C A R A C T E R I Z A Ç Ã O d e u m e x t r a t o d e
c y s tic e r c u s
c e l l u l o s a e
.
C O M U N I C A Ç Ã O P R É V I A *
Felix R. Zyn gier **
O autor apresenta um estudo sobre a composição antigênica do
C y st i c e r c u s c e l l u l o sa eempregando as técnicas de gei-difusão e imunoeletroforese; através da gel-difusão
evidenciaram-se 5 faixas de precipitação e, na imunoeletroforese, 9 sistemas de
precipitação. Salienta, ainda, a importância de novos estudos a fim de melhor definir a
composição antigênica do parasita.
I N T R O D U Ç Ã O
A t e n ía se e c i st i c e r c o se sã o e n t i d a d e s c l í n i cas b e m c o n h e c i d a s e m n o sso m e i o , p a r t i c u l a r m e n t e n o s e st a d o s d e Sã o Pa u l o , M i n a s G e r a i s e Ri o d e J a n e f r o 9 . A t e n ía se i n t e st i n a l a p r e se n t a - -se c o m m o r b i d a d e r e l a t i v a m e n t e b a i x a , e n q u a n t o q u e a c i st i c e r c o se p o ssu i a p o t e n c i a l i d a de d e i n v a d i r o si st e m a n e r v o so c e n t r a l , o q u e e m m u i t o a gr a v a o p r o g n ó st i c o d o s c a so s, c o m o a c e n t u a m D i x o n e L i p sc o m b 2 , D i x o n e H a r - gr e av e s! e Po w e l l e c o l s1 1 .
N o d i a g n ó st i c o d a c i st i c e r c o se t e m - sf f e m p r e gad o as r e a ç õ e s d e f i x a ç ã o d o c o m p l e m e n t o 1 , p r e c i p i t a ç ã o , h e m a g l u t i n a ç ã o p a ssi v a e ge l - d i f u - sã o 1 2 , c o m p o si t i v i d a d e m á x i m a e m t o r n o d e 8 5 p o r c e n t o d o s c a so s c o m p r o v a d o s, o q u e d e i x a ce r ca d e 1 5 p o r c e n t o d o s p a c i e n t e s c o m o f a l so - n e ga t i v o s d o p o n t o d e v i st a so r o l ó g i c o . Fa l so s p o si t i v o s t ê m si d o d e sc r i t o s n a sí f i l i s n e r v o sa, c o m o r e f e r e m V e r o n e si e Sp i n a - F r a n - ç a 1 5 , e r e aç õ e s c r u z a d a s o c o r r e m c o m a h i d a t i - d o se e a c e n u r o se n e r v o sa , se g u n d o Pr o c t o r , Po w e l l e El sd o n - D e w 1 2 .
A c o m p o si ç ã o a n t i gê n i c a d o
Cysticercus
cellulosae
t e m si d o p o u c o e st u d a d a ; e st e t r a b a l h o se p r o p õ e a f a z e r u m a a b o r d a g e m i n i c i a l d e st e p r o b l e m a .
M A T E R I A L E M É T O D O S
O s c i st i c e r c o s f o r a m o b t i d o s m e d i a n t e d i s se c a ç ã o d e c a r c a ç a s d e su í n o s i n f e st a d o s. O s c i st i c e r c o s ( í n t e g r o s o u r o m p i d o s) f o r a m l av a d o s c o m so l u ç ã o sa l i n a f i si o l ó g i c a e se c o s c o m p ap e l d e f i l t r o , e, a p ó s p e sa d o s, f o r a m gu a r d a d o s a - 8 0 ° C a t é se u u so . A p ó s r e u n i d a u m a q u a n t i d a d e j u l ga d a su f i c i e n t e , o s h e l m i n t o s f o r a m h o m o g e n e i z a d o s e m á l c o o l e t í l i c o a - 7 0 ° C , se n d o e st a su sp e n sã o i n c u b a d a a - 8 0 ° C p o r u m a h o r a . A se gu i r a d i c i o n o u - se i gu al v o l u m e d e é t e r e t í l i c o a - 7 0 ° C , e a m i st u r a f o i n o v a m e n t e i n c u b a d a p o r 3 h o r a s a - 8 0 ° C . A p ó s est e p e r ío d o a m i st u r a f o i c e n t r i f u ga d a a 4 0 . 0 0 0 g a - 2 0 ° C p o r 4 5 m i n u t o s e m u m a c e n t r í f u g a r e f r i ge r a d a So r v a l l R C 2 - B , se n d o o so b r e n a d a n t e . d e sp r e z a d o . O se d i m e n t o f o i d e s se c a d o a - 2 0 ° C so b p r e ssã o r e d u z i d a p o r 2 4 h o r a s. O m a t e r i al se c o f o i su sp e n so e m t a m p ã o T r i s 0 , 0 5 M p H 8 , 0 c o m a z i d a só d i c a a 0 , 0 2 5 %, e a e x t r a ç ã o se d e u p o r 7 2 h o r a s a 4 ° C c o m a gi t a ç ã o c o n t ín u a . A m i st u r a f o i c e n t r i f u ga d a a 4 8 . 0 0 0 g p o r 6 0 m i n u t o s a 4 ° C . O se d i m e n t o f o i d e sp r e z a d o e o so b r e n a d a n t e f o i u sa d o n a s è t a p a s su b se q ü e n t e s c o m o e x t r a t o .
A d e t e r m i n a ç ã o d o t e o r d e p r o t e í n a s d o e x t r a t o f o i r e a l i za d a p e l o m é t o d o d e F o l i n 5 , e o
* T r a b a l h o r e aliz ad o c o m a u x í l i o d o C o n se l h o d e E n si n o p ar a G r a d u a d o s d a U . F . R. J . e C. N . Pq .
* * D e p a r t a m e n t o d e Im u n o l o gi a , In st i t u t o d e M i c r o b i o l o gi a d a U . F . R. J . , Ce n t r o d e Ciê n c i a s d a Sa ú d e , Cid a d e U n ive r si t á r ia , Il h a d o F u n d So , R i o d e J an e ir o, Br asil.
5 6 Re v. Soc. Br as. Me d . T r op. Vol. X N P 2
Fig. 1 — G e l - d i f u sã o d o e x t r a t o d e Cysticercus cellulosae c o n t r a a n t i - so r o o b t i d o e m c o e l h o , o b se r v a n d o - se c i n c o f a i x a s d e p r e cip it a çã o.
Fig. 2 — Im u n o e l e t r o f o r e se d o e x t r a t o d e C. cellulosae, e m q u e se p o d e m ve r n o ve a r c o s d e p r e ci p it a çã o.
Mar - Ab r / 7 6 Re v. Soc. Br as. Me d. T r op. 5 7
t e o r d e c a r b o i d r a t o s f o i e st i m a d o p e l a t é c n i c a d e M o l i sc h , c o m o d e sc r i t a p o r K a b a t 3. D o i s c o e l h o s f o r a m i m u n i z a d o s c o m 1 m g d e p r o t e í na d e st e e x t r a t o e m u l si o n a d o e m a d j u v a n t e c o m p l e t o d e Fr e u n d , e m 4 i n j e ç õ e s i n t r a m u s- c u l ar e s a i n t e r v a l o s d e 1 0 d i a s. D u a s se m a n a s a p ó s a ú l t i m a i n j e ç ão , o s c o e l h o s r e c e b e r a m u m a d o se d e r e f o r ç o ( se m a d j u v a n t e ) p o r vi a i n t r a m u sc u l a r , e f o r a m sa n g r a d o s a p ó s 5 d i a s. A ge l - d i f u sã o f o i r e a l i za d a se g u n d o O u c h t e r l o n y ® e a i m u n o e l e t r o f o r e se d e a c o r d o c o m Sc h e i d e g- ge r 1 3. O a gar f o i u l t e r i o r m e n t e d i a l i z a d o c o n t r a so l u ç ã o sa l i n a f i si o l ó g i c a e c o r a d o c o m A m i d o s- c h w ar t z.
R E SU L T A D O S
O s r e su l t a d o s o b t i d o s c o n st a m d a s F i g u r a s 1, 2 e 3. Po d e - se o b se r v a r q u e n a ge l - d i f u sã o e vi d e n c i o u - se a p r e se n ç a d e 5 f a i x a s d e p r e c i p i t ação, q u e n a i m u n o e l e t r o f o r e se se d e sd o b r a r am e m n o v e si st e m a s d e p r e c i p i t a ç ã o . A m ai or i a d a s f r a ç õ e s e v i d e n c i o u d e sl o c a m e n t o a n ó d i c o na e l e t r o f o r e se , e m b o r a u m a f r a ç ã o t i ve sse d e m o n st r a d o m o b i l i d a d e c a t ó d i c a .
O e x t r a t o d e
C. cellulosae
o b t i d o se g u n d o a t é cn i ca d e sc r i t a p o ssu í a u m t e o r p r o t é i c o d e 1, 08 m g/ m l e d e c a r b o i d r a t o s d e 0 , 4 3 m g/ m l .D I SC U SSÃ O
O f r a c i o n a m e n t o d o s a n t í g e n o s p a r a si t á r i o s é a ssu n t o d a m a i o r i m p o r t â n c i a , n ã o a p e n a s d e v i d o às i m p l i c a ç õ e s q u e p o ssu i n a c a r a c t e r i z a ção d o c o m p l e x o a n t i g ê n i c o d o s c e st ó d i o s, m a s
so b r e t u d o na a v a l i a ç ã o d o s a n t íg e n o s f u n c i o n a i s d e sc r i t o s p o r So u l sb y 14 e n o i so l a m e n t o d e f r a ç õ e s p u r i f i c a d a s. Est a s f r a ç õ e s p o d e m v i r a a ssu m i r p ap e l i m p o r t a n t e n a t a x o n o m i a d o s c e st ó d i o s, a l é m d e p o t e n c i a l m e n t e p o d e r e m v i r a r e so l v e r o p r o b l e m a d a r e a t i v i d a d e c r u z a d a 1 2 . Est e e st u d o m o st r a q u e u m m í n i m o d e 9 f r a ç õ e s p o d e m sèr i d e n t i f i c a d a s n o e x t r a t o d e
Cysticercus cellulosae.
O f r a c i o n a m e n t o u l t e r i o re i so l a m e n t o d a s v á r i a s f r a ç õ e s sã o e t a p a s a se r e m c o b e r t a s e m f u t u r o p r ó x i m o .
A p e sa r d a s d i f e r e n ç a s d e m e t o d o l o gi a , est e t r a b a l h o c o n f i r m a o s a c h a d o s d e M a d d i so n e c o l s. 6 n o q u e d i z r e sp e i t o ao n ú m e r o d e si st e m a s a n t íg e n o - a n t i c o r p o n a ge l - d i f u sã o e à m o b i l i d a d e e l e t r o f o r é t i c a d a s f r a ç õ e s d o e x t r a t o . A c r e sc e n t a m - se o s a c h a d o s d a i m u n o e l e t r o f o r e se , a i n d a n ã o 'd e sc r i t o s a t é e n t ão .
Po r se t r a t a r d e a ssu n t o m u i t o p o u c o e st u d a d o so b e st e p r i sm a , n o v o s e st u d o s são d e se j á vei s, n o se n t i d o d e m e l h o r se d e f i n i r a c o m p o si ç ã o a n t i gê n i c a d o p a r a si t a : 1) d i a gn ó st i c o , j á q u e c o m a n t í g e n o s p u r i f i c a d o s p o d e r - se - i a p r o ve r t e st e s d i a g n ó st i c o s m a i s se n sív e i s e e sp e c í f i c o s; 2 ) e st u d o d a p a t o ge n i a d a d o e n ç a , n o se n t i d o d e se i n d i v i d u a l i z a r o s a n t íg e n o s f u n c i o n a i s e se u p ap e l n a s d i v e r sa s m a n i f e st a ç õ e s d a d o e n ç a ; 3 ) i m u n o t e r a p ê u t i c o , e st ar i a a b e r t a a p o ssi b i l i d a d e d e se f a ze r e m r e l a ç ã o à c i st i c e r c o - se u m a d e sse n si b i l i z a ç ã o c o m a n t í g e n o s p u r i f i c a d o s, v i sa n d o a t i n gi r f i n a l i d a d e c o m p a r á v e l à q u e l a o b t i d a na h i d a t i d o se . O e f e i t o d r a m á t i c o d o s c o r t i c o st e r ó i d e s n a n e u r o c i st i c e r c o se são u m i n d i c a d o r e m b o r a i n d i r e t o d a p a r t i c i p a ç ã o d e f e n ô m e n o s i n f l a m a t ó r i o s, c e r t a m e n t e d e n a t u r e z a i m u n e , n e st a e n t i d a d e .
SUMMARY
The author presents the results obtained with gel-diffusion and
immunoeletrophore-sis to detect the antigenic composition o f
Cy st i c e r c u s c e l l u l o sae /5 and 9 antigenic
fractions were obtained respectively with gel-diffusion and immunoeletrophoresis. The
author points o u t that more detailed studies must be carried o u t in order to determine
the real antigenic composition o f the parasite.
R E F E R Ê N C I A S B I B L I O G R Á F I C A S
1. D I X O N , H . B . F . & H A R G R E A V E S , W . H . — Cy st i c e r c o si s
(Taenia solium ) —
A f u r t h e r t e n y e a r s st u d y c o v e r i n g 2 8 4 c ase s.Quart.
J. Med.
7 5 : 1 0 7 - 1 1 8 , 1 9 4 4 .2. D I X O N , H . B . F . & L I P SC O M B , F . M . - Cy st i c e r c o si s: a n a n a l y si s a n d f o l l o w - u p o f 4 5 0 cases.
Spec. Rep. Ser. Med. Res. Coun.
( L o n d o n )
2 9 9
:vi + 5 8 , 1 9 6 1 .3. K A B A T , E. A . & M A V E R , M . M . - Ex p e r i m e n t a l I m m u n o c h e m i st r y , Ch a r l e s C. T h o - m a s Co . , 2 n d ed. , 1 9 6 1 .
4 . L A N G E , O . — O l í q u i d o c e f a l o r a q u i d i a n o na c i st i c e r c o se d o si st e m a n e r v o so c e n t r a l .
Re v. Neuroi. Psychiat. S. Paulo. 2 :
2 - 1 5 ,58 Re v. Soc. Bras. Me d . T r op. V o l. X N P 2
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Chem. 193:
2 6 5 - 2 7 3 , 1 9 5 1 . 6. M A D D I SO N , S. E. , W H I T T L E , H . & E L S-D O N - D E W , R. — T h e a n t i ge n s o f t ap e - w o - r m s - S.
A fr. J. Sei. 5 7 213-211,
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Arq. Neuropsiq. (S. Paulo) 15:
1 8 3 - 1 8 9 ,1 9 5 7 .
8. O U C H T E R L O N Y , O. - Di f f u si o n - i n - ge l m e t h o d s f o r i m m u n o l o g i c a l a n a l y si s —
Ann. Allergy 5:
1 - 7 8 , 1 9 5 8 .9. P E SSO A , S. B . — Pa r a si t o l o g i a M é d i c a , 5 ? ed. Ed . G u a n a b a r a — K o o g a n , R i o d e J a n e i r o , 1 9 5 8 .
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Ann. Trop. Med. Parasito!. 60:
1 5 9 - 1 6 4 ,1 9 6 6 .
11. P O W E L L , S. J. , P R O C T O R , E. M . , W I L - M O T , A . J . & M A C L E O D , I. N . - C y st i c e r c o si s a n d e p i l e p sy i n A f r i c a n s: a c l i n i c a i a n d se r o l o gi c a l st u d y .
Ann. Trop. Med.
Parasito!.
5 0 : 1 5 2 - 1 5 8 , 1 9 6 6 .12 . P R O C T O R , E. M . , P O W E L L , S. J . & E L S- D O N - D E W , R. — T h e se r o l o gi c a l d i a g n o si s o f c y st i c e r c o si s.
Ann. Trop. Med. Parasito!.
5 0 : 1 4 6 - 1 5 1 , 1 9 6 6 .
1 3. S C H E I D E G G E R , J. J. — U n e M i c r o - m é t h o - d e d e l 'i m m u n o - e l e c t r o p h o r è se .
Int. Arch.
Allergy
7 : 1, 0 3 - 1 1 0 , 1 9 5 5 .14. S O U L SB Y , E. J . L . — T h e n a t u r e a n d o r i g i n o f t h e f u n c t i o n a l a n t i g e n s i n h e l m i n t h i n f e c t i o n s —
Ann. N. Y. Acad. Sei. 113:
4 9 2 - 5 0 9 , 1 9 6 3 .
