Aula - Praticas seguras em laboratórios de biologia molecular (2017)

BIOTECNOLOGIA BACHARELADO EM

Práticas seguras em laboratórios de

biologia molecular

Disciplina de Técnicas em Biologia Molecular

Objetivo Abordagem geral Práticas seguras, equipamentos e gestão

Laboratórios de biologia molecular

Aplicação profissional Formação de recursos humanos

Cursos / Treinamentos

Atuação / gerenciamento/ Consultoria Laboratórios de biologia molecular Concursos / seleções

Setores público e privado

Problemas comuns nos laboratórios de biologia molecular Desconhecimento/emprego Normas ou regras específicas

Heterogeneidade de atividades laboratoriais → mesma área

Carência de abordagens Instrua/Conscientize importância da segurança Falta Treinamento inicial

Registros escritos das normas

Falta Padronização de metodologias, protocolos e processos Comunicação (setores ou profissionais) Organização estrutural Desfavorável

Planejamento arquitetônico Almoxarifado Sinalização de segurança Ausência/mal distribuição dos EPs Gerenciamento de resíduos Outros...

Como esse problemas têm sido

resolvidos?

(Sistema de Gestão Laboratorial)

Normas → Práticas seguras

Gestão Laboratorial?

Aplicação de normas e medidas em ambientes laboratoriais, visando o treinamento e a instrução de profissionais para o gerenciamento seguro dos laboratórios e das atividades de pesquisa e desenvolvimento.

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Importância desse Sistema de Gestão?

Treinamento em segurança laboratorial

Geral e especifico (função/atividade/tipo de laboratório) Uso / manutenção correta de equipamentos

Qualidade e conservação Melhores condições de trabalho

Qualidade → análises e resultados

Capacitação de RH Atividades (qq ambiente laboratorial) Disciplina metodológica

Correção de vícios  modo de trabalho/operação Rastreabilidade de erros  registros operacionais

Rápida correção

Qualidade / Credibilidade  resultados (melhoria continua) Padronização de ensaios Validação e Reprodutibilidade 04

Pilares do Sistema

Definição de Responsabilidades

Definição de Responsabilidades Formação, experiência e responsabilidades

Orientador Pós-Doc Doutorando Mestrando IC e Voluntários Diretor Gerente Supervisor Técnico Estagiários/Trainee 07

Treinamento & Qualificação

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Para que serve?

Compreensão Práticas seguras de laboratório

Padronização Normas laboratoriais (gerais/específicas)

Uso, conservação e manutenção  Equipamentos

Controle de acidentes Práticas seguras; Primeiros socorros, etc.

Necessidade de Qualificação?

Alunos/profissionais Cursos, treinamentos e estágios

Equipamentos/aparelhos Validação Numa empresa → REGRA!

Credibilidade & Reprodutibilidade Qualidade

Metodologias (protocolos)  Validação

Ñ são inalteráveis → Valide seus resultados!!!

Credibilidade & Reprodutibilidade Qualidade

O Ambiente Laboratorial

bservação!

Dados estatísticos  acidentes:

• Imperícia • Imprudência • Negligência

 Leigos & Profissionais

“Necessidade de treinamentos mais rígidos em práticas seguras”

Laboratório  Ferramenta obrigatória → Biologia molecular

3 formas: • Treinamento/formação

• Pesquisa → fenômenos (demonstração prática) • Desenvolvimento

Cuidados!  Acidentes: • Agentes tóxicos/corrosivos • Agentes perfurocortantes • Agentes biológicos

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Práticas seguras em laboratórios “Conjunto de medidas técnicas educacionais que são empregadas para prevenir acidentes e eliminar condições inseguras do ambiente de trabalho.”

“Complexidade dos Experimentos No. Requisitos de Segurança ” bservação!

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Prática comum/inapropriada:

• O ideal: Requisitos de segurança  Projeto inicial

“Montagem em locais já construídos!”

Condições do ambiente laboratorial  Inseguras? • Falhas de treinamento

• Falhas estruturais → qualidade e disposição de instalações, mobiliário inadequado, EPCs, etc.

Conjunto de medidas ou ações voltadas para a prevenção, controle, minimização ou eliminação dos riscos presentes nas atividades de pesquisa, produção, ensino, desenvolvimento tecnológico e prestação de serviços.

Biossegurança

????

?

CDC (1998): Algo/ação → Dano

Perguntas importantes no ambiente laboratorial

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Qual

Onde

Acidentes no ambiente laboratorial Decorrentes: a)Fatores pessoais de insegurança

b)Condições inseguras

a) Fatores pessoais de insegurança? • Atitudes comportamentais

• Ações contrárias  normas de segurança / bom senso.  Físicos e biológicos: Incompatibilidade (homem x atividade)

• Sexo

• Medidas antropométricas • Coordenação visual e motora • Grau de atenção • Tempo de reação ao estímulos

 Psicológicos e emocionais: Comportamento • Estabilidade emocional

• Personalidade • Preocupações • Doenças

• Falta de investimento em segurança • Seleção ineficaz

• Falta de qualificação e treinamento

 Organizacionais: Gestão

b) Condições inseguras?

• Irregularidades/deficiências  ambientes laboratorial • Aparelhos • Equipamentos • Instalações • Métodos/processos • Inadequados ! 16

Risco de acidentes em laboratórios de biologia molecular

Fator humano:

Avaliações mundiais na área de Biossegurança

Riscos de acidentes em laboratórios  Evitados: A, B, C

Tipos de profissionais no ambiente laboratorial Inseguros ou de risco:

Seguros:

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Tipos de riscos no ambiente laboratorial

d) Risco químico → reagentes e soluções químicas: • Sólida, líquida e gasosa

• Absorção  intoxicação crônica e aguda • Estocagem descuidada

• Falta de planejamento • Tempo de reação

 Acidentes & Danos

c) Risco físico → fatores ambientais: • Ruídos e vibrações • Temperatura • Umidade • Radiação • Pressões anormais

e) Risco biológico → microrganismos (presentes/manipulados) • Bactérias

• Fungos • Bacilos • Parasitas

 Patogênicos

b) Risco ergonômico → maus hábitos/atitudes profissionais (psicofisiologia) • Esforço físico

• Postura inadequada • Repetição de movimentos • Ritmos excessivos

a) Risco de acidentes → cortes,queimaduras, etc. • Arranjo físico inadequado

• Equipamentos e aparelhos mal conservados • Armazenamento inadequado • Má iluminação

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Identificação dos riscos biológicos NR-32  Diretrizes para a implementação de medidas de proteção à segurança e saúde de profissionais que atuam nos setores de saúde.

a) Fontes de exposição e reservatórios

b) Via de transmissão: fonte/reservatório → hospedeiro. Via de

transmissão: direta ou indireta.

c) Transmissibilidade, patogenicidade e virulência do agente.

d) Persistência: ambiente

Classes dos riscos biológicos

Diretrizes  Trabalho em Contenção de Materiais Biológicos (CBS 2004) → 5 tipos:

 Classe de Risco I: ↓ Ri e Rc –  probabilidade de causar doenças - Ex.: Lactobacillus.

Classes dos riscos biológicos

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 Classe de Risco I

 Classe de Risco II: Ri moderado; Rc limitado – Enfermidades (humanos e animais); - Profilaxias e terapias eficientes - Ex.: Schistosoma mansoni .

Classes dos riscos biológicos

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 Classe de Risco I  Classe de Risco II

 Classe de Risco III: ↑ Ri; Rc limitado

-  Transmissibilidade e patogenicidade - Potencialmente letais

- Profilaxia e tratamentos – Ex.: Bacillus anthracis

Classes dos riscos biológicos  Classe de Risco I

 Classe de Risco II  Classe de Risco III  Classe de Risco IV: ↑ Ri e Rc

-  Transmissibilidade, patogenicidade e virulência - Letais

- Profilaxia e tratamentos - Vírus

– Ex.: Vírus Ebola

Classes dos riscos biológicos  Classe de Risco I

 Classe de Risco II  Classe de Risco III  Classe de Risco IV

 Classe de Risco especial: ↑ risco de contaminação animal /meio ambiente - Existentes no país

- Doenças humanas ou animais - Perdas econômicas - Ex.: Achantina fulica.

Aliados contra os acidentes laboratoriais 23 Individuais (EPIs) Coletivos (EPCs) Dispositivos/Produtos (Evitar/amenizar acidentes)

Equipamentos de Proteção (EP)

Equipamentos de Proteção Individual (EPIs) Uso pessoal  Integridade física e saúde  Riscos

Máscaras 1. Cabeça

Protetores faciais Protetores auditivos Óculos de segurança

Respirador facial Tocas 24

EPIs 2. Membros superiores e inferiores

Luvas de procedimentos especiais

Remoção correta das luvas de procedimento

Aplicador automático de pro-pés 3. Tronco → Jalecos/aventais 26 EPIs EPCs 1. Capelas de exaustão

Integridade física e saúde de todos  Riscos

EPCs 2. Câmaras de segurança

Ambiente estéril (manipulação de células)

Temperatura e umidade  controladas 3. Sinalização de segurança Água PQ ou CO2 CO2 EPCs 29 4. Outros EPC’s Lava-olhos fixo Lava-olho portátil Água PQ ou CO2 CO2

Kit – primeiros socorros Extintores EPCs

Chuveiro de segurança

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Kits de contenção de derramamentos Mapa de Riscos

Objetivos do Mapa de Riscos

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 Reunir informações → estabelecimento de um diagnóstico da situação

 Informar e conscientizar → fácil visualização/intensidade dos riscos

 Possibilitar → troca e divulgação de informações entre os profissionais

 Estimular → participação nas atividades de prevenção de acidentes.

Etapas de elaboração do Mapa de Riscos

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1) Conhecer o processo de trabalho → análise do ambiente

2) Identificação → riscos

3) Identificação → medidas preventivas (Ex.: PC e PI).

4) Identificação → indicadores de saúde (Ex.: queixas, acidentes,

doenças, etc.);

5) Conhecimento → levantamentos ambientais

6) Elaboração do Mapa → planta-baixa

Prática Seguras c/ Reagentes químicos Riscos potenciais  Estocagem/manuseio de reagentes

 Planejamento dos procedimentos de segurança  Treinamento em primeiro-socorros  Cumprimento das medidas de segurança

Problemas de estocagem  diversidade de produtos químicos e embalagens • Sólido • Líquido • Gasoso • Plástico • Papel • Vidro • Metal • Caixas • Garrafas • Cilindros • Tambores

Estocagem no laboratório ↓ volume e tempo: • Ambiente ventilado e sinalizado

• Pessoal treinado (EPI’s e EPC’s) • Mapa de risco

• Proibida ingestão de alimento (sólidos/líquidos)

Estocagem de Reagentes Químicos

Estocagem de resíduos químicos: Correta Identificação de resíduos químicos

Fichas, etiquetas e rótulos → normas e modelos

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Rótulos para descartes de resíduos químicos Rótulos para identificação de soluções químicas

Critérios mínimos de identificação

Falhas na estocagem de reagentes e resíduos

Tá de brincadeira!

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Errado!

Super Errado!

Estocagem de reagentes químicos: Falhas

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Estocagem de reagentes químicos: Falhas

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Estocagem de reagentes químicos: Falhas

Correto

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Estocagem correta de reagentes químicos Capela de exaustão: falhas no uso

Errado

Capela de exaustão: uso correto

Livre

Estoque mínimo ao longo da parede lateral

Correto

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Reagentes químicos: manuseio e cuidados a) Ler cuidadosamente → rótulos

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Rótulos completos Reagentes químicos: manuseio e cuidados

b) Não abrir qualquer recipientes → certificação do conteúdo c) Proteger rótulos → ação do ambiente ou próprio reagente.

Reagentes químicos: manuseio e cuidados d) Treinamento → procedimentos de pipetagem.

Filtros de contenção

Pipetas pi-pump

Reagentes químicos: manuseio e cuidados e) Identificação de produtos químicos

g) Nunca adicionar água aos ácidos

h) Não dirigir a abertura de frascos → sua direção ou na de outros. i) Verificar a compatibilidade: reagente → frasco.

j) Manter reagentes inflamáveis → recipientes adequados e longe de fontes de calor. k) Utilização da capela

l) Descarte adequado → reagentes usados e frascos vazios de reagentes. f) Não executar reações/manipular reagentes → sem EPs.

Explosão e incêndio→ Laboratório de Química da UFMG (2010) Acidentes com reagentes químicos inflamáveis

Equipamentos e Aparelhos de

Laboratórios de Biologia Molecular

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Principais equipamentos de um laboratório de biologia molecular

Principais equipamentos de um laboratório de

biologia molecular Cuidados básicos com equipamentos

b) Seguir instruções  manuais e POPs.

c) Não usar  mesmo ponto elétrico p/ vários equipamentos. d) Identificação de voltagens → Pontos e cabos

e) Treinar técnicos/alunos  utilização e limpeza dos equipamentos. f) Manter os equipamento protegidos  quando fora de uso. g) Atenção  dispositivos de segurança (visuais ou sonoros). j) Desligar equipamentos da corrente elétrica  Limpeza.

a) Antes da montagem  Inspecionar a aparelhagem Completa, intacta e em condições

Procedimentos Operacionais Padrão

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 Metodologias

 Utilização de equipamentos  Procedimentos de segurança Protocolos  Descrição detalhada:

Objetivo  PADRONIZAÇÃO!

 Linguagem clara e completa;  Permitir o estabelecimento;  Atualizado.

Manuseio de vidrarias  Problema sério:Quebra!

Agente de acidentes + Comuns

a) Instruir → maior cuidado na manipulação.

b) Evitar → vidrarias trincadas ou quebradas, com arestas cortantes. c) Forrar balcões e pias → lâminas de borracha (quebras). d) Não secar vidrarias volumétricas → estufas aquecidas.

f) Não acoplar tubos de vidro ou termômetros em rolhas sem antes lubrificá-los. g) Usar luvas de borracha (com superfície antiderrapante) → lavagem das vidrarias.  Providências:

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Ao ingressar num ambiente laboratorial 1) Conhecer o Mapa de Riscos;

2) Não utilizar o laboratório na ausência dos gestores;

3) Utilizar indumentárias apropriadas:

4) Não entre em locais de risco desconhecido;

5) Não utilizar equipamentos sem treinamento prévio;

6) Seguir regras básicas → beber, comer, fumar, etc;

7) Evitar atitudes de risco: ex. debruçar sobre as bancada

8) Evitar distrações;

9) Evite trabalhar sozinho no laboratório;

10) Lavar as mãos;

11) Localização do chuveiro de emergência, lava-olhos,

12) Localização e os tipos de extintores de incêndio no laboratório.

13) Localização das saídas de emergências.

Erros comuns na realização de experimentos

Falta planejamento

Esquecer de avaliar  experimentos anteriores

Experimentos  muitas etapas simultâneas

Não usar controles

Não checar disponibilidade  reagentes e equipamentos

Não calcular o tempo  ensaio 59

Gerenciamento de Resíduos de

Laboratórios de Biologia Molecular

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