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Avaliação de doses subletais e do risco ambiental da oxitetraciclina em larvas de tilápia-do-nilo submetidas à manejo de estresse. - Portal Embrapa

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1 Autor, Bolsista CNPq (PIBIC): Graduação em Jaguariúna-SP; nataliaakemi3@gmail.com.

2 Colaborador, Bolsista CNPq (ITI-A): Graduação Jaguariúna-SP.

3 Colaborador, Pesquisador da Embrapa Meio Ambiente

4 Colaborador, Bolsista de Desenvolvimento Tecnológico Industrial do CNPq 5 Orientador: Pesquisador da Embrapa Meio Ambiente, Jaguariúna

AVALIAÇÃO DE DOSES SUBLETAIS E DO RISCO LARVAS DE

TILÁPIA-Natalia Akemi Takeshita¹; Bruna Milke

RESUMO – A intensificação da aquicultura gerou o aumento de doenças

consequentemente a utilização de antibióticos. dosagens subletais de oxitetraciclina após a

tilápia-do-nilo, assim como determinar o risco ambiental e verificar o possível efeito deste fármaco nos parâmetros de qualidade da água.

33,9±0,73 mg e comprimento médio inicial de 13±

e em jejum por 12 horas. Após o estresse por exposição ao ar durante cinco minutos, os peixes foram distribuídos aleatoriamente em 21 aquários (10 larvas/aquário), onde foram ex

concentrações de oxitetraciclina 0,03; 0,82; 1,65; 2,47; 3,30 e 4,12 mg L

tratamentos, incluindo o controle e três repetições de cada tratamento. A mortalidade foi contabilizada 24 e 48 horas após a exposição ao antibiótic

foram medidos diariamente (pH, oxigênio dissolvido, temperatura, condutividade). foi classificada de acordo com o risco

para o cálculo de coeficiente de obtidos demonstraram diferença potencializa os efeitos tóxicos da oxitetraciclina apresenta alto risco

Palavras-chaves: antibiótico, piscicultura,

1 Autor, Bolsista CNPq (PIBIC): Graduação em Medicina Veterinária, Centro Universitário de Jaguariúna nataliaakemi3@gmail.com.

: Graduação Medicina Veterinária, Centro Universitário de Jaguariúna Colaborador, Pesquisador da Embrapa Meio Ambiente, Jaguariúna-SP.

Colaborador, Bolsista de Desenvolvimento Tecnológico Industrial do CNPq – Nível B, Jaguariúna 5 Orientador: Pesquisador da Embrapa Meio Ambiente, Jaguariúna-SP; hamilton.hisano@embrapa.br

AVALIAÇÃO DE DOSES SUBLETAIS E DO RISCO AMBIENTAL DA OXITETRACICLINA EM -DO-NILO SUBMETIDAS AO MANEJO DE ESTRESSE

Bruna Milke Chiste2; Claudio Martin Jonsson³; Mattioli4; Hamilton Hisano5

Nº 20407

A intensificação da aquicultura gerou o aumento de doenças bacterianas

consequentemente a utilização de antibióticos. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito de s subletais de oxitetraciclina após a exposição ao ar sobre a mortalidade de larvas de nilo, assim como determinar o risco ambiental e verificar o possível efeito deste fármaco nos parâmetros de qualidade da água. Foram utilizadas 210 larvas com peso médio inicial de o médio inicial de 13±0,72 mm, previamente aclimatadas por 48 horas . Após o estresse por exposição ao ar durante cinco minutos, os peixes foram distribuídos aleatoriamente em 21 aquários (10 larvas/aquário), onde foram ex

concentrações de oxitetraciclina 0,03; 0,82; 1,65; 2,47; 3,30 e 4,12 mg L

tratamentos, incluindo o controle e três repetições de cada tratamento. A mortalidade foi contabilizada 24 e 48 horas após a exposição ao antibiótico. Os parâmetros de qualidade da água foram medidos diariamente (pH, oxigênio dissolvido, temperatura, condutividade).

risco de contaminação ambiental para os peixes, risco (CR). Os valores de pH, temperatura

estatística significativa. O manejo de estresse (exposição ao ar) da oxitetraciclina. Além disso, com base no

risco para larvas de tilápia-do-nilo.

antibiótico, piscicultura, impacto ambiental, toxicidade, Oreochromis niloticus

Centro Universitário de Jaguariúna - UNIFAJ, Medicina Veterinária, Centro Universitário de Jaguariúna - UNIFAJ,

Nível B, Jaguariúna-SP. hamilton.hisano@embrapa.br.

AMBIENTAL DA OXITETRACICLINA EM NILO SUBMETIDAS AO MANEJO DE ESTRESSE

; Cristiano Campos

bacterianas nos peixes, e estudo foi avaliar o efeito de exposição ao ar sobre a mortalidade de larvas de nilo, assim como determinar o risco ambiental e verificar o possível efeito deste fármaco com peso médio inicial de 0,72 mm, previamente aclimatadas por 48 horas . Após o estresse por exposição ao ar durante cinco minutos, os peixes foram distribuídos aleatoriamente em 21 aquários (10 larvas/aquário), onde foram expostos a seis concentrações de oxitetraciclina 0,03; 0,82; 1,65; 2,47; 3,30 e 4,12 mg L-1, totalizando sete tratamentos, incluindo o controle e três repetições de cada tratamento. A mortalidade foi o. Os parâmetros de qualidade da água foram medidos diariamente (pH, oxigênio dissolvido, temperatura, condutividade). A oxitetraciclina peixes, usando o método temperatura e oxigênio dissolvido O manejo de estresse (exposição ao ar) coeficiente de risco, a

(2)

ABSTRACT – The intensification of aquaculture

consequently the use of antibiotics. The objective of the study was to evaluate the effect of sub lethal dosages of oxytetracycline

as to determine the environmental risk and verify the possible effect of this drug on water quality parameters. A total of 210 larvae were used with an average initial weight of 33.9±0.73 mg and an average initial length of 13±0.72 mm, previously acclimated for 4

After stress from exposure to air for five minutes, larvae/aquarium), where they were exposed to six

2.47; 3.30 and 4.12 mg L-1, totaling seven treatments, including control and three repetitions of each treatment. Mortality was counted 24 and 48 hours after exposure to the antibiotic. Water quality parameters were measured daily (pH, dissolved oxygen, temperature, conductivity).

was classified according to the risk of environmental contamination for fish, using the method for calculating the risk coefficient (RC).

statistically significant difference. Stre

of oxytetracycline. In addition, based on the risk coefficient, oxytetracycline presents high risk for Nile tilapia larvae.

Keywords: antibiotic, fish farming,

1 INTRODUÇÃO

A tilápia-do-nilo é uma das princip pelo seu potencial zootécnico (BARROSO Brasil alcançou 432.149 toneladas, nacional (MEDEIROS; ALBUQUERQUE,

atualmente estão baseados no uso de altas den

2013). Dessa forma, problemas com baixa qualidade de água e estresse aos animais são frequentes, podendo ocasionar i

produção cada vez mais dependente de químicos para o tratamento de enfermidades, dos antimicrobianos (MONTEIRO

A oxitetraciclina é um antibiótico do grupo das tetraciclinas e sua utilização é bastante difundida mundialmente para o tratamento de infecções bacterianas em peixes (RIGOS; TROISI, 2005), devido seu amplo espectro, efetividade e baixo custo. Este antibiót

The intensification of aquaculture has increased the bacterial

consequently the use of antibiotics. The objective of the study was to evaluate the effect of sub lethal dosages of oxytetracycline after exposure to air on the mortality of Nile tilapia larvae, as well

etermine the environmental risk and verify the possible effect of this drug on water quality parameters. A total of 210 larvae were used with an average initial weight of 33.9±0.73 mg and an average initial length of 13±0.72 mm, previously acclimated for 48 hours and fasted for 12 hours.

osure to air for five minutes, fish were randomly assigned to 21 aquaria larvae/aquarium), where they were exposed to six oxytetracycline concentrations: 0.03;

, totaling seven treatments, including control and three repetitions of each treatment. Mortality was counted 24 and 48 hours after exposure to the antibiotic. Water quality parameters were measured daily (pH, dissolved oxygen, temperature, conductivity).

was classified according to the risk of environmental contamination for fish, using the method for calculating the risk coefficient (RC). The values of pH, temperature and dissolved oxygen showed a statistically significant difference. Stress management (exposure to air) potentiates the

In addition, based on the risk coefficient, oxytetracycline presents high risk for

antibiotic, fish farming, environmental impact, toxicity, Oreochromis niloticus

uma das principais espécies de peixes produzidos no B BARROSO; MUÑOZ; CAI, 2019). Em 2019, a

alcançou 432.149 toneladas, representando 57% do total da produção da MEDEIROS; ALBUQUERQUE, 2020). Os sistemas de produção aquícolas

baseados no uso de altas densidades de estocagem de peixes

oblemas com baixa qualidade de água e estresse aos animais são ocasionar imunossupressão e aumento do risco de doenças, tornando a produção cada vez mais dependente de químicos para o tratamento de enfermidades,

ianos (MONTEIRO et al., 2015).

A oxitetraciclina é um antibiótico do grupo das tetraciclinas e sua utilização é bastante difundida mundialmente para o tratamento de infecções bacterianas em peixes (RIGOS; TROISI, 2005), devido seu amplo espectro, efetividade e baixo custo. Este antibiót

2 the bacterial diseases in fish, and consequently the use of antibiotics. The objective of the study was to evaluate the effect of

sub-exposure to air on the mortality of Nile tilapia larvae, as well etermine the environmental risk and verify the possible effect of this drug on water quality parameters. A total of 210 larvae were used with an average initial weight of 33.9±0.73 mg and an 8 hours and fasted for 12 hours. andomly assigned to 21 aquaria (10 oxytetracycline concentrations: 0.03; 0.82; 1.65; , totaling seven treatments, including control and three repetitions of each treatment. Mortality was counted 24 and 48 hours after exposure to the antibiotic. Water quality parameters were measured daily (pH, dissolved oxygen, temperature, conductivity). Oxytetracycline was classified according to the risk of environmental contamination for fish, using the method for The values of pH, temperature and dissolved oxygen showed a ss management (exposure to air) potentiates the toxic effects In addition, based on the risk coefficient, oxytetracycline presents high risk for

reochromis niloticus.

no Brasil, e se destaca produção de tilápia no % do total da produção da piscicultura aquícolas preconizados sidades de estocagem de peixes (GARCIA et al., oblemas com baixa qualidade de água e estresse aos animais são munossupressão e aumento do risco de doenças, tornando a produção cada vez mais dependente de químicos para o tratamento de enfermidades, a exemplo

A oxitetraciclina é um antibiótico do grupo das tetraciclinas e sua utilização é bastante difundida mundialmente para o tratamento de infecções bacterianas em peixes (RIGOS; TROISI, 2005), devido seu amplo espectro, efetividade e baixo custo. Este antibiótico possui ação

(3)

bacteriostática e inibe a síntese proteica em bactérias gram NEMGAS; ALEXIS, 2006).

Apesar de muito efetivo, o uso da oxitetraciclina em peixes pode gerar distúrbios no organismo dos peixes, devido à

(MARSHALL; LEVY, 2011). Pode

al., 2015), alterações na eritropoiese e na (REDA et al., 2013; RIJKERS et al

causando lesões no sistema nervoso, degradação celular, morte celular (RODRIGUES e hepatotoxicidade (GUARDIOLA

Por outro lado, os antibióticos

qual representa o impacto da substância para os organismos no meio ambiente (FUJIMOTO 2012). Quando esse tipo de medicamento contamina os corpos hídricos pode desenvolver resistência aos antibióticos por algumas bactérias, riscos à saúde humana, microflora e microfauna ambiental (RIGOS et al., 2004).

Os peixes são expostos a condições estressantes durante o manejo em pisciculturas, e o estresse é uma resposta do organismo a qualquer

provocando modificações no estado fisiológico estocagem e o baixo nível de oxigênio

al., 2014), onde o aumento de densidade nos sistemas de produção gerando sua resposta imune e seu desempenho ocorrer durante as atividades

manuseio resultando em alterações

Os organismos aquáticos sofrem alterações metabólicas quando expostos a estre

ambientais como substâncias químicas e mudanças na temperatura do ambiente (IWAMA, 1998). Essa resposta pode ser caracterizada

incluem uma elevação no plasma cortisol (MOORE; HAWKE, 2004). fisiológicas mediada pelos hormônios alteração na proteína total e glicose gerais no organismo do animal em de desenvolvimento do peixe e tentando

bacteriostática e inibe a síntese proteica em bactérias gram-negativas e gram

Apesar de muito efetivo, o uso da oxitetraciclina em peixes pode gerar distúrbios

ido à utilização excessiva ou inadequada desse medicamento Pode também ocasionar imunossupressão, nefrotoxicidade (ISLAM alterações na eritropoiese e na imunidade celular com diminuição do índice fagocitário

et al., 1980), estresse oxidativo (radicais hidroxila e peroxinitrito) causando lesões no sistema nervoso, degradação celular, morte celular (RODRIGUES

e hepatotoxicidade (GUARDIOLA et al., 2012).

óticos podem ser classificados de acordo com o risco ambiental, o qual representa o impacto da substância para os organismos no meio ambiente (FUJIMOTO 2012). Quando esse tipo de medicamento contamina os corpos hídricos pode desenvolver

algumas bactérias, riscos à saúde humana, microflora e microfauna

Os peixes são expostos a condições estressantes durante o manejo em pisciculturas, e o estresse é uma resposta do organismo a qualquer situação que altere o estado de repouso normal provocando modificações no estado fisiológico e mudanças bioquímicas

oxigênio dissolvido são os principais estressores densidade na criação e produção no geral levou gerando um estressor que altera o bem-estar dos desempenho do crescimento (YOUSEFI et al., 2016).

de criação, como hipercapnia, hipóxia, alterações no metabolismo dos peixes (HOSEINI et

Os organismos aquáticos sofrem alterações metabólicas quando expostos a estre

ambientais como substâncias químicas e mudanças na temperatura do ambiente (IWAMA, 1998). caracterizada por primária, secundária e terciária.

plasma dos níveis de corticosteroides e catecolaminas, 2004). Os efeitos secundários levam a alterações hormônios do estresse, onde há ativação de várias

glicose do sangue. Por fim, os efeitos terciários em relação à quebra de energia, desviando tentando suprir as alterações obtidas do estresse

3 negativas e gram-positivas (RIGOS;

Apesar de muito efetivo, o uso da oxitetraciclina em peixes pode gerar distúrbios negativos o excessiva ou inadequada desse medicamento imunossupressão, nefrotoxicidade (ISLAM et imunidade celular com diminuição do índice fagocitário ., 1980), estresse oxidativo (radicais hidroxila e peroxinitrito) causando lesões no sistema nervoso, degradação celular, morte celular (RODRIGUES et al., 2018)

de acordo com o risco ambiental, o qual representa o impacto da substância para os organismos no meio ambiente (FUJIMOTO et al., 2012). Quando esse tipo de medicamento contamina os corpos hídricos pode desenvolver algumas bactérias, riscos à saúde humana, microflora e microfauna

Os peixes são expostos a condições estressantes durante o manejo em pisciculturas, e o situação que altere o estado de repouso normal e mudanças bioquímicas. A densidade de estressores na piscicultura (NI et levou a uma superlotação dos peixes, assim como 2016). Estressores podem transporte, triagem e

al., 2016).

Os organismos aquáticos sofrem alterações metabólicas quando expostos a estressores ambientais como substâncias químicas e mudanças na temperatura do ambiente (IWAMA, 1998). terciária. Os efeitos primários catecolaminas, principalmente o alterações bioquímicas e várias vias metabólicas e terciários englobam alterações os substratos das vias estresse (IWAMA, 1998).

(4)

A resposta ao estresse é mediada pelo sistema neuroendócrino e celular em nível molecular e orgânico. Essas respostas afetam diretamente a saúde do animal em relação à resistência a doenças, ao crescimento e à reprodução (NAKANO

situação estressante a capacidade do animal de tolerar estressores depende da resposta terciária do organismo, e em conjunto com a presença de um tóxico no ambiente aquático a resposta fica ainda mais comprometida, pois o nível de efeitos será ainda maior envolvendo

molecular, celular e bioquímico (WEIS Nas fases iniciais de de

distintos dos adultos devido à questão ecológica e aquisição de recursos, assim o estudo das larvas é importante em relação a

comportamento dos animais, levando em consideração que são contaminantes e condições estressantes

presente estudo foi avaliar o efeito de dosagens sobre a mortalidade de larvas de tilápia

o possível efeito deste fármaco nos parâmetros de qualidade da

2 MATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi conduzido no Laboratório de Ecotoxicolo Meio Ambiente, Jaguariúna-SP. Para os testes de

Terramicina® como fonte de oxitetraciclina e seguiram os procedimentos estabelecidos nas diretrizes da OECD (1992). Este estudo foi apr

(CEUA) da Embrapa Meio Ambiente (Protocolo nº 011/2018).

As larvas foram adquiridas em piscicultura comercial, localizada no município de Monte Mor - SP. Os animais foram previamente aclimatados por 48 horas,

desenvolvimento determinada para o estudo. A água utilizada apresentou como v

qualidade da água: temperatura 28ºC (controle por termostato); pH 6,8; aeração artificial constante, oxigênio dissolvido >5 mg L-1; condutividade 14,00

água foram efetuadas diariamente e a alimentação foi realizada com ração comercial específica para a fase. Os eventuais resíduos de fezes e sobra de rações do tanque eram retirad diariamente por sifonamento. Os parâmetros de qualidade da água foram medidos diariamente, sendo eles pH, oxigênio dissolvido, temperatura, condutividade, utilizando sonda Horiba (modelo U 53), dureza e amônia total utilizando LabconTest®.

Anteriormente ao ensaio,

realização do teste de estresse e exposição a doses sub

posta ao estresse é mediada pelo sistema neuroendócrino e celular em nível molecular e orgânico. Essas respostas afetam diretamente a saúde do animal em relação à resistência a

reprodução (NAKANO; HAYASHI; NAGAMINE

situação estressante a capacidade do animal de tolerar estressores depende da resposta terciária em conjunto com a presença de um tóxico no ambiente aquático a resposta fica ainda mais comprometida, pois o nível de efeitos será ainda maior envolvendo

(WEIS, 2001; LIMA et al. 2006).

Nas fases iniciais de desenvolvimento de vida dos peixes, as larvas são organismos questão ecológica e aquisição de recursos, assim o estudo das larvas é importante em relação ao crescimento, alimentação, mortalidade, transporte e

, levando em consideração que são mais sensíveis à exposição dições estressantes (BIALETZKI et al., 2016). Dessa forma, o objetivo do avaliar o efeito de dosagens subletais de oxitetraciclina

sobre a mortalidade de larvas de tilápia-do-nilo, assim como determinar o risco ambiental e verificar deste fármaco nos parâmetros de qualidade da água.

O experimento foi conduzido no Laboratório de Ecotoxicologia e Biossegurança da Embrapa SP. Para os testes de exposição foi utilizado

como fonte de oxitetraciclina e seguiram os procedimentos estabelecidos nas diretrizes da OECD (1992). Este estudo foi aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA) da Embrapa Meio Ambiente (Protocolo nº 011/2018).

larvas foram adquiridas em piscicultura comercial, localizada no município de Monte Mor SP. Os animais foram previamente aclimatados por 48 horas, a fim de preservar a fase de desenvolvimento determinada para o estudo. A água utilizada apresentou como v

emperatura 28ºC (controle por termostato); pH 6,8; aeração artificial constante, ; condutividade 14,00 μS cm-1 e NH4 < 0,1 mg L

água foram efetuadas diariamente e a alimentação foi realizada com ração comercial específica para a fase. Os eventuais resíduos de fezes e sobra de rações do tanque eram retirad

Os parâmetros de qualidade da água foram medidos diariamente, sendo eles pH, oxigênio dissolvido, temperatura, condutividade, utilizando sonda Horiba (modelo U 53), dureza e amônia total utilizando LabconTest®.

Anteriormente ao ensaio, os animais foram privados de alimentação por 12 horas para a stresse e exposição a doses subletais de oxitetraciclina durante o período 4 posta ao estresse é mediada pelo sistema neuroendócrino e celular em nível molecular e orgânico. Essas respostas afetam diretamente a saúde do animal em relação à resistência a HAYASHI; NAGAMINE, 2018). Quando em situação estressante a capacidade do animal de tolerar estressores depende da resposta terciária em conjunto com a presença de um tóxico no ambiente aquático a resposta fica ainda mais comprometida, pois o nível de efeitos será ainda maior envolvendo ação em nível

de vida dos peixes, as larvas são organismos questão ecológica e aquisição de recursos, assim o estudo das crescimento, alimentação, mortalidade, transporte e mais sensíveis à exposição com Dessa forma, o objetivo do após exposição ao ar determinar o risco ambiental e verificar

gia e Biossegurança da Embrapa foi utilizado produto comercial como fonte de oxitetraciclina e seguiram os procedimentos estabelecidos nas ovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais

larvas foram adquiridas em piscicultura comercial, localizada no município de Monte Mor a fim de preservar a fase de desenvolvimento determinada para o estudo. A água utilizada apresentou como variáveis de emperatura 28ºC (controle por termostato); pH 6,8; aeração artificial constante, < 0,1 mg L-1. As renovações de água foram efetuadas diariamente e a alimentação foi realizada com ração comercial específica para a fase. Os eventuais resíduos de fezes e sobra de rações do tanque eram retirados Os parâmetros de qualidade da água foram medidos diariamente, sendo eles pH, oxigênio dissolvido, temperatura, condutividade, utilizando sonda Horiba (modelo U

os animais foram privados de alimentação por 12 horas para a letais de oxitetraciclina durante o período

(5)

de 48 horas. Foram utilizadas 210

mg e comprimento médio inicial de 13 ± 0,72 mm. Após o estresse por exposição ao ar durante cinco minutos, os peixes foram distribuídos aleatoriamente em 21 aquários com volume útil de 1 L (10 larvas/aquário), onde foram expostos a seis concentrações de

2,47; 3,30 e 4,12 mg L-1, totalizando sete tratamentos, incluindo o controle e trê

cada tratamento. A mortalidade foi contabilizada 24 e 48 horas após a exposição ao antibiótico. eutanásia dos animais após o ensaio experimental (96 h)

benzocaína (250 mg L-1), seguindo a Resolução nº 1000/2012 do Conselho Federal de Medicina Veterinária (CFMV, 2012).

A oxitetraciclina foi classificada peixes, usando o método para o

DIAZ-GARDUNO et al., 2017). Segundo para calcular o CR, sendo elas

efeito não observado (CENO). Para (CL50) avaliada para essa mesma anteriores com valor de 3,45 mg partir da CL50 dividida por 10, para espécies em relação à sensibilidade. dependente da CAE, onde foi considerada al., 2014), que é eficiente no controle

O CR foi calculado a partir

interpretação do CR estabelece diferentes níveis de risco, como sendo: < 0,01: risco insignificante; 0,01 – 0,1: baixo risco;

2006, DIAZ-GARDUNO et al., 2017).

Os resultados foram submetidos ao teste de normalidade e homogeneidade da variância, seguido por análise de variância (ANOVA). Quando significativo, aplicou

para a mortalidade após o estresse e o teste de Tukey a 5% de probabilida

de qualidade de água. Os dados foram analisados no programa estatístico R versão 3.5.1. ( CORE TEAM, 2018).

3 RESULTADOS E DISCUSSÃO

A mortalidade das larvas

concentrações subletais de oxitetraciclina período de 24 h, a mortalidade

Foram utilizadas 210 larvas de tilápia-do-nilo com peso médio inicial de 33,9 ± 0, mg e comprimento médio inicial de 13 ± 0,72 mm. Após o estresse por exposição ao ar durante cinco minutos, os peixes foram distribuídos aleatoriamente em 21 aquários com volume útil de 1 L (10 larvas/aquário), onde foram expostos a seis concentrações de oxitetraciclina 0,03; 0,82; 1,65;

, totalizando sete tratamentos, incluindo o controle e trê

. A mortalidade foi contabilizada 24 e 48 horas após a exposição ao antibiótico. s o ensaio experimental (96 h) foi realizada com

), seguindo a Resolução nº 1000/2012 do Conselho Federal de Medicina

classificada de acordo com o risco de contaminação o cálculo de coeficiente de risco (CR) (HERNANDO Segundo HERNANDO et al. (2006) duas variáveis a concentração ambiental estimada (CAE)

Para o cálculo da CENO utilizou-se a concentração mesma fase de desenvolvimento da tilápia-do-nilo

mg L-1 (TAKESHITA et al., 2019). O cálculo da para que assim possa significar um fator de sensibilidade. O risco de intoxicação ambiental aguda

considerada a concentração de 4 mg L-1 do antibiótico controle de infecções em peixes.

partir da divisão entre CAE e CENO. Um critério

estabelece diferentes níveis de risco, como sendo: < 0,01: 0,1: baixo risco; 0,1 – 1: risco médio; >1: alto risco

., 2017).

Os resultados foram submetidos ao teste de normalidade e homogeneidade da variância, seguido por análise de variância (ANOVA). Quando significativo, aplicou-se a regressão polinomial para a mortalidade após o estresse e o teste de Tukey a 5% de probabilidade para os

Os dados foram analisados no programa estatístico R versão 3.5.1. (

ÃO

larvas de tilápia-do-nilo, após o manejo de oxitetraciclina foi registrada nos períodos de 24

foi mais acentuada e aumentou (P<0,05) linearm

5 nilo com peso médio inicial de 33,9 ± 0,73 mg e comprimento médio inicial de 13 ± 0,72 mm. Após o estresse por exposição ao ar durante cinco minutos, os peixes foram distribuídos aleatoriamente em 21 aquários com volume útil de 1 L oxitetraciclina 0,03; 0,82; 1,65; , totalizando sete tratamentos, incluindo o controle e três repetições de . A mortalidade foi contabilizada 24 e 48 horas após a exposição ao antibiótico. A foi realizada com hidrocloreto de ), seguindo a Resolução nº 1000/2012 do Conselho Federal de Medicina

contaminação ambiental para os (HERNANDO et al., 2006; variáveis são utilizadas (CAE) e a concentração de concentração letal média nilo em nossos estudos da CENO é realizado a avaliação intra e inter-aguda por oxitetraciclina é

antibiótico (MIRANDA et

Um critério comum para a estabelece diferentes níveis de risco, como sendo: < 0,01: >1: alto risco (HERNANDO et al.,

Os resultados foram submetidos ao teste de normalidade e homogeneidade da variância, se a regressão polinomial de para os parâmetros Os dados foram analisados no programa estatístico R versão 3.5.1. (R

de exposição ao ar e 24 e 48 h (Figura 1). No linearmente em função

(6)

das crescentes dosagens do antibiótico concentração (4,12 mg L-1). No

comportamento (y=16,504x+9,1039; relação aos valores de 24 horas tratamento controle (0 mg L-1).

Figura 1. Mortalidade das larvas de tilápia (■ ---) e 48h (● ˗̶̶̶̶ ̶ ).

As larvas utilizadas no estudo antibiótico, como natação irregular batimento de opérculo. MACHADO comportamento dos peixes causadas natação irregular, aumento do batimento estudos com poluentes que levam operculares são dependentes do realizam goles frequentes de ar

(SHRIVASTAVA, THAKUR; SHRIVASTAVA Os valores de pH estão apresentados 2,47, 3,30 e 4,12mg L-1 diferiram

exceto para 3,30 mg L-1. Essa diminuição dissociação do ácido carbônico

metabolismo de respiração dos

durante o ensaio experimental. Segundo 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 0,5 1 M o rt al id ad e (% )

antibiótico (y=15,142x+9,9565; R² = 0,9186) atingindo No período de 48 h, a mortalidade também

(y=16,504x+9,1039; R² = 0,9447) com um acréscimo de 6,7% horas na maior concentração. Não houve mortalidade

Mortalidade das larvas de tilápia-do-nilo após estresse agudo e expostas a

estudo apresentaram comportamento atípico irregular e principalmente a permanência na superfície MACHADO et al. (2016) observaram em seus estudos

causadas pela oxitetraciclina, como falta de capacidade batimento opercular e permanência na superfície levam ao estresse do animal, foi relatado

consumo de oxigênio e da condição de estresse, para evitar o contato com o tóxico e aliviar THAKUR; SHRIVASTAVA, 2011).

apresentados na Figura 2. O pH do tratamento diferiram (P<0,05) ao longo dos períodos com diminuição

diminuição ocorre devido a concentração de (H2CO3) (ESTEVES, 1998), que pode estar animais e decomposição de matéria orgânica Segundo a Resolução CONAMA Nº 020/1986,

1 1,5 2 2,5 3 3,5 Oxitetraciclina (mg L-1) 6 atingindo 60% na maior apresentou o mesmo 6,7% de mortalidade em mortalidade dos animais do

nilo após estresse agudo e expostas a oxitetraciclina por 24h

atípico após a exposição ao superfície da água com alto estudos as alterações no capacidade de arremesso, superfície da água. Em relatado que os movimentos estresse, onde os animais o estresse respiratório

tratamento controle (0 mg L-1), diminuição dos valores, íons H+ originados da estar relacionada com o ânica (fezes e excretas) 020/1986, que “dispõe sobre a

(7)

classificação das águas doces, aquicultura de espécies destinadas os valores de pH do estudo estão

Figura 2. Valores de pH em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 horas, respectivamente. Letras distintas indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

Os valores de temperatura (Fig 2,47 mg L-1 e 3,30 mg L-1, onde houve

Figura 3. Valores de temperatura (°C) em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 horas, respectivamente. Letras distintas indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

A temperatura da água pode afetar diretamente a atividade, comportamento, nutrição, crescimento e reprodução dos peixes, as taxas metabólicas aceleram com o aumento da temperatura (SWANN, 1997). A temp

32º C (OSTRENSKI; BOEGER, 1998) e os valores obtidos no estudo estão dentro do recomendado para a espécie. a b 6,5 6,6 6,7 6,8 6,9 7 0 p H a a 26 26,2 26,4 26,6 26,8 27 0 T em p er at u ra ° C

salobras e salinas do Território Nacional”, destinadas à alimentação humana em águas doces

estão dentro dos valores de referência.

Valores de pH em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 horas, indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

Os valores de temperatura (Figura 3) indicaram diferença estatística nas concent , onde houve ligeiro decréscimo de temperatura do período inicial

Valores de temperatura (°C) em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 horas, indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

A temperatura da água pode afetar diretamente a atividade, comportamento, nutrição, crescimento e reprodução dos peixes, as taxas metabólicas aceleram com o aumento da temperatura (SWANN, 1997). A temperatura para produção de tilápia-do-nilo varia entre 23º C a 32º C (OSTRENSKI; BOEGER, 1998) e os valores obtidos no estudo estão dentro do recomendado

a a a ab a a a a a ab b a a a b b 0,03 0,82 1,65 2,47 3,3 Oxitetraciclina (mg L-1)

0 horas 24 horas 48 horas

a a a a a a a a a b b a a a a ab ab 0 0,03 0,82 1,65 2,47 3,3 Oxitetraciclina (mg L-1)

0 horas 24 horas 48 horas

7 Nacional”, o pH ideal para a doces varia de 6 a 9, assim

Valores de pH em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 horas,

indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

diferença estatística nas concentrações de decréscimo de temperatura do período inicial e 24 h.

Valores de temperatura (°C) em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 horas, indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

A temperatura da água pode afetar diretamente a atividade, comportamento, nutrição, crescimento e reprodução dos peixes, as taxas metabólicas aceleram com o aumento da nilo varia entre 23º C a 32º C (OSTRENSKI; BOEGER, 1998) e os valores obtidos no estudo estão dentro do recomendado

a b b b 4,12 48 horas a a ab a 4,12 48 horas

(8)

O oxigênio dissolvido do tratamento (P<0,05) ao longo do período experimental

ligeira redução (P<0,05) nas primeiras 24h e que diferiu estatisticamente do períod diminuição do oxigênio dissolvido

animais.

Figura 4. Valores de oxigênio dissolvido em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 horas, respectivamente. Letras distintas

Segundo Resolução CONAMA Nº 020/1986 que “dispõe sobre a classificação das águas doces, salobras e salinas do Território Nacional”, levando em consideração que a tilápia

um peixe de água doce (LAAN, 2018), o oxigênio dissolvido ideal não deve ser inferio os valores obtidos durante o estudo se encontram dentro dos valores de referência (Figura 4).

A diminuição de oxigênio dissolvido pode ocorrer pela presença de resíduos orgânicos (fezes), morte e decomposição de matéria orgânica ou por certas

remover o oxigênio da água (FRANCIS

oxigênio dissolvido da água para degradação da molécula, assim como a respiração dos animais pode estar envolvida com esse decréscim

A oxitetraciclina foi classificada de acordo com GARDUNO et al. (2017) e apresentou alto r

utilizado a CAE (4 mg L-1) referente a concentração eficiente no tratamento de infecções bacterianas em peixes. A farmacocinética

assim consegue penetrar através síntese de proteínas (tradução), reversível. Contudo, a limitação podem agir tanto em organismos

a b 7,5 7,7 7,9 8,1 8,3 8,5 0 O xi g ên io d is so lv id o ( m g L -1) do tratamento controle (0 mg L-1) 3,30 mg L-1

(P<0,05) ao longo do período experimental (Figura 4). Já na concentração de 0,03 mg L ligeira redução (P<0,05) nas primeiras 24h e que diferiu estatisticamente do períod

diminuição do oxigênio dissolvido era esperada, em função do metabolismo de respiração dos

Valores de oxigênio dissolvido em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 distintas indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

Resolução CONAMA Nº 020/1986 que “dispõe sobre a classificação das águas doces, salobras e salinas do Território Nacional”, levando em consideração que a tilápia

um peixe de água doce (LAAN, 2018), o oxigênio dissolvido ideal não deve ser inferio os valores obtidos durante o estudo se encontram dentro dos valores de referência (Figura 4).

A diminuição de oxigênio dissolvido pode ocorrer pela presença de resíduos orgânicos (fezes), morte e decomposição de matéria orgânica ou por certas substâncias químicas que podem remover o oxigênio da água (FRANCIS-FLOYD, 2003). A oxitetraciclina pode levar ao consumo de oxigênio dissolvido da água para degradação da molécula, assim como a respiração dos animais pode estar envolvida com esse decréscimo de oxigênio dissolvido (KRAMER, 1987).

A oxitetraciclina foi classificada de acordo com HERNANDO et al . (2017) e apresentou alto risco de intoxicação ambiental (C

) referente a concentração eficiente no tratamento de infecções farmacocinética da oxitetraciclina baseia-se no seu

através dos poros na membrana celular de bactérias, alterando o complexo ribossomo-mensageiro,

desse antibiótico se deve a sua baixa seletividade procariontes como eucariontes (LEAL et al.,

a a a a a b a a a ab b ab a a a b 0,03 0,82 1,65 2,47 3,3 Oxitetraciclina (mg L-1)

0 horas 24 horas 48 horas

8 e 4,12 mg L-1 reduziu . Já na concentração de 0,03 mg L-1 houve ligeira redução (P<0,05) nas primeiras 24h e que diferiu estatisticamente do período inicial. Essa ão do metabolismo de respiração dos

Valores de oxigênio dissolvido em teste de exposição subletal de oxitetraciclina por 0, 24 e 48 indicam diferenças significativas por Tukey (P<0,05).

Resolução CONAMA Nº 020/1986 que “dispõe sobre a classificação das águas doces, salobras e salinas do Território Nacional”, levando em consideração que a tilápia-do-nilo é um peixe de água doce (LAAN, 2018), o oxigênio dissolvido ideal não deve ser inferior a 6 mg L-1 os valores obtidos durante o estudo se encontram dentro dos valores de referência (Figura 4).

A diminuição de oxigênio dissolvido pode ocorrer pela presença de resíduos orgânicos substâncias químicas que podem FLOYD, 2003). A oxitetraciclina pode levar ao consumo de oxigênio dissolvido da água para degradação da molécula, assim como a respiração dos animais

(KRAMER, 1987).

et al. (2006) e DIAZ-isco de intoxicação ambiental (CR= 11,6) quando ) referente a concentração eficiente no tratamento de infecções seu caráter hidrofílico, bactérias, age inibindo a mensageiro, sendo essa ligação seletividade tóxica, pois ., 2018). Deste modo, a a b b b 4,12 48 horas

(9)

farmacocinética da oxitetraciclina ambiental, podendo atingir diversos da resistência bacteriana.

A realização dos cálculos de CR

não deve ser usado para prever quantitativamente

apenas é usado qualitativamente como um indicador aproximado para comparação de risco e de possíveis impactos nos organismos (USEPA, 1998).

MACHADO et al. (2016) com CAE (10 mg L tilápia-do-nilo, considerado alto risco ambiental. apresentaram CR de 6,58 para alevinos de pacu

ambiental. Ambos os estudos com espécies distintas apresentaram índices de alto risco ambiental relacionado à exposição de oxitetraciclina aos organismos aquáticos.

O uso da oxitetraciclina representa ser causado devido os efeitos tóxicos resposta imune inata deprimida,

estresse oxidativo (HOSEINI; YOUSEFI, imunológico dos peixes, sendo

crescimento bacteriano e imunidade antibiótico, ou bactérias resistentes

4 CONCLUSÃO

A exposição ao ar é um fator estressor exposição a doses subletais de oxitetraciclina base no coeficiente de risco, a oxitetraciclina

5 AGRADECIMENTOS

Ao CNPq pela concessão da bolsa de iniciação científica (PIBIC), Ecotoxicologia e Biossegurança da Embrapa Meio Ambiente

materiais necessários, e por fim estudo.

6 REFERÊNCIAS

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oxitetraciclina descreve a classificação como alto diversos tipos de organismos aquáticos, assim como

os cálculos de CR é importante para a previsão de possíveis intoxicações e não deve ser usado para prever quantitativamente em relação à mortalidade dos animais apenas é usado qualitativamente como um indicador aproximado para comparação de risco e de possíveis impactos nos organismos (USEPA, 1998).

. (2016) com CAE (10 mg L-1) apresentaram CR de 1,82 para pós

nilo, considerado alto risco ambiental. CARRASCHI et al. (2011) com CAE (50 mg kg para alevinos de pacu Piaractus mesopotamicus, considerado alto risco ambiental. Ambos os estudos com espécies distintas apresentaram índices de alto risco ambiental

exposição de oxitetraciclina aos organismos aquáticos.

representa alto risco ambiental na maioria dos tóxicos que esse antibiótico causa nos organismos

elevação de cortisol, danos patológicos nos

YOUSEFI, 2019). A oxitetraciclina suprime extremamente a imunidade humoral a mais afetada. Há

imunidade baixa, assim um microrganismo que resistentes pode causar doenças nos animais (RIJKERS

fator estressor para as larvas de tilápia-do-nilo e oxitetraciclina pode agravar seus efeitos tóxicos oxitetraciclina apresenta alto risco para larvas

Ao CNPq pela concessão da bolsa de iniciação científica (PIBIC),

Ecotoxicologia e Biossegurança da Embrapa Meio Ambiente (LEB) pela infraestrutura e todo materiais necessários, e por fim a todos os colaboradores que auxiliariam na realização dest

BARROSO, R. M.; MUÑOZ A. E. P.; CAI, J. Social and economic performance of tilapia farming in FAO Fisheries and Aquaculture Circular, n. 1181).

9 risco de intoxicação como levar ao aumento

para a previsão de possíveis intoxicações e em relação à mortalidade dos animais, ele apenas é usado qualitativamente como um indicador aproximado para comparação de risco e de

CR de 1,82 para pós-larvas de (2011) com CAE (50 mg kg-1) , considerado alto risco ambiental. Ambos os estudos com espécies distintas apresentaram índices de alto risco ambiental

dos estudos, isso pode organismos aquáticos, como nos tecidos e indução de extremamente o sistema Há uma diminuição do não seja tratado pelo (RIJKERS et al., 1980).

nilo e em conjunto com a efeitos tóxicos. Além disso, com

de tilápia-do-nilo.

Ao CNPq pela concessão da bolsa de iniciação científica (PIBIC), ao Laboratório de (LEB) pela infraestrutura e todos os ariam na realização deste

(10)

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