UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO” CÂMPUS DE ARAÇATUBA - FACULDADE DE ODONTOLOGIA
Avaliação da interface osso/implante
após o uso do copolímero de PLA/PGA associado a
osso autógeno em coelhos.
Estudo biomecânico e imunohistoquímico
Te se d e d o uto ra d o a p resenta d a à Fa c uld a d e d e Od o ntolo g ia d o “ Ca m p us d e Araçatuba – UNESP” , c o m o p a rte d o p ro g ra m a p a ra o b tenç ã o d o g ra u d e Do uto r em Od o nto lo g ia (Áre a d e C o nc e ntra ç ã o e m C irurg ia e Tra um a to lo g ia Buco-Maxilo-Facial)
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO” CÂMPUS DE ARAÇATUBA - FACULDADE DE ODONTOLOGIA
Avaliação da interface osso/implante
após o uso do copolímero de PLA/PGA associado a
osso autógeno em coelhos.
Estudo biomecânico e imunohistoquímico
Te se d e d o uto ra d o a p resenta d a à Fa c uld a d e d e Od o ntolo g ia d o “ Ca m p us d e Araçatuba – UNESP” , c o m o p a rte d o p ro g ra m a p a ra o b tenç ã o d o g ra u d e Do uto r em Od o nto lo g ia (Áre a d e C o nc e ntra ç ã o e m C irurg ia e Tra um a to lo g ia Buco-Maxilo-Facial).
Orientada:
Liliane Scheidegger da Silva Zanetti
Orientador:
Prof. Dr. Idelmo Rangel Garcia Júnior
Ficha Catalográfica elaborada pela Biblioteca da FOA / UNESP
Zanetti, Liliane Scheidegger da Silva
Z28a Avaliação da interface osso/implante após o uso do copolímero de PLA/PGA associado a osso autógeno em coelhos :
Estudo biomecânico e imuno- histoquímico
/Liliane Scheidegger da Silva Zanetti. - Araçatuba : [s.n.], 2008
83 f. : il. ; tab. + 1 CD-ROM
Tese (Doutorado) – Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Odontologia, Araçatuba, 2008
Orientador: Prof. Dr. Idelmo Rangel Garcia Júnior
1. Implante dentário osseointegrado 2. Enxerto ósseo 3. Ácido poliglicólico.
DADOS CURRICULARES
LILIANE SCHEIDEGGER DA SILVA ZANETTI
Nascimento: 05/03/74 - Vitória – ES
Filiação: Ivonete Scheidegger da Silva
Joel Henrique da Silva
1993/1997: Graduação:
Curso de Odontologia da Universidade do Federal do Espírito
Santo- UFES
1999/2001: Pós-graduação:
Mestrado em Clínica Odontológica Área de Concentração em Cirurgia
-Faculdade de Odontologia de Piracicaba – Unicamp/SP.
2005/2008: Pós-graduação:
Doutorado em Odontologia- Área de Concentração em Cirurgia e Traumatologia Buco-Maxilo-Facial –
DEDICATÓRIA
OS MEUS QUERIDOS
JOEL, IVONETE
EGLAUCO
PELO AMORAGRADECIMENTO ESSENCIAL
AGRADECIMENTOS
Ao Prof. Dr. IDELMO RANGEL GARCIA JÚNIOR, m e u o rienta d o r, p e lo s e nsina m e nto s p resta d o s, p e la sua p a c iênc ia , tra nq üilid a d e e lid e ra nç a c o m q ue re g e to d o e ste siste m a d e e nsino e a te nç ã o à sa úd e , c o m ta nto e ntusia sm o , e xc e lê nc ia e d ed ic a ç ã o . Se u e xe m p lo d e p ro fissio na lism o é, se m dúvida para nós, modelo singular.
A Profa . Dra . IVETTE BECCALLI, re sp o nsá vel p ela m inha fo rm a ç ã o básic a na Cirurg ia na UFES e m inha inic ia ç ã o na d o c ê nc ia . Se u e xe m p lo d e vid a e p ro fissio na lism o m e inc entivo u a se g uir o c a m inho d a á re a d e Cirurg ia BMF. Ag ra d e ç o im ensa m ente p e la c o nfia nç a q ue se m p re m e d ed ic o u, p e lo seu exemplo de vida e acima de tudo pela fiel amizade.
Ao Prof. Dr. JOSÉ RENATO COSTA, p o r m e a c o m p a nha r d e sd e a m inha inic ia ç ã o na Cirurg ia na UFES, p e lo s e nsina m e nto s e inc e ntivo . Me us sinc e ro s a g ra d e c im e nto s p elo a p o io na re a liza ç ã o d o Mestra d o e inc entivo a completar minha formação docente.
Ao s Pro fe sso re s d a Áre a d e C irurg ia e Tra um a to lo g ia BMF d a F. O. de Piracicaba/Unicamp, Prof. Dr. MÁRCIO DE MORAES, Prof. Dr. ROGER WILLIAM
FERNANDES MOREIRA, Prof. Dr. RENATO MAZZONETTO, Prof. Dr. LUIS AUGUSTO PASSERI e Prof. Dr. JOSÉ RICARDO DE ALBERGARIA BARBOSA, re sp o nsá veis p ela
m inha fo rm a ç ã o no Me stra d o . Me us sinc e ro s a g ra d e c im e nto s p e lo s ensinamentos que fundamentaram minha formação clínica e docente.
c o m ig ua ld a d e e re sp e ito p ro fissio na l, a g ra d e ç o p e lo a p o io e inc e ntivo d a d o na realização do doutorado.
À Profa . Dra . ROBERTA OKAMOTO, a g ra d e ç o p e la o rie nta ç ã o e p a rtic ip a ç ã o d ire ta na s fa se s d a re a liza ç ã o d e ste tra b a lho , p e la c o m p e tê nc ia e p a c iê nc ia no s se us e nsina m e nto s e e xtre m a d e lic a d e za e hum a nid a d e p re sta d o s aos alunos da pós-graduação da FOA-Unesp.
Ao Prof. Dr. OSWALDO MAGRO FILHO p e lo s e nsina m e nto s e dedicação p e rm itind o se m p re um c o nvívio a g ra d á ve l na s a tivid a d e s d o c urso , e stre ita nd o o s laços de proximidade com os alunos da pós-graduação.
Ao s c o le g a s d a Pó s-graduação: JÉSSICA GULINELLI, LEANDRO DE
CARVALHO CARDOSO, MARCELO KAIATT, PAULO DOMINGOS, FLÁVIA PEREIRA, MARCOS HEIDY e ALBANIR BORRASCA, p e la c o nvivênc ia a g ra d á ve l d ura nte o
p e río d o q ue e stive e m Ara ç a tub a . Ag ra d e ç o p e lo a p o io e m d ive rso s m o m e nto s que precisei.
Em e sp e c ia l a o s a m ig o s FRANCISLEY SOUZA e THALLITA QUEIROZ, a g ra d e ç o p e lo p ro fund o re sp e ito , p ro fissio na lism o e d e d ic a ç ã o demonstrados na re a liza ç ã o d o s e xp e rim e nto s, te nd o sid o fund a m e nta is e ve rd a d e iro s companheiros em todos os momentos.
À THAÍS RODRIGUES, p o r te r m e a c o lhid o e m sua c a sa , te nd o c o nvivid o d e m a ne ira c o rd ia l e a le g re se m p re . Ag ra d e ç o p e la c o nfia nç a e ho sp ita lid a d e que sempre demonstrou.
À a m ig a CAMILA BENEZ RICIERI, agradeço p o r p e rm itir um a a m iza d e q ue a d istâ nc ia nã o a p a g a rá , te nho c e rte za se rá d ura d o ura . Agradeço p e lo s momentos alegres, e desejo que tenhamos muitos outros.
CARLOS ROBERTO ROLDI agradeço p e la c o nfia nç a e por to d o a p o io d a d o
sempre. Tenho orgulho em fazer parte desta instituição!
Ao s c o le g a s Pro fe sso re s Dr. ANDRÉ ALBERTO CÂMARA PUPPIN, Dr.
AGUIMAR BOURGUIGNON, Dr. CARLOS TIMÓTEO e Dr. FABIANO GIESEN minha
gratidão p e lo re sp e ito e p ro fissio na lism o , e p o r to rna re m a g ra d á veis o a m b ie nte de trabalho.
Ao s m e us q ue rid o s a m ig o s e c o le g a s: BRUNO CARVALHO, PATRÍCIA
BIANCHI, LILIANA P. BARROS, CAROLINA B. CARVALHO, GABRIELA DUARTE e RENATO MARANO, a g ra d e ç o o c o nvívio a g ra d á ve l, a m iza d e e te m p o d e d ic a d o s,
tendo sido fundamentais no cumprimento de mais essa etapa profissional.
A a m ig a d o c o ra ç ã o DIANA ARANTES SAD RAMALHO, p e la a m iza d e sinc e ra e m to d a s a s c irc unstâ nc ia s e p e lo s m o m e nto s a le g re s vivid o s. Me u d e se jo é tê-la sempre perto.
A g ra nd e a m ig a MARTHA SALIM p e la le a ld a d e e c o m p a nhe irism o , se m a q ua l c he g a r a té a q ui nã o te ria sid o p o ssíve l, e sta nd o se m p re d isp o sta a a jud a r. Minha retribuição sempre será o meu maior agradecimento.
Ao Prof. Dr. ÉLCIO MARCANTÔNIO JÚNIOR a g ra d e ç o a d isp o nib ilid a d e e m p e rm itir a utiliza ç ã o d o La b o ra tó rio EXAKT®d a Fa c uld a d e d e Od o nto lo g ia d e
Araraquara/Unesp, e ao RAFAEL FAEDA pelo tempo dispensado.
AGRADECIMENTOS ESPECIAIS
Ao GLAUCO, m e u sinc e ro e p ro fund o a g ra d e c im e nto p e lo a m o r, p a c iê nc ia , se re nid a d e , c o nfia nç a e a p o io p re sta d o s e m to d o s o s m o m e nto s. Ob rig a d a p o r insistir em fa ze r p a rte d a m inha vid a , e p o r p e rm itir e sta r a o se u la d o sem p re . Ag ra d e ç o p o r te r p e rm itid o a re a liza ç ã o de um sonho!!!
Ao s m e us q ue rid o s e a m a d o s p a is JOEL e IVONETE, p o r m e a p o ia re m e m to d o s o s m o m e nto s, m e sm o te nd o q ue e sta r d ista nte p o r ta nta s veze s. Ob rig a d a p e lo s e nsina m e nto s fund a m e nta d o s num a vid a cristã. Agradeço a Deus todos os dias por tê-los presentes em minha vida!
Ao s m eus a m a d o s irm ã o s LARISSA, FILIPE e ANDRÉ, p e lo a m o r e c a rinho d e se m p re , p e lo e no rm e p ra ze r d a c o nvivê nc ia em fa m ília e p o r fa ze re m existir VITOR e HENRIQUE, no ssa s m a io res a le g ria s. Ob rig a d a p o r existirem em minha vida.
Ao s q ue rid o s e a m a d o s tio s MARLI e NEIVALDO SCHEIDEGGER, p e la d e d ic a ç ã o e c a rinho p re sta d o s no d ia a d ia . Ag ra d e ç o p e la convivência, p a c iê nc ia e p o r se rvire m d e e xe m p lo d e fa m ília e vid a espiritual.
EPÍGRAFE
"Todo aquelequesededica ao estudo da ciência
chega a convencer-sedequenasleis do universo
semanifesta umespírito sumamentesuperior ao
do homem, e perante o qual nós, com nossos
podereslimitados, devemoshumilhar-nos."
SUMÁRIO
RESUMO 1
ABSTRACT 3
LISTA DE ABREVIATURAS ESIGLAS 5
LISTA DE ILUSTRAÇÕES
6 LISTA DE TABELAS EGRÁFICOS
10 INTRODUÇÃO GERAL
11 Referências bibliográficas
16
1. INTRODUÇÃO 18
2. PROPOSIÇÃO
22
3. MATERIAL E MÉTODO 23
3.1 Copolímero PLA/PGA
24 3.2 Procedimento Cirúrgico
24 3.3 Euta ná sia e prepa ro da s a mostra s pa ra a ná lise
microscópia
26
3.3.1 Imunohistoquímica
26
3.3.1.1 Histologia 28
3.4 Preparo da amostra para análise biomecânica
29
4.1 Análise Macroscópica
31
4.2 Análise Biomecânica 31
4.2.1Análise Morfométrica por MEV
32 4.3 Análise Imunohistoquímica
32
4.3.1 Análise Histológica qualitativa 34
5. DISCUSSÃO
37
6. CONCLUSÃO 43
7. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
44 ANEXO 1: NORMAS DE PUBLICAÇÃO
48
ANEXO 2: TABELAS, GRAFICOS E ILUSTRAÇOES 53
ANEXO 3: CERTIFICADO DO COMITÊ DE ÉTICA EM PESQUISA
RESUMO
ZANETTI, LSS. Ava lia ç ã o d a inte rfa c e o sso / im p la nte a p ó s o uso d o c o p o lím e ro d e PLA/ PGA a sso c ia d o a o sso a utó g e no e m c o e lho s. Estud o biomecânico e imunohistoquímico [Te se ]. Ara ç a tub a : Unive rsid a d e Estadual Paulista; 2008.
(1) Pro p o siç ã o : Este e stud o a va lio u o uso d o c o p o lím e ro d e á c id o
imunoistoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para RANK L, OPG e OC . No p e río d o d e 60 d ia s p ó s-operatórios a a na lise biomecânica d e torque-reverso fo i re a liza d a a nte s d a d e sc a lc ific a ç ã o . (3) Re sulta d o s: Os re sulta d o s o b tid o s d e m o nstra ra m q ue o c o p o lím e ro PLA/ PGA m istura d o a o o sso a utó g eno apresentou-se biocompatível, bioabsorvivel e p e rm itiu a ne o fo rm a ç ã o ó ssea e m c o nta to c o m o implante, re ve la d a p e la a ná lise d a e xp re ssã o d a s p ro te ína s q ue re g ula m o g a nho e a p e rd a d e m a ssa ó sse a . E, ho uve p re d o m inâ nc ia sig nific a nte d e
deposição óssea e estabilidade revelada pela análise de torque-reverso
(
a
= 0,05). (4) C o nc lusõ e s: O c o p o lím e ro d e PLA/ PGA p o d e se r utiliza d o no p re e nc him e nto d e d e feito s so b re fre sa d o s a o re d o r d e im p la nte s e m tíb ia s de coelhos quando adicionado ao osso autógeno raspado, pois apresenta cara c te rístic a s d e b io c o m p a tib ilid a d e e b io d eg ra d a ç ã o , se nd o to ta lm e nte re a b so rvid o e sub stituíd o p o r o sso , p e rm itind o a fo rm a ç ã o d e osso de qualidade na interface osso/implante.
ABSTRACT
ZANETTI, LSS. Eva lua tio n o f the b o ne / im p la nt inte rfa c e a fte r use o f the p o lyla c tic a nd p o lyg lyc o lic a c id c o p o lym e r (PLA/ PGA) a sso c ia te d to the b o ne ha rvest in ra b b its. Biomechanical a nd im uno histo c he m istry stud y. [Thesis]. Araçatuba: São Paulo State University; 2008.
period postoperative the against-to rq ue b io m e c ha nic s w a s c a rrie d thro ug h b e fo re the d e c a lc ifie d . (3) Re sults: The g o tte n re sults ha d d isc lo se d tha t the copolym e r PLA/ PGA w ith b o ne g ra ft sho w e d b io c o m p a tib ility, bioabsorption a nd a llo w e d b o ne g ro w ing in c o nta c t w ith the im p lant, d isc lo se d b y e xp re ssio n o f the p ro teins tha t re g ula te the p ro fit a nd mass b o ne lo ss. And , ha d sig nific a nt p re d o m ina nc e o f b o ne deposition a nd sta b ility d isc lo se d b y against-torque ( = 0,05). (4) C o nc lusio ns: The PLA/ PGA c o p o lym e r c a n b e use d filling d e fe c ts d rille d a ro und im p la nts in tib ia o f ra b b its, w he n a d d e d b o ne ha rve st sc ra p e d , the re fo re it p re se nts c ha ra c te ristic s like b io c o m p a tib ility a nd b io d eg ra d a tio n, b e ing to ta lly re so rp te d a nd sub stitute d b y b o ne , allowing the bone formation with quality in the interface bone/implant.
LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS
AS = Azul de Stevenel C = Grupo controle
CEEA = Comissão de Ética em Experimentação Animal DAB = Diaminobenzidina
EDTA = Ácido etileno-diamino-tetracético G = Grupo tratado
GMC = Programa para análise estatística HA = Hidroxiapatita
HE = Hematoxilina e eosina Kg = Kilogramas
mm = milímetros mL = mililítros
MEV = Microscopia eletrônica de varredura MMA = Metil metacrilato
OC = Osteocalcina OPG = Osteoprotegerina
PBS = Tampão fosfato de sódio PGA = Ácido Poliglicólico PLA = Ácido Poliláctico
PLA/PGA = Copolímero de ácido polilático e poliglicólico PMMAL= Polimetil–metacrilato lento
PVP-I = Polivinil pirrolidona iodo
RANKL = Receptor Ativador Nuclear Kappa-B Ligante VA = Vermelho de Alizarina
LISTA DE ILUSTRAÇÕES
Figura 1: Anti-sepsia. Figura 2: Incisão.
Figura 3: Retalho cirúrgico descolado. Figura 4: Fresagem do leito receptor. Figura 5: Leito receptor.
Figura 6: Coleta de osso raspado (G).
Figura 7: Polímero PLA/PGA adicionado à superfície do implante (G). Figura 8: Im p la nte insta la d o a p ó s a d iç ã o d o p o límero m istura d o a o o sso autógeno raspado (G).
Figura 9: Implante após 60 dias de instalação (G).
Figura 10: Pre p a ro d o te c id o ó sse o p a ra e nc a ixe d e c ha ve p a ra torquímetro manual (G).
Figura 11: Remoção do implante por torque reverso (G).
Figura 12: Ne g a tivo d a á re a o nd e fo i insta la d o o im p la nte a p ó s sua remoção (G).
Figura 13: Soro de burro para o processamento imunohistoquímico. Figura 14: Soro Dunkey
Figura 15: Coloração das lâminas por DAB.
Figura 16: Álcoois e corantes para coloração HE.
Figura 18: De sg a ste d a p e ç a inc luíd a e m re sina e m a p a re lho a b ra sivo Exakt®.
Figura 19: Adesão do corpo de prova na lâmina no aparelho do Sistema Exakt®.
Figura 20: Corte da peça em aparelho do Sistema Exakt®.
Figura 21: C o ra nte s VA/ AS utiliza d o s na c o lo ra ç ã o d a s lâ m ina s c o rta d a s pelo Sistema Exakt®.
Figura 22: Mic ro sc ó p io a c o p la d o a o c o m p uta d o r o nd e fo ra m capturadas as imagens de todas as lâminas obtidas das amostras.
Figura 23: Te c id o ó sse o ne o fo rm a d o c e lula riza d o a c o m p a nha nd o to d a a interface. HE, 40X, 40 dias (G).
Figura 24: Nota -se a p re se nç a d e te c id o ó sse o e m ne o fo rm a ç ã o , a lé m d e re sto s d o b io m a te ria l (PLA/ PGA) visua liza d o no c a nto sup e rio r d ireito da lâmina. HE, 400X, 15 dias (G).
Figura 25: Asp e c to d a inte rfa c e no g rup o c o ntro le a p re se nta nd o -se c o m te c id o ó sse o a p e na s na c o rtic a l sup e rio r e te c id o c o njuntivo adjacente à interface. HE, 40X, 15 dias (C).
Figura 26: Asp e c to d a inte rfa c e no g rup o c o ntro le . Te c id o ó sse o a p e na s na c o rtic a l infe rio r e te c id o im a turo p re e nc he nd o a inte rfa c e . HE, 40X, 15 dias (C).
Figura 28: Te c id o ó sse o ne o fo rm a d o e te c id o im a turo (c o njuntivo ) e ntre a interface e o osso. HE, 40X, 40 dias (C).
Figura 29: C a m a d a d e te c id o ó sse o na inte rfa c e p ró xim a a c o rtic a l superior no grupo controle. HE, 40X, 40 dias (C).
Figura 30: Te c id o ó sse o na re g iã o o c up a d a p e lo p ic o e va le d o im p la nte no g rup o tra ta d o . No ta -se a s á re a s d e o sso c o m p a c to a c o m p a nha nd o a inte rfa c e e a usê nc ia d o b io m a te ria l. HE, o rig ina l 400X, 60 dias (G).
Figura 31: Te c id o ó sse o ne o fo rm a d o , c e lula riza d o , c o ra d o p e lo VA, e m c o nta to c o m a sup e rfíc ie d o im p la nte na á rea d a c o rtic a l sup e rio r. VA/AS, 400X, 60 dias (G).
Figura 32: Te c id o ó sse o ne o fo rm a d o , c e lula riza d o , c o ra d o p e lo VA, e m c o nta to c o m a sup e rfíc ie d o im p la nte na á re a d a s e sp ira s d o im plante. VA/AS, 100X, 60 dias (G).
Figura 33: Te c id o ó sse o e m neo fo rm a ç ã o c e lula riza d o , c o ra d o p e lo VA e á re a s d e te c id o c o njuntivo c o ra d a s p e lo AS e m c o nta to c o m a superfície do implante. VA/AS, 400X, 60 dias Grupo Controle (C).
Figura 34: Te c id o ó sse o c o ra d o p e lo VA c o nte nd o inúm e ro s o ste ó c ito s. VA/AS, 400X, 60 dias Grupo Controle (C).
Figura 35: Qua d ro c o nte nd o a s im a g ens d a s lâ m ina s d o g rup o tra ta d o (G) para análise qualitativa das imunomarcações.
(C) para análise qualitativa das imunomarcações.
Figura 37: MEV. Grupo controle (C). Período 60 dias. Observa-se algumas á re a s c o nte nd o o sso a d e rid o à sup e rfíc ie d o im p la nte. (o rig ina is d e 56X).
Figura 38: MEV. Grup o c o ntro le (C ). Pe río d o 60 d ia s. Ob se rva -se a p re se nç a d e a lg um te c id o ó sse o a d e rid o à sup e rfíc ie d o im p la nte . (originais de 200X).
Figura 39: MEV. G rup o tra ta d o (G2). Pe río d o 60 d ia s. O b se rva -se a p re se nç a d e o sso e m c o nta to e m to d a a sup e rfíc ie d o im p la nte . (originais de 56X).
LISTA DE TABELAS E GRÁFICOS
Ta bela 1: Da d o s d o s va lo re s o b tid o s na a ná lise d e to rq ue -reve rso no s grupos controle (C) e tratado (G) no período de 60 dias.
Ta bela 2: Te ste e sta tístic o p a ra m é tric o utiliza nd o a m o stra s ind e p e nd e nte s p a ra a ná lise d e to rq ue -reve rso no s g rup o s c o ntro le (C ) e tratado(G).
Ta bela 3: Aná lise se m i-quantita tiva . Mé d ia s p e rc e ntua is d a s im uno m a rc a ç õ e s o b tid a s na s d ife re ntes re g iõ e s no s p e río d o s d e 15 e 40 dias nos grupos C e G.
Grá fico 1: Mé d ia d a s a m o stra s d e to rq ue reve rso d o s g rup o s C e G no período de 60 dias (<a = 0,05 >).
Grá fico 2: So m a s p e rc e ntua is d o s va lo re s d a s im uno m a rc a ç õ e s d a s regiões analisadas no grupo controle (C). Período de 15 e 40 dias.
Grá fico 3: So m a s p e rc e ntua is d o s va lo re s d a s im uno m a rc a ç õ e s d a s regiões analisadas no grupo tratado (G). Período de 15 e 40 dias.
INTRODUÇÃO GERAL
d e fo rç a s d ura nte o p e río d o p ó s-operatório 1, 2, 4, 5. Se g und o o p ro to c o lo p ro p o sto p a ra a utiliza ç ã o d e im p la nte s a inc id ênc ia d e fo rç a foi preconizada se r instituíd a a p ó s um p e río d o d e 3 a 6 m e se s 6. Em b o ra , e stud o s p o steriores c o nc luíra m q ue p o d e ha ve r o sse o integ ra ç ã o q ua nd o se utiliza carga mastigatória sobre o implante recém instalado7, 8, 9.
A e sta b ilid a d e p rim á ria a p ó s o p ro c e d im e nto d a c o lo c a ç ã o d e im p la nte s é um d o s fa to re s re sp o nsá veis p e la o sse o integ ra ç ã o d o s imp la nte s d e ntá rio s. Alto s índ ic e s d e fra c a sso e p e rd a d e im p la ntes têm sido a trib uíd o s a a c ha d o s a sso c ia d o s a im p la nte s e m o sso d e q ua lid a d e ruim e c o nse q üe nte m e nte e sta b ilid a d e p rim á ria d im inuíd a 10, 11, 12. A estabilidade p rim á ria o c o rre no m o m e nto d a insta la ç ã o d o im p la nte e e stá re la c io na d a a o níve l d e c o nta to ó sse o p rim á rio 13, q ue é influenc ia d o p rinc ip a lm e nte p ela q ua lid a d e d o tra b e c ula d o , a lé m d o c o m p rim e nto , geometria e superfície do implante14.
O s m é to d o s e xiste nte s p a ra a um e nto s ó sse o s d o s re b o rdos a lve o la re s a nte s d a insta la ç ã o d e im p la nte s d e ntá rio s p o d e m se r: os im p la nte s o u enxertos ó sse o s a utó g e no s, a ló g e no s, xe nó g e no s o u aloplásticos/biomateriais; a a p lic a ç ã o d e fa to re s d e c re sc im e nto ; a re g e ne ra ç ã o ó ssea g uia d a ; a distração o ste o g ê nic a ; e as combinações entre essas técnicas.
Osse o ind uç ã o é a ha b ilid a d e e m ind uzir o o sso d o ho sp e d eiro a produzir novo tecido ósseo. Ex: Osso autógeno e fatores de crescimento.
O sse o c o nd uç ã o g uia e c o nd uz o d e se nvo lvim e nto d e no vo te c id o ó sse o a tra vé s d e sua m a triz d e sup o rte (a rc a b o uç o ). Ex: Osso autógeno e materiais aloplásticos/Biomateriais.
O e nxe rto a utó g e no é re tira d o d o p ró p rio p a c iente . É a lta mente o ste o g ê nic o , o sse o ind uto r e o sse o c o nd uto r. Te m m e no r re a b so rç ã o e m o rb id a d e . Os tip o s e xiste nte s sã o o s intra -o ra is o u e xtra -o ra is. As á re a s d o a d o ra s intra -o ra is m a is c o m uns sã o retro-m o la r, tub e ro sid a d e , ra m o a scendente, sínfise m a nd ib ula r, p ro c e sso c o ro nó id e e tó rus. Os e nxe rto s extra-o ra is p o d e m se r re tira d o s d a c rista ilía c a , c a lo ta c ra nia na , tíb ia e outras15.
O s e nxe rto s a ló g e no s fo rm a m o sso p o r o sse o ind uç ã o o u osseocondução, é o b tid o d e c a d á vere s e a rm a ze na d o e m b a nc o s d e ossos. Po d e m se r m ine ra liza d o s o u d e sm ine ra liza d o s. A d e sm ine ra liza ç ã o re no va a fa se m ine ra l e e xp õ e o c o lá g e no e o s fa to re s d e c re sc im e nto d o osso16, 17.
Os e nxe rto s a lo p lá stic o s/biomateriais sã o feito s d e m a te rial sinté tic o o u na tura l, se nd o a p e na s osse o c o nd uto re s, func io na nd o c o m o um material de preenchimento. Um exemplo são as cerâmicas como a HA, sã o seg ura s e b e m to le ra d a s, m a s te m p o uc o p o te nc ia l p a ra fo rm a r no va s inse rç õ e s, d im inuind o a s c ha nc e s d e inc o rp o ra ç ã o ó sse a . Po d e m se r sintéticas como o fosfato de cálcio e naturais como o coral.
Os fatores de crescimento ósseo são substâncias osseopromotoras utiliza d a s p a ra e stim ula r a fo rm a ç ã o ó sse a e a c e le ra r o p ro c e sso d e integ ra ç ã o e ntre o sso e im p la nte . As p ro te ína s m o rfo g e né tic a s, p o r e xe m p lo , tê m sid o utiliza d a s p a ra e stim ula r a p ro life ra ç ã o e e sp e c ia liza ç ã o de células-tronco na reconstituição do tecido ósseo bucal.
A re g e ne ra ç ã o ó sse a g uia d a é um re c urso c irúrg ic o rea liza d o pela a p lic a ç ã o d e b a rreira s físic a s c o m o m e m b ra na s no tra ta m e nto d e d e feito s ó sse o s p e rio d o nta is o u periimplantares, c o m o o b je tivo d e possibilitar a neoformação óssea dentro do defeito.
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1. INTRODUÇÃO
A q ua lid a d e e q ua ntid a d e ó sse a s insufic iente s no s re b o rd o s a lve o la re s é um a d a s p rinc ip a is c a usa s d e fa lha na insta la ç ã o d e im p la nte s d e ntá rio s. Atua lm e nte a s d ific uld a d es e m se o b te r o sso p a ra re c o nstruir re b o rd o s tê m inte nsific a d o a p ro c ura por so luç õ e s q ue ve nha m m e lho ra r o p ro g nó stic o d e sse s im p la nte s. Diversa s fo rm a s q ue ve nha m m e lho ra r a q ua lid a d e e a quantidade ó sse a s, p a ra sup o rta r o s im p lantes de maneira satisfatória têm sido propostas1, 2, 3.
As d e fic iênc ia s intra -ó sse a s c o m o a s d eixa d a s p o r p e riim p la ntites, alvéolo s re c é m e xtra íd o s o u a s re la c io na d a s a o p ro c e d im e nto d e insta la ç ã o d e im p la nte s, a lg um a s ve ze s vã o re q ue re r tra ta m e nto utiliza nd o um sub stituto ó sse o . A ne c e ssid a d e d e re c o nstruç ã o d e sses d e feito s levo u a o d e se nvo lvim e nto d e d ife re nte s té c nic a s d e o b te nç ã o e a d ive rso s tip o s d e sub stituto s ó sseo s, d e ntre e le s o s e nxe rto s a utó g eno s, a ló g e no s, xe nó g e no s e a lo p lá stic o s 3, 4, 5, 6. O p rinc ip a l o b jetivo d e sse s m a te ria is é atuar como osseoindutor ou osseocondutor, e na prevenção mecânica da inva sã o d e c é lula s d e te c id o c o njuntivo no m eio d o d e feito ó sse o interferindo no processo de reparo 7.
o b te nç ã o . Atua lm e nte , o fo sfa to d e c á lc io e a hid ro xia p a tita (HA) sã o o s sub stituto s ó sse o s a lo p lá stic o s m a is fre q ue nte m e nte utiliza d o s. Esse s m a te ria is a p re se nta m va nta g e ns e d e sva nta g e ns. Ma te ria is b io a b so rvíve is c o m o o fo sfa to d e c á lc io , no rm a lm e nte te m a lta s p ro p rie d a d es osseocondutoras, embora o período de sua biodegradação possa ser mais rá p id o d o q ue a p o ssib ilid a d e d e a p o siç ã o ó sse a d e ntro d o d e feito 8. Po r o utro la d o , a im p la nta ç ã o d e m a te ria is nã o a b so rvíveis c o m o a HA a p re se nta b a ixa a tivid a d e o sse o c o nd uto ra , e m b o ra e sse s m a te ria is permaneça m no m eio d o d e feito c ria nd o um a b a se d e suste nta ç ã o p a ra ne o fo rm a ç ã o ó ssea 9. Entre ta nto , a inva sã o d e te c id o c o njuntivo q ue fre q ue nte m e nte o c o rre a o re d o r d o s g râ nulo s d e HA inte rfe re na ne o fo rm a ç ã o ó ssea , p o d e nd o se to rna r um a d ific uld a d e d e d ifíc il resolução.
utilizadas na c o m p o siç ã o d e d isp o sitivo s c irúrg ic o s d e stina d o s à c irurgia b uc o m a xilo fa c ia l e o rto p é d ic a 10, 11, 12. Sua s p ro p rie d a d e s d e b io c o m p a tib ilid a d e e b io d e g ra d a ç ã o fa ze m c o m q ue a sua a p lic a ç ã o seja b e m to le ra d a , nã o se nd o ne c e ssá ria a sua re m o ç ã o 24, 25. Estud o s e xp e rim enta is d em o nstra ra m q ue , o p e río d o d a d eg ra d a ç ã o d e ste s d isp o sitivos c irúrg ic o s p o lim éric o s c o m o m ini-p la c a s, p a ra fuso s, fio s d e sutura o u malhas d e o ste o sínte se , e stá c o rre la c io na d o c o m o s fa to re s lo c a is e c o m a d e nsid a d e e sp e c ífic a d o m a te ria l, q ue é d e p e nd e nte d o seu grau de polimerização e peso molecular13, 24.
Fa to re s c o m o a b a ixa d e nsid a d e do c o p o lím e ro d e PLA/ PGA, fa ze m c o m q ue a sua b io d eg ra d a ç ã o o c o rra d e fo rm a lenta, podendo o c o rre r d e posição óssea simultânea25. A biodegradação d e a lg uns d e sse s copolímeros o c o rre p o r hid ró lise e o período d e te m p o q ue isto o c o rre é d e p e nd e nte d e sua d e nsid a d e , p o d e nd o deixar no se u lug a r um a p o rc e nta g e m e leva d a d e te c id o 14. De sta fo rm a , justific a -se o uso d e m a te ria is c o nstituíd o s p o r e sta s sub stâ nc ia s p a ra a sutura d o s te c id o s, a c o nstruç ã o d e d isp o sitivo s p a ra a fixa ç ã o d e fra tura s ó ssea s e p a ra materiais de reparação dos tecidos moles 15, 16.
2. PROPOSIÇÃO
3. MATERIAL E MÉTODO
Este p ro to c o lo d e p e sq uisa fo i sub m e tid o e a p ro va d o p e la C o m issã o d e Étic a e m Exp e rim e nta ç ã o Anim a l (C EEA) d o s C urso s d e Od o nto lo g ia e Me d ic ina Ve te riná ria d a Unive rsid a d e Esta d ua l Pa ulista “Júlio de Mesquita Filho”, Campus de Araçatuba (UNESP) (ANEXO 1).
A a m o stra fo i c o nstituíd a d e 20 c o e lho s m a c ho s b ra nc o s d a ra ç a
No va Ze lâ nd ia , to d o s a p re se nta nd o a p ro xim a d a m e nte 5 m e se s d e id a d e
3.1Copolímero PLA-PGA
O c o p o lím e ro c o nsistiu e m um a m istura d e á c id o lá c tic o e á c id o g lic ó lic o (PLA/ PGA) na p ro p o rç ã o d e 50:50. C o ntro la m o s o p H d a so luç ã o a d ic io na nd o hid ró xid o d e só d io . Fo i utiliza d o o m é to d o d o s p re c urso re s p o lim é ric o s o u m a is c o nhe c id o como m é to d o Pe c hini, que é um a té c nic a q ue p o d e se r a p lic a d a no d e se nvo lvim e nto d e m a te ria is a va nç a d o s. O p ro c e sso é b a se a d o na c a p a c id a d e q ue c e rto s á c id o s o rg â nic o s, ta is como os ácidos cítrico, lático e o glicólico, possuem de formarem quelatos. Este s q ue la to s p o d e m e ste rific a r q ua nd o a q ue c id o s c o m um p o lia lc o o l e polimerizar a temperaturas mais elevadas formando uma resina.
3.2 Procedimento Cirúrgico
Os a nim a is fo ra m m a ntid o s em jejum 8h a nte s d o p ro c e d im e nto c irúrg ic o q ua nd o fo ra m a ne ste sia d o s via p a re nte ra l. A m e d ic a ç ã o c o nsistiu d e inje ç ã o intra m usc ula r d e 3m g / Kg d e Ke ta m ina (Fra nc o ta r – Vib ra c d o Bra sil Ltd a , Sã o Pa ulo , Bra sil) e 0,22m l d e c lo rid ra to d e tia zina (Rompum – Ba ye r AS – Sa úd e Anim a l, Sã o Pa ulo , Bra sil). C o m o c o m p le m e nta ç ã o a ne sté sic a e he m o stá tic a fo i utiliza d a infiltra ç ã o d e Hid ro c lo rito d e Me p iva c a ína (0,3m L/ Kg , Sc a nd ic a íne 2%) c / Ad re na lina (1:100.000).
instrum e nta l e m a te ria is esteriliza d o s. Ap ó s tric o to m ia e a nti-se p sia d a re g iã o a nte rio r d a tíb ia utiliza nd o PVP-I 10% degermante, fo i rea liza d a infiltração d o a nesté sic o lo c a l e um a inc isã o d e rm o -p e rio ste a l d e a p ro xim a d a m e nte 6c m d e c o m p rim e nto , c o m lâ m ina nº15 m o nta d a e m c a b o nº3, se g uid a d e d ivulsã o d o te c id o m o le c o m d e sc o la d o r d e periósteo (Molt no9) e exposição óssea (Fig. 1- 3).
Os te c id o s fo ra m re p o sic io na d o s e sutura d o s p o r p la no s empregando-se fio re a b so rvíve l (p o lig la c tina 910 – Vyc ril 4.0) c o m p o nto s c o ntínuo s no p la no p ro fund o e c o m fio m o no fila m e nta r (Nylo n, Mononylon) com pontos interrompidos no plano mais externo.
No p ó s-o p e ra tó rio im e d ia to o s a nim a is re c e b e ra m a d m inistra ç ã o sub c utâ ne a d e 100m g d e Am p ic ilina Be nza tina (30m g / kg ), c o m a fina lid a d e d e p reve nir infe c ç ã o p ó s-operatória e a d m inistra ç ã o intramuscular de 0,1ml de Dipirona Sódica a cada 6 horas durante 3 dias.
3.3 Eutanásia e preparo das amostras para análise microscópica 3.3.1 Imunoistoquímica:
Os 20 a nim a is fo ra m a ne stesia d o s e eutanasiados no s p e río d o s pós-o p e ra tó rio s d e 15, 40 e 60 d ia s. Se nd o 5 c o e lho s no p e río d o d e 15 d ia s, 5 no p e río d o d e 40 d ia s e 10 no p e río d o d e 60 d ia s p ó s-o p e ra tó rio s. A técnica d e e uta ná sia c o nsistiu d a p e rfusã o no ve ntríc ulo e sq ue rd o c o m so luç ã o sa lina tamponada p o r 5 m inuto s, e e m se g uid a c o m fo rm a ld eído 4% (Ac ro s Org a nic s) d ura nte 40 m inuto s utiliza nd o b o m b a p e rfuso ra Masterflex®LS (C o le -Parme r Instrum e nt C o m p a ny). Fina liza d a a p e rfusã o , a tib ia o nd e fo ra m insta la d o s o s im p la nte s fo i re m o vid a e p ré -fixa d a em fo rm a ld e íd o 4% d ura nte 6 ho ra s a tem p e ra tura d e 4oC (C e lsius), la va d a s em solução tampão (PBS) e imersas em solução descalcificadora (EDTA).
d o im p la nte . As a m o stra s te c id ua is fo ra m d e sc a lc ific a d a s e m EDTA na c o nc e ntra ç ã o d e 5%, p H 7,0, d isso lvid o e m á g ua MiliQ, por a p ro xim a d a m e nte 60 a 80 d ia s. Em se g uid a , a s se c ç õ e s te c id ua is fo ra m c rio p ro teg id a s c o m sa c a ro se a 30% (Merck), p a ra p o sterio r c o rte e m c rio sta to , a 14 m d e e spessura, m o nta d a s e m lâ m ina s p revia m e nte gelatinizadas.
semi-q ua ntita tiva m ente e m m ic ro sc ó p ic o óptico c o m o b je tiva d e a um e nto 20X Leic a Aristo p la n Mic ro syste m s (Leitz, Be nshe in, Ale m a nha ), a c o p la d o a um a c â m e ra d e c a p tura d e im a g em (Leic a®DFC 300FX, Le ic a Microsystems, Heerburgg, Switzerland) (Fig. 22).
3.3.1.1 Histologia:
As tíbias d e 5 a nim a is d o período d e 60 d ia s fo ra m re m o vid a s e a p ó s a fixa ç ã o fo ra m leva d a s d ire to a um a seq üê nc ia d e á lc o o is d e c o nc e ntra ç ã o c re sc e nte c o m tro c a d e so luç ã o a c a d a 24 ho ra s, se g uid o d e um b a nho d e a c e to na p o r 24 ho ra s. Ap ó s o b a nho d e a c e to na a s p e ç a s fo ra m e m e rsa s e m p o lim e til m e ta c rila to le nto (PMMAL) c o m tro c a s d iá ria s d ura nte 3 d ia s. A se g uir, a s p e ç a s re c e b e ra m 2 b a nho s d e Me til Metacrilato (MMA). Na se q üê nc ia d o p ro c e ssa m e nto , fo i rea liza d a a inc lusã o d a s p e ç a s e m MMA a sso c ia d o a o c a ta lisa d o r, Pe ró xid o d e Benzoíla 1%, aguardando-se o período de polimerização da resina (Fig. 17). Ap ó s o b te nç ã o d o s b lo c o s e m re sina a c rílic a c o nte nd o a s p e ç a s, e sta s fo ra m leva d a s a o m ic ró to m o (Exa kt®C utting Syste n Ap p a ra te b a u, Gm b h, Ha m b urg o , Ale m a nha ) e o b tid o s a ssim c o rte s c o m e sp e ssura e m m éd ia d e 50µm (Fig. 17 a 20). As lâminas foram coradas usando os corantes vermelho de alizarina (VA) e azul de Stevenel (AS) (Fig. 21).
3.4 Preparo da amostra para análise biomecânica
e xp o sta s, e o s implantes re a b e rto s p a ra re a liza ç ã o d a a ná lise biomecânica. Ne ste p ro c e d im e nto o te c id o m o le e ó sse o q ue se e nc o ntra va so b re a c a b e ç a d o s im p la nte s fo i c uid a d o sa m e nte rem o vid o (Fig . 9 e 10). Em se g uid a utiliza nd o -se d e um a c ha ve d e e nc a ixe a o im p la nte , e ste s fo ra m c o ne c ta d o s a m o nta d o re s p a ra q ue um a p a re lho d e to rq ue -reve rso (15-BTG ,To nic h, Ja p a n) fo sse utiliza d o (Fig .11). O s im p la nte s fo ra m sub m e tid o s à fo rç a g ra d ua l d o a p a re lho re g istra d o s e m Ncm, e fo ra m a no ta d o s o s va lo re s d e fo rç a d o m o m e nto d a rup tura d a interface do implante com o osso (Fig.12).
4. RESULTADOS
4.1. Análise macroscópica
Ao s 60 d ia s a p ó s a re a b e rtura d a s tíb ia s p a ra a re a liza ç ã o d o te ste b io m e c â nic o , fo i o b se rva d o que o s im p la nte s a p re se nta ra m -se e stá veis e re c o b e rto s c o m o sso ne o fo rm a d o e m a m b o s o s g rup o s. No g rup o tra ta d o (G ) o s im p la nte s apresentaram-se num a p o siç ã o trid im e nsio na l m a is p ró xim a d a p o siç ã o d e instalação. Entre ta nto , a lg uns implantes d o g rup o c o ntro le (C ) a p re se nta ra m -se inc lina d o s e m re la ç ã o à superfície óssea.
4.2. Análise biomecânica
4.2.1. Análise morfométrica por microscopia eletrônica por varredura (MEV)
Após 60 d ia s fo ra m o b se rva d a s d e fo rm a q ua lita tiva a s á re a s d e tecido ósseo a d e rid a s à sup e rfíc ie d o s im p la nte s re m o vid o s, e m a m b o s o s g rup o s, p o r ve zes iso la d a s o u re c o b rind o b o a p a rte d o s m esm o s o u q ua se totalmente rec o b e rta s p o r te c id o ó sseo e m to d a a sua exte nsã o (Fig.37-40).
4.3. Análise imunohistoquímica
p ro te ína e p e río d o s, ind ivid ua lm e nte p a ra c a d a g rup o , o nd e a a ná lise semi-q ua ntita tiva fo i re a liza d a p o r 3 a va lia d o re s d istinto s. Os a va lia d o re s a no ta va m o s e sc o re s p a d ro niza d o s em 20, 30, 60 e 90% d e a c o rd o c o m a quantidade d e im uno m a rc a ç õ e s visua liza d a s. Os e sc o re s fo ra m ta b ula d o s e sub m e tid o s à a ná lise e sta tístic a p e lo p ro g ra m a GMC. Os re sulta d o s obtidos podem ser visualizados pelos Gráficos 2, 3 e 4.
o b se rva d o na so m a d a s m éd ia s p e rc e ntua is d a s re g iõ e s a na lisa d a s, o q ue se to rna um ind ic a tivo d e q ue o te c id o ó sse o so fre u d e p o siç ã o d e c á lc io , ocorrendo sua mineralização (Gráfico 4).
4.3.1. Análise histológica qualitativa
implante apresentou-se b a sta nte c e lula riza d o c o m a p re se nç a d e osteócitos em grande número.
Aos 15 dias nota-se a presença de tecido ósseo em neoformação na á re a c o rre sp o nd e nte à s e sp ira s d o im p la nte no g rup o tratado e m to d a a e xte nsã o d a inte rfa c e (G )(Fig . 23) a lé m d e re sto s d o b io m a te ria l (PLA/PGA) (Fig . 24), e no g rup o c o ntro le a sp e c to d a inte rfa c e apresentando-se c o m te c id o ó sse o e m fo rm a ç ã o p re d o m ina nte m e nte na c o rtic a l sup e rio r e tec id o c o njuntivo a d ja c e nte à inte rfa c e (Fig . 25-26). Aos 40 d ia s no g rup o tra ta d o (G ) no ta -se a p re se nç a d e o ste ó c ito s e o ste o b la sto s b e m m a rc a d o s na re g iã o o c up a d a p e lo p ic o e va le d o im p la nte (Fig . 27), e no g rup o c o ntro le (C ) p re se nç a d e te c id o ó sseo p re d o m ina nte m e nte na c o rtic a l sup e rio r e te c id o c o m p a tíve l c o m conjuntivo p re e nc he nd o a inte rfa c e (Fig . 28-29). Ao s 60 d ia s no g rup o tra ta d o (G ) fo i o b se rva d a a usê nc ia d o b io m a te ria l a lém d e á re a s d e o sso maduro acompanhando o formato das espiras do implante (Fig. 30).
5. DISCUSSÃO
O q ue se te m e sp e ra d o c o m o re sulta d o d a utiliza ç ã o d e um b io m a te ria l q ue se rá utiliza d o c o m o sub stituto ó sse o é q ue o m e sm o a p re se nte c a ra c te rístic a s c o m o b io c o m p a tib ilid a d e , b io a b so rç ã o e p rinc ip a lm e nte p o te nc ia l d e o sse o ind uç ã o o u o sse o c o nd uç ã o . Entre ta nto , a s p e sq uisa s na s á re a s d e b io m a te ria is tê m d e m o nstra d o a s d ific uld a d e s e m se o b te r to d a s e ssa s c a ra c te rístic a s e m um únic o m a te ria l, ind ic a nd o q ue o s m e lho re s re sulta d o s sã o e nc o ntra d o s q ua nd o se utiliza m o s enxe rto s ó sse o s a utó g e no s, e m funç ã o d e se a p re se nta r c o m o um sub stituto ó sse o c o m p le to se nd o a lém d e tud o o sse o c o nd uto r, o sse o ind uto r e o ste o g ê nic o 23.
d e c a rb o no (C O2) c o m o p ro d uto s fina is d o m e ta b o lism o d o á c id o p o lilá c tic o , e e tileno g lic o l d a d eg ra d a ç ã o e nzim á tic a d o á c id o poliglicólico 16. Isso ind ic a q ue e sse s m a te ria is p o d e m so fre r b io d e g ra d a ç ã o sem c a usa r tra nsto rno s a o o rg a nism o a o g e ra rem se us p ro d uto s fina is d e m e ta b o lismo. Os p ro d uto s d a d e g ra d a ç ã o d e sse s copolímeros a p re se nta m b a ixa to xic id a d e . Em virtud e d a re d uzid a m a ssa d o s p o lím e ro s im p la nta d o s e à le ntid ã o d o p ro c e sso d e d e g ra d a ç ã o o u tra nsfo rm a ç ã o d o s p o lím e ro s e m m o nô m e ro s, estes encontram-se e m q ua ntid a d e s to xic o lo g ic a m e nte insig nific a ntes no o rg a nism o. Alé m d isso , tratam-se d e sub stâ nc ia s q ue p o d e m se r no rm a lm e nte e nc o ntra d a s no o rg a nism o hum a no e a nim a l, q ue sã o d e g ra d a d a s m e d ia nte m e c a nism o s fisio ló g ic o s d e c o ntro le m e ta b ó lic o . A im p la nta ç ã o d o c o p o lím e ro nã o d e se q uilib ra o o rg a nism o p o rq ue o s seus c o m p o ne nte s já e stã o fisiologicamente presentes no mesmo24.
Enc o ntra m o s na lite ra tura o c o p o lím e ro d e PLA/ PG A se nd o utiliza d o na fo rm a g e l p a ra p re e nc him e nto d e d e feito s p e rio d o nta is, e m p ro c e d im e nto s e nd o d ô ntic o s p e ria p ic a is e a té e m leva nta m e nto d e seio m a xila r p révio à insta la ç ã o d e im p la nte s d e nta is1, 7. Isto e m funç ã o d e sua c o nsistê nc ia e p la stic id a d e se m e lha nte à d e um silic o ne d e uso hid ráulico. Portanto, p o d e se r intro d uzid o na c a vid a d e a lve o la r e a g ir na m em b ra na d o seio levantando-a d e m o d o a tra um á tic o , re d uzind o o risc o d e laceração na m em b ra na , risc o a sso c ia d o à s m a no b ra s d e leva nta m e nto c o m instrum e nto s m e tá lic o s. Ap ó s e leva d a a m e m b ra na , é p o ssíve l intro d uzir junto c o m o g e l, o utro s m a te ria is q ue se ja m c o nsid e ra d o s necessários c o m o o sso a utógeno. C o ntud o , o g e l, m e sm o ind ivid ua lm e nte , estabiliza a membrana depois de elevada, pois logo que entra em contato com o sangue, que apresenta solubilidade aquosa, sofre hidrólise,e assume o a sp e c to e a c o nsistê nc ia d e um g e sso m a c io e p o ro so , q ue c o nstitui e strutura id e a l p a ra a e sta b iliza ç ã o d e um c o á g ulo , o q ua l o rig ina d o d o periósteo fic a iso la d o e ntre o a sso a lho d o seio e a m e m b ra na , posteriormente transformando-se em osso1.
tíb ia s d e c o e lho , se m q ua lq ue r e sta b ilid a d e p rim á ria 25. Fo i o b se rva d a depo siç ã o ó sse a na inte rfa c e / o sso im p la nte no g rup o tra ta d o c o m o PLA/ PGA, ind ic a nd o q ue o b io m a te ria l p o d e se r utiliza d o c o m o p re e nc him e nto d e e sp a ç o s e ntre a s e sp ira s d e um im p la nte insta la d o se m e sta b ilid a d e p rim á ria e m tíb ia s d e c o e lho . Isso p o d e se r e m funç ã o d a sim p le s p e rm a nê nc ia d o b io m a te ria l im p e d ind o a inva sã o d e te c id o c o njuntivo na sup e rfíc ie d o im p la nte d ura nte um te m p o sufic ie nte p a ra o c o rre r d e p o siç ã o ó sse a c ulm ina nd o c o m um a inte rfa c e ó sse a intimamente aderida à superfície do implante.
Outro fa to r im p o rta nte a se r evid e nc ia d o é a influê nc ia d a d e nsid a d e ó sse a , o u seja , d a q ua lid a d e d o tra b e c ula d o d isp o níve l e m um sítio e d ê ntulo . A d e nsid a d e ó sse a é o p a râ m e tro m a is im p ortante p a ra a estabilidade inic ia l d o im p la nte p e rm itind o a a usê nc ia d e m o vim e nto d ura nte o p rim eiro e stá g io d e c ic a triza ç ã o c irúrg ic a . A q ua ntid a d e ó ssea d isp o níve l d e sc rita c o m o a a rq uite tura e xte rna o u vo lum e d a á re a e d ê ntula c o nsid e ra d a p a ra o s im p la nte s, va i influe nc ia r no re sulta d o fina l d a e sta b ilid a d e p rim á ria . Alé m d isso , c o nsid e ra nd o a esp e ssura , la rg ura , c o m p rim ento e a ng ula ç ã o d a á re a e d ê ntula , um a q ua ntid a d e ó sse a suficiente é a condição primária para a colocação do implante no correto posicionamento ó sse o . Os re sulta d o s fa vo rá veis o b tid o s ne ste e stud o na a ná lise d e to rq ue re ve rso revela ra m e sta b ilid a d e no s im p la nte s m e sm o e m um leito so b re fre sa d o . Alg uns fa to re s p o d e m te r c o ntrib uíd o p a ra e sse s re sulta d o s c o m o o b io m a te ria l o u a p re se nç a d e o sso a utó g e no a sso c ia d o a o c o p o lím e ro , já q ue q ua nd o utiliza m o s e ssa s a sso c ia ç õ e s o s re sulta d o s obtidos são favoráveis. Entretanto, devemos salientar que, o tratamento de sup e rfíc ie q ue ta m b é m p o d e influe nc ia r e a c e le ra r o p ro c e sso d e d e p o siç ã o ó sse a na inte rfa c e 29, 30, ne ste e stud o nã o e xe rc e u influê nc ia , em função de o implante utilizado ter sido de superfície usinada.
6.
CONCLUSÃO
7.
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Manuscripts sho uld b e d o ub le -sp a c e d w ith a t le a st a o ne -inch m a rg in a ll a ro und . Num b e r a ll p a g e s. Do no t inc lud e a utho r na m es as headers or footers on each page.
Title pa ge. Pa g e 1 sho uld inc lud e the title o f the a rtic le a nd the na m e , d e g re e s, title , p ro fe ssio na l a ffilia tio n, a nd full a d d re ss o f a ll a utho rs. Pho ne , fa x, a nd e -m a il a d d re ss m ust a lso b e p ro vid e d fo r the c o rre sp o nd ing a utho r, w ho w ill b e a ssum e d to b e the first-listed a utho r unle ss o the rw ise no ted . If the p a p e r w a s p re se nte d b e fo re a n o rg a nize d g ro up , the na m e o f the o rg a niza tio n, lo c a tio n, a nd d a te should be included.
Abstra ct/ key words. Pa g e 2 o f the m a nusc rip t sho uld inc lud e the a rtic le title, a m a xim um o f 300-w o rd a b stra c t, a nd a list o f ke y w o rd s no t to e xc e e d 6. Ab stra c ts fo r b a sic a nd c linic a l re se a rc h a rtic les m ust b e struc ture d w ith the fo llo w ing se c tio ns: (1) Purp o se , (2) Ma te ria ls a nd Me tho d s, (3) Re sults, a nd (4) C o nc lusio ns. Ab stra c ts fo r a ll o the r typ e s o f a rtic le s (ie , lite ra ture revie w s, c linic a l re p o rts, te c hno lo g ie s, a nd c a se re p o rts) sho uld no t e xc e e d 250 w o rd s a nd need not be structured.
Introduction. Sum m a rize the ra tio na le a nd p urp o se o f the stud y, giving only pertinent references. Clearly state the working hypothesis. Materials and Methods. Present materials and methods in suffic ient detail to allow c onfirmation of the observations. Published methods should be referenc ed and disc ussed only briefly, unless modifications ha ve b e e n m a d e . Ind ic a te the sta tistic a l m e tho d s use d , if applicable.
Results. Pre se nt re sults in a lo g ic a l se q ue nc e in the te xt, ta b le s, a nd illu stra tio n s. Do n o t re p e a t in th e te xt a ll th e d a ta in th e ta b le s o r illustrations; emphasize only important observations.
Discussion. Em p ha size the ne w a nd im p o rta nt a sp e c ts o f the stud y a nd the c o nc lusio ns tha t fo llo w fro m the m . Do no t re p e a t in d e ta il d a ta o r o the r m a te ria l g ive n in the Intro d uc tio n o r Re sults se c tio n. Re la te o b se rv a tio ns to o the r re le v a nt stud ie s a nd p o int o ut the implications of the findings and their limitations.
c la im ing p rio rity a nd a llud ing to w o rk tha t ha s no t b e e n c o m p le te d . Sta te ne w hyp o the se s w he n w a rra nte d , b ut c le a rly la b e l the m a s such.
Acknowledgments. Ac kno w le d g e p e rso ns w ho ha ve m a d e sub sta ntive c ontrib utions to the stud y. Sp ec ify g ra nt or other fina nc ia l sup p ort, c iting the na me of the sup p orting org a niza tion a nd g ra nt number.
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Pro vid e c o m p le te info rm a tio n fo r e a c h re fe re nc e , inc lud ing na m es o f a ll a utho rs (up to six). If the re fe re nc e is to part of a book, also include title of the chapter and names of the book's editor(s).
Journal reference style:
1. Johansson C, Albrektsson T. Integration of screw implants in the rabbit: A 1-ye a r fo llo w -up o f re m o va l to rq ue o f tita nium im p la nts. Int J Oral Maxillofac Implants 1987;2:69-75.
Book reference style:
1. Ska la k R. Asp e c ts o f b io m e c ha nic a l c o nsid e ra tio ns. In: Brå ne m a rk P-l, Za rb GA, Alb re ktsso n T (e d s). Tissue-Inte g ra te d Pro sthe se s: Osse o integ ra tio n in C linic a l De ntistry. C hic a g o : Quinte sse nc e , 1985:117-128.
ILLUSTRATIONS AND TABLES
Illustra tio ns a nd ta b le s sho uld b e e m b e d d e d in a PC Wo rd document.
All illustrations and tables should be grouped at the end of the text. O rig ina l slid e s o r hig h-re so lutio n im a g e s m ust b e se nt to the Pub lishe r's office upon acceptance of the article.
No te tha t a rtic le a c c e p ta nc e is p e nd ing the rec e ip t o f a c c e p ta b le original art.
Bla ck & white–Sub m it thre e se ts o f hig h-q ua lity g lo ssy p rints. Sho uld the q ua lity p ro ve ina d eq ua te , ne g a tives w ill b e re q ue ste d a s w e ll. Pho to g ra p hs should be unmounted and untrimmed.
Radiographs–Submit the original radiograph as well as two sets of prints. Color–C o lo r is use d a t the d isc re tio n o f the p ub lishe r. No c ha rg e is m a d e fo r suc h illustra tio ns. Orig ina l slid es (35-m m tra nsp a renc ie s) m ust b e sub m itte d , p lus tw o se ts o f p rints m a d e fro m the m . Whe n a se rie s o f c linic a l im a g e s is sub m itte d , to na l va lue s m ust b e unifo rm . Whe n instrum e nts a nd a p p lia nc e s are photographed, a neutral background is best.
Drawings–Fig ure s, c ha rts, a nd g ra p hs sho uld b e p ro fe ssio na lly d ra w n a nd le tte re d la rg e e no ug h to b e re a d a fte r re d uc tio n. Hig h-re so lutio n (a t le a st 300 d p i) la se r-p rinte d a rt is a c c e p ta b le (no p ho to c o p ie s, p le a se ); a lso provide electronic file if possible.
Electronic Files–May be accepted if original figures (as specified above) are una va ila b le . Re so lutio n m ust b e a t lea st 300 d p i; file s sa ved in .tiff o r .e p s format are preferred.
Legends–Figure legends should b e g ro up e d o n a se p a ra te she e t a nd typ e d double-spaced.
MANDATORY SUBMISSION FORM
The Ma nd a to ry Sub m issio n Fo rm (p ub lishe d in issue s 1 a nd 4 a nd a c c e ssib le at www.quintpub.com) m ust b e sig ned b y a ll a utho rs a nd fa xe d to the JOMI Manuscript Editor (630 736 3634)
PERMISSIONS AND WAIVERS
Wa ive rs m ust b e o b ta ine d fo r p ho to g ra p hs sho w ing p e rso ns. Whe n suc h w a ive rs a re no t sup p lie d , fa c e s w ill b e m a ske d to p reve nt identification.
ANEXO 2: TABELAS, GRÁFICOS E ILUSTRAÇÕES
Ta bela 1: Da d o s d o s va lo re s o b tid os na a ná lise d e torque-reve rso no s g rup o s c o ntro le (C )
e tratado (G) no período de 60 dias.
AMOSTRAS Período 60 dias
C(controle) G( PLA-PGA + OSSO)
Amostra 1 22 15
Amostra 2 16 21
Amostra 3 10 22
Amostra 4 8 20
Amostra 5 10 30
Média 13,2 21,6
Desvio padrão 5,8 5,4
Ta bela 2: Te ste esta tístic o p a ra m étric o utiliza nd o a m o stra s ind e p e nd e ntes p a ra a ná lise d e
torque-reverso nos grupos controle (C) e tratado (G).
GMC C e G
Valor Calculado de
T 2,38
Graus de Liberdade
8,00 Media de amostra
(1) 13,20
Media de amostra
(2) 21,60
Probabilidade de
Igualdade 4,32*
Tabela 3: Análise semi-quanitativa. Médias percentuais das imunomarcações obtidas nas diferentes regiões nos períodos de 15 e 40 dias nos grupos C e G.
Médias das Amostras de Torque Reverso (N.cm)
5,8 5,4 13,2 21,6 0 5 10 15 20 25
Média Desvio padrão
Controle Tratado
Gráfico 1: Méd ia d a s a m o stra s d e to rq ue reve rso d o s g rup o s C e G no p e río d o d e 60 d ia s (<a = 0,05 >).
C (Controle) G (Tratado) Período Proteína Cortical
Superior Medular Cortical Inferior Cortical Superior Medular Cortical Inferior
OPG 20% 6,6% 20% 20% 33,3% 46,6%
RANKL 26,6% 6,6% 46,6% 56,6% 20% 20%
15 dias
Osteocalci
na 6,6% 6,6% 13,3% 46,6% 20% 60%
OPG 43,3% 46,6% 33,3% 20% 20% 20%
RANKL 6,6% 20% 60% 56,6% 33,3% 46,6%
40 dias
Osteocalci
Somas Percentuais dos Valores das Regiões Analisadas - GRUPO CONTROLE
20,0%
26,6%
6,6%
6,6% 6,6% 6,6%
20,0% 46,6% 60,0% 46,6% 26,6% 43,3% 6,6% 40,0% 46,6% 13,3% 33,3% 20,0% 0,0% 10,0% 20,0% 30,0% 40,0% 50,0% 60,0% 70,0%
OPG RANKL Osteocalcina OPG RANKL Osteocalcina
15 dias 40 dias
Cortical Superior Medular Cortical Inferior
Gráfico 2: So m a s p e rc entua is d o s va lo res d a s im uno m a rc ações d a s re g iõe s a na lisa d a s no grupo controle (C). Período de 15 e 40 dias.
Somas Percentuais dos Valores das Regiões Analisadas - GRUPO G
20,0% 56,6% 56,6% 33,3% 20,0% 20,0% 33,3% 46,6% 66,60% 56,60% 20,0% 46,6% 56,60% 20,0% 20,0% 60,0% 20,0% 46,6% 0,0% 10,0% 20,0% 30,0% 40,0% 50,0% 60,0% 70,0%
OPG RANKL Osteocalcina OPG RANKL Osteocalcina
15 dias 40 dias
Cortical Superior Medular Cortical Inferior
Soma: Cortical Superior + Medular + Cortical Inferior
47%
80%
27%
123%
87%
113%
0% 20% 40% 60% 80% 100% 120% 140%
OPG RANKL Osteocalcina OPG RANKL Osteocalcina
15 dias 40 dias
Fig. 1 – Anti-sepsia. Fig. 2 – Incisão.
Fig. 3 - Retalho cirúrgico descolado.
Fig. 5 – Leito receptor.
Fig. 4 – Fresagem do leito receptor.
Fig. 6 - Coleta de osso raspado (G).
Fig. 7 – Polímero PLA/PGA adicionado
Fig. 11 - Re m o ç ã o d o im p la nte p or torque reverso (G).
Fig. 12 - Neg a tivo d a á re a o nd e fo i insta la d o o im p la nte a p ó s sua remoção (G).
Fig. 9 – Im p la nte a p ó s 60 d ia s d e instalação (G).
Fig. 13 – So ro d e b urro para o processamento imunohistoquímico.
Fig. 14 – Soro Donkey.
Fig. 10 - Pre p a ro d o te c id o ó sseo p a ra e nc a ixe d e c ha ve p a ra torquímetro manual (G).
Fig . 15 – Co lo ra ç ã o d a s lâ m ina s p o r DAB.
