PD&I PESQUISA, DESENVOLVIMENTO E INOVAÇÃO PASSADO, PRESENTE E FUTURO

(1)

PD&I

PESQUISA, DESENVOLVIMENTO

E INOVAÇÃO

LIPOSSOMAS:

PASSADO,

PRESENTE

E FUTURO

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Uso Ativos Livres Possíveis Vantagens do Uso de Ativos em Veículos Área Normal Área Alvo Área Normal Área Alvo

ENCAPSULAÇÃO ATIVOS

Ambiente Inativação ?? Ativo Livre Efeito Limitado Ambiente Ativo em Veículo Acesso, Afinidade Efeito: toxicidade? Não Acesso, Não Afinidade

(3)

LIPOSSOMAS

Histórico

Foram descritos na década de 60 por Alec

Bangham: “Esférulas de Fosfolipídios”

Termo Lipossomas introduzido por Sessa

e Weissman – final década 60

Foram usados inicialmente em pesquisa

básica: como modelo de membrana celular

(mimetização celular)

São aplicados em diversas áreas:

cosmética, alimentícia, farmacêutica e

médica.

(4)

LIPOSSOMAS

Molécula Anfifílica Zwitteriônico (dipolar) Cabeça Polar Hidrofílica Ácido graxo insaturado Ácido graxo saturado Cauda Apolar Hidrofóbica

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LIPOSSOMAS

Moléculas Anfifílicas formam Estruturas Supramoleculares em Água

bicamada plana membrana (lamela)

Fosfolipídios livres em água

Vesícula Esférica Unilamelar

(6)

O que são lipossomas?

Hidrofílicas

Anfifílicas

LIPOSSOMAS

Hidrofílicas

Hidrofóbicas

(7)

INTERAÇÃO COM CÉLULAS

LIPOSSOMAS

Adsorção Endocitose Troca Lipídica Fusão Endocitose

(8)

Método de Bangham : Hidratação do

Filme Seco de Lipídios

LIPOSSOMAS

1. Evaporação do solvente 2. Formação do filme lipídico

seco

3. Hidratação do filme - MLV 4. Uniformização de tamanhos

(9)

LIPOSSOMAS

LUV / SUV

MLV, OLV MVV

Tipos

LUV / SUV

Unilamelar Grande / Pequeno

MLV, OLV Multi ou Oligolamelar MVV Multivesicular

Transição Fase

Temperatura Baixa

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LIPOSSOMAS

Encapsulação

Proteção, Solubilização - 1ª geração Alvo Específico - 2ª geração

Anfifílico

Hidrofílico

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Inativo:

lipossomas convencionais agrupam-se aos

tecidos específicos do sistema reticuloendotelial

Direcionamento do Ativo

LIPOSSOMAS

Ativo:

alteração da superfície dos lipossomas com

ligantes (anticorpos, enzimas, proteína A, açúcares)

Diretamente

ao local

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Definir Objetivo

Objetivo Alcançado

Definir Formulação

Compilar/Analisar

Resultados

Decidir

LIPOSSOMAS

Mental

Experimental

Manipulação

Solução

Resposta

Análise

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LIPOSSOMAS - PROCESSOS

• Simples

• Reprodutível

• Escalonável

• Controle tamanho lipossomas

• Boa relação custo/eficácia e custo/benefício

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LIPOSSOMAS - DESAFIOS

Problemas: “Triple S”

. “Sterility”’

. “Stability”

. “Scale-Up”

Contornados através de

Novos Equipamentos

e Processos – Análise

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1 o

_{RELATO DO USO LIPOSSOMAS}

P/ TRATAMENTO

• Paciente com Doença de Gaucher: deficiência em

glucocerebrosidase lisossomal

hepatoesplenomegalia

• Administração glucocerebrosidase lipossomal através de injeções

iv por 13 meses em paciente esplenectomizado

• Redução tamanho fígado; melhora função RES

• Administração por 5 anos: estabilização do tamanho fígado e da

saúde em geral

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Conhecimento de 1

os

_{humanos tratados com}

lipossomas comerciais (injetável)

LIPOSSOMAS COMERCIAIS

Daunoxome e Ambisome

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Ativo / Produto Indicação Ano Aprovação

Anfotericina B / Ambisome Infecção Fúngica;_Leishmaniose 1990 (Europa); 1997₂₀₀₀ Doxorrubicina / Doxil (USA) e Sarcoma de Kaposi_{Câncer de Ovário} 1995₁₉₉₉

LIPOSSOMAS COMERCIAIS

Doxorrubicina / Doxil (USA) e

Caelyx (outros países) Câncer de Ovário Câncer de Mama

1999

1999 (EUA) 2003 Daunorrubicina / Daunoxome Sarcoma de Kaposi 1996

Citarabina (Cytosine Arabinoside) / DepoCyt Meningite Linfomatosa Meningite Neoplásica 1999 Fase IV

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Ativo / Produto Indicação Ano Aprovação

Doxorrubicina / Myocet Câncer Mama Metástico 2000 (Europa) Verteporfina / Visudyne Degeneração Macular Miopia Patológica 2000 2001

LIPOSSOMAS COMERCIAIS

Verteporfina / Visudyne Miopia Patológica Histoplasmose Ocular

2001 Sulfato de Morfina / DepoDur Dor Pós-Cirúrgica

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LIPOSSOMAS – FASE III/IV

Ativo Indicação Fase Clínica

Cisplatina Câncer de Pulmão Fase III Cisplatina Câncer de Pulmão Fase III Citarabina (Cytosine

Arabinoside) Meningite Neoplásica Fase IV Lurtotecan Câncer de Ovário Fase III

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LIPOSSOMAS – FASE I/II

Vincristine Linfoma Não-Hodgin Fase II Paclitaxel Tumor Sólido Avançado Fase I/II Aroplatina Câncer Fase I/II Aroplatina Câncer Fase I/II Atra – IV Linfoma Células-T _Não-Hodgin Fase II Interleukina 2

Estimulante Imunológico usado com Vacina Câncer

Pulmão

Fase II Prostraglandina E-1 Doença Arterial Periférica Fase II

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LIPOSSOMAS – FASE I/II

Mitoxantrona Câncer Avançado Fase I/II Cisplatina (Stealth) Câncer Avançado Fase I/II Oxaliplatina Câncer Colo Retal Fase II

Topotecan Câncer Avançado Fase I/II Paclitaxel Câncer Pulmão, Mama e

Ovário Fase I/II Paclitaxel Câncer Próstata e _Pâncreas Fase II Vinorelbina Câncer Avançado Fase I

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LIPOSSOMAS CONVENCIONAIS

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(24)

AMBISOME

®

Anfotericina B Lipossomal – 50 mg/frasco

• Administração iv

• Pó Liófilo

• Após reconstituição com água: dispersão lipossomal amarela e translucente

• Excipientes: HSPC, DSPG, Colesterol, Sacarose, Succinato Dissódico Hexahidratado, Alfa-Tocoferol

(25)

AMBISOME

®

• Utilizado em pacientes com intolerância à terapia com Anf B convencional ou em: idosos, pacientes com AIDS, em tratamento quimioterápico

• Diminui toxicidade

(26)

DAUNOXOME

®

Daunorrubicina Lipossomal – 50 mg, 2 mg/mL

• Sarcoma de Kaposi em estado avançado - HIV

• Dispersão Lipossomal vermelha e translucente – SUV, D_médio 45 nm

• Excipientes: DSPC, Colesterol, Sacarose, Glicina, Cloreto de Cálcio

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DEPOCYT

®

Citarabina Lipossomal – 50 mg/ frasco (5 mL)

• Meningite Linfomatosa

• Administração Intratecal (normal/e a cd 2 semanas: 82 h)

• MVV: Suspensão Branca Estéril

• Excipientes: DOPC, DPPG, Colesterol, Trioleína

• pH: 5,5 – 8,5

Vesículas não concêntricas, cada uma

com um cerne aquoso interno que

encapsula a solução com o ativo,

circundada por uma bicamada lipídica.

(28)

DEPODUR

®

Sulfato de Morfina Lipossomal – 10 mg/mL (2 mL)

• Dor Pós-Cirurgia

• Liberação prolongada por 48 horas

• Administração Epidural

• MVV: Suspensão Branca Estéril

• Excipientes: DOPC, DPPG, Colesterol, Trioleína e Tricaprilina

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VISUDYNE

®

Verteporfina Pó Liófilo – 15 mg / frasco

• Degeneração Macular, Miopia Patológica, Histoplasmose Ocular

• Verteporfina é ativada por luz: mistura 1:1 de 2 isômeros (I e II)

• Terapia fotodinâmica: Laser de baixa energia

• Liofilizado verde escuro

• Após reconstituição com 7 mL de água: 2 mg/mL (7,5 mL)

• Excipientes: DMPC, EPG, Ascorbil Palmitato, Hidroxitolueno Butilado, Lactose

(30)

(31)

(32)

DOXIL

®

Doxorrubicina Lipossomal – 2 mg/mL

• Sarcoma de Kaposi, Câncer de Ovário e de Mama

• Administração iv (normalmente a cd 4 semanas)

• Lipossomas “Stealth”: Liberação prolongada (metoxiPEG) – 55 h

• Dispersão lipossomal estéril vermelha translucente (SUV)

• + 90% Doxorrubicina encapsulada

• Excipientes: HSPC, DSPE-MPEG, Colesterol, Sulfato de Amônia, Histidina, Sacarose

(33)

(34)

FLEX POWER

®

Salicilato de Trolamina 10%

• Tecnologia Flex-• Tecnologia Flex-Somes • Usado p/ artrite, tendinite e dor nas costas, ombros, pescoço, joelho, tornozelo...

(35)

VIROSSOMAS

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EPAXAL

®

Vacina Hepatite A

•

Primeiro produto baseado na Tecnologia Virossomas

• Sem alumínio: maior tolerabilidade

• Induz a formação de anticorpos nos 10 primeiros dias

• Após segunda dose: proteção por 20 anos

• Registro em + de 40 países

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INFLEXAL

®

Vacina Influenza

• Tecnologia Virossomas • Introduzida em 1997 • Registro em 43 países

• Única vacina que pode ser usada para todas faixas etárias (a partir 6 meses)

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LIPOSSOMAS CATIÔNICOS

CATIÔNICOS

Aplicações:

Médico-farmacêuticas

(vacina- terapia gênica)

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LIPOSSOMAS / DNA

+

Lipossoma Catiônico Desidratação Rehidratação controlada + + + + + + + + + + ₊ + + + + Lipossomas Catiônicos Multilamelares + + + + + + + + + + Complexação Eletrostática Condições controladas + + + + + + + + + + + + + + -- -- -- -+ + + + + Complexo + + +

(600 nm)

Rosada, Torre et al., 2008

DNA plasmídeo -- -- - _{DNA/Lipossoma}Complexo Catiônico + -- -- - + + + + + + + + + + + + + + + Lipossoma catiônico encapsulando DNA -Desidratação Rehidratação controlada Lipossoma Catiônico DNA Plasmídeo + + + + + + + + + +

(600 nm)

(250 nm)

(40)

• Lipossomas Polimerizados:

administração oral

LIPOSSOMAS

Perspectivas Futuras

• Lipossomas Magnéticos: direciona/o

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LIPOSSOMAS

Perspectivas Futuras

• Lipossomas com

microbolhas + ultrassom:

- potencial p/ tratamento trombose - potencial p/ entrega ativos

• Lipossomas com

microbolhas + temperatura: potencial p/ tratamento não-invasivo tumor cérebro

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LIPOSSOMAS

Terapia Gênica:

Introdução de material genético exógeno nas células alvo com o objetivo de corrigir ou eliminar a nível molecular as

causas de patologias que envolvam fatores genéticos Cura completa após única administração e sem Cura completa após única administração e sem efeitos adversos

small interfering RNA

Uso Lipossomas como Vetor

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