Discussão geral - Seleção de micro-organismos com maior potencial antimicrobiano

3.2 Seleção de micro-organismos com maior potencial antimicrobiano

3.2.6 Discussão geral

Em um estudo de Takahashi e colaboradores, ao menos 67 % dos extratos orgânicos de fungos filamentosos isolados na região de Cerrado brasileiro demonstraram possuir atividade antibacteriana (TAKAHASHI et al., 2008). No presente trabalho, resultados similares foram constatados, visto que, com exceção da linhagem de E. coli, no mínimo 65% dos fungos filamentosos estudados demonstraram certa atividade antimicrobiana contra pelo menos um dos micro-organismos alvo. Diante disso, é possível pressupor que as linhagens de fungos e as condições de cultivo e obtenção dos extratos estudados mostraram-se eficientes a aquisição de compostos antimicrobianos, no entanto, é importante ressaltar que o estudo de outros métodos de cultivo e extração podem ser estudados com o objetivo de aumentar o potencial antimicrobiano destas linhagens.

Na pesquisa de Carvalho et al. (2012), 320 culturas endofíticas de fungos filamentosos isoladas no Cerrado brasileiro foram estudadas quanto ao seu potencial antimicrobiano contra linhagens de E. coli, S. aureus, Pseudomonas aeruginosa e C. albicans. Os fungos foram cultivados em placas com PDA e os metabólitos extraídos com etanol. A atividade antimicrobiana desses extratos foi analisada pelo método da microdiluição e 5 % deles

demonstraram elevada atividade (70 a 100 % de inibição) contra pelo menos um dos micro- organismos alvo (CARVALHO et al., 2012). No presente trabalho, dentre as 169 culturas de fungos filamentosos estudadas, 13 % demonstraram elevado potencial antimicrobiano (81 à 100% de inibição) contra pelo menos uma das linhagens patogênicas avaliadas. Isso comprova que os resultados obtidos foram mais promissores que os encontrados pelos autores, além de uma vantagem adicional devido ao uso de extratos aquosos ao invés de extração alcoólica, como a utilizada na pesquisa citada.

Dentre as 169 culturas estudadas, nota-se um menor número de linhagens (2,4 %) capazes de inibir entre 81 e 100 % do crescimento da cepa de E. coli analisada. Segundo Vaara (1993) o resultado encontrado pode ser explicado pela estimativa de que 90 % dos antibióticos naturais são incapazes de inibir bactérias Gram-negativas, como a E. coli, por exemplo. Já para a linhagem de S. choleraesuis, constatou-se o maior número de culturas fúngicas com elevado potencial de inibição para esta bactéria (6,5 %). Além disso, também foram verificados os maiores valores de redução, chegando até 100 % de inibição desta bactéria. Esta ação foi conferida pelos extratos dos fungos IB4C, IB6B, IB27B e IB40A. O mesmo valor de inibição foi obtido para C. albicans, com o emprego do extrato IB6B.

Das culturas de fungos filamentosos pertencentes à CMLB apenas duas, Aspergillus sp. (1099) e RP478, mostraram-se promissoras para a inibição da linhagem de B. cereus e C.

albicans, respectivamente. Isso sugere que, dentro das condições testadas neste estudo, os

micro-organismos desta coleção foram pouco favoráveis na produção de compostos antimicrobianos contra as cepas patogênicas estudadas.

Verifica-se também que alguns dos fungos com maior potencial antimicrobiano inibiram mais de um dos micro-organismos alvo. Isso permite inferir que as atividades antimicrobianas destes extratos estejam relacionadas a três tipos de ação: aqueles com atividade antimicrobiana contra bactérias Gram-positivas (B. cereus e S. aureus), aqueles contra bactérias Gram-negativas (E. coli e S. choleraesuis) e aqueles extratos com amplo espectro de inibição (inibição de gram-positivas, gram-negativas e fungos). Os extratos dos fungos BG13D e BG13E, por exemplo, demonstraram ação antibacteriana contra as bactérias gram-positivas deste estudo e podem possuir atividade antimicrobiana contra outras pertencentes ao mesmo grupo. Já o extrato BG8C, por sua vez, demonstrou ação antimicrobiana contra bactérias Gram-negativas e o potencial antibacteriano contra este grupo

de bactérias pode ser explorado com maior afinco. As amostras IB4C, IB6A, IB6B, IB36A, IB36C, IB45B e BG5A apresentaram ação antimicrobiana de amplo espectro, o que permite concluir que os compostos produzidos por essas linhagens de fungos têm ação contra diferentes grupos microbianos. Desta forma, faz- se necessário um estudo mais aprofundado para sua potencial aplicação tanto na indústria de alimentos e farmacêutica, quanto como produtores de novos agentes antimicrobianos de amplo espectro.

Alguns autores referem-se ao solo em regiões de transição do Cerrado com pouca disponibilidade de nutrientes, criando ambientes hostis e ao mesmo tempo, fazendo que os organismos presentes neste local desenvolvam um metabolismo diferenciado sendo possível a produção de novas moléculas com propriedades biológicas de interesse (LUCAS; DE CASTRO; TAKAHASHI, 2007). Isso talvez explique o fato dos micro-organismos isolados em Barão Geraldo possuírem alto potencial antimicrobiano. Além destas, as culturas de fungos isoladas da região de Mata Atlântica também se mostraram muito promissoras para a produção de compostos bioativos. Isso permite que, futuramente, após estudos mais aprofundados, estes micro-organismos possam ser utilizados como novas fontes de compostos antimicrobianos.

Figura 14. Cultura dos fungos BG13E (A) e BG13D (B), cujos extratos apresentaram atividade antimicrobiana contra as bactérias Gram-positivas estudadas.

Figura 15. Cultura dos fungos IB4C (A), IB6A (B), IB6B (C), IB36A (D), IB36C (E) e IB45B (F), cujos extratos apresentaram atividade antimicrobiana de amplo espectro.

Figura 16. Cultura dos fungos BG 8C (A) (cujo extrato apresentou atividade contra as bactérias Gram-negativas); BG5A (B) (apresentou atividade de amplo espectro); IB49C (C) (apresentou atividade contra S. aureus ATCC 6538); BG4B, BG11A, BG14K e Aspergillus sp. (1099) (D) (apresentaram atividade contra a cepa de B. cereus); IB14B, IB27B, IB38E e IB40A (E) (apresentaram atividade contra S. choleraesuis ATCC 14028) e IB8A, BG10C, RP478 (F) (apresentaram atividade contra C. albicans ATCC 10231).

A identificação do gênero das linhagens de fungos que apresentaram maior atividade antimicrobiana é necessária, uma vez não é possível diferenciar algumas linhagens muito similares pela análise morfológica (Figuras 14, 15 e 16).

68 4 CONCLUSÕES

 O presente trabalho permitiu o isolamento de 118 culturas de fungos filamentosos, as quais foram adicionadas à CMLB e poderão ser utilizadas em estudos futuros.

 Através da bioprospecção de fungos filamentosos, isolados de biomas do Estado de São Paulo, foi possível isolar 22 culturas com elevado potencial antimicrobiano contra pelo menos um dos micro-organismos alvo analisados.

 Isolados da região de Mata Atlântica e da região de transição apresentaram maior potencial antimicrobiano.

 As linhagens dos fungos IB36A, BG11A, BG13D e BG13E produziram compostos com efeitos bactericida e bacteriolítico sobre B. cereus.

 Os extratos dos fungos IB6A, IB36A, IB45B, IB49C, BG13D e BG13E apresentaram efeito bactericida sobre S. aureus ATCC 6538, sendo que os extratos das linhagens IB6A, IB36A, IB45B, BG5A, BG13D e BG13E também apresentaram efeito bacteriolítico.

 Apenas os fungos IB6B e IB38E produziram compostos com efeito bactericida sobre as linhagens de E. coli ATCC 11229 e S. choleraesuis ATCC14028, respectivamente.

 Nenhum dos extratos fúngicos estudados produziram compostos efeito fungicida sobre

C. albicans ATCC 10231.

 O trabalho realizado representa a etapa inicial na obtenção de novos compostos antimicrobianos naturais e novas fontes destes compostos. Os resultados fornecem informações importantes que podem ser utilizadas no desenvolvimento de novos fármacos ou aditivos alimentares.

69 5 SUGESTÕES PARA TRABALHOS FUTUROS

 Realizar a identificação dos fungos filamentosos que apresentaram maior potencial antimicrobiano contra os micro-organismos alvo deste estudo;

 Identificar as moléculas relacionadas à atividade antimicrobiana produzidas pelos isolados de fungos filamentosos selecionados;

 Avaliar o mecanismo de ação dessas moléculas;

 Estudar outras condições de cultivo e diferentes extratos a partir dos isolados ativos e a otimização da produção dos compostos;

 Avaliar a toxicidade dos extratos e possibilidade de ensaios in vivo;

 Avaliar o potencial das culturas de fungos selecionadas para produção de compostos com outras atividades biológicas e outras moléculas de alto valor agregado.

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No documento Isolamento e seleção de fungos filamentosos silvestres de distintos biomas do Estado de São Paulo para produçao de compostos antimicrobianos (páginas 84-138)