במ
ה הנ
-DNA
:דיטואילקונה
ה לש ויביכרמ -DNA מ םייונב םה ,םידיטואילקונ םה -3 :םיביכרמ סיסב .םהינש ןיב תרשקמה רכוס תלוקלומו טפסופ תלוקלומ ,ינקנח דיטואילקונה ןמ קלח :דיזואילקונ -.רכוסהו סיסבה קר רפסמה לעמ םיגאט י"ע ןמוסמ רכוס תלוקלומב םימוטאה לש רופסמה ידבהל ידכ .ינקנחה סיסבב םימוטאה רופסממ ל :םיסיסב לש תוצובק יתש תומייק :םינידימיריפ תלעב תחא תעבטמ םייונב 4 ינקנח ינשו םינמחפ ם . :םינירופ .השושמו תשמוחמ ,תועבט יתשמ םייונב ב רכוסה -DNA : יסקואיד שי) זוביר H םוקמב OH הדמעב 2 .( ב רכוסה -RNA : .זוביר :ידיזוקילג רשק ב רשקה סיסבה ןי .רכוסל ררוש אתב pH תובר רפוב תויצקאיר תובקעב תאזו ילארטינ ה תא תועבקמה -pH ילעב םירוזא שי ךא , pH טאפסופה .הנוש ב ילילש ןעטמב תועט -pH ה ןכלו יגולויזיפ -DNA ןעטמב ןועט רסומ) הצמוח אוה דיטואילקונה ןכלו ילילש H+ .( ש תומש םנשי םיטאפסופה רפסמ יפל :תולוקלומל םינו
ה הנבמ
-DNA
:
ה -DNA וד אוה תוכורא תוארשרש יתש :ילידג .םיטאפסופל תורבוחמה םירכוס לש bone -back : .םירכוסה לש תוארשרשה ל -back bone ןמחפמ :תוינוויכ שי 5' ןמחפל 3' . תחא םיכופה םינוויכב ןה תוארשרשה יתש :היינשל antiparallel םיסיסבה תוגוז . בוחמ :ןמימ ירשק תרזעב הזל הז םיר G ו -C םירצוי 3 .ןמימ ירשק A ו -T םירצוי 2 .ןמימ ירשק .הנבמה תא םיבציימ ןמימה ירשק ופסופ רשק -:ירטסאיד רשק רצוי טפסופה ירטסא ןמחפל רבוחמ .ןצמחל ןמחפ ןיב הדמעב 5 הדמעב ןמחפלו הטמלמ 3 .הלעמלמ :ףרגר'צ ללכ ה רפסמ -A ה רפסמל הווש -T . פסמ ה ר -G ה רפסמל הווש -C ה רפסמ . -A ה רפסמל הווש אל -G . :הרעה ה תומכ דחא לידג לע -A ה תומכל הווש חרכהב אל -T . ןירופ אוה גוויזה ,הז ללכ יפל -.ןידימיריפ רוביח והמ תעדל ולכי קירקו ןוסטוו הלוקלומה לש רטוקה יפל :םיסיסבה A םע T ו -G םע C ה יגוס ינשב ההז תויהל ךירצ רטוקה) . .(םירוביח ה תלוקלומ -DNA ןכלו .םייבופורדיה םה םיסיסבהו יליפורדיהו תילילש ןועט טפסופה :תיטאפיפמא איה 2 תויטפיפמא תולוקלומ (לופכ לילס) .םיממ טלמיהל ידכ ןהיניב רשק רוציל תוטונ םיצוחנ :םלש בוביס 10.5 ה לש םלש בוביס םילשהל ידכ םיסיסב -DNA ) 360 .(תולעמ :הלאש שי 10 תלגוסמש הנטק הלוקלומ םיחקול םא .ינשה לעמ דחא םיבשויש םיסיסב ןיב סנכיהל 2 ידכ ךירצ םיסיסב תוגוז המכ ,תוגוזה ןיב הקחרהל תמרוגו םיסיסבה תוגוז ?בוביס םילשהל :הבושת .בוביס םילשהל ידכ םיסיסב רתוי ךירצ ןכלו הנטק םיסיסבה תוגוז ןיב תיווזה
:יבחרמ הנבמ
רמ הניחבמ תיבח טעמכ וא םיכנואמ םיסיסבה סקילהה ריצל םיכנואמ . :יורק הז הנבמ B-DNA . לע הדוקנ לכב -ה יבג -DNA דחא דצמ שי minor groove ינשה דצהמו major groove םהו ה בוביס םע דחיב םהיניב םיפלחתמ -DNA . ל -DNA ה רוזאב םינובלח דואמ הברה םירשקנ -major groove םוקמ רתוי םש שי :יכ שי יכ םגו ןכלו םימוטא תוצובק לש רתוי בר ןווגמ םש .רתוי םיבר םייפיצפס הרישק ירתא לש תיווזב םיאצמנ אל םירכוסה 180 ינש רצוי הזו ,ינשה יפלכ דחא תולעמ ב םיהז םניאש םידדצ -DNA . ב אוה גוז לכ -34 הנימי הייטה תולעמ .םדוקה גוזהמ
:םונגה בכרה
% ה G -C רוא ןיב הנתשמ םימזינג רתוי שישכ .םינוש G-C יגוויז , הלא יכ) םיקזח רתוי םיסיסבה 3 תמועל ןמימ ירשק 2 ילוא הזו ( .תוינוציק רתוי תוביבסב םייח רשפאמ םילידג ינש ובש בצקה תדידמ י"ע הקדבנ םונגה תובכרומ .היצזידירביה םירבוע עוני ףרגה זא ,רתוי םינווגמו םיבכרומ םיפצרהש לככ י .ןמז רתוי חקיי םיסיסבה לש גוויזה יכ הנימ ןיעמ שי םייאליע םירוצי לש םונגל 3 ,דחא ףרגב םיפרג םנשי :רמולכ 3 .םונגה לש תובכרומ יגוס :הכומנ תובכרומ .תורזח הברה םע םירצק םיפצר :תינוניב תובכרומ הברה םמצע לע םירזוחה םיפצר .םונגל ורדחש םיסוריומ םרוקמו ובג תובכרומ :הה םיפצר ,םיימעפ וא תחא םעפ םיעיפומ .םיכורא דואמ :הרעה ב םיסיסבה רפסמ ןיב רשק ןיא -DNA לדוגל .(הזכ רשק ןיא עודמ ,םירקוח הקיסעמש הלאש וז) ולש תובכרומה תמר וא םזינגרואה
:היצרוטנרו היצרוטנד
:היצרוטנד .םידרפנ םילידג ינשל לופכה לילסה תכיפהו ןמימה ירשק קוריפ :םומיח תודרפיהלו הזוזתל תואיבמ רשא הלוקלומב תודיערל םרוג .םילידגה ינש רוא לש העילב יפל םילידג ינשל דיחי לידג ןיב לידבהל ןתינ -DNA לג ךרואב רוא עלוב 260nm ) UV לב .( י ע לש רואה ת ssDNA מ רתויב ההובג -40% ה לש וזמ -dsDNA . Stacking : ס םיסיסב תוגוז ןיב היצקארטניאה םיכומ ה הנבמ ךותב םיליבקמ םירושימב -double helix םרוג .תיטפואה העילבב הדיריל m T : תלוקלומ לש הכתהה תרוטרפמט DNA רשאכ) תיפיצפס % 50 דח בצמב רבכ -.(ילידג \ יסחימ עפשומ AT:GC ה זוחאש לככ , -GC ,רתוי הובג Tm .רתוי הובג לש הילע 1% ב GC הילעל םורגת ב -0.4 ה .תולעמ -Tm ת הלוקלומה ךרואב יול קר דע) תורצק תולוקלומב ~30 לככ .(םיסיסב תוגוז ה ,רתוי הכורא הלוקלומהש -Tm .רתוי הובג :הרעה וב תומוקמ המכב תישענ לופכה לילסה תחיתפ -.תינמז חלמ יזוכירל הפישח םיהובג/םיכומנ : ה תלוקלומב טפסופה תוצובק -DNA תומרוגו תילילש תונועט ה ינש ןיב ההיחדל ב םילידג -dsDNA חלמה זוכיר תאלעה. תא הלידגמו םיילילשה ןינעטמה ךוסימל תמרוג הסימתב ה הנבמ תוביצי -Double-helix . :אתב חלמה זוכיר ~0.2M . :הרעה ה תא הלעמ חלמה זוכירב היילע -Tm . ייוניש תעפשה pH : םג pH מ לודג) דואמ יסיסב -10 םגו ( pH מ ןטק) דואמ יצמוח -2.3 גפל םימרוג ( רוציל תלוכיב העי ה הנבמ בוצייל ןמימ ירשק -double helix .היצרוטנד תמרגנ ךכבו pH רשקל םיקזנל םורגל לוכי יצמוח ופסופה -םירטסאיד םע דובעל םיפידעמ ןכלו לילסב pH .יסיסב :םיטנגאיר ) םוינומאו האירוא ,דימאמרופ ומכ םיטנגאיר NH4+ ה תוביצי תא םידירומ ( -dsDNA תמ םהש םושמ ה תלוקלומב םיסיסבה םע םירח -DNA תריצי לע .ןמימ ירשק :היצרוטנר .םיירטנמלפמוק םילידג ינש ןיב רושיק Nucleation : לילס לש םירצק םירוזא רצוויהל םיליחתמו הזל הז םיכשמנ םיירטנמלפמוק םירוזא אוה הז בלש .לופכ תוריהמ עבוק בלש ב נר ה זוכירב יולת אוהו ,היצרוט -ssDNA הסימתב . Zippering : ודה רוזאה -'ץיר יומד טקפאב טשפתמ יביס לש םיכורא םירוזא תריציל 'ץר dsDNA . :הרעה ב הכומנ הרוטרפמטב שחרתת תילאמיטפוא היצרוטנר -20 המ תולעמ -Tm . .םיחלמה זוכיר יוניש וא הרוטרפמט תאלעה ןוגכ הביבסה יאנתב יוניש תשרוד הטושפ היצרוטנד ומרגי הז גוסמ םייוניש .םיינוציק םירקמב אתה סרהל ףאו אתה תוליעפב םישובישל ה יביס לש םיימוקמ הדרפה יכילהת -DNA םימיזנא י"ע םיעצובמו םירקובמ קותעת וא הלפכה ךרוצל .הביבסה יאנתב יוניש אלל םיביס תדרפה םירשפאמש םייפיצפס
:היצזידירביה
םילידג ינשל תסחייתמ כ"דב היצרוטנר ו דחיב םדוק ויהש .םירבוחמ תויהל םירזוח .דחיב םדוק ויה חרכהב אלש םימילשמ םילידג ינש רוביחל םג תסחייתמ היצזידירביה :רטליפ לע היצזידירביה ) יאלג Probe :( עטקמ DNA (יטנסורולפ/יביטקאוידר) ןמוסמ .הרטמה ףצרל ירטנמלפמוק יפיצפס ףצר לעב שמשמ יאלגה ייסולכוא ךותמ םייפיצפס םיפצר יוהיזל יעטקמ לש תברועמ ה DNA וא RNA . םיסינכמ הילאש הנחבמ י"ע עצבתהל הלוכי היצזידירביה יעטקמ DNA עטקמ םגו עודיו רצק -probe םיחפוס יאלגה תא . רחאל זאו (תיבויח ןועט רטליפהו תילילש ןועט יאלגה) רטליפל .הצוחה רטליפה תא םיפולש ,היצזידירביה זידירביה/היצרוטנר םויקל תושירד :היצ 1 םיאתמ חלמ זוכיר . -0.15-0.5M . 2 לש היצזידירביה רשפאת דחמש הרוטרפמט . ssDNA םניאש ב םיירטנמלפמוק חרכהב -100% תולוכיש תויצטומ ןנשי יכ) לכב םה תויאצמבש םילידג תונשל טעמ (םימילשמ תאז .ןיטולחל תיפיצפס יתלב היצזידירביה ענמת ךדיאמו Stringency :(הרמחה תדימ) לש תויפיצפס לע הטי .היצזידירביהה לכל יאלגה לש תויפיצפסה :הכומנ 'פמט DNA איה .המוד יד ל תויפיצפסה הרוטרפמטה תא םילעמש לככ -DNA ןמימ ירשק י"ע רשקה קוזיח בקע הלוע םילשמ .םימיאתמ ורבחתי אל םימילשמ םילידג םג :ההובג 'פמט .(היצרוטנד ורבעי) ילידג םג :הובג חלמ זוכיר לכ אל ם םימיאתמ ךכ .ורבחתי ot Blot D : לש םייפיצפס םיפצר יוהיזל תייוסינ הטיש RNA/DNA .היצזידירביה תואמגודב 1 . DNA .האוושהל םישמשמה םינוש תורוקממ קפומ 2 ה . -DNA לע םירדגומ םירוזאב היזופיד תועצמאב "גפסומ" יקנה יבג הנרבממ הש ירחא . -DNA מה תא םיפלקמ רטליפל חפסנ .הנרבמ 3 ב םימילשמ םיפצר םע היצזידירביה רבוע יפיצפס ףצרל יאלג . -DNA לעש -מגודב םימייק אל םא .הנרבממה יבג ה אל זא יאלגה ףצרל םימילשמ םיפצר .היצזידירביה שחרתת .םליפל הנרבממה תא םיפשוח תופיטש רחאל זאו 4 יאלגה דומצ םהילא םירוזאה . וליאב עובקל ןתינו םיהוזמ ואמגודמ ה ת -DNA םיפצר םימייק .יאלגה ףצרל םימילשמ
Southern blot : ל המוד הטיש -dot blot ןיב לדבהה . ב לופיטה :תוטישה -DNA .ינפל 1 ה תא םיקיפמ . -DNA םיכתוחו .היצקירטסר ימיזנא י"ע ותוא 2 . ה תא םיצירמ -DNA ל'ג ךותב הרצק הלוקלומ .(הזרופורטקלא) כורא הלוקלומו רתוי קוחר ץורת ה .הלחתהב רתוי ראשית 3 . ה תא םיחקול -smears ל'גהמ םישוע ןהלו blot -.םי תא חקול לזונה ה -DNA הנרבממה לא ותוא ריבעמו .ל'גהמ 4 .ןמוסמ יאלג םע םיביגמ . 5 לש הזילנאו םליפל הפישח . .תואצותה לע םילבקמ ל'גה יבג החירמ -smear ללגב תולוקלומ הברה ןנשיש DNA דואמ הברהב לדג .םי FISH : .םלש זורא םוזומורכב םימלש םיפצרל יטנסורואולפ יאלג לש היצזידירביה ה ףצרב םייוניש רחא בוקעל תרשפאמ וז הטיש -DNA וא םירסח ולח םא עובקלו המקרה יאתב .יטנגה רמוחב תופסות
:םוזומורכה תסיחד
גל התוא סוחדל ךרוצ שיש הלודג דואמ הלוקלומ אוה םוזומורכ לכ דואמ לדו -ה ץוויכ .ןטק דואמ -DNA .תומר רפסמב שחרתמ ןיערגב " Beads on a string :" אוה לילסה DNA תעבטה םגו מ תבכרומ -DNA .םינוטסיה :םיארקנש םינובלחמו :םוזואילקונ ה לילס -DNA .םינוטסיהה תא םיימעפ ףיקמש :םינוטסיה ב ,םירצק יד םינובלח -pH םינועט םה יגולויזיפ .תיבויח םנשיו ,אתב םיצופנ דואמ הלא םינובלח 4 םיגוס :םיירקיע H2A , H2B , H3 ו -H4 לכבו . ןיב שי םהמ דחא 102 ל -135 .היצולובאב םירומש דואמ םה .ונימא תוצמוח ה -DNA ךירצ רשאכו הבוט הרוצב ןובלחל ביבסמ דמצנ הש -DNA ,קותעת וא לופכש ךרוצל ןובלחהמ קתוני היצליטצא םירבוע םינובלחה ל םהלש הכישמהו -DNA .תדרוי ביס DNA אוה "זורח" לכ ובש לש רמטקואמ בכרומ םוזואליקונ :רמולכ ,םינוטסיה 8 םינוטסיה -2 תביל אוה הז רמטקואו גוס לכמ .םוזואילקונה ךרעב שי םוזואילקונה ביבס 146 ןיבו םיסיסב תוגוז כ שי םימוזואליקונה -200 תוגוז ימב תוימניד תמייק .םיסיסב םירתא) ףופילל םיפדעומ םירתא שי ךא ,םוזואילקונה םוק תוגוזב םייוורה A -T הברה םע םירוזאמ ףופילל רתוי םילק G -C .( 30 nm fiber : םנשי :םימוזואליקונ לש סקילהל המודה ביסב םייוצמ םימוזואליקונה 6 .דחא בוביסב םימוזואילקונ םוזואליקונ H1 .תויטקפמוקה תדימ תא עבוק בלח והז עיפומש ןו תונוש תויצאירווב .םינג יוטיבב ינושל בושח ןמס והז ,םינוש םיאתב 300 nm : ה לש םילודג דואמ םיפופל -30 nm fiber . 1400 nm : ה ץוויכ תמר ,אתה ייח בורב .אתה תקולח ךלהמב םימוזומורכה -DNA ב תמייתסמ -30 nm fiber . ב םידיטואילקונה רפסמ בושיח -50 :םיבוביס 50 יס #) * (םיבוב 6 * (בוביסב םימוזואילקונ #) 200 = (םוזואילקונב םידיטואילקונ #) 60,000 .
ה לופכש
-DNA
3
:לופכשל םיירשפא םילדומ
Conservative : לע תינבתכ שמשמ "םא" ביס לכ "תב" ביס זתנוסמ היבג לופכ לילס תריציל םירבחתמ "םאה" יביס ינש ךילהתה םויסב .ירטנמלפמוק ס ינשו דחא .ינש לופכ לילס תריציל םירבחתמ תבה יבי Conservative -Semi : לע תינבתכ שמשמ "םא" ביס לכ זתנוסמ היבג םהמ דחא לכש ,םילופכ םילילס ינש םירצונ .ירטנמלפמוק "תב" ביס .דחא "תב" ביסו דחא "םא" ביס ליכמ Dispersive : םילופכה םילילסה ינשמ דחא לכ לש ופוסב םילבקתמה , ילהתה ."תב"ה ביסמ םיעטקמו "םא"ה ביסמ םיעטקמ ליכמ ,ך ימסה לדומה וזש וליג להטשו ןוסלסמ -.יביטברסנוק פכהה ךילהת .ליבקמב םינוויכה ינשל םדקתמ הל וד איה הלפכההש הלגתה ובש יוסינ -:תינוויכ םגו ןימי דצמ םג םינמיס ולבקתהש ןוויכמ הנקסמה ,הלפכהה גלזמ לש לאמש דצמ ד הלפכה :איה ו -.תינוויכ :ןורתי .ריהמ רתוי אוה לופכשה :ןורסיח וב תוענש תוכרעמ יתש ןנשי -יפ ךירצו תינמז -2 ןיב ןמזתל ךירצ םגו היגרנא תעקשהו םינובלח .ןהיתש ליחתמ םהב תומוקמ המכ םנשי םיטוירקואאב .דחיב םיליחתמ חרכהב אל םהו ,לופכשה אוה הלחתהל תרדגומ הדוקנ שיש ךכב ןורתיה ינש הזיאבו לופכשה תא ליחתהל יתמ ןמזתל ןת .בצק ה לופכש -DNA ןוויכמ אוה 5' ןוויכל 3' .זתנתסמה לידגה לש .םיטפסופ ינש םיררחתשמ רוביחה ידכ ךות לש תיליפואילקונ הפקתה שי לידגה זותניס ךלהמב OH לע .טפסופה ןוויכמ ןותחתה לידגה לש הזתניס ןיא תואיצמב 3' ןוויכל 5' יכ לש םינוש םיגוס ינשל םינוש םימיזנא ינשל קקדזנ הזכ הרקמב .לופכש
:יקאזקוא לש יוסינה
אל לבא ןוויכ ותואב םיכראתמ םילידגה ינשש ובשח ןמזה ותואב ןוויכמ תיטמיזנא תוליעפ האצמנ 3' ל 5' תא הלעמ יקאזקוא ןכלו . יתלב הלפכהה ןכא םאו .םיעטקמ לש הלפכה שי יכ הרעשהה -,הפיצר .םירצק םיעטקמ לבקנ זא .יקאזקוא יעטקמ םיארקנ םירצקה םיעטקמה טיילפמטכ שמשל הלוכי טיילפמט תלוקלומ לכ לידגל leading וא (הלפכהה גלזמ לש דחא דצב) לידגל lagging .(הלפכהה גלזמ לש ינשה ודיצב) תלפכה DNA ב -E.Coli : E.Coli לכ ומצע תא ליפכמ 20 ל לבא ,תוקד יפ ה ,ןאכש םינותנה -DNA ומצע תא ליפכמ ולש לכ 80 הלפכהה ידכ ךותש ללגב הז .תוקד רוזחמ ליחתמ (לופכשהמ עבר רחאל ךרעב) תלפכה לש ףסונ DNA ךכ .הלוקלומ התוא לע אוהש םוזומורכ לבקמ רצונש קדייח לכ .הלפכהה ךילהת לש ועצמאב
:לופכשה ךילהת
ה תחיתפ תליחת
-DNA
:
כ לש ףצר ונשי -250 םהב םידיטואליקונ 4 לש תורזח 9 דועו (ההכ םוח) םידיטואילקונ 3 לש תורזח 13 ןובלחל רושיק רתאכ םישמשמ וללה םיפצרה .(ריהב םוח) םידיטואילקונ DnaA . קלפמוק רצויו ההכ םוחה לש םיפצרל רקיעב רשקנ אוה ס לש 20-30 ב שומישבו .םינובלח -ATP שי ה לש ףופיכ -DNA ושאר החיתפו דואמ הברה םיליכמ וללה םיפצרה .לידגה לש תינ A -T רתוי לק ךכ יכ ) םתוא חותפל 2 .(ןמימ ירשק
DnaA ל רשקיהל לגוסמ אל -DNA אלש היצליתמ רבע רשקיהל לגוסמ אל םגו) קר .(לתוממ יצח קר אוהש לידגל ב היצליתמה רשאכ -origin ,המלשוה ה -DnaA אוה הז רבדו רשקיהל לכוי אווצ דוע יהוז ,בצקה תניחבמ קובקב ר .לופכשה בצק לע הרקב םיזנאה י"ע תישענ היצליתמה DAM הדמעב ןקנחל ליתמ תצובק ףיסומ רשא 6 .ןינדאב :זאקילה םיזנאה ךרוצש םיזנא ATP מ יונב אוה .ולש תוליעפל -6 תת תחא לכש תודיחי תלוקלומ תרשוק ATP תלוקלומ לכ .תחא ATP זילורדיה תרבוע ה .זאקילהה לש בוביסלו ניבמ יונישל תמרוגש לע בבותסמ זאקילהה -ה יבג -DNA לע כ"דב דבוע אוה .ותוא חתופו ה לידג -lagging לופכשה תא םיאתהל ידכ םג ,יטיאה לידגה והזש ינש לע דובעל לוכי אוה ינורקע ןפואב) יטיאה לש הזתניסה בצקל .(םילידגה תת לכ -ירשק תרצוי זאקילהה לש הדיחי ה םע ןמימ -back-bone ה לש -DNA לש הזילורדיה שי רשאכו ה -ATP תתה , -ה תא תפחוד -הדיחי -DNA הייונפ איה תעכו הנממ ררחתשמ אוהו הרושק איה וילא דוע רושקל ATP דועו DNA . SSB :
Single Strand Binding Protein ה לש דיקפתה . -SSB .לידגה ךותב םיינוינש םינבמ תריצי עונמל אוה וא ב רוזא ות -SSB ופסופה רשקל רשקנש תושעל לגוסמה ףסונ רוזא ונשיו .יבויח ןעטמב ןועט ירטסאיד םע היצקארטניא SSB ה רושיק אוה (תוריהמ עבוק בלשה) רושיקה בצק תא עבוקש בלשה .םינכש -SSB ה לא םגו וילא םירשקנ רבכ םירחאה .ןושארה -DNA רושיק והז .(רושיק תודוקנ יתש) ינשה פואוק .רתוי רהמ םירשקנ םה ןכלו יביטר
:זאמירפ ה לע רמיירפה תא רציימש ןובלח -DNA לש רמיירפ רציימ אוה . RNA רמיירפה ךרוא . 10-20 ל רשפאי אוהו םיסיסב DNA .הזתניסה תא ךישמהל זארמילפ
ה תכראה
-DNA
:
םע דיטואילקונ חקול םיזנאה 3 םקממ ,םיטפסופ הפקתהל ילאמיטפוא םוקימב ותוא .תיליפואילקונ ינש תיליפואילקונה הפקתהה ידכ ךות זאו דואמ הברה רורחש ךות םיקרפתמ םיטפסופ ךישמהל םיזנאל תרשפאמש וז איהו ,היגרנא .האלה םדקתהלו DNA polymerase I : הו די ףככ ראותמ םיזנאה הנבמ -DNA .וכרד רבוע ובש יטילטקה רתאה ונשי םיזנאה לש םיוסמ רוזאב תפסוה עצבתת רתא שי יטילטקה רתאל ףסונב .דיטואילקונה proofreading . ה תצובק תבשייתמ ובש עקש םייק םיזנאה ךותב -OH הנבמל םרוג הזו ה ובש יבחרמ -OH אוה ותוא טפסופל שממ בורק דיטואילקונה לש ה ןיב קחרמה ,םיאתמ םיסיסב גוויז ןיא רשאכ .ףוקתי OH וניא טפסופל ןכלו ילאמיטפוא .םהיניב רשק רצוויי אל Proofreading : טושפו ותוא ההזמ אוה ,ןוכנ אל דיטואילקונ סינכמ םיזנאהש עגרב םשלו .הצוחה ותוא איצומ תאצוה תלוכיל קוקז םיזנאה ךכ ךופה ןוויכב םידיטואילקונ 3' ל -5' . לש קוידה תא תרפשמ וז תלוכי ב םעפ תועט) לדוג ירדס ינש דועב םיזנאה 108 .( רוזאה לש הזתניסה ךלהמב הטסה הנשי ה רוזא לא זתנוסש -exonuclease םיזנאב .הצוחה אצויו קרפתמ דיטואילקונה םשו
ןוויכמ הזתניס ןיאש ךכל תפסונ הביס 3' ןוויכל 5' : לאמש דצב זא ,ינשה ןוויכל התייה הכראההש חיננ םיראשנ 3 לידגב דיטואילקונה לע םיטפסופ םא זאו .ךראתמש ,ןוכנ אל דיטואילקונ רבחתמ טפסופ םע דיטואילקונ ראשנ קלוסמ אוהש רחאל לוכי אל םיזנאה זאו םילשמה לידגה לע דחא .זתנסל ךישמהל תלוכי התייה אל םא proofreading התייה אל זא ה תא ךיראהל היעב -DNA .ינשה ןוויכל םג וניאש ליגר דיטואילקונ deoxy בקע תוויע רצונ : ה תצובק -OH אלו תקפסמ הברק ןיא זאו תפסונה .ירטסאידופסופה רשקה רצונ דיטואילקונ di-deoxy ןיא : OH הדמעב 3 הכוסה לש הכראה ןיא ןכלו תיליפואילקונ הפקתה עצבל לוכיש .תרשרשה לש םימיזנאב םישמתשמ רגנאס לש ףוצירה תטישב תולוכי םהלש proofreading הש ידכ תושלח -DNA איצוי אל זארמילופ ה םידיטואילקונה תא -di-doxy .ףצרהמ םימיזנאה לע םיינכט םינותנ : DNA polymerase I : סורפ הכומנ תויביס ינפל ףרצל לגוסמ אוה תודיחי המכ) ידימ םג שיו ידימ ךומנ ולש בצקה ,(לפונ אוהש ) אתב תולוקלומ ידימ רתוי 400 .(
DNA polymerase III תא לפכשמש הז אוה ה -DNA .אתב המ אוה ,רי סורפ תלוכי ול שי ,ההובג תויביס proofreading
DNA polymerase III : םנשי 3 ה תא םיביכרמש םינובלח -core : α : םידיטואילקונ תפסוה לע יארחא 5' ל -3' . ε : לע יארחא proofreading תוליעפ : 3' ל -5' .זאליקונוסקא θ : הדיחיל תרזוע ε ב -Proofreading . תת יתש שיו -ל ץוחמ תודיחי -core :םיזנאה לש β : ל רבחתהל םיזנאל רזוע -DNA . γ : clamp loader ה רובע -Lagging strand תודיחי יתשל רזוע : β ה תרישקל תחא הדיחי רוציל -DNA . ה לידגב -lagging ה -clamp loader ךלהמב םג ראשנ (ההכ קורי) .יקאזקוא יעטקמ תזתניס
םינובלח םע תויצקארטנא שי זאקילהל םיכומס ה םע דחא דצמ : -clamp loader הזו , ה ןיב לידבהל זאקילהל רשפאמ -leading ל -lagging ינש לע הרקב רשפאמ הז . .תוזארמילופה :יקאזקוא יעטקמל םירמיירפ לש הפלחה י"ע םיפלחומ DNA polymerase I ה עטקמב שמתשמ רשא , -DNA ו לידגה לע בשייתמ אוה .רמיירפכ מ תא קרפל ליחת ירפה רמי RNA זתניס ךות DNA ןוויכמ קרפמ אוה .ומוקמב 5' ןוויכל 3' מ ךופה) -proofreading קרפל לגוסמ םג הז םיזנא .( DNA ה לש םודאה קלחהמ םג תצק דוע קרפמ אוה ןכלו -DNA המ לפונ אוהש דע -DNA תויביס סורפה תא ריבסמ הזו זארמילופה השעש לכ תא שדחמ זתנסי אלש :הכומנה III . ש בצקה תא גישי אלש ידכ יטיא תויהל ךירצ ול DNA polymerase III . ל -DNA polymerase III .םירמיירפ קוליסל תלוכי ןיא :זאגיל יעטקמ ינש רבחמ זאגיל DNA ב תאז השוע אוה -3 :םיבלש 1 . ATP ,רבד לש ופוסבש ךכ הזילורדיה רבוע AMP יטנלווק רשק תריצי ךות םיזנאל רבחתמ .םהיניב 2 . ה -AMP םע רשק תריציל םיזנאהמ רבעומ ה לש חוורבש טפסופה -DNA ןיב רשק רצונ . הדמעב טפסופ 5' הדמעב ףסונ טפסופל 5' . ב אצמנש ליגרה רשקהמ הנוש אוה הזה רשקה -DNA . 3 לידגב היהש טפסופה תא לעפשמ הז . הו ,הליחתכלמ -OH האצותכו ותוא ףקות חוורבש ה ךכמ -AMP ןיב רשק רצונו ררחתשמ יתש .היהש חוורה םוקמב תולוקלומה לכב הרקתש היצקאיר זרזמ םיזנאה ךא ,ןפוא .םייק הארנכש יטגרנא םוסחמ רובעל עייסמ אוה
:תוזארמוזיאופוט ב רבגומ חתמ רצונ ,םילידגה ינש לש החיתפ שי רשאכ לופכשה ךילהת ןמזב -DNA רוגס ןיידעש םורגל לוכי הז .החיתפה םוקמל םיבורקה םירוזאב ב םירבשל -DNA .הלפכהה גלזמ תריצעל וא ב חתמה תא םיעיגרמ תוזארמוזיאופוט -DNA .חתמה רורחשל םרוגש הלוקלומה ךותיח י"ע ב תוהזל םיעדוי םה -DNA .וילא רשקיהלו לופיקה ירוזא תא גוס I : ופסופה רשקה תא תחתופש ןיזורית תצובק ול שי יטילטקה רתאב -ב ךתח תריציל ירטסאיד -DNA ) nick עגרנ וב םייקש חתמהו וריצ לע בבותסהל ךתחנש לידגה ותואל רשפאמ הזה ךתחה .( ופוטה ,חתמה תעגרה רחאל .תמייוסמ הדימב רמולכ) ולש ןצמחה לא טפסופה תא ריזחמ זארמוזיא המ ררחתשמ אוה זאו (הליעי הרוצב עצבתת תימיכה היצקארהש ךכ ותוא םקממ -DNA . גוס II : ינש לש החיתפ הנשי םילידגה .םהינש לש היצגיל זאו לופכה לילסב
:יטוירקורפ םוזומורכב היצנימרט
לש םוזומורכ לכ E.Coli :היצנימרט ירתא ינש ליכמ TerA, TerB . TerA .ןועשה ןוויכ דגנ עיגמש הלפכהה גלזמ תומדקתה תא רוצעל ודיקפת : TerB עיגמש הלפכהה גלזמ תומדקתה תא רוצעל ודיקפת : .ןועשה ןוויכ םע ןוויכב הלפכהה גלזממ םימלעתמ םה) תוינוויכ שי היצנימרטה ירוזאל .(דגונמה דחא לכ י"ע לכושמ תויהל לוכי ךא ,םיימעפ לפכושמ אל :הפיפחה רזא ינשל הכחמו רצענ ןושאר עיגמ שימ .(ןושאר עיגמש ימ) הלפכהה תוגלזממ המ םיררחתשמ םימיזנאה ינש זאו -DNA . מ דחא רשאכ עיבצמ הז ,יתוהמ ןפואב רתוי טאל םדקתמ הלפכהה תוגלזמ ב היעב לע -DNA אתל ןמסמ הז היצנימרטה רוזאל ןמזה ותואב ךרעב ועיגה םהינש םא ךכו תאו) הלפכהה תא ךישמהל םעט ןיאו ןיקת אל והשמ זא ,אל םאו .הניקת הרוצב התשענ הלפכההש .(קדייחה ייח ה ירוזאל -Ter גוסמ םינובלח םירשקנ : Tus . לש בצמב תוראשנ תורצונש תועבטה יתש ,לופכשה ךילהת ףוסב זאמרוזיאופוטו "תובלושמ תועבט" II .הלאה תועבטה תא חתופ :םיטוירקורפל םיטוירקואא ןיב םילדבה 1 רתוי הברה שי :םיטוירקואא . DNA תוברעמש תוזארמילופ .ךילהתב 2 . DNA -ירפהמ הזתניסה תא ליחתמ :אפלא זארמילופ לבא .רמי תורשע המכ רחאל זארמילופ ותוא ףילחמו לפונ אוה םיסיסב תואמ .אתלד 3 םיטוירקורפב רשאמ תיטיא רתוי איה הלפכהה גלזמ תומדקתה . .(םינוטסיהה לש םמויק ללגב הזש םירעשמ) 4 ןוויכמ זאילקונוסקא תוליעפ השוע ימ הלגתה אל םויה דע . 5' ןוויכל 3' רפה תא ףילחמ ימ רורב אלו ה לש םירמיי -RNA . :םיטוירקואאב הזתניס ה תומכ תא םיליפכמ רשאכ -DNA תומכ תא ליפכהל םג ךירצ ה תזתניס ןמזב .םינוטסיהה -DNA םינוטסיה לש רבגומ רוציי ונשי ב ןיבלתשמש (ריהב בוהצ) -DNA םינשיה םינוטסיהה םע דחיב .(ההכ בוהצ) (ריהב לוחכ) היצליטצא םירבוע םישדחה םינוטסיהה איהש לכ אל רבכ םיניזילה זאו .םיניזילה דחאל ליטצא תצובק תפסוה -.רתוי םינשיה תמועל םישדחה תא ןמסמ הזו .םייבויח ךכ תולתכ םינגה יוטיב לע תיטנגיפא העפשה שיש איה הרעשהה .םינוטסיהה לש היצלטיצאב
:םירמולטה תיעב
ה לידגב -leading . לידגה ףוסל דע העיגמ הלפכהה ב -lagging רמיירפ שי RNA .זתנוס אלש עטקמ שי ותוקרפתה ירחאו ה ןכלו ףוסה דע עיגנ אל םג האבה הלפכהב -gap לדגיו לדגי הזה לבקנ םעפ לכבו DNA .רתוי רצק :זארמולט םיזנאה מו ןובלחמ בכורמה םיזנא -RNA סרוור תוליעפ ול שיש תריצי :זאטפירקסנרט DNA מ -RNA . ה עטקמ -DNA אצמנש לכב טעמכ ףצר ותוא .ומצע לע רזוחש רצק ףצרב ןייפואמ םימוזומורכה ףוסב .םימוזומורכה ל ,זארמולט םיזנאה -RNA ךכו .םירמולטבש םירזוחה םיפצרה םע םיסיסב גוויז רוציל תלוכי שי ובש ל רשקנ םיזנאה -DNA תזתניסב ליחתמ םיזנאה הרישקה רחאל .הצקבש DNA לע -ה ךס RNA -תנסמו ,טיילפמט םע םיסיסב יגוויז רצוי ,הנימי קילחמ אוה זאו .(דורוב ןמוסמ) רזוחה ףצרה תא ז ה תא ךיראמ אוה ךכו בושו בוש ףצרה ותוא תא זתנסל ךישממ אוה זאו רצי עגרהש ףצרה -DNA אוה . ךרעב זתנסמ 500 לידגב תירוק זאו .הככ םג ךוראה לידגה תא ךיראמ אוה .םוזומורכה הצקב םיסיסב ידימ רצקה ו רמיירפ זתנסמו רשקנ זאמירפ :הליגר הזתניס -DNA ולש הזתניסה תא ךישממ זארמילופ ב רסח ראשיי ןכ רבד לש ופוסב .ףוסה דע -DNA םיפצרל ףופחי אלו םירמולטה יפצרל ליבקי אוה ךא .םיבושח :הרעשה .םירמולטה ךרואב יולתה ,רדגומ םייח ךרוא שי םיאתלםימגפ ןוקית
ב
-DNA
:תוינטנופס תויצטומ
לש תויועט DNA polymerase : ה תלוכי -proofreading רמולכ .תויועט שי ןיידע לבא קוידה תא תרפשמ םנמא הלפכה רוזחמ לכב תוסנכומ 300 .תויצטומ רתוי תוסנכומ (סרטס) םימיוסמ םיבצמב .יארקא ןפואב תויועט :תויצזירמוטואט מב הסנכהמ תועבונש תויועט ךלה לש םינוכנ אל םירמוטואט לש הלפכהה ה -DNA אל רמוטאטהש איה היעבה . .םיאתמ םיסיסב גוויזב סנכנ :אמגוד A-Imino גוויזב םג סנכיהל לוכי םע םיסיסב C . :היצנימאיד ב -C ל ךופהל ול םרוג ונימאה תצובק קוליס : -U םע םיסיסב יגוויז תושעל לוכיש A . ב -A ןיטנסקופיהל ךפוה : יגוויז תושעל לוכיש םע םיסיסב C . G ל ךפוה : -xantine . ל קר -T יד ןיא -.היצנימא ב יעבט ןפואב םימייק אל םילבקתמש הלא לכ -DNA שיש ןוקיתה תכרעמל םינמסמ םה הז ןפואב . עודמ הרעשהה םג יהוזו .היעב U ב עיפומ אל -DNA לכ אוהש תורמל -ל המוד ךכ -T . הד :היצנירופ ירופ לש קוליס ן G/A לש הזילורדיהמ האצותכ ב רוזא לבקתמ זאו .ידיזוקילגה רשקה -DNA .סיסב םוש ליכמ אלש :היצדיסקוא ב סיסבל ןצמח תפסוה -DNA ל רשפאמ .ןוכנ אל םיסיסב גוויז רוציל לוכי אוה זאו -G םיסיסב גוויז רוציל םע םג A םע קר אלו C . :היצליקלא
.םידיטואילקונל ליתמ תוצובק תפסוה .םינוכנ אל םיסיסב יגוויזל םרוג םג הז הצובקל ותכיפהו סיסבה לועפשל םורגל הלוכי היצליקלא א רתא רצונו בזוע אוה זאו הבוט תבזוע -.ינירופ
:תויתביבס תויצטומ
analogs Base : הנבמב םימוד רשא םיימיכ םירמוח תושעל םילגוסמ ךא םימייוסמ םידיטואילקונל יסב יגוויז .םינוכנ אל םיס Intercalating agents : הקחרהל םימרוגו םיסיסבה תוגוז ןיב סנכיהל םילגוסמ ןכלו תוחוטש תועבט רפסמ םהלש םירמוח ב םייוניש יללכ ןפואב .םהיניב -DNA .לופכשב עוגפל םילוכי Ployaromatic hydrocarbon : בר ,תוירגיסב תאצמנש הלוקלומ רוציל הלוכיש תיתעבט ה םע םייטנלווק םירשק -DNA . :םיפסונ םילקימיכ ה םע רישי רשק תרצוי אלש םירמוח תצובק -DNA לש הריצי זוריזל םימרוגה םירמוח . reactive oxygen's ל קיזמ םהלש רבגומ רוציי ךא ,ףוגב יעבט ןפואב םירצונ םנמאש -DNA . :הנירק ארטלוא תונירק תנירק .תוקזח דואמ ןה לוגס UV רוג תמ תריציל רצק םהיניב קחרמה ,ךכמ האצותכ .םיכומס םינידימיריפ לש םירמיד תוליעפב עגפי הזו רתוי DNA polymerase .
ןוקיתה ינונגמ
:
Direct repair
:
ב היעבה תא יפיצפס ןפואב ההזמש םיזנא -DNA .התוא ןקתמ טושפו 1 םיזנא . photolyase ב -E.Coli פ לש םירמיד קוריפל םרוג רשא .םינידימירי .הז גוסמ תויצטומל םרוגש הז אוה רואה יכ ינויגה הזשו ,רוא יאנתב לעופ םיזנאה 2 םיזנאה . methyltransferase ב תויצליתמ ההזמ רשא -DNA .וילא ןתוא ריבעמו
Mismatch repair
)
MMR
:(
םינובלח םנשי .הלפכהה רחאל רצק ןמז דבועש ןונגנמ לש רוזא םיהזמה mismatch אל דיטואילקונ תסנכה ה הנבמ ונממ האצותכ .םיאתמ -DNA ךכו ילאמיטפוא אל לידג תא קרוס ,רוזא ותואל רשקנ ןובלחה .ההוזמ רוזאה ה -DNA ה תדוקנ דע ותוא קרפמ ,רצונש שדחה -mismatch :ש חוור רצונ זאו , DNA polymerase לוכי .שדחמ אלמל ?ןוכנה לידגה תא תוהזל עדוי אוה ךיא אל םיטוירקואאב ימה לש ןונגנמ ואצמ שדחה לידגהש םיחינמו היצליתמ ןתינ ילוא ךכו ןשיה לידגהמ םיחוור רתוי הברה ליכמ .םהיניב לידבהלBase Excision Repair
)
BER
:(
ב תונטק תועיגפ לע דבועש ןונגנמ -DNA . ולש ןוקיתו סיסב תאצוה ןוכנ אלה סיסבה רבוע flipping המ הצוחה -DNA . ה תא קרוסש זאליזוקילג םיזנא ונשי -DNA ה ךרואל -minor groove U תא ההזמ יפיצפס זאליזוקילג ונשי םגפ לכל .םגפה .ותוא ההזמש (סיסבל רכוסה ןיב) ידיזוקילגה רשקה תא קרפמ הזה םיזנאה ב רוזא לבקתמ זאו -DNA הז סיסב ןיא רשאכ .סיסב ליכמ אלש נא םיזנא :םיפסונ םימיזנאל ןמיס ה לידג תא ךתוחש זאליקונוד -DNA דיטואילקונ םיפסומ םיליגרה םימיזנאה זאו םידדצה ינשמ .לידגל ותוא םירבחמו
Repair
Excision
Nucleotide
(NER)
:
ב רתוי םילודג םימגפב לופיטל דעונ -DNA ונשי . :םיסיסבה ןיב רמידה רצונ ובש רוזא לש יוהיז ה לש יבחרמה הנבמב יונישמ האצותכ -DNA זאו . םידיטואילקונ רפסמ ךתוחש זאילקונודנא נשי .זאקילה י"ע הצוחה קלוסמ עטקמה ,עטקמהמ רחאלו -.עטקה לש שדחמ הזתניס שי ןכמ םיזנאה ןכלו יפיצפסה העיגפה םוקימ לש יוהיז ןיא תא תואדווב דירוהל ידכ םיסיסב המכ דירומ .םיעוגפה םיסיסבה Response -UV ב -E.Coli : 1 . UvrA ו -UvrB ה תא םיקרוס -DNA תא םישפחמו .םגפה 2 . UvrA ו סקלפמוקה תא בזוע -UvrB ה תא חתופ -DNA .םגפה דיל 3 . UvrC םע סקלפמוק רצוי UvrB רצויו nicks ינשב כ) םידדצה 7 םיסיסב upstream ו -downstream .( 4 . DNA helicase UvrD םוגפה לידגה תא ררחשמ ו -DNA Pol I ה תא םינקתמ זאגילו .חוור .ךילהתב םיברועמש םירחא םיבר םינובלח םנשי םיטוירקואאב :םיטוירקואאב ןוקית יכילהת זתנסל םיעדויש םיבר םימיזנא שי DNA דואמ תויביס סורפ הנשי םלוכל .ןוקיתה יכילהתב םיברועמש ןוקיתה ןמזב תויצטומ סינכהל סנרטניא אתל שישש םירעשמ .לודג דואמ אל םהלש קוידה .הכומנ .ינויצולובא ןורתי םיאתל ונתיי ילואש
Double strand repair
:
ה תריבשב לפטמש ןונגמ -DNA ינשב וב םילידגה םילידגה רבשהמ האצותכ .תינמז קוריפ םרגנ .תויעב רוצילו קחרתהל םייושע ,םימיזנא י"ע רבשה רוזא לש ףסונ .םידדוב םידיטואילקונ םידחוימ םימיזנא י"ע היצגיל תירוק זאו ה יעטקמ תא םירבחמש -DNA " :הזל הז end joining ." ) A וקרופש םיסיסב רפסמב הלוע םגפה ןוקית( רשא רוזא יכ איה הרעשההו ,וזתנוסי אלו .קלוסיש ףידע תויעב ליכמ ) B יפל םלשומ רסחה רוזאה םימעפל ( .גולומוהה םוזומורכה י"ע ןוקית DNA -םשי .ןורחא ןוקית ןונגנמ ןיעמ :תוזארמילופ תויעב םע דדומתהל םיעדויש תוזארמילופ .תועיגפה תורמל זתנסלו
היצניבמוקר
:הזוימב תפלחה DNA . :ןוקיתב .םוסח לופכש ןוקיתבו םילידגה ינש לש הריבש הנשי רשאכ .ינשה םוזומורכל רבעומ דחא םוזומורכמ עדימ :האצות לוכי םיפולחש רפסמ .תויחא אל תודיטמורכ יתש תוברועמ ףולחש לכב ותוא ךרואל שחרתהל םי טנלוויב לכש ךכ , 4 .תוברועמ תויהל תויושע תודיטמורכה Synaptonemal complex ןושארה קלחב הנבנה לודג ינובלח סקלפמוק : הזאפורפ לש I .םיגולומוהה םימוזומורכה ןיב גוויזה תא ךוותמו עצבתת םזומורכב םירוזיא הזיאב רידגמ סקלפמוקה :היצינבמוקר NCO-Non Cross Over
אל םהב םירוזא , םהבש םינטק םירוזא םהיניבו .היצניבמוקר עצבתת .שחרתת ןכ איה
:ךילהתה
ה ךותיח -DNA ודה -:ילידג ןובלחל Spo11 ןיזוריטהו ליעפה רתאב ןיזוריט תצובק שי ופסופה רשקה תא ךתוח ינש תא ךתוח ןובלחה .ירטסאיד ה ילידג -DNA יב יטנלווק רשק תריצי ךות .םהינ :דיחי לידג תריצי ה לוכיע -DNA רוציל דעונ DNA דח תושעל לוכיש ילידג invasion ה לא -DNA .ינשה :לידגה תשילפ ןובלח RecA ה תא ליחשהל יארחאש הז אוה -DNA דחה -ה ךות לא ילידג -DNA ינשה םוזומורכה לש רוצילו D-loop . RecA : ולש תודיחיה ,רמיטלומ רצויש ןובלח נ ה לא תורשק -DNA דואמ סקלפמוק תורצויו סנכנ דחאה ודיצמש לודג DNA וד דיצמו ילידג רחאה DNA דח תיגרנאב שומיש ידכ ךותו ילידג ATP , RecA .םיסיסבה יגוויז תא ףילחמ םה יכ םפצרב םימוד דואמ םה םילידגה יגוויז תפלחה ןכלו םיגולומוה םימוזומורכ
לכ הניא םיסיסבה -.תיתייעב ךכ י ש נ תורשפא ה ש םג ורבעי םיקוחר םילידג .ףולחש Holiday Junction : םינייצמ םילוחכה םיציחה .ימ םע ףלחתה ימ לש ופוסב ובש בצמ ראתמ ילאמשה לדומה וניא הזה לדומהש רבתסהו ,ףולחש ןיא רבד ןיא ובש בצמ ראתמש דיחיה לדומה .ןוכנ אוה ךולחש SDSA .(תחתמ עיפומ)
ion
Gene convers
:
.הפלחה תלבקתמ זאו ףולחשה רוזאב קוידב ןג ונשי םימעפל ךמס לע דחא גולומוהמ ףצר תפלחהל םורגת ןוקיתה תכרעמ .תיארקא היהת הפלחהה .רחאה גולומוהה לש תינבתה ה תלפכה ךלהמב ןוקית יכילהת -DNA הז ןונגנמב םישמתשמ .גולומוהה םוזומורכה יפל הזתניסל יגפ ןוקית :הלפכהה גלזמב תוע ה לש קוריפ ונשי -DNA דחל .ינשה םזומורכה לא שלופ רשא לידג .תיגולומוה היצניבמוקר י"ע םקוש הלפכהה ךילהת
:םינוזופסנרט
יעטקמ DNA .םוקמל םוקממ רובעל םילוכיש transposons DNA only : עטקמ DNA כ לש םירצק םיפצר שי ויתווצקבש -20 .םיכופה םינוויכבו םיהז םיסיסב :ארקנה תוחפל דחא ןג דדוקמ הזה עטקמה ךותב transposase .םונגה יבחרב גלדל לוכי זה רבדה . הלאכ םנשי םיפסונ םינג םיליכמ וילא ףסונבש תודימע םינקמה םינג םה רתויב םימסרופמה .הקיטויביטנאל :םונגב רבעמה רצוויהל ליחתמ דחא עגרב ןובלחה transposase לע) םרוגה (הזה ןגה ךמס ה ךותיחל -DNA תווצקב תא ומצעל ךתוח ןובלחה) ה -DNA ה עטקמ זאו ( -DNA .רחא םוקמל רבוע תומרוג הלאה תוזוזתה לש הקתשה/הלעפהל .םונגב םינוש םירוזא ההובג רתוי תודימע םזינגרואל רשפאל הלוכיו םזינגרוא ותוא לש תונושה תא הלידגמ וז הנוכת המב .היצולובאה ךל ב :הרעה -DNA םניא םיעטקה (רבוע עטקמה וילא) הרטמה inverted .ןוויכה ותואל םה אלא ךות םג תורקל לוכי הזה ךילהתה הלפכה ידכ םוזופזנרטה זאו : ףסונ םוקמל ומצע תא לפכשמ .םוזומורכה ותואב
Retroviral like transposomes : ורטר לע ססובמ -.םיסוריו עודי לש תויראש םונגב ונל שיש םמצע תא ץיפהל םילגוסמה םיסוריו .םונגב DNA רציימ RNA תלא םגו זאטפירקסנרט סרוור םיזנאה ה . -RNA ל ךפוה -DNA שומיש ךות סרוור םיזנאב זאו ,זאטפירקסנרט .רחא םוקמל רדוחו םונגל סנכנ אוה Nonretroviral retrotransposons : קותעש ונשי הליחת RNA ה , -RNA םיוסמ רוזאל רבחתמ ב -DNA .זאטפירקסנרט סרוור םיזנאל סיסבכ שמשמו רצונ זאו DNA .םונגה ךותל המינפ סנכנש :תמדוקה הטישל וזה הטישה ןיב לבהה 1 ה . -RNA ה לא רבחתמש הז אוה -DNA אוה כ"חא קרו .זאטפירקסנרט סנוורל תינבתכ שמשמ 2 ה . -RNA טפירקיפסנרט סרוורל דדוקמ אל אלא זא .םיזנאל םידדוקמש םונגב םירחא םירוזאמ ותוא לבקמ
קותעשה ךילהת
םיאתב קותעש לש דחא בלש שי יטוירקורפ RNA ובו ןיערג שי םיטוירקואאב .ןובלח תריציל ךישממ רשא ה קותעש שחרתמ -RNA רפסמ כ"חא רובעל לוכי רשא לע םינוש םיכילהת -ל ךופה-ל תנמ -RNA אוה זאו ,רגוב אצוי אוה םשו המסלפוטיצה לא ןיערגהמ הצוחה .םגרותמ בלש :םיבלש ינש ןיב הדרפה הנשי השעמל תפטעמ יכ םירובס .ןובלחה תריצי בלשו תורגבתהה ןיב לידבהל ידכ החתפתה ןיערגה RNA ל רגוב וניאש -RNA .םיכילהתה לכ תא רבע רבכש RNA אל רגוב אל תוא דירפהל ךרוצ שי ןכלו םגרותמ תויהל יואר ו .תמגרתמש תכרעמהמ רודמ הנוכת הריבעמש תיתשרות הדיחי :ןג רצוי רשא יטנגה רמוחב רוזא והז .רודל ןג לכמ :יסאלקה לדומה .הליעפ הלוקלומ .רחא ןובלח םילבקמ רוציי םונגהמ ןטק דואמ רוזא קר השעמל כ ,ןובלח רבד לש ופוסב -1% . ןיב םילדבה DNA ל -RNA : ב -RNA םייק U םוקמב T ב -DNA . ב -RNA םוקמב זוביר אוה רכוסה ב זוביריסקואיד -DNA .
:םיטוירקורפב קותעש
ה עטקמ לכ אל -RNA ינשב .ןובלחל ךפוה רצונש ה ידיצ -RNA :םירוזא ינש םנשי 5'utr ו -3'utr .םימגרותמ םניאש ה ילידג ינש ןיבמ -DNA לידג אוה דחא , טיילפמטה -antisense . ה לידג אוה ינשה -coding ה תלוקלומל ההז אוהו -RNA ה דבלמ) תרצונש -U ה םוקמב -T :םג ארקנ .( sense strand . ב הדוקנה -DNA רצוויהל ליחתמ הבש RNA :תארקנ +1 :ארקנ וינפלש דיטואילקונה . -1 ןיא) רפסמ הדמע 0 .(
ה יגוס ןווגמ -RNA : ה תולוקלומ לכ ךותמ -RNA כ ,אתב -% 3 םה mRNA ו -% 70 םה rRNA מוזוביר) הברהל קוקז אל אתה .(םי mRNA ומכ .םינובלח המכ רצייל ןתינ דחא ךמס לע יכ תומכ ,ןכ ה -mRNA .םירצוימש םינובלחה תומכב הטילש י"ע תוליעפה תא רקבל תפסונ ךרד הניה אתב תונוכת RNA : RNA ה לשמל) ינושילש הנבמל וליפאו ינוינש הנבמל לפקתהל םילוכי -tRNA .( RNA קאיר זלטקל םילוכי .תוימיכ תויצ
Initiation
:
Cis elements ב רוזאה לכ : -DNA הלחתהה תדוקנל לעמ אצמנש :ארקנ promoter ה תזתניס ןוויכ תא עבקי אוהו -RNA תאו ה תא רוציי לידג הזיא רידגמ השעמל אוה .הלש תומכה -RNA . סוזנצנוק יפצר ינשב ןייפואמ אוהו טושפ דואמ הנבמ אוה רוטומורפה םיטוירקורפב : 1 . TATA box כ אצמנ : -10 םיסיסב upstream יפצר הברה וב שיו קותעשה תליחתל TA . 2 . -35 box אצמנ : 35 םיסיסב upstream .קותעשה תליחתל ה ינש ןיב קחרמה אוה רוטומורפב בושחה ישילשה טנמלאה -boxes .(עובק דימת וניאש) הלאה ה ינש ןיב קחרמה תוגלפתה -boxes : ase RNA polymer : קר שי יטוירקורפ םיאתב RNA -ה יגוס לכ תא זתנסמ רשא דחא זארמילופ -RNA .שיש תת המכמ בכרומ הז םיזנא והז .תוינובלח תודיחי .(אמגיס םע דחיב םיזנאה) םיזנאולוה מ רתוי ההובג תורידתב תויועט השוע אוה ךא ,ההובג תויביססורפ ול שי -DNA polymerase קוקז אל . מיירפל לע ר -.הזתניס ליחתהל תנמ תת :אמגיס הדיחיה ל דחא דצמ תרשקנ אמגיס -RNA polymerase יפצר לא ינש דצמו cis ה) רוטומורפב -boxes ןוכנה םוקמה לא םיזנאה תא האיבמ איה לכבו ( ה םע רשק תרצוי איה תאצמנ אמגיס רשאכ .תוליעפל -DNA לא ותוא תעבקמו .םיזנאה ב קחרמה םהב םירוטומורפ ה ןי -boxed קוידב אוה 17 אמגיס לש תויניפאה , ה לא תילאמיטפוא היהת -DNA ףצרל בורק רתוי רוטומורפה ףצרש לככ . .תויניפאה תא םילידגמו רשקה תא םיקזחמש ןמימ ירשק רתוי ויהי ,סוזנצנוקה :אמגיס ידיקפת לש תויניפאה תרבגה RNA polymerase .םימייוסמ רוטומורפ יפצרל יניפאה תנטקה לש תו RNA polymerase .םירוטומורפ םניאש םירוזאל ה לש לופכה ילילסה תחיתפב עויס -DNA .("זאקילה תוליעפ")
.אמגיס לש דחא גוסמ רתוי שי יטוירקורפ אתב שי םינגה בורב σ70 םינג םנשיש וליג לבא .רחא גוסמ אמגיס תרשקנ םהילאש ה לע בשייתמ םיזנאהש רחאל -DNA שי -DNA melting : לילסה לש החיתפ .לופכה לש קותעש תיעוב תחתפנ ~14 םיזנאל תמרוג אמגיסה .םידיטואילקונ רוטומורפה רוזאל קזח דואמ רבחתהל רחאל קרו לש קותעש 8-9 bp אמגיסש ונממ תררחתשמ ו ךישמהל לוכי אוה .קותעשב האלה
Elongation
:
ה -RNA polymerase ףיסומ ,רצק עטקמ חתופ ,םדקתמ לקונ ה תרשרש תא ךיראמו םיאתמ דיטואי -RNA ןאכ םג . ןוויכמ איה הזתניסה 5' ןוויכל 3' . ה םע רבחתמ אפלא הדמעב טפסופה -OH לידגה הצקב ופסופ רשקב המרב המוד ךילהתה .ירטסאיד ב הרוקש המל תיראלוקלומה -DNA . תולוכי ןיא םיזנאל proofreading יהוז לבא ,תובוט צק םייח ןמז םע הלוקלומ תולוקלומ ןנשיו ,ר RNA תופסונ .ןיקת ןפואב ורצווייש ב חתמ -DNA : ב חתמ רצונ -DNA ודה -.קותעשה תיעוב תחיתפ בקע ילידג ה לופכש ךלהמב -DNA ופוט ןנשי -.םימיזנא הלאכ ןיא הז ךילהתב וליאו ,חתמה תעגרהל תוזארמוזיא ב רצונש חתמה יכ ךירצ אלש םירעשמ -DNA ה כ"דב םגו ינמז אוה -RNA polymerase יעטקמ זתנסמ RNA ל בר חתמ םרגנ אל ןכלו םיכורא דואמ אל -DNA . :זארמילופהמ האיציו הסינכ ה -DNA תינפת השועו םיוסמ ןוויכמ עיגמ לש 90 .לופכה לילסה תחיתפ לע לקמ הארנכ הזה בוביסה .תולעמ שי החיתפה רוזאב Rudder -.םיחותפ םילידגה תא קיזחמה ןובלח ש רחא רתאב יטילטקה רתאה לא םידיטואילקונ םיסנכנ םיזנאה ל ה לידג לא םירבחתמו (קוריה ץחה ןוויכב) -RNA רוזאה .ךראתמה חותפה לש הלפכה תיעוב ~25 bp כ הסכמ םיזנאה . -40 bp ב -DNA , .לודג דואמ םיזנא והז
ש ןמזב -RNA polymerase אובל לוכי ,רוטומורפה תא בזע רבכ דחא בשייתהלו RNA polymerase ךרדב .הזתניסה תא םג ליחתהלו ףסונ .ינשה ירחא דחא ותוא םיזתנסמש םימיזנא המכ שי דחא ןגל ללכ הברה :ליעפ דואמ היהי ולש רוטומורפה ,ןובלח הברה ונממ ךירצש ןג .וילא ההובג דואמ היהת אמגיס לש תויניפאהו וכרואל ורשקיי םימיזנא
Termination
:
ילנימרט לש םיגוס ינש :תו Rho dependent : ה לא רשקנה זאקילה אוה ור ןובלחה -RNA וכרואל םדקתמו זתנתסמה לוצינ ידכ ךות ATP ה תא ךשומו סקלפמוקל ףוסבל עיגמ אוה זאו . -RNA ה םג ךכמ האצותכו וכותמ -RNA polymerase .ררחתשמ ה לא שרקנ ורש וליג -RNA polymerase בלשב .קותעשה תליחתב רבכ ידע) םיוסמ ה לא רבחתמ אוה (יתמ רורב אל ןי -RNA ליחתמו רצונש קותעתה םויסל רושקה רוטקפהש תוארל ןיינעמ .וכרואל םדקתהל לש זובזב ןיעמ הפ שי .קותעשה תליחתב רבכ םיזנאה לע בשייתמ .ךילהתה תליחתמ םיזנאה לע בשויש ןובלח loop Hairpin : עטקמ שי ןגה ףוסב DNA ל דדוקמש -RNA יל לוכי רשא רוצ לש ינוינש הנבמ stem&loop םידיטואילקונ ףצר וירחאו , גוסמ U . ה ןיב תוביצי רסוחל תמרוג האלולה RNA polymerase ןיבל ה -DNA ה ףצר ,ףסונב .תיבחרמ עירפמש הנבמ והז ןכש , -U רתוי שלח רשק ילעב םיסיסב יגוויז וניה האלולה רוזאב ה ןיב -DNA ל -RNA הלא ינשו (ןמימ ירשק תוחפ) םימרוג ה םע סקלפמוקהמ םיזנאה לש רורחשל -DNA .
:םיטוירקואאב קותעש
ה .וכותב השענ קותעשהו ,את ןיערג שי םיטוירקואאב -RNA כ רצונ -pre-mRNA רובעל ךירצ רשא .םינוש םידוביע :קותעשה םוקימ םיהכ םירוזא שי ןיערגב -ה ם-הב -DNA תמועל סוחד רתוי ד תוחפ אוה םהב םיריהב םירוזא תוחפ אוהש הפיא .סוח .תורקל לוכי קותעשה סוחד ה -nuclear pores םתביבסב םיליכמ DNA הנשיו .סוחד תוחפ .(קורי עבצ) קותעשה ךילהת רובע הלא םירוזאל הפדעה םיליכמ (בוהצ עבצ) רתוי םיקוחרה םירוזאה DNA וניאש ה לשמל ,קתעושמ -origin of replication ןובלח רציימ אלש ירוזא םגו ה תיברמ ,השעמל .םירמולטה -DNA .קתעושמ וניא לדומ -1 : ה לש הטסה היהת םיוסמ ןג לש היצביטקא בקע -DNA ה רוזאמ -OFF ה רוזאל -ON ה רוזאב . -ON .קותעשל םישורדה םימרוגה לכ םייוצמ לדומ -2 : ה לא םינובלחה תא זיזהל טושפ רתוי -DNA ה ןכלו ךפהל רשאמ -DNA יוצמ רבכ קתעושמה ה ירוזאב -ON .
:זארמילופ ימיזנא רפסמ RNA polymerase I זתנסמ : rRNA (םימוזוביר) RNA polymerase II זתנסמ : mRNA
RNA polymerase III זתנסמ : tRNA . :יתועמשמה לדבהה .המוד דואמ םתשולש י"ע קותעשהו ול םייפיצפסש םינובלח שי םהמ דחא לכל ה בנז -CTD גוסב שיש II : 20-50 לש תורזח 7 מוח .ןוחרז רובעל תולוכי רשא ונימא תוצ
Initiation
:
ה -DNA .םינוטסיה תרזעב לפוקמ יטוירקואאה םאה רורב אלו לופיקה לש החיתפ שי הלחתהב :םידיקפת ינש שי םינוטסיהל .םקלחב קר וא ירמגל םיקלוסמ םינוטסיהה 1 .(םיקלוסמ תויהל םיכירצ ןכלו) קותעש םיענומ . 2 אוצמל םיזנאל םירזוע . .קותעשה תליחת םוקמ תא :סנרטב םיטנמלא ל םירשקנש םינובלח -DNA יוצמ םתוא דדוקמש המו) ותלועפ תא םירקבמו דואמ םיטנמלא תויהל םילוכי .(ןגה םוקממ קוחר ה לופיקש םיקוחר -DNA הברקל םתוא איבמ .קותעשה םוקמל תיזיפ Mediator : ל רשקנ אלש ןובלח -DNA ךוותמ אלא טקפה ראש לכ ןיב תכרעמ ןיבל םירחאה םירו .קותעשה :הרעה ךרדב לא םירשקנ סנרטב םירוטקפה ללכ ה -major grooves ב -DNA רשקיהל לק רתוי יכ .תוילאנויצקנופ תוצובק רתוי םש שיו םשל ב םיטנמלא -Cis : ףצר שי םיטוירקורפב ומכ TATA box שי ודיל .רוטומורפב BRE רשקנ וילא ףצרה , TFIIB וא םירוסנהנא . םגו ,םינורטניא ךותב ,ןגהמ דואמ םיקוחר תויהל םילוכי םירוסרפר downstream .ןגל תויהל םילוכי ומצע ןגה ךותב תא םירקבמש םירוזא ה .קותעשה core promoter היהי ללכב םאה עבקיי .ןוויכ הזיאל זא ןכ םאו קותעש רתוי םיקחורמה םיטנמלאה .קותעשה תומכ תא ועבקי ל רוטומורפ ףא תעברא לכ תא ליכמ א .םיטנמלאה TATA box : אצמנ כ"דב 35 -25 םיסיסב upstream קחרמהמ הייטס שי רשאכ .קותעשה תליחתל הדוקנב אל קותעש תלחתה לבקנ םימעפל .םיקיתעת תוחפ לבקנו קותעשב עגפי הז ,ילאמיטפואה ב קתעשל ליחתי םימעפח םיזנאה אלא ,וזה -1, -2, +2 וסמ תוגלפתה הנשי . תליחת תדוקנ לש תמי
לכ וניא וזה המרב קויד .קותעשה ללגב) םכרואב םינושה םיקיתעת רצוויהל םילוכי לבא .בושח ךכ ל ףסונה דוביעה -pre-mRNA .(רצונש :הרעה ןיא םינגהמ קלחב TATA box לש תורזח הברה םיליכמ םה לבא C ו -G רוטומורפה ירוזאב םה .קותעשה תליחתל רשק םהל שיש םיחינמו .םינוש םירתא המכב קותעש ליחתהל םילגוסמ :ךילהתה ה תחפשמל םיכייש ךילהתב םיברועמש םירוטקפה -TFII ל רשפאיש ינובלח סקלפמוק םינוב םה . -RNA polymerase ל רשקיהלו עיגהל -DNA . TFIID : ה תא וכותב ליכמ
-=TATA Binding Protein
TBP ל רשקנ רשא -TATA box ה ףופיכל םרוגו -DNA תפו םג םנשי .ותחי TAF=TBP Associated Factors
ש :םהידיקפת 1 ל םירזוע . -TBP ה תא אוצמל -TATA box . 2 רותב םיאבה םירוטקפה תא יבהל םיעייסמ . . ל םירשקנ םינמוסמ םינוטסיה -TAF . TFIIA : ה םע ביגמ -TBP לש TFIID לש רושיקה תא בציימו TBP ל -TATA box תמיסח י"ע repressors רוטקפ לש י .קותעש TFIIB : ל רשקנ -BRE רושיקב עייסמו TFIID םיזנאל RNA polymerase II . TFIIF : םיזנאה םע סקלפמוקב עיגמ RNA polymerase II רזועו ןיבו וניב רושיקל FTIIB . E TFII : תרישקל עייסמ TFIIH זאניקכ ותוליעפ תא רשפאמו ה בלשל רבעמל םיזנאה רורחשל םג ץוחנ .זאקילהו -elongation . TFIIH : תוליעפ") קותעשה רוזא לש החיתפ עצבמ בנזב ןיזוריטהו ןירסה ירייש תא ןחרזמ .("זאקילה ה -CTD לש תויניפאה תא הדירומ היצלירופסופ , םיזנאל רשפאל ידכ רוטומורפה רוזאל םיזנאה ה בלשל האלה ךישמהל -elongation תיברמ . ךילהתב םיררחתשמ קותעשה ירוטקפמ סופ .היצלירופ :הרעה ב תויצטומש יוהיז -TFIIH היעבל ומרג ןוקיתה ןונגנמב NER . ה -DNA תעשה ירוטקפמ דחאל רשקנו לפקתמ הזו ,קו .קותעשה ךילהת תטאה/תרבגהלו רוטומורפה בוצייל רזוע
Elongation
:
.הזתניסה תא עינמה חוכה איה אפלא טפסופ ןיב רשקה תחיתפל היגרנאה
Termination
:
CTD : .וילא םירשקנ םיינובלח םירוטקפ דואמ הברה ל םירבחתמ היצנימרטל םיארחאש םירוטקפה -CTD תליחתב רבכ היצנימרטה רוזאל עיגמ םיזנאהש עגרב .קותעשה ל -cleavage & poly-A signals :תיסחי רצק םידיטואילקונ ףצר) 5-6 (םיסיסב ב וילא םירשקנו ותוא םיהזמ םירוטקפה -RNA זתנוסש רחאל . ה תלוקלומ לש ךותיח םיעצבמ םירוטקפה ,רושיקה -mRNA , downstream כו) םהלש רושיקה רתאל ך ב לכומ היצנימרטה ףצר -mRNA .( ה -RNA polymerase הש ךכל עדומ אל -mRNA ונממ ךתחנ ה ךותיח רחאל .הזתניסב ךישממ אוהו -mRNA ןובלח רשקנ תיטילטקוסקא תוליעפ ול שיש (םודא ןמקפ) ףסונ אוה : ה תא לוכאל ליחתמ -RNA קיפסמ עיגמ אוהשכ .ותוא קרפלו סקלפמוקה לש רוערעל םרוג ולש קוריפה ,םיזנאה לא בורק המ לפונ םיזנאה זאו -DNA . :העיתפמ העפות יעטק םג םירצונ ,ןגה לש רכומהו ךוראה קיתעתל ףסונב RNA רוזאב םירצק יקיתעת םג ,םהילא ףסונבו .רוטומורפה RNA לידגב) ךופהה ןוויכל םירצק ) קותעשה תוינוויכ תא עבוק רוטומורפהש עודי יכ עיתפמ הז .(!ינשה The antisense transcription .( תושגנתה DNA ו -RNA :זארמילופ ה םא -DNA polymerase שגופ אוה הלפכהה גלזמבו םדקתמ RNA polymerase זתנסמש RNA ה לש הליפנל םרוג אוה זא והשלכ -RNA polymerase המ -DNA ה תלוקלומ תא חקול םג אוהו -RNA זתניס אוהש .ולש הזתניסל רמיירפכ הב שמתשמו
דוביע
mRNA
המ דרומ םייק היה ןכש עדימ וא ,וילא ףסומ םונגב םייק היה אלש עדימ םהבש םיכילהת -mRNA .
Capping
:
הצקב הנבמ קותעשה רחאל ףסוותמ 5' ליתמ ליכמש ןינאוג ובש הדמעב 7 ה תפסוה יבלש . -cap : 1 ה הצקהמ אמאג טפסופ לש קוליס . 5' ב -DNA ) phosphohydrolase ( 2 בש אטיב טפסופל ןינאוגה לש טפסופה ןיב רשק רוביח . -DNA ) guanylyl transferase .( 3 הדמעב ליתמ תצובק תפסוה . 7 ) ןינאוגה לש methyl transferase .( ה ךילהת -capping שכ רבכ הרוק ה -mRNA המ הצוחה ץבצבמ -RNA polymerase . ה לכ -CTD ירוטקפ שי capping ה תליחתש עגרבו , -RNA הצוחה אצוי םיפיסומו אמאג טפסופ לש קוריפ ול םישוע ,וילע םיבשייתמ םה ,םיזנאהמ .היצליתמו ןינאוג :הרעה ה -rRNA הו -tRNA םיליכמ אל cap ל יכ -RNA polymerase םהלש בנז ןיא CTD כלו םירצויש םינובלח םהל ןיא ן capping . םנשי mRNA םירכוסה לע םג ליתמ תוצובק םהל תופסומש ה ידיקפת -cap : קוריפ בכעמ RNA ה ןוויכמ -5' :ןובלח רשקנש ללגב cap binding protein . ה -cap ץירממ splicing .םוגרתו
Poly Adenylation
:
לש ךורא בנז תפסוה A ה הצקב 3' ה לש -RNA . ה לע םיבשייתמ ,קותעשה ךילהת םויסב -RNA ירוטקפ
CPSF=Cleavage and Polyadenylation factors ה לע
-RNA
ו -CstF= Cleavage stimulating Factor ךותיחל םימרוגו המ ולש -RNA polymerase . :םיזנאה עיגמ זאו poly-A polymerase ) PAP ףצר זתנסמה ( לש A ל עיגהל לוכיש 200-250 ה הצקב םיסיסב -3' . :ןובלחה עיגמ הזתניסה ידכ ךות poly-A binding protein
אוהו ה יפצרל רשקנ -A ל רשקנ ןובלח לכ) -12 A םינובלחה לכו ( ה לש בנזה תא םיפצמ -A . ה ידיקפת -A -poly : ה תוביצי לע רמוש -mRNA ה ןוויכמ תוזאילקונודנא י"ע קוריפ ענומ 3' .
