EXTRAÇÃO DE FRAÇÕES ANTIGÊNICAS DE
S MANSONI
COM KC1 *
M auro Sca pin * * e Miriam Tendler* * *
U tiliz a n d o 5 p a r tid a s d e S. mamsoni a d u lto s , o b tid o s p e la in fe c ç ã o d e c o b a io s e c a m u n d o n g o s , o b tiv e r a m - s e t r ê s e x tr a t o s a n tig ê n ic o s ( E l, E 2 e E 3 ) . E s te s e x tr a to s , e m c o n ta c to c o m so ro d e d o e n te s e s q u is to s s o m ó tic o s , fo r n e c e r a m as lin h a s d e p r e c ip ita ç ã o d a F ig. 1 p e lo p ro c e s so d e im u n o e le tr o o s m o fo r e s e .
Estudos sobre os componentes antigê nicos de S. m a n s o n i (form as larvares e adultas) vêm sendo desenvolvidos, visando, através de investigações imunoquímicas, eíetuar sua caracterização, isolamento e purificação. A análise da literatu ra mos tra que se têm extraído frações antigênicas usando-se homogeneizados de vermes adultos, cercárias e/ou ovos de S. m a n s o n i, em extratos aquosos (6; 11), soluções de NaCl (1; 2; 4; 10) ou soluções salinas tam - ponadas (8). Alguns autores utilizaram ul- trasom em suspensão de água destilada, tamponada com EDTA 0,02M (5) e ainda associação de ultrasom e homogeneização em solução de NaCl 0,85% (3).
A presente comunicação refere-se à ex tração antigênica pelo KC1 3M de 5 p a r tidas de vermes adultos de S. m a n s o n i ob tidas pela infecção de cobaios e cam un dongos, sendo um a das partidas a m istura de parasitos destes dois hospedeiros. A téc nica de extração consistiu na utilização de 250 mg de vermes secos, em 2,0 ml de so
lução KC1 3M, submetidos à agitação em agitador mecânico a 12,5 ciclos por segun do durante 3 horas à tem peratura am bi ente (20°C). Os vermes foram m antidos em suspensão na solução de KC1, ficando em repouso por 24 horas a 4°C e a seguir submetidos à centrifugação a 1.000 g por 10 m inutos, p ara sua sedimentação. O so- brenadante foi novam ente centrifugado a 10.000 g, d u ran te 30 m inutos a 4°C, para clarificar a solução e esta utilizada como extrato E l. Um segundo extrato foi prepa rado usando-se os vermes anteriorm ente tratados com KC1 3M, lavados duas vezes em água destilada, secados e submetidos à homogeneização em solução de NaCl 0,15M como descrito anteriorm ente (9), constitu indo-se no extrato E2. Um terceiro extra to, E3, foi obtido a p a rtir de homogeneiza ção de suspensão de vermes em solução de NaCl 0,15M (9).
Os soros de quatro doentes esquistosso móticos, cujos diagnósticos foram feitos por métodos coprológicos, portadores de
* T rabalho realizad o n o I n s titu to G onzaga d a G am a F ilh o d a U .G .F . e I n s titu to de E n d em ias R u -rais d a F .I .O . CRUZ, M in istério d a Saúde.
** Professor A ssisten te do D e p a rta m e n to de B iofísica do C e n tro de C iências B iológicas e d a S a ú d e e do In s titu to G o n zag a d a G am a P ilh o d a U .G .F .
*** Médica do I n s titu to d e E n d em ias R u ra is d a F .I .O . CRUZ — M in istério d a S aú d e e b olsista do Conselho N acional de P esquisas.
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Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
Vol. IX — NO 2
S 1 E T © S 1 E l
se f.s sa et
S3 E2 S3 E1
F i g u r a 1 — X .E .O .P . e n tre d ife re n te s soros de
p a c ie n te s p o rtad o re s de E. m sn sô n ic a S l, S2, S3) e os e x tra to s E l e E2, e v id en cian d o lin h a s de p re ci p ita ç ã o com o e x tra to E l e a u sê n c ia d e sta s com o e x tra to E2.
form a clínica hepato-intestinal de esquis- tossomose m ansônica, foram usados como fonte de anticorpos p ara as experiências.
Os extratos antigênicos obtidos pelas técnicas acim a referidas (El, E2, E3) e os quatro soros de doentes esquistossomóticos foram submetidos ao processo de imuno- eletroosmoforese (I.E .D .F .) e o resultado
de três destes soros é visto n a Figura 1. Houve form ação de linhas de precipitação entre todos os soros testados e os extratos E l e E3. Não houve, entretanto, formação de im unoprecipitado entre os soros e o ex tra to E2, indicando que o KC1 M3 retirou todo o m aterial antigênico presente nas partidas de vermes utilizados no preparo de El.
S V M M A R Y
U sin g a d u l t S. m ansoni fro rn e x p e r i m e n ta l l y i n f e c t e d h a m s t e r s a n d m ice , t h r e e a n t ig e n ic f r a c t io n s w e r e o b ta in e d ( E l , E 2 e E 3 ) . T h e s e fr a c t io n s , in c o n ta c t w i t h s e ra o f p a t ie n ts w l t h h e p a t o i n t e s t i n a l s c h is to s o m ia s is , s h o w e d by im m u n o - e le tr o o s m o p h o r e s is t e c h n iq u e t h e p r e c ip ita tio n lín e s o f F ig . 1 .
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