g .0

1 _ I N T R O D U Ç Ã O

A c u l t u r a d a m e l a n c i a (Citrullus vulgaris, S h r a d . ) se e s t e n d e p o r

t o d o o B r a s i l , c a b e n d o as m a i o r e s c o l h e i t a s a o s Estados d a B a h i a , R i o

G r a n d e d o S u l , M i n a s G e r a i s e São P a u l o . C a l c u l a - s e q u e e m 1 9 5 6 a

á r e a c u l t i v a d a f o i de 8 1 m i l h e c t a r e s , c u j a p r o d u ç ã o se a v a l i a v a e m

2 5 2 m i l h õ e s de c r u z e i r o s .

N o E s t a d o d e São P a u l o a c u l t u r a se i n i c i o u d e m o d o e x t e n s i v o

n o m u n i c í p i o d e A m e r i c a n a , h á c e r c a d e u m s é c u l o . H o j e é p l a n

-t a d a e m d i f e r e n -t e s p o n -t o s d o E s -t a d o , c o m o São P e d r o , P i r a ç u n u n g a ,

B a u r u , T u p ã , M o j i M i r i m e t c .

H á q u i n z e a n o s os a g r i c u l t o r e s d o E s t a d o se r e s s e n t i r a m d a f a l t a

d e boas s e m e n t e s d e m e l a n c i a . Foi q u a n d o a Seção d e O l e r i c u l t u r a e

F l o r i c u l t u r a d o I n s t i t u t o A g r o n ô m i c o d e C a m p i n a s i n i c i o u e n s a i o s d e

c o m p e t i ç ã o d e v a r i e d a d e s , e s t u d a n d o a s q u a n t o a m o l é s t i a s e à c o n

-s e r v a ç ã o d u r a n t e o t r a n -s p o r t e , a o f o r m a t o , à p r o d u ç ã o , a o -s a b o r e,

p r i n c i p a l m e n t e , à a c e i t a ç ã o p e l o s m e r c a d o s c o n s u m i d o r e s . E s t u d a n d o 2 6 v a r i e d a d e s , c o n c l u i u - s e q u e t ã o s o m e n t e t r ê s d e l a s a p r e s e n t a v a m

u m c o n j u n t o d e q u a l i d a d e s q u e as r e c o m e n d a v a m : a F l o r i d a F a v o r i t e ,

a T o m W a t s o n e a K e c k l e y Sweet.

O n ú m e r o de s e m e n t e s nos f r u t o s n o r m a i s dessas v a r i e d a d e s o s c i l a

e n t r e 5 0 0 a 1 0 0 0 e é d e se c r e r q u e u m f r u t o s e m s e m e n t e s s e r á

a p r e c i a d o n o m e r c a d o c o n s u m i d o r e, p o r t a n t o , a l c a n ç a r á u m p r e ç o

m e l h o r . N o J a p ã o j á se c u l t i v a m v a r i e d a d e s h í b r i d a s , s e m s e m e n t e s .

Os Estados U n i d o s i m p o r t a m essas v a r i e d a d e s p a r a e s t a b e l e c e r suas

c u l t u r a s d e m e l a n c i a s e m s e m e n t e s ; nesse p a í s , e n t r e t a n t o , j á se i n i

c i a r a m e x p e r i ê n c i a s n o s e n t i d o d e o b t e r v a r i e d a d e s p r ó p r i a s , d e s p r o

-v i d a s d e s e m e n t e s .

J u l g o u - s e , p o r t a n t o , q u e s e r i a i n t e r e s s a n t e c o n s e g u i r f r u t o s s e m

s e m e n t e s de u m a d a s t r ê s v a r i e d a d e s m a i s c u l t i v a d a s e m S. P a u l o .

A s p r i m e i r a s e x p e r i ê n c i a s f o r a m f e i t a s p e l a s Seções d e O l e r i

c u l t u r a e F l o r i c u l t u r a e d e F i s i o l o g i a , d o I n s t i t u t o A g r o n ô m i c o , p u l v e -r i z a n d o - s e f l o -r e s -r e c é m - a b e -r t a s c o m os s e g u i n t e s h o -r m ô n i o s : á c i d o

b e t a - n a f t i l a c é t i c o I O- 3

; á c i d o b e t a - n a f t i l a c é t i c o I O-4

; h o r t o m o n e A

e S e r a d i x A , n ã o se t e n d o c o n s e g u i d o a f o r m a ç ã o d e u m f r u t o , s e q u e r . O m é t o d o , a l i á s , é d i s p e n d i o s o e d e r e s u l t a d o s i n s e g u r o s p a r a a p l i c a

-ç ã o e m c u l t u r a s d e g r a n d e e x t e n s ã o .

F l o r i c u l t u r a e a d e C i t o l o g i a , r e s o l v e n d o - s e e n c a m i n h a r a s o l u ç ã o d o

p r o b l e m a p e l a o b t e n ç ã o d e f r u t o s t r i p l ó i d e s , v a l e n d o s e d a s u a p r o

-v á -v e l e s t e r i l i d a d e . C o u b e a e x e c u ç ã o d o s t r a t a m e n t o s e o e s t u d o d o

m a t e r i a l a o p r i m e i r o d o s a u t o r e s , c o m a c o l a b o r a ç ã o d o s d e m a i s . Es-c o l h e u - s e a v a r i e d a d e K e Es-c k l e y Sweet p a r a i n í Es-c i o d o s t r a b a l h o s , q u e

c o n s i s t i r a m n o s e g u i n t e : a ) d u p l i c a ç ã o d o n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s , o b

-t e n d o - s e l i n h a g e n s -t e -t r a p l ó i d e s ; b ) c r u z a m e n -t o d e d i - e -t e -t r a p l ó i d e s ,

p a r a o b t e n ç ã o d e t r i p l ó i d e s ; c ) p o l i n i z a ç ã o a r t i f i c i a l d a s f l o r e s f e m i n i

-nas t r i p l ó i d e s c o m p ó l e n d e p l a n t a s d i - o u t e t r a p l ó i d e s , p r o c u r a n d o

e s t a b e l e c e r l i n h a g e n s c o m p a t í v e i s c u j o p ó l e n i n d u z a o d e s e n v o l v i m e n

-t o d o o v á r i o -t r i p l ó i d e s e m f e c u n d a ç ã o , d a í r e s u l -t a n d o os f r u -t o s s e m

s e m e n t e s . A p ó s essa sucessão d e e x p e r i m e n t o s , c a b e r i a a o I n s t i t u t o

A g r o n ô m i c o m a n t e r as l i n h a g e n s t e t r a p l ó i d e s e d i p l ó i d e s , p r o d u z i r as

s e m e n t e s h í b r i d a s e d i s t r i b u í - l a s a o s i n t e r e s s a d o s , a n u a l m e n t e .

A s e x p e r i ê n c i a s f o r a m i n i c i a d a s e m o u t u b r o d e 1 9 5 3 e, c o m o

v e r e m o s a d i a n t e , e n v o l v e r a m u m a s é r i e d e o b s t á c u l o s q u e a o s p o u c o s

f o r a m s e n d o r e m o v i d o s .

O b t i v e r a m - s e os d e s e j a d o s f r u t o s t r i p l ó i d e s s e m s e m e n t e s . N o

es-t á g i o a es-t u a l d o s es-t r a b a l h o s e s es-t u d a m - s e n o v a s c o m b i n a ç õ e s h í b r i d a s , p o i s

a i n d a h á f r u t o s t r i p l ó i d e s q u e a p r e s e n t a m a l g u m a s s e m e n t e s , se b e m

q u e c h ô c h a s , m a s d e t a m a n h o g r a n d e . Os p r ó p r i o s t e t r a p l ó i d e s p o d e m

v i r a d e s p e r t a r i n t e r e s s e c o m e r c i a l p o r a p r e s e n t a r e m j á u m r e d u z i d o

n ú m e r o d e s e m e n t e s .

C a b e r á a g o r a à Seção d e O l e r i c u l t u r a , m u l t i p l i c a r as s e m e n t e s

t e t r a p l ó i d e s , e s t a b e l e c e r os c a m p o s d e p r o d u ç ã o d e s e m e n t e s t r i p l ó i d e s e v e r i f i c a r a p o s s i b i l i d a d e desse m a t e r i a l se t o r n a r d e i n t e r e s s e c o

-m e r c i a l .

2 M A T E R I A L E M É T O D O

C o m o todas as v a r i e d a d e s , a K e c k l e y Sweet t e m 2 2 c r o m o s s o m o s

s o m á t i c o s ( f i g u r a 1 - A ) . A s o l u ç ã o p r o p o s t a p a r a o p r o b l e m a , c o m o d i s s e m o s a t r á s , e r a a d u p l i c a ç ã o d o n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s ; o b t i d a a

l i n h a g e m t e t r a p l ó i d e ( 2 n = 4 4 ) , t r a t a r - s e - i a , e m s e g u i d a , d e o b t e r

s e m e n t e s h í b r i d a s , t r i p l ó i d e s ( 2 n — 3 3 ) . Os f r u t o s p r o d u z i d o s p e l a s p l a n t a s t r i p l ó i d e s p r o v a v e l m e n t e s e r i a m d e s p r o v i d o s d e s e m e n t e s .

t r a t a m e n t o c o m c o l q u i c i n a ( 8 , 9 ) , r e s o l v e m o s t e n t a r a d u p l i c a ç ã o d o s

c r o m o s s o m o s d a m e l a n c i a p e l o t r a t a m e n t o d e s e m e n t e s e m i n í c i o d e

g e r m i n a ç ã o : as s e m e n t e s e r a m p o s t a s a g e r m i n a r e m a m b i e n t e s c o m

9 0 % d e u m i d a d e r e l a t i v a e à t e m p e r a t u r a d e 3 0 ° C ; q u a n d o g e r m i n a -v a m e a p r e s e n t a -v a m u m a r a i z d e 1 a 2 c m d e c o m p r i m e n t o (o q u e se

d a v a e m g e r a l 5 0 a 6 0 h o r a s d e p o i s d e s e m e a d a s ) e r a m s u b m e t i d a s a o

t r a t a m e n t o , f i c a n d o i m e r s a s n a s o l u ç ã o d o a l c a l ó i d e d u r a n t e o t e m p o

d e s e j a d o . A s o l u ç ã o d e c o l q u i c i n a , r e c é m - p r e p a r a d a , f o i u s a d a e m d u a s

c o n c e n t r a ç õ e s ( 0 , 0 5 % e 0 , 1 0 % ) . N o p r i m e i r o c a s o os t e m p o s d e t r a

-t a m e n -t o f o r a m 8 , 1 2 . 1 6 e 2 4 h o r a s ; p a r a a c o n c e n -t r a ç ã o m a i o r os

t e m p o s f o r a m 4 , 8 , 1 2 e 17 h o r a s ; c o m o c o n t r o l e , u m a p a r t e d a s

se-m e n t e s e r a c o l o c a d a e se-m v a s o c o n t e n d o s i se-m p l e s se-m e n t e á g u a , d u r a n t e o

m e s m o t e m p o . E m s e g u i d a , l a v a v a m - s e as s e m e n t e s e m á g u a c o r r e n t e

e p l a n t a v a m - s e e m v a s i n h o s d e p a p e l , c o m t e r r a . Estes v a s i n h o s s ã o f e i t o s d e p a p e l d e j o r n a l , d u p l o o u t r i p l o , n u m m o l d e d e m a d e i r a q u e

lhes i m p r i m e a f o r m a d e u m p a r a l e l e p í p e d o s e m f u n d o , d e 6 x 6 c m

de b a s e ; e r a m c o r t a d o s c o m 15 c m d e a l t u r a , a r r a n j a d o s u n s a o

l a d o d o s o u t r o s d e n t r o d e u m a c a i x a d e m a d e i r a d e m e s m a a l t u r a e

c h e i o s c o m t e r r a . Q u a n d o as p l a n t i n h a s e m d e s e n v o l v i m e n t o j á a p r e

-s e n t a v a m d o i -s p a r e -s d e folha-s d e f i n i t i v a -s , a-s c a i x a -s e r a m l e v a d a -s p a r a

o c a m p o , d e l a s se r e t i r a v a m os v a s i n h o s d e j o r n a l ( c a d a u m c o m

u m a p l a n t i n h a ) e p l a n t a v a - s e à d i s t â n c i a d e 3 x 3 m e t r o s . O p a p e l

e r a r e t i r a d o a p e n a s n a h o r a d e se c o l o c a r a p l a n t a n a c o v a e, p a r a

q u e a t e r r a n ã o se e s b o r o a s s e , m o l h a v a - s e l i g e i r a m e n t e u m p o u c o a n t e s d o t r a n s p l a n t e .

T a n t o e m s o l u ç ã o d e c o l q u i c i n a c o m o e m á g u a as s e m e n t e s e m

g e r m i n a ç ã o f e r m e n t a v a m e as r a í z e s se m a c e r a v a m q u a n d o a d u r a ç ã o d o t r a t a m e n t o e r a s u p e r i o r a 1 2 h o r a s ; u m b o m n ú m e r o d e p l a n

-t i n h a s n ã o se r e c u p e r o u , a o s e r e m l e v a d a s p a r a os v a s i n h o s c o m -t e r r a .

A s o b s e r v a ç õ e s i n i c i a i s n o c a m p o se r e l a c i o n a v a m c o m o m o d o

d e r a m i f i c a ç ã o d a s p l a n t a s , t a m a n h o e t e x t u r a d a s folhas, e t a m a n h o d a s f l o r e s . G r a n d e p a r t e d a s f l o r e s e r a a u t o - p o l i n i z a d a a r t i f i c i a l m e n t e .

C o l h i a m s e os f r u t o s d e flores a u t o p o l i n i z a d a s e l i v r e m e n t e p o l i z i n a -d a s , m e -d i a m - s e e c o m p r i m e n t o e a l a r g u r a e a n o t a v a - s e o peso. A s

s e m e n t e s e r a m c o n t a d a s , m e d i d a s e p e s a d a s .

O n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s e r a c o n t a d o e m p o n t a s d e r a í z e s , c o

processo c o m u m d e d e s i d r a t a ç ã o p e l o á l c o o l b u t í l i c o , c o r t a d a s a 8

m i c r o s e c o l o r i d a s p e l a h e m a t o x i l i n a f é r r i c a , f i z e r a m - s e c o n t a g e n s d e

c r o m o s s o m o s e m n u m e r o s a s p l a n t a s .

C o m o a u x í l i o à d e t e r m i n a ç ã o d i r e t a d o n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s p r o c u r o u - s e e s t a b e l e c e r u m a c o r r e l a ç ã o e n t r e esse n ú m e r o e o n ú m e r o

de estornas n a s folhas a d u l t a s ; os e s t o r n a s e r a m c o n t a d o s e m p e d a ç o s

de e p i d e r m e i n f e r i o r , m o n t a d o s e m l â m i n a s d e v i d r o e m a c e t a t o d e

c e l u l o s e d i s s o l v i d o e m á c i d o a c é t i c o e r e c o b e r t o s c o m u m a l a m í n u l a O ) .

O p ó l e n e r a c o l h i d o d e f l o r e s r e c é m - a b e r t a s , c o l o c a d o n u m a gota

d e c a r m i m a c é t i c o s o b r e u m a l â m i n a d e v i d r o , r e c o b e r t o c o m u m a l a

m í n u l a e m e d i d o a o m i c r o s c ó p i o , c o m o a u x í l i o d e u m a o c u l a r m i

-c r o m é t r i -c a .

A s i m p l e s d e t e r m i n a ç ã o d e 2 n = 4 4 c r o m o s s o m o s n a s r a í z e s

n e m s e m p r e e r a i n d i c a ç ã o d e q u e a p l a n t a toda e s t a v a " d u p l i c a d a " :

v á r i a s p l a n t a s t i n h a m a p e n a s u m a p a r t e d u p l i c a d a . Era d o c o n j u n t o

d e d a d o s r e l a t i v o s p r i n c i p a l m e n t e a n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s , t a

-m a n h o d e e s t o r n a s , t a -m a n h o d e g r ã o d e p ó l e n , f o r -m a t o d o s f r u t o s ,

n ú m e r o e t a m a n h o d a s s e m e n t e s , q u e se t i r a v a f i n a l m e n t e u m a c o n

-c l u s ã o sobre o e f e i t o p a r -c i a l o u t o t a l d o t r a t a m e n t o .

A s s e m e n t e s d a s p l a n t a s t i d a s c o m o t e t r a p ó l i d e s e r a m s e m e a d a s

e m c a i x a s d e P e t r i o u e m g e r m i n a d o r c o m t e m p e r a t u r a e u m i d a d e

c o n t r o l a d a s , o u d i r e t a m e n t e n a t e r r a . S o m e n t e a p ó s o s e g u n d o c i c l o d e e s t u d o s é q u e se e s t a b e l e c i a d e f i n i t i v a m e n t e q u a i s as p l a n t a s t e

-t r a p l ó i d e s .

Estas e r a m p o l i n i z a d a s c o m p ó l e n d e p l a n t a s d i p l ó i d e s d a m e s m a

v a r i e d a d e ; u m a p a r t e d a s flores e r a a u t o f e c u n d a d a , e a o m e s m o t e m p o

p o l i n i z a v a m - s e a s p l a n t a s d i p l ó i d e s c o m p ó l e n d a s t e t r a p l ó i d e s .

D e s t a f o r m a , a o m e s m o t e m p o q u e se m u l t i p l i c a v a m as s e m e n

-tes t e t r a p l ó i d e s , o b t i n h a m - s e f r u t o s c o m s e m e n t e s q u e d e v e r i a m ser h í b r i d a s , t r i p l ó i d e s ( 2 n = 3 3 ) .

A s s e m e n t e s t r i p l ó i d e s e r a m c o n t a d a s e m c a d a f r u t o , m e d i d a s e p e s a d a s . Postas a g e r m i n a r s e g u i a m s e os e s t u d o s r e l a t i v o s à p o r

-c e n t a g e m d e g e r m i n a ç ã o , d e s e n v o l v i m e n t o d a s p l a n t a s , -c o n t a g e n s d e c r o m o s s o m o s , c o n t a g e m d e e s t o r n a s , o b s e r v a ç ã o sobre o p ó l e n ,

po-l i n i z a ç ã o , f o r m a ç ã o d o s f r u t o s . Estes f i n a po-l m e n t e e r a m m e d i d o s ,

pe-(1

sados e a b e r t o s p a r a a c o n s t a t a ç ã o d a e x i s t ê n c i a o u n ã o d e s e m e n t e s .

C o m o v e r e m o s m a i s a d i a n t e , n e m s e m p r e o f r u t o t r i p l ó i d e se m o s

-t r o u d e s p r o v i d o d e s e m e n -t e s .

3 _ O B T E N Ç Ã O D E T E T R A P L Ó I D E S

Os p r i m e i r o s t r a t a m e n t o s d e s e m e n t e s f o r a m r e a l i z a d o s e m se-t e m b r o - o u se-t u b r o d e 1 9 5 3 .

A s p l a n t i n h a s a f e t a d a s p e l o t r a t a m e n t o a p r e s e n t a v a m d e s d e l o g o

u m a p a r a l i s a ç ã o n o c r e s c i m e n t o d a r a i z ; o h i p o c ó t i l o se e n g r o s s a v a

b a s t a n t e d u r a n t e a i g u n s d i a s , d e p o i s n o v a s r a í z e s e r a e m i t i d a s e os

c o t i l é d o n e s s u r g i a m espessos; as folhas d e f i n i t i v a s e r a m grossas e m e

-nos r e c o r t a d a s q u e as d a s p l a n t a s n o r m a i s .

P l a n t a s a s s i m a f e t a d a s r e s u l t a r a m d e t o d o s os t r a t a m e n t o s c o m

c o l q u i c i n a ( e s t a m p a s 1 e 2 ) ; a c o n c e n t r a ç ã o m e n o r e os t e m p o s m e n o s l o n g o s d e t e r m i n a r a m m a i o r n ú m e r o d e p l a n t a s r e s t a b e l e c i d a s , p o r é m

m e n o s a f e t a d a s . D o s t r a t a m e n t o s a m a i o r c o n c e n t r a ç ã o e m a i s d e m o

-r a d o s , e m m u i t o s i n d i v í d u o s o h i p o c ó t i l o se a p -r e s e n t a v a e n g -r o s s a d o

d e m a s i a d a m e n t e , n ã o h a v i a e m i s s ã o d e n o v a s r a í z e s n e m se f o r m a

-v a m as folhas d e f i n i t i -v a s ; a s s i m , d o t r a t a m e n t o 0 , 1 0 % — 1 7 h o r a s

n e n h u m a p l a n t a c h e g o u a o e s t a d o a d u l t o .

F o i , p o r t a n t o , d o s t r a t a m e n t o s i n t e r m e d i á r i o s ( 0 , 0 5 % e 0 , 1 0 % ) a 8 , 1 0 e 1 2 h o r a s q u e se c o n s e g u i u o m a i o r n ú m e r o d e p l a n t a s a f e

-t a d a s . Es-tas e r a m , a p r i n c í p i o , -t r a n s p l a n -t a d a s p a r a c a i x a s c o m -t e r r a ,

e d e p o i s d e a l g u n s d i a s l e v a d a s p a r a l o c a l d e f i n i t i v o . F r i s e m o s , n e s t e p o n t o , q u e h o u v e m u i t o insucesso n o t r a n s p l a n t e ; o sucesso f o i m a i o r ,

m a i s t a r d e , q u a n d o e m o u t r o s t r a t a m e n t o s a d o t a m o s o u s o d e v a s i -n h o s d e p a p e l d e j o r -n a l , c o m o j á d e s c r e v e m o s .

Dos t r a t a m e n t o s e f e t u a d o s e m 1 9 5 3 ( a o t o d o 3 0 6 s e m e n t e s t r a

-t a d a s , e x c l u i n d o - s e as -t e s -t e m u n h a s ) a p e n a s q u a -t r o p l a n -t a s c h e g a r a m a f l o r e s c e r e f r u t i f i c a r . Dessas p l a n t a s t i v e m o s f r u t o s d e p o l i n i z a ç ã o

c o n t r o l a d a c u j a s s e m e n t e s p u d e r a m s e r e s t u d a d a s ; u m a ú n i c a p l a n t a se s o b r e s s a i u e n t r e as d e m a i s p e l a s u a f o l h a g e m m a i s espessa.

D e 7 5 4 s e m e n t e s t r a t a d a s e m 1 9 5 4 , o n ú m e r o d e p l a n t a s a p a -r e n t e m e n t e " d u p l i c a d a s " f o i d e 2 6 , n u m c a m p o o n d e se a c h a v a m 1 7 0

p l a n t a s . Dessas p l a n t a s , p o s s i v e l m e n t e t e t r a p l ó i d e s , n e m todas f o r n e

4 — O B S E R V A Ç Õ E S SOBRE A S P L A N T A S T E T R A P L Ó I D E S

A s p l a n t a s t e t r a p l ó i d e s a p r e s e n t a m u m a s p e c t o c a r a c t e r i s t i c a

-m e n t e d i f e r e n t e das d i p l ó i d e s : n ã o se r a -m i f i c a -m t a n t o q u a n t o estas

( f i g u r a 2-A), as r a m a s s ã o m a i s g r o s s a s , as f o l h a s m a i o r e s , m a i s

es-pessas, m e n o s r e c o r t a d a s ; as f l o r e s são t a m b é m m a i o r e s ( e s t a m p a

3-A, a, b) e d e u m a m a r e l o m a i s i n t e n s o . A o m i c r o s c ó p i o , a l é m d o

dobro d o n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s ( 2 n = 4 4 , f i g u r a l - O a p r e s e n t a m

g r ã o s d e p ó l e n m a i o r e s ( q u a d r o 2 ) e m e n o r n ú m e r o d e estornas p o r

m i l í m e t r o q u a d r a d o .

SI

y

M>

tiS

FIGURA 1 — Melancia, variedade Keckley Sweet Leesburg. A a C — Metáfases somáticas de plantas diplóide ( 2 n = 2 2 ) , triplóide ( 2 n = 3 3 ) , e tetraplóide ( 2 n = 4 4 ) , respectivamente. ( X 2 8 0 0 ) .

F l o r e s c e m a b u n d a n t e m e n t e , são a u t o f é r t e i s e q u a n d o p o l i n i z a

-d a s p o r p l a n t a s -d i p l ó i -d e s f r u t i f i c a m b e m . N ã o t e m o s i n -d i c a ç ã o q u a n t o

à p o r c e n t a g e m d e f r u t i f i c a ç ã o e m r e l a ç ã o a o n ú m e r o de f l o r e s , p o r é m

é e v i d e n t e q u e p r o d u z e m m e n o r n ú m e r o d e f r u t o s p o r p l a n t a q u e as

d i p l ó i d e s ; isto d e v e ser l e v a d o à c o n t a d o t a m a n h o r e l a t i v o d a s p l a n t a s

p o i s , c o m o d i s s e m o s , as p l a n t a s d i p l ó i d e s r a m i f i c a m m u i t o m a i s . E'

possível q u e p l a n t a d a s a m e n o r d i s t â n c i a , a p r o d u ç ã o r i v a l i z e c o m as

d i p l ó i d e s , p o r u n i d a d e d e á r e a .

Em u m c a m p o e m q u e h a v i a 5 0 p l a n t a s t e t r a p l ó i d e s c u j a f i n a

l i d a d e e r a a o b t e n ç ã o d e s e m e n t e s t r i p l ó i d e s , f i z e m o s a l g u m a s o b s e r -v a ç õ e s s o b r e o n ú m e r o d e f r u t o s p o r p l a n t a e n ú m e r o d e s e m e n t e s p o r

Os d a d o s a t r á s se r e f e r e m a p e n a s a o s f r u t o s c u j o peso e r a s u p e

-r i o -r a 3 k g , p o -r o n d e se v ê q u e a l é m d o p e q u e n o n ú m e -r o d e f -r u t o s

p o r p l a n t a , é t a m b é m r e d u z i d o o n ú m e r o d e s e m e n t e s p o r f r u t o .

Os f r u t o s s ã o m a i s c u r t o s e m a i s l a r g o s ( e s t a m p a 3-A, c) q u e os

d a v a r i e d a d e o r i g i n a l ( e s t a m p a 3-C, c ) , às v e z e s q u a s e e s f é r i c o s , a

c a s c a é r e s i s t e n t e , o " b r a n c o " d e e s p e s s u r a r e d u z i d a , a p o l p a m u i t o

v e r m e l h a , m a i s d o c e e c o m m e n o r n ú m e r o d e s e m e n t e s q u e a v a r i e d a d e

d i p l ó i d e , a p r e s e n t a n d o a i n d a g r a n d e q u a n t i d a d e d e s e m e n t e s t a n t o

c h ô c h a s c o m o a t r o f i a d a s . O m a i o r n ú m e r o d e s e m e n t e s a t é a g o r a o b t i d o f o i 3 5 8 , e m u m f r u t o t e t r a p l ó i d e d e 9 6 0 0 g .

A s s e m e n t e s ( e s t a m p a 3-A, d) são m a i s l a r g a s , m a i s espessas e

m a i s p e s a d a s q u e as d a v a r i e d a d e d i p l ó i d e ( q u a d r o 1). G e r m i n a m c o m c e r t a d i f i c u l d a d e ( q u a d r o s 3 e 4 ) .

5 — O B T E N Ç Ã O D E S E M E N T E S T R I P L Ó I D E S

A p a r t i r d e 1 9 5 4 , a o m e s m o t e m p o q u e se f a z i a m o b s e r v a ç õ e s

s o b r e os t e t r a p l ó i d e s e se c u i d a v a d a s u a m u l t i p l i c a ç ã o , t e n t a v a s e t a m

-b é m a o -b t e n ç ã o d e t r i p l ó i d e s . A p r i n c í p i o , os c r u z a m e n t o s p a r a esse f i m

e r a m e f e t u a d a s nos d o i s s e n t i d o s : 2 n ( ç ) x 4 n e 4 n ( ? ) x 2 n ;

m a i s d e 1 7 0 flores p o l i n i z a d a s n o s e n t i d o 2 n x 4 n p r o d u z i r a m a p e n a s d o i s f r u t o s d e t a m a n h o n o r m a l , u m deles c o m 2 9 0 s e m e n t e s c h ô c h a s e

o u t r o c o m 8 4 2 s e m e n t e s d i p l ó i d e s ; d a d o esse i n s u c e s s o , os c r u z a m e n

-tos p a s s a r a m a ser f e i t o s e x c l u s i v a m e n t e n o o u t r o s e n t i d o , a l i á s c o m

b o m p e g a m e n t o .

A s s i m , e m 1 9 5 5 u m c a m p o f o i i n s t a l a d o e m L i m e i r a , c o m p l a n -t a s -t e -t r a p l ó i d e s -t e n d o d e p e r m e i o a l g u m a s l i n h a s d e p l a n -t a s d i p l ó i d e s

p a r a f o r n e c e r e m o p ó l e n p a r a os c r u z a m e n t o s . O s e r v i ç o se r e s u m i u

à c a s t r a ç ã o d a s f l o r e s m a s c u l i n a s d a s p l a n t a s t e t r a p l ó i d e s d e i x a n d o q u e as flores f e m i n i n a s f o s s e m n a t u r a l m e n t e p o l i n i z a d a s p e l o v e n t o

o u p o r i n s e t o s , c o m p ó l e n d a s p l a n t a s d i p l ó i d e s . O b t i v e r a m - s e , desse m o d o , 5 9 f r u t o s c o m u m t o t a l d e 1 5 8 0 s e m e n t e s t r i p l ó i d e s .

Os f r u t o s c o l h i d o s d a s p l a n t a s t e t r a p l ó i d e s p o l i n i z a d a s p o r d i

-p l ó i d e s n ã o d i f e r i a m e x t e r n a m e n t e d o s a u t o f e c u n d a d o s o u c r u z a d o s

c o m o u t r o t e t r a p l ó i d e . Suas s e m e n t e s , r e l a t i v a m e n t e n u m e r o s a s e m a l g u n s casos e escassas e m o u t r o s , a p a r e n t e m e n t e e r a m i d ê n t i c a s às

s e m e n t e s ( q u a d r o 1) a a n á l i s e e s t a t í s t i c a c o n f i r m o u essa o b s e r v a ç ã o :

as s e m e n t e s d i p l ó i d e s f o r m a m u m g r u p o e as t r i e t e t r a p l ó i d e s f o r

-m a -m o u t r o g r u p o e -m q u e elas se a p r e s e n t a -m -m a i s l a r g a s , -m a i s

es-pessas e m a i s p e s a d a s .

6 — O B S E R V A Ç Õ E S SOBRE A S P L A N T A S T R I P L Ó I D E S

E m 1 9 5 5 s e m e a r a m - s e as p r i m e i r a s s e m e n t e s h í b r i d a s , d e q u e

d e v e r i a m r e s u l t a r as p l a n t a s t r i p l ó i d e s . A o m e s m o t e m p o , s e m e a r a m

-se a l g u n s t r i p l ó i d e s d a v a r i e d a d e Y a m a t o , o r i g i n á r i o s d o J a p ã o .

Os t r i p l ó i d e s j a p o n e s e s a p r e s e n t a v a m - s e b a s t a n t e r e s i s t e n t e s à a n t r a c n o s e ; os f r u t o s e r a m q u a s e t o t a l m e n t e d e s p r o v i d o s de s e m e n

t e s , o u s e j a , estas e r a m n a m a i o r i a a b o r t a d a s m a s p e r f e i t a m e n t e c o

-m e s t í v e i s , c o -m -m u i t o r a r a s e x c e ç õ e s .

Os nossos p r i m e i r o s t r i p l ó i d e s , n o e n t a n t o , f o r a m r e a l m e n t e d e

-c e p -c i o n a n t e s q u a n t o a o r e s u l t a d o q u e se e s p e r a v a : seus f r u t o s , u n s

a l o n g a d o s c o m o os d i p l ó i d e s , o u t r o s a r r e d o n d a d o s c o m o os t e t r a p l ó i -des, n ã o e r a m d e s p r o v i d o s d e s e m e n t e s : estas e r a m a t r o f i a d a s , p o r é m

n ã o t a n t o q u e p u d e s s e m ser c o m e s t í v e i s ; a l é m disso e r a m n u m e r o s a s .

E m 1 9 5 6 n o v o s h í b r i d o s (dos t r a b a l h o s d e 1 9 5 5 e m L i m e i r a )

f o r a m s e m e a d o s , j u n t a m e n t e c o m d i p l ó i d e s e t e t r a p l ó i d e s .

V e r i f i c o u s e q u e e n t r e os n o v o s h í b r i d o s a l g u m a s p l a n t a s a p r e s e n t a v a m s e m u i t o m a i s a p r o x i m a d a s d a s d i p l ó i d e s d o q u e das t e

-t r a p l ó i d e s , q u a n -t o à r a m i f i c a ç ã o d a p l a n -t a e a o a s p e c -t o g e r a l d a

-p l ó i d e s f o r a m l i v r e m e n t e -p o l i n i z a d o s ; os t e t r a -p l ó i d e s f o r a m u t i l i z a d o s

p a r a a s i n t e t i z a ç ã o de n o v o s t r i p l ó i d e s .

C o l h e r a m - s e , e m j a n e i r o d e 1 9 5 7 , as m e l a n c i a s d e s t e c a m p o , s e n d o possível e n t ã o c o m p a r a r f r u t o s t r i p l ó i d e s c o m d i e t e t r a p l ó i

des. V e r i f i c o u s e q u e a l g u n s h í b r i d o s t r i p l ó i d e s p r o d u z i r a m os a l m e

-j a d o s f r u t o s s e m s e m e n t e s .

O f r u t o t r i p l ó i d e é d e f o r m a o b o v a l e, n a s d i m e n s õ e s , i n t e r m e d i á

-r i o e n t -r e d i - e t e t -r a p l ó i d e s ( e s t a m p a 3-B, c).

A a u s ê n c i a de s e m e n t e s n ã o é t o t a l : s u r g e m u m a , d u a s o u a l

-g u m a s a p a r e n t e m e n t e n o r m a i s e s e m e l h a n t e s às t e t r a p l ó i d e s ; a m a i o r p a r t e das s e m e n t e s é a t r o f i a d a , p e r f e i t a m e n t e c o m e s t í v e l , as q u a i s ,

r e t i r a d a s d o f r u t o e p o s t a s a s e c a r , se r e d u z e m a m i n ú s c u l o s f r a g m e n

-t o s , f i n o s c o m o p a p e l .

Em a l g u n s f r u t o s , p o r é m , e n c o n t r a m s e s e m e n t e s q u e se e n q u a

-d r a m m a i s n o t i p o " c h ô c h a s " q u e p r o p r i a m e n t e a t r o f i a -d a s , n ã o s e n -d o

p o r t a n t o c o m e s t í v e i s . N ã o se sabe a i n d a a c a u s a de se o b t e r o r a u m ,

o r a o u t r o t i p o de f r u t o t r i p l ó i d e .

A p o l p a é d o c e , s a n g ü í n e a ; o " b r a n c o " , de espessura r e d u z i d a

c o m o nos f r u t o s d i p l ó i d e s .

7 _ C I T O L O G I A

•7 . 1 — I D E N T I F I C A Ç Ã O DOS TETRAPLÓIDES E TRIPLÓIDES

À m e d i d a q u e i a m s e n d o f e i t o s os t r a t a m e n t o s p e l a c o l q u i c i n a , e r a d e interesse i m e d i a t o a i d e n t i f i c a ç ã o dos t e t r a p l ó i d e s o b t i d o s , p e l a

c o n t a g e m dos seus c r o m o s s o m o s . Em v i s t a , p o r é m , de o m a t e r i a l ser

escasso e m a i s a i n d a dos d a n o s c a u s a d o s à p l a n t a p a r a a c o l h e i t a t a n t o d e r a í z e s c o m o d e b o t õ e s p a r a m i c r o s p o r o g ê n e s e ( u m a v e z c o

l h i d a s as r a í z e s a p l a n t a n ã o m a i s resiste a o t r a n s p l a n t e , q u e n o r m a l

-m e n t e j á é d i f í c i l ) , a c o n t a g e -m dos c r o -m o s s o -m o s f o i f e i t a -m a i s t a r d e : p r i m e i r a m e n t e f o r a m m u l t i p l i c a d o s os s u p o s t o s t e t r a p l ó i d e s , p o r m e i o

d e a u t o f e c u n d a ç õ e s , e d e p o i s i d e n t i f i c a d o s a t r a v é s d e s u a p r o g ê n i e .

L o g o de i n í c i o e n c o n t r o u - s é a l g u m a d i f i c u l d a d e de o r d e m t é c n i c a

q u e r n a c o l h e i t a d a s r a í z e s q u e r n o processo de c o l o r a ç ã o das l â m i n a s :

q u a n d o as s e m e n t e s g e r m i n a m e m c a i x a d e P e t r i , s o b r e p a p e l c h u p ã o u m e d e c i d o , n ã o f o r n e c e m m a t e r i a l a p r o p r i a d o p a r a e x a m e a o m i c r o s

-t e r i a l d e p o i s de as p l a n -t a s e s -t a r e m s u f i c i e n -t e m e n -t e e n r a i z a d a s n a

t e r r a .

Q u a n t o à c o l o r a ç ã o p e l a h e m a t o x i l i n a f é r r i c a , s e g u i n d o a m e s m a t é c n i c a a d o t a d a p a r a c a f é e o u t r a s p l a n t a s e s t u d a d a s n a Seção de

C i t o l o g i a , n ã o t i v e m o s b o n s r e s u l t a d o s c o m a m e l a n c i a ; c o n s e g u i m o s

nossas c o n t a g e n s d e c r o m o s s o m o s i n t r o d u z i n d o l i g e i r a m o d i f i c a ç ã o n a c o n c e n t r a ç ã o d o m o r d e n t e : a l u m e n d e f e r r o a 1 % d u r a n t e 3 0 m i

-n u t o s , e m l u g a r d e a 2 % d u r a -n t e 2 h o r a s .

A n a t u r e z a t e t r a p l ó i d e d a s p l a n t a s o b t i d a s e r a v e r i f i c a d a m u i t a s

v e z e s e m suas p r o g e n i e s ; h o u v e u m c a s o e m q u e se d e t e r m i n o u 2 n = 4 4 e m sete p l a n t a s o b t i d a s p e l a a u t o f e c u n d a ç ã o d e u m m e s m o

t e t r a p l ó i d e ; nas p r o g e n i e s F2 a i n d a se c o n s t a t o u a t e t r a p l o i d i a ; n o e n

-t a n -t o , q u a n d o a p l a n -t a o r i g i n a l f o r a p o l i n i z a d a p o r d i p l ó i d e , as

se-m e n t e s o b t i d a s d e r a se-m p l a n t a s c o se-m 2 n = 2 2 e n ã o 2 n = 3 3 . I s t o

i n d i c a q u e a p l a n t a o r i g i n a l e r a p r o v a v e l m e n t e u m a q u i m e r a ; a p r o -g ê n i e t e t r a p l ó i d e f o r m o u - s e a p a r t i r d e u m a z o n a de t e c i d o c o m

2 n = 4 4 ; a f l o r p o l i n i z a d a p o r d i p l ó i d e f o r m o u - s e e m z o n a d e t e c i d o

c o m 2 n = 2 2 .

E m 1 9 5 4 f o r a m s e l e c i o n a d o s pelos c a r a c t e r í s t i c o s v e g e t a t i v o s d a s

p l a n t a s de q u e p r o v i e r a m , p e l a f o r m a d o f r u t o e p e l o t i p o d a s

sem e n t e s , 6 4 f r u t o s . C o n t a n d o os c r o sem o s s o sem o s e sem p l a n t a s q u e se o r i g i -n a r a m dessas s e m e -n t e s , p u d e m o s c o r r e l a c i o -n a r o t i p o d a s s e m e -n t e s

c o m o n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s : t e n d o v e r i f i c a d o q u e d e n t r o d e d e t e r

-m i n a d o s t i p o s d e s e -m e n t e os e -m b r i õ e s e r a -m d i p l ó i d e s , d e s c a r t a -m o s t o d o o m a t e r i a l desse t i p o , s e m e x a m e c i t o l ó g i c o ; p a s s a n d o a e x a m i n a r

som e n t e as p l a n t a s o r i g i n á r i a s d e s e som e n t e s l a r g a s e g r o s s a s , e n c o n -t r a m o s c i n c o -t e -t r a p l ó i d e s ; p o r a n a l o g i a e -t a m b é m p o r c o m p a r a ç õ e s d e

n ú m e r o d e e s t o r n a s , s e l e c i o n a m o s m a i s 19 t e t r a p l ó i d e s .

Em 1 9 5 6 f o r a m f e i t a s as p r i m e i r a s c o n t a g e n s d e c r o m o s s o m o s e m

p l a n t a s t r i p l ó i d e s ( 2 n = 3 3 , f i g u r a 1-B).

Q u a n t o à m i c r o s p o r o g ê n e s e , n ã o f o i e s t u d a d a a i n d a e m p l a n t a s

t r i p l ó i d e s ; f i z e m o s , a p e n a s nos t e t r a p l ó i d e s , a l g u m a s o b s e r v a ç õ e s , c o n s -t a -t a n d o a f o r m a ç ã o desde m o n o - a -t é -t e -t r a v a l e n -t e s e m M e -t á f a s e I; a o

l a d o d e s e p a r a ç õ e s a n a f á s i c a s r e g u l a r e s , v e r i f i c a m o s m u i t a s i r r e g u l a

-res; m i c r o s p o r ó c i t o s c o m " t e t r a d e s " a n o r m a i s , d i v i d i n d o - s e e m 5 o u 6 " m i c r o s p ó r i o s " d e t a m a n h o s d i f e r e n t e s , t a m b é m são e n c o n t r a d o s .

N ã o t e m o s o b s e r v a ç õ e s s u f i c i e n t e s p a r a a v a l i a r a p r o p o r ç ã o e m

-d i c a r a s u a f e r t i l i -d a -d e e t a l v e z s e j a m a c a u s a -d a -d i m i n u i ç ã o -d o n ú m e r o

d e s e m e n t e s e d a f o r m a ç ã o d e s e m e n t e s " c h ô c h a s " .

A s n u m e r o s a s c o n t a g e n s d e c r o m o s s o m o s r e a l i z a d a s e m p l a n t a s

c o m 2 n = 2 2 , 3 3 e 4 4 , s e m se d e p a r a r c o m m o n o - o u t r i s s ô m i c a s ,

i n d i c a m q u e n ã o h á , p r o v a v e l m e n t e , f o r m a ç ã o de g â m e t a s f é r t e i s a n ã o ser c o m n = 11 e n = 2 2 .

7 . 2 — GRÃOS DE PÓLEN

O b s e r v a ç õ e s e s p e c i a i s f o r a m f e i t a s sobre os g r ã o s d e p ó l e n : d e

c i n c o p l a n t a s d i p l ó i d e s , c i n c o t r i p l ó i d e s e c i n c o t e t r a p l ó i d e s c o l h e r a m

-se c i n c o flores d e c a d a u m a , d e v i d a m e n t e p r o t e g i d a s n a v é s p e r a d a

a b e r t u r a . C o m o p ó l e n d e u m a f l o r se p r e p a r a v a u m a l â m i n a c o m

c a r m i n a c é t i c o , f a z e n d o - s e o b s e r v a ç õ e s i n d i v i d u a i s d e 1 0 0 g r ã o s e m

c a d a l â m i n a .

Os g r ã o s d e p ó l e n d a s p l a n t a s t r i p l ó i d e s se a p r e s e n t a v a m s e m p r e

e n r u g a d o s , i r r e g u l a r e s e v a z i o s d e c i t o p l a s m a , o q u e c o n f e r e a essas

p l a n t a s c o m p l e t a e s t e r i l i d a d e m a s c u l i n a . N a s p l a n t a s d i p l ó i d e s e t e t r a

p l ó i d e s o c o r r e m d e 2 a 3 0 % d e p ó l e n v a z i o d e c i t o p l a s m a ; n a s p r i m e i

-ras essa p o r c e n t a g e m se a v i z i n h a d o l i m i t e i n f e r i o r ; n a s t e t r a p l ó i d e s

a v i z i n h a - s e d e 3 0 % e c h e g a , às v e z e s , a 4 0 o u 5 0 % .

A s m e d i ç õ e s f o r a m f e i t a s c o m o a u x í l i o d e u m a o c u l a r m i c r o m é

t r i c a e r e f e r e m s e s o m e n t e aos g r ã o s d e p ó l e n a r r e d o n d a d o s , a p a r e n t e

-m e n t e n o r -m a i s e q u e se c o l o r e -m p e l o c a r -m i -m a c é t i c o ; c o -m o este t i p o

d e g r ã o s n ã o o c o r r e n o s t r i p l ó i d e s , as m e d i ç õ e s só f o r a m f e i t a s n o s

d i p l ó i d e s e t e t r a p l ó i d e s .

Os r e s u l t a d o s e n c o n t r a m - s e n o q u a d r o 2 , o n d e se p o d e v e r i f i c a r

a m é d i a g e r a l d e 6 4 , 1 8 m i c r o s p a r a as d i p l ó i d e s e 7 8 , 5 3 m i c r o s p a r a

as t e t r a p l ó i d e s . A d i f e r e n ç a e s t a t í s t i c a e n t r e essas m é d i a s é a l t a m e n t e

s i g n i f i c a t i v a .

P e l a a n á l i s e e s t a t í s t i c a v e r i f i c o u - s e q u e h á m a i o r v a r i a b i l i d a d e e n t r e f l o r e s d a m e s m a p l a n t a , q u e e n t r e p l a n t a s p e r t e n c e n t e s a o m e s

-m o t i p o ( d i p l ó i d e o u t e t r a p l ó i d e ) . Essa v a r i a b i l i d a d e p o d e ser a t r i b u í d a

à o c o r r ê n c i a d e u m a s p o u c a s flores q u e a p r e s e n t a r a m u m a v a r i a ç ã o e x t r a o r d i n á r i a n o t a m a n h o d o s g r ã o s d e p ó l e n ; esse f a t o f o i n o t a d o

t a n t o d e n t r o d o g r u p o d a s d i p l ó i d e s c o m o d e n t r o d o g r u p o d a s p l a n t a s

7 . 3 — N Ú M E R O E T A M A N H O DOS ESTOMAS

Seções da e p i d e r m e i n f e r i o r d a s folhas d e m e l a n c i a p o d e m ser

f a c i l m e n t e d e s t a c a d a s d e s d e q u e estas e s t e j a m c o m e ç a n d o a m u r c h a r .

A s seções m o n t a d a s sobre u m a gota d e a c e t a t o d e c e l u l o s e e m

l â m i n a d e v i d r o e r o c o b e r t a s c o m u m a l a m í n u l a p o d e m s e r c o n s e r v a d a s

i n d e f i n i d a m e n t e p a r a e x a m e a o m i c r o s c ó p i o .

C o m o i n t u i t o d e o b s e r v a r a c o r r e l a ç ã o e n t r e o n ú m e r o d e c r o

-m o s s o -m o s e o n ú -m e r o d e e s t o r n a s , c o l h e -m o s , e -m d u a s é p o c a s , -m a t e r i a l

d e c i n c o p l a n t a s d e c a d a n í v e l d e p l o i d i a .

N a p r i m e i r a é p o c a , t o m a m o s u m a f o l h a a d u l t a d e c a d a p l a n t a , r e a l i z a n d o c o n t a g e n s e m 5 0 c a m p o s d e c a d a f o l h a . N a s e g u n d a é p o

c a f o r a m c o l h i d a s c i n c o folhas a d u l t a s d e c a d a p l a n t a e f e t u a n d o c o n

-t a g e n s e m 2 0 c a m p o s d e c a d a f o l h a . S e m p r e q u e possível as folhas d a s e g u n d a é p o c a e r a m c o l h i d a s n a s m e s m a s p l a n t a s u s a d a s n a

p r i m e i r a .

T a n t o n u m a c o m o n o u t r a é p o c a h o u v e d i f e r e n ç a s i g n i f i c a t i v a e n t r e as m é d i a s e n c o n t r a d a s p a r a os t r ê s t i p o s d e p l a n t a ; n ã o h o u v e d i f e r e n ç a e n t r e os n ú m e r o s e n c o n t r a d o s n a s d u a s é p o c a s p a r a o m e s m o

n í v e l d e p l o i d i a .

o n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s e o n ú m e r o de estornas f o i c o n f i r m a d a ,

t e n d o - s e a c h a d o e m m é d i a 4 3 9 , 315 e 245 e s t o r n a s p o r m m2

respec-t i v a m e n respec-t e p a r a as p l a n respec-t a s d i p l ó i d e s , respec-t r i p l ó i d e s e respec-t e respec-t r a p l ó i d e s .

Q u a n t o a o t a m a n h o , se b e m q u e n ã o t e n h a m s i d o r e a l i z a d a s

m e d i ç õ e s c o m o i n t u i t o d e se p r o c e d e r a u m a a n á l i s e e s t a t í s t i c a , o b s e r

v a m o s q u e os estornas são m a i o r e s nos t e t r a p l ó i d e s , m é d i o s nos t r i p l ó i

-des e m e n o r e s nos d i p l ó i d e s .

8 — G E R M I N A Ç Ã O DE S E M E N T E S

U m a e x p e r i ê n c i a s o b r e o p o d e r g e r m i n a t i v o d a s s e m e n t e s t r i - e

t e t r a p l ó i d e s f o i r e a l i z a d a e m s e t e m b r o de 1956, c o m p a r a t i v a m e n t e

E n t r a r a m n e s t a e x p e r i ê n c i a a p e n a s as p l a n t a s d a s q u a i s se d i s

-p u n h a de m a i o r q u a n t i d a d e de s e m e n t e s . A s s i m , 1 1 t e t r a -p l ó i d e s e

d u a s t r i p l ó i d e s f o r a m c o m p a r a d a s c o m a d i p l ó i d e : a e x p e r i ê n c i a f o i

r e a l i z a d a e m g e r m i n a d o r , à t e m p e r a t u r a de 3 0 ° C e u m i d a d e r e l a t i

-v a de 9 0 % , c o m 1 0 0 s e m e n t e s de c a d a p l a n t a , d i s t r i b u í d a s e m p a r c e l a s de 2 0 , a o a c a s o , p e l o g e r m i n a d o r .

C o m o se p o d e v e r i f i c a r p e l o q u a d r o 3 , as t r i p l ó i d e s e t e t r a p l ó i d e s

l e v a r a m m a i s t e m p o p a r a g e r m i n a r q u e as d i p l ó i d e s ; q u a n t o à p o r c e n -t a g e m de g e r m i n a ç ã o , s o m e n -t e u m a das -t e -t r a p l ó i d e s a p r e s e n -t o u - a

t ã o a l t a q u a n t o a d i p l ó i d e ( 9 3 % e 9 4 % r e s p e c t i v a m e n t e ) , t o d a s as d e

-m a i s t r i - e t e t r a p l ó i d e s a p r e s e n t a r a -m u -m a g e r -m i n a ç ã o q u e v a r i o u de

5 2 a 7 8 % .

T e n d o - s e d e c i d i d o p l a n t a r u m c a m p o c o m t r i p l ó i d e s e t e t r a p l ó i d e s a o l a d o de u m o u t r o o n d e se c o m p a r a v a m d i v e r s a s v a r i e d a d e s d i p l ó i

-d e s , a s e m e a -d u r a f o i f e i t a -d i r e t a m e n t e n a s covas. N o t a m o s e n t ã o q u e as s e m e n t e s d i p l ó i d e s d o c a m p o de v a r i e d a d e s g e r m i n a r a m q u a n d o

c a m p o só g e r m i n a r a m a p ó s c h u v a s m a i s d e m o r a d a s . A l é m disso, a

p o r c e n t a g e m d e g e r m i n a ç ã o d e s t a s ú l t i m a s f o i m u i t o b a i x a ( q u a d r o 4 ) .

T u d o i n d i c a , p o r t a n t o , q u e as s e m e n t e s t r i e t e t r a p l ó i d e s n e -c e s s i t a m de -c u i d a d o s e s p e -c i a i s p a r a q u e r e p r o d u z a m , n o -c a m p o , o

p o d e r g e r m i n a t i v o d e m o n s t r a d o e m e x p e r i ê n c i a s d e l a b o r a t ó r i o .

9 — D I S C U S S Ã O E C O N C L U S Õ E S

F r u t o s p a r t e n o c á r p i c o s o c o r r e m n a t u r a l m e n t e e m c i t r o s , b a n a n a , a b a c a x i , p e p i n o e m u i t a s o u t r a s espécies v e g e t a i s . A r t i f i c i a l m e n t e , a

p a r t e n o c a r p i a t e m s i d o i n d u z i d a e m n u m e r o s a s p l a n t a s (3) p e l a a p l i

c a ç ã o d e h o r m ô n i o s às f l o r e s , s u p r i m i n d o s e a p o l i n i z a ç ã o : n ã o h a

v e n d o f e r t i l i z a ç ã o , os f r u t o s se d e s e n v o l v e m s e m s e m e n t e s . O p r o

-cesso e n v o l v e t r a b a l h o m a n u a l c o n s t a n t e e a p l i c a ç ã o d e d r o g a s c a r a s

q u a i s s e j a m os á c i d o s i n d o l a c é t i c o , i n d o l b u t í r i c o , n a f t a l e n o a c é t i c o e

m u i t a s o u t r a s . M e l a n c i a s s e m s e m e n t e s f o r a m p r i m e i r a m e n t e o b t i d a s

p o r W o n g ( 1 1 ) e m 1 9 3 8 , u s a n d o os t r a t a m e n t o s q u í m i c o s a q u e nos

r e f e r i m o s .

Por o u t r o l a d o , a p o l i n i z a ç ã o d e u m a p l a n t a p o r p ó l e n d e o u t r a p l a n t a , o q u a l n ã o é c a p a z d e f e r t i l i z á - l a , p o d e i n d u z i r à f o r m a ç ã o d e

f r u t o s s e m s e m e n t e s q u e se d e s e n v o l v e m c o m o e s t í m u l o c a u s a d o p e l a

p o l i n i z a ç ã o . A p e n a s p a r a e x e m p l i f i c a r v e j a - s e a o c o r r ê n c i a d e f r u t o s

p a r t e n o c á r p i c o s e m Coffea canephora d i p l ó i d e q u a n d o p o l i n i z a d a p o r

C. canephora t e t r a p l ó i d e ( 1 0 ) . O m e s m o a c o n t e c e u e m Citrullus vulgaris

p o l i n i z a d a p o r C. colocynthis (1) d e i g u a l n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s .

Q u a n d o a h i b r i d a ç ã o i n t e r o u i n t r a e s p e c í f i c a o c o r r e d a n d o f o r m a

-ç ã o a p l a n t a s t r i p l ó i d e s , estas são e s t é r e i s d e v i d o à m e i o s e i r r e g u l a r ;

e n t r e t a n t o , se f o r e m d e v i d a m e n t e p o l i n i z a d a s , os f r u t o s se d e s e n v o l

-v e m e são p a r t e n o c á r p i c o s p e l a f a l t a d a f e r t i l i z a ç ã o . A e s t e r i l i d a d e dos a u t o t r i p l ó i d e s o b t i d o s n a m e l a n c i a f o i a p r o v e i t a d a n a p r á t i c a e

c o m sucesso p e l o s j a p o n e s e s ( 5 ) . H o j e a q u a n t i d a d e d e s e m e n t e s t r i

-p l ó i d e s e x -p o r t a d a s -p a r a os E E . U U . d a A m é r i c a d o N o r t e é u m a f o n t e

d e d ó l a r e s p a r a o J a p ã o ( 4 ) .

T e n d o p l a n e j a d o a o b t e n ç ã o d e t r i p l ó i d e s d e m e l a n c i a , o nosso t r a b a l h o c o n s i s t i u n a d u p l i c a ç ã o d o n ú m e r o d e c r o m o s s o m o s d e u m a v a r i e

d a d e d i p l ó i d e e e m s e g u i d a n a h i b r i d a ç ã o d a t e t r a p l ó i d e c o m a d i p l ó i

d e . V e n c i d a s as d i f i c u l d a d e s ; t a n t o m a t e r i a i s c o m o t é c n i c a s , o b t i v e

N e m t o d o s os f r u t o s t r i p l ó i d e s , n o e n t a n t o , e r a m c o m p l e t a m e n t e

d e s p r o v i d o s d e s e m e n t e s , s e n d o q u e u m a m e s m a p l a n t a p r o d u z i u f r u

-tos s e m s e m e n t e s , f r u t o s c o m s e m e n t e s a t r o f i a d a s e c o m e s t í v e i s e

f r u t o s c o m s e m e n t e s a t r o f i a d a s m a s n ã o c o m e s t í v e i s .

Os a u t o r e s j a p o n e s e s ( 5 , 6 ) t a m b é m u s a r a m i d ê n t i c o processo p a r a o b t e n ç ã o d a m e l a n c i a s e m s e m e n t e s . E n c o n t r a r a m a m e s m a d i

f i c u l d a d e c o m r e l a ç ã o a u m c e r t o n ú m e r o d e s e m e n t e s " c h ô c h a s " f o r

-m a d a s n o s f r u t o s e -m v e z d e s e -m e n t e s c o -m p l e t a -m e n t e a b o r t a d a s e

c o m e s t í v e i s ( 2 , 7 ) .

N ã o t e m o s c o n h e c i m e n t o , p o r m e i o d a l i t e r a t u r a , d e c o m o t e r i a m

os j a p o n e s e s v e n c i d o essa d i f i c u l d a d e . C o n h e c e m o s t r ê s d o s seus t r i

-p l ó i d e s : 1) F u m i n x M i a k o N o . 3 ; 2 ) Y a m a t o x M i a k o N o . 3 ; 3 )

Y a m a t o x A s a h i Y a m a t o c u j a s s e m e n t e s n o s f o r a m c e d i d a s g e n t i l m e n

-t e p e l o D r . N o r i o K o n d o , e m 1 9 5 5 . T i v e m o s o p o r -t u n i d a d e d e s e m e a r

a l g u m a s e d e v e r i f i c a r o p e q u e n o n ú m e r o d e s e m e n t e s c h ô c h a s n o s

f r u t o s t r i p l ó i d e s . A l é m disso, p u d e m o s n o t a r q u e se t r a t a d e p l a n t a s

b e m r e s i s t e n t e s à a n t r a c n o s e .

Se a q u a l i d a d e d o p ó l e n u s a d o p a r a p o l i n i z a r a s flores t r i p l ó i d e s

t e m a l g u m a i n f l u ê n c i a sobre o a p a r e c i m e n t o e m m a i o r o u m e n o r

n ú m e r o d e s e m e n t e s c h ô c h a s , n ã o se s a b e ; m e s m o as e x p e r i ê n c i a s

f e i t a s p o r F u r u s a t o e M i y a s a w a ( 2 ) n ã o p e r m i t i r a m u m a c o n c l u s ã o

a r e s p e i t o .

Ensaios a s e r e m r e a l i z a d o s , p o s s i v e l m e n t e e s c l a r e c e r ã o este p r o

-b l e m a ; d a m e s m a f o r m a , h á n e c e s s i d a d e d e e x p e r i m e n t o s p a r a a sol u ç ã o d o p r o b sol e m a r e f e r e n t e a o a p r o v e i t a m e n t o t o t a sol d a p o t ê n c i a g e r

-m i n a t i v a d a s s e -m e n t e s t r i - e t e t r a p l ó i d e s .

A s o b s e r v a ç õ e s r e a l i z a d a s q u a n t o a o n ú m e r o d e f r u t o s p o r p l a n t a

e n ú m e r o d e s e m e n t e s p o r f r u t o , c o n d u z e m à c o n c l u s ã o d e q u e n o

p r o s s e g u i m e n t o desses e s t u d o s d e v e m se e n c o n t r a r t e t r a p l ó i d e s q u e

a p r e s e n t e m c a p a c i d a d e d e c o m b i n a ç ã o s u p e r i o r p a r a a p r o d u ç ã o d e

se-m e n t e s h í b r i d a s .

V e n c i d a s m a i s essas e t a p a s d e t r a b a l h o , e s t a r e m o s e m c o n d i ç õ e s

d e o f e r e c e r a o s s e r v i ç o s t é c n i c o s o f i c i a i s s e m e n t e s d e l i n h a g e n s q u e d e v e r ã o s e r m u l t i p l i c a d a s ; a p r o d u ç ã o d a s s e m e n t e s h í b r i d a s se f a r á

e m c a m p o s d e t e t r a p l ó i d e s c o m l i n h a s d i p l ó i d e s e n t r e m e a d a s ; as f l o r e s

A R T I F I C I A L POLYPLOIDY I N T H E PRODUCTION OF SEEDLESS W A T E R M E L O N S

(CITRULLUS VULGARIS S C H R A D . )

SUMMARY

Watermelons (Citrullus vulgaris Schrad.) are in general provided w i t h numerous seeds: large in the " A m e r i c a n " varieties and small in t h e "Japanese" varieties.

Triploids ( 2 n = 3 3 ) o f t h e "Japanese" varieties are already under c u l t i v a t i o n by A m e r i c a n farmers who import t h e hybrid seeds f r o m Japan and seedless f r u i t s are being produced in ever increasing amounts.

In Brazil the Japanese diploid ( 2 n = 2 2 ) varieties are only of recent i n t r o d u c t i o n ; among the A m e r i c a n varieties ( 2 n = 2 2 ) , " K e c k l e y Sweet" is one o f t h e best known and preferred f o r its good taste. For the obtention o f seedless watermelons i t seemed advisable to start t h e w o r k w i t h such a variety because of its commercial significance. T h e first step was t h e obtention o f tetraploids ( 2 n = 4 4 ) ; t h e adopted method consisted in the t r e a t m e n t o f g e r m i n a t i n g seeds in a n aqueous colchicine solution; best results were achieved using a n 0 . 1 % solution f o r 8 t o 12 hours.

T h e tetraploids are o f more stunted g r o w t h , w i t h larger leaves and flowers; t h e fruits are smaller, round a n d few-seeded.

In a t t e m p t i n g t o cross tetraploids w i t h diploids, successfull results were obtained when @ 4 n flowers were pollinated w i t h pollen f r o m 2 n plants. T r i p l o i d ( 2 n = 3 3 ) plants, obtained f r o m hybrid seeds, were completely male sterile b u t set f r u i t s when pollinated w i t h pollen f r o m 2 n plants.

T h e t r i p l o i d plants are somewhat intermediate between d i — a n d tetraploids as t o the size o f leaves a n d g r o w t h h a b i t ; the f r u i t s are less elongated t h a n in the diploids and not round as in t h e tetraploids. Some f r u i t s are seedless, i.e. w i t h aborted seeds t h a t can be eaten together w i t h the p u l p ; others show f r o m few t o many empty seeds which are f l a c i d , b u t not quite f i t t o be eaten.

Comparative studies have been made of pollen, stomata a n d seeds o f 2 n , 3 n and 4 n plants.

Studies are in progress to solve some problems encountered in t h e mass pro-duction a n d g e r m i n a t i o n of tetraploid a n d t r i p l o i d seed; up to now they are handicaps to t h e commercial u t i l i z a t i o n o f these "seedless watermelons".

L I T E R A T U R A C I T A D A

1 . FURUSATO, K A Z U O & M I Y A S A W A , A K I R A . Hybridization experiments w i t h

Citrullus vulgaris and C. colocynthis. N a t i o n a l Institute o f Genetics (Japan),

2.--- --- Report on pollination of t r i p l o i d watermelons w i t h pollen of various diploid varieties. Seiken Z i h ô 5 : 1 2 8 - 1 3 0 . 1 9 5 2 .

3 . GUSTAFSON, FELIX G. Parthenocarpy: natural and a r t i f i c i a l . Bot. Rev. 8: 5 9 9 - 6 5 4 . 1 9 4 6 .

4 . J O H N S T O N E , FRANCIS E. (júnior). The customers came back for more. Sth. Seedsman 1 6 ( 1 2 ) : 3 7 , 8 7 . 1 9 5 3 .

5 . K I H A R A , H. & N I S H I Y A M A , I. A n application of sterility of autotriploids to the breeding of seedless water-melons. Seiken Z i h ô 3 : [ 9 3 ] - 1 0 3 . 1 9 4 7 .

6 . & Y A M A S H I T A , Y. A p r e l i m i n a r y investigation for the f o r m a t i o n of tetraploid water-melons. Seiken Z i h ô 3 : [ 8 9 ] - 9 2 . 1 9 4 7 .

7 . K O Y A M A , M . Studies on empty seeds (shiina) in t r i p l o i d watermelon I. Seiken Z i h ô 5:[1 051-1 0 9 . 1 9 5 2 .

8 . MENDES, A . J. T . Duplicação do número de cromossômios em café, algodão e f u m o , pela ação da colchicina. Campinas, Instituto agronômico, 1 9 3 8 . 21 p. (Bol. Tecn. n.° 5 7 )

9 . Observações citológicas em Coffea. X I — Métodos de t r a t a m e n t o pela colchicina. Bragantia 7 : [ 2 2 1 ] - 2 3 0 . 1 9 4 7 .

1 0 . — Partenogênese, partenocarpia e casos anormciis de fertilização em Coffea. Bragantia 6 : [ 2 6 5 ] - 2 7 4 . 1 9 4 6 .