HAL Id: hal-00901884

HAL Id: hal-00901884

https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00901884

Submitted on 1 Jan 1989

HAL is a multi-disciplinary open access archive for the deposit and dissemination of sci- entific research documents, whether they are pub- lished or not. The documents may come from teaching and research institutions in France or abroad, or from public or private research centers.

L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est destinée au dépôt et à la diffusion de documents scientifiques de niveau recherche, publiés ou non, émanant des établissements d’enseignement et de recherche français ou étrangers, des laboratoires publics ou privés.

Apport du fractionnement cellulaire dans l’approche de l’incidence de la fasciolose sur les biotransformations

hépatiques

P. Galtier, G. Larrieu, M. Alvinerie

To cite this version:

P. Galtier, G. Larrieu, M. Alvinerie. Apport du fractionnement cellulaire dans l’approche de l’incidence

de la fasciolose sur les biotransformations hépatiques. Annales de Recherches Vétérinaires, INRA

Editions, 1989, 20 (2), pp.238-239. �hal-00901884�

Schenkman J.B. &

Kupfer

^D.

(1982)

^{In :}

Hepatic Cytochrome

^P-450

Monooxygenase System,

Perga- mon Press, Oxford

Walker C.H.

(1980) Species

variations in some

hepa-

tic microsomal enzymes that metabolize xenobiotics.

Prog. Drug

^Metab. 5, 113-164

Bioactivation in vivo et in vitro du

2-acétyla-

minofluorène par le noyau cellulaire de foie de rat. C. ^C.

Petit, ^Petit,

^{P. P.}

Fournier, ^Fournier,

^{V. V.}

Burgat-Sacaze Burgat-Sacaze

A.G. Rico

(Laboratoire

^de

Toxicologie

^bio-

chimique

^et

métabolique, ENVT, 23,

^Chemin des

Capelles,

31076 Toulouse

Cedex)

Le

2-acétylaminofluorène (2-AAF)

^{est un}

modèle d’étude bien connu de la

carcinogenè-

se

chimique, capable d’engager

des liaisons covalentes avec toutes les macromolécules de la cellule.

Le schéma

métabolique

^{de sa} bioactivation fait

appel

^{à une}

N-hydroxylation

^P-450

dépen- dante,

suivie d’une

conjugaison (sulfo-, acétyl-

ou

glucurono-conjugaison) conduisant, après

le

départ

^du

groupement conjugué,

^{au carcino-}

gène

^ultime

qui

^{est un} ion nitrénium hautement

électrophile.

Cette bioactivation est

généralement

^consi-

dérée comme réalisée essentiellement dans la fraction microsomale de la cellule

(Mhydroxy- lation, glucurono-conjugaison)

^{et le}

cytosol (autres conjugaisons).

^Certains auteurs ont

cependant

^{mis en évidence une} bioactivation du 2-AAF par la membrane

nucléaire, quantita-

tivement

beaucoup plus

^faible que celle due à la fraction microsomale.

Des études in vivo chez le rat nous ont per- mis de mesurer les niveaux de fixation cova-

lente de base sur l’ADN et les

protéines nucléaires,

microsomales et

cytosoliques.

^Par

rapport

^{à ces}

témoins,

des études réalisées dans les mêmes conditions sur des animaux

prétraités

par ^un inhibiteur des sulfotransfé- rases, le

pentachlorophénol (PCP),

^montrent

une diminution

importante

^{des fixations cova-}

lentes sur les

protéines

microsomales et nucléaires mais une

augmentation significative

sur les

protéines

nucléaires et

l’ADN,

^ce

qui suggère

^{une activité}

métabolique

propre ^au

noyau in

^vivo.

Après

incubation de fractions nucléaires

purifiées

de foie de rat avec du 2-AAF en

pré-

sence de

NADPH,

^une fixation covalente

signi-

ficative a été mise en évidence sur l’ADN.

Dans les mêmes

conditions,

^{aucune fixation}

n’est observée avec la

diméthylnitrosamine, qui

se fixe

pourtant

^{10 fois}

plus

que le 2-AAF in vivo. En

présence

^de

PCP,

la fixation du 2-AAF chute de 50% par

rapport

^aux noyaux témoins.

Ces

premiers

^résultats

suggèrent

l’inhibition par le PCP de voies

métaboliques

^nucléaires

dont la nature reste à déterminer. La discordan-

ce observée in vivo

comparativement

^{à in vitro}

n’est pas ^a

priori

^en faveur de l’existence d’une sulfo-transférase dans le noyau.

La

signification

^{de ces} bioactivations nucléaires dans la

carcinogenèse chimique

^doit

être

précisée,

^des

électrophiles

ultimes formés à

proximité

de la chromatine étant a

priori

^sus-

ceptibles d’engager

^de

façon privilégiée

^des

liaisons covalentes avec l’ADN.

Références

Kawajiri

K., ^Yonekawa H., Hara E. &

Tagashira

^Y.

(1979) Activation of 2-acetylaminofluorene ^{in the} nucloi of rat liver. Cancer Res. 39, 1089-1093 Meerman J.N.H.,

Sterenborg

^{H.M.J. &} Mulder G.H.

(1979)

^{Use of} pentachlorophenol ^{as a}

long-term

^inhi-

bitor of sulfation of phenols ^and

hydroxamic

^{acids in}

the rat in vivo. Biochem. Pharmacol. 32, 1587-1593 Stout D.L. & Becker F. (1979) Metabolism of 2-amino- fluorene and

2-acetylaminofluorene

to mutagens

by

rat

hepatocyte

nuclei. Cancer Res. 39, 1168-1173 Stout D.L., Hemminki K. & Becker F.F. (1980) Cova- lent

binding

^of

2-acetylaminofluorene,

2-aminofluorene and

N-hydroxy-2-acetylaminofluorene

^{to rat liver}

nuclear DNA and proteins ⁱⁿ vivo and in vitro. Cancer Res. 40, 3579-3584

Apport

du fractionnement cellulaire dans

l’approche

^de l’incidence de la fasciolose sur les biotransformations

hépatiques.

^P.P.

Galtier,

^G. Larrieu

M. Alvinerie (Laboratoire

de

Pharmacologie-Toxicologie, INRA, 180,

Chemin de

Tournefeuille,

³¹³⁰⁰

Toulouse)

L’étude

pharmacocinétique

^{de traceurs ou de}

médicaments avant

puis

^{au cours} d’une infes- tation

expérimentale

d’ovins par 150 métacer- caires de Fasciola

hepatica

^laisse

apparaître

une altération

significative

du devenir de cer-

tains

xénobiotiques

^{en situation}

pathologique (Tufenkji et al.,

¹⁹⁸⁷ et

1988).

Chez cette même

espèce,

^{des recherches}

basées sur l’utilisation de fractions microso- males et

cytosoliques hépatiques

^ont

permis

^de

mettre en évidence la

déplétion

^des monooxy-

génases dépendant

^du

cytochrome

P-450 lors de la

phase

^de

migration intraparenchymateuse

des douves immatures

(semaines

^{4 à}

12).

^Ces

perturbations

^semblent

régresser

^{au fur et à}

mesure de l’évolution du

parasite

^{vers le stade}

adulte. Par contre, au-delà de l’envahissement des canalicules biliaires par les douves adultes

(semaine 16),

certaines enzymes de

conjugai-

son, notamment les

glutathion

S-transférases

se trouvent

significativement

^abaissées

(Galtier et al., 1986b).

^{De tels}

arguments biochimiques peuvent

être corrélés avec les modifications

métaboliques enregistrées in

^vivo.

Chez le rat recevant 20

métacercaires,

une

étude

plus approfondie

de la fraction microso- male d’animaux induits ou non par le

phéno-

barbital ou le

3-méthylcholanthrène

^{nous a} per- mis de reconnaître le caractère

spécifique

^de

l’inhibition envers une forme

particulière

^du

cytochrome P-450, fisoenzyme

^{non inductible}

h ou UT-A

(Galtier et al., 1986a).

Des études sont actuellement menées pour reconnaître l’interférence de la fasciolose

parenchymateuse

^sur finductibilité du

cytochro-

me LM3C ovin par ^un

antibiotique

^macrolide

(troléandomycine).

L’inhibition des biotransfor- mations

hépatiques dépendant

^des

cyto-

chromes

P-450,

observée à certains stades du

parasitisme

des ruminants par la douve

rejoint

les nombreuses recherches

ayant

^{conduit à}

des conclusions similaires pour d’autres

patho- logies d’origine

^{virale ou}

parasitaire (Renton, 1983).

^D’autre

part,

des inhibitions compa- rables dans le métabolisme de substrats endo-

gènes (hormones, prostaglandines) pourraient

être

impliquées

^dans

l’apparition

de manifesta- tions secondaires à la fasciolose.

Références

Galtier P., Larrieu G. & Beaune P. (1986a) Characteri- zation of the microsomal

cytochrome

P-450 inhibited in rat liver in the course of fascioliasis. Biochem.

PharmacoL 23, ^4345-4347

Galtier P., ^Larrieu G.,

Tufenkji

^{A.E. & Franc M.}

(1986b) Incidence of

experimental

facioliasis on the activity ^of drug metabolizing enzymes in lamb liver.

Drug Metab. Dispos.

14, 137-141

Renton K.W. (1983) Relationships between the enzymes of detoxication and host defense mecha- nisms. In :

Biological

Basis of Detoxication

(Caldwell

J. &

Jakoby

N.B.,

eds.)

^Academic Press, ^{New York}

Tufenkji

A.E., ^Alvinerie M., ^Houin G. & Galtier P.

(1987) Pharmacokinetics of sulfobromophthalein, ^lido- caine and

indocyanine

green in the ^course of subclini- cal fascioliasis in

sheep.

Res. Vet. Sci. 43, 327-330

Tufenkji

A.E., ^Alvinerie M., ^Pineau T., Boulard C. &

Galtier P. (1988) Incidence of a subciinical fascioliasis

on

antipyrine

clearance and metabolite excretion in

sheep.

Xenobiotica 18, 357-364

Facteurs d’altération du tissu

hépatique

chez la vache et

conséquences pathogènes.

J. Barnouin

(INRA, Laboratoire d’Éco-Patholo- gie,

⁶³¹²²

Ceyrat, France)

Une évaluation des facteurs d’altération du tissu

hépatique

^en

élevage

^{bovin a} été condui- te à

partir

^{de trois}

paramètres (sérologie

^Fas-

ciola

hepatica

^ou -F.h- GLDH et

y-GT plasma- tiques)

^{dans des}

enquêtes épidémiologiques

multifactorielles

(Barnouin, 1980; Faye

^{et Bar-}

nouin, 1987).

^{Dans une}

première ^étude,

^21%

des vaches laitières

(n

⁼

3733)

^{et 41% des}

vaches allaitantes

(n

⁼

518)

échantillonnées dans 7

départements français

^étaient

sérologi- quement positives

vis-à-vis de F.h

(Barnouin

et

al., 1988).

^Par

ailleurs,

^{il a} été constaté

plus

de

sérologies

^F.h.

positives

^{dans les}

élevages

laitiers à faible

fertilité,

par

rapport

^{à des éle-}

vages à fertilité normale

(Barnouin

^et

aL, 1983).

Les facteurs nutritionnels d’altération

hépatique

ont été

analysés

à l’aide d’une étude cas-

témoin

portant

^{sur des}

élevages (n

⁼

34)

indemnes de

trématodes;

^{on a ainsi}

comparé

des

élevages

^dans

lesquels

^{des taux}

plasma- tiques

élevés de GLDH

(>

¹⁵

U/I,

^{et de}

y-GT (>

20

U / I)

^{ont été - oui ou non - mis en évi-}

dence chez les vaches. Deux facteurs d’altéra- tion ont été isolés

(Barnouin

^et

Paccard, 1988) : 1)

Les urémies élevées

(>

⁴⁰

mg/

100

ml)

liées à la consommation d’herbe et d’azote non

protéique mélangé

^à

l’ensilage

^de

maïs; 2)

la consommation de colza en vert; les

agents toxiques potentiels

seraient alors la 5-

méthylcystéine

^{sulfoxide et des}

glucosinolates;

(Fales et al., 1987).

^Par

ailleurs,

^une faible ferti- lité caractérisait les

élevages

concernés par les deux facteurs d’altération mis en

évidence;

^l’in-

gestion

^{de colza est} apparue ^{liée à une}

impor-

tante mortalité néonatale

(composés antithy-

roïdiens du

colza),

relation confirmée dans une autre

enquête (Barnouin, 1988),

^{et à des}

pho-

tosensibilisations

hépatogènes.

^{Une autre}

étude,

réalisée dans 50

élevages

à haute pro- duction laitière de la

région Bretagne

^a

permis

de

préciser

que :

1)

les altérations du tissu

hépatique (GLDH élevées)

^en

rapport

^avec

Fasciola

hepatica (étude cas-témoin,

⁸²⁰

vaches)

^{sont maximum en}

septembre,

^octobre

et

novembre; 2)

^{le colza en vert}

peut

^{être un}

puissant

^facteur d’altération du foie

(ictère, dégénérescence graisseuse, dépôts

^biliaires

dans le

parenchyme).

L’altération du transit biliaire

peut

conduire à la rétention d’une

importante quantité

de bile dans la vésicule