Associação entre glioxalase I e paracoccidioidomicose-infecção.

R e v is ta d a S o c ie d a d e B r a s ile ir a d e M e d ic in a T r o p ic a l 2 6 (3 ):1 4 1 -1 4 3 , ju l - s e t , 1 9 9 3

A R T IG O S

A S S O C I A Ç Ã O E N T R E G L I O X A L A S E I

E

P A R A C O C C ID IO ID O M IC O S E -IN F E C Ç Ã O

M a r l y A . S . B a l a r i n e D é r í i a V i l l a l b a F r e i r e - M a i a

C om o o b je tiv o d e s e es tu d a r a su s c e p tib ilid a d e g e n é tic a à p a r a c o c c id io id o m ic o s e -in fe c ç â o , p r o c u r o u -s e d e te r m -in a r um a p o s s ív e l a s s o c ia ç ã o e n tre a g lio x a la s e 1 e a re a ç ã o in tr a d é rm ic a à p a r a c o c c id io id in a . O fe n ó tip o G L O 1 o c o rr e u e m fr e q ü ê n c ia sig n ifica tiva m en te m a is a lia e n tre o s in d iv íd u o s co m rea çã o p o sitiva .

P a la v r a s -c h a v e s : G lio xa la se I. P a ra co c c id io id o m ic o se . P a ra co c cid io id in a . G enética. M ic o se s .

A g l i o x a l a s e I ( G L O I) é u m m a r c a d o r g e n é t ic o c u j o g e n e e s t á l o c a l i z a d o n o b r a ç o c u r to d o c r o m o s s o m o 6 h u m a n o e e s t á e m e q u i lí b r io d e l i g a ç ã o c o m o s is t e m a H L A 7 814 20. H á d o i s a le lo s a u t o s s ô m i c o s c o d o m i n a n t e s

GLO

GLO2

A p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e , m i c o s e s is t ê m ic a c a u s a d a p e l o f u n g o

Paracoccidioides brasiliensis,

P.

brasiliensis,

A r e s i s t ê n c ia à i n f e c ç ã o p e l o

P. brasiliensis

N a t e n t a t iv a d e s e v e r i f i c a r s e f a t o r e s g e n é t ic o s i n f l u e n c i a m n a r e s i s t ê n c ia d o s e r h u m a n o à in f e c ç ã o

D e p a r t a m e n t o s d e C i ê n c i a s B i o l ó g i c a s d a F a c u l d a d e d e M e d i c i n a d o T r i â n g u l o M i n e i r o , U b e r a b a , M G e d e G e n é ti c a , I n s tit u to d e B i o c iê n c ia s d a U n i v e r s i d a d e E s ta d u a l P a u lis ta , B o tu c a tu , S P .

S u p o r t e f i n a n c e i r o - F A P E S P .

E ndereço p a ra correspondência-, D r a . M a r l y A . S p a d o tt o B a la r in . G e n é t i c a / D e p t o . d e C iê n c ia s B io l ó g i c a s / F M T M . P r a ç a M a n o e l T e r r a s / n , 3 8 0 1 5 - 0 5 0 U b e r a b a , M G , B r a s il . R e c e b i d o p a r a p u b l i c a ç ã o e m 3 0 / 0 4 / 9 3 .

p e lo

P. brasiliensis,

i

C o m o o b j e t iv o d e e s tu d a r a s u s c e p t ib ilid a d e à p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e - i n f e c ç ã o p r o c u r o u - s e n o p r e s e n t e tr a b a lh o d e te r m in a r s e h á a s s o c i a ç ã o e n tr e a g l i o x a l a s e I e o t e s t e i n t r a d é r m i c o à p a r a c o c c id io id in a .

M A T E R I A L E M É T O D O S

F o r a m c o le t a d a s a m o s t r a s d e s a n g u e p e r if é r ic o d e 2 2 3 in d iv í d u o s b r a n c o s , s e n d o 1 1 4 m a s c u lin o s c o m id a d e m é d ia d e 3 1 , 0 6 + 1 8 , 3 0 a n o s e 1 0 9 f e m i n i n o s , c o m id a d e m é d ia d e 2 9 , 5 0 + . 1 5 ,8 3 a n o s , r e s id e n te s e m P r a tâ n e a -S P , c o n s id e r a d a á r ea e n d ê m ic a d e p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e 15.

T o d o s o s i n d i v í d u o s f o r a m s u b m e t i d o s à r e a ç ã o in tr a d é r m ic a à p a r a c o c c id io i d i n a , a n t í g e n o s o l ú v e l , p o l i s s a c a r í d i c o , p r e p a r a d o d e a c o r d o c o m o m é t o d o p a d r o n iz a d o p o r F a v a N e t t o e R a f a e l3 . A s r e a ç õ e s c o m n ó d u l o d e e n d u r a ç ã o i g u a l o u s u p e r io r a 5 m m n o s e u d i â m e t r o m a i o r f o r a m c o n s i d e r a d a s c o m o p o s i t i v a s , e a s o u t r a s , c o m o n e g a t i v a s .

A s h e m á c i a s , u t i l i z a d a s p a r a o e s t u d o d o p o l i m o r f is m o e n z im á t i c o d a G L O I , f o r a m la v a d a s tr ê s v e z e s e m s a lin a i s o t ô n i c a ( N a C l 0 , 1 5 M ) , e s t o c a d a s e m g li c e r o l t a m p o n a d o a - 2 0 ° C e a n a lis a d a s p e l o m é t o d o d e K u h n l e c o l s 10 c o m m o d i f i c a ç õ e s . P o u c o a n t e s d o u s o , f o i p r e p a r a d o o h e m o l i s a d o , s e n d o c o l o c a d a n a s u s p e n s ã o u m a g o t a d e á g u a b id e s t ila d a g e la d a . A p ó s a g it a ç ã o , a s u s p e n s ã o f o i

B a la r in M A S , F r e ir e -M a ia D V. A s s o c ia ç ã o z n lre g h o x a la s e I e p a r a c o c c id io id o m ic o s e - in fe c ç ã o . R e v is ta d a S o c ie d a d e B r a s ile ir a d e M e d ic in a T r o p ic a l 2 5 :1 4 1 -1 4 3 , j u l- s e t, 1 99 3.

in c u b a d a a 4 ° C p o r 1 O m iti. A p c is a h e m ó l i s e , fo r a m a d ic io n a d a s a o t u b o d u a s g o l a s d e te tr a c l e r e t o d e c a r b o n o . O m a te r ia l f o i a g it a d o ’ ig t r o s a m e n t e p o r u m m i n u t o , c e n t r if u g a d o a ISO O rp m p o r lO m in e m a n t id o a 4 ° C a t é o m o ia e n t o d o u s o .

T r ê s m i c r o l i t o s d o h e m o l i s a d o f o r a m a p lic a d o s a t r a v é s d e p a p é i s d e f i lt r o 2 x 1 O m n i, i n s e r i d o s e m p e q u e n o s c o r t e s n o g e l d e a g a r o s e ( B R L - F u n b e c ) a 0 , 8 % . d e ta m p ã o T r is 0 , 1 M ( S ig i n a ) / á c i d o c ít r ic o 0 , 2 8 M ( M e r c k ) p H 7 , 5 , d i l u í d o 1 : 4 . O g e l f o i c o l o c a d o e m c â m a r a ú m id a a u m a v o lt a g e m d e 5 , 5 v / c m , p o r 2 h o r a s e 3 0 m in a 4 ° C .

N a p a r te a n ó d ic a d o g e l f o i c o l o c a d o u m p a p e l d e f i lt r o c o m s o l u ç ã o d e 4 0 m g d e g lu t a t io n r e d u z id o ( S ig m a ) e 0 , 2 m l d e m e t il g l i o x a l ; m t a m p ã o f o s f a t o 0 , 2 M p H 6 , 7 . A p ó s a in c u b a ç ã o p o r 2 0 m in u t o s a 3 7 ° C , o g e l f o i c o r a d o c o m u m a s o lu ç ã o d e lO m g M T T ( a z u l d e t i a z o l i l - S ig m a ) e 0 , 5 m g d e D C I P ( d i c l o r o - f e n o l i n d o f e n o l - la M o t t e ) e lO m l d e a g a r e m t a m p ã o d e T r is 0 , 1 M p H 8 , 5 .

O s c o n t r o le s f o r a m c o n s t i t u íd o s p o r a m o s tr a s d e f e n ó t ip o s c o n h e c i d o s .

R E S U L T A D O S E D I S C U S S Ã O

O s f e n ó t ip o s G L O 1 , 2 1 e 2 o c o r r e r a m , n o

to ta l d a a m o s t r a , c o m fr e q ü ê n c ia s a p r o x im a d a s d e 1 8 , 5 4 e 2 8 % , r e s p e c t iv a m e n t e ( T a b e la 1 ). C o m o n ã o f o i e n c o n tr a d a d if e r e n ç a s e x u a l e s t a t is t ic a m e n t e s i g n i f i c a t i v a h o m e n s e m u lh e r e s fo r a m a g r u p a d o s , e a f r e q ü ê n c ia d o g e n e

GLO

N o e n t a n t o , fo r a m s i g n i f i c a t i v a s a s d if e r e n ç a s d e fr e q ü ê n c ia d o f e n ó t ip o d e G L O 1 e n t r e o s R I P p o s i t i v o s e o s n e g a t i v o s ( T a b e la 1 ) , c o m u m e x c e s s o d e p r e v a lê n c ia e n tr e o s p r im e i r o s . C o m b a s e n e s s e s r e s u lt a d o s , s u g e r i m o s u m a h i p ó t e s e d e q u e h a ja a s s o c i a ç ã o e n tr e a p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e - i n f e c ç ã o e o l o c o G L O 1 .

A G R A D E C I M E N T O S

A g r a d e c e m o s a o P r o f . D r . A d e m a r F r e i r e -M a ia p e la r e v i s ã o e s u g e s t õ e s d a d a s e a C r i s t in e P . N o g u e i r a p e la o r ie n t a ç ã o n o e s t a b e l e c i m e n t o d a t é c n ic a .

S U M M A R Y

W ith the p u tp o s e to s tu d y th e g e n e tic s u s c e p tib ility to p a ra c o c c id io id o m y c o sis -in fe c tio n w e s e a r c h e d f o r a p o s s ib le a s s o c ia tio n b e tw e e n g ly o x a la s e I a n d th e in tra d e rm ic p a r a c o c c id io id in r ea ctio n . T h e p h e n o ty p e G L O 1 w a s sig n ifica n tly m o r e f r e q u e n t a m o n g p o s itiv e rea cto rs.

K ey- w orás: G fy o xa la se I. P a ra c o c c id io id o m y c o s is. P a ra co ccid io id in . G enetic. M yc o sis.

R E F E R Ê N C I A S B I B L I O G R Á F I C A S

1 . A i b o m o z M B . P a r a c o c c i d i o i d o m i c o s i s - i n f e c c i ó n . In : D e l N e g r o G , L a c a z C S , F i o r i l l o A M ( e d s ) P a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e : b l a s t o m i c o s e s u l - a m e r i c a n a I a ' e d i ç ã o S a v i e r , E D U S P , S ã o P a u l o p . 1 - 9 , 1 9 8 2 . 2 . C a l i c h V L G , B u r g e r E , K a s h i n o S S , F a z i o l i R A ,

S i n g e i V e r m e s L M . R e s i s t a n c e t o P a r a c o c c id io id e s bra silien sis in m i c e is c o n t r o l l e d b y a s i n g l e d o m i n a n t a u t o s o m a l g e n e . L i f e c t i o n a n d I m m u n i t y 5 5 : 1 9 1 9

-T a b ela 1 - D istr ib u iç ã o Ua fr e q i i ê n n a d o s fe n ó tip o s a a G L O I em re la ç ã o à r e a ç ã o in tr a d é rm ic a à p a r a c o c c id io id b ia ,kir>

R I P F e n ó t i p o G L O I T o t a l

1 2 -1 2

_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ o (*)_ ______ e ___________ o _ _ _ _ _ _ _ e ___ ____ ____ o_ _ _ _ _ _ _ _ e _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

P o s i t i v a 2 0 1 3 , 9 9 4 4 4 2 , 3 2 1 4 2 1 , 6 9 7 8

N e g a t i v a 2 0 2 6 0 1 7 7 7 8 , 6 8 4 8 4 0 , 3 1 1 4 5

T o t a l ( n ) 4 0 1 2 1 6 2 2 2 3

( % ) 1 8 5 4 2 8

B a la r in M A S , F r e ir e -M a ia D V . A s s o c ia ç ã o e n tre g lio x a la s e I e p a r a c o c c id io id o m ic o s e - in fe c ç ã o . R e v is ta d a S o c ie d a d e B r a s ile ir a d e M e d ic in a T r o p ic a l 2 6 :1 4 1 -1 4 3 , ju l - s e t , 199 3.

1 9 2 3 , 1 9 8 7 .

3 . F a v a N e t t o C , R a p h a e l A . A r e a ç ã o i n t r a d é r m i c a c o m p o l i s s a c á r i d e d o P a r a c o c c id io id e s b ra silien sis, n a b l a s t o m i c o s e s u l - a m e r i c a n a . R e v i s t a d o I n s t i t u t o d e M e d i c i n a T r o p i c a l d e S ã o P a u l o 3 : 1 6 1 - 1 6 5 , 1 9 6 1 .

4 . F r a n c o M H L P , M o r e i r a D M , S a l z a n o F M , S a n t o s S E B , C o n c e i ç ã o M M , S c h n e i d e r H . N e w d a t a o n t h e a s s o c i a t i o n b e t w e e n t h e g l y o x a l a s e I a n d h a p t o g l o b i n l o c i . H u m a n H e r e d i t y 3 6 : 1 2 6 - 1 2 8 , 1 9 8 6 .

5 . G o l d a n i L Z , M o n t e i r o C M C , D o n a d i E A , M a r t i n e z R , V o l t a r e l l i J C . H L A a n t i g e n s in B r a z i l i a n p a t i e n t s w i t h p a r a c o c c i d i o i d o m y c o s i s . M y c o p a t h o l o g i a

1 1 4 : 8 9 - 9 1 , 1 9 9 1 .

6 . G o n z á l e s N M , A l b o m o z M B , R i o s R , P r a d o L . P a r a c o c c i d i o i d o m i c o s i s y s u r e l a c i ò n c o m e l s i s t e m a H L A . In : A n a i s d o 2 o - E n c o n t r o s o b r e P a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e , U n i v e r s i d a d e E s t a d u a l P a u l i s t a “ J ú l i o d e M e s q u i t a F i l h o ” , B o t u c a t u , r e s u m o s a d i c i o n a i s , 1 9 8 3 .

7 . H a n s e n H E , E r i k s e n B . H L A - G L O l i n k a g e a n a l y s i s i n 5 7 i n f o r m a t i v e f a m i l i e s . H u m a n H e r e d i t y 2 9 : 3 5 5 - 3 6 0 , 1 9 7 9 .

8 . H a n s e n H E , O l e s e n L a r s e n S , E r i k s e n B . N o l i n k a g e d i s e q u i l i b r i u m H L A - G L O f o u n d i n 1 . 0 0 4 n o r m a l , u n r e l a t e d d a n e s . H u m a n H e r e d i t y 3 1 : I S ­

I S , 1 9 8 1 .

9 . K õ m p f J , B i s s b o r t S , G u s s m a n n S , R i t t e r H . P o ly m o r p h i s m o f r e d c e l l g l y o x a l a s e I ( E . C .: 4 . 4 . 1 . 5 ) . A n e w g e n e t i c m a r k e r in m a n . H u m a n g e n e t i k 2 7 : 1 4 1 -

1 4 3 , 1 9 7 5 .

1 0 . K ü h n l P , S c h w a b e n l a n d R , S p i e l m a n n W . I n v e s t i g a t i o n s o n t h e p o l y m o r p h i s m o f g l y o x a l a s e I ( E C 4 . 4 . 1 . 5 ) i n t h e p o p u l a t i o n o f H e s s e n , G e r m a n y . H u m a n G e n e t i c s 3 8 : 9 9 - 1 0 6 , 1 9 7 7 .

1 1 . L a c a z C S , Z a m i t h V A , D e l N e g r o G , S i q u e i r a A M . A s p e c t o s c l í n i c o s g e r a i s . F o r m a s p o l a r e s d a p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e . P a r t i c u l a r i d a d e s c l í n i c a s i n f a n t o - j u v e n i s . In\ D e l N e g r o G , L a c a z C S , F i o r i l l o A M ( e d s ) P a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e : b l a s t o m i c o s e s u l - a m e r i c a n a . I a - e d i ç ã o S a r v i e r , E D U S P , S ã o P a u l o p . 1 4 1 - 1 4 7 , 1 9 8 2 .

1 2 . L a c e r d a G B , A r c e - G o m e z B . H L A e p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e ( P C M ) . A n a i s d o 2 0 - E n c o n t r o s o b r e p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e , U n i v e r s i d a d e E s t a d u a l P a u l i s t a “ J ú l i o d e M e s q u i t a F i l h o ” , B o t u c a t u p . 9 , 1 9 9 3 .

1 3 . L a c e r d a G B , A r c e - G o m e z B , Q u e i r o z T e l l e s F i l h o F . I n c r e a s e d f r e q u e n c y o f H L A - B 4 0 in p a t i e n t s w i t h p a r a c o c c i d i o i d o m y c o s i s . J o u r n a l o f M e d i c a i a n d V e t e r i n a r y M y c o l o g y 2 6 : 2 5 3 - 2 5 6 , 1 9 8 8 ,

1 4 . L e a c h R , D e m a r s R , H a s s t e d t S , W h i t e R . C o n s t r u c t i o n o f a m a p o f t h e s h o r t a r m o f h u m a n c h r o m o s o m e ó . P r o c e e d i n g o f t h e N a t i o n a l A c a d e m y o f S c i e n c e s o f t h e U n i t e d S t a t e s o f A m e r i c a 8 3 : 3 9 0 9 - 3 9 1 3 , 1 9 8 6 .

1 5 . M a r q u e s S A , F r a n c o M F , M e n d e s R P , S i l v a N C A , B a c c i l i C , C u r c e l l i E D , F e r a c i n A C M , O l i v e i r a C S , T a g l i a r i n i J V , D i l l o n N L . A s p e c t o s e p i d e m i o l ó g i c o s d a p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e n a á r e a e n d ê m i c a d e B o t u c a t u ( S ã o P a u l o - B r a s i l ) . R e v i s t a d o I n s t i t u t o d e M e d i c i n a T r o p i c a l d e S ã o P a u l o 2 5 : 8 7 - 9 2 , 1 9 8 3 . 1 6 . M e n d e s R P , C o l a u t o E M R , M e i r a D A , B a r r a v i e r a

B . F r e q ü ê n c i a d e s i s t e m a s s a n g u í n e o s e m d o e n t e s c o m p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e , d a r e g i ã o d e B o t u c a t u . A n a i s d o 2 o • E n c o n t r o s o b r e P a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e , U n i v e r s i d a d e E s t a d u a l P a u l i s t a “ J ú l i o d e M e s q u i t a F i l h o ” , B o t u c a t u p . 8 , 1 9 8 3 .

1 7 . P o n s i r e n a s C V G . E s t u d o d e a s s o c i a ç ã o e n t r e o s a n t í g e n o s H L A - A , B e D r c o m a s f o r m a s c r ô n i c a s d a p a r a c o c c i d i o i d o m i c o s e . T e s e d e m e s t r a d o , U n i v e r s i d a d e F e d e r a l d o P a r a n á , C u r i t i b a , 1 9 9 1 . 1 8 . R e s t r e p o F M , R e s t r e p o M , R e s t r e p o A . B l o o d

g r o u p s a n d H L A a n t i g e n s i n p a r a c o c c i d i o i d o m y c o s i s . S a b o u r a n d i a 2 1 : 3 5 - 3 9 , 1 9 8 3 .

1 9 . S a n - B l á s G , S a n - B l á s F . P a r a c o c c i d i o i d e s b r a s ilie n s is c e l l w a l l s t r u c t u r e a n d v i r u l e n c e . M y c o p a t h o l o g i a 6 2 : 7 7 - 8 6 , 1 9 7 7 .

2 0 . W o n g P , K o m a m i c k i L , S c h r o e d e r M L , L e w i s M , K a i t a H , P h i l i p p s S , S t r a n c L , M c A l p i n e P J . A n a l y s i s f o r l i n k a g e b e t w e e n F 1 3 A a n d t h r e e c h r o m o s o m e 6 m a r k e r l o c i : e v i d e n c e f o r 6 p t e r : F 1 3 A : H L A . G L O l . c e n g e n e o r d e r . H u m a n G e n e t i c s 7 9 : 2 2 8 - 2 3 0 , 1 9 8 8 .