Pratica2controledemicrorganismos

CONTROLE DE MICRORGANISMOS

Limpeza, desinfecção e esterilização

O manuseio dos microrganismos nos laboratórios, no lar, nos hospitais,

nas indústrias depende essencialmente dos conhecimentos de como

controlá-los:

-Destruir

-Inibir

Vários agentes físicos e químicos podem ser utilizados

para controle de microrganismos

-Escolha do agente depende se quer destruir todos os microrganismos, somente certos microrganismos or prevenir multiplicação dos organismos já existentes -Do tipo de agente

Agentes físicos e químicos podem matar ou inibir o crescimento de microrganismos

-

Agentes que matam os microrganismos= microbicidas

Ex: bactericida

Agentes microbianos

-Agentes que inibem o crescimento= microbiostáticos

Condições que influenciam a atividade microbiana

-Tamanho da população

-Intensidade ou concentração do agente -Tempo de exposição

-Temperatura em que os microrganismos são expostos -Natureza do material que contém os microrganismos -Características dos microrganismos que estão presentes

Definições importantes

Limpeza=

Processo que remove a sujeira

Esterilização

= Processo de destruição de todas as formas de microrganismos

Desinfecção

= Processo que mata formas vegetativas, mas não necessariamente os endosporos. Destrói organismos infecciosos

Germicida

= Sinônimo de desinfectante

Anti-sepsia=

Processo pelo qual utiliza-se substâncias providas de ação letal ou inibitória da reprodução microbiana, de baixa corrosividade e irritabilidade na pele e mucosa

Anti-séptico

= Composto químico que quando aplicado na superfície do corpo previne a multiplicação de microrganismos

Agentes Físicos

Altas temperaturas

Baixas temperaturas

Radiações

Filtração

Dessecação

Altas temperaturas

-Um dos meios mais eficazes e mais utilizados -Calor pode ser aplicado em condições:

úmidas = calor úmido

secas = calor seco

O calor úmido é:

-Muito mais eficiente do que o calor seco

-Causa desnaturação e coagulação das proteínas vitais, como as enzimas= destruição das pontes de hidrogênio

-É mais rápido= desnaturação de protéinas ocorre em tempo menor do a oxidação dos constituíntes orgânicos (causada pelo calor seco)

Calor úmido

vapor d’água

água fervente

pasteurização

Vapor d’água

-Vapor d’água sob pressão é o meio mais prático e seguro de aplicação do calor úmido -Em sistema fechado aumento de pressão causa aumento de temperatura (temperaturas

maiores do que sem pressão ou água fervente)

O vapor d’água sob pressão é a mais prática e segura aplicação do calor úmido. O aparelho destinado a este fim é a AUTOCLAVE. É um processo mais eficiente para destruir os microrganismos e os esporos, que o calor seco.

Esterilização por calor úmido

-A autoclavação é feita a 121º C com tempo de exposição de 15 a 30 minutos. A penetração do vapor no material garante maior nível de destruição dos microrganismos, e por este motivo é mais rápido. -Aparelho semelhante a uma panela de

pressão

-Utiliza-se este tipo de esterilização para meios de cultura e diversas soluções.

-O tempo de esterilização deve ser aumentado quando se enche bastante a autoclave com meios para esterilizar.

Funcionamento da autoclave:

-A câmara de parede dupla da autoclave é lavada com vapor fluente para remover todo o ar;

-É então preenchida com vapor puro e mantida a uma determinada temperatura e pressão por um período específico de tempo.

-É essencial que todo o ar residual inicialmente presente na câmara seja

completamente substituído por vapor d’água, porque se o ar estiver presente reduzirá a temperatura interna da autoclave;

-A autoclave é usualmente operada a uma pressão de 15 lb./pol² , na qual a temperatura do vapor é de 121ºC.

A eficiência do processo de esterilização depende de alguns fatores:

-Os materiais devem ser limpos antes do processo, sendo adequadamente embalados.

-O tempo deve ser contado a partir do momento em que a temperatura de 121ºC é atingida.

-A distribuição do material no interior da autoclave deve garantir que o vapor atinja todo o material por igual.

-Se o material sair úmido da autoclave indica falhas no processo, neste caso deve ser novamente esterilizado.

Vantagens:

1. Não tóxico;

2. Ciclo fácil de monitorar e controlar; 3. Processo rápido;

4. Penetra em materiais com lúmens;

5. Seguro para o meio ambiente e para o operador.

Desvantagens:

1. Dano a materiais sensíveis;

2. Necessita de secagem. Material úmido compromete a qualidade do processo.

Água fervente

-Água elevada ao ponto de ebulição

-Mata organismos vegetativos no líquido

-Alguns endosporos podem resistir a 1000_{C por mais de uma hora}

Pasteurização

Temperatura de esterilização possui efeitos adversos em muitos alimentos: Sabor, aspecto, valor nutritivo

Logo tratamentos alternativos devem ser utilizados

Pasteurização: Processo de aquecimento lento em baixas temperaturas= mata células

vegetativas, mas não mata endosporos. Logo não é esterilizante

Exemplo

Calor seco

-O calor seco ou ar quente em temperaturas suficientemente altas levam os microrganismos à morte

-Não é tão eficiente como o calor úmido

-Penetra nas substâncias de uma forma mais lenta que o calor húmido e por isso exige temperaturas mais elevadas e tempos mais longos, para que haja uma eficaz esterilização.

-Bastante usado em vidrarias de laboratório

-Material por período de tempo prolongado na estufa

Incineração

-Prática de rotina em laboratório: alças de semeadura bacteriológicas colocadas em bicos de bunsen

-Incineração também é usada para eliminação de materiais contaminados como swabs, carcaça de animais de laboratório infectados. Lixo hospitalas

Baixas temperaturas

Temperaturas abaixo de Oo_{C inibem o metabolismo dos microrganismos em geral}

Algumas bactérias psicrófilas podem crescer a Oo_C,

mas não menos que isso

O congelamento é muito utilizado para preservar alimentos, drogas e espécimes de laboratório

Importante= temperaturas abaixo de Oo_{C não matam os microrganismos e por isso}

tem sido utilizadas para manutenção indefinida dos mesmos Freezer doméstico= -20o_{C= perídos mais curtos}

Freezer –70o_{C = períodos mais longos}

Radiação

Radiações eletromagnéticas= transmitidas através do espaço ou de um material São classificadas de acordo com o comprimento de onda= quantidade de energia É inversamente proporcional ao comprimento de onda

Menor comprimento de onda=maior energia Raios gamma

Raios X

Radiações ionizantes

Raios gamma e raios X

-Possuem energia suficiente para ionizar moléculas= Conduzem elétrons e rompem moléculas em átomos. Formam íons

-Possuem a vantagem de penetrar em pacotes e produtos esterilizando seu interior -Usada em alimentos e equipamentos médicos

Radiações não ionizantes

Radiação UV

-Ao invés de ionizar moléculas a radiação UV excita elétrons= resultando em moléculas que reagem diferentemente das não irradiadas

-Absorvida por muitos compostos intracelulares= DNA é o principal alvo Formação de dímeros de pirimidina

-Economicamente viável para grandes ou pequenas quantidades de produtos -Um dos processos mais rápidos de esterilização existentes na atualidade

-Alto poder de penetração, sendo o processo realizado na embalagem final dos produtos -Permite imediato uso dos materiais, após o término do processo

-Processo de esterilização existente de menor agressividade ao meio ambiente

Esterilização por radiação

Radiação ultra violeta

As radiações não ionizantes são de UV (200-400 nm) mas maior atividade

bactericida ocorre no comprimento de onda de 260 nm

Filtração

-Microrganismos são frequentemente removidos de líquidos e do ar por filtração -Embora filtração não seja um agente físico, é um processo físico

-Usada em materais que não podem ser esterilizados por autoclavação Ex: vitaminas ou proteínas termosensíveis

Esterilização por filtração

A filtração é especialmente utilizada para esterilização de meios e soluções. É um método que não destrói, apenas remove.

É usado quando outras coisas não podem ser usadas; aplica-se a líquidos e soluções.

Os filtros estéreis obrigam os líquidos a passar por um septo filtrante, em poros com diâmetros menores que 220 nm, o que assegura a retenção de microorganismos.

O produto fica livre de todo tipo de microorganismos

Como os poros são apertados o líquido tem dificuldade a passar - é motivo para se realizarem as filtrações sob pressão.

Pode ser pressão positiva em que se empurra o líquido ou pressão negativa (vácuo) em que há sucção. O mecanismo é por retenção mecânica num recipiente de recepção que deve estar estéril.

Dessecação

-Células microbianas vegetativas quando dessecadas interrompem suas atividades metabólicas= declínio na população viável

-Atualmente bastante usado na indústria de alimentos= secam frutas, carnes, pães, grãos de milho, trigo

Liofilização

-Microrganismos são submetidos a desidratação extrema em temperaturas de

Agentes químicos

Existe uma grande variedade de agente químicos

-Alguns matam

-Alguns inibem o crescimento

Utilizados em diversos ambientes:

-escolas, no lar, locais de trabalho

-lesões da pele

Características de um agente químico ideal

-Atividade antimicrobiana= capacidade de inibir ou matar microrganismos -Solubilidade= deve ser solúvel em água ou outros solventes como o álcool -Estabilidade= deve ser estável para armazenamento

-Ausência de toxicidade

-Homogeneidade= Não devem se depositar ou agregar-se -Atividade em temperatura ambiente ou corporal

-Poder de penetração

-Ausência de poderes corrosivos e tintoriais

-Poder desodorizante= o ideal é ser inodoro ou de odor agradável -Capacidade detergente= ser capaz de remover microrganismos -Disponibilidade e baixo custo

Principais agentes químicos

Fenol e compostos fenólicos

Álcoois

Halogênicos

Metais pesados e seus compostos

Detergentes

Fenol e compostos fenólicos

-Um dos agentes químicos mais utilizados

-É usado como composto padrão com o qual outros desinfetantes são comparados -Solução aquosa de fenol mata formas vegetativas, porém não destrói endosporos

-Lesam células microbianas pela alteração da permebeabilidade seletiva da membrana plasmática= perda de substâncias vitais

-Desnaturam e inativam proteínas vitais= enzimas

-Dependendo da concentração pode ser bacteriostático ou bactericida -Pode ser tóxico e possui odor desagradável

-Tem sido substituído por produtos relacionados menos tóxicos

Lysol

-Desinfetante produzido a partir de uma substância de sabão contendo substâncias derivadas do fenol

usado para desinfetar objetos inanimados. Ex: paredes, assoalhos

Hexaclorofeno

-Atua como agente bacteriostático em bactérias gram-positiva

Álcoois

-Álcool etílico

= em concentração de 70 a 90% mata formas vegetativas, mas não destrói endosporos

-

Álcool isopropílico

= também usado como antiséptico (90%) -Desnatura proteínas, solventes de lipídeos, ação detergente Usados como antisépticos da pele e instrumentos, bancadas… Eficiente contra alguns vírus= envelopados

Halogênios

-Iodo e cloro (também bromo)

-São agentes oxidantes= por isso altamente reativos e destroem componentes vitais da célula microbiana

Metais pesados e seus compostos

-Mercúrio, chumbo, zinco, prata, cobre

-Capacidade inibitória sobre bactérias= principalmente a prata -Metais dissolvidos em líquido responsáveis pela inibição

Detergentes

-São compostos que diminuem a tensão superficial -Utilizados para limpar supefícies

-Compostos amfipáticos= quando uma substância apolar, como gorduras é colocada em solução aquosa de detergente os grupos hidrofóbicos

do detergente ligam-se a substâncias enquanto os hidrofílicos criam superfície que se encaixa a água

Detergentes (detergentes iônicos)

-Detergentes são substâncias que têm a propriedade de tornar solúveis em água

substâncias que não são solúveis ou que têm baixa solubilidade.

-Agem basicamente sobre as gorduras, mas pouco agem sobre as proteínas e polissacarídeos, que são componentes abundantes na matéria orgânica.

-Os detergentes comuns são conhecidos como detergentes iônicos. Eles possuem uma estrutura básica, composta por duas partes:

uma que se liga às moléculas de água e outra que se liga às moléculas da substância a ser diluída (Ex. matéria orgânica), fazendo uma ponte entre as substâncias e as

Avaliação do poder antimicrobiano dos desinfetantes e antisépticos

Técnicas laboratoriais utilizadas

-Técnica de diluição de tubo

-Técnica de inoculação em placas -Técnica de coeficiente fenólico

Agentes químicos que esterilizam

-Utilizados para esterilização de materiais sensíveis ao calor

Em laboratório Em hospitais Principais

-Óxido de etileno

-ββββ propiolactona

-Glutaraldeído

-Formaldeído

Processos a ser aplicado aos

materiais utilizados no laboratório:

- Limpeza

- Desinfecção

- Embalagem

- Esterilização

Material crítico

Ex: meios de cultura

material a ser utilizado em cultura

Esterilização

Material semi-crítico

Ex: bancadas,

Desinfecção

Material não crítico

Ex: espátulas para pesagem dematerial

Limpeza

Limpeza manual

:

E o procedimento realizado para remoção da sujeira por meio da ação física com auxílio de detergente, água e artefatos como esponja e escova.

Limpeza

-Pia exclusiva com cuba funda (preferencialmente). -Bancada para apoio, deve ser lavável.

-Cuba plástica para colocar a solução de limpeza(água e -Escovas e/ou esponjas para a limpeza dos artigos.

-Após o procedimento os utensílios devem ser limpos (cuba, escovas, etc)

A limpeza e secagem do artigo é obrigatória antes da desinfecção ou -esterilização.

O que precisa?

-Uso de material de proteção: aventais impermeáveis, luvas anti-derrapantes de cano longo, e em alguns casos óculos de proteção e máscara

Detergentes

Limpeza

Limpeza manual

Limpeza automatizada

E

quipamentos específicos

-Lavadora

-Detergente comum ou

detergente enzimático

-temperatura

Está limpo?

“Todo artigo contaminado deve ser limpo precedendo ou

não a desinfecção ou esterilização”

“Todo artigo contaminado deve ser limpo precedendo ou

“Todo artigo contaminado deve ser limpo precedendo ou

não a desinfecção ou esterilização”

Este processo pode ser:

Físico (Pasteurização)

Químico (Desinfectantes)

Pode ser classificado como:

Desinfecção de alto nível:

inativa todos os microrganismos, exceto

esporos. Ex: HBV, HIV e M. tuberculosis.

Desinfecção de nível intermediário:

é aquela que inativa bactérias na

forma vegetativa (M. tuberculosis), fungos e a maioria dos vírus.

Desinfecção de baixo nível:

inativa a maioria das bactérias na forma

vegetativa, exceto M. tuberculosis, alguns fungos e vírus. É indicada também

para itens de uso “não-crítico”.

VÍRUS COM ENVELOPE LIPÍDICO vírus HBV, HIV BACTÉRIAS VEGETATIVAS Pseudomonas aeruginosa FUNGOS Candida spp VÍRUS PEQUENOS OU NÃO LIPÍDICOS poliovírus MICOBACTÉRIAS ESPOROS BACTERIANOS Bacillus subtillis

MAIOR

RESISTÊNCIA

-Alto Nível

Nível Intermediário

Baixo Nível

MENOR

RESISTÊNCIA

Desinfeccao química

BACTÉRIAS VEGETATIVAS M. tuberculosis

Não atuam sobre BAAR e esporos Só agem enquanto em contato Inativação enzimática Antissépticos Gram-positivas Gram-negativas Metais pesados Tempo de exposição longo Curto (formas vegetativas) Prolongado (esporos) Desnaturação protéica agente alquilante Desinfectantes (instrumentos e superfícies) Gram-positivas Gram-negativas BAAR Aldeídos***

Pouco ativo contra esporos Efeito imediato Inativação enzimática Antissépticos Desinfectantes Gram-positivas Gram-negativas BAAR Iodóforos

Odor irritante pouco ativo contra esporos Efeito imediato Inativação enzimática Antissépticos Desinfectantes Gram-positivas Gram-negativas BAAR Iodo

Odor irritante pouco ativo contra esporos Efeito imediato Inativação enzimática agente oxidante Tratamento da água Gram-positivas Gram-negativas BAAR Cloro

Não age sobre BAAR e esporos Curto (10-30 min) Alteração da membrana celular bacteriana Antissépticos Sanitizantes Desinfectantes (instrumentos cirúrgicos) Gram-positivas Gram-negativas Compostos Quaternários de amônio

Fenol puro é corrosivo e de odor desagradável Efeito imediato Desnaturação protéica Desinfectantes Gram-positivas Gram-negativas BAAR Fenóis

Pouco ativo contra esporos Curto (10-15 min) Desnaturação protéica dissolução de lipídeos Antissépticos Desinfectantes Gram-positivas Gram-negativas BAAR** Álcoois (70-80%) Desvantagens Tempo de exposição Modo de ação Uso Espectro de ação* Agente

Métodos de Desinfecção de alto nível:

Glutaraldeído: Indicado para qualquer objeto sensível ao calor, e para rápida

desinfecção de itens reutilizados.

É utilizado em solução a 2% com pH alcalino (7,5-8,5) por 30 minutos.

Formaldeído: Pode ser encontrado na forma sólida (pastilhas formalina) ou

como solução aquosa 37-40% (diluído em álcool ou água).

A solução deve ser usada por 30 minutos sendo a concentração de 8% em solução alcoólica e 10% em solução aquosa.

Peróxido de Hidrogênio: Age em presença de matéria orgânica e deve-se

fazer a imersão do material em solução com concentração de 3-6% por 15-30 minutos.

Ácido Peracético: A concentração de uso é variável para a desinfecção,

sendo que o tempo de exposição deve ser no mínimo de 20 minutos.

Método de Desinfecção de nível intermediário

Compostos Clorados: Hipoclorito de sódio(liquido), Hipoclorito de Cálcio (solido)

-Atuam na inibição de reações enzimáticas intracelulares, desnaturação de proteínas, e inativação de ácidos nucléicos.

-Apresentam atividade antimicrobiana de amplo espectro, -Possuem baixo custo e ação rápida,

-No entanto seu uso é limitado, pois é irritante, instável por 24 horas, fotossensível e volátil, além de ser corrosivo para metais.

-Uso é indicado para artigos de vidro e borracha, sendo contra-indicado para metais (é corrosivo).

-Tempo de exposição dos artigos a estes compostos é de aproximadamente 10 minutos.

Álcoois Etílicos e Isopropílicos

-Mecanismo de ação através da desnaturação de proteínas. -Concentração de uso= 70% e 92%

-Tempo de uso= por 10 minutos

-Usados para a desinfecção de superfícies.

Fenólicos:

-Mecanismo de ação é através do rompimento da parede celular, precipitando

proteínas, quando usado em alta concentração, e alteração dos sistemas enzimáticos fundamentais, quando utilizado em baixa concentração.

-Concentração de uso= 0,4-5%

-Tempo de exposição= menor ou igual a 10 minutos.

Iodóforos:

-Ação através do alto poder de penetração na parede celular, levando a ruptura de proteínas.

-Concentração de uso= 30 a 50 ppm

-Tempo de exposição= menor ou igual a 10 minutos.

Desinfecção química

Método de Desinfecção de baixo nível

Álcoois Etílicos e Isopropílicos

Compostos Clorados Hipoclorito de sódio(liquido), Hipoclorito de Cálcio (sólido)

Fenólicos: em concentração menor que 5% Iodóforos: em concentração menor que 30 ppm

Compostos de Amônio Quaternário: Age através da inativação de enzimas,

desnaturação de proteínas essenciais, ruptura da membrana celular. Sua concentração para uso é de 0,4 a 0,6% por um tempo de no mínimo 10 minutos.

Desinfecção química

Desinfetantes

Toxicidade

Tempo de

exposição

Concentração

Corrosão

Odor

Custo x Benefício

DESINFECÇÃO POR GLUTARALDEÍDO

DESINFECÇÃO POR GLUTARALDEÍDO

VANTAGENS

DESVANTAGENS

• rápido: 20 - 30 min

• monitoração da [ ] e ph

• compatibilidade com

uma grande gama de

materiais

• custo aceitával

• rápido: 20 - 30 min

• monitoração da [ ] e ph

• compatibilidade com

uma grande gama de

materiais

• custo aceitával

• processo manual

• enxágüe difícil

• toxicidade (inalação)

• fixa sujidade residual

•odor pungente

• processo manual

• enxágüe difícil

• toxicidade (inalação)

• fixa sujidade residual

•odor pungente

Desinfecção química (alto nível)

DESINFECÇÃO POR ÁCIDO

DESINFECÇÃO POR ÁCIDO

PERACÉTICO A 0,2%

PERACÉTICO A 0,2%

VANTAGENS

DESVANTAGENS

• rápido: 10 minutos

• monitoração da [ ]

• enxágüe fácil

• baixa toxicidade

• remove sujidade

residual

• rápido: 10 minutos

• monitoração da [ ]

• enxágüe fácil

• baixa toxicidade

• remove sujidade

residual

• processo manual

• incompatível com aço

bronze, latão e ferro

galvanizado

• custo ????

• odor avinagrado

• processo manual

• incompatível com aço

bronze, latão e ferro

galvanizado

• custo ????

• odor avinagrado

Desinfecção química (alto nível)

Desinfecção química (nível intermediário)

--

QUATERNÁRIO DE AMÔNIO

QUATERNÁRIO DE AMÔNIO

--

HIPOCLORITO DE SÓDIO: 0,2%

HIPOCLORITO DE SÓDIO: 0,2%

Vantagens: Muito baixa toxicidade

Indicado quando a garantia da

baixa

toxicidade é prioritária

-

Pia exclusiva com cuba funda (preferencialmente). -Torneira.

-Bancada para apoio, deve ser lavável.

-Cuba/balde plástico para colocar a solução. -Cuba/balde plástica para o enxágüe..

-Embalagens.

-Proteção adequada para o profissional (gorro,óculos de proteção, avental impermeável, máscara específica, luvas de cano longo) -Espaço físico adequado => exclusivo, ventilado,

Desinfecção química

O princípio ativo inovador e mais importante dos DETERGENTES ENZIMÁTICOS, como o próprio nome diz, são as ENZIMAS.

ENZIMAS são substâncias bioquímicas (proteínas) que têm a propriedade de promover transformações específicas em outras substâncias bioquímicas, como as proteínas, gorduras e açúcares.

O processo de digestão de alimentos que ocorre em nosso organismo, dá-se

essencialmente à base de enzimas que decompõem as estruturas moleculares complexas em estruturas simples podendo então ser dissolvidas e absorvidas pelas células dos

intestinos.

Detergentes enzimáticos

As enzimas que fazem isto são basicamente de três tipos: 1.PROTEASES: decompõem as proteínas

2.AMILASES: decompõem os polissacarídeos (açúcares c/ moléculas muito grandes)

3.LIPASES: decompõem as gorduras

ENZIMAS agem de forma específica, não danificando os materiais constituintes dos equipamentos e instrumentos.

Esterilização

Em microbiologia é importante a esterilização de meios, soluções e materiais

de vidro ou metal que se utiliza. A assepsia é extremamente importante e entende-se por assepsia todas as condições, gestos e atitutes uqe mantem o estado de ausência de microrganismos contaminantes no meio em que se atua.

Alguns microrganismos produzem esporos, que são formas de resistência, podendo permanecer inativos por longos períodos e depois voltar ao estágio inicial de infectividade. Portanto as técnicas de esterilização devem destruir tanto a célula bacteriana, como os esporos.

Existem diversos métodos de esterilização: Físicos ou Químicos. Mas definitivamente os métodos de esterilização mais empregados são os que utilizam o calor, seja este úmido (autoclave) ou seco (estufa, ou forno de Pasteur), sendo que o desempenho do calor úmido (autoclave) é melhor.

RADIAÇÃO IONIZANTE

RADIAÇÃO IONIZANTE

CALOR

CALOR

ÚMIDO (AUTOCLAVE) ÚMIDO (AUTOCLAVE) SECO (ESTUFA, CHAMA) SECO (ESTUFA, CHAMA)

Métodos de Esterilização

Métodos de Esterilização

A melhor maneira de garantirmos a destruição de microrganismos presentes

em instrumentos e equipamentos é mediante o uso do calor úmido

Imbatível para artigos

termorresistentes!

Físicos

SOLUÇÃO:
glutaraldeído 2%
ácido peracético 0,2%
peróxido de hidrogênio 3- 6% SOLUÇÃO:
glutaraldeído 2%
ácido peracético 0,2%
peróxido de hidrogênio 3- 6%

Métodos de Esterilização

Métodos de Esterilização

Químicos

Alguns instrumentos como tesouras e pinças podem ser esterilizados mergulhando em 70% de álcool (70 ml de álcool absoluto e 30 de água destilada).

O material contaminado, por exemplo as alças que tocaram em cultura de bacterias, Devem ser descontaminados atraves de chama de um bico de Bunsen.

As bocas de tubos contendo meios de cultura, devem sempre que destapados ser chamuscados na chama do bico de Bunsen (se não forem abertos em camara de fluxo laminar).

Meios de cultura e material a ser utilizado em cultura deve ser esterilizados

Meios contaminados com as culturas de bactérias, devem ser descontaminados por autoclavagem, e em seguida despejados em sacos plásticos fortes.

O material de vidro contaminado por sua vez após autoclavagem deve ser lavado e autoclavado.

Fatores que afetam a eficácia da

Fatores que afetam a eficácia da

esterilização

esterilização

A atividade dos agentes esterilizantes depende de inúmeros

fatores, alguns inerentes às qualidades intrínsecas do

organismos e outros dependentes das qualidades

físico-químicas do agente ou fatores externos do ambiente.

- Número e localização de microrganismos

- Resistência inata dos microrganismos

- Concentração e potência do agente germicida

- Fatores físicos e químicos

- Matéria orgânica

Finalidades

-Manter a esterilidade do produto, protegendo-o das condições de transporte e armazenagem até o seu uso.

-A embalagem deve: permitir a dissipação do agente esterilizante; a secagem e a aeração; manter a esterilidade

Características

-Ser apropriada para os materiais e para o método de esterilização - proporcionar selagem adequada

- proporcionar barreira microbiana adequada -proteger o conteúdo do pacote de danos físicos

-resistir à punções e rasgos; ser livre de furos; ser livre de ingredientes tóxicos -apresentar custo benefício positivo

Tipos de embalagem

Embalagens

Caixa metálica – preferencialmente de alumínio -Embalagem individual com material específico

É imprescindível o controle de qualidade nos processos de esterilização. Como se trata de um processo que inclui diversas variáveis (tempo, temperatura, limpeza prévia, conhecimento da pessoa responsável pelo processo, etc), se qualquer destas variáveis for negligenciada, o processo não

será efetivo e o risco de contaminação é eminente.

O controle deve ser realizado através de métodos químicos e bacteriológicos.

Os métodos químicos utilizam uma fita especial que mostra, através da mudança de cor, se a temperatura desejada foi atingida.

Os métodos bacteriológicos utilizam a bactéria chamada Bacillus subtilis, que por ser produtora de esporos, é uma eficiente indicadora da qualidade do processo.

.

Indicadores

Indicadores

Químicos

Químicos

Classe 1:

Tiras impregnadas com tinta termo-química que muda de

coloração quando exposto a temperatura.

⇒ usados externamente em todos os pacotes

Indicador Biológico

Indicador Biológico

É o único meio de assegurar que o conjunto de todas as

condições de esterilização está adequada, porque os

microrganismos são diretamente testados quanto ao seu

crescimento ou não após a aplicação do processo.

(São preparações padronizadas de microrganismos, numa concentração do inóculo em torno de 106_{, comprovadamente resistentes e específicos para um particular} processo de esterilização para demonstrar a efetividade do processo).

Tiras de papel impregnadas de esporos – leitura em

laboratório.

Condições de estocagem do artigos esterilizados

• Quanto ao ambiente: deve ser limpo; arejado e seco; deve ser restrito

à equipe do setor.

• Quanto ao artigo: após o processo de esterilização, não colocá-lo em

superfície fria (pedra ou aço inoxidável ), utilizar cestos ou recipientes vazados até que esfriem;

• invólucro (tecido de algodão cru, tecido não tecido, papel grau

cirúrgico, papel crepado, papel com filme, tyvec ou caixas metálicas perfuradas) deve permanecer íntegro e ser pouco manuseado para evitar que os pacotes rasguem ou solte o lacre;

• ser estocado em armários fechados com prateleiras;

• prateleiras identificadas de modo a facilitar a retirada do material; • material deve ser estocado de acordo com a data de vencimento da

esterilização para facilitar a distribuição e não ficar material vencido no estoque;

• estocar separadamente dos não estéreis para reduzir o nível de

contaminantes externos.

“O prazo de validade de esterilização está diretamente

relacionado à qualidade da embalagem e condições de

armazenagem.”