HAL Id: hal-00901790

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Submitted on 1 Jan 1988

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LE CLONAGE DES GÈNES : APPROCHE MÉTHODOLOGIQUE

F Lefèvre

To cite this version:

F Lefèvre. LE CLONAGE DES GÈNES : APPROCHE MÉTHODOLOGIQUE. Annales de

Recherches Vétérinaires, INRA Editions, 1988, 19 (1), pp.70-70. �hal-00901790�

3’OH

labelling

^of

synthetic oligonucleotides

with nucleotides

analogs

^{to use} them ^as non-radiocative

probes (A

Kumar, P

Tchen,

^J

Cohen)

Séquence nucléotidique

^et

expression

dans E coli du

gène qui

code pour la

protéine

^non structurale NCVP2 du rotavirus bovin

(M

Brémont, A

Charpelienne,

^D

Chabanne,

^J

Cohen)

Obtention et caractérisation d’un recombinant vaccine

exprimant

^un

gène

de rotavirus

(D

Poncet)

Étude

structurale et fonctionnelle du

plasmide cryptique

^de Salmonella

typhimurium (C Martin,

^F

Norel,

^M

Popoff)

Construction et utilisation de vecteurs dérivés de l’AEV pour le transfert de

gènes

^{chez le}

poulet (F Flamant,

^M

Benchaibi,

^P

Thoraval,

^F

Chambonnet,

^P Savatier, ^D

Poncet,

^F

Mallet,

^C

Legras,

^Y

Chebloune,

^A

Reyss-Bryon,

FL

Cosset,

^C

Bagnis,

C Faure, D

Quilichini,

^J

Samarut,

G Verdier, V

Nigon)

Problèmes liés à l’utilisation de vecteurs rétroviraux pour le transfert de

gènes

^{chez le}

poulet (G Dambrine,

E

Esnault,

^F

Chambonnet,

^D Bourret, G Luneau, F

Coudert,

^P

Mongin)

Construction de vecteurs recombinants permettant

l’expression

inductible dans des cellules eucaryotes d’une

protéine

^{codée au} locus c-myc humain

(JF

Dedieu, ^C

Gazin,

^M

Rigolet,

^F

Galibert)

L’ORGANISATION

DU

GÉNOME EUCARYOTE

DBLANGY

CNRS, VillejuilFrance

Résumé non reçu

LE CLONAGE DES GÈNES : APPROCHE MÉTHODOLOGIQUE

F

LEFÈVRE

Station de Virologie ^et d’immunologie, INRA, route de Thiverval, 78850 Thiverval-Grignon, ^France

Cet

exposé

^sera conçu ^{comme un tour} d’horizon des

principales

méthodes permettant actuellement le

clonage

^d’un

gène

eucaryote

(plus spécialement

^d’un

gène

^de

mammifère)

^à

partir

^d’une

banque

^d’ADN

génomique

et/ou d’une

banque

^d’ADN

complémentaire

issue d’ARN messagers.

Après

^un

rappel

concernant les différents types ^{de vecteurs de}

clonage

et les méthodes de construction des

banques d’ADN, l’approche méthodologique

^à

adopter

pour isoler le

gène

^{recherché sera}

évoquée,

^à l’aide de divers

exemples,

^{dans les trois cas suivants :}

- cas d’un

gène

codant pour ^une

protéine possédant

^des

propriétés biologiques

^ou

biochimiques

connues

(exemple

^du

clonage

^des

gènes

^des

interférons) ;

>

- cas d’un

gène

^{dont le}

produit

n’est pas caractérisé mais

qui

^est

responsable

^d’un

phénotype

transférable à des cellules cultivées in vitro

(exemple

^du

clonage

de certains

oncogènes) ;

- cas d’un

gène

^{dont le}

produit

n’est pas caractérisé mais

qui

^est

responsable

^d’un

phénotype particulier

chez l’individu.

Le dernier cas permettra ^de

présenter

certaines méthodes récentes

permettant la cartographie physique

et le

clonage

^de

régions

étendues du

génome

des mammifères

(sondes

^détectant des

régions polymor- phes

dans l’ADN

génomique, cartographie

^{de l’ADN}

grâce

^{aux méthodes}

d’électrophorèse

^en

champ pulsé,

^« chromosome

walking

^»,

etc).

^{Il sera} illustré par la

présentation

^des

approches

utilisées pour cloner les

gènes responsables

de certaines maladies héréditaires de l’homme pour

lesquelles

le déficit

biochimique primaire

est inconnu.