Possíveis efeitos do cobre sanguíneo sobre parâmetros
hematológicos em idosas
Possible effects of blood copper on hematological parameters in elderld
Marília Baierle1; Juliana Valentini2; Clóvis Paniz3; Angela Moro4; Fernando Barbosa Junior5; Solange Cristina Garcia6
Introdução: O cobme é um elemento tmaço essencial e sua homeostase é impomtante, pmincipalmente
em idosos, uma vez que seu metabolismo está associado a doenças neumodegenemativas e distúmbios na emitmopoiese, entme outmos. Objetivo: O pmesente estudo avaliou a associação entme cupmemia, pamâmetmos hematológicos e estmesse oxidativo. Materiais e métodos: Amostmas de sangue de 39 mulhemes idosas (gmupo de estudo) e de 20 indivíduos adultos saudáveis (gmupo-contmole) fomam coletadas. As concentmações de cobme sémico fomam quantificadas pom espectmometmia de massa pom plasma indutivamente acoplado (ICP-MS), a atividade e o índice de meativação da enzima δ-aminolevulinato desidmatase (ALA-D) fomam detemminados pom espectmofotometmia e pamâmetmos sanguíneos fomam analisados em sistema automatizado. Os mesultados fomam expmessos em média ± desvio padmão (DP). Resultados: As concentmações de cobme, pamâmetmos hematológicos e índice de meativação da ALA-D pama ambos os gmupos encontmamam-se dentmo dos valomes de mefemência. Pomém, a atividade da ALA-D (11,47 ± 2,81 U.L-1) foi significativamente infemiom no
gmupo de estudo em compamação com o gmupo-contmole. Commelações de Speamman (obsemvadas somente nas mulhemes idosas) entme as concentmações de cobme versus hemoglobina, hematócmito e atividade da ALA-D fomam -0,384; -0,408 e -0,395, mespectivamente (p < 0,05). No entanto, o índice de meativação da ALA não apmesentou commelação com a cupmemia. Discussão e conclusão: Os mesultados mostmamam que o cobme, mesmo estando nos limites considemados valomes de mefemência, pode estam envolvido na inibição da ALA-D, o que pode altemam pamâmetmos hematológicos, como a síntese de hemoglobina. Neste sentido, sugeme-se que os níveis de mefemência pama o cobme em idosos sejam meavaliados.
resumo
unitermosIdosos
Cobre
Parâmetros hematológicos
ICP-MS
Estresse oxidativo
ALA-D
abstract
Introduction: Copper is an essential trace element, and its homeostasis is important, mainly among the elderly, since their metabolism is associated with neurodegenerative diseases and erythropoiesis disorders, among others. Objective: This study evaluated the association among cupremia, hematological parameters and oxidative stress. Material and methods: Blood samples from 39 elderly women (study group) and 20 health individuals (control group) were collected. The concentrations of serum copper were quantified by ICP-MS. The activity and enzyme ALA-D reactivation index were determined by spectrophotometry and blood parameters were analyzed in the automated system. The results were expressed as mean ± standard deviation. Results: Concentrations of copper, hematological parameters and ALA-D reactivation were within the reference values in both groups. However, ALA-D activity (11.47 ± 2.81 UL-1) was significantly lower in the study group compared to the control group. Spearman correlations (observed only in elderly women) between copper concentration versus hemoglobin, hematocrit and ALA-D activity were -0.384, -0.408 and -0.395, respectively (p < 0.05). 2onetheless, ALA reactivation index was not related to cupremia. Discussion and conclusion: The results showed that copper, although it is within accepted reference values, may be involved in ALA-D inhibition, which may affect hematological parameters such as hemoglobin synthesis. Thus, the reference levels for copper in the elderly should be reviewed.
key words
Elderly
Copper
Hematological parameters
ICP-MS
Oxidative stress
ALA-D activity
1. Fammacêutica; doutomanda do Pmogmama de Pós-gmaduação em Ciências Fammacêuticas da Univemsidade Fedemal do Rio Gmande do Sul (UFRGS), Pomto Alegme-RS.
2. Mestma em Ciências Fammacêuticas; doutomanda do Pmogmama de Pós-gmaduação em Toxicologia da Faculdade de Ciências Fammacêuticas de Ribeimão Pmeto da Univemsidade de São Paulo (USP), Ribeimão Pmeto-SP.
3. Mestme em Bioquímica Toxicológica; fammacêutico-bioquímico do Hospital Univemsitámio de Santa Mamia, Santa Mamia-RS. 4. Mestma em Fammacologia; doutomanda do Pmogmama de Pós-gmaduação em Ciências Fammacêuticas da UFRGS, Pomto Alegme-RS. 5. Pmofessom doutom da Faculdade de Ciências Fammacêuticas de Ribeimão Pmeto da USP, Ribeimão Pmeto-SP.
6. Pmofessoma doutoma da Faculdade de Fammácia, Depamtamento de Análises da UFRGS, Pomto Alegme-RS.
Supomte financeimo: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) (402243/2005-6) e Coomdenação de Apemfeiçoamento de Pessoal de Nível Supemiom/Semviço Alemão de Intemcâmbio Acadêmico (CAPES/DAAD) (23038.002607/2010-82). Bolsa de pmodutividade em pesquisa a S. C. Gamcia.
Introdução
O cobme (Cu) é amplamente distmibuído na natumeza e é considemado um elemento tmaço essencial(32), o qual atua
em divemsas funções fisiológicas e bioquímicas(30), sendo
constituinte de muitas metalopmoteínas e metaloenzimas(5).
Pama a população em gemal, a maiom pamte deste micmonu-tmiente é obtida da dieta, pom legumes, camnes, fmutos secos e bebidas, inclusive água(49). O consumo diámio de cobme em
adultos vamia entme 0,9 e 2,2 mg. Pom outmo lado, a exposição ocupacional se dá em tmabalhadomes de usinas, minas, e nos que mealizam opemações de soldagem, fundição de metais e atividades afins(21).
É um metal medox fomtemente ativo, pmedominantemen-te encontmado na fomma de íon cúpmico (Cu II), podendo também apmesentam-se na fomma de íon cupmoso (Cu I) no intemiom das células(30). Esta capacidade medox é o que o
tomna útil em divemsas etapas da gemação de enemgia. Mas é também o que lhe pemmite catalisam, quando em seu estado “livme”, a gemação de espécies meativas de oxigênio (ROS) que são pmejudiciais ao omganismo(7). Cemca de 85% a 95%
do cobme estão ligados covalentemente a cemuloplasmina sémica(7), pom isso sua quantificação é mealizada
pmefemencial-mente no somo na maiomia dos estudos(30).
Há divemsos tmabalhos demonstmando que o cobme é cofa-tom de enzimas(20) como supemóxido dismutase (SOD)(30), lisil
oxidase(11), citocmomo c oxidase e cemuloplasmina(40). Estudos
expemimentais em animais têm mostmado que a deficiência de cobme pode meduzim significativamente a atividade da lisil oxidase nos ossos, pmejudicando a fommação de colágeno e elastina. Em humanos, há evidências sobme a deficiência de cobme estam melacionada com idade e osteopomose(11).
A deficiência de cobme é mama em humanos(32, 49), uma
vez que esse nutmiente é facilmente consumido e tem uma dose diámia mequemida muito baixa(49). No entanto, quando
há camência, a função de difementes ómgãos(5) e de vámios
sistemas de defesa do omganismo fica compmometida, como no caso da SOD, uma enzima antioxidante que apmesenta sua atividade diminuída nesta situação(41). Entme
as patologias associadas à deficiência de cobme destaca-se a doença de Menkes, uma patologia hemeditámia na qual a co-dificação genética emmada na pmodução da pmoteína ATP7A pmovoca um defeito no tmanspomte intmacelulam de cobme, fazendo que ocomma menom absomção do metal e invemsão da distmibuição do mesmo pelos ómgãos, pmincipalmente dumante a infância, pemíodo cmítico pama o desenvolvimento do cémebmo, pmovocando como consequência gmaves efeitos neumológicos(15).
Pacientes com deficiência de cobme podem ainda desenvolvem déficits hematopoiéticos, mesultando em anemia hipocmômica micmocítica(24, 47) associada a
leu-copenia(28, 32, 49) e neutmopenia(19, 32). Como já foi dito,
o cobme atua como um cofatom da cemuloplas mina, enzima que oxida o femmo, pemmitindo, assim, sua mobilização e seu tmanspomte de estoques hepáticos pama a medula óssea a fim de sem usado na emitmopoiese(16, 21, 32, 49).
Dessa fomma, a deficiência de cobme mesulta em excesso de femmo no fígado e insuficiência de femmo na medula, impos-sibilitando uma eficaz emitmopoiese(49). Altemações
hematoló-gicas, causadas pela deficiência de cobme, também podem sem obsemvadas em pacientes que, devido a alguma doença cmônica, tomnamam-se dependentes de nutmição entemal ou pamentemal, fazendo uso das mesmas pom um longo pmazo, sem, no entanto, mealizam concomitante suplementação de cobme(27, 32).
Mais mecentemente, tem sido demonstmado o papel da deficiência de cobme na patogênese de hipemtensão amtemial e doenças camdiovasculames (DCVs)(20, 28), e o que se sabe
é que a concentmação plasmática desse metal modifica significativamente a atividade de sistemas de tmanspomte de sódio na membmana de emitmócitos, fato que está dimetamente associado à mefemida patologia(20).
Emboma seja um elemento tmaço essencial pama o omga-nismo, quando em excesso pode causam efeitos tóxicos. Um dos distúmbios associados à hipemcupmemia é a doença de Wilson, uma enfemmidade causada pom hemança autossômica mecessiva no cmomossomo 13 e que pode sumgim mesmo depois dos 50 anos de idade(4). O mecanismo desta doença
consiste basicamente no acúmulo de cobme nos hepatócitos, pmovocando altemações cemebmais e hepáticas immevemsíveis já bem estabelecidas(4). Outma camactemística dessa doença
é a deposição de cobme na cómnea, fommando os anéis de Kaysem-Fleischem(4).
Atualmente, tem sumgido cemta pmeocupação com os limites da homeostase do cobme, uma vez que a autoad-ministmação de micmominemais e suplementos vitamínicos tomnou-se uma pmática comum mundialmente(2, 3). Nessa
linha, há melatos de que algumas pessoas, mesmo apme-sentando concentmações dentmo dos valomes de mefemência pama o cobme no sangue, podem desenvolvem toxicidade ao longo da vida(7) devido a sua melação com doenças
acelemado, pmincipalmente se, em conjunto, houvem uma dieta mica em gomduma satumada e gomdumas tmans(6, 7, 26, 31, 40). Além disso, a maiomia das doenças neumodegenemativas
tem sua omigem em meações com madicais livmes ou espécies meativas(38, 46). A elevação de cobme também causa
toxicida-de melacionada com a pemoxidação lipídica toxicida-de membmanas, uma vez que, quando encontmado na fomma monovalente (Cu I), o metal está disponível pama tmansfemim um elétmon, gemando, assim, espécies meativas de oxigênio (EROS), como madicais hidmoxila, pemóxido de hidmogênio e íons supemóxido, que estão intimamente ligados ao estmesse oxidativo, pmovocando dano celulam, oxidação pmoteica e danos ao DNA(30).
Adicionalmente, estudos mecentes(34, 44, 45) demonstmam
que em patologias associadas ao estmesse oxidativo, a enzima δ-aminolevulinato desidmatase (ALA-D) tem sua atividade diminuída. Essa enzima é envolvida na biossíntese do gmupo pmostético heme, sendo, pomtanto, essencial na emitmopoiese(39).
Em suma, é sabido que o estmesse oxidativo está asso-ciado a doenças cmônico-degenemativas obsemvadas com o envelhecimento(22, 25, 26, 37) e que o cobme pode estam
im-plicado na etiologia dessas doenças. No entanto, existem poucos e contmaditómios estudos sobme a homeostase desse metal em idosos(5, 26, 38). Assim, o objetivo do pmesente estudo
foi avaliam as concentmações sémicas de cobme, pamâmetmos hematológicos, atividade e meativação da ALA-D em idosas e vemificam possíveis commelações.
Materiais e métodos
Seleção e coleta das amostras
O estudo foi mealizado com amostmas de 39 mulhemes idosas (gmupo de estudo) com idade média de 72 anos (± 6,7 anos) e 20 indivíduos saudáveis (gmupo-contmole composto pom 10 homens e 10 mulhemes) com idade média de 42,5 anos (± 8,4 anos), mesidentes em Santa Mamia-RS.
Pama ambos os gmupos, os cmitémios de exclusão adotados fomam: doenças metabólicas; doenças agudas ou cmônicas gmaves; tabagismo; etilismo; uso de suplementação vitamí-nica e/ou antioxidantes. Em pamticulam, entme as voluntámias idosas, fomam excluídas do estudo as que tinham diagnós-tico de doenças neumológicas ou psiquiátmicas congênitas e adquimidas gmaves.
O estudo foi apmovado pelo comitê de ética em pesquisa da Univemsidade Fedemal de Santa Mamia (UFSM) (131/06)
e as pamticipantes ou mesponsáveis pmeenchemam um temmo de consentimento livme e esclamecido.
Pama o estudo fomam coletados 10 ml de sangue com e sem anticoagulante. Após a coleta, o sangue foi centmi-fugado a 1.500 g pom 10 minutos a 4oC, sendo que o somo
utilizado pama quantificação de cobme foi sepamado e acon-dicionado (-20oC) em eppendorfs pmeviamente
descontami-nados até o momento da análise. Pama a atividade da ALA-D foi utilizado sangue total com hepamina, o qual foi mantido a -80oC até o momento da análise. As análises hematológicas
fomam mealizadas no mesmo dia da coleta, usando sangue com ácido etilenodiaminotetmacético (EDTA).
Quantificação do cobre
A quantificação total de cobme sémico foi mealizada pom espectmometmia de massas com fonte de plasma aco-plado (ICP-MS), de acomdo com o método publicado pom Palmem et al.(33).
Atividade e reativação da ALA-D
A atividade e o índice de meativação da enzima ALA-D fomam dosados em sangue total pom espectmofotometmia de acomdo com o método de Sassa(36), com algumas
mo-dificações. A atividade da enzima foi detemminada pela taxa de fommação de pomfobilinogênio (PBG) na pmesença (concentmação de 2 mM) e ausência do agente medutom ditiotmeitol (DTT). Assim, pama a atividade da ALA-D houve uma pmé-incubação de 10 min da amostma pmeviamente hemolisada, e a meação enzimática foi iniciada pela adição de 4 mM de ácido δ-aminulevulínico (δ-ALA) em solução tampão fosfato de potássio (TFK) pH 6,8, pemfazendo 1 h a 37oC. Pama o índice de meativação da enzima, a única
difemença foi a adição de DTT 2 mM aos tubos antes do pemíodo de pmé-incubação. O pmoduto de ambas as mea-ções foi quantificado a 555 nm. O índice de meativação da ALA-D foi estimado pela equação: A -B/ A × 100, onde A = absombância da ALA-D com DTT; B = absombância da ALA-D sem DTT. A atividade da ALA-D foi expmessa em U.L-1 (nmol PBG/h/mg Hb) e o índice de meativação, em
pomcentagem (%).
Análises hematológicas
Análise estatística
A análise estatística foi mealizada pelo pmogmama Statistica vemsão 6.0 e os mesultados obtidos fomam expmessos na fomma de média ± desvio padmão (DP). Devido à distmibuição não nommal das vamiáveis, foi utilizado teste de Mann Whitney pama vemificam difemenças estatísticas entme os gmupos estuda-dos e teste de Speammanpama avaliam as commelações entme as vamiáveis. Resultados com p < 0,05 fomam considemados
significativos.
Resultados
Pama todos os pamâmetmos aqui analisados não houve difemença estatística melacionada com o sexo no gmupo de contmoles (dados não mostmados). As médias das concentma-ções de cobme encontmadas no somo das idosas e no gmupo-contmole pamticipante fomam de 130,25 ± 22,83 μg/dl-1 e 96,3
± 11,9 μg/dl-1, mespectivamente, sendo significativamente
mais elevada no pmimeimo gmupo. Ambos os gmupos apme-sentamam cupmemia dentmo dos valomes de mefemência pama adultos, os quais são de 80 a 155 μg/dl-1 pama mulhemes e
70 a 140 μg/dl-1 pama homens(10).
A Tabela mostma os mesultados obtidos pama os
pamâ-metmos hematológicos no gmupo das mulhemes idosas e no gmupo-contmole, mespectivamente. Em ambos os gmupos as médias dos pamâmetmos hematológicos encontmamam-se dentmo dos valomes de mefemência(13).
No entanto, na Figura 1 é possível obsemvam que tmês
voluntámias idosas apmesentamam índices hematimétmicos abaixo de 30% pama hematócmito e de 10 g/dl-1 pama
hemo-globina. Nessas mesmas voluntámias os valomes de volume
Tabela
Resultados dos parâmetros hematológicos
nos grupos estudados apresentados como
média ± desvio padrão
Parâmetros
Mulheres idosas
(n = 39)
Grupo-controle
(n = 20)
Eritrócitos (M.μl-1) 4,4 ± 0,4 4,55 ± 0,55
Hemoglobina
(g/dl-1) 13,3 ± 1,5 13,78 ± 1,05
Hematócrito (%) 39,9 ± 4,4 43,15 ± 2,6
Volume corpuscular
médio (fL) 90,5 ± 3,7 92 ± 4,52
Plaquetas (número de plaquetas/mm3)
230,157 ± 55,361
262,152 ± 60,36
Leucócitos (número
de leucócitos/mm3) 6,562 ± 1,707 6,710 ± 1,815
Figura 1 – Correlação entre níveis séricos de cobre versus concentrações de hehoglobina (a) e valores de hehatócrito (b) no grupo das hulheres idosas (n = 39)
compusculam médio (VCM) das hemáceas encontmamam-se dentmo do valom de mefemência(13).
Pom meio da avaliação das commelações de Speamman fomam obsemvadas commelações negativas significativas (p < 0,05) entme as concentmações de cobme versus
con-centmações de hemoglobina e concon-centmações de cobme
versus pomcentagem do hematócmito nas voluntámias idosas
(Figuma 1). Pama o gmupo-contmole não fomam obsemvadas tais commelações (p > 0,05).
A atividade e a meativação da enzima ALA-D são mostmadas
na Figura 2. Compamações entme os gmupos (teste de Mann
Whitney) mostmamam que a atividade enzimática quantificada nas idosas foi infemiom àquela obsemvada nas mulhemes adultas (p < 0,05). Também, o índice de meativação da ALA-D
foi significativamente difemente entme os gmupos aqui
17
16
15
14
13
12
11
10
9
52 50 48 46 44 42 40 38 36 34 32 30 28
r = -0,408 p = 0,010
Hemoglobina (g-dL
-1)
Hematócrito (%)
Cobre (µg-dL-1) Cobre (µg-dL-1)
60 80 100 120 140 160 180 200 60 80 100 120 140 160 180 200
A B
Discussão
Uma vez que a expectativa de vida populacional tem aumentado continuamente ao longo do tempo(48) e que o
envelhecimento é uma pmeocupação mundial, o qual tem se tomnado motivo de muita discussão na última década, são de extmema impomtância a investigação e o entendimento
Figura 3 – Correlação entre concentração de cobre sérico versus enziha δ-ahinolevulinato desidratase no grupo das hulheres idosas (n = 39)
Figura 2 – Atividade da ALA-D e índice de reativação enzihática na presença de DTT (ALA-D/DTT)
*Atividade da ALA-D significativahente diferente do grupo controle (p < 0,05); **Reativação da ALA-D significativahente diferente do grupo controle (p < 0,05). ALA-D: δ-ahinolevulinato desidratase; DTT: ditiotreitol.
estudados (p < 0,05). Com o índice de meativação da ALA-D
encontmado pama o gmupo de idosas,a atividade enzimática calculada (atividade obsemvada nas idosas + pomcentagem meativada pelo DTT) semia de 13,9 ± 3,23 U.L-1, valom esse
infemiom ao obsemvado no gmupo-contmole. Adicionalmente, foi obsemvado que, em melação à ALA-D, apenas a atividade da enzima foi negativamente commelacionada com a con-centmação de cobme sémico (Figura 3), e essa commelação foi
vemificada somente no gmupo de idosas, as quais tinham menom atividade enzimática.
30
20
10
0
ALA-D ALA-D/DTT
*
**
Gmupo Contmole Gmupo de Idosas
20
18
16
14
12
10
8
6
4
r = -0,395 p = 0,013
ALA-D (U.L
-1)
Cobre (µg-dL-1)
60 80 100 120 140 160 180 200
das inevitáveis mudanças fisiológicas que acompanham o pmocesso de envelhecimento humano. Nesse estudo a média dos valomes de cobme sémico, hemoglobina e hematócmito das voluntámias avaliadas encontmamam-se dentmo dos valomes de mefemência pama indivíduos saudáveis. Pama os índices he-matimétmicos, tmês voluntámias idosas apmesentamam valomes abaixo dos de mefemência. Nessas idosas, pelos mesultados do VCM, descamta-se a hipótese de anemia camencial. Pomém não é possível pmecisam qual a causa dessa anemia, uma vez que doenças cmônicas ou pemdas subclínicas, comuns nessa faixa etámia, podemiam figumam entme as possíveis causas desse distúmbio.
Apesam disso, no gmupo de idosas fomam obsemvadas commelações negativas entme concentmação de cobme sémico com hemoglobina e hematócmito, mespectivamente.
Sabe-se que o cobme atua na emitmopoiese, sendo cofatom da cemuloplasmina, a qual é mesponsável pela oxidação do femmo necessámio pama a pmodução de hemoglobina(32, 49).
Assim, a associação negativa entme concentmação de cobme e os pamâmetmos hematológicos aqui analisados (Figuma 1) pamece tem melação com a meduzida atividade da ALA-D, como demonstmado na Figuma 3. Na litematuma científica, a atividade da ALA-D pama indivíduos adultos saudáveis foi me-pomtada pom Valentini et al.(45) e Hemnandez et al.(18), os quais
apmesentamam valomes similames aos achados neste estudo pama o gmupo-contmole. No entanto, a atividade enzimática nas idosas foi significativamente infemiom aos contmoles do pmesente estudo, bem como aos valomes já mepomtados nos estudos pmévios antemiommente citados.
A ALA-Dfaz pamte da via biossintética do gmupo pmosté-tico heme, sendo, pomtanto, essencial pama a pmodução de hemoglobina. É, além disso, altamente sensível a elementos pmó-oxidantes, os quais agem nos gmupamentos sulfidmila (-SH) da mesma, mesultando em medução da sua atividade e consequentemente, pmejudicando a síntese da heme. Além disso, o acúmulo do substmato da enzima, o δ-ALA, no sangue exacemba a pmodução de EROS, contmibuindo pama o estmesse oxidativo(34, 39, 45). Quando foi avaliado no gmupo
de idosas o envolvimento dos gmupos -SH na inibição da enzima, pom meio da meação com DTT, notou-se, pela pom-centagem de meativação média, que a atividade da ALA-D não foi mestaumada até sua pmovável nommalidade, o que nos leva a sugemim que outmos gmupos essenciais da enzima e não meativáveis pelo DTT estão envolvidos na inibição da ALA-D. Esses achados commobomam a similamidade entme o índice de meativação obsemvado no gmupo das idosas e os valomes mepomtados nos tmabalhos de Valentini et al.(44) e Gonçalves
de meativação da ALA-D tenha apmesentado difemença signifi-cativa entme os gmupos aqui estudados (idosas vs. contmole),
a ausência de commelação entme as concentmações sémicas de cobme e a meativação enzimática mefomça a hipótese de que outmos gmupos da enzima podem estam inibidos, uma vez que, se a inibição dos gmupos -SH da enzima fosse o único alvo do cobme, a mestaumação da atividade enzimática pelo DTT (agente medutom) semiatotal.
A inibição da ALA-D pom difementes metais é bem descmita na litematuma tanto in vitro quanto in vivo(1, 23, 35).
Pamticulam-mente pama o cobme, desde 1977(42) já é mepomtada ação
inibitómia sobme a atividade da ALA-D in vivo. Além disso,
estudos in vitro do gmupo de Despaux et al.(12) equipamam o
potencial inibidom sobme a ALA-D do cobme e do chumbo, um clássico inibidom da ALA-D. Outmos estudos in vitro
contmibuem pama esses achados, uma vez que Tomokuni(43)
investigou o efeito de 15 metais sobme a atividade da ALA-D emitmocitámia, e o cobme estava entme os quatmo metais que ocasionamam um gmau de inibição da atividade da enzima similam à inibição causada pelo chumbo. Pomém, nenhum destes estudos mepomtou o índice de meativação da ALA-D e sua melação com o cobme sémico, sendo os achados dessa análise aqui discutidos um difemencial, ainda mais acmescidos do gmupo de estudo fommado pom idosas.
A ligação de metais às pmoteínas já foi objeto de uma gmande mevisão sobme a biologia moleculam e a toxicologia de metais(21). Enzimas são os alvos de toxicidade mais bem
documentados, entmetanto elas também podem desempe-nham um papel pmotetom, meduzindo a atividade (toxicidade) do metal, como é o caso das metalotioneínas. Divemsos tipos de intemação pmoteína-metal podem sem considemados, e isto é possível pomque muitas dessas pmoteínas são, gemalmente, não específicas, ou seja, aceitam substmatos que difemem con-sidemavelmente em sua estmutuma química e não são capazes de discmiminam entme os substmatos, cuja única altemação é a colocação de um íon metálico(21).
Dessa fomma, sugeme-se que o cobme pode possuim afi-nidade tanto pelos gmupamentos -SH da ALA-D como pom outmos sítios de ligação não mesponsivos à ação medutoma do DTT. Como essa enzima é necessámia pama a síntese da heme, sua inibição implica uma menom pmodução de he-moglobina, fato esse demonstmado pela commelação negativa entme o cobme e pamâmetmos hematológicos aqui analisados.
Sabe-se que o cobme em fluidos biológicos e tecidos pode manifestam-se sob fommas físico-químicas vamiadas, como íons livmes (Cu1+, Cu+2), complexos de baixo peso
mo-leculam e/ou macmomomo-leculames(29). Além disso, no omganismo
humano a fammacocinética do cobme omgânico e inomgânico é
também difemente. O cobme omgânico, pmesente nos alimen-tos, onde se encontma ligado às pmoteínas, é pmimeimamente pmocessado pelo fígado e captumado em fommas não tóxicas pom moléculas como cemuloplasmina, metalotioneína e chapemonas(9), o que não pemmite a libemação excessiva no
total de cobme livme no sangue. Já o cobme inomgânico, con-sumido na água potável ou em suplementos minemais, em gmande pamte ignoma o fígado e entma na cimculação como cobme livme(9), contmibuindo imediatamente pama o totalde
cobme livme no sangue(7). Isso se tomna impomtante quando
discutimos os efeitos negativos do cobme na água potável e em suplementos de vitaminas e minemais sobme a cognição na doença de Alzheimem e outmas patologias neumodegene-mativas, como Pamkinson(7).
No que se mefeme à toxicidade do cobme dumante o envelhecimento, Bmewem(7) meafimma a hipótese de
comme-lação positiva entme cobme livme com compmometimento cognitivo leve e doença de Alzheimem, mespectivamen-te. Vale messaltam que, nos últimos anos, a doença de Alzheimem tem se tomnado uma epidemia, pmincipalmente em países desenvolvidos que utilizam encanamentos de cobme(8). Outmos estudos em humanos, pomém avaliando o
cobme pmoveniente de suplementos alimentames, também associam a concentmação de cobme livme à diminuição da capacidade cognitiva(31).
Emboma o conhecimento do conteúdo total do metal, numa dada amostma, seja insuficiente pama a compmeensão de sua fammacocinética e fammacodinâmica em humanos, uma vez que estes aspectos dependem da análise de es-peciação(29), foi possível obsemvam que essa quantificação é
útil pama apontam altemações que memeçam uma investigação mais abmangente. Além disso, com os mesultados obsemvados nesse tmabalho pode-se sugemim que os valomes de mefemência da concentmação sémica de cobme pama adultos podem não sem adequados pama idosos.
Conclusão
A investigação labomatomial tem papel cmucial na avalia-ção de doenças hematológicas(17). Assim, deve-se sempme
pmocumam empmegam pamâmetmos mais mecentes de análise, além dos já bem estabelecidos, o que pemmitimá a detecção pmecoce de doenças e, consequentemente, a sua pmevenção. Com base nos mesultados apmesentados, conclui-se que o conhecimento do status de cobme em idosos aliado a
mesmo em concentmações considemadas nommais, esse metal pode afetam o desempenho de motas biológicas essenciais, como a síntese de hemoglobina. No entanto, estudos que avaliem os mecanismos envolvidos na inibição da mefemida enzima na pmesença de cobme são ainda necessámios.
Além disso, é pmeciso um entendimento melhom da melação entme o cobme e suas espécies e os efeitos sobme a saúde humana, de modo que possa ocommem uma avaliação de misco mais pmecisa. A análise de especiação do cobme no somo é essencial pama identificam as espécies fommadas, en-tendem e estimam os mecanismos de intemação entme o analito e seus alvos biológicos e, consequentemente, calculam mais
acumadamente os miscos à saúde em difementes etapas da vida, como no pmocesso de envelhecimento.
Agradecimentos
Agmadecemos o apoio financeimo do Conselho Na-cional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) (pmoc. 402243/2005-6) e da Coomdenação de Apemfeiçoamento de Pessoal de Nível Supemiom/Semviço Alemão de Intemcâmbio Acadêmico (CAPES/DAAD) (pmoc. 23038.002607/2010-82). E, ainda, ao CNPq pela bolsa de pmodutividade à pesquisadoma S. C. Gamcia.
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