2. Material e Métodos
2.1. Animais, dietas, delineamento experimental e registro dos dados de ambiência
Todos os procedimentos experimentais utilizados no presente experimento foram aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais – CEAU (processo nº42/2013) da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP - Câmpus Botucatu.
Um experimento foi conduzido na Universidade Estadual Paulista – UNESP, no Laboratório de Nutrição de Aves da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia – FMVZ, -Câmpus de Botucatu, utilizando-se 2.184 pintos de corte, machos, da linhagem Cobb vacinados no incubatório contra doença de Marek e Gumboro.
O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 5 + 1 (dois níveis de vitamina C: 0 e 250 mg/kg da dieta associado a cinco níveis de triptofano digestível: 100; 125; 150; 175 e 200% das exigências de triptofano seguindo as recomendações de Rostagno et al. (2011) para frangos de corte macho de desempenho médio, associados à alta densidade de criação (17 aves/m²), e controle negativo, aves criadas em densidade de 12 aves/m2 e alimentadas com dieta sem suplementação de vitamina C e nível de triptofano de 100% das exigências nutricionais propostas por Rostagno et al. (2011), totalizando 11 tratamentos com seis repetições.
Para frangos de corte, Rostagno et al. (2011) recomendam os níveis de 0,223; 0,200; 0,194 e 0,182% de triptofano digestível, nas fases pré-inicial (1 a 7 dias), inicial (8 a 21 dias), crescimento (22 a 35 dias) e final (36 a 42 dias de idade), respectivamente. As relações entre triptofano digestível e lisina digestível não foram seguidas nas dietas com suplementação em excesso de triptofano (125; 150; 175 e 200% das exigências de triptofano), conforme recomenda por Rostagno et al. (2011).
A fonte de vitamina C utilizada foi o ácido ascórbico conjugado com um biopolímero (PEG polietoxilato 15, Biogenic©).
As dietas foram suplementadas com os aminoácidos sintéticos L-lisina, DL-metionina, L-treonina, L-isoleucina, L-arginina e L-valina de forma a atender as exigências nutricionais para os frangos de corte, exceto para triptofano. A dieta basal foi suplementada com L- triptofano em substituição ao L-ácido glutâmico com o objetivo de alcançar os níveis de triptofano digestível nas dietas para cada fase de criação e o ácido glutâmico foi utilizado para tornar as dietas isonutritivas. Nas rações suplementadas, o caulim foi substituído pela vitamina C para completar 100 kg de ração (Tabelas 1).
As aves foram alojadas em galpão experimental em 66 boxes de 2,0 m², sobre cama de maravalha, equipados com comedouros do tipo tubular e bebedouro tipo nipple. A ração e a água foram fornecidas ad libidtum durante todo o período experimental. Atendendo aos requerimentos mínimos para o bem-estar animal (European Comission, 2007), o programa de luz utilizado foi de 24 horas de luz contínua para a primeira semana de criação, e a partir de então as aves foram criadas em regime de 16 horas de luz e 8 horas de escuro a cada ciclo de 24 horas, até o fim do período experimental.
Aos 10 dias de idade procedeu-se à vacinação ocular contra a doença de Newcastle (New-Vacin HB1®, Biovet S.A.) com o intuito de se avaliar a titulação de anticorpos das aves em idades subsequentes. Aos 14 dias de idade, as aves receberam uma segunda dose da vacina contra a doença de Gumboro (Gumbor-Vet GBV8 IBD®, Biovet S. A.) via água de bebida.
Os dados ambientais foram coletados durante todo o período experimental e posteriormente convertidos a índices de conforto térmico. Entre os quais o ITU e o ITGU têm sido propostos e utilizados para avaliar o ambiente de criação dos animais de produção. O índice de temperatura e umidade (ITU), proposto por Thom (1959) procura indicar o efeito combinado de temperatura e umidade relativa do ar sobre o conforto animal e o índice de temperatura de globo negro e umidade relativa do ar (ITGU), proposta por Buffington et al. (1981), que indica os efeitos combinados da energia radiante, temperatura e velocidade do ar.
Tabela 1. Composição centesimal e nutricional calculada das dietas basais
Ingredientes Pré-inicial Inicial Crescimento Final
Milho 57,510 61,902 63,08 66,465
Farelo de soja 45% 31,940 26,830 26,62 25,250
Farelo glúten milho 3,169 4,470 2,79 0,925
Calcário calcítico 0,913 0,917 0,862 0,765 Fosfato bicálcico 1,965 1,590 1,322 1,100 Óleo de soja 1,228 1,009 2,559 2,955 DL-Metionina (99,0%) 0,349 0,264 0,242 0,241 L-Lisina HCl (78,4%) 0,446 0,413 0,315 0,287 L-Ácido glutâmico 0,342 0,350 0,350 0,350 L-Triptofano (98%) 0,000 0,000 0,000 0,000 L-Treonina (98,5%) 0,137 0,089 0,060 0,063 L-Arginina 0,148 0,123 0,053 0,048 L-Valina (98%) 0,110 0,053 0,004 0,021 L-Isoleucina 0,052 0,016 0,035 0,049 Bicarbonato de sódio 0,123 0,123 0,115 0,116 Sal comum 0,425 0,400 0,382 0,365 Premix vit/min1 0,400 0,400 0,400 0,400 Inerte2 0,743 1,051 0,811 0,600 Total 100,00 100,00 100,00 100,00
Composição nutricional calculada
EM (kcal/kg) 2951 3000 3100 3150 PB (%) 22,20 20,80 19,50 18,00 Lisina dig. (%) 1,311 1,174 1,078 1,010 Metionina dig. (%) 0,650 0,561 0,518 0,489 Triptofano dig. (%) 0,223 0,200 0,194 0,182 Treonina dig. (%) 0,853 0,762 0,701 0,656 Arginina dig. (%) 1,416 1,268 1,164 1,092 Phe+Tirosina dig. (%) 1,745 1,670 0,899 1,392 Valina dig. (%) 1,010 0,904 0,841 0,789 Isoleucina dig. (%) 0,879 0,787 0,733 0,687 Histidina dig. (%) 0,516 0,484 0,464 0,433 Met+Cis dig. (%) 0,945 0,846 0,787 0,738 Leucina dig. (%) 1,864 1,876 1,706 1,499 Cálcio (%) 0,920 0,820 0,733 0,639 Potássio (%) 0,755 0,676 0,674 0,656 Fósforo disp. (%) 0,470 0,393 0,343 0,299 Cloro (%) 0,305 0,291 0,280 0,195 Sódio (%) 0,220 0,210 0,201 0,271
1Premix vitamínico e mineral para frangos de corte (Fatec®). Níveis de garantia/kg de ração: Fase Pré inicial: Vit. A, 10.000 UI; Vit. D3,
2000 UI; Vit. E, 15,00 UI; Vit. K3 2,5 mg; Vit. B1 1,48 mg; Vit. B2, 5,12 mg; Vit. B6, 1,64 mg; Vit. B12, 12 µg; Ácido pantotênico, 10,4 mg; Ácido fólico, 0,568 mg; Niacina, 35 mg; Biotina, 0,052 mg; Fe, 50,4 mg; Se, 0,26 mg; Cu, 6 mg; Mn 65 mg; Zn, 45,48 mg; I, 1 mg; BHT, 2 mg, Colina,0,3g. Bacillus subtillis 3x108 UFC, Halquinol, 30 mg, Narasina 44 mg , Nicarbazina 44 mg. Fase Inicial: Vit. A, 10.000 UI; Vit.
D3, 2000 UI; Vit. E, 15,00 UI; Vit. K3 2,5 mg; Vit. B1 1,48 mg; Vit. B2, 5,12 mg; Vit. B6, 1,64 mg; Vit. B12, 12 µg; Ácido pantotênico, 10,4 mg; Ácido fólico, 0,568 mg; Niacina, 35 mg; Biotina, 0,052 mg; Fe, 50,4 mg; Se, 0,26 mg; Cu, 6 mg; Mn 65 mg; Zn, 45,48 mg; I, 1 mg; BHT, 2 mg, Colina,0,3g. Bacillus subtillis 3x108 UFC, Halquinol, 30 mg, Narasina 44 mg , Nicarbazina 44 mg. Fase crescimento: Vit. A, 8000 UI;
Vit. D3, 1800 UI; Vit. E, 12,00 UI; Vit. K3 2,0 mg; Vit. B1, 1,1 mg; Vit. B2, 4 mg; Vit. B6, 1,15 mg; Vit. B12 10,00 µg; Ácido pantotênico, 9,18 mg; Ácido fólico, 0,38 mg; Niacina, 28 mg; Biotina, 0,04 mg; Cobalto, 0,12 mg; Fe, 50,0 mg; Se, 0,26 mg; Cu, 6 mg; Mn 68,2mg; Zn, 45,00 mg; I, 1 mg; BHT, 2 mg, Colina, 0,258g; Halquinol, 30 ppm; Salinomicina, 66 ppm. Fase Final: Vit. A, 4520 UI; Vit. D3, 910 UI; Vit. E, 6,3 UI; Vit. K3, 0,73 mg; Vit. B1, 0,28 mg; Vit. B2, 2,4 mg; Vit. B6, 0,46 mg; Vit. B12, 5,40 µg; Ácido pantotênico, 4,85 mg; Ácido fólico, 0,171 mg; Niacina, 15,3 mg; Biotina, 0,02 mg; Fe, 50 mg; Se, 0,2 mg; Cu, 6 mg; Mn, 52 mg; Zn, 35 mg; I, 0,78 mg; BHT, 4 mg, Colina,86 mg, Bacillus subtilis 1,5x10e7. A dieta basal foi suplementada com L-triptofano em substituição ao L-ácido glutâmico para atender aos níveis
de 125, 150, 175 e 200%. O caulim foi substituído pela vitamina C (Biogenic®): Ácido ascórbico PEG polietoxilato, 15% (inclusão de 1667 mg/kg dieta para atingir a suplementação de 250mg vitamina C/kg dieta).