Triagem de hemoglobinopatias em recém-nascidos do Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia

')))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))')))))—)L'

““Universidade Federal de Uberlândia, para

*********«obtenção do grau de Bacharel em

Ciências Biológicas.

Uberlândia

—MG

L')

UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÁNDIA CENTRODE CIENCIAS BIOMÉDICAS

CURSODE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Triagem

de

_{hemoglobinopaliag em}

recém-nascidos

do

_Hospital

de Clínicas: da Univergidade

Federal

de

Uberlândia.

Cristiane Valéria

de Oliveira

Camargo

Prof

ª

Mg.

Sílma

Maria Alves de

Melo

(Orientadora)

Monografia

apresentada

à Coordenação do Curso de Ciências Biológicas, da Universidade Federal de Uberlândia, para obtenção do grau de Bacharel em Ciências Biológicas.

Uberlândia

— MG

L')

UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLANDIA CENTRO DE CIÉNCIAS BIOMÉDICAS

CURSODE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Triagem

de

_{hemoglobinopaiiag em recém-nascidos:}

do

Hogpiial de

Clínicas

da

Universidade Federal

de

Uberlândia.

Crigliane Valéria

de Oliveira

Camargo

Aprovada pela

banca

examinadora em

_I

[1998 Nota:

Prof.ª Ms. Silma Maria Alves de Melo (Orientadora)

Bióloga Ãngela Ferreira Silva Rocha (Conselheira)

Prof.

ª

Dr.

ª

Cecília Lomônaco de Paula

(Conselheira) Uberlândia, 25 de Junho de 1998

))) )))))))))

)

)))))

)

)

)

))))

)

Aos

_{meus pais}

Valter

_e

Marlene,

pela

confiança

depositada

em mim, pelo exemplo de luta, pelosacrifício, pelo amor, carinho, incentivo

e pela

minha existência. Amo muito vocês... Obrigada

_por

tudo!

)

)

)

)

” _O

_homem

_se

_torna

_às

_vezes

_o

que ele próprio acredita que

é.

Se eu

insisto em

_repetirpara

mim

_{mesmo que não sou capaz}

de

realizar

alguma coisa,

é possível

que

realmente

me torne

incapaz de

fazê—la.

Ao contrário,

_se

_{tenho a convicção}

_de

_que

_posso

_fazê-la,

certamente

_{adquirirei a}

_{capacidade de}

realiza-Ia

mesmo

_que

não tenha

no começo”.

vi

agradecimentos

A _{Deus,. pelo Dom da vida}

_e

_{pela possibilidade}

de

_{completar mais uma}

etapa

da minha existência.

Ao Fernando,

meu

queridoirmão, pelo carinho, amizade,

compreensão e

companheirismo em

todos os

momentos. Você ilumina minha vida.

Ao Silvio, _{meu namorado,}

_{por ter}

_{compartilhado comigo}

os

momentos felizes

e

também

_os

difíceis

desta

caminhada,

_sempre

me incentivando... Obrigada pela

compreensão,

carinho, _{pelo amor, apoio...} Você

_{sempre será}

muito _especial. Aos

meus

avós,

pelas orações e

incentivos durante toda minha vida.

A Universidade

Federal de

_Uberlândia,

pela

_{oportunidade de adquirir}

as

ferramentas

com

as

quais abrirei novos horizontes, rumo à

satisfação dos meus

ideais profissionais

e

humanos.

A _{Silma, que}

_não

_se

_limitoua

_ser

_somente

_orientadora,

_{mas através}

_de

_seus

próprios conhecimentos

pode

transmitir-me

tantas

lições...

até

mesmo da própria vida. _{Obrigada pela amizade,} incentivo,

dedicação e

confiança

depositada

em mim.

)))))))

)

)

)

)

vii

Ao Dr. Silvio, diretor

_geral

_{do Hemocentro Regional}

_de

_{Uberlândia, que}

demonstrandoacreditar

no desenvolvimento

constante

da Ciência _{tem apoiado}

_e

incentivado

_a

realização de diversas

pesquisas.

Á _{Ãngela, minha co-orientadora, que em pouco tempo mostrou-se uma amiga}

especial,

daquelas

que chegam, entram

e

ficam _no

_coração

da

_{gente pela}

vida

à

fora... _{Obrigada pela atenção, força, carinho, incentivo}

_e

_otimismo.

Á _{Cecília, minhaco—orientadora,pelo carinho, simpatia, disponibilidade}

_e

atenção

durante todoo curso.

As minhas “irmãs”Miriam, Beatriz

_e

_Andréia,

_{por todos os}

_{momentos que}

juntas passamos, pelos

sorrisos

_e

lágrimas divididos,

_pelas

experiências compartilhadas,

pelas

lições aprendidas... Vocês moram no

meu

coração!

Aos funcionários

_e

_{amigos do Hemocentro Regional}

_de

_Uberlândia,

_pela

amizade

_e

_{apoio durante a realização}

_deste

_{trabalho. Foi muito bom conhece-los,}

Aos funcionários do Berçário do Hospital

de

Clínicas da Universidade

_Federal

de Uberlândia, pelo carinho,

_{dedicação e}

auxílio _{na coleta}

dos

dados.

Á _{Bióloga Maria Aparecida de Souza, do laboratório}

_de

_{Imunologia, pelo apoio}

))))

)

)

)

viii

A

_41ª

_{Turma de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Uberlândia,}

que compartilharam comigo diversos momentos

_e

tomaram

_{estes anos}

inesquecíveis. Sentirei

_saudades...

_{ValeuMiriam, Marta, Paula, Fofa (Adriana),} Katiere, _{Lisandra, Cristiana, Juliana, Évilin, Renato}

_e

_Ronaldo.

Resumo

O

_presente

_{trabalho foi realizado}

com recém—nascidos _{na Maternidade do} Hospital _{de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia e teve como}

principal objetivo _{a identificação dos recém-nascidos portadores de hemoglobinopatias.}

As

amostras

de

_sangue

_foram

_coletadas

_{do cordão}

umbilical, _{em tubos contendo} anticoagulante EDTA. A _{metodologia utilizada foi}

diferenciada em seletiva e específica. As _{técnicas seletivas consistiram em eletroforese qualitativa em}

acetato

de celulose _{pH 8,6}

_e

_{resistência globular osmótica em}

NaCl _{0,36%. Como}

_testes

específicos _{foram utilizados: a) eletroforese em ágar-fosfato}

pH 6,2%; b) _{análise da} morfologia eritrocitária; c)

_dosagens

_{de HbS e Hb Bartªs}

por eletroforese quantitativa em

acetato

de celulose _{pH 8,6; d) dosagem de hemoglobina Fetal}

e

e)

_pesquisa

de

agregados

_{de hemoglobina de Bartªs. Neste}

_estudo

_foram

analisadas

601

_amostras

de

_sangue,

_{detectando—se ?}

_casos

de hemoglobinas anormais _(1,16%),

_sendo

_0,16% de HbFAS

_e

_{1,00% de Hb Bartis. Nos recém-nascidos}

caucasóides

foi _observada

uma frequência de 0,5% _{de hemoglobinopatias, enquanto que nos negróides}

esta

frequência foi _{de 2,38%. Os resultados}

_deste

estudo evidenciam

_a

_{importância da} implantação dos programas de

_{detecção e}

_{prevenção da hemoglobinopatias, bem} comoo

_{aconselhamento}

_genético

_aos

portadores, afim de prevenir a forma _{grave da} doença.

SUMÁRIO 1 — _INTRODUÇÃO ... 1 2 —OBJETIVO ... ₁₅ 3

-

_{MATERIAL E MÉTODOS} ... 16 3.1 _{_ Área de Estudo} ... 16 3.2 —Material ... 16 3.3 —Metodologia ... 17 3.3.1 — Conscientização ... 17 3.3.2 —identificação

das

Amostras... 18 3.3.3—Análises Laboratoriais ... 18 A—

Testes

Seletivos... 18 B —

Testes

Específicos... 19 3.3.4 —Aconselhamento Genético ... 21 3.3.5 —Análise Estatistica ... 22 4 —RESULTADOS ... 23 5 —DISCUSSÃO ... 27 6 —CONCLUSÓES ... 33 7 — REFERÉNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ... 35 8 _{_}APÉNDICE ... 40

)

)

)

)

)

l

_-

_Introdução

O

_{sangue é}

_{composto pelo plasma}

e

por três tipos _{de células: os glóbulos} brancos ou _leucócitos,

_{as plaquetas e}

_{os glóbulos vermelhos}

ou hemácias. O _plasma

transporta água, sais, hormônios

_e

_drogas

_para

_{os tecidos}

_e

_{retira deles detritos}

através

dos pulmões (na respiração) e dos rins (na _{excreção). Os leucócitos protegem} o organismo contra

_as

_infecções;

_{as plaquetas possuem}

importante papel no

_processo

_de coagulação

_sanguínea

_e

_{as hemácias}

_{realizam principalmente,}

o transporte de

_gases

(JUNQUEIRA & _{CARNEIRO, 1990).}

A _hemoglobina

_é

_{uma proteína}

encontrada

no interior

_das

_hemácias,

_e

_e' formada por quatro

_cadeias

_{polipeptídicas (as globinas)}

com um total _{de 574} aminoácidos. Duas

_{dessas cadeias}

_{têm 141 aminoácidos}

(aa.)

cada e são

conhecidas por

cadeias

do tipo alfa

_e

_{zeta. As outras}

_duas

_{possuem 146}

ae.

e

são denominadas

por

cadeias

do tipo _{beta, delta, gama-glicina, gama-alanina}

e

épsilon. Cada

_cadeia

polipeptídica

_está

_{ligada ao grupamento heme que}

_é

um _{complexo formado por um} átomo de _{ferro, situado no interior de uma estrutura}

2 ferroso

_e

_{dá a cor vermelha característica da hemoglobina.}

É

_este

_{complexo que}

_se

liga ao oxigênio

_e

dá a _molécula

_{sua capacidade}

_{de transporte de}

gases

(LEHNANN &

HUNSTMAN, 1974).

síntese bastante

_{elevado, uma vez que participam da composição de}

quase todas as

' '

,

e

os

pseudogenes

alfa—1

_e

zeta, que não sintetizam giobina devido a mutações sofridas. As

_cadeias

_{do tipo} beta

_são

_{sintetizadas em um}

complexo gênico localizado _{no braço curto do} cromossomo 11 _que

_é

_{formado pelos}

seguintes

_{genes: beta, delta, gama—alanina,}

gama-glicina e épsilon;

_este

último

_{se expressa somente}

_no

periodo embrionário. Os

genes

gama—alanina_{egama—glicina}

_são

_{característicos do}

periodofetal

_e

_os

_genes

_beta

e

delta

_{são atuantes}

_{a partir de uma}

_fase

_{do periodo}

fetal, _{atuando com toda plenitude} no periodo _{pós—nascimento.}

_{Esse processo}

_de

_{síntese e}

continuo

_{e se}

_{efetua dentro de} um equilíbrio _{de produção que permite}

_a

combinação

_pareada

_{entre globinas alfa}

_e

beta, alfa _{e delta, alfa e gama. A}

_síntese

dos diferentes tipos de hemoglobinas embrionárias, fetais

_e

_{adultas obedecem}

_a

_{um rigido}

controle genético (Figura 1) (NAOUM,1997).

CROMOSSOMO11 15 14 12 11 ! GENESDA:

GENESDA' CROMOSSOMO16

',.

Insulina '

:

,,,/'

C—Ha—ras—1 _"""""""

globdnas lipo alfa

_,

13

x g)obin;13do"pcbeta 117 p

/,

xx hormônio daparatireóide : x 5 q X _| | | '

GENES DO TIPO BETA

GENES DO TIPOALFA

G A Z _{qu1 wai (:} e 7 Y W 6 B

ºu,

&

WH?

5'_W3.

PAFiEAªJENTO DAS GLOBINAS _{TIPOS DE HEMOGLOBINAS}

Y ₍₁

D

7, a2

|:

--—-————-——--—--—— HbFm<c-1%)

õzaz

_Eu:]

_{--- Wma-3,5%)}

5

_Bºa?

_{(1 ———————}

HbA(96-98%)

FIGURA 1 — Representação esquemática dos genes _{localizados nos}

cromossomos 11

e 16 _{e os três tipos de hemoglobinas sintetizadas após o sexto mês de} vida (NAOUM, 1997).

O _{primeiro tetrãmero hemoglobinico, que predomina}

_nas

_quatro

_semanas

_iniciais

do periodo embrionário,

e

_{composto por}

_pares

_{de dimeros de}

_{cadeias zeta e}

_{épsilon, os}

quais formam a Hb Gower—l. _Outras

_duas

_{hemoglobinas embrionárias,}

_{presentes até a}

12ª

_{semana, são}

_{constituídas por}

_pares

_de

_{cadeias zeta e}

_{gama, alfa e épsilon, que} constituem

_as

Hb _{Portland e Hb Gower—2, respectivamente. Ao término}

_desse

_período

não ocorre mais

_{síntese das}

_{hemoglobinas embrionárias, predominando}

_{então nesta}

fase, a Hb Fetal, cuja _produção tem início _na

_{4ª semana}

_de

_gestação

_{com o aumento} progressivo do

_seu

nível _quantitativo

_ao

_{longo do desenvolvimento fetal. A Hb A1,} composta por dimeros de

cadeias

alfa

_e

_beta,

_e

_{sintetizada a partir da 10ª}

_{semana e se}

mantém em

_{concentrações}

_{próximas a} 10%

_até

_{o nascimento. A Hb A; por}

_sua

_vez,

_é

formada por

cadeias

alfa _{e delta, começando a}

_ser

_{sintetizada na}

_{25ª semana}

_em

concentrações

_{reduzidas que permanecem ate' o nascimento,}

_aumentando

_lentamente

até se

estabilizar no 6º mês de _{vida (Figura 2) (NAOUM, 1990).}

Os eritrócitos do _{recém-nascido contém aproximadamente 80% de Hb Fetal,} 20% de HbA1

e

_{menos que 0,5% de HbA2. Pouco}

_antes

_{do nascimento ocorre um}

aumento da

_síntese

_de

_cadeias

_{beta, a Hb Fetal cai progressivamente}

_após

o nascimento,

chegando

a um mínimo em torno do 40 _{mês de idade, porém}

_{esta queda}

PERÍODO

mamou/xm

5 a B _{TIPOS DE Hb} CONCENTRAQES a

_cª

_Ez — Hb Gonr-I ao

_{-40 v.}

; &

cª

tº

- Hb Portland _{5 - ao} 'l-1“ _{(12 52} — Hb Gouw-2 IO - 20

v.

Iº

_uz

_:?

— _{Hb Foto! 5 - 40}

'I.

E cn-us

_cn."

PERÍODO _FETAL TIPOS DE Hb _{CONCENTRACÓES} «2 xª — _{Hb Ford}

90. nov.

«ZGZ-HbA

_O-IO'I.

uzíz-Hb

A2

o-w.

CR-IS CRll

PERÍODO PÓS—_NASCIMENTO

_(cdma

_do

₆

_meses)

TIPOS DE Hb _{cowceumxxcões} 012 82 - Hb A

ses-gav.

«2 52 - Hb _{A2 2,5 - 3.7 'I.}

:?

Y2

'

Hb Fetal O _- I

'I.

LEGENDA: CR—Zõ _CromoSsomo

_nº

₁₆ (:P-le CQ-l _(TR—1.7

_Cromwsomo

_nº

]]

FIGURA 2 — Formação

das

hemoglobinas

humanas

_{nos diferentes períodos}

.

Gene

_Ativo

Gene

_Inativo

do desenvolvimento (NAOUM, _1990).

6 A Hb _{Fetal constitui a maior hemoglobina}

in _{utero, enquanto que a HbA1}

_é

o constituinte predominante na vida _{extra uterina. Ambas}

_{estão presentes}

na mesma célula, porém a proporção relativa de

_cada

_{hemoglobina varia com a idade gestacional}

orgânico interage com _a HbA1 _diminuindo

_sua

_{afinidade para}

o oxigênio, _{e portanto} favorece a liberação do _oxigênio. A Hb _{Fetal não interage com 0 2,3 DPG}

em qualquer grau significativo,

_{consequentemente, as}

_{células contendo}

Hb _{Fetal têm uma afinidade} de oxigênio mais elevada do que

as

que contêm HbA1_ O _{aumento de afinidade de}

oxigênio dos eritrócitos fetais

_é

_{vantajoso para a extração do oxigênio}

no

_sangue

materno dentro da placenta. Ao _{nascimento, com a oxigenação do}

sangue

feita _nos pulmões,

_a

Hb _{Fetal não tem mais condições ideais para}

sua

função,

sendo

substituída pela HbA1 _{(SCHAFFER, 1979).}

Seis

_{meses após}

_{o nascimento,}

as concentrações

_{e os tipos normais de}

hemoglobina

_{passam a ser}

_{os seguintes: HbA1}

(96 - 98%), HbA2 _{(2,5 - 3,7%) e Hb Fetal} (o - _{1%) (SCHILLER,1980).}

Os problemas na

síntese

_{de globinas}

_se

_{manifestam clinicamente}

após

os

durante o _{periodo neonatal (OSKl & NAlMAN,}

1984). As _{hemoglobinopatias}

_{são decorrentes}

de

_alterações

_{da molécula de} hemoglobina

_causadas

_{por defeitos de}

_síntese

de globinas ou da

_sua

_{própria estrutura} química, com _{efeitos anormais}

_e

_{de intensidades variáveis nos}

7 fisiológicos, _podendo

_ser

_{classificadas}

em _{dois grupos:}

_talassemias

_{e hemoglobinas} variantes _{(NAOUM, 1997).}

O _termo

_talassemia

_(do

grego

talasso

= _mar

_e

_haima

:

_sangue)

_{foi originalmente}

selecionado para referir-se a uma forma _{grave de anemia, de manifestações}

precoces

na vida,

_associada

_{à esplenomegalia}

e alterações ósseas,

_{cujos primeiros registros de}

nestas

_{populações,}

_{as talassemias}

_não

estão,

_{em absoluto, restritas}

_{a esta}

_{região, mas}

sim, _{amplamente distribuidas pelo mundo}

(OHENE-FREMPONG & _{SCHWARTZ, 1980).}

As

_{talassemias são decorrentes}

_{de falhas}

a

nível do

_gene

_{regulador, onde em} geral,

_essas

_{mutações provocam um}

bloqueio de

_síntese

_{de uma}

_das

_globinas, com intensidades variáveis, ou

até

mesmo total. _{Ocorrem então, desequilíbrios entre a}

As _{hemoglobinopatias relacionadas}

com _{anormalidades de}

_cadeias

_beta

_são

_de modo geral não

_aparentes

_{clinicamente no}

periodo neonatal, uma vez que

este

distúrbio

_é

_{devido a um decréscimo da produção de}

8

aparecem

inicialmente

_após

_{os 2 ou 3}

_meses

_{de idade, quando a maior parte da}

síntese

de hemoglobina consiste na produção de

_cadeias

_{beta. Por outro lado,}

_as

anormalidades de

_cadeias

_{gama podem}

_ser

clinicamente manifestas em recém-nascidos, e depois

_{desaparecerem}

_{à medida que a criança}

se

torna maior

_e

aumenta-se

a

síntese

_{de cadeia beta. Os distúrbios na produção da}

cadeia

alfa,

_{são aparentes}

ao

_{nascer, uma vez que}

_essas

_cadeias

constituem a metade da molécula da Hb Fetal. Na

_ausência

_{ou diminuição}

_{das cadeias}

alfa,

são

_{formados tetrãmeros de}

_cadeias

gamas,

chamados

Hb Bart's. _{Sendo quatro}

_genes

_{(dois de}

_cada

genitor) _{que regulam a} produção normal de

_cadeias

_{polipeptídicas alfa, a gravidade do}

defeito

_desta

_cadeia

_é

proporcional ao conteúdo de Hb Bart”s _do

_sangue

_{de cordão}

umbilical (SCHAFFER,1979).

De _{uma forma geral,}

_as

_síndromes

alfa

_{talassêmicas são}

_{classificadas em:}

portador

silencioso _(ou

_talassemia

_{alfa mínima)}

_sendo

o tipo _{mais comum}

_e

apresentando deleção

de

_apenas

_{um gene; traço alfa talassêmico}

(ou talassemia alfa menor) com

_deleção

_{de dois}

_genes

_alfa;

_{doença de}

hemoglobina H (ou _{talassemia alfa} intermédia)

_causada

_pela

_deleção

_{de três}

_genes

_alfa

e

_{hidropisia fetal que}

_é

_{a forma}

mais grave de todos os tipos de talassemias,

_sendo

_{letal (NAOUM,1997).} As _{hemoglobinas variantes}

_{são decorrentes}

de falhas _no

_gene

_{estrutural onde} um _{aminoácido qualquer da cadeia polipeptídica}

(alfa ou _{beta) pode}

_ser

_{substituído por} outro. As _{hemoglobinas variantes mais}

_{frequentes são}

a S (falciforme)

_{e a}

C. A HbS

_é

originada por uma substituição do _aminoácido

_nº

_{6 da cadeia beta, o ácido}

glutâmico, pela valina;

_e

_{a HbC, ocorre devido}

_à

substituição do mesmo aminoácido pela lisina (LEHMANN & _{HUNSTMAN, 1974).}

A _{anemia falciforme}

_é

_a

_doença

gene

_{afetado (heterozigotos), produzindo HbA}

_e

_{HbS (HbAS),}

tendo em

_{cada gestação}

a probabilidade de 25% de ter uma criança portadora da forma _{homozigota (HbSS).} Além _{disso, o}

_gene

_{da HbS pode}

combinar—se com _{outras anormalidades hereditárias}

das

_{hemoglobinas (HbC, HbD,}

talassemias, etc.) gerando combinações que também podem

_ser

_{sintomáticas.}

_Desse

_modo,

_todas

essas

formas sintomáticas do

_gene

_da HbS, _{em homozigose ou em combinação,}

são

_{conhecidas como}

_doenças

_falciformes

(BRASIL,1996).

Uma

_das

_{características}

_{dessas doenças}

é a

sua

variabilidadeclínica: _enquanto alguns pacientes _{têm um quadro de grande gravidade e}

estão

_{sujeitos a inúmeras}

complicações

_e

_{frequentes hospitalizações, outros}

apresentam

_{uma evolução mais}

benigna, em alguns

_{casos quase}

_{assintomática. Tanto fatores hereditários como} adquiridos contribuem para

esta

variabilidadeclínica. _{Entre os fatores adquiridos mais} importantes,

_destaca-se

_{o nível sócio-econômico,}

com

_{as conseqúentes}

_{variações na} qualidade de alimentação, de prevenção de infecções

_e

de

_assistência

_{médica. No} quadro clínico, _{alem de predominar}

_as

manifestações de anemia crônica, ocorrem episódios de

_dores

_{ósteo—articulares,}

_dores

abdominais, infecções

_e

_infartes pulmonares, retardo do _{crescimento e maturação sexual, acidente vascular cerebral}

e

comprometimento crônico de _{múltiplos órgãos,}

_sistemas

_{ou aparelhos.}

A _{destruição do}

baço e a principal _{responsável pela suscetibilidade}

aumentada

_{à infecções graves}

(septicemias).

Se

_{não diagnosticada precocemente,}

estão associadas

à alta mortalidade na infância,

_sendo

_{poucos os}

_afetados

que sobrevivem à idade adulta

10 A _{anemia falciforme originou-se na África}

e

foi _trazida

_às

_{Américas pela}

imigração forçada dos escravos. O

_gene

_{da HbS}

_apresenta

_{alta prevalência}

em várias regiões da África _{e outras}

_partes

_do

mundo onde a malária por Plasmodium falciparum

é

_{endêmica, ou onde existam grupos de imigrantes portadores}

do

_gene

S. A _alta

prevalência de HbS

_nessas

_áreas

_pode

_ser

_{explicada por dois mecanismos:}

seleção

de heterozigotos em

áreas

altamente

_{maiarígenas e}

_imigração

_espontânea

_{ou forçada dos} portadores do

_gene

_{alterado (ALLISON,1961 e 1964).}

No Brasil, _distribui-se

_{heterogeneamente, caracterizando-se}

por significativa mistura _{racial, de modo que o}

_processo

_{de colonização teve grande}

influência _na

dispersão

de

_genes

_{anormais, e notadamente}

_{das talassemias}

e falcemias. _{Assim, a} distribuição

_das

_{hemoglobinas anormais, provenientes de formas variantes}

e

talassêmicas,

estão

_{intimamente relacionadas com}

_as

_{etnias, que compõe}

nossa

população,

sendo

_{mais frequente onde a proporção de}

_antepassados

negros da população

é

maior, _{como por exemplo na região nordeste. Além da África}

e Américas,

e

hoje

_encontrada

_{em toda Europa}

_e

_em

_grandes

_{regiões da Ásia. No}

sudeste

do Brasil, a prevalência média de heterozigotos (portadores assintomáticos) é de 2%, valor _que

sobe

a cerca de 6 — 10% entre negros

(NAOUM,1984).

As _{hemoglobinopatias,}

_nas

_{diferentes populações do}

mundo, tem sido alvo de citações da Organização Mundial _de

_Saúde

_{(OMS), recomendando a implantação de} serviços de triagem em

países

onde

_sua

incidência

_é

_{alta, independente de}

_{seu estado}

atual de desenvolvimento. _{Em 10 de maio de 1996 foi aprovado pelo}

Ministério _da

Saúde

_{e pela Coordenadoria de}

_Sangue

_{e Hemoderivados}

(COSAH), 0 PROGRAMA DE ANEMIA _{FALCIFORME (PAF), PORTARIA MS Nº}

951, cujo principal objetivo e'

promover e implementar

_ações

_{que possibilitem a redução da morbimortalidade}

11

melhoria da qualidade de vida

_{das pessoas}

_com

_doença

_{falciforme além de disseminar} informações relativas à doença. O _{programa do Ministério da}

_Saúde

_{tem obtido bons}

resultados por meio _{da padronização de diagnósticos, tratamentos}

_e

_{na formação de}

recursos

_{humanos de profissionais de diversas regiões do Brasil (BRASIL, 1996).}

Estimativas, com

base

_{na prevalência, permitem supor a existência de mais de 4} milhões de portadores do

_gene

de HbS no Brasil,

_e

_{perto de 30.000 com}

_a

_{forma grave,} incluindo _{anemia falciforme,}

_doença

_{de HbC,}

_e

_{interação entre HbS e talassemia beta.} Segundo a estimativa da Organização Mundial de

Saúde

(OMS), a

cada

ano

nascem

no Brasil

_cerca

_{de 2.500 crianças portadoras de}

_doença

_{falciforme. Vinte por cento}

delas

não vão _{atingir 5}

_anos

_{de idade por complicações diretamente relacionadas com} a hemoglobinopatia. Os programas de “screening” neonatal favorecem _{o diagnóstico} rápido,

_antes

do início _{dos sintomas clínicos, permitindo a}

_educação

_{dos pais}

_e

pediatras, bem como a implementação de práticas de cuidados preventivos, melhorando os níveis de morbidade

_e

_{mortalidade (NAOUM, 1997).}

Os primeiros

_estudos

_{visando rastreamento e}

_{a detecção}

_{precoce de} hemoglobinas anormais em

_sangue

de cordão umbilical de recém—nascidos _ocorreram na África, no _{Congo, tendo sido observado na amostra de 1.000}

_casos

_a

_presença

_de 19 _{homozigotos para HbS (RUIZ}

_et

_{al., 1986).}

Nos Estados Unidos da América, a partir de 1970, foram instituídas leis

_estaduais

que tornam obrigatória a triagem, não só

_a

_{recém-nascidos, mas também a}

pré-escoiares,

mulheres grávidas,

casais

em

exames

_{pré-nupciais, internos de instituições}

penais

ou combinações

desses

grupos, no _{sentido de oferecer medidas profiláticas}

_e

informações

às

famílias(PANTALEÃO

_et

_{al., 1993).}

12 implantação

_desses

_{programas é mais ampla. Um dos que mais}

_{se destacam}

_na detecção, tratamento

_e

_{aconselhamento genético de indivíduos portadores da HbS}

_é

aquele

existente na

Jamaica desde

1952. Vale _{salientar que}

_esse

_serviço

_é

_oferecido, principalmente, em Hospitais Universitários

_{e sua}

_{eficiência o torna um dos serviços} mais bem documentados do _{mundo (SERJEANT}

_et

_{al., 1986).}

No Brasil, os resultados confirmam _{que o problema}

_das

_{hemoglobinopatias tem} importância médica, especialmente

_se

_{considerarmos que para}

_cada

_{3 milhões de} crianças que

nascem

anualmente

_as

estimativas

_{são as}

_seguintes:

.

90.000

serão

portadoras de

talassemia

alfa

.

63.000

serão

portadoras de HbAS

.

1.500

_serão

_{portadoras de HbSS}

.

640

serão

portadoras de HbSC

.

330

serão

_{portadoras de talassemia Beta/HbS}

.

260

serão

_{portadoras de talassemia Beta maior}

Por

estas

razões, algumas iniciativas foram

_{tomadas recentemente}

_{para a} prevenção e o tratamento

_{adequado das}

_{hemoglobinopatias. Uma}

_{delas é}

_{o programa} coordenado pelo Centro de Referência de Hemoglobinas da Universidade Estadual Paulista (UNESP) de

São José

do Rio _Preto —SP, que realiza

testes para

_{prevenção de}

falcemias e

talassemias

em

escolares

e

gestantes.

Da _{mesma forma, o Hemocentro e o} Centro Integrado de

_Pesquisa

_{Oncohematológicas na infância(ClPOl), da Universidade} de Campinas realizam programas preventivos

e

de aconselhamento genético. Outros Hemocentros, com

_{destaque aos}

do _{Ceará, Pará, Pernambuco,}

_São

_{Paulo, Marília,} Ribeirão Preto, _{Manaus, Uberlândia, Belo Horizonte, Botucatu e Rio de Janeiro,}

13 também desenvolvem programas regionais

e

atividades

assistenciais e

científicas

(NAOUM, 1997).

No _{Hemocentro Regional de Uberlândia, em maio de} 1995, foi _implantadoo

teste

eletroforese de hemoglobina

_para

triagem de hemogloblnopatias nos doadores, visando uma melhor qualidade

das bolsas

de

_sangue

e orientações

aos

portadores.

Em _março

deste

ano foi _{implantado,em Minas Gerais, o Programa Estadual de}

Triagem Neonatal para Detecção de Doenças Falciformes, particularmente a Anemia Falciforme. O _{tratamento profilático}

será

_realizado

até

_{o sexto ano de vida,} visando reduzir drasticamente a morbidade e mortalidade por

estas doenças. Esse

programa é financiado

e

coordenado pela Secretaria de Estado da

Saúde e

executado pelo Núcleo de

_Pesquisa

em Apoio Diagnóstico (NUPAD) da Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Fundação Hemominas, Serviço de Hematologia do Hospital

das

Clínicas da UFMG

_e

Instituto de

Saúde

da Mulher

_e

da Criança.

Na _{mesma amostra de}

_sangue

_{coletada para o} “Teste do Pezinho”, já em pleno funcionamento para

detecção

de hipotireoidismo congênito e fenilcetonúria,

estão

sendo

realizados também

testes

laboratoriais para

detectar as

Doenças Falciformes. Atualmente 763 municípios mineiros já enviam

amostras

regularmente do

Teste

do Pezinho para serem

analisadas

pelo NUPAD, equivalendo a uma

abrangência

de aproximadamente 90% da população atual de recém-nascidos. A técnica utilizada —

eletroforese de hemoglobina com focalização isoelétrica— _{é uma}

das

mais

_avançadas

no mundo para

este

tipo de triagem neonatal e superior

as técnicas

de eletroforese em

14 Em _janeiro

_deste

_{ano, o município}

de Uberlândia _{instituiu o Programa de} Acompanhamento

_e

_{Aconselhamento Genético Preventivo}

e

Assistência _Integral

_às

Pessoas

_{Portadoras do Traço}

_e

_{da Anemia}

Falciforme, _{como também criou-se a}

Semana

_{dos Portadores de AnemiaFalciforme}

através das

Leis Nº _{7067 e Nº7070.} Diante

_desses

_{programas preventivos que}

vêm

_sendo

_{implantados, acredita—se} que os problemas relacionados _com

_as

_{hemoglobinopatias,}

em _{especial com}

_as

Doenças Falciformes, _{sejam minimizados}

_e

que a população

receba

_{orientações}

_e

15

2

—

Obíelivo

Considerando que

as

hemoglobinopatias

_são

_{frequentes na população brasileira}

e

dentre elas,

_{as doenças}

_falciformes

_{são as}

_{mais prevalentes}

e

com _{altos índices de} morbidade e mortalidade nos primeiros

_anos

_{de vida dos portadores sintomáticos,}

o

presente

_{trabalho teve comoobjetivo:}

.

Identificar

os recém-nascidos portadores de hemoglobinopatias, na Maternidade do Hospital _{de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia.}

16

2—

Material

_e

_Métodos

2.1

—

Área de Estudo

A _{triagem de hemoglobinopatias foi realizada}

em recém—nascidos _na Maternidade _{do Hospital de Clinicas da Universidade Federal de Uberlândia, onde a} estimativa

é

_{de aproximadamente 300 nascimentos por mês.}

2.2

-

Material

0

número de

_{amostras analisadas}

_{foi de 601 recém—nascidos}

de ambos os sexos.

_{Estas amostras}

_de

_sangue

_foram

_coletadas

_{do cordão}

umbilical, em tubos contendo anticoagulante EDTA,

_{e encaminhadas}

_{ao Setor de Hemoglobinopatias}

17 Hemocentro Regional de Uberlândia, onde foram realizados os

testes

_para

hemoglobinopatias.

As

_amostras

_de

_sangue

_foram

mantidas,

até

a _{realização dos testes, sob} refrigeração a 4ºC.

3.2

-

_Metodologia

2.2.1

—

Conscientização

Foi

enviada uma carta, juntamente com uma cópia do projeto de pesquisa,

a

direção do _{Berçário do Hospital}

de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia, solicitando autorização para realização

deste

_{trabalho (Apêndice 1). Após}

_concessão

desta

_{autorização,} foi _{proferida uma palestra para os médicos,}

residentes e

funcionários do berçário, sobre hemoglobinopatias

_e

_{importância do}

_seu

diagnóstico precoce. Foi enviada, também, uma cópia do _{projeto para}

_as

_{Comissões de Ética do}

Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia e da Fundação Hemominas.

18

2.2.2

—

identificação das

Amostras

A _{identificaçãoinicial}

_{das amostras}

_foi

feita _{pelo Hospital, de modo que os tubos}

resultado dos

_testes

_{realizados (Apêndice 2). A}

identificação da raça dos recém-nascidos, realizada pelo Hospital de Clínicas, foi feita

_baseando-se

_{na cor de pele da} mãe, podendo

_ser

_{branca, parda e negra, & quai foi}

realizada

_baseando-se

_{na cor de} pele da mãe. Devido _{ao fato de que o recém-nascido}

tende

_{geralmente a}

_ser

_{mais claro}

que

seu

progenitor,

_essa

_{identificação racial pode}

_ser

inadequada. Por isso, a classificação em

_caucasóides

_{para os recém—nascidos}

brancos, e em _{negróides para os} negros e pardos foi _padronizada.

2.9.2

-

Análises

_{Laboratoriais}

A

—

Testes Seletivos

As

_amostras

_de

_sangue

_{foram submetidas a}

testes

_{seletivos visando}

_estabelecer

19 A.1)

Resistência globular osmótica em

_{NaCl 0,36% (SlLVESTRONl &}

BIANCO, 1975)

Técnica

_usada

_para

_{detectar talassemias,}

_{principalmente a beta heterozigota,} que

apresenta

positividade em 97% _{dos portadores,}

_sendo

_possível

_detectar

_também

casos

de anemia ferropriva

_e

_{os portadores para a hemoglobina C.}

A.2)

_{Eletroforese de Hemoglobina em}

_acetato

_{de celulose}

_{pH 8,6}

(MARENGO-ROWE, ₁₉₆₅₎

Este método permite a qualificação

_e

_{quantificação de hemoglobinas normais e} anormais. As _{diferentes mobilidades eletroforéticas}

_das

_{hemoglobinas anormais}

são

originadas por

alterações

de

_cargas

_elétricas,

_causada

_{por substituição de aminoácidos} de diferentes pontos isoelétricos nas

cadeias

_{formadoras de moléculas.}

Todas

_as

fitas de

_acetato

_{de celulose utilizadas foram}

_coradas

_{com solução} corante de Ponceau, para melhor visualização

das

_{frações hemoglobínicas.}

B

—

Testes

Específicos

B.1)

_{Eletroforese em agar-fosfato}

_{pH 6,2 (Método}

_de

_VELLA,

1968)

Este método

e

_{específico para diferenciar alguns tipos de hemoglobinas mais}

lentas que a hemoglobinaA1, _{como por exemplo: HbS da HbD e HbC da HbE,}

_as

20 migram _em

_{posições semelhantes}

_em

eletroforese alcalina. Permite também a

caracterização

semi—quantitativa_{da hemoglobinafetal.}

B.2)

_{Dosagens de}

_{HbS e Hb}

_{Bart's por eletroforese quantitativa}

em

_acetato

_de

celulose

pH 8,6 (Método

de

_{MARENGO-ROWE, 1965)}

A _{variação da}

_{concentração}

_{de HbS}

está associada às talassemias

alfa

_e

beta. Os tipos de talassemia _{alfa: mínima, menor,}

_doença

_{de HbH}

e

Hidropsia Fetal,

estão

relacionados _{com os valores}

_{das concentrações}

_{de Hb Bartªs.}

8.3) Análise da morfologia eritrocitária

Em

_esfregaço

_{sanguineo, analisa—se o}

tamanho, a forma _{e a coloração dos} eritrócitos. A _{avaliação da morfologia eritrocitária deve}

ser

realizada preferencialmente na porção fina do

_esfregaço

_de

_sangue.

_O

_esfregaço

pode

estar

corado com

_corantes

tradicionais (Giemsa, Wright _{etc.) ou à fresco sem coloração (esfregaço}

"italianoªª). A

avaliação _{morfológica auxilia na identificação}

_{das seguintes}

hemoglobinas:

_talassemias

beta,

talassemias

alfa,

_doenças

_{falciformes e hemoglobinas instáveis}

(NAOUM,1997). As

_hemácias

_{do recém—nascido}

_são

normalmente macrociticas _{(8 a 9 um de} diâmetro). Ha' _{uma mudança gradual para microcitose}

aos

3 _meses,

_chegando

_ao diâmetro normal _{(7,5 um)}

_aos

_{8 meses.}

_Pode-se

encontrar eritrócitos nucleados

_e

_com diversas formas,

_sendo

_{que, quanto menorfor o}

21 o _{numero de eritrócitos nucleados}

_{encontrados e}

mais variações morfológicas

apresentará

(SCHILLER, 1980) .

B.4)

_{Dosagem de}

Hb _{Fetal (Método}

_de

_BETKE

_et

_{al., 1959)}

A Hb fetal

é

alcali—resistente, _{enquanto que}

_as

_{Hb A1, A2}

_e

_{os tipos normais}

_são

facilmente

_{desnaturáveis}

_{por soluções alcalinas.}

Concentrações

acima de 1% _para adultos refletem aumento de Hb Fetal. Em

_sangue

_{de cordão umbilical a quantidade de} Hb _Fetal

_é

_{aproximadamente 70—90%.}

B.5)

_Pesquisa

_de

_agregados

_de

_Hb

_Bart's

_(Método

_de

PAPAYANNOPOULOS &

STAMATAYAMMOPOU_{LOS, 1974)}

Os corpos de inclusão de Hb Bartºs

_são

_{formados por}

_cadeias

_{gama, oriundas da}

desnaturação

do _{tetrãmero. As}

_amostras

_{positivas foram}

_coradas

corn _Solução Azul de Cresii Brilhante

_e

_feitos

_{esfregaços sanguíneos}

em laminas para microscopia óptica, onde foram

_observados

_{precipitados sugestivos de}

_cadeias

gama (Hb Bartªs) _em algumas células.

_Estes

_precipitados

_{apresentam-se}

_dispostos

homogeneamente

no interior dos eritrócitos, _como

_pequenos

_{pontos azulados.}

22

hemoglobinopatias, solicitando que

estes

_{também fizessem os}

_testes

para que

houvesse

_{a confirmação do diagnóstico}

e

assim

_{pudessem receber}

_{orientações} (Apêndice3).

2.2.5

-—

Análise Estatística

As _diferenças

_nas

_frequências

de _{ocorrência de portadores de} hemoglobinopatias entre

_{as raças estudadas}

_foi

verificada por

teste

Xª, _{com correção}

de Yates, utilizando _os

_seguintes

programas: Instant, Graphad instant TM _{e Graphag}

)

)))))

)

23

4

—

Resultados

Foram

_{analisadas amostras}

_{de sangue,}

do _{cordão umbilical, de 601}

recém-nascidos

_{provenientes da Maternidade do}

Hospital _{de Clínicas da Universidade Federal} de Uberlândia.

_Desse

_{total de amostras,}

7 _(1,16%)

_{apresentaram suspeitas}

de hemoglobinopatias durante a realização dos

_testes

_seletivos,

_sendo

₆

_casos

de Hb Bart's _{(1,00%), a qual no recém-nascido}

é

_{considerada indicador de}

_talassemia

_alfa

e

1

caso

de traço _{falciforme (0,16%),}

_representado

por HbFAS. _{Observou-se também que,} do total _de

_amostras

_de

_sangue

analisadas, 391 _{(65,06%) eram de recém—nascidos} classificados como

_{caucasóides e}

_{210 como negróides (34,94%). Dentre}

as amostras

dos

_{caucasóides,}

_{2 (0,50%)}

apresentaram suspeitas

_{de hemoglobinopatias,}

_sendo

₁

(0,25%) com _{traço falciforme (HbFAS)}

_e

₁

com Hb Bartºs (0,25%), _{enquanto que entre}

as amostras

de

_sangue

_{dos recém—nascidos}

negróides, foram

_encontrados

_{5 (2,38%)}

casos suspeitos

de Hb Bartªs _(Tabela 1

e

_{Figuras 3}

_e

4). _{Não foram}

_constatados

diferenças significativas

_nas

frequências de ocorrência de portadores de hemoglobinopatias entre

_{as raças estudadas}

_{(X2 =0.009; p =0.924).}

24 TABELA 1 — Frequência

_e

distribuição dos tipos de hemoglobinopaties

_detectados

_em recém-nascidos _{do Hospital}

de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia.

POPULAÇÃO '

TOTAL _{TOTAL TOTAL}

TIPOS _{DE HbPATIAS}

, , ANALISADO

HbAA _{HbPATIAS FAS}

Hb

Bart's

CAUCASÓ IDES ' ' N ₃₉₁ 389 _{2 1 1} % _55,05 99,50 _{0,50 0,25} 0,25 NEGRÓIDES N ₂₁₀ 205 _{5 0} 5 % _34,94 97,52 _{2,38 0 2,38}

_

N ₅₀₁ 594 ₇ 1 ₅ % ₁₀₀ 98,84 1 16 _0,16 1 0

25

A1

Fetal

CIA2

12345

Figura3 -Eletroforesede_{Hb em acetato de celulose pH 8,6:}

(1,2,4e 5) Hb FAAe (3) Padrão com “pool”deHbASC.

Figura 4 - _{Eletroforese de Hb em acetato de}

celulose pH 8,6: _{(1) Padrão com “pool” de} Hb ASC; (2) Hb FAS; (3) Hb FAAe_{(4) Hb Bartºs (tetrâmero de cadeiasgama).}

26

A _{amostra de}

_sangue

_que

_{apresentou suspeita}

_{de traço falciforme, foi confirmada}

em eletroforese de diferenciação em ágar-fosfato (pH 6,2), onde foram

_{observadas as}

separações das

frações de Hb Fetal, HbA1

e

HbS. Por meio

dessa

técnica foi _possível

diferenciar

_a

HbS da HbD. As _hemoglobinas Fetal, A1

e

8 foram

dosadas nas seguintes

concentrações: 70,5% de Hb Fetal; 16,2% de HbA1

e

_13,3% de HbS. Como controle_foi

dosada

uma amostra de

_sangue

de cordão umbilical, com

_frações

_{hemoglobínicas} normais e que

apresentou concentrações

conforme

_padrões

descritos na literatura: 83,3% de Hb Fetal

_e

16,7% de HbA1.

As

_{amostras sugestivas}

_de Hb Bartºs foram

_dosadas

_e

_{suas concentrações}

variaram de 2,0 a 5,5%.

O

teste

_{de resistência globular osmótica, em solução de NaCl}

_a

_{0,36%, foi} utilizado em

todas as amostras analisadas,

não

_se

_{mostrou eficiente para diagnóstico,} visto _{que, somente} 3

_{casos suspeitos}

de Hb _{Bart's mostraram resistência}

_aumentada

_à

hemólise

_e

_por

_apenas

_{alguns minutos.}

A

análise

_{da morfologia eritrocitária utilizada nas}

_{amostras suspeitas}

_de

hemoglobinopatias indicou _a

_presença

_{de células em alvo em grau moderado, na} maioria dos

_casos,

_{principalmente nos sugestivos de Hb Bart's com resistência globular} osmótica aumentada.

Apenas

uma mãe

e

um

casal

_{compareceram ao Hemocentro Regional de} Uberlândia

_para

_{realização do}

_teste

_{de eletroforese de hemoglobina, cujo resultado} poderia auxiliar no _{diagnostico de portadores. Para todos os sujeitos}

_testados

_os resultados foram negativos para hemoglobinopatias (HbAA).

27

5

-

Discussão

As primeiras publicações

_sobre

_{prevalência de hemoglobinopatias no}

Brasil

talassemias

_{(DOMINGOS, 1993).}

Os primeiros programas de triagem neonatal para

doenças

metabólicas

herdadas

_{tiveram início na}

_década

_{de 1950}

com

_{a detecção}

_{da Fenilcetonúria (PKU).} Na

_década

_{de 60}

_esses

_{programas foram}

estendidos

_{a Serviços de Triagem de}

_Saúde

Pública _(PANTALEÃO

_et

_{al., 1993).}

Os programas preventivos a nível _neonatal

_são

_{amplamente difundidos em}

paises

_{da Europa, principalmente por possibilitarem a}

profilaxia _{de homozigotos} precocemente. Favorecem ainda,

_a

_{sobrevida, minimizando os efeitos deletérios da} doença, com _{redução significativa da morbidade e mortalidade}

28

apresentarem

_{excelente retornoem nível de aconselhamento genético (ROWLEY}

et

al., 1991; LOADER

_et

_{al., 1991). A}

_detecção

_{dos portadores heterozigotos assintomáticos}

é

de grande importância para a

saúde

pública, _{pois representam fonte de novos} heterozigotos

_e

_{possíveis homozigotos. Programas de prevenção}

_são

de grande importância para a conscientização dos heterozigotos, fornecendo

_dados

_{para que}

possam

_{decidir de maneira responsável}

_{sobre seus descendentes,}

_favorecendo

o direcionamento clinico _{para os}

_casos

_{brandos, e acompanhamento}

adequado aos

portadores de formas

_graves

_{(DOMINGOS, 1993).}

O

_presente

_trabalho

_descreve

os resultados da triagem de hemoglobinopatias em recém-nascidos, na Maternidade do Hospital _{de Clínicas da Universidade Federal de} Uberlândia. Optou-se pela população de recém-nascidos, devido ao fato _{de que}

_as

hemoglobinopatias têm sido

_{bastante estudadas}

_{no Brasil quanto à distribuição}

e

incidências em grupos raciais, mas não em nível _{de triagem em recém—nascidos.} A _{aplicação dos}

_testes

_{seletivos para o}

_estudo

dos tipos de hemoglobinas dos 601 recém—nascidos, permitiu _a

_observação

_{de 7}

_amostras

_de

_sangue

_{com mobilidades} eletroforéticas alteradas. Análises posteriores realizadas _{com o emprego dos}

_testes

específicos utilizados no _{Setor de Hemoglobinopatias, do Hemocentro Regional de} Uberlândia, confirmaram os 7

_casos

_{sugestivos de hemoglobinas anormais.}

_Para

uma avaliação mais precisa

_desses

_{resultados seria}

_necessário

_{a utilização de métodos mais}

êYÉEHÉfªêSdêTWB-Xpºr_{exemplo, eletroforese de hemoglobina com focalização isoelétria} A_{frequência de 1,16% de hemoglobinopatias,}

encontrada

entre

_as

601

_amostras

de

_sangue

_{de cordão umbilical analisadas, distribuída}

em 0,16% de HbFAS _{e 1,00% de} Hb Bart's, foi _{compatível com}

_as

_{frequências obtidas em outros}

29

semelhantes,

_{realizados em algumas}

_cidades

_{do Brasil, porém,}

não foram

_encontrados

trabalhos _com

_{recém-nascidos}

_{em Minas Gerais.}

Estudo realizado com _{1.006 recém-nascidos, em}

_{João Pessoa}

— PB, demonstrou

que 0,20% eram portadores de HbFAS _{e 0,09% de HbFAC (PANTALEÃO}

_et

al., 1993). Em um outro

estudo

realizado em

Santos

— SP, com 2.281 _{recém-nascidos,}

foram verificados _{78 (3,41%) portadores de hemoglobinopatias,}

sendo

2,63% de HbFAS; 0,39% de Hb _{Bart's; 0,26% de HbFAC}

_e

_{0,13% DE}

HbFSS (RUIZ

_et

_{al., 1986).} Com _relação

_aos

₆

_casos

_{de Hb Bartªs}

encontrados no

_presente

_{trabalho, foi} verificado 1

caso

_(0,25%)

entre os recém-nascidos

_{caucasóides e}

₅

_casos

_(2,38%) entre os negróides,

_{sendo esta}

_{diferença estatisticamente não}

significativa. De _acordo com

_{as concentrações encontradas}

_{de Hb Bartls,}

sugere-se

que

esses

recém—nascidos

possam ser

_{portadores de talassemia alfa mínima (deleção de}

um

_gene

_{alfa) ou de}

talassemia

alfa _{menor (deleção de dois}

_genes

_alfa).

Alguns

_estudos

têm _{sido realizados no Brasil, com recém—nascidos,}

objetivando a

detecção

_{da hemoglobina de}

_Bans

_em

_sangue

_{de cordão}

umbilical. Em _{Porto Alegre} —

RS, foi _{realizado um}

_estudo

_com

599 amostras,

_{sendo detectados}

_{2,5% de portadores} de Hb Bartºs _{entre os recem-nascidos}

caucasóides e

5,4% _{entre os negróides} (PEDROLLO

_et

_{al., 1990). Em Campinas}

— SP, um outro

estudo

_{foi realizado}

com 320 recém-nascidos de

_mães

_{negróides, onde foi verificado}

que 11,9% _{eram portadores de} Hb Bartºs (SONATI & _{COSTA, 1990).}

_Estes

_resultados

estão

_{em concordância com os}

relatos de frequência do

_gene

_{da talassemia alfa, entre pacientes brasileiros} com anemia,

_estudada

_{pela análise do DNA (COSTA}

_et

al., 1989). A

_{concentração}

_{da Hb Bart's diminui}

gradativamente

_após

_{o nascimento, ao} mesmo tempo em que o nivel de Hb H

_se

_{eleva. Neste período o}

30

talassemia

alfa

_torna-se

difícil, _{ou até impossivel, por técnicas rotineiras (NAOUM &} DOMINGOS, 1998).

O _{uso de mapeamento dos}

_genes

_{alfa da globina, com enzimas de restrição, tem}

demonstrado alta frequencia de

talassemia

_{alfa nos}

_países

_{africanos, como em}

_seus

descendentes

_{que habitam}

_as

_{Américas (MILNER, 1983). A prevalência de}

heterozigose para alfa

_talassemia

_{em negros americanos foi estimada em30%, com 2%} de homozigotos. No _Brasil,

_a

_{talassemia alfa de um ou dois}

_{genes afetados é}

aproximadamente de 4 _{a 5%, com maior frequência entre negros (NAOUM,1997).} A _{frequência de 0,16% de HbFAS,}

_{detectada neste}

_estudo,

divergiu de frequencia de 2,70%

_encontrada

_{em um}

_estudo

_{com 20.613}

_doadores

_de

_{sangue e}

escolares

da região do _{Triângulo Mineiro (MELO}

_et

_{al., 1996).}

_Esse

_{fato pode}

_ser

justificado pelo número de

_{amostras analisadas e}

_por

_se

_{tratar de populações distintas} sócio-economicamente, além dos recém-nascidos serem uma população aleatória.

A

_comparação

_da

_detecção

_{de hemoglobinas de adultos com}

_{recém-nascidos}

possui diferenças, já que no periodo neonatal

_as

_{frações hemoglobinicas anormais}

estão

caracteristicamente em _{menor quantidade que}

_as

_{frações normais. Por}

_esse

motivo,

_após

a

_{separação das}

_{frações hemoglobinicas}

_nas

_{fitas de}

_acetato

_{de celulose,}

as mesmas

foram

_coradas

_{para melhor visualização}

_dessas

_{frações. A HbA2 em}

sangue

de cordão umbilical

_apresenta-se

_em

_{concentrações}

_{inferiores a 0,5% e}

_seu

fracionamento não

é

visível.

Com

_a

_{amostragem de 601 recém-nascidos, não foi possível}

_estabelecer

_uma prevalência de portadores

das

formas

_graves

_{de hemoglobinopatias na região do} Triângulo Mineiro. Diante

desta

situação,

este

trabalho tera' _continuidade

_até

_que

_se

atinja uma amostragem de aproximadamente 1.000recém—nascidos, visto _{que no Brasil}