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DOI: 10.1590/S0102-86502002000100007
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7 - ARTIGO ORIGINAL
ISQUEMIA E REPERFUSÃO HEPÁTICA TOTAL ASSOCIADA AO
ESTADO DE CHOQUE HEMORRÁGICO
CONTROLADO:
EFEITOS
NO SEQÜESTRO DE NEUTRÓFILOS
NO PULMÃO DO RATO!
Mario MantovanF Mauro José Fontelles-EIcio Shiyoiti Hirano" Rosana CeIestina Morandin" Lucélia Rita Gaudino Caputo" André AImeida Schenka?
Mantovani M, Fontelles MJ, Hirano ES, Morandin RC, Caputo LRG, Schenka AA. Isquemia e reperfusão hepática total associada ao estado de choque hemorrágico controlado: efeitos no sequestro de neutrófilos nopulmão do rato. Acta Cir B·ras[serial online] 2002 Jan-Fev; 17(1). Disponível em: URL: http://www.scielo.br/acb.
RESUMO: OBJETIVO: Estudar os efeitos da isq.uemia e reperfusão hepática total sobre acúmulo de neutrófilos no interstício pulmonar de ratos, em condições de normalidade e submetidos ao estado de choque hemorrágico controlado. MÉTODOS: 32 ratos Wistar, machos, foram divididos em quatro grupos de oito animais cada: grupo Sharn, submetido aos procedimentos padrões com um período de 60 minutos de observação; grupo Choque, submetido a choque hemorrágico controlado (PAM = 40 mmHg, 20 min.) seguido de reposição volêmica (Ringer lactato
+
sangue, 3:I) e reperfusão (60 min.); grupo Pringle, submetido a isquemia hepática total (15 min.) ereperfusão (60 min.); grupo Total submetido a choque hemorrágico controlado (15 min.) seguido de reposição volêmica (Ringer lactato+
sangue, 3:1) e reperfusão (60 min.). Após o sacrifício dos animais, procedeu-se à contagem de neutrófilos no interstício pulmonar. RESULTADOS: Os valores encontrados para contagem de neutrófilos no interstício pulmonar indicaram que, os animais dos grupos Pringle, Total e, também, do grupo Choque, não diferiram dos animais do grupo Sham com valores de (Sham 21,08 14,12; Choque 35,15 18,74; Pringle 19,78 15,38; Total 23,90 16,37) (p=0.253) CONCLUSÃO: Em ratos submetidos a estado de choque hemorrágico controlado associado a isquemia hepática de 15 minutos, seguida de 60 minutos de reperfusão, não ocorreu acúmulo significativo de neutrófilos no interstício pulmonar.DESCRITORES: Isquemia. Reperfusão. Choque hipovolêmico. Manobra de Pringle. Neutrófilos.
l. Trabalho realizado no Laboratório deInvestigação em Cirurgia doTrauma (LICIT) da Disciplina de Cirurgia da Faculdade de Ciências Médicas da UNICAMP - Campinas, S.P.,no Núcleo de Medicina e Cirurgia Experimental da FCM - UNICAMP. 2. Professor Titular e Chefe daDisciplina de Cirurgia doTrauma doDepartamento deCirurgia da Faculdade de Ciências Médicas
- UNICAMP. Coordenador doLaboratório deInvestigação emCirurgia do Trauma (LICIT) do Núcleo de Medicina e Cirurgia Experimental da FCM - UNICAMP.
3. Mestre em Cirurgia do Trauma. Aluno de Doutorado do curso de pós-graduação do Departamento de Cirurgia da Faculdade de Ciências Médicas - UNICAMP.
4. Aluno de Mestrado do curso depós-graduação doDepartamento de Cirurgia da Faculdade de Ciências Médicas - UNICAMP. 5. Doutora em Ciências Médicas - Anatomia Patológica. Bióloga do Laboratório de Investigação em Cirurgia do Trauma (LICIT)
-UNICAMP.
6. Mestre em Anatomia Patológica. Professora da Universidade de Alfenas.
7. Médico Residente daDisciplina deAnatomia Patológica da Faculdade de Ciências Médicas - UNlCAMP.
!
46-Acta Cirúrgica Brasileira - VolI7 (I) 2002INTRODUÇÃO
o
trauma é uma das principais causas de morte na população, ocupando o terceiro lugar se consideradas todas as idades e, a primeira, na faixa etária até os 44 anos de vida. Dentre estas causas, o fígado representa um dos principais órgãos atingidos notrauma abdominal'. Deste modo, ospacientes vítimas delesões hepáticas graves, em razãodo choque hemorrágico aqueestão sujeitos, podem evoluir para um estado de resposta inflamatória generalizada com séria repercussão sistêmica e, consequentemente, para um quadro de complicação pulmonar, conhecido como Síndrome da Angustia Respiratória do Adulto -SARN
ou, ainda, apresentar ocomprometimento simultâneo de vários órgãos da economia, resultando na conhecida Insuficiência de Múltiplos órgãos e Sistemas - IMOS3. Nestes pacientes, o princípio básico do tratamento cirúrgico é sustar o sangramento pela oclusão temporária do ligamento hepatoduodenal, manobra descrita por Pringle em 19084• Embora, na prática, represente uma manobra rápida, fácil eeficaz, este procedimento provoca isquemia total do fígado, podendo levar à alterações importantes na estrutura histológica do órgão, piorando a fase de reperfusão em razão da liberação de substâncias desencadeantes da resposta inflamatória, como as citocinas e, pela migração de neutrófilos para os tecidos, representando, portanto, um modelo humano de isquemia e reperfusão (I1R)5.Assim, oobjetivo deste trabalho experimental foiestudar osefeitos da isquemia e reperfusão hepática total sobre acúmulo de neutrófilos no pulmão de ratos, em condições de normalidade e, submetidos ao estado de choque hemorrágico controlado.
MÉTODOS
Todos os procedimentos seguiram a orientação do protocolo previamente estabelecido segundo o projeto piloto elaborado e desenvolvido pela Disciplina de Cirurgia do Trauma e, aprovado pela Comissão de Ética na Experimentação Animal do Instituto deBiologia da UNICAMP.
Animais
Neste experimento, foram utilizados 32 ratos machos, adultos, da linhagem Wistar (CEMIB UNICAMP, Campinas, SP), com pesos que variaram de 185 a 250 gramas (212,65 20,79) e com idade aproximada de 08 semanas. Todos os animais foram mantidos em condições ambientais convencionais e controladas de luminosidade e temperatura, recebendo dieta padrão do LICIT constituída de ração NUVILAB CR-I (Nu vital Nutrientes Ltda., Paraná, Brasil) e água
'ad libitum',
Um período prévio de permanência de uma semana, antes do início do experimento, foi instituído objetivando a aclimatação dos animais ao biotério.Grupos
Os ratos foram aleatoriamente distribuídos em quatro grupos de oito animais cada, sendo:
• Grupo Sham - Ratos em condições de normalidade, submetidos, unicamente,
à
laparotomia e, posteriorme n-te, a um período de 60 minutos de observação, equivalente ao período de reperfusão nos demais grupos; • Grupo Choque - Ratos submetidos à sangria com instalação do estado de choque hemorrágico controlado, com pressão arterial média (PAM) mantida em 40 mmHg, por um período de 20 minutos, seguido da reposição volêmica com solução de Ringer lactato e sangue total (3 : 1) até atingir a PAM de 80 mmHg, com posterior período de reperfusão de 60 minutos.• Grupo Pringle - Ratos submetidos à laparotomia seguida por 15 minutos de manobra de Pringle e,posterior período de reperfusão hepática total de 60 minutos.
• Grupo Total - Ratos submetidos à sangria com instalação do estado dechoque hemorrágico controlado, com PAM mantida em 40 mmHg, por um período de 20 minutos, seguido da reposição volêmica com solução de Ringer Lactato e sangue total (3 : 1)até atingir a PAM de 80 mmHg. A seguir, foram submetidos à laparotomia e 15 minutos de manobra de Pringle, seguida de reperfusão hepática total por um período de 60 minutos.
Procedimentos
cirúrgicos
Os ratos foram submetidos a jejum de 12 horas na noite anterior ao experimento. Os procedimentos cirúrgicos foram realizados sob anestesia intraperitoneal (IP) com uma solução decloridrato decetamina, 80 mg/Kg (Cristália, Itapira, SP)
+
cloridrato xilazina, 10 mg/Kg (Bayer S.A., São Paulo, SP) e, sulfato de atropina (Halex Istar, são Paulo, SP) 0,05 mg/Kg. Oxigênio foi administrado num fluxo de 2 l/min., fornecido sob campânula plástica semi-aberta, de modo a encobrir parcialmente a cabeça do animal e permitir a livre troca gasosa com o meioambiente. Após indução anestésica, realizaram-se a depilação e os animais foram, então, colocados em posição
supina sobre prancha com aquecimento elétrico controlado.
Usando-se técnica as séptica, a artéria carótida direita e veiajugular direita foram dissecadas e cateterizadas com cateteres de polietileno (PE 40), previamente heparinizados, que foram utilizados para efetivação da sangria arterial com estabelecimento do estado de choque hemorrágico controlado, além da coleta venosa de amostras de sangue para exames e, infusão de líquidos para reposição volêmica, respectivamente. A seguir, a artéria femural direita foi dissecada e cateterizada com cateter de polietileno (PE 40) heparinizado, que foi utilizado para controle da pressão arterial média (PAM) dos animais (Registrador Mingograf
804
.
Siemens-Elema, Alemanha). Durante todas as fases do experimento, as seguintes variáveis foram monitorizadas continuamente:eletrocardiograma (ECG), PAM, freqüência cardíaca (FC), freqüência respiratória (FR) e temperatura retal (TR), aqual, foi mantida entre 36°c - 38°c, controlada por aquecimento externo. Medidas das pressões parciais do oxigênio (p02) e do dióxido de carbono (pCO), dos eletrólitos (Na", K+) e do lactato, arteriais, assim como, do hematócrito (Ht), foram obtidas em cada fase do experimento.
Ainstalação do choque hemorrágico controlado foi obtida pela sangria, a intervalos regulares, de volumes equivalentes
a 5% da volernia até a obtenção dos níveis pressóricos iguais a 40 mmHg de PAM para os animais do grupo choque
egrupo total (Figura 1).Retiradas posteriores foram efetuadas, se necessário. A laparotomia mediana foi realizada
com hemostasia rigorosa dos vasos sangüíneos. O ligamento hepatoduodenal (artéria hepática, veia porta e dueto biliar) foi identificado e pinçado (manobra de Pringle) com clamp arterial delicado. Após o período de reperfusão de 60 minutos os animais foram sacrificados por exsanguinação para retirada dos pulmões.
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Figura 1.Esquema de choque por hemorragia controlada.
Processamento
do tecido pulmonar
Em seguida a inspeção da cavidade torácica, o procedimento de 'lavagem' dos vasos sangüíneos pulmonares foi iniciado. Para tanto, a artéria aorta foi pinçada imediatamente acima do músculo diafragma torácico e, as veias cavas, superior e inferior, ao longo de seus trajetos. Em seguida, efetuou-se a cardiomiotomia do ventrículo esquerdo para dar vazão ao líquido da 'lavagem'. O ventrículo direito foi puncionado com cateter intravenoso n."
16 e 20 ml de solução fisiológica foi injetada, de maneira suave, com a finalidade de remover, do leito dos vasos
sangüíneos, quaisquer resquícios de sangue ali contido. Após esta etapa, o coração e os pulmões foram retirados em bloco e o lobo inferior do pulmão direito, fixado em formalina a 10% e, posteriormente, embebido em parafina. Cortes de quatro micrômetros de espessura foram submetidos à coloração pela técnica de hematoxilinaJ eosina, para estudo histológico e contagem do número de neutrófilos no interstício pulmonar (Figura 2).
A leitura das lâminas foi realizada de maneira aleatória e o resultado final da contagem de neutrófilos, em cada corte, foi obtido pela média aritmética dos valores relativos a
10
campos microscópicos, com aumento de400
X, alternando-se dois campos sem leitura para cada campo considerado.
Figura 2.Neutrófilo nointerstício pulmonar.
Análise estatística
Todos os dados obtidos foram armazenados em um banco de dados utilizando-se o programa Excel - versão 97 (Microsoft Co. USA), para computador pessoal. Nas comparações entre os grupos a significância estatística foi aval iada através da Análise deVariância (ANO VAdeum cri tério - Teste F). Na presença dedi ferenças entre os grupos,
estas foram identificadas pejo método deStudent-Newman-Kuels. Adotou-se o nível de significância de 5%(p 0,05) e os valores estão representados sob a forma de média desvio-padrão da média. Os valores de "p" foram obtidos através do programa estatístico SAS - versão 6.12 (Statistical Analysis Siystem Software - Cary, NC, USA).
RESULTADOS
Neste experimento, os grupos foram homogêneos, pois não ocorreram diferenças significativas quanto aos pesos dos animais estudados. O peso médio desvio-padrão, de cada grupo, está representado na tabela I.
Tabela
1
.
Peso dos animais conforme o grupo estudado.Grupo Sham Choque Pringle Total
Média (g) 201.25 216.25 216.87 221.25
Desvio-Padrão 12.74 27.35 16.88 22.79
N 8 8 8 8
(ANOVA: p=O.258).
Variáveis pré-operatórios
Em todos os animais, as variáveis de interesse, avaliadas no pré-operatório, encontravam-se dentro dos limites de normalidade. Exceto pela dosagem da pressão parcial dodióxido de carbono no sangue arterial (pC02), não houve
diferenças significativas entre os grupos estudados, demonstrando que todos os animais foram retirados da mesma população. Os valores da média desvio-padrão, para cada grupo estudado, estão representados na tabela 2. Tabela 2. Valores médios das variáveis pré-operatórias conforme o grupo estudado.
Grupo Sham Choque Pringle Total p*
PAM (mmHg) 118.75±17.91 126.75±17.46 136.50±14.88 128.25±19.16 0.265 FR (mov./min.) 60.25±8.58 58.00±4.78 63.50±16.48 63.50±6.90 0.648 FC (bpm) 310.50±28.27 292.50±40.02 307.50±15.62 312.00±19.24 0.478 PH 7.329±0.062 7.257±0.059 7.311±0.049 7.295±0.033 0.059 PCOz (mmHg) 49.15±6.52 57.67±9.50 48.48±3.00 52.66±5.45 0.035 POz (mmHg) 208.25± 118.62 240.37±68.62 161.75±92.68 222.00±99.11 0.421 HCOJ' (mmol/l] 27.25±3.98 25.37±2.23 24.81±1.75 25.57±1.30 0.269 BE (mmol/l) 0.02±2.18 -2.23±1.90 -1.46±2.37 -1.00±1.15 0.161 Na+(mEq/l) 136.00±8.0 I 132.14±4.14 129.37±8.95 133.62±10.33 0.444 K+ (mEq/l) 4.92±0.59 4.30±0.74 4.93±0.58 4.60±0.72 0.201 Lactato (mmol/l) 0.92±0.12 0.95±0.19 0.91±0.20 0.85±0.14 0.678
*Análise de Variância (ANOVA).
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Para cada grupo e,durante todas asfases de cada experimento, as medidas da PAM, FR e FC foram obtidas para avaliar a evolução hemodinâmica dos animais. Como os valores da PAM foram previamente padronizados no estado de choque (40 mmHg) e na de reposição (80 mmHg), nos grupos Choque e Total, a análise estatística desta variável foi feita nas seguintes fases dos diferentes grupos: sinais vitais iniciais (SVI), início da reperfusão (RPO),reperfusão 30 minutos (RP30) ereperfusão 60 minutos (RP60). O Gráfico 1 ilustra, mais detalhadamente,
a média dos valores da PAM nos diferentes grupos, ao longo de todo o experimento.
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Gráfico 1.Valores daPAM emcada fase do experimento conforme o grupo estudado. SVI- Sinais vitais iniciais RPO- Reperfusão OminoRP30 - Reperfusão 30 minoRP60 - Reperfusão 60 mino
Na comparação entre os valores da PAM no início do experimento (SVI), não foi verificada qualquer diferença significativa entre osdiferentes grupos (p=0.265), estando todos equiparados quanto a esta variável hemodinâmica.
Na fase inicial dareperfusão (RPO), todos os grupos apresentavam PAM significativamente diferentes (p<O.OOOI), exceto entre os grupos Pringle e Total (p=0.123), que evoluíram com valores muito próximos (43.25 3.0I
mmHg e 46.00 3.46 mmHg) e bem abaixo dos demais grupos. Aos 30 minutos de reperfusão (RP30) apenas o grupo Sham apresentava diferença significativa com os demais grupos, com PAM apresentando valor superior a estes (96,5 14.8 mmHg). Após 60 minutos de reperfusão (RP60) a medida da PAM mostrou-se novamente diferente apenas no grupo Sham que, como já vimos, apresentou valores acima dos demais grupos durante todo o experimento, exceto nos sinais vitais iniciais (SVI).
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O número de neutrófilos por campo, presente no pulmão, em cada grupo, após 60 minutos de reperfusão, esta
representado na Tabela 3.
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3.
Número de neutrófilos, por campo, no pulmão, conforme o grupo estudado.Gr
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Pringle
Total
PMN/Campo
Média
21,08 35,15 19,78 23,90DP
14,12 18,74 15,38 16,37N
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p=O.253o
Gráfico 2 ilustra, mais detalhadamente, a média dos valores doacúmulo deneutrófilos, por campo, nointerstíciopulmonar, após 60 minutos de reperfusão, nos diferentes grupos estudados.
Gráfico 2.Valoresdoacúrnulo deneutrófilos, porcampo, nopulmão conforme o grupo estudado.
DISCUSSÃO
o
trauma hepático constitui-se na forma mais comum de trauma abdominal fechado, superado apenas pela lesãodo baço'. O impacto direto ou a compressão da parede abdominal, produzidos pelo agente vulnerante, podem
causar rupturas parenquimatosas desses órgãos com vultosas hemorragias intraperitoneais e choque. Embora a
maioria das lesões hepáticas apresentem-se de pequenas dimensões e requeiram pequenos procedimentos
cirúrgicos, ou até mesmo uma conduta conservadora, algumas, de maior gravidade, podem ser letais se não
forem adequadamente controladas.
Enquanto a causa mais comum demorte nas lesões hepáticas extensas continua sendo ahemorragia, ospacientes
que sobrevivem aotrauma inicial podem evoluir com outras complicações inerentes às alterações induzidas pelo
estado dechoque hemorrágico, traduzidas pela síndrome de Isquemia e reperfusão. Com objetivo de diminuir as
perdas sangüíneas, a manobra de Pringle é o procedimento mais comumente utilizado pelos cirurgiões, podendo,
no entanto, induzir a lesões hepáticas caracterizadas por alterações próprias desta síndrome, com liberação de
enzimas hepatocelulares, redução do fluxo biliar e disfunções metabólicas.
Embora, esta técnica comporte-se como uma maneira segura, muita controvérsia ainda existe sobre o tempo
total de tolerância hepática àisquemia. Deste modo, muitos estudos têm sido realizados, não somente para avaliar
otempo máximo que o tecido hepático pode suportar o clampeamento da tríade portal, mas também, para avaliar
os efeitos da manobra quando executada de maneira intermitente.
Na literatura, diversos autores preconizam que o tempo de isquemia do órgão, se contínuo, não deverá exceder
30 minutos e, o procedimento intermitente deverá ser adotado quando o período para correção das lesões
superar este valor?". Assim, o fígado, que pode suportar grandes danos sem que haja considerável
comprometimento da função, mostra-se bastante sensível ahipóxia eaos efeitos da reperfusão subsequente que,
de maneira associada, induzem a alterações, atribuídas, pelo menos em parte, à liberação de radicais livres
durante afase de reperfusão-"!",
Por outro lado, a isquemia e reperfusão, atualmente, são referidos como os fatores mais importantes na gênese
de disfunções orgânicas conseqüentes à lesões traumáticas, as quais, dependendo do órgão afetado edo tempo
de interrupção do fluxo sangüíneo, podem estar restritas não somente ao órgão isquemiado, como também,
desencadear fenômenos que podem levar àlesão de outros órgãos distantes!':".
Neste sentido, estudos mais recentes indicam que, na fase inicial do choque hemorrágico, os neutrófilos parecem
desempenhar uma importante ação no estabelecimento da síndrome inflamatória sistêmica (SIRS), pois
tornam-se ativados e aderentes às células endoteliais em resposta a IIR. Esta interação entre estes polimorfonucleares
(PMN) e as células do endotélio vascular, representa o mais importante componente responsável pela resposta inflamatória e é coordenada por um sistema de citocinas, ainda, pouco conhecido, gerador de vários radicais
livres'-":". Outrossim, POGGETTI
et al,",
1999, também demonstraram que existem evidências indicando que os PMN participam como mediadores das lesões teciduais que levam à falência orgânica em animais submetidos a IIR. Portanto, estas células, cuja função básica é a fagocitose, secretam enzimas e radicais superóxido que destroem os microrganismos fagocitados; porém, em resposta ao trauma, podem encontrar-se em estado de hiperatividade com liberação de grande quantidade destas substâncias tóxicas para o interstício, levando à SARA e, posteriormente,à
IMOS.Deste modo, as lesões induzidas pela síndrome de IIR podem ser atribuídas a dois mecanismos distintos. Um,
caracterizados pela interação dos PMN com as células endoteliais capilares, mediada pelas citocinas inflamatórias e moléculas de adesão; o outro, pela produção excessiva e posterior liberação de radicais oxigênio, altamente reativos e citotóxicos, durante a fase de reperfusão":",
Atualmente, acredita-se que os macrófagos constituem uma população celular com fundamental importância na patogênese da SIRS pois são responsáveis pela síntese de mediadores inflamatórios conhecidos (citocinas),
entre os quais, pode-se destacar: o fator de necrose tumoral - (TNF), a interleucina - 6 (IL-6) e a proteína inflamatória de macrófagos - 2 (MIP-2), que parecem ter importância fundamental no desencadeamento e desenvolvimento da sfndrome'<".
No fígado, encontram-se grande população de macrófagos fixos (células de Kupffer) e, procedimentos que causam a IIR hepática total, ou mesmo parcial, induzem à síntese de citocinas inflarnatórias'ê'". Assim, após
lesão hepática e manobra de Pringle, estas células podem ser a fonte primária de citocinas que podem levar ao aumento do número de neutrófilos e da permeabilidade microvascular nos tecidos de outros órgãos da economia,
como no pulmão, sugerindo, deste modo, que a lesão causada pela I/R deste órgão pode ser outro fator desencadeante que contribui para o início da SIRS e, consequentemente, da IMOS, em pacientes vítimas de trauma hepático extenso, principalmente, quando associado com grave estado de choque hernorrágico't-P:".
Desta maneira, inúmeros órgãos podem estar envolvidos, merecendo destaque o pulmão, o rim e o intestino,
além de outros, tais como, o coração, o cérebro, o baço, o pâncreas e a supra-renal que, também, podem ser estudados utilizando-se o presente modelo de I / R hepática total.
Portanto, neste modelo experimental de IIR hepática total, os resultados obtidos mostram que, entre os diferentes
grupos analisados, não ocorreu uma diferença estatisticamente significativa quanto ao acúmulo de neutrófilos no interstício pulmonar após um período de 60 minutos de reperfusão (p=0.253).
Curiosamente, diferente do que se poderia esperar, os animais do grupo Pringle e grupo Total, apresentaram valores da contagem de neutrófilos no pulmão muito semelhantes e pouco diferiram do grupo Sham, sugerindo que o pinçamento da tríade portal por um período de 15 minutos, não foi o fator fundamental para o acúmulo dessas células no tecido pulmonar destes animais, sendo os resultados confirmados pela análise estatística que não mostrou diferença significativa entre os grupos aos quais a manobra para isquemia hepática foi realizada. Por outro lado, seja qual for a origem do choque hemorrágico, a sua instalação está relacionada ao posterior desencadeamento da resposta inflamatória sistêmica, traduzida pelo recrutamento e ativação de neutrófilos nos diversos órgãos. Aqui, verifica-se que o grupo Choque apresentou os maiores valores, quando comparado aos demais grupos, embora, estatisticamente não significante.
De qualquer forma, neste trabalho, de maneira inexplicada, como verificado nos animais do grupo Total, a manobra de Pringle representou um fator determinante para diminuir ou retardar o acúmulo de neutrófilos que poderia ser estimulado pelo estado de choque hemorrágico. Neste sentido, algumas possíveis explicações podem ser sugeridas: ou o represamento de sangue no leito vascular esplâncnico causado pelo pinçamento do pedículo hepático ou, ainda, a grande hemodiluição a que estes animais foram submetidos, poderiam ser as condições
responsáveis por este resultado, sem, no entanto, desprezar o fator tempo de IIR hepática que, neste caso, pode ter sido insuficiente para promover o acúmulo destas células no interstício pulmonar que, segundo MARTINS JR21,1997, é tempo-dependente, atingindo concentração máxima somente após 120 minutos de reperfusão. No primeiro caso, o acúmulo sangüíneo esplâncnico levaria ao retardamento do tempo de reperfusão e, também, da migração de PMN para o tecido pulmonar, Quanto ao fator hemodiluição, neste trabalho, verificou-se que os animais do grupo Pringle e Total foram aqueles que necessitaram de maior quantidade de infusão de líquidos para manter os valores da PAM dentro dos parâmetros estipulados pelo protocolo adotado, principalmente, durante a fase de isquemia hepática. Esta infusão maciça de líquidos levou a uma hemodiluição, com baixos valores do hematócrito (grupo Pringle, 32 6%; grupo Total 27 2%) , que repercutiu durante a fase de reperfusão, o que poderia diminuir o aporte de PMN ao interstício pulmonar.
CONCLUSÃO
Em ratos submetidos a estado de choque hemorrágico controlado, associado a isquemia hepática total de 15
minutos, seguida de 60 minutos de reperfusão, não ocorreu acúmulo significativo de neutrófilos no interstício pulmonar.
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ABSTRACT: OBJECTIVE: The purpose of this experimental work was to study the effects of
total hepatic ischemia and reperfusion on the accumulation of neutrophils in the lung of rats, under
normal conditions and submitted to controlled hemorrhagic shock state. METHODS: thirty two
adult male Wistar rats, were divided into four groups: the Sham group, was submitted to the
standard procedures for a period of 60 mino of observation; Shock group, was submitted to controlled
hemorrhagic shock (PAM=40 mmHg, 20 min.) followed by volemic resuscitation (lactated Ringer 's
solution
+
blood, 3:1) and reperfusão for 60 min.; Pringle group, was submitted to total hepaticischemia for 15 mino and reperfusão for 60 min.; The Total group, was submitted to controlled
hemorrhagic shock for 15 mino followed by volemic resuscitation (lactated Ringer 's solution
+
blood, 3:I)and reperfusão for 60 min.). The counting of neutrophils on the lung tissue was performed
after the euthanasia of animais. RESULTS: The values found for the counting of neutrophils on the
lung tissue indicate that the animaIs from the Pringle, Total, and Shock groups, did not differ from
the Sham group, having the following values.jxham, 21,08 14,12; Shock, 35,15 18,74; Pringle,
19,78 15,38; Total, 23,90 16,37) (p=0.253). CONCLUSION: Rats submitted to controlled
hemorrhagic shock state associated to total hepatic ischemia for 15 minutes, followed by 60 minutes
of reperfusion, did not present significant neutrophils accumulation on the lung tissue.
KEY
WORDS: Ischemia. Reperfusion. Hypovolemic shock. Pringle's maneuver. Neutrophil.Conflito de interesses: nenhum
Fontes de financiamento: CNPq
Endereço para correspondência:
Prof. Dr. Mario Mantovani
Rua José de Campos Sales, 650
Campinas - São Paulo - 13095-350
Tel: (19) 3251-7049 1 3788-7852
Fax: (19) 3788-9446
e-rnail: mmmed@uol.com.br
Data do recebimento: 23/0912001
Data da revisão: 01/11/200 I
Data da aprovação: 12/12/200 I
