B OEETh
de &AOficina §amitaria Panamericana
(REVISTA IdENSUAL)
9
AVISO-Aunque par de contado despliégase el mayor ezddado en Pa selección de tos trabajoa publicadoo in tofo o compendiados, 8810 1000 autores son mlidwios de laa opiniones
oertidas, P menos que conste expI&itamente lo contrario
Año 29 Septiembre de 1950 No. 9
NUEVAS CEPAS DE HAEMOPHILUS PERTUSSIS AISLADAS EN MÉXICO
PorelDr. CARLOSVIGIL LAGARDE
Jefe del Laboratorio No. 12, Instituto de Higiene, México D. F.
Colaboradores: Mauro Benitez M. y Marta López Malo
Desde el año 1939 y con el objeto de preparar la vacuna pertussis he
tenido oportunidad de aislar numerosas cepas de Haemophilus pertussis
de casos de tos ferina que constantemente se presentan en la ciudad de México.
De las cepas aisladas la mayoría ha correspondido a la Fase 1 del germen, es decir, han sido cepas hemolíticas, con colonias ‘Smooth,” virulentas para el ratón, que determinan necrosis en la dermis del conejo
y que aglutinan a título alto de 1: 2000 a 1:4OOO con el suero antipertussis
Fase 1. Entre todas, se ha logrado aislar tres cepas que diGeren de las restantes en que aglutinan a tftulo bajo con el citado suero, alcanzando solo títulos de 1:20.
La primera cepa fué aislada de la niña Pascuala Gómez de 4 años de edad y le correspondió el número 318: presentaba tos ferina reciente de 8 días de evolución y la placa se tomó el 27 de agosto de 1945. Dos hermanos de esta niña presentaban también tos ferina y en uno de ellos,
Juan Gómez, de 6 años de edad, se logró aislar una cepa de H. pertussis
que aglutinó a título alto con el suero pertussis Fase 1; en la otra herma- nita de 9 años de edad el cultivo fué negativo.
La segunda cepa No. 361 fué aislada de la niña Josefina Martfnez, de 43 años de edad, al quinto dla de la tos ferina y el aislamiento se hizo el 15 de diciembre de 1947.
La tercera cepa No. 373 se aisló de la niña Rosa Martínez Rodrf- guez, de 18 meses de edad, al quinto día de evolución de la tos ferina y el 25 de agosto de 1949.
Hay que recordar que si bien el H. pertussis es el agente etiológico
predominante de la tos ferina, pueden aislarse en algunos enfermos que
922 BOLETfN DE LA OFICINA SANITARIA PANAMERICANA
presentan el cuadro clfnico de las tos ferina y en bajo porcentaje, el Bacilo
parapertussis o la Brucella bronchiseptica. Estos tres gérmenes reciente- mente aislados, presentan los caracteres comunes siguientes: 1. Mor- fologfa y tinción iguales; 2. Hemólisis positiva; 3. Colonias “Smooth”; 4. Son virulentos para el ratón; 5. Producen necrosis en la dermis del conejo; 6. Los tres dan fuertes reacciones opsonocitofágicas con la sangre de los individuos inmunizados con pertussis.
Desde el punto de vista de la composición antigénica, cuando se inyec- tan conejos con suspensiones de cada uno de los tres germenes, se obtie- nen sueros que aglutinan a diversos títulos los tres microbios presentán- dose aglutinación cruzada por tener antígenos comunes. Eldering y Kendrick, que descubrieron y estudiaron el Bacilo parapertussis demos- traron que las series cortas de inmunización (3 CC de antigeno en 3 inyecciones) producen sueros más específicos, y en cambio, series más largas (12 CC de antígeno en 7 a 10 inyecciones) producen sueros menos específicos, aclarando así datos discrepantes que otros autores habían
encontrado al estudiar el H. pertussis y la Br. bronchiseptica.
Practicando la absorción de aglutininas, encontraron también que cada uno de los tres microbios absorbe completamente las aglutininas homólogas correspondientes de los tres sueros y que cada microbio absorbe ~610 parcialmente las aglutininaa heterólogas de cada uno de los otros dos sueros producidos con los otros dos gérmenes; por lo tanto, empleando sueros absorbidos puede llegarse a un diagnóstico diferencial cierto para distinguir los tres organismos.
Hay también algunas otras características que permiten diferenciar
los tres microbios y pueden citarse las siguientes: (1) El pmtussis y el
parapertussis son inmóviles en tanto que la Br. bronchiseptica es móvil;
(2) el pertussis no cultiva, a menos de entrenamiento especial, en gelosa y
caldo simples, el parapertussis y la Brucetla sí cultivan en los medios
ordinarios; (3) el B. parapertussis obscurece el medio de Bordet además de
ser hemolítico y el pertussis y la Br. bronchiseptica ~610 producen hemb-
lisis; (4) ~610 el parapertussis produce pigmento café; (5) sS10 la Br. bron-
chiseptica reduce los nitratos.
Tomando como base los conocimientos anteriores, se estudiaron las cepas 318, 361 y 373, llegándose a la conclusión de que no se trataba de
B. paraperiussis ni de Br. bronchiseptica pero sí se anotó la característica
de las tres, de baja aglutinabilidad con el suero antipertussis Fase 1. Posteriormente se hicieron reacciones de aglutinación con sueros
diagnósticos anti H. inJluenzae Tipo A, H. influenzae Tipo B y suero
antipertussis Fase IV que gentilmente nos proporcionó el Dr. Ccoffrey W. Balte, de Squibb, habiendo resultado negativas y eliminándose así la
posibilidad de que pudiera tratarse de H. pertussis en Fase IV o de H.
influenzae.
Septiembre 19501 HAEMOPHILUS PERTUSSIS 923
por la Dra. Kendrick y se practicaron algutinaciones en un grupo de 27 cepas que incluyó la 318, 361 y 373; este grupo de cepas son de aisla- miento contemporáneo a las que nos ocupan, los detalles de este estudio son los siguientes:
Sueros:
El suero R 361 es un suero antipertussis que fué preparado con el
cultivo No. 18323 y absorbido con parapertussis. Aglutina el H. pertussis
a títulos de 1:2000 a 1:4000. Aglutina el B. parapertussis a títulos de
1:20 a 1: 100. No aglutina la Br. bronchiseptica.
El suero R 379 es un suero antiparapertussis que fué preparado con la
cepa 17903 y absorbido con Br. bronchiseptica. Aglutina el B. parapertus-
sis a título de 1:7000. Aglutina el H. pertussis a título de 1:20. Aglutina
la Br. bronchiseptica a títulos de 1: 200 a 1: 500.
La técnica de aglutinación empleada fue la rhpida de Noble-Kendrick que nos parece la más práctica y sobre Ia cual tenemos una experiencia de 10 arios.
Todas las cepas se sembraron, además, en gelosa y caldo simples para observar si se producía desarrollo.
RESULTADOS
Como puede advertirse en el cuadro (p. 9241, 24 cepas dieron aglu- tinación a título alto con el suero antipertussis de Michigan; ~610 3 cepas No. 318,3Gl y 373 dieron aglutinación baja con el mismo suero 1:200.
Veinticinco cepas dieron aglutinación negativa con el suero antipara- pertussis de Michigan y sólo 2 cepas la 388 y 390 dieron una aglutinación baja de 1:200.
El cultivo en gelosa y caldo simples fu6 negativo para las 27 cepas. En vista de los anteriores resultados se enviaron a Michigan para su estudio las tres cepas 318, 361 y 373 en donde fueron examinadas y los resultados enviados por la Dra. Eldering.
Del estudio de Michigan se desprende, primero: que son cepas de
H. pertussis en Fase 1 que tienen como característica no aglutinar a título alto con el suero antipertussis Fase 1 standard; segundo: que usando un suero diferente el R 362, se obtuvo una aglutinación alta de 1:5000 para la cepa 361 y de 1: 6000 para la cepa 373, pero en cambio la cepa 318 ~610 aglutinó al 1:200; tercero: que en Michigan también han en- contrado cepas ocasionalmente que son muy pobremente aglutinables pero que tienen buenas propiedades inmunizantes usadas como antigenos en las pruebas de protección al ratón; cuarto: que es interesante que en México se hayan aislado cepas de este tipo.
COMENTARIOS
Estas nuevas cepas de H. pertussis que se caracterizan y difieren de las
9% BOLETIN DE LA OFICINA SANITARIA PANAMERICANA
cepas Aislamiento
279 (10) I-31-1944 317 (11) VIII-24-1945
318 (9) VIII-27-1945
319 (14) VlII-27-1945
321 (24) VIII-27-1945
325 (10) 1x-7-1945 328 (IL) IX-7-1945
339 (22) 1X-12-1947
340 (10) x-4-1947 342 (10) X1-28-1947
346 (26) XII-l-1947 348 (26) XII-l-1947 349 (24) XII-5-1947
356 (12) XII-&1947 360 (26) x11-15-1947
361 (9) XII-s-1947
363 (7) v-10-1949 364 (9) V-16-1949
371 (6) VIII-25-1949
372 (6) VIII-25-1949
373 (6) VIII-25-1949
378 (5) 1x-3-1949
382 (3) 1x-5-1949
384 (3) IX-S-1949
388 (9) 1x-13-1949
I
- L_-
-
AGLUTINACUSN \ i. antipertussii
R 361
1:2000 1:4000 1:200 1: 4090 1:4000 1: 2030 1:4000 1:4000 1:4000 1: 4000 1:4000 1:4030 1:2000 1:2000 1:2000 l:i?OO 1:2000 1:4000 1:2000 1:2000 1:100 1:4000 1:4000 1:4000 1:4000 - -
S. antiparaper- tussis R 379
Negativa “ “ “ LL <‘ ‘< “ <‘ ‘I ‘L “ il “ “ d< “ “ ‘< “ “ <‘ “ ‘I 1:200 ClJLTwG
Gelosa simple
Septiembre 19501 HAEMOPHILUS PERTUSSIS 925
cepas Aishmiento
390 (9) 1:4000 1:200 L‘ <‘
1x-13-1949
393 (ll) 1:4000 Negativo “ “
1x-19-1949
Nota: La fecha situada debajo del número de la cepa indica la fecha de aisla- miento; el número entre paréntesis indica el pase en el que se hizo la observación.
. aislan una que otra vez; son patógenas para el hombre ya que determinan en el niño el cuadro clínico de la tos ferina; su característica de escasa aglutinabilidad parece estable, ya que pudo observarse hasta el pase 28 para la cepa 318; esta última cepa se aisló de un niño cuyo hermano presentaba la tos ferina en el mismo grado de evolución, pero causada por una cepa Fase 1 ordinaria; será interesante estudiar a fondo la composi- ción antigénica de estas nuevas cepas.
RESUMEN
Se han aislado en 1945, 1947 y 1949, tres cepas nuevas de H. pertussis
que se caracterizan por su bajo título de aglutinación con el suero anti- pertussis Fase 1 standard y que son patógenas para el hombre.
El autor hace patente su gratitud al Departamento de Salubridad de Michigan, a las Dras. Kendrick y Eldering y al Dr. Geoffrey W. Bake, de los Laboratorios Squibb, por su eficaz ayuda en la elaboración de este r trabajo.
REFERENCIAS
Cervera B., Ernesto, y Pedro Vera: Manual de microbiología, 1945. Dubos J., René: Bacteria1 and mycotic infections of man, 1948.
Eldering y Kendrick: Badlus parapertussis; a species resembling both Baeillus pertussis and Bacillus bronchisepticus but identical with neither. Jour. Ba&., Vol. 35, No. 6, jun. 1938.
Ferry, N. S., y H. C. Klix: Studies relative to the apparent close relationship between Bact. pertussis and Br. bronchisepticus II. Jour. Bact. 3, 197- 199,1918.
Ferry, N. S., y Arlyle Noble: Studies relative to the apparent close relationship between Bact. pertussis and B. bronchisepticus 1. Jour. Bact. 3, 157- 171,19x
Kendrick, P., J. Gibbs, y M. Sprick: The opsonocitophagic test in the study of pertussis. Jour. Inf. Dis., 60, 302-311, 1937.
Kendrick, P., 3. Miller, y G. M. Lawson: Tentative methods for the bacterio- logical diagnosis and control of whooping cough Report of Referee. Am. Pub. Health Assn. Year Book, pp. 200-206. 193536.
