MORTE SÚBITA DOS CITROS
MARCOS ANTONIO MACHADO1, MARIA LUÍSA PENTEADO NATIVIDADE TARGON1, HELVÉCIO DELLA COLETTA-FILHO1 e GERD WALTER MÜLLER2
RESUMO
A morte súbita dos citros (MSC) surgiu como um gran-de gran-desafio à citricultura por afetar combinações enxertadas sobre limão ‘Cravo’, principal porta-enxerto no Estado de São Pau-lo, e apresentar provável etiologia viral com vetores eficientes. Embora inicialmente restrita à região norte paulista e ao Triân-gulo Mineiro, ela tem sido detectada em outros municípios do Estado. Uma vez que está associada ao porta-enxerto, todas as variedades-copa apresentam-se igualmente suscetíveis. Como controle, tem sido recomendada a subenxertia com porta--enxertos tolerantes. O Centro APTA Citros Sylvio Moreira tem desenvolvido trabalhos objetivando a identificação do agente causal e a disponibilização de novos porta-enxertos para avali-ação.
Termos de indexação: Citrus spp, doença, tristeza, MSC, etiologia, controle.
SUMMARY
CITRUS SUDDEN DEATH
Citrus sudden death (CSD) became a great challenge to the citrus industry because affects all varieties grafted on Rangpur lime, the main rootstock used in the State of São Paulo, Brazil, and because it seems to have a viral ethiology with
1Centro APTA Citros Sylvio Moreira – IAC, Rod. Anhangüera, km 158, Caixa Postal 04,13490-970 Cordeirópolis (SP).
2Professor Visitante, bolsista do CNPq - Núcleo de Pesquisa em Biotecnologia Aplicada - Universida-de Estadual Universida-de Maringá.
efficient vectors. Althought initially limited to north area of São Paulo and Triângulo Mineiro, it has been detected in oth-ers counties. Since the disease is associated to the rootstock species, all scions varieties seems to be equally susceptible. Innarching with tolerant rootstocks has been recommend as control. The Centro APTA Citros Sylvio Moreira has devel-oped activities on ethiology e control with new rootstocks. Index terms: CSD, ethiology, citrus tristeza, control.
1. INTRODUÇÃO
A morte súbita dos citros (MSC), assim denominada em vista da rapi-dez com que as plantas morrem na fase final da doença (INFORMATIVO CENTRO DE CITRICULTURA, 2001) pode ser considerada uma das mais importantes doenças a desafiar a citricultura brasileira nesse começo do século. Descrita pela primeira vez no início de 2001 (GIMENES FERNANDES & BASSANEZI, 2001; MÜLLER et al., 2002a,b), e inicial-mente restrita à região norte paulista e ao Triângulo Mineiro, já tem sido detectada em outros municípios mais ao sul do Estado de São Paulo, no eixo da Rodovia Washington Luís. Até o início de 2003, já tinham sido contabilizadas cerca de 1.200.000 plantas com sintomas da moléstia, numa área com extensão de 156 km2, no sentido norte-sul (BASSANEZI et al., 2003).
As árvores afetadas apresentam, inicialmente, paralisação de cresci-mento, folhas de coloração verde pálido com tendência a amarelecicresci-mento, progressiva morte apical de ramos, sintomas de murcha generalizada, se-guido de pronunciada queda de folhas e de frutos. No estádio final, pratica-mente todas as folhas caem e a árvore sofre colapso rápido com morte da planta, permanecendo, não raro, ainda com frutos. Em plantas com grande carga de frutos próximos à maturação, pode ocorrer murcha e morte rápida (súbita), permanecendo os frutos aderidos à árvore seca. Os sintomas, que já foram encontrados até em plantas com 22 meses de idade, são mais freqüentes em árvores com mais de seis anos, e mais pronunciados na primavera. As árvores geralmente morrem cerca de seis meses após o apare-cimento dos primeiros sintomas. Exames dos tecidos do câmbio do
porta--enxerto mostram uma coloração amarela intensa, com limite nítido que a separa da cor branca a creme dos tecidos internos da casca da copa. Essa coloração amarela é, ainda, o mais característico sintoma para diagnosticar a doença, e precede os sintomas na copa (ROMÁN, 2004). Não se observa incompatibilidade típica (formação de goma marrom) na região de enxertia, comum em várias doenças associadas à enxertia. O sistema radicular de árvores afetadas tem poucas ou nenhuma radicelas e há diferentes níveis de podridão das raízes da ponta para a base, podendo-se observar a ocorrência de fungos oportunistas, Fusarium spp, principalmente, invadindo o lenho do porta-enxerto e da copa.
Todas as variedades-copa das laranjas e tangerinas parecem ser igual-mente suscetíveis quando enxertadas em limão ‘Cravo’. Plantas sobre tan-gerina ‘Cleópatra’ e ‘Sunki’ e citrumelo ‘Swingle’ mostram-se tolerantes. Quanto ao limão ‘Volkameriano’ ainda há dúvidas sobre a sua tolerância (INFORMATIVO CENTRO DE CITRICULTURA, 2003). Provavelmente, as diferenças observadas até o momento reflitam diferenças genéticas no limão ‘Volkameriano’, o que precisa ser ainda comprovado.
2. TRANSMISSÃO E EPIDEMIOLOGIA
Após a constatação das primeiras plantas doentes, a moléstia pode atin-gir de 30 a 100% das árvores do talhão em menos de dois anos. Normal-mente, a velocidade do aparecimento de novas plantas com sintomas é maior a partir do início da estação chuvosa na primavera (de setembro a novembro) e mais reduzida no outono-inverno (de março a agosto). O padrão espacial da MSC é compatível com aquele de uma doença infecciosa, transmitida por vetor (BASSANEZI et al., 2002, 2003).
3. ETIOLOGIA
A partir do descobrimento da MSC, levantaram-se várias hipóteses visando determinar seu agente causal. Algumas delas levavam em conta que fatores abióticos, como estresse ambiental e/ou nutricional, e manejo inade-quado do pomar pudessem ser responsáveis pela doença. No entanto, essas hipóteses foram colocadas em segundo plano quando os dados
epidemiológicos foram analisados e, também, quando pomares muito bem conduzidos começaram a apresentar plantas com sintomas da doença.
O fato de esta ter sido transmitida por união de tecidos reforça a hipó-tese de que um agente biótico seja o responsável (INFORMATIVO CEN-TRO DE CITRICULTURA, 2003; YAMAMOTO et al., 2003). Patógenos de solo, suspeitos de estarem envolvidos com a MSC, foram descartados em vista da constatação de que as populações de Phytophthora, Fusarium e nematóides eram baixas em talhões com alta incidência de plantas afetadas. Também se eliminaram as hipóteses de que bactérias e fitoplasmas pudes-sem ser os agentes causais, em razão dos sintomas e da ausência do patógeno nas plantas afetadas (MÜLLER et al., 2002a,b). A hipótese de serem viróides também foi descartada, pois os mesmos não têm vetores e são transmitidos por borbulhas e ferramentas infectadas (MÜLLER & COSTA, 1980).
Como a distribuição espacial da doença aponta para a existência de um vetor (BASSANEZI et al., 2003), a hipótese de um vírus, especialmente um ou mais variantes do Citrus tristeza virus (CTV), ser o causador da MSC vem sendo uma das mais aceitas. O CTV é endêmico no Brasil e pode ser encontrado em todas as espécies e variedades de citros. Considerado um dos mais complexos vírus de plantas, foi incluído no grupo dos Closterovirus. Seu genoma é composto de uma molécula de RNA simples fita, de 19259 a 19296 bases (PAPPU et al., 1994; KARASEV et al., 1995; MAWASSI et al., 1996; VIVES et al., 1999; TARGON et al., 2000; RUBIO et al., 2001), dependendo do isolado, polaridade positiva, encapsidado por duas proteínas do capsídeo (p25 e p27) em partículas flexíveis, longas e filamentosas, de aproximadamente 10-12 nm de diâmetro por 2.000 nm de comprimento.
O CTV é o agente causal da tristeza dos citros, uma das mais impor-tantes doenças que atingiram a cultura. A tristeza foi detectada pela primeira vez na África do Sul, em 1928, quando foi observada uma incompatibilidade de laranja doce enxertada em laranja ‘Azeda’. No Brasil, foi observada em 1937, quando praticamente dizimou todas as plantas com a combinação laranja doce/‘Azeda’ em pomares do Vale do Paraíba (SP). Os sintomas da MSC assemelham-se ao declínio rápido de laranja doce enxertada sobre laranja ‘Azeda’ e causada pelo CTV.
No entanto, ainda restam dúvidas de que esse vírus possa ser o respon-sável pela MSC, pois: 1) testes de iodo não indicaram o acúmulo de amido acima da linha de enxertia das plantas afetadas, como é encontrado algumas vezes na síndrome clássica causada pelo CTV; 2) análises moleculares não indicaram a presença de estirpes com características diferentes dos isolados presentemente conhecidos; 3) o CTV tem infectado, mas não afetado, árvo-res sobre limoeiro ‘Cravo’ no Brasil, há décadas, e, mesmo o complexo extremamente forte denominado “Capão Bonito” não mata as plantas; 4) CTV é considerado mais severo em condições mais frias (ROISTACHER et al., 1974), enquanto os pomares afetados pela MSC estão em áreas mais quentes.
A favor da hipótese de o CTV ser o agente causal da MSC, tem-se a considerar o seguinte: 1) raças de CTV causando declínio rápido são conhe-cidas há muito tempo afetando combinações de laranjas, tangerinas e pomelos enxertados sobre laranja ‘Azeda’ e lima ‘da Pérsia’ (COSTA et el., 1949); 2) embora com modificações, os sintomas de MSC lembram aqueles de declínio rápido provocados pelo CTV nas combinações de laranja doce enxertada sobre laranja ‘Azeda’; 3) a tristeza dos citros é endêmica no Brasil, sendo suas formas mais conhecidas e caracterizadas aquelas que induzem caneluras, principalmente em laranjeiras enxertadas em porta-enxertos tolerantes ao vírus; entretanto, todas essas formas são capazes de induzir declínio rápido se as copas estiverem sobre laranja ‘Azeda’; 4) o fato de não haver registro de isolados de CTV causadores de declínio rápido afetando limão ‘Cravo’ não significa que eles não ocorram, visto que o Brasil é o único país no mundo a plantar extensivamente esse porta-enxerto; 5) não existe relato de proteção cruzada quando o CTV desenvolve a tristeza na forma de declínio rápido (VEGA et al., 1995).
Em face dessas considerações, não pode ser descartada a hipótese de se tratar de um mutante de formas de CTV preexistentes no Brasil, de uma nova combinação de raças do CTV que se tenham originado favorecidas por fatores edafoclimáticos locais, ou de uma nova raça inadvertidamente introduzida no País.
As fases iniciais da MSC são semelhantes ao declínio dos citros, doença na qual também as copas em porta-enxertos de limão ´Cravo´ são afetadas, o que, geralmente, não ocorre quando enxertadas em tangerinas
(RODRIGUEZ et al., 1979; PRATES et al. 1982). Todavia, as plantas afetadas por declínio, por via de regra, não morrem. A doença também tem algumas similaridades com o declínio súbito de laranja ‘Valência’ sobre limão ‘Volkameriano’ na Venezuela, onde as plantas morriam oito a dez meses após o início dos sintomas (OCHOA et al., 1993). Final-mente, a doença também lembra o problema de declinamiento ou fruta bolita, em Misiones, Argentina, onde todas as árvores sobre trifoliata declinaram e morreram (PUJOL, 1969). No entanto, as causas desses úl-timos problemas permanecem desconhecidas.
4. CONTROLE
Como a MSC vem ocorrendo somente em copas enxertadas em limoeiro ‘Cravo’, deve-se evitar esse porta-enxerto em novos plantios, sendo recomendado o uso das tangerinas ‘Cleópatra’ e ‘Sunki’, citrumelo ‘Swingle’ e P. trifoliata, que se têm mostrado tolerantes à doença. No entanto, esses porta-enxertos não apresentam a mesma tolerância ao déficit híbrido do limão ‘Cravo’, além de apresentarem problemas associados à precocidade e à intolerância a outras moléstias.
Medidas de controle de curto prazo em pomares com MSC inclui, principalmente, a subenxertia com porta-enxertos tolerantes. Subenxertias realizadas em larga escala com porta-enxertos alternativos, em propriedades existentes na região onde ocorre a MSC, têm mostrado que, embora essa técnica proporcione uma aparente remissão dos sintomas, por si só não per-mite a recuperação econômica da planta. As primeiras indicações apontam que a subenxertia poderia ter algum sucesso em plantas com até quatro– cinco anos de idade. O produtor deverá proceder a uma avaliação detalhada do custo-benefício dessa técnica, em face dos prejuízos por quebra de produção que fatalmente ocorrerão (INFORMATIVO CENTRO DE CITRICULTURA, 2003).
Outra possibilidade de controle da MSC é o interplantio com árvores em porta-enxertos tolerantes. Antes disso, o citricultor tem que examinar a sua situação particular, considerando a idade do pomar e o espaçamento. Iniciar um pomar novo em porta-enxertos tolerantes é, sem dúvida, a melhor
opção. No entanto, em muitos casos, o pequeno citricultor não tem área para expandir, o que torna o interplantio obrigatório.
Visto que a MSC é extremamente grave e que representa séria ameaça ao parque citrícola brasileiro, medidas de contenção foram tomadas no Esta-do de São Paulo, no sentiEsta-do de proibir a comercialização e o trânsito de material vegetativo (mudas, borbulhas, porta-enxertos e sementes) produ-zido a céu aberto, procedente das áreas de ocorrência da doença (PORTA-RIA CDA-9, 2002).
5. PESQUISA SOBRE MSC NO CENTRO APTA CITROS SYLVIO MOREIRA
A possibilidade de ocorrência de novos variantes do CTV que pudes-sem afetar os citros considerados tolerantes pudes-sempre foi preocupante. Desse modo, como foi levantada a hipótese de que a MSC seria causada por um novo variante do CTV, e tendo em mente os danos causados pelo “Capão Bonito” desse vírus, vários trabalhos de avaliação e comparação de isolados associados a plantas afetadas pela doença vêm sendo realizados. A utilização de Bi Directional Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (BD-RT-PCR) com primers do gene da capa protéica do CTV, específicos de iso-lados severos de “Capão Bonito” e também de isoiso-lados comuns, mostrou a ocorrência de misturas de haplótipos do CTV em plantas coletadas na região afetada pela MSC, alguns semelhantes aos do complexo severo “Capão Bonito” (TARGON et al., 2002).
A reação de plantas afetadas pela MSC e de plantas com complexos comuns do CTV a sete diferentes anticorpos monoclonais produzidos contra a proteína do capsídeo do CTV foi feita. Os resultados não mostraram uma variação significativa nas populações do CTV em plantas afetadas e não afe-tadas pela MSC (FREITAS-ASTÚA et al., 2003).
A comparação de haplótipos do CTV presentes em plantas afetadas pela MSC com haplótipos comuns do vírus, através de single strand conformational polimorphism (SSCP) dos genes da p20, p23, p25, p27 e início da ORF 1, mostrou a ocorrência de variantes heterogêneos, tanto em plantas afetadas pela MSC como nas outras, infectadas com complexos
comuns do CTV (SOUZA et al., 2002; TARGON et al., 2003). Esses mes-mos genes foram clonados e seqüenciados, e a comparação das seqüências confirmou a existência de uma mistura de variantes do CTV, ocorrendo em níveis variados nas plantas. O agrupamento das seqüências de cada um dos genes analisados não mostrou a predominância de determinado haplótipo do CTV nas plantas afetadas pela MSC (TARGON et al., 2003). Em algumas seqüências de variantes do vírus em plantas da região afetada pela MSC, detectaram-se somente mutações pontuais, que permitiram o desenho de um par de primers para serem utilizados no diagnóstico precoce da doença. O seqüenciamento do genoma total de isolado do CTV associado à planta de laranja doce var. ‘Valência’/ ‘Cravo’, coletada na região afetada pela MSC, mostrou a ocorrência de variantes do CTV. Esses variantes formaram dois grupos principais, estando suas seqüências sendo comparadas com as do genoma de isolados comuns do CTV. Esse trabalho visa à obtenção de primers específicos de isolados do CTV associados a plantas com MSC para serem usados no diagnóstico da doença. A altíssima variação observada nas populações de CTV em plantas com MSC, comum em quase todas as plantas afetadas por esse vírus, não permitiu obter evidências concretas de que o agente causal da MSC seja um novo variante do CTV.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BASSANEZI, R. B.; BERGAMIN FILHO, A.; AMORIN, L.; GIMENES-FERNANDES, N.; GOTTWALD, T. R. & BOVÉ, J. M. Spatial and temporal analyses of Citrus Sudden Death as a tool to generate hypotheses concerning its etiology. Phytopathology, v. 93, p.502-512, 2003.
BASSANEZI, R. B.; YAMAMOTO, P. T. & GIMENES-FERNANDES, N. Progres-so dos sintomas de “morte súbita” em pomares de laranjeiras ‘Valência’ e ‘Pêra’. In: CONGRESSO PAULISTA DE FITOPATOLOGIA, 25, 2002, Espírito Santo do Pinhal. Programa e resumos... Espírito Santo do Pinhal, Sociedade Paulista de Fitopatologia, 2002. p.80.
COSTA, A. S.; GRANT, T. J. & MOREIRA, S. Investigações sobre a tristeza dos citrus II: conceitos e dados sobre a reação das plantas cítricas à tristeza. Bragantia, v.9, p.59-80, 1949.
FREITAS-ASTÚA, J.; TARGON, M. L.. P. N.; ASTÚA-MONGE, G.; SANTOS, F. A.; PERONI, L. A.; STACH-MACHADO, D. R. & MACHADO, M. A. Reação do complexo de CTV de plantas exibindo sintomas de morte súbita dos citros (MSC) a anticorpos monoclonais produzidos contra CTV. Summa Phytopathologica, v.29, n.1, p.76, 2003.
GIMENES FERNANDES, N. & BASSANEZI, R.B. Doença de causa desconhecida afeta pomares cítricos no norte de São Paulo e sul do Triângulo Mineiro. Summa Phytopathogica, v.27, p.93, 2001.
INFORMATIVO CENTRO DE CITRICULTURA. Morte súbita dos citros: o que se sabe sobre a doença até agora. n.100, p.1-3, 2003.
INFORMATIVO CENTRO DE CITRICULTURA. Nova doença já causa prejuí-zos a pomares de São Paulo e Minas Gerais. n.76, p.1-4, 2001.
KARASEV, A.V.; BOYKO, V.P.; GOWDA, S.; NIKOLAEVA, O.V.; HILF, M.E.; KOONIN, E.V.; NIBLETT, C.L.; CLINE, K.; GUMPF, D.J.; LEE, R.F.; GARNSEY, S.M.; LEWANDOWSKI, D.J. & DAWSON, W.O. Complete sequence of the citrus tristeza virus RNA genome. Virology, 208, p.511-520, 1995.
MAWASSI, M.; MIETKIEWSKA, E.; GOFMAN, R.; YANG, G. & BAR-JOSEPH, M. Unusual sequence relationships between two isolates of Citrus tristeza virus. J. Gen. Virol., n.77, p.2359-2364, 1996.
MÜLLER, G. W. & COSTA, A. S. Moléstias de virus e micoplasmas de citros. In: RODRIGUEZ, O.; VIÉGAS, F.C.P.; POMPEU JÚNIOR, J. & AMARO, A.A. (Eds.) Citricultura Brasileira. Campinas: Fundação Cargill. v.2, p.565-607, 1980.
MÜLLER, G.W.; DE NEGRI, J.D.; AGUILAR-VILDOSO, C.I.; MATTOS JÚNIOR, D; POMPEU JÚNIOR, J.; TEÓFILO SOBRINHO, J.; CARVA-LHO, S.A.; GIROTTO, L.F. & MACHADO, M.A. Citrus sudden death: a new citrus disease in Brazil. Proceedings... Conference of IOCV, 15., Riverside, 2002a. p.405-407.
MÜLLER, G. W.; DE NEGRI, J. D.; AGUILAR-VILDOSO, C. I.; MATTOS JÚNIOR, D; POMPEU JÚNIOR, J.; TEÓFILO SOBRINHO, J.; CARVALHO, S. A.; GIROTTO, L. F. & MACHADO, M. A. Morte súbita dos citros: uma nova doença na citricultura brasileira. Laranja. v.22, n.2, p. 371-386, 2002b.
MÜLLER, G.W.; RODRIGUEZ, O. & COSTA, A.S. A tristeza virus complex severe to sweet orange varieties. In: CONFERENCE OF THE INTERNATIONAL ORGANIZATION OF CITRUS VIROLOGISTS, 4., 1966. Roma. Proceedings... Gainesville: IOCV, Univ. Florida Press, 1968. p.64-71.
OCHOA, F.; BERETTA, M.J.G.; DERRECK, K.; LEE, R.F. & RANGEL, E. Comparison of citrus sudden death decline from Venezuela with citrus blight from Florida and declinio from Brazil. In: CONFERENCE OF THE INTERNATIONAL ORGANIZATION OF CITRUS VIROLOGISTS, 12., 1992. New Deli. Proceedings... Riverside: IOCV, Univ. Florida Press, 1993. p.116-120.
PAPPU, H.R.; KARASEV, A.V.; ANDERSON, E.J.; PAPPU, S.S.; HILF, M.E.; FE-BRES, V.J.; ECKLOFF, R.M.G.; McCAFFERY, M.; BOYKO, V.; GOWDA, S.; DOLJA, V.V.; KOONIN, E.V.; GUMPF, D.J.; CLINE, K.C.; GARNSEY, S.M.; DAWSON, W.O.; LEE, R.F. & NIBLETT, C.L. Nucleotide sequence and organization of eight 3' open reading frames of the Citrus Tristeza closteroviruses genome. Virology, 199, p.35-46, 1994.
PORTARIA CDA-9. Diário Oficial do Estado de São Paulo, São Paulo, Poder Exe-cutivo, v.112, n.79, 27 abr. 2002. Seção I.
PRATES, H.S.; MÜLLER, G.W. & COSTA, A.S. Comportamento de combinações copa/porta-enxerto com relação ao declínio dos citros em São Paulo. Fitopatol. Bras., v.73, p.72, 1982.
PUJOL, A.R. Informe sobre el estado actual del problema del declinamiento de citrus en la zona de Misiones. IDIA, v.275, p.1-6, 1969.
RODRIGUEZ, O.; ROSSETTI, V.; MÜLLER, G.W.; MOREIRA, C.S.; PRATES, H.S.; DE NEGRI, J.D. & GREVE, A. Declínio de plantas cítricas em São Paulo. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE FRUTICULTURA, 5., 1979. Pelotas. Anais.... Pelotas: SBF, 1979. p.927-932.
ROISTACHER, C.N.; BLUE, R.L.; NAUER, E.M. & CALAVAN, E.C. Suppression of tristeza virus symptoms in Mexican lime seedlings grown at warm temperatures. Plant Disease Reporter, v.58, p.757-760, 1974.
ROMÁN, M.P.; CAMBRA, M.; JUÁREZ, J.; MORENO, P.; DURAN-VILA, N.; TANAKA, F.A.O.; KITAJIMA, E.W.; YAMAMOTO, P.T.; BAZZANESI, R.B.; TEIXEIRA, D.C.; JESUS JR.,W.C.; AYRES, A.J.; GIMENES-FERNANDES, N.; RABENSTEIN, F.; GIROTTO, L.F. & BOVÉ, J.M. Citrus sudden death in Brazil: a graft transmissible bud union disease. Plant Disease, 88(5): 453- 467, 2004.
RUBIO, L.; AYLLÓN, M.A.; KONG, P.; FERNÁNDEZ, A.; POLEK, M.; GUERRI, J.; MORENO, P. & FALK, B.W. Genetic variation of Citrus tristeza virus isolates from California and Spain: Evidence for mixed infection and recombination. J. Virol., v.75, p.8054-8062, 2001.
SOUZA, A.A.; TAKITA, M.A.; SANTOS, F.A.; LOCALI, E.C.; MULLER, G.W. & MACHADO, M.A. Análise de haplótipos do gene do capsídeo do CTV em plantas com sintoma de morte súbita dos citros. Fitopatologia Brasileira, v.27, p.212-213, 2002. (Suplemento)
TARGON, M.L.P.N.; ASTÚA-MONGE, G.; KISHI, L.; FREITAS-ASTÚA, J.; SOU-ZA, A.A.; SANTOS, F.A.; MULLER, G.W. & MACHADO, M.A. Avaliação de haplótipos do CTV em plantas com sintomas de morte súbita dos citros por SSCP e seqüenciamento dos genes da p20 e p23. Summa Phytopathologica, v.29, n.1, p.71-72, 2003.
TARGON, M.L.P.N.; MACHADO, M.A.; MÜLLER, G.W.; ASTÚA-MONGE, G. & SANTOS, F.A. Avaliação de complexos de CTV em plantas afetadas por morte súbita dos citros. Fitopatologia Brasileira, v.27, p.213, 2002. (Suplemento) TARGON, M.L.P.N.; MACHADO, M.A.; MÜLLER, G.W.; COLETTA FILHO, H.D.; MANJUNATH, K.L. & LEE, R.F. Sequence of coat protein gene of the severe citrus tristeza virus complex Capão Bonito. In: CONFERENCE OF THE INTERNATIONAL ORGANIZATION OF CITRUS VIROLOGISTS, 14., 1998. Campinas. Proceedings... Riverside: IOCV, 2000. p.122-126.
VEGA, J.; MÜLLER, G.W. & LEE, R.F. Evaluation of exotic mild strains of citrus tristeza virus for cross protection on Sour orange rootstock in Brazil. In: LEE, R. F. et. al. (Eds.). INTERNATIONAL WORKSHOP, 3., (FINAL REPORT) CITRUS TRISTEZA AND THE BROWN CITRUS APHID IN THE CARIBBEAN BASIN: MANAGEMENT STRATEGIES. Proceedings... Lake Alfred: Univ. Florida, 1995. p.173-174.
VIVES, M.C.; RUBIO, L.; LOPEZ, C.; NAVAS-CASTILLO; J., ALBIACH-MARTI, M.R.; DAWSON, W.O.; GUERRI, J.; FLORES, R. & MORENO, P.The com-plete genome sequence of the major component of a mild citrus tristeza virus isolate. J. Gen. Virol., v.80, p.811-816, 1999.
YAMAMOTO, P.T.; JESUS-JUNIOR, W.C.; BASSANEZI, R.B.; SANCHES, A.L.; AYRES, A.J.; GIMENES-FERNANDES, N. & BOVÉ, J.M. Transmission of the agent inducing symptoms of citrus sudden death by graft inoculation under insect proof conditions. Fitopatologia Brasileira, v.28, p.265, 2003. (Suplemento)
