Prevalência da cárie dentária e presença de bactérias cariogénicas no dorso lingual Estudo seccional cruzado

Revista

Portuguesa

de

Estomatologia,

Medicina

Dentária

e

Cirurgia

Maxilofacial

w w w . e l s e v i e r . p t / s p e m d

Investigac¸ão

Prevalência

da

cárie

dentária

e

presenc¸a

de

bactérias

cariogénicas

no

dorso

lingual

– Estudo

seccional

cruzado

João

Galrão

_,

_Luís

_Proenc¸a

_e

_Helena

_Barroso

a_{MestreemMedicinaDentária,InstitutoSuperiordeCiênciasdaSaúdeEgasMoniz,Almada,Portugal}

b_{ProfessorAssociado,InstitutoSuperiordeCiênciasdaSaúdeEgasMoniz;CentrodeCiênciasMoleculareseMateriais,Faculdadede}

CiênciasdeLisboa,Lisboa,Portugal

c_{ProfessoraAssociada,InstitutoSuperiordeCiênciasdaSaúdeEgasMoniz;URIA-CPM,FaculdadedeFarmáciadeLisboa,Lisboa,}

Portugal

informação

sobre

o

artigo

Historialdoartigo: Recebidoa20dejaneirode2011 Aceitea19denovembrode2011 On-linea4dejaneirode2012 Palavras-chave: Dorsolingual Microrganismos ÍndiceCPO-D Streptococcusmutans Lactobacillusspp.

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e

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u

m

o

Objetivos:Pesquisaequantificac¸ãodemicrorganismosnodorsolingualdeindivíduoscom altoebaixoíndicedeCPO-D.

Materiaisemétodos:Oestudoefetuadoenvolveu50indivíduos,avaliadosquantoaosseus índicesdeCPO-D,pormeiodeumexameclínico,separadosemdoisgrupos,altoíndice decárieebaixoíndicedecárie,de25elementoscada.Emcadaindivíduofoipesquisadaa presenc¸ademicrorganismosnodorsodalíngua,recorrendoameiosdeculturaespecíficos (ColumbiaAgar,MSA,MSBeRogosaAgar).Osmicrorganismosisoladosforamidentificados equantificados.Osresultadosobtidosforamalvodeanáliseestatísticainferencial.

Resultados: Osresultadosobtidosmostraramumarelac¸ãopositivaentreosvaloresdos Strep-tococcusmutansedeLactobacillussppcomindivíduoscomCPO-Delevados(p<0,001).

Conclusão:Osdadosobtidosnesteestudodemonstramqueodorsolingualéumimportante nichodebactérias,nomeadamentemicrorganismoscariogénicos.

©2011SociedadePortuguesadeEstomatologiaeMedicinaDentária.Publicadopor ElsevierEspaña,S.L.Todososdireitosreservados.

Prevalence

of

dental

caries

and

cariogenic

bacteria

in

tongue

dorsum

-Cross

sectional

study

Keywords: Tonguedorsum Microorganisms DMFT Streptococcusmutans Lactobacillusspp.

a

b

s

t

r

a

c

t

Objective:Identificationandquantificationofmicroorganismsinthetonguedorsumin sub-jectswithhighandlowlevelofDMFT.

Materials and methods: The study involved50 subjects assessed fortheir DMFT levels, through a clinicalexamination, separated intotwogroups of 25 elementseach, being one groupa high prevalenceof dentalcaries and the other a low prevalenceof den-talcaries.Ineachindividualthepresenceofmicroorganismsinthetonguedorsumwas determined, using specific culture media (Columbia Agar, MSA, MSB e Rogosa Agar).

∗ _{Autorparacorrespondência.}

Correioeletrónico:Joaogalrao@netcabo.pt(J.Galrão).

1646-2890/$–seefrontmatter©2011SociedadePortuguesadeEstomatologiaeMedicinaDentária.PublicadoporElsevierEspaña,S.L.Todososdireitosreservados.

Theisolatedmicroorganismswereidentifiedandquantified.Inferentialstatisticalanalysis wasperformedontheexperimentaldata.

Results:TheresultsshowedapositiverelationshipbetweenthevaluesofStreptococcusmutans

andLactobacillusspp.withsubjectswithahighDMFT(p<0,001).

Conclusion:Thedatafromthisstudydemonstratethatthebackofthetongueisanimportant nicheofbacteria,includingcariogenicmicroorganisms.

©2011SociedadePortuguesadeEstomatologiaeMedicinaDentária.PublishedbyElsevier España,S.L.Allrightsreserved.

Introduc¸ão

Odorsodalínguarepresentaumdosmaiscomplexosnichos ecológicoshumanos,sendoque,aproximadamenteumterc¸o dosmicrorganismos,quehabitamacavidadeoral,se encon-trasóaoníveldodorsolingual1_{.Acomposic¸ãobacterianada}

superfícielingualécomplexaededifícilcaracterizac¸ãodevido aofactodeumindivíduosaudávelapresentaremmédia100 a 200 espécies diferentes, indicando umaheterogeneidade substancialentreindivíduos2_{.Odorsodalínguaformauma}

zonaecológicaúnica,comassuascriptasepapilas,que pro-videnciamumasuperfícieamplafavorecendoaacumulac¸ão deresíduosoraisedemicrorganismos.Microbiologicamente, constituiumimportantereservatóriobacteriano,funcionando assim,comoumfatordeterminanteaoníveldacolonizac¸ão da superfície dentária3–5_{. As investigac¸ões feitas à origem}

dosmicrorganismos na saliva,concluem quegrande parte desses microrganismos emanam da língua e, emgeral, os microrganismosdalínguainfluenciamafloradetodaa cavi-dadeoral6_.

Apesardadescamac¸ão contínuadoepitéliodalíngua,o dorsoraramenteseapresentalivredeestripesde Staphylococ-cusedeStreptococcus.Estesmicrorganismospodemcompor até90%damassabacteriananalíngua1,4,7_.

DentrodafamíliadosStreptococcuséimportanterealc¸aro grupodosStreptococcusviridans,queenglobaquatroconjuntos filogenéticos:mitis,mutans,salivariuseogrupoanginosusou

milleri.Algumasdessasbactériasestãoimplicadasemdoenc¸as oraiscomoacárieeaperiodontite,sendoestasasinfec¸ões bacterianasmaiscomunsemhumanos8_.

Asprincipais espécies bacterianas associadasao desen-volvimentodacárie(bactériascariogénicas)sãoStreptococcus mutans(S.mutans),eLactobacillusspp.9–12_{.Estasespéciesestão}

intimamenteligadas aosíndicesde cáriedeum indivíduo, apresentandoumaassociac¸ãopositivaentreosseusníveise aaltaprevalênciadecáries13–15_.

OS.mutanséconsideradoporalgunsautorescomosendo umorganismoespecíficodascáriesdentáriaseconstituiuma das bactérias com maior poder cariogénico devido à sua grandecapacidadeacidogénica13,14,16,17_{.Habitanormalmente}

nassuperfíciesdentárias,mastemsidoencontradonoutros nichos,taiscomoodorsodalíngua6,18,19.

Existemàvoltade100espéciesdeLactobacillusealgumas dessasespécies habitamvárias zonas donossoorganismo, como por exemplo, o trato gastrointestinal e o trato uro-genitalfeminino,ondedesempenhamumpapelimportante na saúde geral do hospedeiro, funcionando como micror-ganismosprobióticos.Emcontraste,nacavidadeoral,estas bactériasestãoamplamenteimplicadasnodesenvolvimento

da cárie dentária. Os estudos demonstram que aparecem duranteosprimeirosanosdevidaeestãopresentesem ele-vadosnúmerosnasaliva,dorsodalíngua,namucosaorale palato20,21_{.OLactobacillus,talcomooS.mutans,exibecertos}

trac¸oscariogénicos,taiscomo oalto potencialacidogénico, libertandograndesquantidadesdeácidolático,diminuindoo pHdomeioatéaopontodeinibirocrescimentodeorganismos menosácidotolerantes22,23_.

É importante salientarque outras bactérias orais como

Actinomycesisraelii,Streptococcusmitis,Streptococcusmillerie Veil-lonellatambémpossuemalgumpotencialcariogénicotendojá sido encontradasassociadasalesõesde cárie16,24_{. Os}

estu-dosefetuadosàfloraresidenteda cavidadeoral,concluem queváriasbactériasorais,paraalémdoS.mutansedos Lac-tobacillus,sãosuficientementeacidogénicasparateremefeito cariogénico,ouseja,estasbactériastrabalhandoemconjunto enummeio ricoemhidratosdecarbono,possuema capa-cidade de baixarem o pH do meio para níveis críticos de desmineralizac¸ãodoesmaltedosdentes,iniciandoassimo processodacárie,porémaumataxamaislenta16,25_.

A cárie dentária éa doenc¸a com maior prevalência no mundointeiro,étransmitidalogonosprimeirosanosdevida erepresentaumproblemasignificativodesaúdepúblicaem algunspaíses.Encontra-sepresenteemtodasaspopulac¸ões domundoesenãofortratadaprovocaadestruic¸ãodos teci-dosdurosdodente(esmalteedentina),sendoaprincipalrazão paraaperdadepec¸asdentárias23,26–28_.

Comesteestudopretendeu-seidentificarquaisos micror-ganismos presentes no dorso lingual em indivíduos com elevadoíndicedeCPO-Deemindivíduosdebaixoíndicede CPO-D.

Materiais

e

métodos

Foi efetuado um estudo seccional cruzado que decorreu durante3meses(maio,junhoejulho).

Esteestudoenvolveu50indivíduos.Estesforamavaliados quantoaosseusníveisdeCPO-Deagrupadosemdoisgrupos distintos,de25elementoscada.OgrupoAformadopelo con-juntodeindivíduoscomaltoíndicedecárie,CPO-Dsuperior a3,eogrupoBconstituídopeloconjuntodeindivíduoscom baixoíndicedecárie,CPO-Dinferior3.Foramexcluídos,neste estudo,indivíduosportadoresdequalquerdoenc¸asistémicae queestivessemsoboefeitodeantibióticos.

Foramestudadosmaisindivíduos,masapenasestes esta-vamdeacordocomoscritériosdeinclusão

Os50indivíduosestudadosrepresentam1%dosutentesda clínicanoperíododoestudo.

EsteestudofoiaprovadopelaComissãodeÉticado Insti-tutoSuperiordeCiênciasdaSaúdeEgasMoniz.

TodososparticipantesassinaramumTermode Consenti-mentoInformado.

Variáveisdeestudo Protocoloclínico

Os indivíduos estudados foram avaliados quanto aos seus índicesdecáriepormeiodeumexameclínico.

Odiagnóstico das lesões de cárieteve emconta os cri-térios da OMS, tendo sido apenas realizado um exame clínico(visual etátil),não seefetuando quaisquerexames radiológicos29_.

Protocololaboratorial

Apósoexameclínicofoifeitaarecolha,comumazaragatoa estéril,deumaamostradodorsodalíngua,aoníveldosulco medianodaparteanteriordalíngua.Aamostrafoiguardada numtubodeensaiocommeiodetransporteBHI(BrainHeart Infusion)etransportadaparaolaboratório.

As amostras foram inoculadas em meios de cultura: ColumbiaAgar(bioMérieux),MSA(Mitis-Salivarius-Agar),MSB (Mitis-Salivarius-Bacitracina) e Rogosa Agar29,30_{. Os 3}

pri-meiros foram incubados em aerobiose e em atmosfera de anaerobiose,a37◦Cdurante48h,eoRogosaagarfoiincubado emmicroaerofilia,a37◦Cdurante48h.

Identificac¸ão das amostras. Após a incubac¸ão os microrga-nismosisoladosforam diferenciadosvisualmente, peloseu aspeto e pela sua atividade hemolítica. O número de ufc foi registado numa ficha de participante. Posteriormente, foram re-isoladas colónias em meio Columbia Agar, para efetuar a sua identificac¸ão. Estas foram incubadas nas mesmas condic¸ões de temperatura e atmosfera do seu isolamento.

Foiefetuadacolorac¸ãodeGramepesquisadaapresenc¸a daenzimacatalaseemtodososmicrorganismos.Quandoesta últimaseencontravapresente,omicrorganismofoire-isolado emmeioChapmanAgar(bioMérieux)efoi efetuadooteste decoagulase,comofimdedespistarumapossívelestirpede

Staphylococcusaureuscoagulasepositivo.

Posteriormente, procedeu-seà identificac¸ão dos micror-ganismos por meio de galerias de identificac¸ão Api®

(bioMérieux).ParaasestripesdeEstreptococosutilizou-seo testeApi20Strep®_{,para asbactérias anaeróbiasutilizou-se}

otesteApi20A®_{,eparaosbacilosGramnegativos}

utilizou-seo testeApi 20 E®_{. Para aidentificac¸ão dosLactobacilos}

utilizou-seotesteApi50CH®_.

Análiseestatística

Osdadosobtidosnestainvestigac¸ãoforamsubmetidosà aná-liseestatísticapeloprogramaPASWv18,utilizandométodos deestatísticadescritivaeinferencial(testesdoQui-Quadrado,

t-StudentedeMann-Whitney).Ostestesforamaplicados con-siderandoumníveldesignificânciade5%.

Tabela1–ValoresmédiosdeCPO-Dedeidades.

Valormédio Desviopadrão Grupo

CPO-D 13,44 7,14 A 0,96 1,14 B Idades 34,56 14,84 A 21,68 3,35 B

Resultados

Nopresenteestudofoiavaliadaumaamostrade50indivíduos, separadosemdoisgrupos:grupoAcomaltoíndicedeCPO-D egrupoBcombaixoíndicedeCPO-D.

A média dos valores de CPO-D do grupo A foi maior (13,44±7,14)queadogrupoB(0,96±1,14)(tabela1).

Comparativamenteàmédiadasidadesdosindivíduosem estudo,ogrupoAapresentouumvalormédio(34,56±14,84) maisaltodoqueogrupoB(21,68±3,35)(tabela1).

A nível microbiológico foram identificadas 19 espécies distintas numtotal de2,55x107 _{UFC/mlisoladas.A espécie}

bacteriana mais encontrada nas amostras foi o Strepto-coccus sallivarius, (32% das espécies encontradas) seguido doStreptococcusviridans(24%)edoStreptococcusmitis(14%).O

Streptococcusmilleri(13%)oLactobacillusspp(5%)eaPrevotella melaninogenica/oralis(3%),seguem-seàsbactériasanteriores. Comumapercentagemidênticade1%,encontram-seas espé-ciesStaphylococcusaureuseaGemellamorbillorum.Asrestantes espécies encontravam-se empercentagensinferiores a 1%. A espécie menos encontrada foi o Streptococcus anginosus

(fig.1).

Adicionalmente,foi tambémefetuadaumaanálise esta-tísticaaníveldocruzamentodasvariáveisdoexameclínico (índiceCPO-D),comosmicrorganismosisolados.

Na comparac¸ãodas variáveis foramutilizados ostestes estatísticosdoQui-Quadrado,t-StudenteMann-Whitneypara umníveldesignificânciade5%.

Os resultados referentes aos indivíduos portadores de

StreptococcusmutansetambémdeLactobacillusspp,mostram um número superior de indivíduos portadores com CPO-D elevado em comparac¸ão aos indivíduos portadores com CPO-Dbaixo(p<0,001)(tabela2).Nestesdadosconstatamos que76%dosindivíduoscomCPO-Delevadosãoportadores de Streptococcus mutansdivergindo dosvalores encontrados para os indivíduos com CPO-D baixo, que se situou nos 12% de indivíduos portadores.A nível dosLactobacillus spp

constata-seque96%dosindivíduoscomCPO-Dalto analisa-dossãoportadores,sendoqueosvaloresencontradospara os indivíduos com CPO-D baixo, foi de 48% de indivíduos portadores(tabela2).

Verificou-se ainda queos Lactobacillusspp seencontram em maior quantidade nos indivíduos com CPO-D elevado (4,70±0,30),comparandocomosdeCPO-Dbaixo(2,98±0,47) (p<0,001)(tabela3).

Discussão

Os resultados obtidos indicam uma maior prevalência de bactérias no dorso lingual emindivíduos com CPO-D alto. Nesteestudoverificou-sequeodorsolingualfuncionacomo

Tabela2–N◦indivíduosportadores/classedeCPO-D.

CPO-Delevado(n=25) CPO-Dbaixo(n=25) p

Streptococcussallivarius 25(100%) 25(100%) -Streptococcusmitis 23(92%) 25(100%) -Streptococcusmilleri 25(100%) 19(76%) -Streptococcusviridans 23(92%) 25(100%) -Streptococcusmutans 19(76%) 3(12%) <0,001a Lactobacillusspp 24 (96%) 12 (48%) <0,001a a _{TestedoQui-Quadrado.}

importantenichoparaváriasestirpesbacterianasincluindo estirpescariogénicas,comoéocasodosStreptococcusmutans

e dos Lactobacillus spp.. Este pode ser considerado um estudopiloto,cujos resultadospreliminares demonstrama importânciadenofuturoaprofundarestetemaeverificarse

estenichobacterianoteráinfluêncianodesenvolvimentoda cárie.

Osresultadosmostramqueonúmerodemicrorganismos isoladosnosindivíduoscomCPO-Delevadoé,nasuamaioria, superioraosdosindivíduoscomCPO-Dbaixo.Estesdadosvão

Prevotella melaninogenica/oralis Streptococcus viridans Staphylococcus aureus Streptococcus equinus Actinomyces meyeri/odontolyticus Streptococcus constellatus Streptococcus anginosus Streptococcus agalactiae Enterococcus faecalis Lactobacillus spp Streptococcus sallivarius Streptococcus milleri Gemella morbillorum Actinomyces naeslundii Streptococcus mitis Streptococcus oralis Streptococcus intermedius Streptococcus mutans Streptococcus bovis < 1% < 1% 1% 1% 33% 26% 14% 15% 6% 3%

Tabela3–Log(UFC/ml)/classedeCPO-D. CPO-Delevado Média±desvio padrão CPO-Dbaixo Média±desvio padrão p Streptococcussallivarius 4,77±0,52 4,57±0,58 0,211a Streptococcusmitis 4,43±0,50 4,24±0,43 0,174a Streptococcusmilleri 4,49±0,55 4,21±0,38 0,053a Streptococcusviridans 4,58±0,63 4,45±0,52 0,434a Streptococcusmutans 2,76±0,61 2,55±0,13 0,885b Lactobacillusspp 4,70±0,30 2,98±0,47 <0,001b a _{Testet-Student.} b _{TesteMann-Whitney.}

aoencontrodosresultadosencontradosemoutrosestudos quedemonstramapresenc¸adeumaumentode microrganis-mos,especialmentenosvaloresdosStreptococcusmutansenos

LactobacillussppemindivíduoscomCPO-Delevados15,19,25,32_.

Poroutrolado,existemestudosquemostramqueaescovagem dalínguacontribuiuparaadiminuic¸ãodosniveisde Strepto-coccusmutansedeLactobacillusspp.2,19_.

A existência de significado estatístico nas diferenc¸as encontradasnosindivíduosportadoresdeStreptococcusmutans

edeLactobacillussppcomdiferentesCPO-Dcorroboramcom aliteraturacorrente, queidentificaesses dois microrganis-moscomo principais agentes cariogénicos.Emrelac¸ão aos outrosmicrorganismos,aausênciadesignificadoestatístico nasdiferenc¸asencontradasnassuasquantidades, parecem indicarapoucarelac¸ãoexistenteentreosseusníveiseoíndice deCPO-D.Na verdade,aindanãoseencontrabemdefinido asuacontribuic¸ãopara odesenvolvimentoda cárie dentá-ria.Alguns estudos16,31 _{evidenciamo potencial cariogénico}

destesmicrorganismos,demonstrandoasuacapacidade aci-dogénica,comoéocasodoStreptococcusmitisedoStreptococcus milleri,mas pelocontrário,outrosestudos28,32 _caracterizam

essesmicrorganismoscomobenéficos, namedida que ocu-pamosnichosdosmicrorganismoscariogénicos,impedindo assimasuacolonizac¸ão.

Apequenarepresentatividadedaamostraeofactodeser umestudoretrospetivopermitemapenasmostrarqueodorso da línguaéumimportante nicho demicrorganismos. Para aferir da importância deste nicho para o desenvolvimento dacárie,sãonecessáriosestudosmaisaprofundados.Muito poucosesabesobreafloramicrobianadodorsolingual,por issoconsideramosqueesteestudopilotoéimportantecomo baseparanofuturosedelinearemestudosmaiscompletos.

Conclusão

Estesdadosapontamparaointeressedoestudododorso lin-gualnasaúdeoralecomotal,deverealc¸ar-seaimportânciada escovagemdalíngua,juntamentecomaescovagemdos den-teseousodofiodentáriocomoformaeficaznocombateda placabacterianaenaprevenc¸ãodacáriedentária.

Conflito

de

interesses

Osautoresdeclaramnãohaverconflitodeinteresses.

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