U
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
FACULDADE DE ENGENHARIA DE ALIMENTOS
ÉRIC KEVEN SILVA
Production of annatto seed oil emulsions by ultrasonic technology using prebiotic
carbohydrates as stabilizing agents
Produção de emulsões de óleo de semente de urucum utilizando tecnologia
ultrassônica e carboidratos prebióticos como agentes estabilizadores
Campinas – SP 2016
ÉÉRIC KEVEN SILVA
Production of annatto seed oil emulsions by ultrasonic technology using prebiotic
carbohydrates as stabilizing agents
Produção de emulsões de óleo de semente de urucum utilizando tecnologia
ultrassônica e carboidratos prebióticos como agentes estabilizadores
Tese de doutorado apresentada à Faculdade de Engenharia de Alimentos da Universidade Estadual de Campinas como parte dos requisitos exigidos para a obtenção do título de Doutor em Engenharia de Alimentos
Thesis presented to the Faculty of Food Engineering of the University of Campinas in partial fulfillment of the requirements for the degree of Doctor in Food Engineering
Orientadora: Profa. Dra. Maria Angela de Almeida Meireles Petenate
ESTE EXEMPLAR CORRESPONDE À VERSÃO FINAL DE TESE DEFENDIDA PELO ALUNO ERIC KEVEN SILVA E ORIENTADA PELA PROF(A) DR(A) MARIA ANGELA DE ALMEIDA MEIRELES PETENATE
Campinas – SP 2016
Agência(s) de fomento e nº(s) de processo(s): CNPq, 140275/2014-2
Ficha catalográfica
Universidade Estadual de Campinas
Biblioteca da Faculdade de Engenharia de Alimentos Claudia Aparecida Romano - CRB 8/5816
Silva, Éric Keven,
Si38p SilProdução de emulsões de óleo de semente de urucum utilizando tecnologia ultrassônica e carboidratos prebióticos como agentes estabilizadores / Éric Keven Silva. – Campinas, SP : [s.n.], 2016.
SilOrientador: Maria Angela de Almeida Meireles Petenate.
SilTese (doutorado) – Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos.
Sil1. Bixa orellana L.. 2. Ultrassom. 3. Inulina. 4. Goma Arábica. I. Petenate, Maria Angela de Almeida Meireles. II. Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Engenharia de Alimentos. III. Título.
Informações para Biblioteca Digital
Título em outro idioma: Production of annatto seed oil emulsions by ultrasonic technology using prebiotic carbohydrates as stabilizing agents
Palavras-chave em inglês:
Bixa orellana L.
Ultrasound Inulin Gum Arabic
Área de concentração: Engenharia de Alimentos Titulação: Doutor em Engenharia de Alimentos Banca examinadora:
Maria Angela de Almeida Meireles Petenate [Orientador] Ana Silvia Prata Soares
Fabiana Queiroz
Samantha Cristina de Pinho Vanessa Martins da Silva Data de defesa: 29-02-2016
C
COMISSÃO EXAMINADORA
Profª. Drª. Maria Angela de Almeida Meireles Petenate
ORIENTADORA – DEA/FEA/UNICAMP
Profª. Drª. Ana Silvia Prata Soares
MEMBRO TITULAR – DEA/FEA/UNICAMP
Profª. Drª. Fabiana Queiroz
MEMBRO TITULAR – DCA/UFLA
Profª. Drª. Samantha Cristina de Pinho
MEMBRO TITULAR – FZEA/USP
Drª. Vanessa Martins da Silva
MEMBRO TITULAR – DEA/FEA/UNICAMP
Prof. Dr. Ângelo Luiz Fazani Cavallieri
MEMBRO SUPLENTE – UFSCar
Prof. Dr. Guilherme José Máximo
MEMBRO SUPLENTE – DEA/FEA/UNICAMP
Drª. Izabela Dutra Alvim
MEMBRO SUPLENTE – ITAL (Campinas, SP)
A Ata da defesa com as respectivas assinaturas dos membros encontra-se no processo de vida acadêmica do aluno
A
AGRADECIMENTOS
À professora M. Angela A. Meireles pela orientação, conselhos, conhecimentos e experiências compartilhadas, pelo exemplo de dedicação e profissionalismo e acima de tudo por ser uma inspiração a sempre buscar a excelência.
Ao LASEFI e todos integrantes pelo excelente tempo de convívio. Em especial ao Moyses Moraes (co-orientador para assuntos da vida), pelas infinitas horas de conversas e conselhos que foram fundamentais na minha formação. Giovani Zabot (meu professor), por me ensinar que sempre posso ir além quando se há dedicação e disciplina. Gislaine Faria, por todos conselhos, suporte e segurança transmitida para execução do meu trabalho. Isabel Debien (Bebel), por seu enorme coração, acolhimento e momentos de descontração. Maria Thereza, pela amizade, companheirismo e incentivo constante. Renata Vardanega, por alegrar o ambiente de trabalho com seu sorriso contagiante. Júlio Cezar, por todo auxílio na parte “pesada” dos experimentos e amizade. Pedro Ivo, por sempre me fazer refletir acerca dos experimentos de uma forma sistemática. Matheus Bargas, pelo auxílio na reta final dos experimentos da tese, momentos de descontração e as melhores sugestões de Campinas. E ao senhor Ariovaldo Astini (Ari), por todo auxílio na operação e manutenção dos equipamentos e pela disposição sempre pronta em me ajudar.
Ao LEP e às professoras Rosiane Cunha e Miriam Hubinger por toda estrutura disponibilizada para realização dos experimentos desta tese. Em especial à Dra. Vanessa Martins por me acompanhar em todas as etapas deste trabalho, por todos conselhos e conhecimentos compartilhados, pelos ótimos momentos de descontração durante a realização das análises.
À FEA e UNICAMP pela oportunidade, recursos e estrutura para realização do doutorado.
Ao CNPq pela bolsa de estudos e à FAPESP e CAPES pelos recursos para a pesquisa. Aos membros da banca examinadora pela atenção, disponibilidade e sugestões para melhoria desta tese.
Aos amigos que UFLA me apresentou. À prof. Joyce Maria, pelo seu enorme coração, apoio constante e amizade que levarei para sempre no coração. À profa. Soraia V. Borges, por todo carinho e incentivo. Ao casal de amigos, prof. Diego Botrel e Regiane Fernandes, por todos conhecimentos compartilhados, por todo apoio e por serem um exemplo a ser seguido. Ao prof. Evandro Galvão (meu mestre), pela amizade e admiração. À Viviane Machado, pelos excelentes momentos de terapia acadêmica e amizade. À Mariane Rabelo, pela parceria, cuidado e melhores
momentos de descontração. Ao Ariel Antonio (Nica), pela amizade e companheirismo na caminhada da vida acadêmica. Ao Gabriel Carvalho, pela amizade e singularidade. E em especial à profa. Fabiana Queiroz, foi admirando o seu enorme coração, comprometimento com seu trabalho, carinho pelos seus alunos e os seus brilhantes insights como engenheira, que decidi seguir esta carreira profissional. Minha eterna gratidão, respeito e admiração. Vai estar para sempre no meu coração!
Aos meus amigos, sempre presentes e me incentivando a alcançar todos os meus sonhos, tornando a minha caminhada mais fácil e gratificante. Em especial à minha amiga Ana Letícia por sonhar junto comigo desde os tempos da graduação a nossa mudança para Campinas e pós-graduação na FEA. Sem dúvida nada do que vivi teria o mesmo valor se não estivesse sempre ao meu lado. Obrigado pela sinceridade, respeito, amor e por todo incentivo. Vai estar para sempre no meu coração! À minha amiga Andresa Gomes, um dos maiores presentes que a FEA me trouxe. Desde o primeiro instante sabíamos que a amizade ia ser para sempre. Por todos conselhos, por sempre estar ao meu lado e me apoiar nos momentos mais difíceis. Para sempre no meu coração! À minha amiga Ana Gabriela por todo carinho, companheirismo e por sempre trazer leveza para os meus dias em Campinas com seu meigo olhar e sorriso. Ao amigo Lino Lopes por ser um verdadeiro irmão presente em todos momentos, pelo incentivo e pelas infinitas horas de conversa e risadas. Ao amigo Max Douglas por sempre colocar os meus pés no chão, respeito e amizade sincera.
À Igreja Viva Campinas e todos seus membros por todo amor, investimento, aconselhamento, aprendizado, aos momentos únicos! Vocês foram e são uma ponte sobre um rio de dor. Em especial à Dra. Luiza Hayashi Endo, um exemplo de amor e dedicação ao próximo.
À toda minha família. Em especial aos meus pais, Custódio Reis e Cida Melo, por me amarem incondicionalmente e investirem suas vidas para que eu pudesse ser quem eu sou hoje. As palavras nunca vão expressar minha gratidão e amor. Cada conquista na minha vida sempre será dedicada a vocês!
Ao meu melhor amigo, por me cercar dia após dia com amor e aceitação, pelas mais belas inspirações, por me tornar um ser humano melhor a cada dia, por não desistir dos meus sonhos até mesmo quando eu desisto, por me fortalecer durante a caminhada e renovar as minhas forças. Minha gratidão e todo meu amor ao meu Deus, o Maravilhoso, Conselheiro, Poderoso, Pai Eterno e Príncipe da Paz.
RESUMO
O óleo extraído das sementes de urucum (Bixa orellana L.) apresenta compostos bioativos visados por diferentes seguimentos industriais, como tocotrienóis e geranilgeraniol. A estabilização destes compostos por meio do seu encapsulamento é uma interessante alternativa para agregação de valor a cadeia de processamento do urucum, além de ampliar as possibilidades de aplicação em produtos funcionais. Neste sentido, a avaliação do uso da tecnologia de ultrasonicação aliado a utilização de biopolímeros para formação de emulsões do óleo são perspectivas promissoras para o desenvolvimento de novos produtos. Em vista disso, o objetivo desta tese foi a estabilização dos compostos bioativos provenientes do óleo de urucum obtido por extração supercrítica utilizando a técnica de ultrasonicação como processo de emulsificação e empregar biopolímeros prebióticos como estabilizantes para obtenção de produtos funcionais. Um estudo detalhado com foco na interface óleo-biopolímero-água para compreensão dos mecanismos de estabilização envolvidos foi desenvolvido com goma Arábica, isolado proteico de soro de leite, amido modificado, polietilenoglicol e inulina. A emulsificação por ultrassom foi comparada, com densidades energéticas similares, ao método convencional por cisalhamento mecânico em dispositivo do tipo rotor-estator. Os resultados mostraram a superioridade do ultrassom no afinamento das emulsões. Assim, foi realizado um estudo de otimização das condições de potência (W) e tempo de processo (min) para obtenção de emulsões finas empregando amido modificado, isolado proteico de soro de leite e goma Arábica. As emulsões otimizadas foram secas por freeze-drying e spray-drying e as micropartículas obtidas foram comparadas em relação às suas propriedades tecnológicas. Destaque para as micropartículas obtidas com goma Arábica por freeze-drying que apresentaram eficiência de aprisionamento de óleo de 97 ± 1% e para as obtidas com amido modificado por spray-drying com 94.8 ± 0.2% de eficiência de encapsulação. O efeito do grau de polimerização (DP) da inulina (DP ≥ 10 e DP ≥ 23) e potência de sonicação (W) foram avaliados sobre a emulsificação do óleo. As emulsões obtidas com DP ≥ 23 apresentaram estabilidade a separação de fase em todas as potências aplicadas devido à rápida gelificação da inulina decorrente da alta taxa de microcisalhamento. A caracterização das micropartículas obtidas pela técnica freeze-drying contribuiram para o avanço no conhecimento das propriedades da inulina como um material de parede. O maior DP foi mais efetivo na retenção de geranilgeraniol e redução da velocidade de oxidação do óleo pelo teste
acelerado Rancimat. No entanto, as inulinas atuaram principalmente como um agente carreador para o óleo, apresentando uma eficiência de encapsulação inferior a 50%. Para contornar este resultado, foram avaliadas blendas de inulina (DP ≥ 10) com os biopolímeros de superfície ativa, amido modificado, goma Arábica e isolado proteico de soro de leite (1:1 m/m). Os resultados mostraram que as blendas foram favoráveis para obtenção de micropartículas funcionais com eficiência de encapsulação satisfatória (> 75%). A associação de inulina com os biopolímeros resultou na obtenção de matrizes encapsulantes de compostos lipofílicos altamente efetivas e com elevada estabilidade à separação de fases. A emulsificação com ultrassom não reduziu a atividade antioxidante do óleo apesar do intenso stress associado a cavitação acústica promovida pelo dispositivo. O óleo extraído das micropartículas apresentou maior atividade antioxidante que o óleo não processado. Este resultado foi associado a possível atividade antioxidante da inulina e demais encapsulantes.
ABSTRACT
The oil extracted from annatto seeds (Bixa orellana L.) presents bioactive compounds targeted by different industrial segments, as tocotrienols and geranylgeraniol. Stabilization of these compounds through its encapsulation is an interesting alternative to adding value to processing chain of annatto besides expanding the application possibilities in functional products. In this sense, the assessment of the use of ultrasonication technology combined with the use of biopolymers for forming emulsions are promising prospects for the development of new products. Therefore, the objective of this thesis was stabilizing of the bioactive compounds provided from annatto seed oil using ultrasound technique as emulsification process with prebiotic biopolymers for obtaining functional products. We performed a detailed study focusing on oil-biopolymer-water interface for understanding of stabilization mechanisms involved with gum Arabic, whey protein isolate, modified starch, polyethylene glycol and inulin. Ultrasonic emulsification was compared to the conventional method by mechanical shearing of the rotor-stator type device at similar energy densities. The results showed the superiority of ultrasound in thinning of the emulsions. Based on these results we performed a study optimizing power conditions (W) and process time (min) to obtain fine emulsions using whey protein isolate, modified starch and gum Arabic as emulsifiers. The optimized emulsions were dried by freeze-drying and spray-drying and the obtained microparticles were compared with regard to their technological properties. Highlight for microparticles obtained from gum Arabic by freeze-drying and modified starch by spray-drying that showed oil entrapment efficiency of 97 ± 1% and encapsulation efficiency of 94.8 ± 0.2%, respectively. The effect of degree of inulin polymerization (DP), DP ≥ 10 and DP ≥ 23, and sonication power (W) were evaluated on the emulsification of oil. The emulsions obtained with DP ≥ 23 showed phase separation stability in all powers applied due to rapid gelling of inulin and high rate of microshear. The characterization of microparticles obtained by freeze-drying technique assist in contributing to the advance of knowledge of the properties of inulin as a wall material. The highest DP was more effective in retaining geranylgeraniol and reduction of oil oxidation rate by the Rancimat accelerated test. However, inulins have acted primarily as a carrier agent for the oil, having an encapsulation efficiency exceeding 50%. To work around this result, blends of inulin (DP ≥ 10) with emulsifying biopolymers as gum Arabic, whey protein isolate and modified starch, were evaluated. The
results showed that the blends were favorable for obtaining functional microparticles with satisfactory encapsulation efficiency (>75%). The association of inulin with biopolymers resulted in encapsulating matrices of lipophilic compounds highly effective and with high stability to phase separation. The emulsification with ultrasound does not reduced the oil antioxidant activity despite the intense stress associated with acoustic cavitation promoted by the device. The oil extracted from the microparticles showed higher antioxidant activity than the oil unprocessed. This result was associated with possible antioxidant activity of inulin and other encapsulants.
LISTA DE ILUSTRAÇÕES
Figura 1.1 Estrutura química dos tocoferóis e tocotrienóis ... 26 Figura 1.2 Estrutura molecular de geranilgeraniol ... 27 Figura 1.3 Esquema geral das atividades realizadas na tese. ... 30 Figura 2.1 Destabilization mechanisms for an O/W emulsion. Source: Adapted from Bouyer, Mekhloufi [4] ... 39 Figura 2.2 Components of a batch-type ultrasonicator: generator, transducer, amplifier and probe.. ... 40 Figura 3.1 Flow diagram of the processes used for obtaining emulsions ... 51 Figura 3.2 Interfacial tension between the annatto seed oil and the biopolymer suspensions. ... 52 Figura 3.3 Viscosity-shear rate profile at 298 K of the anatto seed oil emulsions processed by disperser multiple phase (DR) and ultrasound (US). ... 53 Figura 3.4 Droplet size distribution curves of the anatto seed oil emulsions processed by disperser multiple phase (DR) and ultrasound (US). ... 54 Figura 3.5 Optical micrograph of the anatto seed oil emulsions processed by disperser multiple phase (DR) and ultrasound (US). ... 56 Figura 3.6 Effect of the emulsification process on the creaming index (%) of the emulsions. ... 57 Figura 3.7 Optical micrographs of the cream phase after 10 days of storage. ... 58 Figura 4.1 Contour plot showing the effects of applied power and processing time on the annatto seed oil emulsions stabilized by A) WPI and B) SF. ... 66 Figura 4.2 Creaming stability of the annatto seed oil emulsions stabilized by WPI after 72 h of processing ... 67 Figura 4.3 Creaming stability of the annatto seed oil emulsions stabilized by SF after 72 h of processing ... 68 Figura 4.4 Droplet size distribution of the ultrasound-assisted annatto seed oil emulsions with a smaller mean droplet diameter; both obtained at 480 W and 5 min ... 69 Figura 4.5 SEM image showing the annatto seed oil microparticles obtained by FD and SD using WPI and SF ... 70 Figura 4.6 Confocal micrographs of the annatto seed oil microparticles obtained by FD and SD using WPI and SF ... 71
Figura 4.7 Particle size distribution obtained by FD and SD using WPI and SF as wall materials.
... 71
Figura 4.8 Surface oil, entrapment efficiency and encapsulation efficiency of annatto seed oil from WPI-FD, WPI-SD, SF-FD and SF-SD microparticles ... 71
Figura 4.9 X-ray diffraction patterns of WPI, SF and annatto seed oil microparticles ... 72
Figura 4.10 TGA results of the thermal decomposition and its derivative (DTG) of WPI, SF and annatto seed oil microparticles ... 73
Figura 5.1 Experimental procedure for ultrasound-assisted encapsulation of annatto seed oil ... 77
Figura 5.2 Creaming stability of annatto seed oil emulsions for different processing conditions; photos taken 72 h after processing ... 79
Figura 5.3 Droplet size distribution of the ultrasound-assisted annatto seed oil emulsions: A) influence of ultrasonication power; B) influence of processing time. ... 80
Figura 5.4 SEM images of GA-FD and GA-SD microparticles ... 81
Figura 5.5 CSLM of annatto seed oil microparticles obtained by FD and SD techniques ... 82
Figura 5.6 Comparison of particle size distribution for GA-FD and GA-SD microparticles ... 82
Figura 5.7 Influence of the drying method on SO, entrapment efficiency, EE and geranylgeraniol retention ... 83
Figura 5.8 Oxidative stability of annatto seed oil before and after encapsulation through accelerated test Rancimat ... 83
Figura 5.9 Kinetic release of geranylgeraniol from GA-FD and GA-SD microparticles ... 84
Figura 6.1 Influence of inulin DP and ultrasonication power on the stability toward coalescence of the annatto seed oil emulsions ... 90
Figura 6.2 Influence of inulin DP and ultrasonication power on droplet size distribution ... 90
Figura 6.3 Surface oil, entrapment efficiency and encapsulation efficiency of the annatto seed oil microparticles ... 91
Figura 6.4 Morphology and particle size distributions of the particles obtained with GR and HP inulins ... 92
Figura 6.5 X-ray diffraction patterns of GR, HP and annatto seed oil microparticles ... 93
Figura 6.6 TGA results for thermal decomposition and its derivative (DTG) of GR, HP and annatto seed oil microparticles ... 93
Figura 6.7 Oxidation curves (conductivity versus time) obtained from the Rancimat
accelerated test of annatto seed oil before and after encapsulation with inulins ... 94
Figura 7.1 Confocal microscopy of annatto seed oil microparticles ... 104
Figura 7.2 Effect of the degree of inulin polymerization on geranylgeraniol retention ... 106
Figura 7.3 DSC curves of pure inulins and annatto seed oil microparticles ... 108
Figura 7.4 Water adsorption isotherms of annatto seed oil microparticles ... 110
Figura 7.5 Images of annatto seed oil microparticles after water adsorption at seven equilibrium relative moistures ... 113
Figura 8.1 Droplet size distribution combined with optical microscopy of annatto seed oil emulsions. ... 131
Figura 8.2 Size distribution and micrographs of microparticles containing annatto seed oil. ... 134
Figura 8.3 Micrographs obtained by confocal microscopy of microparticles containing annatto seed oil. ... 136
Figura 8.4 Surface oil, entrapment efficiency and encapsulation efficiency of annatto seed oil as a function of blends with inulin ... 137
Figura 8.5 Geranylgeraniol retention of microparticles containing annatto seed oil ... 139
Figura 8.6 Influence of blends of inulin with biopolymers in the maintenance of antioxidant activity of annatto seed oil ... 141
LISTA DE TABELAS
Tabela 2.1 Methods and mechanism for stabilizing emulsions. ... 40
Tabela 2.2. An overview of O/W emulsions stabilized with biopolymers assisted by ultrasonication. ... 41
Tabela 3.1 Characterization of materials used as emulsifier/stabilizers ... 50
Tabela 3.2 Zeta potential and pH values of biopolymer suspensions processed with disperser multiple phase (DR) and ultrasound (US). ... 51
Tabela 3.3 Rheological characteristics (apparent viscosity, flow and consistency indices at 298 K) of the anatto seed oil emulsions processed with disperser multiple phase (DR) and ultrasound (US). ... 54
Tabela 3.4 Characterization of the droplet size of the anatto seed oil emulsions processed with disperser multiple phase (DR) and ultrasound (US). ... 55
Tabela 4.1 Influence of the applied power (W) and processing time (min) on the mean droplet diameter ... 65
Tabela 4.2 Regression coefficients and evaluation of the mathematical models for ܦଷଶ. ... 66
Tabela 4.3 F-ratios and p-values of the regression models... 66
Tabela 4.4 Particle characterization: moisture, ܦସଷ and PDI ... 69
Tabela 5.1 Influence of power and ultrasonication time on the mean superficial diameter (D32) and polydispersity index (PDI) of droplets of annatto seed oil emulsion ... 79
Tabela 5.2 Characterization of annatto seed oil microparticles obtained using FD and SD techniques ... 82
Tabela 6.1 Emulsion droplet size and separation (%). ... 89
Tabela 6.2 Characterization of annatto seed oil microparticles ... 90
Tabela 7.1 Parameters fitted for GAB model ... 111
Tabela 8.1 Composition and characterization of annatto seed oil emulsions. ... 123
SUMÁRIO
CAPÍTULO 1 Introdução Geral, Justificativa, Objetivos e Estrutura da Tese ... 23
1.1 INTRODUÇÃO ... 24
1.1.1 Óleo de semente de urucum... 25
1.1.1.1 Tocotrienóis ... 26 1.1.1.2 Geranilgeraniol ... 27 1.2 JUSTIFICATIVA ... 27 1.3 OBJETIVOS ... 28 1.3.1 Objetivo geral ... 28 1.3.2 Objetivos específicos ... 28 1.4 ESTRUTURA DA TESE ... 29 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ... 33
CAPÍTULO 2 Revisão Bibliográfica ... 36
Ultrasound-assisted formation of emulsions stabilized by biopolymers ... 37
2.1 Introduction ... 37
2.2 Emulsions ... 38
2.2.1 Classification... 38
2.2.2 Stabilization methods and mechanisms ... 38
2.3 Biopolymers as emulsion stabilizers ... 38
2.4 Ultrasound technology in the emulsification process ... 39
2.4.1 Effect of HIUS on biopolymers ... 40
2.5 Ultrasonic applications in emulsions stabilized by biopolymers ... 43
2.6 Mini-review of patents on the field ... 44
2.7 Future directions ... 44
Acknowledgements ... 44
References and recommended reading... 44
CAPÍTULO 3 Mecanismos de estabilização e emulsificação assistida por ultrassom ... 47
Ultrasound-assisted formation of annatto seed oil emulsions stabilized by biopolymer 48 3.1 Introduction ... 48
3.2 Material and methods ... 49
3.2.1 Annatto seed oil extraction ... 49
3.2.3 Emulsification via mechanical stirring and ultrasound ... 49
3.2.4 ζ-Potential and pH measurements ... 49
3.2.5 Dynamic interfacial tension ... 50
3.2.6 Rheology ... 50
3.2.7 Emulsion droplet size ... 50
3.2.8 Optical microscopy ... 50
3.2.9 Creaming stability ... 50
3.2.10 Statistical analysis ... 50
3.3 Results and discussion ... 50
3.3.1 ζ-Potential, pH and dynamic interfacial tension ... 51
3.3.2 Viscosity and rheological behavior ... 52
3.3.3 Emulsion droplet size ... 53
3.3.4 Optical microscopy of the emulsions ... 55
3.3.5 Creaming stability ... 56
3.4 Conclusion ... 58
Acknowledgements ... 58
References ... 59
CAPÍTULO 4 Otimização do processo de ultrasonicação, formação e caracterização de micropartículas ... 61
Ultrasound-assisted encapsulation of annatto seed oil: Whey protein isolate versus modified starch ... 62
4.1 Introduction ... 62
4.2 Material and methods ... 63
4.2.1 Annatto seed oil extraction ... 63
4.2.2 Biopolymers used as emulsifier/wall materials ... 63
4.2.3 Production of annatto seed oil emulsions ... 63
4.2.4 Characterization of the emulsions ... 64
4.2.4.1 Emulsion droplet size ... 64
4.2.4.2 Creaming stability ... 64
4.2.5 Obtaining annatto seed oil microparticles ... 64
4.2.5.1 Freeze-drying process ... 64
4.2.6 Particle characterization ... 64
4.2.6.1 Moisture content ... 64
4.2.6.2 Particle size distribution ... 64
4.2.6.3 Scanning electron microscopy (SEM) ... 64
4.2.6.4 Confocal laser scanning microscopy (CLSM) ... 64
4.2.6.5 Entrapment efficiency (oil retention) ... 65
4.2.6.6 Surface oil ... 65
4.2.6.7 Encapsulation efficiency ... 65
4.2.6.8 X-ray diffraction (XRD) ... 65
4.2.6.9 Thermogravimetric analysis (TGA) ... 65
4.2.7 Statistical analysis ... 65
4.3 Results and discussion ... 65
4.3.1 Ultrasound-assisted encapsulation ... 65
4.3.2 Powder characterization ... 67
4.3.2.1 Moisture content ... 68
4.3.2.2 Particle morphology and size distribution ... 68
4.3.2.3 Surface oil, entrapment efficiency and encapsulation efficiency ... 69
4.3.2.4 X-ray diffraction (XRD) ... 69
4.3.2.5 Thermogravimetric analysis (TGA) ... 70
4.3.2.6 Connecting the results of microparticles characterization ... 72
4.4 Conclusion ... 72
Acknowledgements ... 73
References ... 73
CAPÍTULO 5 Efeito da morfologia da micropartícula sobre a retenção e cinética de liberação de geranilgeraniol ... 75
Ultrasound-assisted encapsulation of annatto seed oil: Retention and release of a bioactive compound with functional activities ... 76
5.1 Introduction ... 76
5.2 Material and Methods ... 77
5.2.1 Extraction of annatto seed oil ... 77
5.2.2 Emulsifying/wall material and materials for chromatographic analyses ... 77
5.2.4 Emulsion characterization ... 77
5.2.4.1 Droplet distribution size ... 77
5.2.4.2 Creaming stability ... 78
5.2.5 Drying the continuous phase of emulsions ... 78
5.2.5.1 FD technique ... 78
5.2.5.2 SD technique ... 78
5.2.6 Characterization of microparticles obtained from drying the emulsion ... 78
5.2.6.1 Moisture and water activity ... 78
5.2.6.2 Particle size distribution ... 78
5.2.6.3 Scanning electron microscopy (SEM) ... 78
5.2.6.4 Confocal scanning laser microscopy (CSLM) ... 78
5.2.6.5 Entrapment efficiency (oil retention) ... 78
5.2.6.6 Surface oil ... 78
5.2.6.7 Encapsulation efficiency ... 78
5.2.6.8 Geranylgeraniol retention ... 78
5.2.6.9 Oxidative stability ... 79
5.2.6.10 Kinetic release of geranylgeraniol ... 79
5.2.7 Statistical analyses ... 79
5.3 Results and discussion ... 79
5.3.1 Ultrasound-assisted emulsification ... 79
5.3.2 Characterization of particles obtained by drying the optimized emulsion ... 80
5.3.2.1 Particle morphology and size distribution ... 80
5.3.2.2 Moisture and water activity ... 80
5.3.2.3 Oil encapsulation efficiency and geranylgeraniol retention ... 81
5.3.3 Oxidative stability ... 83
5.3.4 Kinetic release of geranylgeraniol ... 83
5.4 Conclusion ... 84
Acknowledgements ... 84
References ... 84
CAPÍTULO 6 Influência da energia de sonicação e grau de polimerização da inulina sobre a estabilização do óleo de semente de urucum ... 86
Influence of the degree of inulin polymerization on the ultrasound-assisted encapsulation
of annatto seed oil ... 87
6.1 Introduction ... 87
6.2 Material and Methods ... 88
6.2.1 Annatto seed oil extraction ... 88
6.2.2 Inulins used as wall material ... 88
6.2.3 Preparation of annatto seed oil emulsions ... 88
6.2.4 Characterization of the emulsions ... 88
6.2.4.1 Emulsion droplet size ... 88
6.2.4.2 Emulsion stability ... 88
6.2.5 Freeze-drying... 88
6.2.6 Particle characterization ... 88
6.2.6.1 Moisture and water activity ... 88
6.2.6.2 Entrapment efficiency (oil retention) ... 88
6.2.6.3 Surface oil ... 89
6.2.6.4 Encapsulation efficiency ... 89
6.2.6.5 Morphology and microstructure ... 89
6.2.6.6 Particle size distribution ... 89
6.2.6.7 X-ray diffraction (XRD) ... 89
6.2.6.8 Thermogravimetric analysis (TGA) ... 89
6.2.6.9 Oxidative stability of annatto seed oil ... 89
6.2.6.10 Kinetic release of geranylgeraniol ... 89
6.2.7 Statistical analysis ... 89
6.3 Results and discussion ... 89
6.3.1 Influence of the applied power on the emulsion characteristics ... 89
6.3.2 Characterization of the annatto seed oil microparticles ... 90
6.3.2.1 Moisture and aw ... 90
6.3.2.2 Surface oil, entrapment efficiency and encapsulation efficiency ... 91
6.3.2.3 Microstructure and particle size distribution ... 91
6.3.2.4 Powder X-ray diffraction ... 91
6.3.2.5 Thermogravimetric analysis (TGA) ... 91
6.4 Conclusion ... 94
Acknowledgements ... 94
References ... 94
CAPÍTULO 7 Efeito do grau de polimerização da inulina sobre as propriedades físicas das micropartículas ... 121
Effect of the degree of inulin polymerization on the physical properties of annatto seed oil microparticles obtained by freeze-drying ... 96
7.1 Introduction ... 97
7.2 Material and Methods ... 99
7.2.1 Annatto seed oil extraction ... 100
7.2.2 Inulins and materials for chromatographic analyses ... 100
7.2.3 Microencapsulation of annatto seed oil ... 100
7.2.4 Confocal scanning laser microscopy (CSLM) ... 101
7.2.5 Geranylgeraniol retention ... 101
7.2.6 Differential scanning calorimetry (DSC) ... 102
7.2.7 Water adsorption isotherms ... 102
7.2.8 Statistical analysis ... 103
7.3 Results and Discussion ... 104
7.3.1 Confocal microscopy ... 104
7.3.2 Geranylgeraniol retention ... 105
7.3.3 Glass transition temperature (Tg) ... 107
7.3.4 Water adsorption isotherms of annatto seed oil microparticles ... 108
7.4 Conclusion ... 114
Acknowledgements ... 114
References ... 114
CAPÍTULO 8 Blendas de inulina com emulsificantes e os seus efeitos sobre as propriedades funcionais das micropartículas ... 117
Biopolymer-prebiotic carbohydrate blends and their effects on the retention of bioactive compounds and maintenance of antioxidant activity ... 118
8.1 Introduction ... 120
8.2 Material and Methods ... 121
8.2.2 Wall materials and solvents for chromatographic analyses ... 121
8.2.3 Obtaining annatto seed oil emulsions ... 122
8.2.4 Emulsion characterization ... 123
8.2.4.1 Droplet size distribution ... 124
8.2.4.2 Optical microscopy ... 124
8.2.4.3 Creaming stability ... 124
8.2.5 Particles formation by freeze-drying ... 125
8.2.6 Particles characterization ... 125
8.2.6.1 Moisture content and water activity ... 125
8.2.6.2 Particle size distribution ... 125
8.2.6.3 Scanning electron microscopy (SEM) ... 126
8.2.6.4 Confocal laser scanning microscopy (CLSM) ... 126
8.2.6.5 Surface oil (SO) ... 126
8.2.6.6 Entrapment efficiency (oil retention) ... 126
8.2.6.7 Encapsulation efficiency ... 127
8.2.6.8 Geranylgeraniol retention ... 127
8.2.6.9 Antioxidant activity ... 128
8.2.7 Statistical analysis ... 129
8.3 Results and discussion ... 129
8.3.1 Encapsulating annatto seed oil by emulsification ... 129
8.3.2 Moisture content and water activity ... 132
8.3.3 Microstructure and particle size distribution ... 133
8.3.4 Confocal microscopy ... 134
8.3.5 Entrapment and encapsulation efficiencies of annatto seed oil ... 137
8.3.6 Geranylgeraniol retention ... 138
8.3.7 Antioxidant activity of the annatto seed oil before and after encapsulation ... 139
8.4 Conclusion ... 141
Acknowledgements ... 142
References ... 142
CAPÍTULO 9 Discussão Geral ... 146
9.1 Discussão Geral ... 147
CAPÍTULO 10 Conclusões gerais, sugestões para trabalhos futuros e memória do período de doutorado ... 151
10.1 CONCLUSÕES GERAIS ... 152 10.2 SUGESTÕES PARA TRABALHOS FUTUROS ... 154 10.3 MEMÓRIA DO PERÍODO DE DOUTORADO ... 155 APÊNDICES ... 158
APÊNDICE A - Artigo de revisão sobre encapsulação de compostos alimentícios utilizando tecnologia supercrítica ... 158 APÊNDICE B - Material suplementar do Capítulo 2 ... 172 APÊNDICE C - Material suplementar do Capítulo 3 ... 174 APÊNDICE D - Material suplementar do Capítulo 4 ... 180 APÊNDICE E - Material suplementar do Capítulo 5 ... 193 APÊNDICE F - Material suplementar do Capítulo 6... 198 APÊNDICE G - Material suplementar do Capítulo 7 ... 204 APÊNDICE H - Material suplementar do Capítulo 8 ... 206
CAPÍTULO 1
Introdução Geral, Justificativa, Objetivos e Estrutura da Tese
Ϯϯ
1. INTRODUÇÃO ďƵƐĐĂ ƉŽƌ ƉƌŽĚƵƚŽƐ ĨƵŶĐŝŽŶĂŝƐ Ğ ƐĞŐƵƌŽƐ ƉĂƌĂ Ž ĐŽŶƐƵŵŽ ŚƵŵĂŶŽ ƚĞŵ ŝŵƉƵůƐŝŽŶĂĚŽĂƐŝŶĚƷƐƚƌŝĂƐĚĞƉƌŽĚƵƚŽƐĨĂƌŵĂĐġƵƚŝĐŽƐ͕ĐŽƐŵĠƚŝĐŽƐĞĂůŝŵĞŶƚŽƐĂĂƵŵĞŶƚĂƌŽƐ ƐĞƵƐŝŶǀĞƐƚŝŵĞŶƚŽƐŶĂƵƚŝůŝnjĂĕĆŽĚĞĐŽŵƉŽƐƚŽƐŶĂƚƵƌĂŝƐĞŵƐƵďƐƚŝƚƵŝĕĆŽĂŽƐĂĚŝƚŝǀŽƐƐŝŶƚĠƚŝĐŽƐ ƉĂƌĂĂƚĞŶĚĞƌĂĚĞŵĂŶĚĂĞĞdžƉĞĐƚĂƚŝǀĂƐĚĞƵŵŵĞƌĐĂĚŽĐŽŶƐƵŵŝĚŽƌĐĂĚĂǀĞnjŵĂŝƐĞdžŝŐĞŶƚĞĞ ĐŽŶƐĐŝĞŶƚĞ ĚĂ ŶĞĐĞƐƐŝĚĂĚĞ ĚĞ ĐƵŝĚĂĚŽƐ ĐŽŵ Ă ƐĂƷĚĞ ƌĞůĂĐŝŽŶĂĚŽƐ ƉƌŝŶĐŝƉĂůŵĞŶƚĞ ă ĂůŝŵĞŶƚĂĕĆŽ͘ KƐ ſůĞŽƐ ƉƌŽǀĞŶŝĞŶƚĞƐ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞƐ ƐĆŽ ƵŵĂ ĚĂƐ ĨŽŶƚĞƐ ŵĂŝƐ ƌŝĐĂƐ ĚĞ ĐŽŵƉŽŶĞŶƚĞƐ ŶĂƚƵƌĂŝƐ͕ ƚĂŝƐ ĐŽŵŽ ĄĐŝĚŽƐ ŐƌĂdžŽƐ͕ ĐĂƌŽƚĞŶŽŝĚĞƐ͕ ƉŽůŝĨĞŶſŝƐ͕ ĨŝƚŽƐƚĞƌſŝƐ͕ ƚŽĐŽĨĞƌſŝƐĞŽƵƚƌŽƐĐŽŵƉŽƐƚŽƐĐŽŵĞůĞǀĂĚĂĂƚŝǀŝĚĂĚĞďŝŽůſŐŝĐĂ ;ŚŝŽƵ et al.͕ϮϬϭϮͿ͘KſůĞŽ ŽďƚŝĚŽ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞƐ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ ƚĞŵ ĂĚƋƵŝƌŝĚŽ ŶŽƚŽƌŝĞĚĂĚĞ ƉŽƌ ĐŽŶƚĞƌ ƐƵďƐƚąŶĐŝĂƐ ĐŽŵŽ ƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐĞŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽůƋƵĞƐĆŽĚĞŐƌĂŶĚĞŝŵƉŽƌƚąŶĐŝĂƉĂƌĂĂŵĂŶƵƚĞŶĕĆŽĚĂƐĂƷĚĞ ŚƵŵĂŶĂ͘KƐƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐƐĆŽĂŶƚŝŽdžŝĚĂŶƚĞƐůŝƉşĚŝĐŽƐĞĐŽŵƉƁĞŵƵŵŐƌƵƉŽĚĞĐŽŵƉŽƐƚŽƐƋƵĞ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂŵĂƚŝǀŝĚĂĚĞǀŝƚĂŵşŶŝĐĂ ͘KŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽůĠƵŵŝŵƉŽƌƚĂŶƚĞĨĄƌŵĂĐŽĐŽŵŐƌĂŶĚĞ ƉŽƚĞŶĐŝĂůĚĞĂƉůŝĐĂĕĆŽŶŽĐŽŵďĂƚĞĂĚŝǀĞƌƐŽƐƚŝƉŽƐĚĞĐąŶĐĞƌ͕ĂůĠŵĚĞĂƉƌĞƐĞŶƚĂƌĚŝǀĞƌƐĂƐ ŽƵƚƌĂƐĂĕƁĞƐƚĞƌĂƉġƵƚŝĐĂƐ͘ hŵĂĂůƚĞƌŶĂƚŝǀĂƉĂƌĂĂŵƉůŝĂĕĆŽĚĂĚŝƐƉŽŶŝďŝůŝnjĂĕĆŽĚŽƐĐŽŵƉŽƐƚŽƐďŝŽĂƚŝǀŽƐĚŽ ſůĞŽ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ ǀŝƐĂŶĚŽ ŝŶƷŵĞƌĂƐ ƉŽƐƐŝďŝůŝĚĂĚĞƐ ĚĞ ĂƉůŝĐĂĕĆŽ Ğŵ ĚŝǀĞƌƐŽƐ ƉƌŽĚƵƚŽƐĠĂƐƵĂĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽ͘ĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽĠƵŵƉƌŽĐĞƐƐŽĚĞƌĞĐŽďƌŝŵĞŶƚŽŽŶĚĞƵŵĂ ƐƵďƐƚąŶĐŝĂ͕ĚĞŶŽŵŝŶĂĚĂŵĂƚĞƌŝĂůĂƚŝǀŽŽƵŶƷĐůĞŽ͕ĠĞŶǀŽůǀŝĚĂƉŽƌƵŵŵĂƚĞƌŝĂůĚĞŶŽŵŝŶĂĚŽ ĂŐĞŶƚĞ ĞŶĐĂƉƐƵůĂŶƚĞ͕ ƋƵĞ ƚĞŵ Ă ĨƵŶĕĆŽ ĚĞ ƉƌŽƚĞŐĞƌ Ž ŵĂƚĞƌŝĂů ĂƚŝǀŽ ƚŽƚĂůŵĞŶƚĞ ŽƵ ƉĂƌĐŝĂůŵĞŶƚĞ͘ ĞŶƚƌĞ ĂƐ ƚĠĐŶŝĐĂƐ ĚĞ ĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽ ĞdžŝƐƚĞŶƚĞƐ͕ ĐĂĚĂ ŵĠƚŽĚŽ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂ ǀĂŶƚĂŐĞŶƐ Ğ ůŝŵŝƚĂĕƁĞƐ ĚĞƉĞŶĚĞŶĚŽ ĚĂƐ ĞdžƉĞĐƚĂƚŝǀĂƐ Ğŵ ƌĞůĂĕĆŽ ăƐ ĐĂƌĂĐƚĞƌşƐƚŝĐĂƐ ĚĂƐ ƉĂƌƚşĐƵůĂƐ ŽďƚŝĚĂƐ Ğ͕ ƉŽƌƚĂŶƚŽ͕ Ġ ĨƵŶĚĂŵĞŶƚĂů Ă ƐĞůĞĕĆŽ ĂĚĞƋƵĂĚĂ ĚŽ ŵĠƚŽĚŽ ǀŝƐĂŶĚŽ ĂƐ ƉƌŽƉƌŝĞĚĂĚĞƐĚĞƐĞũĂĚĂƐŶĂĂƉůŝĐĂĕĆŽĞŵƉƌŽĚƵƚŽƐ͘WƌŝŶĐŝƉĂůŵĞŶƚĞĞŵƌĞůĂĕĆŽăĞƐƚĂďŝůŝnjĂĕĆŽ ĚŽſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵ͕ƉŽŝƐŶĆŽĞdžŝƐƚĞŵĞƐƚƵĚŽƐƐŽďƌĞƉƌŽĐĞƐƐŽƐĚĞĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽ ĚĞƐƚĞǀĂůŝŽƐŽŵĂƚĞƌŝĂůĂƚŝǀŽ͘ ŵƵůƐƁĞƐ ƐĆŽ ƐŝƐƚĞŵĂƐ ĐŽůŽŝĚĂŝƐ ĂŵƉůĂŵĞŶƚĞ ƵƚŝůŝnjĂĚŽƐ ŶĂ ĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽ͕ ƐŽůƵďŝůŝnjĂĕĆŽĞůŝďĞƌĂĕĆŽĐŽŶƚƌŽůĂĚĂĚĞĐŽŵƉŽƐƚŽƐůŝƉŽĨşůŝĐŽƐ;'ŽŵĞƐ et al.͕ϮϬϭϲ͖tĂŶŐ et al.͕ ϮϬϭϲͿ͘ĞŶƚƌĞŽƐǀĄƌŝŽƐŵĠƚŽĚŽƐĚĞĞŵƵůƐŝĨŝĐĂĕĆŽĐŽŵŽĂƵƚŝůŝnjĂĕĆŽĚĞƌŽƚŽƌĞƐŵĞĐąŶŝĐŽƐ͕ ŚŽŵŽŐĞŶĞŝnjĂĚŽƌĞƐĂĂůƚĂƉƌĞƐƐĆŽĞŵŝĐƌŽĨůƵŝĚŝnjĂĚŽƌĞƐ͕ŽĞŵƉƌĞŐŽĚĞƚĞĐŶŽůŽŐŝĂƐĞŵĞƌŐĞŶƚĞƐ ĐŽŵŽĂƵůƚƌĂƐŽŶŝĐĂĕĆŽƉĂƌĂĨŽƌŵĂĕĆŽĚĞĞŵƵůƐƁĞƐĐŽŵŵĞŶŽƌĚŝƐƚƌŝďƵŝĕĆŽĚĞƚĂŵĂŶŚŽĚĂ Ϯϰ
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1.1 Óleo de semente de urucum
KƵƌƵĐƵŵ;Bixa orellana>͘ͿĠƵŵĂĄƌǀŽƌĞĚĞƉĞƋƵĞŶŽƉŽƌƚĞĐƵůƚŝǀĂĚĂĞŵƌĞŐŝƁĞƐ ƚƌŽƉŝĐĂŝƐ Ğ ƐƵďƚƌŽƉŝĐĂŝƐĚŽŵƵŶĚŽ͘ EĂ ŝŶĚƷƐƚƌŝĂ͕ Ğŵ ŐĞƌĂů͕ Ġ ƉƌŝŶĐŝƉĂůŵĞŶƚĞ ǀĂůŽƌŝnjĂĚŽƉŽƌ ƐƵĂƐ ƐĞŵĞŶƚĞƐ ƉŝŐŵĞŶƚĂĚĂƐ ƋƵĞ ƐĆŽ ĨŽŶƚĞ ĚĞ ĐŽůŽƌĂŶƚĞ ŶĂƚƵƌĂů ůĂƌĂŶũĂ Ğ ǀĞƌŵĞůŚŽ ;^ĂƚLJĂŶĂƌĂLJĂŶĂ et al.͕ϮϬϬϯͿ͕ƋƵĞĂƉƌĞƐĞŶƚĂŵƷůƚŝƉůĂƐĂƉůŝĐĂĕƁĞƐĞŵĂůŝŵĞŶƚŽƐ͕ĐŽƐŵĠƚŝĐŽƐ͕ ƉƌŽĚƵƚŽƐ ĨĂƌŵĂĐġƵƚŝĐŽƐ Ğ ƚġdžƚĞŝƐ ;WƌĂďŚĂŬĂƌĂ ZĂŽ et al.͕ ϮϬϬϱͿ͘ ĂůŝĂĚŽ ă ƚĞŶĚġŶĐŝĂ ĚĞ ƐƵďƐƚŝƚƵŝĕĆŽ ĚĞ ĐŽůŽƌĂŶƚĞƐ ƐŝŶƚĠƚŝĐŽƐ ƉŽƌ ŶĂƚƵƌĂŝƐ Ğ Ž ĨĂƚŽ ĚĞ ƚŽĚĂƐ ĂƐ ƉĂƌƚĞƐ ĚĂ ƉůĂŶƚĂ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂƌĞŵ ƉƌŽƉƌŝĞĚĂĚĞƐ ŵĞĚŝĐŝŶĂŝƐ Ğ ƐĞƌĞŵ ƵƚŝůŝnjĂĚĂƐ Ğŵ ĚŝĨĞƌĞŶƚĞƐ ƐŝƐƚĞŵĂƐ ĚĞ ŵĞĚŝĐĂŵĞŶƚŽ͕ĂƐƵĂƉƌŽĚƵĕĆŽĂƵŵĞŶƚŽƵŝŶƚĞƌŶĂĐŝŽŶĂůŵĞŶƚĞŶŽƐƷůƚŝŵŽƐĂŶŽƐ;:ŽƐĞƉŚ et al.͕ ϮϬϭϭͿ͘ KƌĂƐŝůĠƵŵĚŽƐŵĂŝŽƌĞƐƉƌŽĚƵƚŽƌĞƐĞĞdžƉŽƌƚĂĚŽƌĞƐĚĞƐĞŵĞŶƚĞƐĞĞdžƚƌĂƚŽƐĚĞ ƵƌƵĐƵŵ͕ ƐĞŶĚŽ Ă ƉůĂŶƚĂ ĐƵůƚŝǀĂĚĂ Ğŵ ƚŽĚĂƐ ĂƐ ƌĞŐŝƁĞƐ ďƌĂƐŝůĞŝƌĂƐ ƉĂƌĂ ĐŽŵĞƌĐŝĂůŝnjĂĕĆŽ ĚŽ ĐŽůŽƌĂŶƚĞ ;ůďƵƋƵĞƌƋƵĞ Ğ DĞŝƌĞůĞƐ͕ ϮϬϭϭͿ͘ Ɛ ƐĞŵĞŶƚĞƐ ĚŽ ƵƌƵĐƵŵ ĐŽŶƚġŵ͗ ϰϬ Ͳ ϰϱй ĚĞ ĐĞůƵůŽƐĞ͖ϯ͕ϱͲϱ͕ϮйĚĞĂĕƷĐĂƌĞƐ͖Ϭ͕ϯͲϬ͕ϵйĚĞſůĞŽĞƐƐĞŶĐŝĂů͖ϯйĚĞſůĞŽĨŝdžŽ͖ϰ͕ϱͲϱ͕ϱйĚĞ ƉŝŐŵĞŶƚŽƐ͖ϭϯͲϭϲйĚĞƉƌŽƚĞşŶĂƐ͖ĐŽŵŽƚĂŵďĠŵɲͲĞɴͲĐĂƌŽƚĞŶŽ͕ĂůĠŵĚĞƚĂŶŝŶŽƐ͕ƐĂƉŽŶŝŶĂƐ ĞŽƵƚƌŽƐĐŽŶƐƚŝƚƵŝŶƚĞƐ;ŶƐĞůŵŽ et al.͕ϮϬϬϴͿ͘ ŝǀĞƌƐŽƐ ĐĂƌŽƚĞŶŽŝĚĞƐ ĨŽƌĂŵ ŝĚĞŶƚŝĨŝĐĂĚŽƐ ŶĂƐ ƐĞŵĞŶƚĞƐ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ͕ ƐĞŶĚŽ Ă ďŝdžŝŶĂ Ž ƉƌŝŶĐŝƉĂů ƌĞƐƉŽŶƐĄǀĞů ƉĞůĂ ĐŽůŽƌĂĕĆŽ͕ ƌĞƉƌĞƐĞŶƚĂŶĚŽ ĐĞƌĐĂ ĚĞ ϴϬ Ͳ ϵϬй ĚŽƐ ĐĂƌŽƚĞŶŽŝĚĞƐƚŽƚĂŝƐ ;WƌĞƐƚŽŶĞ ZŝĐŬĂƌĚ͕ ϭϵϴϬ͖ ĂůĂƐǁĂŵLJ et al.͕ ϮϬϬϲͿ͘ ďŝdžŝŶĂ Ġ Ƶŵ ĠƐƚĞƌ ŵŽŶŽŵĞƚşůŝĐŽƐŽůƷǀĞůĞŵůŝƉşĚŝŽƐ͕ĐůĂƐƐŝĨŝĐĂĚĂĐŽŵŽɴͲĐĂƌŽƚĞŶŽŝĚĞ͕ƉƌĞƐĞŶƚĞŶŽƌĞǀĞƐƚŝŵĞŶƚŽ Ϯϱ
ĞdžƚĞƌŝŽƌĚĂƐƐĞŵĞŶƚĞƐ͘KƵƚƌŽĐĂƌŽƚĞŶŽŝĚĞĞŶĐŽŶƚƌĂĚŽĠĂŶŽƌďŝdžŝŶĂ͕ ƵŵĄĐŝĚŽĚŝĐĂƌďŽdžşůŝĐŽ ƋƵĞƌĞƉƌĞƐĞŶƚĂĂĨŽƌŵĂƐŽůƷǀĞůĚĂďŝdžŝŶĂĞŵĄŐƵĂ;^ŚĂƌŵĂ et al.͕ϮϬϭϯͿ͘ĞǀŝĚŽĂŽĐŽůŽƌĂŶƚĞ ĚŽƵƌƵĐƵŵĐŽŶƚĞƌĨƌĂĕƁĞƐůŝƉŽƐƐŽůƷǀĞŝƐĞŚŝĚƌŽƐƐŽůƷǀĞŝƐ͕ĞůĞƉŽĚĞůŝŐĂƌͲƐĞĂĐĞƌƚĂƐƉŽƌĕƁĞƐĚĞ ƉƌŽƚĞşŶĂƐ ƋƵĞ ŝŶƚĞŶƐŝĨŝĐĂŵ Ă ƐƵĂ ĞƐƚĂďŝůŝĚĂĚĞ͘ ƐƚĂƐ ĐĂƌĂĐƚĞƌşƐƚŝĐĂƐ ĨĂnjĞŵ ĚŽ ƵƌƵĐƵŵ Ž ĐŽůŽƌĂŶƚĞŶĂƚƵƌĂůŵĂŝƐƉŽƉƵůĂƌĞŵƚŽĚŽŽŵƵŶĚŽ;ůǀĞƐ et al.͕ϮϬϬϲͿ͘ ůĠŵ ĚŝƐƐŽ͕ Ž ƵƌƵĐƵŵ ƚĞŵ ƵŵĂ ĨƌĂĕĆŽ ůŝƉşĚŝĐĂ ƌŝĐĂ Ğŵ ƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐ Ğ ŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽů͕ ƋƵĞ ƚĞŵ ŐƌĂŶĚĞ ƉŽƚĞŶĐŝĂů ĚĞ ĂƉůŝĐĂĕĆŽ Ğŵ ƉƌŽĚƵƚŽƐ ĂůŝŵĞŶƚşĐŝŽƐ ĐŽŵŽ ƐƵƉůĞŵĞŶƚŽŶƵƚƌŝĐŝŽŶĂůĞŶƵƚƌĂĐġƵƚŝĐŽ;:ŽŶĚŝŬŽĞWĂƚƚĞŶĚĞŶ͕ϭϵϴϵ͖ůďƵƋƵĞƌƋƵĞĞDĞŝƌĞůĞƐ͕ ϮϬϭϮ͖DŽƌĂĞƐ et al.͕ϮϬϭϱͿ͘ 1.1.1 Tocotrienóis KƐ ƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐ Ğ ƚŽĐŽĨĞƌſŝƐ ƐĆŽ ĐŽŵƉŽƐƚŽƐ ĂŶƚŝŽdžŝĚĂŶƚĞƐ ĐŽŶŚĞĐŝĚŽƐ ƉŽƉƵůĂƌŵĞŶƚĞĐŽŵŽǀŝƚĂŵŝŶĂ ͘KĐŽƌƌĞŵŶĂƚƵƌĂůŵĞŶƚĞŶĂƐŽŝƚŽŝƐŽĨŽƌŵĂƐĚĞɲͲ͕ɴͲ͕ɶͲĞɷͲ ƚŽĐŽĨĞƌſŝƐ Ğ ƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐ ;&ŝŐƵƌĂ ϭͿ͘ EĂ ĚŝĞƚĂ ŚƵŵĂŶĂ ŽƐ ƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐ ƐĆŽ ĞŶĐŽŶƚƌĂĚŽƐ Ğŵ ƉĞƋƵĞŶĂƐƋƵĂŶƚŝĚĂĚĞƐ͕ƐĞŶĚŽƋƵĞĂŵĂŝŽƌĚŝƐƉŽŶŝďŝůŝĚĂĚĞĚĞƐƚĞƐŶƵƚƌŝĞŶƚĞƐĠŽďƐĞƌǀĂĚĂŶŽ ſůĞŽ ĚĞƉĂůŵĂ͕ ĚĞĨĂƌĞůŽĚĞ ĂƌƌŽnj Ğ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞĚĞ ƵƌƵĐƵŵ͕ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂŶĚŽ Ă ƉƌŽƉŽƌĕĆŽ ĚĞ ƚŽĐŽĨĞƌſŝƐ͗ƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐĚĞϮϱ͗ϳϱ͕ϱϬ͗ϱϬĞϬ͕ϭ͗ϵϵ͕ϵ͕ƌĞƐƉĞĐƚŝǀĂŵĞŶƚĞ;WŝĞƌƉĂŽůŝ et al.͕ϮϬϭϯͿ͘ Figura 1. ƐƚƌƵƚƵƌĂƋƵşŵŝĐĂĚŽƐƚŽĐŽĨĞƌſŝƐĞƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐ. KƚĞŽƌĚĞɷͲƚŽĐŽƚƌŝĞŶŽůŶĂĨƌĂĕĆŽůŝƉşĚŝĐĂĚĂƐƐĞŵĞŶƚĞƐƐĞĐĂƐĚĞƵƌƵĐƵŵĠϭϰϬͲ ϭϰϳ ŵŐͬϭϬϬ Ő ;&ƌĞŐĂĂ et al.͕ ϭϵϵϴͿ͘ K ſůĞŽ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ ŽďƚŝĚŽ ƉŽƌ ĞdžƚƌĂĕĆŽ ƐƵƉĞƌĐƌşƚŝĐĂĐŽŵĚŝſdžŝĚŽĚĞĐĂƌďŽŶŽĨŽŝĐĂƌĂĐƚĞƌŝnjĂĚŽĐŽŵƚĞŽƌĚĞɷͲƚŽĐŽƚƌŝĞŶŽůĚĞϭϰ͘ϲцϬ͘ϰ Ϯϲ
й͘ ůŝƚĞƌĂƚƵƌĂ ĐŝĞŶƚşĨŝĐĂ Ž ĐůĂƐƐŝĨŝĐŽƵ ĐŽŵŽ Ă ŵĂŝŽƌ ĨŽŶƚĞ ŶĂƚƵƌĂů ĚĞ ɷͲƚŽĐŽƚƌŝĞŶŽů ;ůďƵƋƵĞƌƋƵĞĞDĞŝƌĞůĞƐ͕ϮϬϭϮ͖DŽƌĂĞƐ et al.͕ϮϬϭϱͿ͘ ůŐƵŶƐ ĞƐƚƵĚŽƐ ŝĚĞŶƚŝĨŝĐĂƌĂŵ ŽƐ ƚŽĐŽƚƌŝĞŶſŝƐ ĐŽŵŽ ŽƐ ŵĂŝƐ ĞĨŝĐĂnjĞƐ ĐŽŵƉŽƐƚŽƐ ĂŶƚŝŽdžŝĚĂŶƚĞƐĞĂŶƚŝĐĂŶĐĞƌşŐĞŶŽƐƋƵĂŶĚŽĐŽŵƉĂƌĂĚŽƐĂŽƐƚŽĐŽĨĞƌſŝƐ;DĐŝŶƚLJƌĞ et al.͕ϮϬϬϬ͖ ^LJůǀĞƐƚĞƌĞ^ŚĂŚ͕ϮϬϬϱͿ͘ ůĞƐĂƉƌĞƐĞŶƚĂŵĂƚŝǀŝĚĂĚĞĂŶƚŝͲŚŝƉĞƌĐŽůĞƐƚĞƌŽůġŵŝĐĂ;YƵƌĞƐŚŝ et al.͕ ϮϬϬϮͿ͕ĂŶƚŝĐĂŶĐĞƌşŐĞŶĂ;tĂĚĂ et al.͕ϮϬϬϱͿĞŶĞƵƌŽƉƌŽƚĞƚŽƌĂ;<ŚĂŶŶĂ et al.͕ϮϬϬϱͿ͘ 1.1.2 Geranilgeraniol KĐŽŶƐƚŝƚƵŝŶƚĞƚĞƌƉġŶŝĐŽŵĂũŽƌŝƚĄƌŝŽĚĂƐƐĞŵĞŶƚĞƐĚĞƵƌƵĐƵŵĠŽŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽů͕ ƌĞƉƌĞƐĞŶƚĂŶĚŽ ϭй ĚĂƐ ƐĞŵĞŶƚĞƐ ƐĞĐĂƐ ;:ŽŶĚŝŬŽ Ğ WĂƚƚĞŶĚĞŶ͕ ϭϵϴϵͿ͘ ƐƚĞ ĐŽŵƉŽƐƚŽ Ġ Ƶŵ ŝƐŽƉƌĞŶſŝĚĞ;&ŝŐƵƌĂϮͿĞŶĐŽŶƚƌĂĚŽĞŵĨƌƵƚĂƐ͕ǀĞŐĞƚĂŝƐĞŐƌĆŽƐ;WĂŶ et al.͕ϮϬϬϵͿ͘ Figura 2. ƐƚƌƵƚƵƌĂŵŽůĞĐƵůĂƌĚĞŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽů ŝŶĚƷƐƚƌŝĂ ĨĂƌŵĂĐġƵƚŝĐĂ ƚĞŵ ŐƌĂŶĚĞ ŝŶƚĞƌĞƐƐĞ ŶŽ ŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽů ĚĞǀŝĚŽ ƐƵĂ ĐĂƉĂĐŝĚĂĚĞĚĞƉƌŽŵŽǀĞƌĂĂƉŽƉƚŽƐĞĚĞĚŝǀĞƌƐŽƐƚŝƉŽƐĚĞĐĠůƵůĂƐĐĂŶĐĞƌşŐĞŶĂƐ͕ŽƵƐĞũĂ͕ĞůĞ ƉƌŽŵŽǀĞĂŵŽƌƚĞƉƌŽŐƌĂŵĂĚĂĚĂƐĐĠůƵůĂƐĚŽĞŶƚĞƐĞƉĞƐƋƵŝƐĂƐŽĂƉŽŶƚĂŵĐŽŵŽƵŵŐƌĂŶĚĞ ĂůŝĂĚŽŶĂůƵƚĂĐŽŶƚƌĂŽĐąŶĐĞƌ;KŚŝnjƵŵŝ et al.͕ϭϵϵϳ͖zŽƐŚŝŬĂǁĂ et al.͕ϮϬϬϵ͖<ĂƚƵƌƵ et al.͕ϮϬϭϭ͖ DĂƌĐƵnjnjŝ et al.͕ ϮϬϭϮͿ͘ dĂŵďĠŵ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂ ĂƚŝǀŝĚĂĚĞƐ ĂŶƚŝͲŝŶĨůĂŵĂƚſƌŝĂƐ ;'ŝƌŝǁŽŶŽ et al.͕ ϮϬϭϯͿ͕ ĂĕĆŽ ƚĞƌĂƉġƵƚŝĐĂ ƉĂƌĂ ĚŽĞŶĕĂ ĚĞ ŚĂŐĂƐ ;DĞŶŶĂͲĂƌƌĞƚŽ et al.͕ ϮϬϬϴͿ͕ ŝŶŝďŝĕĆŽ ĚŽ ŵŝĐƌŽƌŐĂŶŝƐŵŽ ĐĂƵƐĂĚŽƌ ĚĂ ƚƵďĞƌĐƵůŽƐĞ ;sŝŬ et al.͕ ϮϬϬϳͿ͕ ĂůĠŵ ĚĞ ƐĞƌ Ƶŵ ŝŵƉŽƌƚĂŶƚĞ ŝŶƚĞƌŵĞĚŝĄƌŝŽŶĂƐşŶƚĞƐĞĚĞǀŝƚĂŵŝŶĂ<͕ǀŝƚĂŵŝŶĂ ĞĚŝǀĞƌƐŽƐŚŽƌŵƀŶŝŽƐ;,LJĂƚƚ et al.͕ϮϬϬϮͿ͘ 2. JUSTIFICATIVA ƉƌŽƉŽƐƚĂĚĞƐƚĞƚƌĂďĂůŚŽĨŽŝƵƚŝůŝnjĂƌĂƵůƚƌĂƐŽŶŝĐĂĕĆŽ͕ƵŵĂƚĞĐŶŽůŽŐŝĂĞŵĞƌŐĞŶƚĞ͕ ƉĂƌĂ ĂŐƌĞŐĂĕĆŽ ĚĞ ǀĂůŽƌ ĂŽ ſůĞŽ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ Ğ ƉƌŽŵŽǀĞƌ Ă ĚŝƐƉŽŶŝďŝůŝnjĂĕĆŽ ĚĞ ĐŽŵƉŽƐƚŽƐďŝŽĂƚŝǀŽƐ͕ĞƐƚĂďŝůŝnjĂĚŽƐƉĞůŽƉƌŽĐĞƐƐŽĚĞĞŶĐĂƉƐƵůĂŵĞŶƚŽ͕ƉĂƌĂƐƵƉƌŝƌĂĐƌĞƐĐĞŶƚĞ ĚĞŵĂŶĚĂĚŽƐĐŽŶƐƵŵŝĚŽƌĞƐŵŽĚĞƌŶŽƐƉŽƌƉƌŽĚƵƚŽƐŶĂƚƵƌĂŝƐƋƵĞƉƌŽŵŽǀĂŵƐĂƵĚĂďŝůŝĚĂĚĞ͘ Ϯϳ
WŽƌƚĂŶƚŽ͕ĂũƵƐƚŝĨŝĐĂƚŝǀĂĚĂƌĞĂůŝnjĂĕĆŽĚĞƐƚĞƚƌĂďĂůŚŽĐŽŶƐŝĚĞƌĂƋƵĞĂƵƚŝůŝnjĂĕĆŽĚŽ ƉƌŽĐĞƐƐŽ ĚĞ ĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽ ĂƐƐŝƐƚŝĚĂ ƉŽƌ ƵůƚƌĂƐƐŽŵ ĚŽ ſůĞŽ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ ĐŽŵ ďŝŽƉŽůşŵĞƌŽƐĐŽŵŽĞƐƚĂďŝůŝnjĂŶƚĞƐͬĞŵƵůƐŝĨŝĐĂŶƚĞƐĞĂŽďƚĞŶĕĆŽĚĞƉĂƌƚşĐƵůĂƐĚŽſůĞŽĨŽƌŶĞĕĂŵ ŝŶĨŽƌŵĂĕƁĞƐ ƋƵĂůŝƚĂƚŝǀĂƐ Ğ ƋƵĂŶƚŝƚĂƚŝǀĂƐ ƉĂƌĂ ĂƉůŝĐĂĕĆŽ Ğŵ ĞƐĐĂůĂ ŝŶĚƵƐƚƌŝĂů͕ ŝĚĞĂůŝnjĂŶĚŽ Ă ŽďƚĞŶĕĆŽĚĞŶŽǀŽƐƉƌŽĚƵƚŽƐƋƵĞƉŽƐƐĂŵĂƚĞŶĚĞƌĂƐŽĐŝĞĚĂĚĞĚĞĨŽƌŵĂŐĞƌĂů͘ Ɛ ƉĞƌƐƉĞĐƚŝǀĂƐ ƉĂƌĂ Ž ĐĞŶĄƌŝŽ ĨƵƚƵƌŽ ƐĆŽ ƋƵĞ ĂƐ ƉŽƚĞŶĐŝĂŝƐ ĂƉůŝĐĂĕƁĞƐ ĚĂ ƵůƚƌĂƐŽŶŝĐĂĕĆŽ ŶŽ ƉƌŽĐĞƐƐĂŵĞŶƚŽ Ğ ĞƐƚĂďŝůŝnjĂĕĆŽ ĚĞ ĐŽŵƉŽƐƚŽƐ ďŝŽĂƚŝǀŽƐ ĐŽŶƚŝŶƵĞŵ ĐƌĞƐĐĞŶĚŽŝŵƉƵůƐŝŽŶĂĚŽƉĞůĂďƵƐĐĂƉŽƌƉƌŽĚƵƚŽƐĚĞĂůƚĂƋƵĂůŝĚĂĚĞ͕ĨĂnjĞŶĚŽƋƵĞŽƉƌŽĐĞƐƐŽ ƚĞŶŚĂŵĂŝŽƌĂĐĞŝƚĂĕĆŽŝŶĚƵƐƚƌŝĂů͘ 3. OBJETIVOS 3.1 Objetivo geral ŐƌĞŐĂƌǀĂůŽƌĂŽƐƉƌŽĚƵƚŽƐĚĂĐĂĚĞŝĂĚĞƉƌŽĐĞƐƐĂŵĞŶƚŽĚŽƵƌƵĐƵŵƉŽƌŵĞŝŽĚĂ ĞƐƚĂďŝůŝnjĂĕĆŽĚŽƐĐŽŵƉŽƐƚŽƐďŝŽĂƚŝǀŽƐƉƌŽǀĞŶŝĞŶƚĞƐĚŽſůĞŽŽďƚŝĚŽƉŽƌĞdžƚƌĂĕĆŽƐƵƉĞƌĐƌşƚŝĐĂ ĚĂƐƐƵĂƐƐĞŵĞŶƚĞƐƵƚŝůŝnjĂŶĚŽĂƚĠĐŶŝĐĂĚĞƵůƚƌĂƐŽŶŝĐĂĕĆŽĐŽŵŽƉƌŽĐĞƐƐŽĚĞĞŵƵůƐŝĨŝĐĂĕĆŽĞ ĞŵƉƌĞŐĂƌ ďŝŽƉŽůşŵĞƌŽƐ ƉƌĞďŝſƚŝĐŽƐ ĐŽŵŽ ĞƐƚĂďŝůŝnjĂŶƚĞƐ ǀŝƐĂŶĚŽ Ă ŽďƚĞŶĕĆŽ ĚĞ ƉƌŽĚƵƚŽƐ ĨƵŶĐŝŽŶĂŝƐ͘ 3.2 Objetivos específicos x ZĞǀŝƐĂƌŽĞƐƚĂĚŽĚĂĂƌƚĞĞŶǀŽůǀĞŶĚŽĂĨŽƌŵĂĕĆŽĚĞĞŵƵůƐƁĞƐǀŝĂƵůƚƌĂƐŽŶŝĐĂĕĆŽĐŽŵ ďŝŽƉŽůşŵĞƌŽƐĐŽŵŽĞŵƵůƐŝĨŝĐĂŶƚĞƐͬĞƐƚĂďŝůŝnjĂŶƚĞƐ͖ x ƐƚƵĚĂƌŽƐŵĞĐĂŶŝƐŵŽƐĚĞĞƐƚĂďŝůŝnjĂĕĆŽĚĞĞŵƵůƐƁĞƐĚĞſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵ ĞŵƉƌĞŐĂŶĚŽ ŽƐ ďŝŽƉŽůşŵĞƌŽƐ ŐŽŵĂ ƌĄďŝĐĂ ;'Ϳ͕ ŝƐŽůĂĚŽ ƉƌŽƚĞŝĐŽ ĚĞ ƐŽƌŽ ĚĞ ůĞŝƚĞ ;tW/Ϳ͕ ĂŵŝĚŽ ŵŽĚŝĨŝĐĂĚŽ ;,ŝĂƉͿ͕ ĂŵŝĚŽ ŵŽĚŝĨŝĐĂĚŽ ;^&Ϳ͕ ƉŽůŝĞƚŝůĞŶŽŐůŝĐŽů ;W 'Ϳ Ğ ŝŶƵůŝŶĂĐŽŵŽĞŵƵůƐŝŽŶĂŶƚĞƐͬĞƐƚĂďŝůŝnjĂŶƚĞƐ͖ x ǀĂůŝĂƌŽĞĨĞŝƚŽĚŽƉƌŽĐĞƐƐŽĚĞĞŵƵůƐŝĨŝĐĂĕĆŽǀŝĂƵůƚƌĂƐƐŽŵĚĞĂůƚĂŝŶƚĞŶƐŝĚĂĚĞƉŽƌ ŵĞŝŽĚĂĐŽŵƉĂƌĂĕĆŽĐŽŵĂĞŵƵůƐŝĨŝĐĂĕĆŽƉŽƌĂŐŝƚĂĕĆŽŵĞĐąŶŝĐĂ͖ x ĞƚĞƌŵŝŶĂƌĂƐĐŽŶĚŝĕƁĞƐĚĞƉŽƚġŶĐŝĂ;tͿĞƚĞŵƉŽĚĞƉƌŽĐĞƐƐŽ;ŵŝŶͿŶŽƵůƚƌĂƐƐŽŵ ƉĂƌĂŽďƚĞŶĕĆŽĚĞĞŵƵůƐƁĞƐĚĞſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵĐŽŵŵĞŶŽƌƚĂŵĂŶŚŽĚĞ ŐŽƚĂĚĂĨĂƐĞĚŝƐƉĞƌƐĂĞ͕ƉŽƌƚĂŶƚŽ͕ŵĂŝƐĞƐƚĄǀĞŝƐăĐƌĞŵĞĂĕĆŽ͖ x KďƚĞƌƉĂƌƚşĐƵůĂƐĚĞſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵƉŽƌŵĞŝŽĚĂƐĞĐĂŐĞŵĚĂĨĂƐĞĐŽŶƚşŶƵĂ ĚĂƐĞŵƵůƐƁĞƐŵĂŝƐĨŝŶĂƐƉŽƌŵĞŝŽĚĂƐƚĠĐŶŝĐĂƐĨƌĞĞnjĞͲĚƌLJŝŶŐĞƐƉƌĂLJͲĚƌLJŝŶŐĞĂǀĂůŝĂƌ Ϯϴ
ĂƐƉƌŽƉƌŝĞĚĂĚĞƐĚĂƐƉĂƌƚşĐƵůĂƐŽďƚŝĚĂƐĞŵƌĞůĂĕĆŽĂŽƚĞŽƌĚĞƵŵŝĚĂĚĞ͕ĂƚŝǀŝĚĂĚĞĚĞ ĄŐƵĂ͕ ĚŝƐƚƌŝďƵŝĕĆŽ ĚĞ ƚĂŵĂŶŚŽ Ğ ĚŝąŵĞƚƌŽ ŵĠĚŝŽ͕ ŵŽƌĨŽůŽŐŝĂ͕ ſůĞŽ ƐƵƉĞƌĨŝĐŝĂů͕ ĞĨŝĐŝġŶĐŝĂĚĞĂƉƌŝƐŝŽŶĂŵĞŶƚŽĚĞſůĞŽ͕ĞĨŝĐŝġŶĐŝĂĚĞĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽĚĞſůĞŽ͕ĐŝŶĠƚŝĐĂĚĞ ůŝďĞƌĂĕĆŽ ĚĞ ŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽů͕ ƉĂĚƌƁĞƐ ĚĞ ĚŝĨƌĂĕĆŽ ĚĞ ƌĂŝŽƐͲy͕ ĞƐƚĂďŝůŝĚĂĚĞ ƚĠƌŵŝĐĂ Ğ ŽdžŝĚĂƚŝǀĂ͖ x ŽŶƚƌŝďƵŝƌ ƉĂƌĂ Ž ĂǀĂŶĕŽ ŶŽ ĐŽŶŚĞĐŝŵĞŶƚŽ ĚĂƐ ƉƌŽƉƌŝĞĚĂĚĞƐ ĚĂ ŝŶƵůŝŶĂ ĐŽŵŽ Ƶŵ ŵĂƚĞƌŝĂůĚĞƉĂƌĞĚĞ͕ŶĂƚĞŶƚĂƚŝǀĂĚĞĞƐĐůĂƌĞĐĞƌŽĞĨĞŝƚŽĚŽŐƌĂƵĚĞƉŽůŝŵĞƌŝnjĂĕĆŽƐŽďƌĞ ĂƐĐĂƌĂĐƚĞƌşƐƚŝĐĂƐĞŶĐĂƉƐƵůĂŶƚĞƐ͖ x KďƚĞƌƉĂƌƚşĐƵůĂƐĚĞſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵĞŶĐĂƉƐƵůĂĚĂƐĐŽŵŵĂƚĞƌŝĂůƉƌĞďŝſƚŝĐŽ Ğ͕ĂƐƐŝŵ͕ĚŝƐƉŽŶŝďŝůŝnjĂƌƵŵŶŽǀŽƉƌŽĚƵƚŽƚŽƚĂůŵĞŶƚĞĨƵŶĐŝŽŶĂů͖ 4. ESTRUTURA DA TESE EĞƐƚĂ ƚĞƐĞ ĂƐ ĞƚĂƉĂƐ ĚĞ ĚĞƐĞŶǀŽůǀŝŵĞŶƚŽ ĚŽ ƉƌŽũĞƚŽ ĚĞ ƉĞƐƋƵŝƐĂ ĞƐƚĆŽ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂĚĂƐĞŵϭϬĐĂƉşƚƵůŽƐ͘EĞƐƚĞCapítulo 1 - Introdução Geral, Justificativa, Objetivos e
Estrutura da TeseƐĆŽĂƉƌĞƐĞŶƚĂĚŽƐŽƚĞŵĂƉƌŝŶĐŝƉĂůĚĞƐƚĞĞƐƚƵĚŽ͕ŽƐŽďũĞƚŝǀŽƐƉƌĞƚĞŶĚŝĚŽƐ
ĞĂƐĞƚĂƉĂƐĞŶǀŽůǀŝĚĂƐƉĂƌĂĂƐƵĂƌĞĂůŝnjĂĕĆŽ͘ƐĂƚŝǀŝĚĂĚĞƐƌĞĂůŝnjĂĚĂƐŶĞƐƚĂƚĞƐĞĞƐƚĆŽĞdžŝďŝĚĂƐ ŶĂ&ŝŐƵƌĂϯ͘
EŽ Capítulo 2 - Ultrasound-assisted formation of emulsions stabilized by
biopolymers Ġ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂĚĂ ƵŵĂ ƌĞǀŝƐĆŽ ƐŽďƌĞ ĂƐ ĐŽŶĚŝĕƁĞƐ ŽƉĞƌĂĐŝŽŶĂŝƐ ĚĞ ĨŽƌŵĂĕĆŽ ĚĞ ĞŵƵůƐƁĞƐƉĞůĂƚĞĐŶŽůŽŐŝĂĞŵĞƌŐĞŶƚĞĚĞƵůƚƌĂƐŽŶŝĐĂĕĆŽ͘KĐĂƉşƚƵůŽĚŝƐĐƵƚĞŽƐŵĞĐĂŶŝƐŵŽƐĚĞ ĞƐƚĂďŝůŝnjĂĕĆŽ ĚĞ ĞŵƵůƐƁĞƐ Ğ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂ ƵŵĂ ĐŽŵƉŝůĂĕĆŽ ĚĞ ĂƌƚŝŐŽƐ ĐŝĞŶƚşĨŝĐŽƐ ŶŽƐ ƋƵĂŝƐ Ž ƵůƚƌĂƐƐŽŵĨŽŝƵƚŝůŝnjĂĚŽƉĂƌĂĨŽƌŵĂĕĆŽĚĞƐŝƐƚĞŵĂƐĐŽůŽŝĚĂŝƐĞƐƚĄǀĞŝƐŶŽƐƋƵĂŝƐƐĞƵƚŝůŝnjĂƌĂŵ ďŝŽƉŽůşŵĞƌŽƐĐŽŵŽĞƐƚĂďŝůŝnjĂŶƚĞƐͬĞŵƵůƐŝĨŝĐĂŶƚĞƐ͘ Ϯϵ
Figura 3. ƐƋƵĞŵĂŐĞƌĂůĚĂƐĂƚŝǀŝĚĂĚĞƐƌĞĂůŝnjĂĚĂƐŶĂƚĞƐĞ͘
EĞƐƚĞƐĞŶƚŝĚŽ͕ŽCapítulo 3 - Ultrasound-assisted formation of annatto seed oil
emulsions stabilized by biopolymers ĂƉƌĞƐĞŶƚĂ Ƶŵ ĞƐƚƵĚŽ ƐŽďƌĞ ŽƐ ŵĞĐĂŶŝƐŵŽƐ ĚĞ
ĞƐƚĂďŝůŝnjĂĕĆŽĚĞĞŵƵůƐƁĞƐĚĞſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵƌĞůĂĐŝŽŶĂĚŽƐĂŽƐďŝŽƉŽůşŵĞƌŽƐ'͕ tW/͕,ŝĂƉ͕^&͕W 'ĞŝŶƵůŝŶĂ͕ǀŝƐƚŽƋƵĞĂƚĠŽŵŽŵĞŶƚŽĚĂƌĞĂůŝnjĂĕĆŽĚŽƚƌĂďĂůŚŽŶĆŽĞdžŝƐƚŝĂŵ ĚĂĚŽƐ ŶĂ ůŝƚĞƌĂƚƵƌĂ ƐŽďƌĞ Ă ĨŽƌŵĂĕĆŽ ĚĞ ĞŵƵůƐƁĞƐ ĚĞ ſůĞŽ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ͘ EĞƐƚĞ ĐĂƉşƚƵůŽ Ž ƉƌŽĐĞƐƐŽ ĚĞ ŚŽŵŽŐĞŶĞŝnjĂĕĆŽ ƉŽƌ ƵůƚƌĂƐŽŶŝĐĂĕĆŽ Ġ ĐŽŵƉĂƌĂĚŽ ĂŽ ƉƌŽĐĞƐƐŽ ĐŽŶǀĞŶĐŝŽŶĂůƉŽƌĐŝƐĂůŚĂŵĞŶƚŽŵĞĐąŶŝĐŽƉŽƌŵĞŝŽĚĂĂƉůŝĐĂĕĆŽĚĞĚĞŶƐŝĚĂĚĞƐĞŶĞƌŐĠƚŝĐĂƐ ƐŝŵŝůĂƌĞƐŶĂŽďƚĞŶĕĆŽĚĂƐĞŵƵůƐƁĞƐ͘KƐƌĞƐƵůƚĂĚŽƐĐůĂƌĂŵĞŶƚĞŵŽƐƚƌĂƌĂŵĂƐƵƉĞƌŝŽƌŝĚĂĚĞĚĂ ĞŵƵůƐŝĨŝĐĂĕĆŽƉŽƌƵůƚƌĂƐƐŽŵ͘
K Capítulo 4 - Ultrasound-assisted encapsulation of annatto seed oil: Whey
protein isolate versus modified starch ĂƉƌĞƐĞŶƚĂ Ƶŵ ĞƐƚƵĚŽ ĚĞ ŽƚŝŵŝnjĂĕĆŽ ĚĂƐ ĞŵƵůƐƁĞƐ
ƉƌŽĚƵnjŝĚĂƐ ŶŽ ĂƉşƚƵůŽ ϯ ĂĐĞƌĐĂ ĚĂƐ ĐŽŶĚŝĕƁĞƐ ĚĞ ƉŽƚġŶĐŝĂ ;tͿ Ğ ƚĞŵƉŽ ;ŵŝŶͿ ĚĞ ƉƌŽĐĞƐƐĂŵĞŶƚŽŶŽƵůƚƌĂƐƐŽŵƉĂƌĂĂŽďƚĞŶĕĆŽĚĞĞŵƵůƐƁĞƐĐŽŵŵĞŶŽƌƚĂŵĂŶŚŽĚĞŐŽƚĂĞ͕ ƉŽƌƚĂŶƚŽ͕ ŵĂŝƐ ĞƐƚĄǀĞŝƐ͕ ǀŝƐĂŶĚŽ ŽƐ ŵĞůŚŽƌĞƐ ƌĞƐƵůƚĂĚŽƐ ƉŽƐƐşǀĞŝƐ ŶĂ ĞĨŝĐŝġŶĐŝĂ ĚĞ ĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽĚŽƐĐŽŵƉŽƐƚŽƐďŝŽĂƚŝǀŽƐƉƌĞƐĞŶƚĞƐŶŽſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵƉŽƌŵĞŝŽĚĞ Ƶŵ ĞdžƉĞƌŝŵĞŶƚŽ ĐŽŵƉĂƌĂƚŝǀŽ ĚŽ ĚĞƐĞŵƉĞŶŚŽ ĚŽƐ ďŝŽƉŽůşŵĞƌŽƐ tW/ Ğ ^& ĐŽŵŽ ĞŵƵůƐŝĨŝĐĂŶƚĞƐͬĞŶĐĂƉƐƵůĂŶƚĞƐ͘ Ɛ ĞŵƵůƐƁĞƐ ŵĂŝƐ ĨŝŶĂƐ Ğ ĞƐƚĄǀĞŝƐ ĨŽƌĂŵ ĐŽŶǀĞƌƚŝĚĂƐ Ğŵ ƉĂƌƚşĐƵůĂƐƉŽƌŵĞŝŽĚĂƐĞĐĂŐĞŵĚĂĨĂƐĞĐŽŶƚşŶƵĂƉĞůĂƐƚĠĐŶŝĐĂƐĨƌĞĞnjĞͲĚƌLJŝŶŐĞƐƉƌĂLJͲĚƌLJŝŶŐ͘ ƐƉĂƌƚşĐƵůĂƐŽďƚŝĚĂƐĨŽƌĂŵĐĂƌĂĐƚĞƌŝnjĂĚĂƐƋƵĂŶƚŽăƋƵĂůŝĚĂĚĞƚĞĐŶŽůſŐŝĐĂŶŽŝŶƚƵŝƚŽĚĞƐĞ ǀĞƌŝĨŝĐĂƌ Ă ĞĨĞƚŝǀŝĚĂĚĞ ĚŽ ƉƌŽĐĞƐƐŽ ĚĞ ĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽ ĚŽ ſůĞŽ Ğ ƉŽƚĞŶĐŝĂů ĚĞ ĂƉůŝĐĂĕĆŽ Ğŵ ĚŝǀĞƌƐŽƐƉƌŽĚƵƚŽƐ͘
EŽCapítulo 5 - Ultrasound-assisted encapsulation of annatto seed oil: Retention
and release of a bioactive compound with functional activities͕ ƐĞŵĞůŚĂŶƚĞŵĞŶƚĞ ĂŽ
ĂƉşƚƵůŽ ϰ͕ ĨŽŝ ĂǀĂůŝĂĚŽ Ă ƵƚŝůŝnjĂĕĆŽ ĚĞ ' ĐŽŵŽ ĞŵƵůƐŝĨŝĐĂŶƚĞͬŵĂƚĞƌŝĂů ĚĞ ƉĂƌĞĚĞ ŶĂ ĞƐƚĂďŝůŝnjĂĕĆŽĚŽſůĞŽĚĞƵƌƵĐƵŵƉŽƌŵĞŝŽĚĂƉƌŽĚƵĕĆŽĚĞĞŵƵůƐƁĞƐĨŝŶĂƐŶŽƵůƚƌĂƐƐŽŵ͘EŽ ĞŶƚĂŶƚŽ͕ ĞƐƚĞ ĐĂƉşƚƵůŽ ƚĞǀĞ ĐŽŵŽ ĨŽĐŽ ĂǀĂůŝĂƌ Ă ŝŶĨůƵġŶĐŝĂ ĚŽƐ ƉƌŽĐĞƐƐŽƐ ĚĞ ƐĞĐĂŐĞŵ ĚĂ ĞŵƵůƐĆŽ ĚĞ ſůĞŽ ĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞ ĚĞ ƵƌƵĐƵŵ͕ ĨƌĞĞnjĞͲĚƌLJŝŶŐ Ğ ƐƉƌĂLJͲĚƌLJŝŶŐ͕ ƐŽďƌĞ Ă ƌĞƚĞŶĕĆŽ Ğ ĐŝŶĠƚŝĐĂ ĚĞ ůŝďĞƌĂĕĆŽ ĚŽ ĐŽŵƉŽƐƚŽ ŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽů͕ ĂůĠŵ ĚĞ ĂǀĂůŝĂƌ ŽƐ ĞĨĞŝƚŽƐ ƐŽďƌĞ Ă ĞƐƚĂďŝůŝĚĂĚĞŽdžŝĚĂƚŝǀĂĚĂƐŵŝĐƌŽƉĂƌƚşĐƵůĂƐ͘ ƵƚŝůŝnjĂĕĆŽĚĞƵŵĐĂƌďŽŝĚƌĂƚŽƉƌĞďŝſƚŝĐŽĐŽŵŽŵĂƚĞƌŝĂůĞŶĐĂƉƐƵůĂŶƚĞĚŽſůĞŽĚĞ ƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵĞŽƐĞĨĞŝƚŽƐĚŽƵůƚƌĂƐƐŽŵŶĂŽďƚĞŶĕĆŽĚĂƐĞŵƵůƐƁĞƐĨŽƌĂŵĞƐƚƵĚĂĚŽƐŶŽ Capítulo 6 - Influence of the degree of inulin polymerization on the ultrasound-assisted
encapsulation of annatto seed oil͘EĞƐƚĞĐĂƉşƚƵůŽĨŽƌĂŵĂǀĂůŝĂĚĂƐŝŶƵůŝŶĂƐĚĞĚŝĨĞƌĞŶƚĞŐƌĂƵ ĚĞ ƉŽůŝŵĞƌŝnjĂĕĆŽ ĐŽŵŽ ĞƐƚĂďŝůŝnjĂŶƚĞƐ ƉĂƌĂ ĂƐ ĞŵƵůƐƁĞƐ Ğ ŵĂƚĞƌŝĂŝƐ ĚĞ ƉĂƌĞĚĞ ĚŽ ſůĞŽ͘ Ɛ ŵŝĐƌŽƉĂƌƚşĐƵůĂƐŽďƚŝĚĂƐĨŽƌĂŵĐĂƌĂĐƚĞƌŝnjĂĚĂƐƉŽƌĚŝĨĞƌĞŶƚĞƐƚĠĐŶŝĐĂƐĐŽŵŽĐŽŵŽŽďũĞƚŝǀŽĚĞ ƐĞĂǀĂůŝĂƌŽĞĨĞŝƚŽĚŽĐŽŵƉƌŝŵĞŶƚŽĚĂĐĂĚĞŝĂŵŽůĞĐƵůĂƌŶĂƐƉƌŽƉƌŝĞĚĂĚĞƐĚĂƐŵŝĐƌŽƉĂƌƚşĐƵůĂƐ ŽďƚŝĚĂƐ ƉĞůĂ ƚĠĐŶŝĐĂ ĨƌĞĞnjĞͲĚƌLJŝŶŐ͘ WĂƌƚŝŶĚŽ ĚĞƐƚĞ ŵĞƐŵŽ ŽďũĞƚŝǀŽ Ğ ĐŽŵ ĨŽĐŽ ŶĂ ĐĂƌĂĐƚĞƌŝnjĂĕĆŽĚĞƉƌŽƉƌŝĞĚĂĚĞƐĨşƐŝĐĂƐĚĂƐŵŝĐƌŽƉĂƌƚşĐƵůĂƐĐŽŵŽĂŵŽƌĨŽůŽŐŝĂĞĚŝƐƚƌŝďƵŝĕĆŽ ĚŽ ĐŽŵƉŽƐƚŽ ɷͲƚŽĐŽƚƌŝĞŶŽů ŶĂ ŵŝĐƌŽĞƐƚƌƵƚƵƌĂ ĚĂ ƉĂƌƚşĐƵůĂ͕ ƌĞƚĞŶĕĆŽ ĚŽ ĐŽŵƉŽƐƚŽ ŐĞƌĂŶŝůŐĞƌĂŶŝŽů ƉĞůĂƐ ŵĂƚƌŝnjĞƐ ĞŶĐĂƉƐƵůĂŶƚĞƐ͕ ƚƌĂŶƐŝĕĆŽ ĚĞ ĨĂƐĞƐ ĚĂƐ ŵŝĐƌŽƉĂƌƚşĐƵůĂƐ Ğ ĞƐƚĂďŝůŝĚĂĚĞĨşƐŝĐĂƉŽƌŵĞŝŽĚĂƐŝƐŽƚĞƌŵĂƐĚĞĂĚƐŽƌĕĆŽĚĞĄŐƵĂ͕ŽCapítulo 7 - Effect of the
degree of inulin polymerization on the physical properties of annatto seed oil microparticles obtained by freeze-drying ĨŽŝĚĞƐĞŶǀŽůǀŝĚŽŶŽƐĞŶƚŝĚŽĚĞƐĞĐŽŵƉůĞŵĞŶƚĂƌĂƐŝŶĨŽƌŵĂĕƁĞƐ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂĚĂƐŶŽĐĂƉşƚƵůŽĂŶƚĞƌŝŽƌ͘ KƐ ĂƉşƚƵůŽƐ ϲ Ğ ϳ ĞǀŝĚĞŶĐŝĂƌĂŵ ƋƵĞ Ă ŝŶƵůŝŶĂ͕ ŝŶĚĞƉĞŶĚĞŶƚĞ ĚŽ ŐƌĂƵ ĚĞ ƉŽůŝŵĞƌŝnjĂĕĆŽĂǀĂůŝĂĚŽ͕ŶĆŽĨŽŝĞĨĞƚŝǀĂŶĂĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽĚŽſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵĚĞǀŝĚŽ ăďĂŝdžĂĞĨŝĐŝġŶĐŝĂĚĞĞŶĐĂƉƐƵůĂĕĆŽŽďƐĞƌǀĂĚĂƉĂƌĂĂƐŵŝĐƌŽƉĂƌƚşĐƵůĂƐ͕ƉŽŝƐĂƐŝŶƵůŝŶĂƐƉƵƌĂƐ ĂƚƵĂƌĂŵ ƉƌŝŶĐŝƉĂůŵĞŶƚĞ ĐŽŵŽ ĂŐĞŶƚĞƐ ĐĂƌƌĞĂĚŽƌĞƐ ĚŽ ſůĞŽ͘ EĞƐƚĞ ƐĞŶƚŝĚŽ͕ ǀŝƐĂŶĚŽ Ă ƉƌŽĚƵĕĆŽĚĞŵŝĐƌŽƉĂƌƚşĐƵůĂƐĨƵŶĐŝŽŶĂŝƐĞŵĂŝƐĞĨŝĐĂnjĞƐŶĂƉƌŽƚĞĕĆŽĚŽƐĐŽŵƉŽƐƚŽƐďŝŽĂƚŝǀŽƐ ĚŽſůĞŽĚĞƐĞŵĞŶƚĞĚĞƵƌƵĐƵŵ͕ŽCapítulo 8 - Biopolymer-prebiotic carbohydrate blends and
their effects on the retention of bioactive compounds and maintenance of antioxidant activityĨŽŝĚĞƐĞŶǀŽůǀŝĚŽ͘
KCapítulo 9 – Discussão GeralĂƉƌĞƐĞŶƚĂƵŵĂĚŝƐĐƵƐƐĆŽĚŽƐƉƌŝŶĐŝƉĂŝƐƌĞƐƵůƚĂĚŽƐ ŽďƐĞƌǀĂĚŽƐĞƉŽŶƚŽƐĐŚĂǀĞĂŽƐƋƵĂŝƐĞƐƚĂƚĞƐĞĐŽŶƚƌŝďƵŝƵƉĂƌĂŽĚĞƐĞŶǀŽůǀŝŵĞŶƚŽĐŝĞŶƚşĨŝĐŽ͘ ͕ĨŝŶĂůŵĞŶƚĞ͕ŽCapítulo 10 – Conclusões GeraisĂƉƌĞƐĞŶƚĂŽƐƉƌŝŶĐŝƉĂŝƐƌĞƐƵůƚĂĚŽƐŽďƚŝĚŽƐ Ğŵ ĐĂĚĂ Ƶŵ ĚŽƐ ĐĂƉşƚƵůŽƐ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂĚŽƐ ŶĞƐƚĞ ƚƌĂďĂůŚŽ͕ ĨĂnjĞŶĚŽ ƵŵĂ ůŝŐĂĕĆŽ ĚĞ ƚŽĚŽ Ž ĐŽŶŚĞĐŝŵĞŶƚŽŐĞƌĂĚŽĞŵƌĞƐƉŽƐƚĂĂŽŽďũĞƚŝǀŽŐĞƌĂůƉƌŽƉŽƐƚŽŶĂƚĞƐĞ͘ůĠŵĚŝƐƐŽ͕ĂŽĨŝŶĂů ĚĞƐƚĞ ĐĂƉşƚƵůŽ Ġ ĂƉƌĞƐĞŶƚĂĚĂ Ă ƐĞĕĆŽ Memória do período do doutorado ƉĂƌĂ ƌĞŐŝƐƚƌŽ ĚĞ ƚŽĚĂƐĂƚŝǀŝĚĂĚĞƐĚĞƐĞŶǀŽůǀŝĚĂƐĞŽƐƚƌĂďĂůŚŽƐĂĐĂĚġŵŝĐŽƐƌĞĂůŝnjĂĚŽƐŶŽƉĞƌşŽĚŽ͘
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ^͕^͖͘^,Z/͕D͖͘<,dZ͕t͖͘>/͕t͘t͖͘,E'͕y͘WƌŽĐĞƐƐŽƉƚŝŵŝnjĂƚŝŽŶŽĨƵůƚƌĂƐŽƵŶĚͲ ĂƐƐŝƐƚĞĚ ĐƵƌĐƵŵŝŶ ŶĂŶŽĞŵƵůƐŝŽŶƐ ƐƚĂďŝůŝnjĞĚ ďLJ K^ͲŵŽĚŝĨŝĞĚ ƐƚĂƌĐŚ͘ Ultrasonics Sonochemistry, ǀ͘Ϯϭ͕Ŷ͘ϰ͕Ɖ͘ϭϮϲϱͲϭϮϳϰ͕ϮϬϭϰ͘ >hYh ZYh ͕͘>͖͘͘D /Z > ^͕D͘͘͘dƌĞŶĚƐŝŶĂŶŶĂƚƚŽĂŐƌŽŝŶĚƵƐƚƌLJ͗ŝdžŝŶƉƌŽĐĞƐƐŝŶŐ ƚĞĐŚŶŽůŽŐŝĞƐĂŶĚŵĂƌŬĞƚ͘Recent Patents on Engineering, ǀ͘ϱ͕Ŷ͘Ϯ͕Ɖ͘ϵϰͲϭϬϮ͕ϮϬϭϭ͘
ͺͺͺͺͺͺ͘ĞĨĂƚƚŝŶŐŽĨĂŶŶĂƚƚŽƐĞĞĚƐƵƐŝŶŐƐƵƉĞƌĐƌŝƚŝĐĂůĐĂƌďŽŶĚŝŽdžŝĚĞĂƐĂƉƌĞƚƌĞĂƚŵĞŶƚĨŽƌ ƚŚĞ ƉƌŽĚƵĐƚŝŽŶ ŽĨ ďŝdžŝŶ͗ džƉĞƌŝŵĞŶƚĂů͕ ŵŽĚĞůŝŶŐ ĂŶĚ ĞĐŽŶŽŵŝĐ ĞǀĂůƵĂƚŝŽŶ ŽĨ ƚŚĞ ƉƌŽĐĞƐƐ͘ Journal of Supercritical Fluids, ǀ͘ϲϲ͕Ɖ͘ϴϲͲϵϰ͕ϮϬϭϮ͘
>s ^͕Z͘t͖͘h>^KE ^Kh͕͖͘͘h>^KE ^Kh͕^͘D͘͘͘'͖͘:hZ '/͕W͘ZĞĐŽǀĞƌLJ ŽĨŶŽƌďŝdžŝŶĨƌŽŵĂƌĂǁĞdžƚƌĂĐƚŝŽŶƐŽůƵƚŝŽŶŽĨĂŶŶĂƚƚŽƉŝŐŵĞŶƚƐƵƐŝŶŐĐŽůůŽŝĚĂůŐĂƐĂƉŚƌŽŶƐ ;'ƐͿ͘Separation and Purification Technology, ǀ͘ϰϴ͕Ŷ͘Ϯ͕Ɖ͘ϮϬϴͲϮϭϯ͕ϮϬϬϲ͘
E^ >DK͕'͘͘^͖͘Dd͕D͘ ͘Z͘D͖͘͘ZKZ/'h ^͕ ͘,LJŐƌŽƐĐŽƉŝĐďĞŚĂǀŝŽƌŽĨĂŶŶĂƚƚŽ;ŝdžĂ KƌĞůůĂŶĂ >Ϳ ĚƌŝĞĚ ĞdžƚƌĂĐƚ͘ Comportamento higroscópico do extrato seco de urucum (Bixa Orellana L), ǀ͘ϯϮ͕Ŷ͘ϲ͕Ɖ͘ϭϴϴϴͲϭϴϵϮ͕ϮϬϬϴ͘
>^tDz͕<͖͘WZ,<ZZK͕W͘'͖͘^dzEZzE͕͖͘ZK͕͘'͘^ƚĂďŝůŝƚLJŽĨďŝdžŝŶ ŝŶĂŶŶĂƚƚŽŽůĞŽƌĞƐŝŶĂŶĚĚLJĞƉŽǁĚĞƌĚƵƌŝŶŐƐƚŽƌĂŐĞ͘LWT - Food Science and Technology, ǀ͘ ϯϵ͕Ŷ͘ϴ͕Ɖ͘ϵϱϮͲϵϱϲ͕ϮϬϬϲ͘ ,/Kh͕͖͘<>K' ZKWKh>K^͕E͖͘K^<Kh͕'͖͘^>d͕&͘E͘DŝŐƌĂƚŝŽŶŽĨŚĞĂůƚŚƉƌŽŵŽƚŝŶŐ ŵŝĐƌŽĐŽŶƐƚŝƚƵĞŶƚƐĨƌŽŵĨƌLJŝŶŐǀĞŐĞƚĂďůĞŽŝůƐƚŽ&ƌĞŶĐŚĨƌŝĞƐ͘Food Chemistry, ǀ͘ϭϯϯ͕Ŷ͘ϰ͕Ɖ͘ ϭϮϱϱͲϭϮϲϯ͕ϮϬϭϮ͘
&Z '͕ E͖͘ DKKE͕ D͖͘ K/͕ &͘ /ĚĞŶƚŝĨŝĐĂƚŝŽŶ ĂŶĚ ĞƐƚŝŵĂƚŝŽŶ ŽĨ ƚŽĐŽƚƌŝĞŶŽůƐ ŝŶ ƚŚĞ ĂŶŶĂƚƚŽ ůŝƉŝĚ ĨƌĂĐƚŝŽŶ ďLJ ŐĂƐ ĐŚƌŽŵĂƚŽŐƌĂƉŚLJͲŵĂƐƐ ƐƉĞĐƚƌŽŵĞƚƌLJ͘ JAOCS, Journal of the American Oil Chemists' Society, ǀ͘ϳϱ͕Ŷ͘ϭϮ͕Ɖ͘ϭϳϮϯͲϭϳϮϳ͕ϭϵϵϴ͘
'/Z/tKEK͕ W͘ ͘ Ğƚ Ăů͘ ŝĞƚĂƌLJ ƐƵƉƉůĞŵĞŶƚĂƚŝŽŶ ǁŝƚŚ ŐĞƌĂŶLJůŐĞƌĂŶŝŽů ƐƵƉƉƌĞƐƐĞƐ ůŝƉŽƉŽůLJƐĂĐĐŚĂƌŝĚĞͲŝŶĚƵĐĞĚŝŶĨůĂŵŵĂƚŝŽŶǀŝĂŝŶŚŝďŝƚŝŽŶŽĨŶƵĐůĞĂƌĨĂĐƚŽƌͲŬĂƉƉĂĂĐƚŝǀĂƚŝŽŶŝŶ ƌĂƚƐ͘European Journal of Nutrition, ǀ͘ϱϮ͕Ŷ͘ϯ͕Ɖ͘ϭϭϵϭͲϭϭϵϵ͕ϮϬϭϯ͘
'KD ^͕ ͖͘ K^d͕ ͘ >͘ Z͖͘ ^^/^ W ZZ ,/>͕ &͖͘ hE,͕ Z͘ >͘ ZŽůĞ ŽĨ ƚŚĞ ƉŚĂƐĞƐ ĐŽŵƉŽƐŝƚŝŽŶŽŶƚŚĞŝŶĐŽƌƉŽƌĂƚŝŽŶŽĨŐĂůůŝĐĂĐŝĚŝŶKͬtĂŶĚtͬKĞŵƵůƐŝŽŶƐ͘Journal of Food Engineering, ǀ͘ϭϲϴ͕Ɖ͘ϮϬϱͲϮϭϰ͕ϮϬϭϲ͘ ,^,d:/E͕͘D͖͘^/͕^͘EĂŶŽͲĞŵƵůƐŝĨŝĐĂƚŝŽŶŽĨŽƌĂŶŐĞƉĞĞůĞƐƐĞŶƚŝĂůŽŝůƵƐŝŶŐƐŽŶŝĐĂƚŝŽŶ ĂŶĚŶĂƚŝǀĞŐƵŵƐ͘Food Hydrocolloids, ǀ͘ϰϰ͕Ŷ͘Ϭ͕Ɖ͘ϰϬͲϰϴ͕ϮϬϭϱ͘ ,zdd͕ :͘ ͖͘ <Kdd^͕ '͘ ^͖͘ &&> Z͕ :͘ ĞǀĞůŽƉŵĞŶƚ ŽĨ ƐLJŶƚŚĞƚŝĐ ƌŽƵƚĞƐ ƚŽ ͕>ͲĂůƉŚĂͲ ƚŽĐŽƉŚĞƌŽů;ǀŝƚĂŵŝŶ ͿĨƌŽŵďŝŽůŽŐŝĐĂůůLJƉƌŽĚƵĐĞĚŐĞƌĂŶLJůŐĞƌĂŶŝŽů͘Organic Process Research & Development, ǀ͘ϲ͕Ŷ͘ϲ͕Ɖ͘ϳϴϮͲϳϴϳ͕ϮϬϬϮ͘
