Princípios de Boas Práticas de Laboratório da OCDE APLICAÇÃO DAS PBL NOS ESTUDOS DE BIOEQUIVALÊNCIA- A EXPERIÊNCIA DO LEF

Princípios de Boas Práticas

de Laboratório da OCDE

APLICAÇÃO DAS PBL NOS ESTUDOS DE BIOEQUIVALÊNCIA-

A EXPERIÊNCIA DO LEF

Conteúdo

O LEF

Enquadramento

Requisitos

Aplicabilidade

1995

o LEF

Bioanálise

Diclofenac Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 1992

Digoxina Soro LC-MS 0,3 ng/ml 1993

Terfenadina Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 1993

Aciclovir Plasma HPLC/FLU 20 ng/ml 2 estudos em 1994

Omeprazol Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 1996, 1998

Acetato de Megestrol Plasma HPLC/UV 5,0 ng/ml 1996 Clonixina Plasma/Ur ina HPLC/UV 10/20 ng/ml 1997 Tramadol Plasma GC-MS 8,0 ng/ml 1998 Substância Matriz biológica Método de análise LOQ BD/BE

Nilutamida Plasma HPLC/UV 50 ng/ml 2000

Tenoxicam Plasma HPLC/UV 50 ng/ml 2000

Paracetamol Plasma HPLC/UV 100 ng/ml 2000, 2004

Ticlopidina Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 2001

Loratadina/ desloratadina

Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2001

Captopril Plasma LC-MS/MS 40 ng/ml 2001, 2005

Cefadroxil Plasma HPLC/UV 0,25 µg/ml 2001

Alprazolam Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2001, 2004

Enlapril/enalaprilato Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2003; 2004

Flucloxacilina Plasma HPLC/UV 0,4 µg/ml 2003 Substância Matriz biológica Método de

análise

LOQ BD/BE

Nimesulida/ 4-hidroxi

Plasma LC-MS/MS 10 ng/ml 2003, 2004

Ranitidina Plasma HPLC/UV 40 ng/ml 2003

Fluconazol Plasma HPLC/UV 0,2 µg/ml 2004

Fluoxetina/ nor-fluoxetina

Plasma LC-MS/MS 1 ng/0,5 ng/ml 2004

Lansoprazol Plasma HPLC/UV 20 ng/ml 2004

Lorazepam Plasma LC-MS/MS 1 ng/ml 2 estudos em 2004 Lovastatina/ OH-acid Plasma LC-MS/MS 10 ng/ml 2004 Nimodipina Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2004 Substância Matriz biológica Método de análise LOQ BD/BE

Ambroxol Plasma HPLC/UV 5,0 ng/ml 2004

Diazepam Plasma LC-MS/MS 5 ng/ml 2004

Ciclosporina Plasma HPLC/UV 20 ng/ml 2004

Valproato de sódio Plasma GC/MS 1,0 µg/ml 2007

Telmisartan Plasma LC-MS/MS 5 ng/ml 2011 Olmesartan/ Hidroclorotiazida Plasma LC-MS/MS 10 ng/ml 10 ng/ml 2013 Free Ezetimibe/ Total Ezetimibe Simvastatina Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 1,0 ng/ml 0,25 ng/ml 2015

“The bioanalytical part of bioequivalence trials should be performed in accordance

with the principles of Good Laboratory Practice (GLP). However, as human

bioanalytical studies fall outside the scope of GLP, the sites conducting the studies

are not required to be monitored as part of a national GLP compliance programme”.

Estudo

… entende-se uma experiência ou um conjunto de experiências em que uma substância em estudo é analisada, em condições laboratoriais ou em ambiente normal, a fim de se obterem dados sobre as suas propriedades e ou segurança, com vista à sua apresentação às autoridades regulamentares competentes.

Intervenientes

Administração da Instalação de ensaio

Administração do local de ensaio

Diretor de Estudo

Investigador principal

1.1.Administração da Instalação Ensaio

Identificação das pessoas com as responsabilidades definidas

Garantir pessoal qualificado, instalações, equipamento e materiais adequados Garantir a existência e aprovar procedimentos internos

Garantir Programa de Garantia de Qualidade Designar o Director de Estudo

Garantir a aprovação do Plano de Estudo Nomeação do gestor de Arquivo

Garantir a elaboração e manutenção do plano mestre Garantir a existência de linhas claras de comunicação Garantir sistemas informatizados adequados e validados

Plano Mestre

… a compilação de toda a informação de apoio para avaliação da carga de trabalho e para seguimento dos estudos numa instalação de ensaio.

Plano de Estudo

… um documento que define os objetivos e a conceção do processo experimental para a realização do estudo, incluindo quaisquer alterações introduzidas.

1.2 Diretor de Estudo

 _{Responsável pela execução global do estudo e elaboração do relatório final}  _{Aprovar o plano de estudo e quaisquer alterações}

 _{Disponibilizar o plano de estudo à Garantia de Qualidade}

 _{Disponibilizar todo o material necessário (plano de estudo, procedimentos internos) ao}

pessoal envolvido no estudo

 _{Garantir o cumprimento do plano de estudo, avaliar e documentar o impacto dos desvios}  _{Garantir o registo integral e documentação de todos os dados brutos}

 Garantir a validação dos sistemas informatizados

 _{Aprovar o Relatório Final (validade dos dados e cumprimento BPL)}

Dados em bruto

…e todos os registos e documentação da instalação de ensaio, ou respetivas cópias autenticadas, que constituem o resultado das atividades e observação originais de um estudo. Os dados em bruto podem incluir também, por exemplo, fotografias, cópias de microfilmes ou microfichas, dados em suporte eletrónico, observações ditadas, dados registados a partir de instrumentos automatizados ou qualquer outra forma de armazenamento de dados considerada capaz de armazenar informação, de forma segura, durante o período de tempo fixado.

1.4. Pessoal do Estudo

 _{Deve ter conhecimentos necessários sobre BPL}

 _{Cumprimento das instruções constantes no plano de estudo e nos}

procedimentos internos

 _{Quaisquer desvios devem ser documentados e comunicados ao DE}  _{Responsável pelo registo imediato e preciso dos dados em bruto, bem}

como pela qualidade desses dados

 _{Observar as medidas de precaução necessárias a fim de minimizar os}

2.2. Pessoal de Garantia de Qualidade

 Procedimento de funcionamento do programa de GQ

 _{Manter cópias dos planos de estudo aprovados}  Acesso a uma cópia atualizada do plano mestre

 _{Verificar o plano de estudo à luz das BPL (documentada)}

 _{Realizar e registar as inspeções (ao estudo, às instalações, aos procedimentos)}

 _{Verificar que todos os documentos necessários foram disponibilizados ao pessoal do estudo}  _{Inspecionar os relatórios finais}

 Comunicar os dados de inspeção à administração e ao DE

 _{Declaração a incluir no relatório final (tipos de inspeção, datas, fases do estudo inspecionadas,}

3. Instalações

• Áreas que garantam o isolamento • Garantia de conservação e proteção

Sistemas de

ensaio

• Evitar contaminações, misturas,

• condições adequadas de conservação;

• áreas segregadas para receção e armazenamento e para mistura com veículos • Procedimentos para descontaminação e transporte (eliminação resíduos)

Manuseamento

• segurança, recuperação dos planos de estudo, dados brutos, relatórios,… • protecção contra deterioração (fogo; inundações; humidade)

4. Equipamento, materiais e reagentes

Adequadamente localizados, conceção e capacidade adequados

Periodicamente inspecionados, limpos, mantidos e calibrados

Não devem interferir com os sistemas de ensaio

Produtos químicos, reagentes e soluções devem estar identificados

(concentração, prazo de validade, instruções de armazenamento, data de preparação

5. Sistemas de Ensaio

“Qualquer sistema biológico, químico ou físico, ou uma combinação destes, utilizado num estudo”

p.ex: animais, plasma, tecidos

Condições adequadas de armazenamento,

acomodação,

manuseamento, a fim de garantir a qualidade dos dados

Registos de origem, data e condições de chegada

Devidamente identificados Evitar contaminação

6. Substâncias para estudo e de

referência

Recepção, manuseamento, amostragem e armazenamento

◦ Registo de caracterização, data de receção, prazo de validade, quantidades recebidas e utilizadas

◦ Procedimentos

Caracterização

7.

Procedimentos

Substâncias para estudo e de referência

Equipamentos, materiais e reagentes

Conservação de registos, elaboração de relatórios, armazenamento e

recuperação

Sistema de ensaio

Procedimentos LEF

Estudos no LEF segundo os Princípios BPL/OCDE Validação Métodos Bioanalíticos

Estudos BPL- manuseamento de Amostras Análise de Amostras Biológicas

Repetição de Análise de Amostras

Limpeza e desinfecção do laboratório e Equipamentos de Bioensaios

Atuação da Unidade de Garantia de Qualidade Análise Farmacocinética e Tratamento estatístico Avaliação Cromatogramas

8. Execução do Estudo

Plano de Estudo

“Documento que define os objetivos e a conceção do processo experimental para a realização do estudo, incluindo quaisquer alterações introduzidas”

A cada estudo deve ser atribuída uma única identificação

Aprovado pelo DE

Avaliação da conformidade BPL pela GQ

Aprovação pela Administração da instalação de ensaio Aprovado pelo Patrocinador

Todos os desvios devem estar descritos, explicados e datados pelo DE

8. Execução do Estudo

Conteúdo Plano de Estudo

Identificação do estudo, da substância para estudo e da substância de referência

Informações relativas ao patrocinador e à instalação de ensaio

Datas (data de aprovação do plano de estudo; datas propostas para início e conclusão do processo experimental)

Métodos de Ensaio

9. Relatório Estudo

Identificação do estudo, da substância para estudo e da substância de referência Informações relativas ao patrocinador e à instalação de ensaio

Datas e início e conclusão do processo experimental

Resultados

Descrição dos materiais e métodos de ensaio

10. Armazenamento e conservação dos

registos e materiais

• Validação dos sistemas informatizados

• Registos de Monitorização ambiental

• Amostras dos espécimes • Substância Referência

• Registo de Qualificação Pessoal • Registos de manutenção e

calibração dos aparelhos

• Procedimentos

Ficheiro BPL

GLP e Bioanálise

Linearidade Rigor e Precisão Seletividade

Estabilidade em várias condições

ANÁLISE AMOSTRAS

Linearidade Rigor e Precisão Incurred Samples

Integração cromatográfica Definição lote de análise Reanálise de amostras Desvios e impacto

Notas Conclusivas

O cumprimentos das BPL em estudos Bioequivalência

asseguram a

Obrigada!