REDEMAT
REDE TEMÁTICA EM ENGENHARIA DE MATERIAISUFOP - CETEC - UEMG
Pós-Graduação em Engenharia de Materiais
Dissertação de Mestrado
Estudo da Agregação e Sedimentação Eritrocitárias
Utilizando Diferentes Técnicas Experimentais
Autor: Giuliano Siniscalchi Martins
Orientador:
Dr. Antonio Valadão Cardoso
Giuliano Siniscalchi Martins
Estudo da Agregação e Sedimentação Eritrocitárias
Utilizando Diferentes Técnicas Experimentais
Dissertação de Mestrado apresentada ao programa
de Pós-Graduação em Engenharia de Materiais da
REDEMAT, como parte integrante dos requisitos
para obtenção do título em Mestre em Engenharia
de Materiais.
Á r e a d e c o n c e n t r a ç ã o : B i o m a t e r i a i s
O r i e n t a d o r : D r . A n t o n i o V a l a d ã o C a r d o s o
M386e Martins, Giuliano Siniscalchi.
Estudo da agregação e sedimentação eritrocitárias utilizando diferentes técnicas experimentais [manuscrito]/ Giuliano Siniscalchi Martins. – 2007.
114f.: il. color., grafs., tabs.
Orientador: Prof. Antônio Valadão Cardoso.
Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Ouro Preto. Escola de Minas. Rede Temática em Engenharia de Materiais.
Área de concentração: Análise e seleção de materiais.
1. Eritrócitos - Teses. 2. Espectrofotometria - Teses. 3. Diabetes - Teses. 4. Soro - Teses. I. Universidade Federal de Ouro Preto. II. Título.
CDU: 543.42:616.15
A G R A D E C I M E N T O S
A g r a d e ç o a s s e g u i n t e s p e s s o a s :
A m i n h a n o i v a C a m i l a , p e l o c a r i n h o , a m o r , d e d i c a ç ã o e p e l o a u x í l i o c o n s t a n t e n a e l a b o r a ç ã o d o t r a b a l h o .
A m i n h a q u e r i d a m ã e p e l a f o n t e d e f é e p e r s e v e r a n ç a q u e s e m p r e m e o f e r e c e u .
A o D r . A n t o n i o V a l a d ã o C a r d o s o p e l a c o m p r e e n s ã o e p e l a o r i e n t a ç ã o s e m a q u a l e s t e t r a b a l h o n ã o s e r i a c o n c r e t i z a d o .
A o D r . M a r c o s H o r á c i o P e r e i r a , D r . N e l d e r d e F i g u e i r e d o G o n t i j o e a o D r . L i n c o l n C a m b r a i a T e i x e i r a p e l o t o t a l a p o i o n o u s o d e s u a s e s t r u t u r a s l a b o r a t o r i a i s .
A o m e u a m i g o A l b e r t o d e S o u z a M o l p e l o a u x í l i o n a b u s c a d e a m o s t r a s .
A o s e s t u d a n t e s d e I n i c i a ç ã o C i e n t í f i c a A d r i a n a R o s a e G u i l h e r m e d e A r a ú j o M a r c o n d e s p e l o s u p o r t e t é c n i c o o f e r e c i d o .
E n f i m , a t o d a s a q u e l a s p e s s o a s q u e d e a l g u m a f o r m a m e
S U M Á R I O
L I S T A D E F I G U R A S V I I I
L I S T A D E T A B E L A S X I I
L I S T A D E N O T A Ç Õ E S X I I I
R E S U M O _ _ X V
1 . 0 - I N T R O D U Ç Ã O 1
2 . 0 - O B J E T I V O S 3
3 . 0 - R E V I S Ã O R I B L I O G R Á F I C A 3
3 . 1 - I N T R O D U Ç Ã O 3
4 . 0 - S O L U Ç Õ E S C O L O I D A I S _ 4
5 . 0 - P R O T E Í N A S ¨ 6
5 . 1 - C R O M Ó F O R O S E C R O M O P R O T E Í N A S _ 7
6 . 0 - S A N G U E _ 9
6 . 1 - G L Ó B U L O S V E R M E L H O S 1 1
6 . 2 - F I B R I N O G Ê N I O 1 2
7 . 0 - A G R E G A Ç Ã O 1 4
8 . 0 - H E M O R R E O L O G I A 1 7
8 . 1 - M O D E L O S H E M O R R E O L Ó G I C O S 1 9
8 . 1 . 1 - M O D E L O D E C A S S O N 1 9
8 . 1 . 2 - M O D E L O D E W A L B U R N E S C H N E C K 2 0
8 . 1 . 3 - M O D E L O D E S C O T T B L A I R 2 0
8 . 1 . 4 - M O D E L O D E Q U E M A D A 2 0
8 . 2 - F L U X O D E S A N G U E E M V A S O S 2 1
8 . 3 - E F E I T O F A H R A E U S - L I N D Q V I S T 2 2
8 . 4 -D I S T R I B U I Ç Ã O R A D I A L D E G L Ó B U L O S B R A N C O S E P L A Q U E T A S 2 3 9 . 0 -P R I N C Í P I O S F Í S I C O S D E A L G U M A S T É C N I C A S E M P R E G A D A S 2 3
9 . 1 - E Q U A Ç Õ E S D E O N D A 2 3
9 . 2 - O N D A E L E T R O M A G N É T I C A 2 5
9 . 3 - O E S P E C T R O E L E T R O M A G N É T I C O 2 6
9 . 4 - L U Z V I S Í V E L 2 7
9 . 5 - U L T R A V I O L E T A 2 7
9 . 6 - I N T E R A Ç Ã O D A L U Z C O M A M A T É R I A 2 7
9 . 7 - D I S P E R S Ã O 2 7
9 . 8 - E S P A L H A M E N T O E I N T E R F E R Ê N C I A 2 8
9 . 9 - T R A N S M I S S Ã O D A L U Z E M M E I O S D E N S O S 2 9 9 . 1 0 - R E F L E X Ã O 3 0 9 . 1 1 - R E F R A Ç Ã O 3 0 9 . 1 2 - M A G N I T U D E D A A B S O R Ç Ã O D E R A D I A Ç Ã O 3 0
9 . 1 3 - L E I D E B E E R 3 2
9 . 1 4 - L E I D E L A M B E R T - B E E R 3 3
9 . 1 5 - D E S V I O S D A L E I D E L A M B E R T - B E E R 3 4
9 . 1 5 . 1 - F A T O R E S R E A I S 3 4
9 . 1 5 . 2 - F A T O R E S I N S T R U M E N T A I S 3 5
9 . 1 5 . 3 - F A T O R E S Q U Í M I C O S 3 5
9 . 1 6 - A B S O R Ç Ã O N A R E G I Ã O D O U V - V I S 3 5
9 . 1 7 - V E L O C I D A D E D E S E D I M E N T A Ç Ã O 3 7
1 0 - D E S C R I Ç Ã O D E A L G U M A S T É C N I C A S E M P R E G A D A S 4 0
1 0 . 1 - E S P E C T R O F O T Ô M E T R O S 4 0
1 0 . 3 - L E I T O R D E M I C R O P L A C A S 4 4
1 1 - M A T E R I A I S E M É T O D O S 4 7
1 1 . 1 - C O L E T A D O S A N G U E 4 8
1 1 . 2 - D E T E R M I N A Ç Ã O D O H E M A T Ó C R I T O 4 9
1 1 . 3 - M I C R O S C O P I A Ó P T I C A 4 9
1 1 . 4 - V H S 5 0
1 1 . 5 - E N S A I O E S P E C T R O F O T O M É T R I C O 5 0
1 1 . 6 - E N S A I O C I N É T I C O D E A B S O R B Â N C I A 5 1
1 1 . 7 - L E I T O R D E M I C R O P L A C A S 5 1
1 2 . 0 R E S U L T A D O S E D I S C U S S Ã O 5 3
1 2 . 1 -M I C R O S C O P I A Ó P T I C A ( O B S E R V A Ç Ã O D A A G R E G A Ç Ã O E R I T R O C I T Á R I A ) 5 3
1 2 . 2 - E S P E C T R O F O T O M E T R I A 5 7
1 2 . 3 - V E L O C I D A D E D E H E M O S S E D I M E N T A Ç Ã O 6 7
1 2 . 4 - U V - V I S - M O D O C I N É T I C O 7 1
1 2 . 5 - L E I T O R D E M I C R O P L A C A S 8 0
1 3 . 0 - C O N C L U S Õ E S 9 0
1 4 . 0 - T R A B A L H O S F U T U R O S _ 9 2
L I S T A D E F I G U R A S
F I G U R A 5 . 1 - P o s i c i o n a m e n t o d o g r u p o a m i n a N H 2 n a c a d e i a c a r b ô n i c a . _ 6
F I G U R A 5 . 2 : L i g a ç ã o P e p t í d i c a . _ 6
F I G U R A 5 . 3 : E s t r u t u r a g e n é r i c a d e u m a p r o t e í n a . _ 7 F I G U R A 5 . 4 : T i p o d e l i g a ç õ e s e n t r e p r o t e í n a s . _ 7 F I G U R A 5 . 5 : R e p r e s e n t a ç ã o d e a l g u n s t i p o s d e h e m o g l o b i n a . _ 9 F I G U R A 6 . 1 : D i a g r a m a d a f o r m a ç ã o d e f i b r a s d e f i b r i n a . _ 1 3 F I G U R A 7 . 1 : M o d e l o s d e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a : p o n t e a m e n t o
( e s q u e r d a ) e d e p l e ç ã o ( d i r e i t a ) . _ 1 4
F I G U R A 8 . 1 : D e f o r m a ç ã o d e h e m á c i a s n a m i c r o c i r c u l a ç ã o . 1 7 F I G U R A 8 . 2 : G r á f i c o i l u s t r a t i v o d o c o m p o r t a m e n t o d o s a n g u e . 1 8 F I G U R A 8 . 3 : F l u x o L a m i n a r e m t u b o : a f i g u r a a p r e s e n t a o p e r f i l d e v e l o c i d a d e d o f l u x o l a m i n a r d e l í q u i d o s e m t u b o . 2 2
F I G U R A 9 . 1 : E s p e c t r o E l e t r o m a g n é t i c o . 2 6
F I G U R A 9 . 2 : I n t e r f e r ê n c i a e m u m p o n t o P p o s t e r i o r a u m g r u p o d e
á t o m o s . 2 8
F I G U R A 9 . 3 : I n t e r f e r ê n c i a e m u m p o n t o P l a t e r a l a u m g r u p o d e
á t o m o s . _ 2 9
F I G U R A 9 . 4 : M o d e l o p a r a d e t e r m i n a ç ã o d a a b s o r b â n c i a . 3 1 F I G U R A 9 . 5 : - E s p e c t r o e l e t r ô n i c o d o b e n z e n o . 3 6 F I G U R A 1 0 . 1 : E s q u e m a d e d o i s t i p o s d e e s p e c t r o f o t ô m e t r o s , m o n o f e i x e
( a c i m a ) e d e f e i x e d u p l o ( a b a i x o ) . 4 1
F I G U R A 1 0 . 2 : D e s c r i ç ã o d o s i s t e m a ó t i c o d o L e i t o r d e E l i s a ( a l t e r a d a ) . 4 5 F I G U R A 1 1 . 1 : S e q ü ê n c i a d e e n s a i o s e p r o c e d i m e n t o s r e a l i z a d o s . 4 7 F I G U R A 1 2 . 1 : M i c r o g r a f i a s d e a m o s t r a s d e s a n g u e h u m a n o ( e s q u e r d a ) ,
s u í n o ( c e n t r o ) e b o v i n o ( d i r e i t a ) . 5 3
F I G U R A 1 2 . 2 : M i c r o g r a f i a s d e a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o n o s
F I G U R A 1 2 . 3 : M i c r o g r a f i a s d e a m o s t r a s d e s a n g u e b o v i n o c o m a d i ç ã o d e f i b r i n o g ê n i o n a s c o n c e n t r a ç õ e s d e 5 g / L ( e s q u e r d a ) , 1 0 g / L ( d i r e i t a ) e
h e m a t ó c r i t o d e 4 0 % . 5 5
F I G U R A 1 2 . 4 : M i c r o g r a f i a s d e a m o s t r a s d e s a n g u e b o v i n o c o m a d i ç ã o d e
f i b r i n o g ê n i o n a c o n c e n t r a ç ã o 2 0 g / L ( d i r e i t a ) e h e m a t ó c r i t o d e 4 0 %. 5 6
F I G U R A 1 2 . 5: M i c r o g r a f i a s d e a m o s t r a s d e s a n g u e b o v i n o c o m a d i ç ã o d e
f i b r i n o g ê n i o n a s c o n c e n t r a ç õ e s d e 3 0 g / L e h e m a t ó c r i t o d e 4 0 %. 5 6
F I G U R A 1 2 . 6 : E s p e c t r o d e A b s o r ç ã o d o P l a s m a S u í n o . 5 7 F I G U R A 1 2 . 7 : A b s o r b â n c i a e m f u n ç ã o d o a u m e n t o d a c o n c e n t r a ç ã o d o p l a s m a s u í n o o b t i d o a p a r t i r d o s m á x i m o s d e a b s o r b â n c i a p o r b a n d a
p a r a o b t e n ç ã o d e s s e r e s u l t a d o . 5 8
F I G U R A 1 2 . 8 : E s p e c t r o d e A b s o r ç ã o d o P l a s m a B o v i n o . 5 9 F I G U R A 1 2 . 9 : A n á l i s e d o c o m p o r t a m e n t o d e a b s o r ç ã o e m f u n ç ã o d o a u m e n t o d a c o n c e n t r a ç ã o d o p l a s m a b o v i n o o b t i d o a p a r t i r d o s m á x i m o s d e a b s o r b â n c i a p o r b a n d a p a r a o b t e n ç ã o d e s s e r e s u l t a d o . 6 0 F I G U R A 1 2 . 1 0 : E s p e c t r o d e A b s o r ç ã o d e u m a S u s p e n s ã o d e H e m á c i a s
B o v i n a s . 6 1
F I G U R A 1 2 . 1 1 : A n á l i s e d o c o m p o r t a m e n t o d e a b s o r ç ã o e m f u n ç ã o d o a u m e n t o d a c o n c e n t r a ç ã o d e h e m á c i a s b o v i n a s a p a r t i r d o m á x i m o d e a b s o r b â n c i a p o r b a n d a p a r a o b t e n ç ã o d e s s e r e s u l t a d o . 6 2 F I G U R A 1 2 . 1 2 : E s p e c t r o d e A b s o r ç ã o d o F i b r i n o g ê n i o b o v i n o . 6 3 F I G U R A 1 2 . 1 3 : A b s o r b â n c i a ( m á x i m o d a b a n d a 1 ) e m f u n ç ã o d o a u m e n t o d a c o n c e n t r a ç ã o d e f i b r i n o g ê n i o . 6 4 F I G U R A 1 2 . 1 4 : C o m p o r t a m e n t o d a s a m o s t r a s d e f i b r i n o g ê n i o ( c o n c e n t r a ç ã o v e r s u s a b s o r b â n c i a ) p a r a u m c o m p r i m e n t o d e o n d a f i x o
d e 6 5 5 n m . 6 5
F I G U R A 1 2 . 1 5 : C o m p o r t a m e n t o d a s a m o s t r a s d e h e m á c i a b o v i n a , p l a s m a b o v i n o e p l a s m a s u í n o ( c o n c e n t r a ç ã o v e r s u s a b s o r b â n c i a ) p a r a
u m c o m p r i m e n t o d e o n d a f i x o d e 6 5 5 n m . 6 6
F I G U R A 1 2 . 1 6 : E n s a i o d e V H S r e a l i z a d o e m a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o n o s h e m a t ó c r i t o s d e 2 0 % , 2 5 % , 3 0 % e 3 5 % . 6 7 F I G U R A 1 2 . 1 7 : R e g r e s s ã o L i n e a r d o s d a d o s o b t i d o s n o e n s a i o d e V H S. 6 8 F I G U R A 1 2 . 1 8 : E s b o ç o d a c u r v a c a r a c t e r í s t i c a d o p r o c e s s o d e
F I G U R A 1 2 . 1 9 : E s q u e m a r e p r e s e n t a d o p r o c e s s o d e s e d i m e n t a ç ã o o b s e r v a d o n a s c u b e t a s e m t r ê s i n s t a n t e s ( t 1 , t 2 e t 3 ) . 7 1 F I G U R A 1 2 . 2 0 : E s b o ç o d a c u r v a p r e v i s t a p a r a o p r o c e s s o d e s e d i m e n t a ç ã o n o e n s a i o d e U V - V I S n o m o d o a b s o r b â n c i a x t e m p o ( m o d o c i n é t i c o ) u t i l i z a n d o u m c o m p r i m e n t o d e o n d a d e 6 5 5 n m . 7 2 F I G U R A 1 2 . 2 1 : E n s a i o d e e s p e c t r o f o t o m e t r i a U V - V I S n o m o d o a b s o r b â n c i a
x t e m p o ( m o d o c i n é t i c o ) u t i l i z a n d o a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o. 7 3
F I G U R A 1 2 . 2 2 : E s b o ç o d o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e s e d i m e n t a ç ã o p r o d u z i d o a p a r t i r d a c u r v a s e x p e r i m e n t a i s o b t i d a s n o s e n s a i o s e s p e c t r o f o t o m é t r i c o s c o m a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o . 7 4 F I G U R A 1 2 . 2 3 : V a l o r e s ( e m m ó d u l o ) d a s i n c l i n a ç õ e s d a s r e t a s d a s r e g i õ e s I I , I I I e I V e m f u n ç ã o d e h e m a t ó c r i t o ( s a n g u e s u í n o ) . 7 6 F I G U R A 1 2 . 2 4 : E n s a i o d e e s p e c t r o f o t o m e t r i a U V - V I S n o m o d o a b s o r b â n c i a
x t e m p o ( m o d o c i n é t i c o ) u t i l i z a n d o a m o s t r a s d e s a n g u e h u m a n o. 7 7
F I G U R A 1 2 . 2 5 : V a l o r e s ( e m m ó d u l o ) d a s i n c l i n a ç õ e s d a s r e t a s d a s r e g i õ e s I , I I , I I I e I V e m f u n ç ã o d e h e m a t ó c r i t o ( s a n g u e h u m a n o ) . 7 8 F I G U R A 1 2 . 2 6 : R e p r e s e n t a ç ã o d o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e m m i c r o p l a c a s . 8 0 F I G U R A 1 2 . 2 7 : E n s a i o n o l e i t o r d e m i c r o p l a c a s c o m a m o s t r a s d e s a n g u e
b o v i n o n o s h e m a t ó c r i t o s d e 1 % , 5 % , 1 0 % , 2 0 % , 3 0 % e s a n g u e t o t a l. 8 1
F I G U R A 1 2 . 2 8 : E n s a i o n o l e i t o r d e m i c r o p l a c a s c o m a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o n o s h e m a t ó c r i t o s d e 1 % , 5 % , 7 , 5 % , 2 0 % e 4 0 % . 8 2 F I G U R A 1 2 . 2 9 : E n s a i o n o l e i t o r d e m i c r o p l a c a s c o m a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o n o s h e m a t ó c r i t o s d e 1 % , 5 % , 7 , 5 % e 4 0 % . 8 3 F I G U R A 1 2 . 3 0 : E s b o ç o d o c o m p o r t a m e n t o a p r e s e n t a d o p o r a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o a o s e r e m a n a l i s a d a s p e l o l e i t o r d e m i c r o p l a c a s . 8 4 F I G U R A 1 2 . 3 1 : R e s u l t a d o d e e n s a i o s n o l e i t o r d e m i c r o p l a c a s c o m f i b r i n o g ê n i o a d i c i o n a d o a a m o s t r a s d e s a n g u e b o v i n o n a s c o n c e n t r a ç õ e s d e 5 g / L , 1 0 g / L , 1 5 g / L , 2 0 g / L , 2 5 g / L e 3 0 g / L . 8 5 F I G U R A 1 2 . 3 2 : R e s u l t a d o d e e n s a i o s n o l e i t o r d e m i c r o p l a c a s c o m f i b r i n o g ê n i o a d i c i o n a d o a a m o s t r a s d e s a n g u e b o v i n o . 8 6 F I G U R A 1 2 . 3 3 : R e s u l t a d o d e e n s a i o s n o l e i t o r d e m i c r o p l a c a s c o m a m o s t r a s d e s a n g u e h u m a n o ( h e m á c i a s l a v a d a s a e s q u e r d a , h e m á c i a s
L I S T A D E T A B E L A S
T A B E L A 5 . 1 : A l g u n s g r u p o s d e c r o m ó f o r o s , c o m p r i m e n t o s d e o n d a d o p i c o d e a b s o r ç ã o e a b s o r v i d a d e m o l a r . _ 8 T A B E L A 5 . 2 : F a i x a s d e a b s o r ç ã o d o s d i v e r s o s t i p o s d e h e m o g l o b i n a. _ 9 T A B E L A 6 . 1 : C o m p o n e n t e s d o p l a s m a h u m a n o ( a l t e r a d a ) . 1 0 T A B E L A 1 2 . 1 : D a d o s o b t i d o s p o r l i n e r i z a ç ã o n o e n s a i o d e V H S . 6 8 T A B E L A 1 2 . 2 : T e m p o d e s e d i m e n t a ç ã o c a l c u l a d o a p a r t i r d a r e g i ã o I
L I S T A D E N O T A Ç Õ E S
σ T e n s ã o d e C i s a l h a m e n t o
•
σ T a x a d e C i s a l h a m e n t o
γ D e f o r m a ç ã o
•
γ T a x a d e D e f o r m a ç ã o
G M ó d u l o d e Y o u n g
F F o r ç a
A Á r e a
Η V i s c o s i d a d e
ηa p V i s c o s i d a d e A p a r e n t e
t T e m p e r a t u r a A b s o l u t a
t0 T e m p e r a t u r a I n i c i a l
H F r a ç ã o V o l u m é t r i c a d e E r i t r ó c i t o s ( H e m a t ó c r i t o )
R N ú m e r o d e R e y n o l d s
T T r a n s m i t â n c i a
Ti T r a n s m i t â n c i a I n t e r n a
A A b s o r b â n c i a
ε A b s o r v i d a d e M o l a r
c C o n c e n t r a ç ã o M o l a r
η0 V i s c o s i d a d e I n t r í n s e c a a u m a T a x a d e C i s a l h a m e n t o z e r o
∞
η V i s c o s i dade Intrínseca a uma Taxa de Cisalhamento Infinita
Ψ F u n ç ã o d e O n d a
2
∇ O p e r a d o r L a p l a c i a n o
Er C a m p o E l é t r i c o
Br C a m p o M a g n é t i c o
µ0 P e r m e a b i l i d a d e M a g n é t i c a ( 1 , 2 6 x 1 0 - 6 H / m )
ε0 P e r m i s s i v i d a d e E l é t r i c a ( 8 , 8 5 2 x 1 0 - 6 F / m )
n Í n d i c e d e R e f r a ç ã o
N C o n t r i b u i ç ã o d e E l é t r o n s p o r U n i d a d e d e V o l u m e
me M a s s a d o E l é t r o n
ω0 F r e q ü ê n c i a d e R e s s o n â n c i a
ω F r e q ü ê n c i a
θ1 A n g u l o d e I n c i d ê n c i a
θ2 Â n g u l o d e R e f r a ç ã o
P P o d e r R a d i a n t e
l E s p e s s u r a d o N í v e l E s p a l h a d o r ( C a m i n h o Ó p t i c o )
B C
T C o e f i c i e n t e d e T r a n s m i s s ã o C o e r e n t e
E
∆ D i f e r e n ç a d e E n e r g i a E n t r e D o i s E s t a d o s E n v o l v i d o s e m u m a T r a n s i ç ã o h C o n s t a n t e d e P l a n c k = 6 , 6 2 5 6 x 1 0- 2 7 e r g . s e g c V e l o c i d a d e d a L u z n o V á c u o = 2 , 9 9 7 9 2 5 x 1 0 1 0 c m s- 1
λ C o m p r i m e n t o d e O n d a
r R a i o d a s E s f e r a s e m S u s p e n s ã o
g A c e l e r a ç ã o d a G r a v i d a d e
ρ D e n s i d a d e d a s P a r t í c u l a s e m S u s p e n s ã o
V V e l o c i d a d e d e Q u e d a
a, b , c Eixos da Partícula
S Sedimentação (mm)
t T e m p o ( s )
ti T e m p o I n i c i a l
R E S U M O
O c o m p o r t a m e n t o r e o l ó g i c o d o s a n g u e é i n f l u e n c i a d o , e m g r a n d e p a r t e , p e l a a g r e g a ç ã o e d e f o r m a ç ã o d a s h e m á c i a s . A l t e r a ç õ e s d a s p r o p r i e d a d e s h e m o r r e o l ó g i c a s d e u m i n d i v í d u o p o d e m s e r r e s p o n s á v e i s p o r e n f e r m i d a d e s r e l a c i o n a d a s a o s i s t e m a c a r d i o v a s c u l a r . U m a d a s a l t e r n a t i v a s p a r a m e l h o r c o m p r e e n s ã o d o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o é o e s t u d o d o c o m p o r t a m e n t o d o s a n g u e c o m a i n s e r ç ã o d e m a c r o m o l é c u l a s e d a s c a r a c t e r í s t i c a s c i n é t i c a s d o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e s e d i m e n t a ç ã o .
N e s t e t r a b a l h o i n v e s t i g a m o s o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e s e d i m e n t a ç ã o e r i t r o c i t á r i a . P a r a e s t e e s t u d o f o r a m r e a l i z a d o s e n s a i o s d e V H S ( V e l o c i d a d e d e H e m o s s e d i m e n t a ç ã o ) c o m s a n g u e s u í n o ( h e m a t ó c r i t o H d e 2 0 % , 2 5 % , 3 0 % e 3 5 % ) e a b s o r b â n c i a e m f u n ç ã o d o t e m p o u t i l i z a n d o e s p e c t r o f o t o m e t r i a U V - V i s e m a m o s t r a s d e s a n g u e s u í n o ( h e m a t ó c r i t o d e 1 % , 5 % , 1 0 % , 1 5 % , 2 0 % e 3 0 % ) e s a n g u e h u m a n o ( h e m a t ó c r i t o d e 1 % , 5 % , 1 0 % , 1 5 % , 2 0 % e 3 0 % ) . . A m i c r o e s t r u t u r a f o i i n v e s t i g a d a p o r m i c r o s c o p i a ó p t i c a e m a m o s t r a s d e s a n g u e b o v i n o ( h e m a t ó c r i t o 4 0 % ) , s u í n o ( h e m a t ó c r i t o 1 % , 5 % , 1 0 % , 3 0 % e 4 0 % ) e h u m a n o ( h e m a t ó c r i t o 4 0 % ) e a m o s t r a s d e s a n g u e b o v i n o ( h e m a t ó c r i t o 4 0 % ) c o m a d i ç ã o d e f i b r i n o g ê n i o n a s c o n c e n t r a ç õ e s d e 5 g / L , 1 0 g / L , 2 0 g / L , 2 5 g / L e 3 0 g / L . O s e n s a i o s n o L e i t o r d e M i c r o p l a c a s f o r a m r e a l i z a d o s p a r a s e d e t e r m i n a r o c o m p o r t a m e n t o d a a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a e s e d i m e n t a ç ã o d o s a n g u e e m f u n ç ã o d o h e m a t ó c r i t o c o m e s e m a d i ç ã o d e f i b r i n o g ê n i o ( p a r a o s a n g u e b o v i n o ) .
A m i c r o s c o p i a ó p t i c a d e l u z t r a n s m i t i d a p e r m i t i u r e a l i z a r u m a o b s e r v a ç ã o s i s t e m á t i c a d a s m i c r o e s t r u t u r a s d o s a n g u e s o b d i f e r e n t e s c o n d i ç õ e s e x p e r i m e n t a i s e d e t e r m i n a r e m q u a i s c o n c e n t r a ç õ e s o c o r r e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a n o s a n g u e b o v i n o q u e , n a t u r a l m e n t e , n ã o a g r e g a . O s e n s a i o s d e V H S i n d i c a r a m q u e a s e d i m e n t a ç ã o d i m i n u i c o m o a u m e n t o d o h e m a t ó c r i t o ( H ) ; e n t r e t a n t o , n o s e n s a i o s d e e s p e c t r o f o t o m e t r i a o f e n ô m e n o n ã o é o b s e r v a d o . É p o s s í v e l d i s t i n g u i r , c o m o U V - V i s , q u a t r o r e g i õ e s n o p r o c e s s o : a - R e g i ã o I o n d e o c o r r e a a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a ; b - R e g i ã o I I o n d e o c o r r e c r e s c i m e n t o d o s a g r e g a d o s e t e r m i n a o i n í c i o d a s e d i m e n t a ç ã o ; c - R e g i ã o I I I o n d e o c o r r e a s e d i m e n t a ç ã o d a a m o s t r a ; e d - R e g i ã o I V , u m p l a t ô q u e i n d i c a a p a r t e f i n a l d o p r o c e s s o d e s e d i m e n t a ç ã o . C o m o L e i t o r d e M i c r o p l a c a s é p o s s í v e l d i s t i n g u i r - s e t r ê s r e g i õ e s n o p r o c e s s o : a - R e g i ã o I o n d e o c o r r e a a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a ; b - R e g i ã o I I o n d e o c o r r e à p r e d o m i n â n c i a d a e t a p a d e s e d i m e n t a ç ã o d o s e r i t r ó c i t o s ; e c - R e g i ã o I I I o n d e o c o r r e a s e d i m e n t a ç ã o d a s p a r t í c u l a s m e n o r e s .
1 . 0 - I N T R O D U Ç Ã O
A a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a d e s e m p e n h a u m p a p e l m u i t o i m p o r t a n t e n o f l u x o s a n g u í n e o , p a r t i c u l a r m e n t e n a m i c r o c i r c u l a ç ã o . E m c o n d i ç õ e s n o r m a i s o s g l ó b u l o s v e r m e l h o s s e a g r e g a m e m e s t r u t u r a s d e n o m i n a d a s r o u l e a u x , a d o t a n d o f o r m a s i r r e g u l a r e s c o m t e n d ê n c i a s e s f é r i c a s [ 1 ] .
U s u a l m e n t e a a v a l i a ç ã o d a a g r e g a ç ã o é f r e q ü e n t e m e n t e e x t r a p o l a d a c o m m e d i d a s d e v i s c o s i d a d e a b a i x a s t a x a s d e c i s a l h a m e n t o . P o u c o s e s t u d o s u s a m m é t o d o s q u a n t i t a t i v o s d i r e t o s p a r a a v a l i a r a a g r e g a ç ã o .
A p r e s e n ç a d e a g r e g a d o s n o s a n g u e c o n s t i t u i - s e e m s é r i o r i s c o p a r a s a ú d e , p o i s e s t e s a g r e g a d o s p o d e m v i a j a r p e l a c o r r e n t e s a n g u í n e a c a u s a n d o o b s t r u ç ã o d e v a s o s e c a p i l a r e s a l é m d e a l t e r a r e m a s p r o p r i e d a d e s r e o l ó g i c a s d o s a n g u e [ 2 , 3 , 4 ] . A s a l t e r a ç õ e s d a s p r o p r i e d a d e s r e o l ó g i c a s d o s a n g u e s ã o r e s p o n s á v e i s p o r d i v e r s a s d o e n ç a s c a u s a d a s p e l a m á c i r c u l a ç ã o d o s a n g u e e m n o s s o o r g a n i s m o ( I s q u e m i a d o m i o c á r d i o , h i p e r a g r e g a ç ã o e m d i a b e t e s , o c l u s ã o v e n o s a d a r e t i n a , e t c ) .
U m a d a s c a u s a s d a a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a é a p r e s e n ç a d e a l g u m a s m a c r o m o l é c u l a s n o s a n g u e . S e , p o r e x e m p l o , l a v a r m o s o s e r i t r ó c i t o s e s u s p e n d e r m o s e s t a s c é l u l a s e m u m m e i o s a l i n o , l i v r e d e m a c r o m o l é c u l a s , o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o n ã o o c o r r e [ 5 ] .
N o s a n g u e n o r m a l o s a g r e g a d o s d e s f a z e m - s e a u m a t a x a d e c i s a l h a m e n t o r e l a t i v a m e n t e b a i x a ( c e r c a d e 2 0 s – 1) s u g e r i n d o f o r ç a s a t r a t i v a s r e l a t i v a m e n t e f r a c a s [ 6 ] .
O n í v e l d e a g r e g a ç ã o é e s t r i t a m e n t e r e l a c i o n a d o c o m a l g u m a s p a t o l o g i a s ( d i a b e t e s , i s q u e m i a d o m i o c á r d i o , f a l h a r e n a l , e t c ) , e n t r e t a n t o a s i n f o r m a ç õ e s r e l a c i o n a d a s a o s m e c a n i s m o s d e a g r e g a ç ã o n e c e s s i t a m d e c o n h e c i m e n t o s e t e o r i a s a i n d a i n é d i t o s [ 7 , 8 , 9 ] .
E x i s t e m d o i s m o d e l o s h i p o t é t i c o s q u e p r e t e n d e m d e s c r e v e r o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o : o m o d e l o d e p o n t e a m e n t o e o m o d e l o d e d e p l e ç ã o [ 1 0 ] .
E m u m e s t u d o u t i l i z a n d o f i b r i n o g ê n i o h u m a n o c o m o a g r e g a n t e C h i e n e J a n [ 1 5 ] , R a m p l i n g e W h i t t i n g s t a l [ 1 6 ] c o n f i r m a r a m o s r e s u l t a d o s a p r e s e n t a d o s p o r N o r d t .
P e s q u i s a s r e a l i z a d a s c o m e r i t r ó c i t o s d e r e c é m - n a s c i d o s i n d i c a r a m q u e e s t a s c é l u l a s a p r e s e n t a m u m g r a u d e a g r e g a ç ã o m e n o r d o q u e e r i t r ó c i t o s d e i n d i v í d u o s a d u l t o s [ 1 7 , 1 8 ] . T a l a g r e g a ç ã o d e p e n d e d a i d a d e g e s t a c i o n a l . E r i t r ó c i t o s d e r e c é m n a s c i d o s c o m i d a d e d e 2 4 a 2 8 s e m a n a s n ã o a p r e s e n t a m a g r e g a ç ã o s i g n i f i c a t i v a [ 1 9 ] . O c o m p o r t a m e n t o d e a g r e g a ç ã o d o s r e c é m n a s c i d o s é a t r i b u í d o à c o n c e n t r a ç ã o d e p r o t e í n a s a g r e g a n t e s e x i s t e n t e s n o p l a s m a d e s s a s c r i a n ç a s [ 2 0 ] : r e c é m n a s c i d o s g e r a l m e n t e p o s s u e m o n í v e l d e f i b r i n o g ê n i o m e n o r d o q u e i n d i v í d u o s a d u l t o s .
J o h n [ 2 1 ] a p r e s e n t o u a e x i s t ê n c i a d e d i f e r e n ç a s n o g r a u d e a g r e g a ç ã o e n t r e a n i m a i s d i f e r e n t e s : c a v a l o s , l e o p a r d o s e r i n o c e r o n t e s e x i b e m u m a a g r e g a ç ã o m a i o r e n q u a n t o n e n h u m a a g r e g a ç ã o é o b s e r v a d a e m b o v i n o s e c a p r i n o s .
M u i t o s e s t u d o s t ê m i n d i c a d o c l a r a m e n t e q u e o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o r e q u e r g r a n d e s á r e a s d e m e m b r a n a p a r a c o n t a t o e n t r e a s c é l u l a s , e s t a c o n c l u s ã o p e r m i t e d e d u z i r q u e p a r a c é l u l a s c o m b a i x a c a p a c i d a d e d e d e f o r m a r - s e o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o s e r i a p e q u e n o [ 2 2 ] . N o e n t a n t o , r e s u l t a d o s a p r e s e n t a n d o c é l u l a s ( e r i t r ó c i t o s ) c o m a l t a v i s c o s i d a d e c i t o p l a s m á t i c a ( e r i t r ó c i t o s v e l h o s , p o r e x e m p l o ) e c o n s e q ü e n t e m e n t e b a i x a d e f o r m a b i l i d a d e a p r e s e n t a r a m u m a a g r e g a ç ã o m a i o r d o q u e c é l u l a s m a i s n o v a s e c o m d e f o r m a b i l i d a d e m a i o r [ 2 3 , 2 4 , 2 5 , 2 6 ] .
O u t r o s p e s q u i s a d o r e s t ê m i n v e s t i g a d o a a ç ã o d e e n z i m a s c a p a z e s d e a t u a r e m n a s u p e r f í c i e d a s h e m á c i a s u t i l i z a n d o u m a e n z i m a c a p a z d e r e m o v e r o á c i d o s i á l i c o ( á c i d o N - a c e t i l n e u r â m i c o ) d a s u p e r f í c i e d a s h e m á c i a s e c o n s t a t a r a m u m g r a n d e c r e s c i m e n t o d a a g r e g a b i l i d a d e c a u s a d a p e l a r e d u ç ã o d a d e n s i d a d e d e c a r g a d a s u p e r f í c i e [ 2 7 ] .
T o d a s a s p e s q u i s a s n e s s a á r e a d e m o n s t r a r a m q u e a i n t e r a ç ã o d o a g r e g a n t e c o m a c é l u l a d e p e n d e d o t i p o d e a g r e g a n t e , n o c a s o d a d e x t r a n a ( p o l i s s a c a r í d e o ) , p o r e x e m p l o , e x i s t e u m a g r a n d e d e p e n d ê n c i a c o m r e l a ç ã o à c a r g a d a h e m á c i a [ 2 8 , 2 9 , 3 0 ] .
A n a l i s a n d o - s e a g r a n d e q u a n t i d a d e d e p e s q u i s a s r e l a c i o n a d a s a o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o p e r c e b e - s e q u e a c o m p r e e n s ã o d o c o m p o r t a m e n t o d a s m a c r o m o l é c u l a s p r e s e n t e s n o s a n g u e p o d e i d e n t i f i c a r c a m i n h o s p a r a o t r a t a m e n t o d e a l g u m a s p a t o l o g i a s e m t e m p o e f i c a z .
f a t o r e s i n e r e n t e s a d i m e n s õ e s c e l u l a r e s e f o r m a d o a p a r a t o . M é t o d o s e s p e c t r o f o t o m é t r i c o s e m h e m a t o l o g i a t a m b é m t ê m s i d o u s u a l m e n t e u t i l i z a d o s p a r a d e t e r m i n a r a p r e s e n ç a d e h e m o g l o b i n a n a f o r m a d e o x i h e m o g l o b i n a e c i a n o h e m o g l o b i n a [ 3 1 , 3 2 , 3 3 ] .
O u s o d e t é c n i c a s f o t o m é t r i c a s e s p e c í f i c a s , q u e n e c e s s i t a m d e p o u c a q u a n t i d a d e d e a m o s t r a e p e r m i t e m u m g r a n d e n ú m e r o d e m e d i d a s , p o d e m p r o p i c i a r s o l u ç õ e s d e p r o b l e m a s d e s s a n a t u r e z a . S e g u i n d o e s t e c a m i n h o , s a b e - s e q u e p a r a u t i l i z a ç ã o d e t a l t é c n i c a é n e c e s s á r i a a c o m p r e e n s ã o d o p r o c e s s o f í s i c o e n v o l v i d o e n t r e a i n t e r a ç ã o d e o n d a s e l e t r o m a g n é t i c a s e a s u s p e n s ã o ( c i n é t i c a d e a g r e g a ç ã o , t e m p o d e s e d i m e n t a ç ã o , e t c ) .
N e s t e t r a b a l h o i n v e s t i g o u - s e o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e s e d i m e n t a ç ã o e r i t r o c i t á r i a u t i l i z a n d o m i c r o s c o p i a ó p t i c a , V e l o c i d a d e d e H e m o s s e d i m e n t a ç ã o ( V H S ) , e s p e c t r o f o t o m e t r i a U V - V i s e L e i t o r d e M i c r o p l a c a s .
2 . 0 - O B J E T I V O S
O t r a b a l h o d e s e n v o l v i d o a p r e s e n t a o s s e g u i n t e s o b j e t i v o s :
( i ) E s t u d a r o c o m p o r t a m e n t o d e a g r e g a ç ã o e s e d i m e n t a ç ã o d o s a n g u e h u m a n o , s u í n o , b o v i n o e a i n f l u ê n c i a d o f i b r i n o g ê n i o n o c o m p o r t a m e n t o d e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a .
( i i ) E s t a b e l e c e r p a r â m e t r o s e m o d e l o s p a r a c o m p r e e n s ã o d o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a .
( i i i ) T e n t a r d e t e r m i n a r a e f i c á c i a d o L e i t o r d e M i c r o p l a c a s p a r a d e t e r m i n a ç ã o d o n í v e l d e a g r e g a ç ã o d e s e d i m e n t a ç ã o d o s a n g u e .
3 . 0 - R E V I S Ã O B I B L I O G R Á F I C A
3 . 1 - I N T R O D U Ç Ã O
O s t ó p i c o s t e ó r i c o s a p r e s e n t a d o s n a s p r ó x i m a s s e ç õ e s t ê m c o m o o b j e t i v o e n g l o b a r o s a s p e c t o s m a i s r e l e v a n t e s d o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a .
E m s e g u i d a s ã o a b o r d a d o s t ó p i c o s t e ó r i c o s q u e d e s c r e v e m a l g u n s d o s a g e n t e s e n v o l v i d o s n o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o ( f i b r i n o g ê n i o e e r i t r ó c i t o s ) . A p a r t i r d e s s e s t ó p i c o s o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o é d i s c u t i d o .
P o s t e r i o r m e n t e o s t ó p i c o s r e l a c i o n a d o s à h e m o r r e o l o g i a ( c o m p o r t a m e n t o r e o l ó g i c o d o s a n g u e ) e a o f l u x o d e s a n g u e s ã o a b o r d a d o s , e s t e s t ó p i c o s v i s a m r e l a c i o n a r a f o r m a ç ã o d e a g r e g a d o s a o c o m p o r t a m e n t o v i s c o s o d o s a n g u e .
P o r f i m , c o n c e i t o s f í s i c o s d e a b s o r ç ã o , t r a n s m i s s ã o e v e l o c i d a d e d e s e d i m e n t a ç ã o s ã o a b o r d a d o s p a r a u m a m e l h o r c o m p r e e n s ã o d a s t é c n i c a s a p r e s e n t a d a s n a s s e ç õ e s s e g u i n t e s .
4 . 0 - S O L U Ç Õ E S C O L O I D A I S
( O s t e x t o s q u e s e s e g u e m r e s u m e m o s C a p í t u l o s : “ S o l u ç õ e s C o l o i d a i s ” , “ P r o t e í n a s ” , ” C r o m o p r o t e í n a s ” , E l e m e n t o s D e l F i s i o l o g i a , E d i t o r a C i e n t í f i c o -M é d i c a , B a r c e l o n a - -M a d r i d - L i s b o a - R i o d e J a n e i r o , S o l u ç õ e s C o l o i d a i s , C 8 º E d i ç ã o , 1 9 6 1 ) .
S o l u ç õ e s c o l o i d a i s s ã o s o l u ç õ e s c u j a s p a r t í c u l a s ( f a s e d i s p e r s a ) p o s s u e m d i m e n s õ e s m a i o r e s q u e 1 n m e m e n o r e s q u e 1 0 0 n m . A s s o l u ç õ e s c u j a s p a r t í c u l a s p o s s u e m d i m e n s õ e s m e n o r e s q u e 1 n m s ã o d i t a s s o l u ç õ e s v e r d a d e i r a s . A s s u s p e n s õ e s p o s s u e m p a r t í c u l a s m a i o r e s q u e 1 0 0 n m [ 3 4 , 3 5 , 3 6 , 3 7 ] .
E m g e r a l u m a s o l u ç ã o c o l o i d a l p o d e s e r c o n s i d e r a d a u m a f a l s a s o l u ç ã o , i s t o é , u m a m e s c l a h e t e r o g ê n e a d e u m a m a t é r i a m u i t o d i v i d i d a ( f a s e d i s p e r s a ) e m u m m e i o d e d i s p e r s ã o ( f a s e c o n t í n u a ) .
O e s t a d o c o l o i d a l é u m e s t a d o f í s i c o q u e m u i t o s c o r p o s p o d e m a d o t a r . O c i t o p l a s m a e a m a i o r i a d o s l í q u i d o s b i o l ó g i c o s c o n s t i t u e m u m a s o l u ç ã o c o l o i d a l . D e n t r e o s l í q u i d o s b i o l ó g i c o s p o d e m o s c i t a r : o s a n g u e , a l i n f a , a b i l e e a l g u m a s s e c r e ç õ e s d i g e s t i v a s . A m a i o r i a d o s f l u í d o s p r o t o p l a s m á t i c o s é f o r m a d a p o r s o l u ç õ e s c o l o i d a i s d e l í q u i d o s d i s p e r s o s e m o u t r o s l í q u i d o s i m i s c í v e i s .
A f o r m a ç ã o d e u m c o l ó i d e d e p e n d e d a i n t e r a ç ã o e n t r e s u a f a s e c o n t í n u a e s u a f a s e d i s p e r s a . O s c o l ó i d e s c u j a f a s e c o n t í n u a e a f a s e d i s p e r s a s ã o c o n s t i t u í d a s p o r d o i s l í q u i d o s s ã o d e n o m i n a d o s l i ó f i l o s , j á o s c o l ó i d e s c u j a f a s e c o n t í n u a é u m l í q u i d o e a f a s e d i s p e r s a é u m s ó l i d o s ã o d e n o m i n a d o l i ó f o b o s . S e n e s t e s c o l ó i d e s a f a s e c o n t í n u a é f o r m a d a p o r á g u a e s t e s s ã o c h a m a d o s r e s p e c t i v a m e n t e d e h i d r ó f i l o s e h i d r ó f o b o s .
o u s e j a , u m a e m u l s ã o . P o r e s t e m o t i v o , à s s o l u ç õ e s c o l o i d a i s s e c l a s s i f i c a m e m s u s p e n s ó i d e s d e c o l ó i d e s h i d r ó f o b o s e e m u l s ó i d e s d e c o l ó i d e s h i d r ó f i l o s .
O s e m u l s ó i d e s a p r o x i m a m - s e d a s s o l u ç õ e s v e r d a d e i r a s , d a d a s a s í n t i m a s r e l a ç õ e s e x i s t e n t e s e n t r e a f a s e d i s p e r s a e o m e i o d i s p e r s a n t e . N o s e m u l s ó i d e s t í p i c o s , a s m i c e l a s s ã o m o l é c u l a s s i m p l e s ( m a c r o m o l é c u l a s ) e i m p r i m e m a o s i s t e m a c a r á t e r h e t e r o g ê n e o s e m n e c e s s i d a d e d e a g r e g a ç ã o . N o s s u s p e n s ó i d e s , a s p a r t í c u l a s d a f a s e d i s p e r s a c o n s t i t u e m - s e d e a g r e g a d o s d e m o l é c u l a s ( s e m e l h a n t e s a p a r t í c u l a s i n s o l ú v e i s ) c o m d i m e n s õ e s a c i m a d a o r d e m m o l e c u l a r ( n a n o m é t r i c o e s u b n a n o m é t r i c o ) [ 3 8 ] .
O s c o l ó i d e s p o d e m a s s u m i r v á r i o s e s t a d o s . D e n t r e e l e s p o d e m o s c i t a r o l í q u i d o , o s o l e o g e l . A s p r o p r i e d a d e s d o g e l e x i b i d a s p e l o s e m u l s ó i d e s s ã o r e s p o n s á v e i s p e l a s c a r a c t e r í s t i c a s f í s i c a s a p r e s e n t a d a s p e l o p r o t o p l a s m a c o n c e n t r a d o .
O s c o l ó i d e s p o s s u e m c a r á t e r á c i d o , b á s i c o o u a n f ó t e r o . O s c o l ó i d e s c o m c a r á t e r b á s i c o s ã o d e n o m i n a d o s c o l ó i d e s b a s ó i d e s e p o s s u e m m i c e l a s c a r r e g a d a s p o s i t i v a m e n t e . O s c o l ó i d e s d e c a r á t e r á c i d o p o s s u e m m i c e l a s c a r r e g a d a s n e g a t i v a m e n t e e s ã o d e n o m i n a d o s c o l ó i d e s a c i d ó i d e s .
E m r e l a ç ã o a o s c o l ó i d e s a n f ó t e r o s , e s t e s a s s u m e m c a r á t e r b á s i c o o u á c i d o d e a c o r d o c o m a r e a ç ã o c o m o m e i o . C o m o a s p a r t í c u l a s d e u m m e s m o c o l ó i d e p o s s u e m c a r g a s d e m e s m o s i n a l , e s t a s s e m a n t ê m s e p a r a d a s u m a s d a s o u t r a s m a n t e n d o a e s t a b i l i d a d e d o s i s t e m a . E m c o l ó i d e s h i d r ó f o b o s a e s t a b i l i d a d e s e d e v e u n i c a m e n t e a s c a r g a s , p o r o u t r o l a d o n o s h i d r ó f i l o s à e s t a b i l i d a d e d e p e n d e t a m b é m d o f e n ô m e n o d e s o l v a t a ç ã o [ 3 9 ] .
A s p a r t í c u l a s c o l o i d a i s s e e n v o l v e m p o r u m a c a m a d a d e á g u a d e n o m i n a d a c a m a d a d e s o l v a t a ç ã o . N e s t a c a m a d a , a s m o l é c u l a s d e á g u a s e e n c o n t r a m o r i e n t a d a s e p o l a r i z a d a s p e l a c a r g a d a p a r t í c u l a . N ã o h á u m a s e p a r a ç ã o c l a r a e n t r e a c a m a d a d e s o l v a t a ç ã o e a á g u a l i v r e . E s t e f a t o r r e d u z a e n e r g i a s u p e r f i c i a l d a p a r t í c u l a t o r n a n d o - a s m u i t o e s t á v e i s .
5 . 0 - P R O T E Í N A S
A s p r o t e í n a s s ã o o s c o n s t i t u i n t e s f u n d a m e n t a i s d a m a t é r i a o r g â n i c a f o r m a d a s p o r c o m b i n a ç õ e s c o m p l e x a s d e a l t o p e s o m o l e c u l a r .
T o d a s a s p r o t e í n a s p o s s u e m a l t a c a p a c i d a d e d e r o t a c i o n a r o p l a n o d e p r o p a g a ç ã o d a l u z p o l a r i z a d a , s e n d o q u e a m a i o r i a d a s p r o t e í n a s s ã o l e v ó g i r a s ( g i r a m o p l a n o d a l u z p o l a r i z a d a p a r a e s q u e r d a ) . A l g u m a s p r o t e í n a s c o m o a h e m o g l o b i n a e a s n u c l e o p r o t e í n a s p o s s u e m c a r á t e r d e x t r ó g i r o .
A s p r o t e í n a s p o s s u e m c a r á t e r a n f ó t e r o , o u s e j a , a d q u i r e m c a r á t e r á c i d o o u b á s i c o c o n f o r m e o m e i o e m q u e s ã o d i l u í d a s .
A s p r o t e í n a s s ã o f o r m a d a s p o r a m i n o á c i d o s , e s t e s s ã o á c i d o s o r g â n i c o s e m q u e o c o r r e u a s u b s t i t u i ç ã o d e u m h i d r o g ê n i o ( e x c e t u a n d o -s e o d o g r u p o c a r b o x í l i c o ) p o r u m a a m i n a N H2.
O s a m i n o á c i d o s p o d e m s e r c l a s s i f i c a d o s d e a c o r d o c o m a p o s i ç ã o d a a m i n a n a c a d e i a c a r b ô n i c a ( f i g u r a 5 . 1 ) . A m a i o r i a d o s a m i n o á c i d o s n a t u r a i s é d e n o m i n a d a α- a m i n o á c i d o s .
F I G U R A 5 . 1 - P o s i c i o n a m e n t o d o g r u p o a m i n a N H 2 n a c a d e i a c a r b ô n i c a .
A s m o l é c u l a s d a s p r o t e í n a s s e f o r m a m p e l a u n i ã o d e d i v e r s o s a m i n o á c i d o s , e s t a u n i ã o o c o r r e p e l a c o n j u g a ç ã o d e u m g r u p o c a r b o x í l i c o d e u m a m i n o á c i d o c o m u m g r u p o a m i n a d e o u t r o ( l i g a ç ã o p e p t í d i c a ) o c o r r e n d o p e r d a d e á g u a ( f i g u r a 5 . 2 ) [ 4 1 ] .
N a s p r o t e í n a s a s c a d e i a s p e p t í d i c a s p a r e c e m a p r e s e n t a r a m e s m a
IGURA 5.3: Estrutura genérica de uma Proteína
A s c a d e i a s p o l i p e p t í d i c a s s ã o l i g a d a s a t r a v é s d e a l g u n s g r u p o s
IGURA 5.4: Tipo de ligações entre proteínas: A pontes de dissulfeto; B pontes de
A s m o l é c u l a s p r o t é i c a s p o d e m s e r c l a s s i f i c a d a s e m e s f é r i c a s e l i n e a r e s . U m a s o l u ç ã o d e p a r t í c u l a s e s f é r i c a s é c a r a c t e r i z a d a p o r e s t r u t u r a f u n d a m e n t a l . E m u m a e x t r e m i d a d e d a c a d e i a s e e n c o n t r a u m a f u n ç ã o a m i n a l i v r e e e m o u t r o e x t r e m o a p r e s e n t a - s e u m a f u n ç ã o á c i d a . S ã o a s c a d e i a s l a t e r a i s ( R1, R2, R3, R4 , e t c . ) q u e d e t e r m i n a m à f u n ç ã o d e c a d a p r o t e í n a ( f i g u r a 5 . 3 ) .
F
f u n c i o n a i s ( a c i d o c a r b o x í l i c o e a m i n a s , p o r e x e m p l o ) . D e n t r e e l e s p o d e m o s c i t a r a s l i g a ç õ e s d o t i p o d i s s u l f e t o , q u e p o d e l i g a r d u a s c a d e i a s p o l i p e p t í d i c a s e m p a r a l e l o . U m o u t r o t i p o d e l i g a ç ã o é a p o n t e d e h i d r o g ê n i o , t a i s l i g a ç õ e s s ã o m a i s f o r t e s q u e a s l i g a ç õ e s d i s s u l f e t o . E s t a s l i g a ç õ e s o c o r r e m q u a n d o o o x i g ê n i o e o n i t r o g ê n i o d e d u a s c a d e i a s ( p o l i p e p t í d i c a s ) d i f e r e n t e s c o m p a r t i l h a m h i d r o g ê n i o ( f i g u r a 5 . 4 ) .
A
B
F
p o s s u
5 . 1 - C R O M Ó F O R O S E C R O M O P R O T E Í N A S
C e r t a s s u b s t â n c i a s d e v e m s u a s c o r e s , d u r a n t e o p r o c e s s o d e b s o r ç ã o d a l u z , a a l g u m a s l i g a ç õ e s i n s a t u r a d a s . O s g r u p o s n o s q u a i s
e n t o s d e o n d a d o i r b a i x a v i s c o s i d a d e , p o u c a a t r a ç ã o e n t r e a s p a r t í c u l a s . D e n t r e e s t a s s e e n c o n t r a m a s g l o b u l i n a s , a s a l b u m i n a s , a s h e m o g l o b i n a s , e t c . P o r o u t r o l a d o u m a s o l u ç ã o d e p a r t í c u l a s l i n e a r e s c a r a c t e r i z a - s e p o r u m a v i s c o s i d a d e a l t a . N e s s a c l a s s e e n c o n t r a m - s e a q u e r a t i n a , a m i o s i n a e o f i b r i n o g ê n i o .
a
e s t a s l i g a ç õ e s e s t ã o p r e s e n t e s s ã o d e n o m i n a d o s c r o m ó f o r o s , j á o s g r u p o s q u e n ã o c o n f e r e m c o r à s u b s t â n c i a , m a s a u m e n t a m o p o d e r d e a b s o r ç ã o d o s c r o m ó f o r o s s ã o d e n o m i n a d o s a u x ó c r o m o s . E m u m c r o m ó f o r o , p o r e x e m p l o , a r a d i a ç ã o u l t r a v i o l e t a é a b s o r v i d a , p r e f e r e n c i a l m e n t e , p e l o g r u p o c r o m ó f o r o . O s c r o m ó f o r o s e m m u i t o s c a s o s s ã o f o r m a d o s p o r l i g a ç õ e s c o v a l e n t e s i n s a t u r a d a s ( T a b e l a 5 . 1 ) :
O s c o r p o s q u e l i b e r a m u m a p r o t e í n a e u m g r u p o c r o m ó f o r o d u r a n
m o g l o b i n a e a
t a h
e l a f
IGURA 5.5: Representação de alguns tipos de hemoglobina
d e s t e s c o m p o s t o s : t e o p r o c e s s o d e h i d r ó l i s e s ã o d e n o m i n a d o s c r o m o p r o t e í n a s . E s t a s p o d e m s e r a g r u p a d a s d a s e g u i n t e f o r m a :
e n t r e o s v á r i o s t i p o s d e c r o m o p r o t e í n a s , a h e D
o x i h e m o g l o b i n a p r e s e n t e s n a s h e m á c i a s d o s a n g u e s ã o p r i n c i p a i s a g e n t e s a b s o r v e d o r e s c o n t i d o s n e s s e f l u í d o . A o x i h e m o g l o b i n a , n o r m a l m e n t e e n c o n t r a d a n o s a n g u e a r t e r i a l , é t r a n s f o r m a d a e m h e m o g l o b i n a a t r a v é s d e t r o c a s g a s o s a s n o s t e c i d o s , o n d e o c o r r e p e r d a d e o x i g ê n i o t o r n a n d o - s e a p a r t i r d a í p a r t e d o s a n g u e v e n o s o .
U m o u t r o t i p o d e c r o m o p r o t e í n a c o n t i d a n o s a n g u e é a m e e m o g l o b i n a , e s t a s e d i f e r e n c i a d a o x i h e m o g l o b i n a p o r p o s s u i r m e t a d e d o n ú m e r o d e á t o m o s d e o x i g ê n i o l i g a d o s a o F e .
E m g e r a l o s t r ê s t i p o s d e h e m o g l o b i n a p o d e m s e r r e p r e s e n t a d o s p i g u r a a b a i x o :
F
A t a b e l a 5 . 2 a p r e s e n t a a f a i x a d e a b s o r ç ã o
T i p o d e H e m o g l o b i n a F a i x a d e A b s o r ç ã o ( n m )
H e m o gl o b i n a 5 9 6 a 5 4 3
O x i h e m o g l o b i n a 5 8 9 a 5 7 7 5 5 6 a 5 3 6
C a r b o x i h e m o g l o b i n a 5 7 9 a 5 6 4 5 4 8 a 5 3 0
M e t a h e m o g l o b i n a N e u t r a 6 3 0 a 6 2 0 5 88 a 5 7 9 5 5 6 a 5 4 2 5 18 a 4 8 6 M e t a h e m o g l o b i n a A l c a l i n a 6 0 5 a 5 7 9 5 8 8 a 5 7 9 5 8 8 a 5 3 5
ABELA 5.2: Faixas de absorção dos diversos tipos de hem
T oglobina.
s a n g u e é u m a s u s p e n s ã o c o n t e n d o v á r i o s t i p o s d e c é l u l a s , s e n d o r e s p o
. 0 - S A N G U E 6
O
D e m o d o g e r a l é m e n o r e m a n i m a i s j o v e n s e n a s f ê m e a s . V a r i a ç õ e s d a d e n s i d a d e d e p e n d e m p r i n c i p a l m e n t e d o n ú m e r o d e g l ó b u l o s v e r m e l h o s e d a q u a n t i d a d e d e p r o t e í n a s p l a s m á t i c a s [ 4 2 ] .
O s a n g u e é f o r m a d o p o r g a s e s , m i n e r a i s , h i d r o c a r b o n a t o s , l í p i d e s , p r o t e í n a s , v i t a m i n a s e h o r m ô n i o s . P o r c e n t r i f u g a ç ã o , p o d e s e r s e p a r a d o e m p l
p i c a s s ã o a p r e s e n t a d o s n a t a b e l a ( t a b e l a 6 . 1 ) :
p l a s m a H u m a n o
a s m a e c é l u l a s . O p l a s m a é , g e r a l m e n t e , c o n s t i t u í d o d e 9 0 % d e á g u a , 7 % d e p r o t e í n a s p l a s m á t i c a s , 1 % d e s u b s t â n c i a s i n o r g â n i c a s e 1 % d e o u t r a s s u b s t â n c i a s o r g â n i c a s . O s c o n t e ú d o s c e l u l a r e s s ã o , e s s e n c i a l m e n t e , o s e r i t r ó c i t o s ( g l ó b u l o s v e r m e l h o s ) , g l ó b u l o s b r a n c o s e a s p l a q u e t a s . O s e r i t r ó c i t o s n o r m a l m e n t e o c u p a m c e r c a d e 5 0 % d o v o l u m e s a n g u í n e o ( c e r c a d e 5 . 0 0 0 . 0 0 0 / m m3) . E x i s t e n o s a n g u e c e r c a d e 5 0 0 0 a 8 0 0 0 g l ó b u l o s b r a n c o s p o r m m3 e 2 5 0 0 0 0 a 3 0 0 0 0 0 p l a q u e t a s p o r m m3. O s g l ó b u l o s v e r m e l h o s h u m a n o s p o s s u e m a f o r m a d e d i s c o s c o m u m d i â m e t r o d e 7 , 6µm e e s p e s s u r a d e 2 , 8µm . O s g l ó b u l o s b r a n c o s ( l e u c ó c i t o s ) a p r e s e n t a m d i v e r s a s f o r m a s e t a m a n h o s . A s p l a q u e t a s s ã o m e n o r e s , p o s s u i n d o u m d i â m e t r o d e c e r c a d e 2 , 5µm [ 4 3 , 4 4 ] .
O s c o m p o n e n t e s d o p l a s m a e s u a s c o n c e n t r a ç õ e s t í
C o m p o n e n t e s d o
C o m p o n e n t e s C o n c e n t r a ç ã o T í p i c a g / L
P r o t e í n a s 7 3 A l b u m i n a s 3 7
G l o b u l i n a s
α1 4
α 2 7
β 9
γ 1 3
F i b r i n o g ê n i o 3 L i p í d e s 5 G l i c o s e 0 , 8
A mi n o á c i d os 0, 5
U r é i a 0 , 3 L a c t a t o s 0 , 1
Í o n s I n o r g â n i c o s
N a + 3 , 2
K + 0, 2
C a + + 0 , 1 M g 0 , 0 1
C l 3 , 2
H C O3- 1 , 7
SO4- 0 , 2
P O4- 0 , 1
O s g l ó b u l o s v e r m e l h o s ( e r i t r ó c i t o s ) c o n s t i t u i n t e s d o s a n g u e p o s s u
f r a ç ã o v o l u m é t r i c a d e e r i t r ó c i t o s n o s a n g u e ( h e m a t ó c r i t o ) p o d e v a r i a r
o s o f r e r c o a g u l a ç ã o , u m f l u í d o d e n o m i n a d o s o r o a p a r e c e n o s a n g u
. 1 - G L Ó B U L O S V E R M E L H O S
O s g l ó b u l o s v e r m e l h o s ( e r i t r ó c i t o s ) s ã o r e s p o n s á v e i s p e l o t r a n s p
e r i t r ó c i t o s p o d e m p e r d e r h e m o g l o b i n a ( h e m ó l i s e ) n a o c o r r
e e r i t r ó c i t o s s ã o s u s p e n s o s e m m e i o s s a l i n o s h i p o t ô n i c o s , e l e s a u m e n
O t a m a n h o d o s e r i t r ó c i t o s v a r i a d e a c o r d o c o m a s e s p é c i e s
E m g e r a l s ã o f o r m a d o s p o r , a p r o x i m a d a m e n t e , 6 5 % d e á g u a e 3 5 % e s
e m u m a v i d a m é d i a d e 1 2 1 d i a s . C a d a u m a d e s s a s c é l u l a s c o n t é m h e m o g l o b i n a r e s p o n s á v e l p e l o t r a n s p o r t e d e o x i g ê n i o n o s a n g u e . O s e r i t r ó c i t o s p o d e m a s s u m i r d i v e r s a s f o r m a s s o b v a r i a ç ã o d a p r e s s ã o o s m ó t i c a d o m e i o : f o r m a e s f é r i c a ( m e i o h i p o t ô n i c o ) , b i c ô n c a v a ( m e i o i s o t ô n i c o ) e c r e n a d a [ 4 5 ] .
A
d e a c o r d o c o m i d a d e , p a t o l o g i a s , c a r a c t e r í s t i c a s a m b i e n t a i s , e t c . O h e m a t ó c r i t o p o d e s e r a l t o ( 5 0 a 6 0 % e m n e o n a t a i s , 6 5 % e m p r e m a t u r o s , 6 0 % e m a d u l t o s v i v e n d o e m a l t a s a l t i t u d e s ) , n o r m a l ( c e r c a d e 4 0 % ) o u b a i x o ( 2 0 a 2 5 % e m c a s o s d e a n e m i a f a l c i f o r m e ) [ 4 6 ] .
A
e . O s o r o é s i m i l a r a o p l a s m a n a c o m p o s i ç ã o , e x c e t o p e l o f a t o d e n ã o a p r e s e n t a r u m a p r o t e í n a d e n o m i n a d a f i b r i n o g ê n i o .
6
o r t e d e o x i g ê n i o a o s t e c i d o s e ó r g ã o s e o t r a n s p o r t e d e C O2 p a r a f o r a d o o r g a n i s m o a t r a v é s d a c i r c u l a ç ã o .
O s
ê n c i a d e a l t e r a ç ã o d o e q u i l í b r i o o s m ó t i c o d o m e i o e m q u e s e e n c o n t r a m . A l g u m a s s u b s t â n c i a s s ã o c a p a z e s d e a l t e r a r e s t e e q u i l í b r i o : á g u a , c l o r o f ó r m i o , é t e r , s a b õ e s , s a i s b i l i a r e s , c e r t a s t o x i n a s d e b a c t é r i a s e v e n e n o s d e c o b r a s [ 4 7 ] .
S
t a m d e t a m a n h o e a d q u i r e m f o r m a e s f é r i c a s e n d o d e n o m i n a d o s e s f e r ó c i t o s e , e m m e i o h i p e r t ô n i c o , s o f r e m c r e n a g e m e a d q u i r e m f o r m a e s t r e l a d a s e n d o d e n o m i n a d o s d e c r e n ó c i t o s . A a l t e r a ç ã o d a t o n i c i d a d e d o m e i o n ã o a l t e r a a s e d i m e n t a ç ã o e o s a g r e g a d o s f o r m a d o s a d q u i r e m f o r m a s n ã o u s u a i s ( e s f e r ó c i t o s , c r e n ó c i t o s , e t c ) . N o e n t a n t o , n a o c o r r ê n c i a d e h e m ó l i s e , a s u p e r f í c i e d a c é l u l a é a l t e r a d a i m p o s s i b i l i t a n d o q u e a a g r e g a ç ã o o c o r r a e a l t e r a n d o a s e d i m e n t a ç ã o e r i t r o c i t á r i a .
a t i n g i n d o d e 2µm a 9µm e m d i â m e t r o . E x e m p l o s d e s t a v a r i a b i l i d a d e d e t a m a n h o t ê m - s e : o c a v a l o c o m 6µm , o b o i c o m 6µm , o c a r n e i r o c o m 5µm , a c o b r a c o m 3 , 5µm , o c a c h o r r o c o m d i m e n s õ e s e n t r e 6 e 6 , 5 µm , e t c [ 4 8 ] .
c o l e s t e r o l e í o n s i n o r g â n i c o s ( p o t á s s i o , c l o r o , b i c a r b o n a t o , f o s f a t o ) [ 4 9 ] .
A h e m o g l o b i n a é a p r o t e í n a m a i s a b u n d a n t e n o s a n g u e ( 1 , 4 a 1 , 6 g
s e r i t r ó c i t o s h u m a n o s p o s s u e m f o r m a d e d i s c o b i c ô n c a v o n a a u s ê n
a c i r c u l a ç ã o s a n g u í n e a o s g l ó b u l o s v e r m e l h o s s ã o s e v e r a m e n t e d e f o r
6 . 2 - F I B R I N O G Ê N I O
f i b r i n o g ê n i o é u m a p r o t e í n a e s t r u t u r a l e s s e n c i a l n o p r o c e s s o d e c o a g u
e n c o n t r a d o n a l i n f a , e m t e c i d o s c o n e c t i v o s e e s p a ç o s i n t e r s
S u a m o l é c u l a é p o l i m é r i c a c o m o m o n ô m e r o f u n d a m e n t a l p o s s u
o n c e n t r a ç õ e s e l e v a d a s d e f i b r i n o g ê n i o t ê m s i d o a p o n t a d a s c o m o r e s p o
f i b r i n o g ê n i o t e m u m a e s t r u t u r a ú n i c a q u e l h e a s s e g u r a u m a c o n f o
p o r 1 0 0 m l ) . É n o r m a l m e n t e e n c o n t r a d a n o s e r i t r ó c i t o s o u d i l u í d a n o p l a s m a q u a n d o o s e r i t r ó c i t o s s o f r e m h e m ó l i s e . T r a t a - s e d e u m a p r o t e í n a f a c i l m e n t e c r i s t a l i z á v e l [ 5 0 ] .
O
c i a d e t a x a s c i s a l h a n t e s . Q u a n d o s ã o p r o d u z i d o s n a m e d u l a ó s s e a , s ã o n u c l e a d o s e c o m f o r m a i r r e g u l a r . A o a t i n g i r e m a m a t u r i d a d e , e x p e l e m o n ú c l e o ( a d q u i r i n d o f o r m a b i c ô n c a v a ) e e n t r a m n a c o r r e n t e s a n g u í n e a . A p ó s a l g u m t e m p o s o f r e m h e m ó l i s e , s e n d o e n t ã o f a g o c i t a d o s p e l o s m a c r ó f a g o s [ 5 1 ] .
N
m á v e i s . A c o m p r e e n s ã o d a g e o m e t r i a e d e f o r m a b i l i d a d e d o s e r i t r ó c i t o s f a c i l i t a o e n t e n d i m e n t o d a s p r o p r i e d a d e s r e o l ó g i c a s d o s a n g u e .
O
l a ç ã o s a n g u í n e a e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a s e n d o c o n s t i t u í d o d e c e r c a d e 4 - 5 % d e c a r b o i d r a t o .
É
t i c i a i s s e n d o p r o d u z i d o n o f í g a d o e p o r m e c a n i s m o s d o p a r ê n q u i m a h e p á t i c o . S u a v i d a m é d i a é c u r t a ( 2 , 5 a 4 , 5 d i a s a p r o x i m a d a m e n t e ) e s u a f o r m a ç ã o é c o o r d e n a d a p e l a c o n c e n t r a ç ã o d o p l a s m a .
i n d o c e r c a d e 3 4 0 k D a ( q u i l o d a l t o n s ) e 4 5 n m d e c o m p r i m e n t o . C a d a m o n ô m e r o c o n s i s t e d e t r ê s c a d e i a s d i f e r e n c i a d a s , Aα ( 6 6 , 5 k D a ) , Bβ( 5 2 K d a ) , γ ( 4 6 k D a ) , e u m a p o r ç ã o N - t e r m i n a l d e s e i s c a d e i a s l i g a d a s p o r 1 1 p o n t e s d e d i s s u l f e t o s n o c e n t r o [ 5 2 ] .
C
n s á v e i s p o r g e r a r a u m e n t o s d o s r i s c o s d e d o e n ç a s c o r o n á r i a s , c e r e b r a i s e v a s c u l a r e s [ 5 3 ] . P o r e s s a r a z ã o a c o m p r e e n s ã o d o c o m p o r t a m e n t o d o f i b r i n o g ê n i o e m r e l a ç ã o a o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a s e t o r n a e v i d e n t e . N a s e d i m e n t a ç ã o d e h e m á c i a s o f i b r i n o g ê n i o a g e c o m o r e s p o n s á v e l p e l o a u m e n t o d a v e l o c i d a d e d o p r o c e s s o [ 5 4 ] .
O
d o m í n i o c e n t r a l ( F i g u r a 6 . 1 ) [ 5 5 ] . A o s e r e m r e m o v i d o s o s f i b r i n o p e p t í d e o s d o s s í t i o s c o r t a d o s f p A e f p B i n t e r a g e m c o m o s d o m í n i o s t e r m i n a i s r e s u l t a n d o n a m o n t a g e m d a f i b r i n a . A r e a t i v i d a d e d a f i b r i n a é r e l a c i o n a d a c o m m u d a n ç a s c o n f o r m a c i o n a i s e e s t r u t u r a i s , e m q u e o f i b r i n o g ê n i o é c o n v e r t i d o e m f i b r i n a e x p o n d o s í t i o s r e a t i v o s .
Trombina
fpA,fpB
Protofibrila
Agregação de Fibras
Fibrinogênio
I G U R A 6 . 1 : D i a g r a m a d a f o r m a ç ã o d e f i b r a s d e f i b r i n a.
f i b r i n o g ê n i o é u m a s u b s t â n c i a i n e r t e n a c i r c u l a ç ã o s a n g u í n e a , e n q u a
x i s t e m e s t u d o s c o m o o b j e t i v o d e d e t e r m i n a r a e x i s t ê n c i a d e u m m e c a n
c o n c e n t r a ç ã o d e f i b r i n o g ê n i o p a r a a m o s t r a s d e g a d o b o v i n o a d u l t o
F O
n t o a f i b r i n a e x p r e s s a d i f e r e n t e s a t i v i d a d e s n o s p r o c e s s o s b i o l ó g i c o s . A c r e d i t a - s e q u e a f i b r i n a s e r v e c o m o s u p o r t e p a r a o c r e s c i m e n t o d e t e c i d o s e u m a b a r r e i r a p a r a a p r o l i f e r a ç ã o d e b a c t é r i a s .
E
i s m o e s p e c í f i c o d e l i g a ç ã o e n t r e o f i b r i n o g ê n i o e o s e r i t r ó c i t o s . A p a r t i r d e s s a s p e s q u i s a s f o r a m c o m p r o v a d a s q u e a s l i g a ç õ e s e s p e c í f i c a s d a s m o l é c u l a s d e f i b r i n o g ê n i o o c o r r e m n a s u p e r f í c i e e x t e r n a d o s e r i t r ó c i t o s . N o c a s o d e e r i t r ó c i t o s d e r a t o s f o r a m d e t e r m i n a d o s 1 9 3 2 ± 1 0 4 s í t i o s p a r a l i g a ç õ e s e s p e c í f i c a s d e f i b r i n o g ê n i o , o n d e a p r o x i m a d a m e n t e 8 0 % d o s s í t i o s s e e n c o n t r a m o c u p a d o s p o r f i b r i n o g ê n i o . U m e s t u d o c o m e r i t r ó c i t o s h u m a n o s i n t a c t o s a p r e s e n t o u u m a a f i n i d a d e s i m i l a r [ 5 6 ] .
A
7 . 0 - A G R E G A Ç Ã O
A a g r e g a ç ã o d o s e r i t r ó c i t o s t e m s i d o m o n i t o r a d a p a r a d e t e r m i n a r a p r e s e
O f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o e r i t r o c i t á r i a t e m s i d o e s t u d a d o d u r a n t e m u i t o
O s p r i m e i r o s a e s t u d a r e m o f e n ô m e n o d e a g r e g a ç ã o f o r a m o s g r e g o
O s e r i t r ó c i t o s q u a n d o s u s p e n s o s e m q u a l q u e r s o l u ç ã o c o n t e n d o p r o t e
S c h m i d - S c h ö e n d e s c r e v e o m e c a n i s m o d e a g r e g a ç ã o a t r a v é s d o s s e g
i ) A m e m b r a n a d o s e r i t r ó c i t o s p e r m i t e a a b s o r ç ã o d e m o l é c u l a s
i i ) D e v i d o a o g r a n d e c o m p r i m e n t o , a s p a r t e s t e r m i n a i s l i v r e s d a s
i i i ) O s g l ó b u l o s v e r m e l h o s p o d e m n o r m a l m e n t e d e f o r m a r - s e ;
i v ) A s f o r ç a s a d e s i v a s s ã o m a i o r e s q u e a s d i s p e r s i v a s p e l o f l u x o d o
E s t u d o s c o m p r o t e í n a s a g r e g a n t e s i s o l a d a s a p r e s e n t a m a e x i s t ê n c i a d e
n ç a d e a l g u m a s p a t o l o g i a s . A f o r m a ç ã o d e r o l o s ( r o l e a u x ) é a p r i n c i p a l c a u s a d e r e d u ç ã o d a e s t a b i l i d a d e d a s u s p e n s ã o e m l o c a i s c o m b a i x a s t a x a s d e f l u x o n a c i r c u l a ç ã o s e n d o r e s p o n s á v e l p o r d i s t ú r b i o s m i c r o c i r c u l a r e s [ 5 9 ] .
s a n o s e p o s s u i g r a n d e s i g n i f i c a d o p r á t i c o n o s d i a s a t u a i s . O e s t u d o d e s t e f e n ô m e n o e n g l o b a á r e a s c o m o f i s i o l o g i a , m e d i c i n a l a b o r a t o r i a l , f í s i c o - q u í m i c a , h e m o r r e o l o g i a , e t c .
s a c e r c a d e 2 5 0 0 a n o s a t r á s . E l e s p e r c e b e r a m q u e o s a n g u e d e p a c i e n t e s c o m c o m p o s i ç ã o d e p l a s m a a n o r m a l s e d i m e n t a v a a n t e s q u e o f e n ô m e n o d e c o a g u l a ç ã o o c o r r e s s e , f o r m a n d o u m a c r o s t a d e n o m i n a d a c r o s t a i n f l a m a t ó r i a ( b u f f y c o a t ) . F a h r a e u s e W e s t e r g r e n [ 6 0 ] f o c a l i z a r a m s e u s t r a b a l h o s n o e s t u d o d o p r o c e s s o d e s e d i m e n t a ç ã o d e s e n v o l v e n d o e n t ã o u m m é t o d o q u e é u s a d o c o m o i n d i c a d o r d e d o e n ç a s n a p r á t i c a m é d i c a a t u a l .
í n a s d e a l t o p e s o m o l e c u l a r s o f r e m a g r e g a ç ã o f o r m a n d o r o u l e a u x ( r o l o s ) e m u m p r o c e s s o r e v e r s í v e l [ 6 1 ] . A n t e s d e s t e f e n ô m e n o a c o n t e c e r , a s c é l u l a s t e m q u e e n t r a r e m c o n t a t o p o r f o r ç a s e x t e r n a s : p o r e x e m p l o , p o r c o l i s õ e s i n d u z i d a s . A s c o l i s õ e s s ã o i n e v i t á v e i s e m q u a l q u e r m e i o . Q u a l q u e r t e n t a t i v a d e q u a n t i f i c a r o p r o c e s s o d e a g r e g a ç ã o e x i g e p r i m e i r o q u e o s a g r e g a d o s s e j a m d i s p e r s o s .
u i n t e s p r i n c í p i o s [ 6 2 ] : (
c o m o u m f i l m e a d e s i v o ; (
m a c r o m o l é c u l a s p o d e m a d e r i r à s u p e r f í c i e d o e r i t r ó c i t o v i z i n h o f o r m a n d o p o n t e s , i s s o s e a d i m e n s ã o e x c e d e r a f a i x a d e r e p u l s ã o c o u l o m b i a n a e x e r c i d a s p e l a s c a r g a s d a m e m b r a n a ( e x : á c i d o s i á l i c o ) . (
(
s a n g u e .
