Introdução à Química Farmacêutica & Medicinal

Introdução à Química

Farmacêutica & Medicinal

Introdução à Química

Farmacêutica & Medicinal

http://www.farmacia.ufrj.br/lassbio

Laboratório de Avaliação e Síntese de Substâncias Bioativas

Eliezer J. Barreiro

Parte 3

Parte 3

Parte 3

Parte 3

Sumário

;

o FÁRMACO e o medicamento

&

benefício

social;

a QUÍMICA

Medicinal

;

DEFINIÇÃO

; Como nascem os fármacos?

O processo

de

descoberta

de

de

de

de

novos

fármacos

; o

berço

da Química Medicinal;

Ernest forneau

;

Alfred Burger

; a

linha do

TeMPO

da

; as

moléculas

pioneiras

;

alcaloides

;

MORFINA

; STREPTEASE molecular;

Os

fármacos

e o

Prêmio

Nobel;

Alexander

Fleming

;

Ernest Chain;

Howard FLOREY =

penicilina

;

bent Samuelsson;

Sune

bergstron

;

_John

VANE =

AAS; teoria das assinaturas;

James

Black e o propranolol;

A estrutura química

e a

atividade:

características estrutrais

dos F

ÁRMACOS

;

dissecação

molecular

; c

onc

e

ito

de

fragmento

molecular

;

as razões

moleculares

DA

ação

dos

fármacos

: sutis efeitos da

estrutura na atividade; pontos

farmacofóricos

, auxofóricos e

toxicofóricos;

o

PARADIGMA de

Fischer;

o centenário

modelo

chave-fechadura;

TIPOS

de interações

FÁRMACO

S-biorreceptores;

os alfabetos bioquímicos

; AS ligações

frágeis

: ligações-H;

Topografia

3D dos

BIORRECEPTORES;

QUÍMICA

COMPUTACIONAL;

QUEM são OS

biorreceptores

; reconhecimento MOLECULAR

;

SIMILARIDADE

MOLECULAR; as fases DA ação dos

FÁRMACOS

; FASE

farmacocinética (PK);

metabolismo

dos

fármacos

;

A origem

dos fármacos: o papel dos

produtos

NATURAIS;

Digoxina

,

o

décano

dos FÁRMACOS

Planejamento

RACIONAL

;

abordagem fisiológica

;

CONCEITO

de composto-

PROTÓTIPO

; Estratégias

de

desenho

_MOLECULAR

;

MOLÉCULAS

inteligentes

;

simplificação

molecular

;

hibridação

molecular;

biososterismo;

Do BOLOR aos fármacos bilionários;

estatinas

;

OS

FÁRMACOS

do

século

21

:

fÁRMACOS

multi-alvos;

T

inibes

;

epílogo

;

Blog

de

I

m

Sítio de reconhecimento molecular

Biorreceptor

Fármaco

Estrutura 3D do alvo terapêutico

O O O S O O HN CH₃

Sítio da COX-2

O

CH

CH

H

H

H

O

_CH

progesterona

17

1

8

14

CH₃ H CH₃ O _{H H} O CH₃ H 19 18 17 7 3 1 20 21 A B C D B/C C/D trans Esqueleto ciclopentano peridrofenantreno C_{19 C} 21

similaridade molecular

1,41 A

PGF

em cães provoca

severa broncoconstrição

PGF

em cães provoca

forte broncodilatação

CO

H

CH

OH

HO

H

O

PGF

H

PGE

PGF

Fase farmacocinética

(

PK

)

Biofase

Biorreceptor

Fase farmacodinâmica

(

PD

)

Efeito terapêutico

As fases de ação dos fármacos….

SciELO - Scientific Electronic Library Online

www.scielo.org/

30/01/2014

A D Buss & MS Butler

(Eds)

V Cechinel-Filho (Editor)

natural product-derived drugs

Inter-alia:

GA Cordell, MD Colvard , J. Nat. Prod. 2012, 75, 514;

D Newman, GM Cragg, J. Nat. Prod. 2012, 75, 311;

DGI Kingston, J. Nat. Prod, 2011, 74, 496; EJ Barreiro, VS Bolzani,

Quim. Nova 2009, 32, 679

Os produtos naturais e os fármacos

2009

Digoxina

cardenolidos

Digitalis purpurea

1542 – Leonhard Fuchs Digitalis purpurea

1785 – William Withering, UK

1875 – Johann Schmiedeberg isola DGX

1928 – Sydney Smith, Burroughs Welcome

1930 – Adolf OR Windaus, Un. Göttingen, AL

1965 – JC Skou*/O Hansen (Na

_/K

_-ATPase)

Digitalis lanata

Dedaleira

Plantaginaceae

Ebers Papyrus

& _{H Zhang et al., Digoxin and other cardiac glycosides inhibit hypoxia inducible factor-1 (HIF-1a) synthesis} and block tumor growth, PNAS2008, 105, 19579;

* JR Huh et al, Digoxin and its derivatives suppress T(H)17 cell differentiation …, Nature 2011, 472, 486

bufanolidos

Sumário

;

o FÁRMACO e o medicamento

&

benefício

social;

a QUÍMICA

Medicinal

;

DEFINIÇÃO

; Como nascem os fármacos?

O processo

de

descoberta

de

de

de

de

novos

fármacos

; o

berço

da Química Medicinal;

Ernest forneau

;

Alfred Burger

; a

linha do

TeMPO

da

; as

moléculas

pioneiras

;

alcaloides

;

MORFINA

; STREPTEASE molecular;

Os

fármacos

e o

Prêmio

Nobel;

Alexander

Fleming

;

Ernest Chain;

Howard FLOREY =

penicilina

;

bent Samuelsson;

Sune

bergstron

;

_John

VANE =

AAS; teoria das assinaturas;

James

Black e o propranolol;

A estrutura química

e a

atividade:

características estrutrais

dos F

ÁRMACOS

;

dissecação

molecular

; c

onc

e

ito

de

fragmento

molecular

;

as razões

moleculares

DA

ação

dos

fármacos

: sutis efeitos da

estrutura na atividade; pontos

farmacofóricos

, auxofóricos e

toxicofóricos;

o

PARADIGMA de

Fischer;

o centenário

modelo

chave-fechadura;

TIPOS

de interações

FÁRMACO

S-biorreceptores;

os alfabetos bioquímicos

; AS ligações

frágeis

: ligações-H;

Topografia

3D dos

BIORRECEPTORES;

QUÍMICA

COMPUTACIONAL;

QUEM são OS

biorreceptores

; reconhecimento MOLECULAR;

SIMILARIDADE

MOLECULAR; as fases

DA ação dos

FÁRMACOS

; FASE farmacocinética (PK);

metabolismo

dos

fármacos

;

A

origem

dos fármacos: o papel dos

produtos

NATURAIS;

Digoxina

,

o

décano

dos

FÁRMACOS

Planejamento

RACIONAL

;

abordagem fisiológica

;

CONCEITO

de

composto-

PROTÓTIPO

; Estratégias

de

desenho

_MOLECULAR

;

MOLÉCULAS

inteligentes

;

simplificação

molecular

;

hibridação

molecular;

biososterismo;

Do BOLOR aos fármacos

bilionários;

estatinas

;

OS FÁRMACOS

do

século

21

:

fÁRMACOS

multi-alvos;

T

inibes

;

epílogo

_;

_Blog

_de

_FARMACOS

_e

_suas

_descobertas

_;

F

I

m

.

Estratégias de desenho

molecular

É a

primeira

substância

de

uma

série

congênere

– i.e.

estruturalmente

relacionada

–

com

atividade

em

modelos

farmacológicos

validados

in vivo

-

que

pode

vir a ser

otimizado

por

modificações

moleculares

subsequentes,

planejadas

.

Otimização

do

Estratégias de desenho

molecular

Sumário

;

o FÁRMACO e o medicamento

&

benefício

social;

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Medicinal

;

DEFINIÇÃO

; Como nascem os fármacos?

O processo

de

descoberta

de

de

de

de

novos

fármacos

; o

berço

da Química Medicinal;

Ernest forneau

;

Alfred Burger

; a

linha do

TeMPO

da

; as

moléculas

pioneiras

;

alcaloides

;

MORFINA

; STREPTEASE molecular;

Os

fármacos

e o

Prêmio

Nobel;

Alexander

Fleming

;

Ernest Chain;

Howard FLOREY =

penicilina

;

bent Samuelsson;

Sune

bergstron

;

_John

VANE =

AAS;

James

Black e o propranolol;

A estrutura química

e a atividade:

características estrutrais

dos F

ÁRMACOS

;

dissecação

molecular

; c

onc

e

ito

de

fragmento

molecular

;

as razões

moleculares

DA

ação

dos

fármacos

: sutis efeitos da estrutura na

atividade; pontos

farmacofóricos

, auxofóricos e

toxicofóricos;

o

PARADIGMA de

Fischer;

o centenário

modelo

chave-fechadura;

TIPOS

de interações

FÁRMACO

S-biorreceptores;

os alfabetos bioquímicos

; AS ligações

frágeis

: ligações-H;

Topografia

3D dos

BIORRECEPTORES;

QUÍMICA

COMPUTACIONAL;

QUEM são OS

biorreceptores

; reconhecimento MOLECULAR;

SIMILARIDADE

MOLECULAR; as fases

DA ação dos

FÁRMACOS

; FASE farmacocinética (PK);

metabolismo

dos

fármacos

;

A

origem

dos fármacos: o papel dos

produtos

NATURAIS;

Digoxina

,

o

décano

dos

FÁRMACOS

Planejamento

RACIONAL

;

abordagem fisiológica

;

CONCEITO

de

composto-

PROTÓTIPO

; Estratégias

de

desenho

MOLECULAR;

MOLÉCULAS

inteligentes

;

simplificação

molecular

;

hibridação

molecular;

biososterismo;

Do BOLOR

aos fármacos bilionários;

estatinas

;

OS FÁRMACOS

do

século

21

:

fÁRMACOS

multi-alvos;

T

inibes

;

epílogo

;

Blog

de

FARMACOS

e

suas

descobertas

;

F

I

m.

P

at

ent

e

obt

ida

LASSBio-294

Cardiotônicos vasoativos

Patent (USPTO) 7.091.238 (15/08/2006)

Mecanismos Alternativos para o Aumento do Inotropismo

Cardíaco

NH O CH₃ N

N

N

O

H

N

HN

OCH

H

C

N

N

O

H

N

N

Imazodana

Pimobendana

mirilnona

Piridinona

Piridazinona

Desenho estrutural

N

NH

O

N

N

N

NH

O

N

NH

O

zoom

acila

hidrazona

E. J. Barreiro, C. A. M. Fraga et al. “QuQuQuQuímica Medicinal de Derivados mica Medicinal de Derivados mica Medicinal de Derivados mica Medicinal de Derivados NNNN----AcilidrazônicosAcilidrazônicosAcilidrazônicosAcilidrazônicos, Prot, Prot, Prot, Protótipos de Agentes tipos de Agentes tipos de Agentes tipos de Agentes Antiinflamat

Antiinflamat Antiinflamat

Antiinflamatóriosriosriosrios, Analg, Analg, Analg, Analgésicos e sicos e Antisicos e sicos e AntiAnti----trombAnti trombtrombtrombóticosticos”, ticosticos QuQuQuQuímica Nova, 25mica Nova,mica Nova,mica Nova,252525, , , , 129-148 ( 2002).

ca.

56% overall yield

Síntese de LASSBio-294

Z-

isomer

_E

_-isomer

M. R. L. Santos, M. G. de Carvalho, R. Bráz-Filho, EEE.... JE JJ.... BarreiroJ BarreiroBarreiro, "Barreiro 1_{H and}13_{C of New}

Bioactive Isochromanylactylarylhydrazone Derivatives", MagnMagnMagnMagn.... ResonResonResonReson.... ChemChemChemChem.... 199819981998,,,, 361998 3636,,,,36 533.

L. F. C. C. Leite, EEEE.... JJJ.... BarreiroJ BarreiroBarreiroBarreiro, M. N. Ramos, J. B. P. da Silva, S. L. Galdino & I. R. Pitta, “Electron Impact Mass Spectrometry of Some 3-[3-(4-aryl)-1,2,4-oxadiazole-5-yl] acyl arylaldehyde Hydrazone derivatives”,SpectroscopySpectroscopySpectroscopySpectroscopy 2000, 141414, 115.14

Análise espectroscópica e por difração de Raios X da configuração relativa de

LASSBio-294

Kummerle, A. E.; Raimundo, J. M.; Leal, C. M.; Silva, G. S.; Balliano, T. A.; Pereira, M. A.; DeSimone, C. A.; Sudo, R. T.; Zapata-Sudo, G.; Fraga, C. A. M.; Barreiro, E. J. , Eur. J. Med. Chem. 2009, 44, 4004-4009.

P. C. Lima, L. M. Lima, K. C. M. da Silva, P. H. O. Léda, A. L. P. Miranda, C. A. M. Fraga & E. J. Barreiro, “Synthesis and Non-addictive Analgesic Activity of Novel N-acylarylhydrazones and Isosters, Derived from Natural Safrole”, Eur. J. Med. Chem., 35, 187 (2000).

N NH O N N N NH O O O N N NH O O O N N LASSBio-286 LASSBio-294 LASSBio-252 Imazodana

benzodioxola

(safrol)

C. L. M. Silva, F. Noël & E. J. Barreiro, “Vasodilatory Properties of LASSBio-294 and its dependence on cGMP increase”, Brit. J. Pharmacol., 235, 239 (2002).

100 µµµM de LASSBio-294µ

cGMP inhibitor

L-NAME (500 µµµµM, A) Indo, 10 µµµM, Bµ

Estudos de Toxicidade Aguda e Sub-aguda

A toxicidade sistêmica aguda e sub-aguda foi investigada em

ratos, por duas vias de administração, p.o. e i.p., nas doses de

1000 µ

µ

µ

µM/kg

e

73 µ

µ

µM/kg

µ

, respectivamente (i.p., administrando-se

2 vezes ao dia, durante 15 dias seguidos: ~

100 vezes superior à

ED

in vivo

).

Não se observaram efeitos

neurotóxicos em culturas

de neurônios hipocampais

de ratos, tratadas com

LASSBio-294 (500 µ

µ

µM).

µ

Efeito neuroprotetor

foi observado em < doses.

Não tem efeito letal, não provoca

letargia, não reduz a motilidade,

nem altera o pêso dos animais.

Não

provoca

alterações

na

contagem de células sanguíneas,

hematócrito, nem altera a taxa de

glicose,

uréia,

TGO,

TGP,

creatinina.

Não altera histopatologicamente

orgãos vitais, tais como fígado,

pulmão, SNC.

Estratégias de desenho

molecular

hit/ligante

validação precoce do alvo-terapêutico

a = Introdução de grupos com diferente perfil de contribuição estereoeletrônica; b = Substituinte R na posição 6 do anel benzodioxola – efeitos estereoeletrônicos;

c = Alquilação do grupamento farmacofõrico – Modificação da habilidade como doador de ligação de H; Alterações conformacionais;

d = Introdução de substituintes alquila – Efeitos estéricos e/ou conformacionais; e = Redução da dupla ligação imínica – Modificação da extensão de conjugação do

grupamento farmacofórico; aumento da liberadade conformacional;

f = Troca do anel tiofeno por núcleos isostéricos com diferentes contribuições eletrônicas; g = Introdução de grupos com diferente perfil de contribuição estereoeletrönica.

“lead optimisation is defined as those activities that are required to optimise a screening hit to a pre-clinical candidate. Thus, lead optimisation invariably comprises synthetic and medicinal chemistry, biochemical and functional screening, computer-aided drug design, in vitro and in vivo pharmacokinetic studies and physicochemical (e.g. solubility, partition coefficient and acidity) studies”

Baxter, A. D. & Lockey, P. M. (2001) Drug Discov. World 2, 9–15.

Novos Análogos do Protótipo Cardioativo LASSBio-294

ESTUDO DO MECANISMO DE AÇÃO

CEREP

Diversity

Profile

101

Alvos Moleculares

Receptores de

Adenosina A

IC

₅₀

= 9.5 µM

IC

₅₀

= 4.6 µM

Receptor A

_2A

PDB 3EML

V.Jaakola et al. Science 2008, 322, 1211

ML Ruiz, Y-H Lim, J Zheng, Adenosine A2A Receptor as

a Drug Discovery Target, J. Med. Chem. 2014, 58,000

GPCR

In vitro

pharmacology

44

LASSBio-294 e LASSBio-897 são ligantes de receptores de adenosina A

LASSBio-294

A_2A IC₅₀ = 4,6 µM A_2A IC₅₀ = 9,5 µM

CEREP STUDY NUMBER 18080 / FINAL REPORT

∆ C=S ~1.57 A

O

O

O

N

H

N

S

3

…mais um exemplo dos

efeitos sutis da estrutura

na atividade.

LASSBio-294

Novo protótipo de

fármaco cardioativo*

*European Patent EP1532140; WO-0078754

*US Patent US7091238-15/08/2006

Thienylhydrazone with digitalis-like properties (positive inotropic effects)

Estruturalmente simples; rota de síntese com >55% de rendimento global,

empregando matéria-prima acessível; escalonável até

5,0

kg (18,2 M);

Potentes

propriedades

inotrópicas

positivas

&

vasodilatadoras;

também

neuroprotetoras; ativo por via oral; boa biodisponibilidade;

Novo mecanismo farmacológico de ação: ligante de receptores adenosinérgicos;

Sem citotoxicidade, genotoxicidade, nem toxicidade sistêmica (aguda e sub-aguda) em

duas vias de administração (p.o. e i.p.*) nas doses

1000 µ

µ

µ

µM/kg

e

73 µ

µ

µ

µM/kg

,

respectivamente;

*i.p.= 2 vezes ao dia, durante 15 dias seguidos: ~

100 vezes ED

in vivo

.

C

₁₃

H

₁₀

N

₂

O

₃

S

1. RC Braga, VM Alves, CAM Fraga, EJ Barreiro, V de Oliveira, CH Andrade, Combination of docking, molecular dynamics and quantum mechanical calculations for metabolism prediction of 3,4-methylenedioxybenzoyl-2-thienylhydrazone, J. Mol. Model., 18, 2065–2078 (2012).

2. RC Braga, ACB Tôrres, CB Persiano, RO Alves, CAM Fraga, EJ Barreiro, V de Oliveira, Determination of the cardioactive prototype LASSBio-294 and its metabolites in dog plasma by LC–MS/MS:

Application for a pharmacokinetic study, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 55, 1024-1030 (2011). (Times cited: 2)

3. A G M Fraga, L L da Silva, CAM Fraga, EJ Barreiro, CYP1A2-mediated biotransformation of cardioactive 2-thienylidene-3,4-methylenedioxybenzoylhydrazine (LASSBio-294) by rat liver

microsomes and human recombinant CYP enzymes, European Journal of Medicinal Chemistry ,46 349-355 (2011). (Times cited: 1)

4. DG Costa , JS da Silva, AE Kummerle, et al., LASSBio-294, A Compound With Inotropic and Lusitropic Activity, Decreases Cardiac Remodeling and Improves Ca2+ Influx Into Sarcoplasmic Reticulum After Myocardial Infarction, Am. J.Hypertension, 23, 1220-1227 (2010). (Times cited:3) 5. FCF Brito, AE Kummerle, C Lugnier , et al., Novel thienylacylhydrazone derivatives inhibit platelet

aggregation through cyclic nucleotides modulation and thromboxane A(2) synthesis inhibition, Eur .J. Pharmacol., 638 , 5-12 (2010). (Times cited: 4)

6. EOCarneiro, CH Andrade, RC Braga, et al., Structure-based prediction and biosynthesis of the major mammalian metabolite of the cardioactive prototype LASSBio-294, Bioorg. Med. Chem. Lett., 20, 3734-3736 (2010). (Times cited:4)

7. L Pol-Fachin, CAM Fraga, EJ Barreiro, et al., Characterization of the conformational ensemble from bioactive N-acylhydrazone derivatives , J. Mol. Graphics & Modelling, 28, 446-454 (2010).

8. G Zapata-Sudo, SL Pereira, HJV Beiral, et al., Pharmacological Characterization of (3-Thienylidene)-3,4-Methylenedioxybenzoylhydrazide: A Novel Muscarinic Agonist With Antihypertensive Profile, Am. J.Hypertension ,23, 135-141 (2010). (Times cited: 2 )

8. AE Kummerle, JM Raimundo, CM Leal, et al., Studies towards the identification of putative

bioactive conformation of potent vasodilator arylidene N-acylhydrazone derivatives , Eur. J. Med. Chem., 44, 4004-4009 (2009). (Times Cited: 16 )

9. AG Silva, G Zapata-Sudo, AE Kummerle, et al., Synthesis and vasodilatory activity of new

N-acylhydrazone derivatives, designed as LASSBio-294 analogues, Bioorg. Med. Chem, 13, 3431-3437 (2005). (Times Cited: 44)

10. H Gonzalez-Serratos, EFR Pereira, RZ Chang, et al., The thienylhydrazone, (2 '-thienylidene)3,4-methylenedioxvbenzoylhydrazine (LASSBio-294), develops fatigue resistance and has a positive inotropic effect in mammalian skeletal muscle, Biophys. J., 86, 225A-225A Suppl. (S 2004).

11. G Zapata-Sudo, RT Sudo, PA Maronas, et al., Thienylhydrazone derivative increases sarcoplasmic reticulum Ca2+ release in mammalian skeletal muscle, Eur. J. Pharmacol., 470, 79-85 (2003) (Times Cited: 4)

12. EJ Barreiro, Strategy of molecular simplification in rational drug design: The discovery of a new cardioactive agent , Quim. Nova, 25, 1172-1180 (2002) (Times Cited: 14)

13. CLM Silva, F Noel, EJ Barreiro, Cyclic GMP-dependent vasodilatory properties of LASSBio 294 in rat aorta, Br. J. Pharmacol., 135 293-298 (2002) (Times Cited: 16 )

14. H Gonzalez-Serratos , RZ Chang, EFR Pereira, et al., A novel thienylhydrazone, (2-thienylidene)3,4-methylenedioxybenzoylhydrazine, increases inotropism and decreases fatigue of skeletal muscle, J. Pharmacol. Exp. Ther., 299, 558-566 (2001) (Times Cited: 14)

15. RT Sudo, G Zapata-Sudo, EJ Barreiro, The new compound, LASSBio 294, increases the contractility of intact and saponin-skinned cardiac muscle from Wistar rats, Br. J. Pharmacol., 134,

603-613 (2001) (Times Cited: 13)

16. PC Lima, LM Lima, KCM da Silva, PHO Léda, ALP Miranda, CAM Fraga, EJ Barreiro, Synthesis and analgesic activity of novel N-acylarylhydrazones and isosters, derived from natural safrole, Eur. J. Med. Chem., 35, 187−203 (2000). (Times cited: 70)

RESULTADOS RECENTES

Estratégias de desenho

molecular

C₁₈H₁₆N₂O₄S₂ Peso Molecular = 388,4

cLog P = 2,3 MR = 100 [cm3_/mol]

Novo composto-protótipo dual

LASSBio-468

Desenhado por

hibridação molecular

LASSBio-596

L. M. Lima, P. Castro, A. L. Machado, C. A. M. Fraga, C. Lugnier, V. L. G. Moraes, E. J. Barreiro, Synthesis and Anti-inflammatory activity of Phthalimide Derivaatives, Designed as New Thalidomide Analogues, Bioorg. Med. Chem. 2002, 10, 3067.

TNF-α ED

2,5 mg/Kg

PDE-4 IC

= 13,6 µM

TNF-α PDE-4

Estudos do

metabolismo

N

H

O

CO

₂

H

S

N

O

O

S

anti-fibrogenic

LASSBio-596

L. M. Lima et al., Synthesis and Anti-inflammatory Activity of Phthalimide Derivatives, Designed as New Thalidomide Analogues, Bioorg. Med. Chem. 2002, 10, 3067; A. L. Machado et al., Design, Synthesis and anti-inflammatory activity of novel phthalimide

derivatives, structurally related to thalidomide, Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 1169; M. S. Alexandre-Moreira et al., LASSBio-468: a New achiral Thalidomide Analogue which Modulates TNF-α and NO Production and Inhibit Endotoxic Shock and Arthritis in Animal Model, Internat. Immunopharmacol. 2005, 5, 485; L. M. Lima, N. M. de Lima, Contribuição do LASSBio no desenvolvimento de novos candidatos a protótipos de fármacos antiasmáticos, Rev. Virtual Quim. 2009, 1, 35; R.M.P. Rocco et al., LASSBio-596: da descoberta aos ensaios pré-clínicos, Rev. Virtual Quim. 2010, 2, 10; G.M.C. Carvalho et al., Can LASSBio-596 and dexamethasone treat acute lung and liver inflammation induced by microcystin-LR?, Toxicon 2010, 56, 604; N.V. Casquilho et al., LASSBio-596 per os avoids pulmonary and hepatic inflammation induced by microscystin-LR, Toxicon 2011, 58, 195.

LASSBio-468

LASSBio-596

Differential scanning calorimetry of LASSBio-596

x-ray diffraction

x-ray diffraction

Ames Test

The bacteria reversed mutation assay : in the presence or absence of liver S9 fraction ⇒ LASSBio-596 (625-3125

µ µ µ

µg/plate) not presented carcinogenic potential

Micronucleus Test

Used to quantify chromosomal damage in eukaryotic cell : in the presence or absence of liver S9 fraction ⇒LASSBio-596