Espectroscopia de Massas

Os espectros de massa de alta resolução foram obtidos em um espectrômetro de massa Waters Xevo Q-TOF (ESI-QTOF), no modo positivo ou negativo, dependendo do produto alvo. As amostras de solução em metanol ou acetonitrila foram injetadas no espectrômetro de massa. Antes de cada análise, o espectrômetro foi calibrado externamente com ácido fosfórico variando de 99 a 980 m / z. Os espectros de massa MALDI-TOF foram registrados em um espectrômetro Bruker Autoflex III MALDI-TOF MS ou em um espectrômetro Bruker Microflex LT MALDI-TOF MS. As amostras foram preparadas pelo método de gotículas secas, utilizando a matriz universal MALDI-TOF (mistura 1: 1 de ácido 2,5-di-hidroxibenzóico e ácido a-ciano-4-hidroxicinâmico). A solução da matriz foi preparada em uma concentração de 10 mg.mL-1 em acetonitrila e água (1: 1, v / v) contendo 2% de ácido fórmico.

4.4. DLS

Tamanho por espalhamento dinâmico de luz (DLS) e potencial zeta. O tamanho médio de partícula e o potencial zeta das nanopartículas foram determinados a 25 ºC por espalhamento dinâmico de luz usando um Malvern Zetasizer Nano ZS-Zen3600 equipado com um laser He-Ne de 4 mW com comprimento de onda de 632,8 nm e detecção no ângulo de espalhamento de 173 ° . Essas medições foram realizadas com células capilares descartáveis (DTS1070). Todas as amostras foram diluídas adequadamente 1000 vezes e 10.000 vezes em PBS (pH = 7,4) e foram realizadas três medições das dispersões resultantes. Os resultados são apresentados em% por número e são representativos da triplicata.

4.5. SÍNTESES

Síntese do 6-nitroexanol (composto 2)

Em um schlenk, sob atmosfera de nitrogênio, foram adicionados 0,973 mg de 2- nitrociclohexanona (6,80 mmol) e uma mistura contendo 9 ml de acetonitrila e 6 ml de água. A solução foi agitada e arrefecida a 0 ºC. 1,26 g de NaBH4 foram adicionados durante uma hora. A solução foi colocada fora do banho de gelo e agitada a TA durante mais duas horas. O solvente foi evaporado a baixa pressão. Uma mistura de solução de HCl a 10% e DCM foi usada para extrair o produto. O 6-nitrohexanol foi purificado por coluna cromatográfica usando 6: 4 hexano: acetato de etilo. Obteve-se 0,724 g de um óleo amarelo pálido com 72% de rendimento.

1H NMR (CDCl3, 250 MHz), δ (ppm): 4.32 (t, J = 7.0 Hz, O2NCH2, 2H), 3.52 (t, J = 6.4 Hz, CH2OH, 2H), 2.87 (s, OH, 1H), 1.96-1.91 (m, O2NCH2CH2, 2H), 1.51-1.46 (m, CH2(CH2)2, 2H), 1.36-1.30 (m, (CH2)2,4H).

Síntese do ácido 6-nitrohexanoico (composto 3)

Em um balão foram adicionados 113 mg (0.79 mmol) de 2-nitrocicloexanona e 47mg (1.1 mmol) de NaOH em 5 mL de água. A mistura ficou sob agitação por 12h. A mistura foi acidificada com ácido acético e extraída com diclorometano. Foram obtidos 121 mg de um óleo amarelo, sendo o produto puro, resultando em um rendimento de 95%. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz), δ (ppm): 10.23 (s, COOH, 1H), 4.37 (t, J = 7.0 Hz, O2NCH2, 2H), 2.36 (t, J = 7.4 Hz, CH2COOH, 2H), 2.00 (qui, J = 7.0 Hz, O2NCH2CH2, 2H), 1.67 (qui, J = 7.4 Hz, CH2CH2COOH, 2.0 H), 1.46 - 1.38 (m, CH2CH2CH2COOH, 2H). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz), δ (ppm): 179.7 (COOH), 75.4 (O2NCH2), 33.6 (CH2COOH), 27.0 (O2NCH2CH2), 25.7 (O2NCH2CH2CH2), 23.9 (CH2CH2COOH). ESI-QTOF-MS [M]- m/z calcd for C6H11NO4:160.06, found 159.98.

Síntese do composto 4

Num balão de fundo redondo contendo 700 mg de 6-nitrohexanol (4,9 mmol) adicionaram-se 150 ml de água e 392 mg de NaOH (9,8 mmol). A solução foi agitada durante 5 min. Em seguida, foram adicionados 2,9 ml de acrilato de terc-butilo (19,6 mmol) e a solução foi agitada durante 72 h. A mistura foi acidificada para perto de pH 5 com ácido acético. DCM foi usado para extrair o produto da água, o qual foi purificado por coluna

cromatográfica usando 7: 3; hexano: acetato de etilo. Obtiveram-se 841 mg de um óleo amarelo pálido com um rendimento de 63%.

1H NMR (CDCl3, 400 MHz), δ (ppm): 4.53 (dddd, J = 4.4, 4.7, 7.0 ,and 9.2 Hz, NO2CH, 1H), 3.61 (t, J = 6.4 Hz, CH2OH, 2H), 2.33-2.22 (m, NO2CHCH2, 2H), 2.08-1.93 and 1.77- 1.70 (m, CH2CH2COOtBu and CH2CH2’COOtBu, 4H), 1.77-1.68 (m, CH2CH2CH2CH2OH, 2H), 1.43 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.01-1.33 (m, CH2CH2CH2CH2OH, 4H). ¹³C NMR (CDCl3, 100 MHz), δ (ppm): 171.4 (COOtBu), 87.7 (NO2CH), 81.2 (COOC(CH3)3), 62.6 (CH2OH), 33.9, 32.4, 31.4, 31.0 and 28.9 (CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, NO2CHCH2 and NO2CHCH2CH2), 28.2 (COOC(CH3)3), 25.3 and 25.2 (CH2CH2CH2OH and CH2CH2CH2OH). ESI-QTOF-MS [M+H]+ m/z calcd for C13H25NO5: 276.1825, found: 276.1811.

Síntese do composto 6

Em um balão de fundo redondo, contendo 815 mg de 4-nitro-9-hidroxi nonanoato de terc-butila, foram adicionados 10 mL de água e 90 mL de ácido fórmico. A mistura foi agitada durante 12 h. O solvente foi evaporado a baixa pressão. O produto era um óleo incolor a amarelo pálido, somando 527 mg, após lavagem com éter, tendo um rendimento de 95%.

1H NMR (CD3OD, 400 MHz), δ (ppm): 8.01 (s, CH2OH), 4.63 (dddd, J = 4.5, 4.9, 7.0 ,and 9.2 Hz, NO2CH, 1H), 4.15 (t, J = 6.5 Hz, CH2OH, 2H), 2.55-2.50 (m, NO2CHCH2, 2H), 2.36-2.32 (m, CH2CH2CO2H), 2.17-2.07 (m, CH2CH2CO2H), 1.70-1.59 (m, CH2CH2CH2CH2OH, 2H), 1.44-1.37 (m, CH2CH2CH2CH2OH, 4H). ESI-QTOF-MS [M]- m/z calcd for C9H17NO5: 218.1034, found 218.1030.

Síntese do composto 10

Num schlenk, com atmosfera de nitrogênio, adicionaram-se 505 mg (2,7 mmol) de ácido 4-nitro-9-hidroxi nonanóico, 930 ul (5,4 mmol) de Di-isopropiletilamina e 1,10 g (3,2 mmol) de HATU em 5 ml de dimetilformamida. Depois de agitar durante 5 min, adicionou- se à solução 570 uL (5,4 mmol) de 2,2-dimetoxietilamina. A mistura foi agitada durante 17 h. O solvente foi evaporado a baixa pressão. O produto foi purificado por coluna cromatográfica utilizando acetato de etila. Obteve-se 596 mg de um óleo amarelo- acastanhado com 73% de rendimento.

1H NMR (CDCl3, 400 MHz), δ (ppm): 8.04 (s, OH, 1H), 5.71 (s, CONH, 1H), 4.55 (dddd, J = 4.5, 4.8, 6.9, and 9.1 Hz, NO2CH, 1H), 4.36 (t, J = 5.2 Hz, CH(OCH3)2, 1H), 4.14 (td,

J1 = 6.6 Hz, J2 = 0.6 Hz, CH2OH, 2H), 3.39-3.38 (m, CH(OCH3)2 and CONHCH2, 8H), 2.29-2.23 (m, NO2CHCH2 and CH2CH2COOtBu 4H), 2.04-1.94 and 1.78-1.61 (m, CH2CH2COOtBu and NO2CHCH2CH2, 4H), 1.39-1.36 (m, CH2CH2CH2OH and CH2CH2CH2OH, 4H). ¹³C NMR (CDCl3, 100 MHz), δ (ppm): 171.0 (COOtBu), 102.6 (CH(OCH3)2), 88.1 (NO2CH), 63.7 (CH2OH), 54.6 and 54.5 (CH(OCH3)2), 41.1 (CONHCH2), 33.9, 32.1, 29.3, 28.3, 25.5 and 25.4 (CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, NO2CHCH2 and NO2CHCH2CH2, CH2CH2CH2OH and CH2CH2CH2OH). ESI-QTOF-MS [M]- m/z calcd for C13H26N2O6: 307.1864, found: 307.1882.

Síntese do composto 5

Em um balão de vidro foram adicionados 73 mg do nitroácido ( 3 ) (0,45 mmol), 146 uL de tercbutil acrilato (TBA) (1 mmol) e 24 mg de NaOH (0,6 mmol) em 5 mL de água. A mistura ficou sob agitação por 72h. A solução foi acidificada com ácido acético e extraída com diclorometano. A fase orgânica foi rotoevaporada. Produto puro foi isolado por coluna cromatográfica, que eluiu com 40% de acetato em hexano,resultando em 74 mg de um óleo amarelo pálido que foi isolado com 56% de rendimento.

1H NMR (CDCl3, 400 MHz), δ (ppm): 4.54 (dddd, J = 4.3, 4.9, 7.0, 9.1 Hz, NO2CH, 1H), 2.35 (t, J = 7.3 Hz, CH2COOH, 2H), 2.30-2.24 (m, CH2CH2COOtBu, 2H), 2.21-1.96 (m, NO2CHCH2 and CH2CH2’COOtBu, 3H), 1.79-1.58 (m, CH2CH2COOH and CH2CH2’COOtBu, 3H), 1.44 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.41-1.35 (m, CH2(CH2)2COOtBu, 2H). ¹³C NMR (CDCl3, 100 MHz), δ (ppm): 178.7 (COOH), 171.4 (COOtBu), 87.7 (NO2CH), 81.3 (COOC(CH3)3), 33.6 (CH2COOH), 33.6 (CH2COOtBu), 31.4 (CH2CH2COOtBu), 28.9 (NO2CHCH2), 28.2 (COOC(CH3)3), 25.3 (CH2(CH2)2COOH), 24.1 (CH2CH2COOH). ESI-QTOF-MS [M]- m/z calcd for C13H23NO6: 289.1447, found: 289.1410.

Síntese do composto 13

Em um schlenk, com atmosfera de nitrogênio, foram adicionados 588 mg (1,9 mmol) de N-(2,2-Dimetoxietil)-4-nitro-9-hidroxi nonamida e 440 uL (2,9 mmol) de 1,8- diazabiciclo (5,4 .0) undec-7-eno em 8 mL de tetra-hidrofurano e depois agitado durante 5 min. 1,10 ml (7,6 mmol) de acrilato de terc-butilo foram adicionados à solução. A solução foi agitada durante 17 h. O solvente foi evaporado a baixa pressão. O produto foi purificado por coluna cromatográfica usando acetato de etila como eluente. O produto era um óleo amarelo-acastanhado e foi obtido com 56% de rendimento resultando em 471 mg.

1H NMR (CDCl3, 400 MHz), δ ppm: 5.89 (t, J = 5.3 Hz, CONH, 1H), 4.30 (t, J = 5.1 Hz, CH(OCH3)2, 1H), 3.56 (t, J = 6.4 Hz, CH2OH, 2H), 3.32 (m, CH(OCH3)2 and CONHCH2, 8H), 2.22-2.05 (m, CH2CH2CONH, CH2CH2CONH and CH2CH2COOtBu, 6H), 1.85-1.80 (m, NO2CHCH2, 2H), 1.53-1.46 (m, CH2CH2COOtBu, 2H), 1.37 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.34-1.29 and 1.24-1.19 (m, CH2CH2CH2OH and CH2CH2CH2OH, 4H). ¹³C NMR (CDCl3, 100 MHz), δ (ppm): 171.6 (COOtBu), 171.4 (CONH), 102.6 (CH(OCH3)2), 93.4 (NO2CH),

81.3 (C(CH3)3), 62.4 (CH2OH), 54.5 (CH(OCH3)2), 41.1 (CONHCH2), 35.4, 32.2, 31.2, 30.8, 30.4 and 30.0 (CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, CH2CH2CONH, CH2CH2CONH, NO2CqCH2 and NO2CqCH2-CH2), 28.1 (C(CH3)3), 25.9 and 23.4. (CH2CH2CH2OH and CH2CH2CH2OH). ESI-MS [M]- m/z calcd for C20H38N2O8: 435.27, found: 435.21.

Síntese do composto 14

Em um schlenk, com atmosfera de nitrogênio e 0 ºC, foram adicionados 450 mg (1,04 mmol) do dendron trifuncional, 125 uL (1,56 mmol) de piridina e 215 uL (2,08 mmol) de anidrido acético em 7 ml de clorofórmio. A solução foi transferida para 25 ºC e agitada por 12 h. A solução foi lavada com água. A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio e filtrada. O solvente foi removido sob baixa pressão. O dendron foi purificado por coluna cromatográfica usando acetato de etila. O produto foi obtido com um rendimento de 82% como um óleo castanho amarelado resultando em 404 mg.

1H NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 5.73 (t, J = 5.1 Hz, CONH, 1H), 4.36 (t, J = 5.2 Hz, CH(OCH3)2, 1H), 4.05 (t, J = 6.6 Hz, CH2OH, 2H), 3.40 (m, CH(OCH3)2 and CONHCH2, 8H), 2.28-2.12 (m, CH2CH2CONH, CH2CH2COOtBu and NO2CHCH2 6H), 2.05 (s, OCCH3, 3H), 1.91-1.86 (m, CH2CH2COOtBu, 2H), 1.65-1.57 (m, CH2CH2CONH, 2H), 1.44 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.42-1.28 (m, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OH and NO2CHCH2CH2, 6H). ¹³C NMR (CDCl3, 125 MHz), δ (ppm): 171.5 (COOtBu), 171.4 (CONH), 171.1 (OCOCH3), 102.6 (CH(OCH3)2), 93.3 (NO2CH), 81.3 (C(CH3)3), 64.2 (CH2OCOCH3), 54.6 and 54.5 (CH(OCH3)2), 41.1 (CONHCH2), 35.5, 31.3, 30.8, 30.4, 30.0 and 28.4 (CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, CH2CH2CONH, CH2CH2CONH, NO2CqCH2 and NO2CqCH2CH2), 28.2 (C(CH3)3), 26.1 and 23.4. (CH2CH2CH2O and CH2CH2CH2O), 21.12 (OCOCH3). ESI-QTOF-MS [M+H]+ m/z calcd for C13H40N2O9: 477.2807, found: 477.2810.

Síntese do composto 12

380 mg (0,8 mmol) do dendron trifuncional foram solubilizados em 60 mL de etanol num schlenk contendo níquel de Raney. A atmosfera e a solução estavam saturadas de hidrogênio. A mistura foi agitada durante 12 h e depois filtrada usando celite. O etanol foi evaporado sob baixa pressão. O óleo castanho restante foi solubilizado em 300 ul de metanol e depois, lentamente adicionado em 400 ml de éter. O éter foi filtrado em celite, que depois foi lavada com diclorometano. O diclorometano foi evaporado a baixa pressão. Obteve-se 297 mg de um óleo castanho com 83% de rendimento.

1H NMR (CD3OD, 500 MHz), δ (ppm): 4.41 (br, CONH, 1H), 4.07 (t, J = 6.4 Hz, CH(OCH3)2, 1H), 3.65 – 3.51 (m, , CH2OCO, 2H), 3.37 (S, CH(OCH3)2, 6H), 3.29-3.28 (m, NHCH2, 2H), 2.51-2.15 (m, CH2CH2CONH, CH2CH2COOtBu and NO2CHCH2 6H), 2.02 (s, OCCH3, 3H), 1.67-1.64 (m, CH2CH2COOtBu, 2H), 1.57 (m, CH2CH2CONH, 2H), 1.45 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.40-1.29 (m, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OH and NO2CHCH2CH2, 6H). ¹³C NMR (CDCl3, 125 MHz), δ (ppm): 176.4 (COOtBu), 175.1 (CONH), 173.1 (OCOCH3), 103.8 (CH(OCH3)2), 81.4 (C(CH3)3), 65.6 (CH2OCOCH3), 62.9 (NH2CH), 54.4 (CH(OCH3)2), 42.0 (CONHCH2), 35.3, 33.5, 31.3, 30.9, 30.8, and 29.6 and (CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, CH2CH2CONH, CH2CH2CONH, NO2CqCH2 and NO2CqCH2CH2), 28.3 (C(CH3)3), 27.6 and 24.1 (CH2CH2CH2O and CH2CH2CH2O), 20.8 (OCOCH3). ESI-QTOF-MS [M+H]+ m/z calcd for C22H42N2O7: 447.3065, found: 477.3098.

Síntese do composto 8

Em um balão de três bocas, sob atm de nitrogênio e temperatura ambiente, foram adicionados 36 mg de DenBi-H (5) (0.12 mmol) e 4 mL de THF. Em seguida foram adicionados 50 uL de glicol acrilato (0.24 mmol ). Um funil de adição foi acoplado ao sistema e adicionados a ele 35 uL de DiPEA (0.18 mmol ) e 2 mL de THF. A base foi adicionada lentamente no meio reacional por aproximadamente 1 h. Após a adição a mistura ficou sob agitação por 16h. O solvente foi rotoevaporado e o restante foi colunado. A segunda fração a sair da coluna, que eluia a 50% de acetato em hexano, era o produto puro.

1H NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 4.24-4.23 (m, COOCH2CH2O, 2H), 3.70 (t, J = 4.7 Hz, COOCH2CH2O, 2H), 3.66-3.58 (m, OCH2CH2O, 4H), 3.53 (q, J = 7.0 Hz, OCH2CH3, 2H), 2.35 (t, J = 7.3 Hz, CH2COOH, 2H), 2.32-2.12 (m, CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, CH2CH2COO and CH2CH2COO, 8H), 1.96-1.85 (m, O2NCqCH2, 2H), 1.65 (qui, J = 7.4 Hz, O2NCqCH2CH2, 2H), 1.43 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.32-1.24 (m, CH2CH2COOH, 2H), 1.23 (t, J = 7.0 Hz, OCH2CH3, 3H). ¹³C NMR (CDCl3, 125 MHz), δ (ppm): 177.3 (COOH), 172.1 (COOCH2), 171.3 (COOtBu), 92.8 (O2NCq), 81.3 (COOC(CH3)3), 70.7 and 69.8 (CH2O), 69.1 (COOCH2CH2O), 66.8 (OCH2CH3), 64.1 (COOCH2CH2O), 34.9 (O2NCqCH2), 33.3 (CH2COOH) and 31.0, 30.1, 30.0 and 28.8 (CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOCH2, CH2CH2COOCH2), 28.2 (COOC(CH3)3), 24.6 (O2NCqCH2CH2), 23.0 (O2NCq(CH2)2CH2), 15.2 (OCH2CH3). ESI- QTOF-MS [M+Cl]- m/z calcd for C22H39NO10: 512.2268, found: 512.2241.

Síntese do composto 9

Em um balão de três bocas sob atm de nitrogênio foram adicionados 31 mg do dendron trifuncional ( 8 ) ( 0.06 mmol ), 28 mg de DCC ( 0.078 mmol ), 3 mg de DMAP ( 0.01 mmol ) e por último 20 uL de EtOH-TMS ( 0.13 mmol ). Solução ficou sob agitação por 20h. O solvente foi rotoevaporado e o crude passado em coluna de onde eluiu na primeira fração com 20% de acetato em hexano.

1H NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 4.24 (t, J = 4.7 Hz, COOCH2CH2O, 2H), 4.15 (t, J = 8.5 Hz, COOCH2CH2Si(CH3)3, 2H), 3.70 (t, J = 4.7 Hz, COOCH2CH2O, 2H), 3.64 (m, OCH2CH2O, 2H), 3.58 (m, OCH2CH2O, 2H), 3.52 (q, J = 7.0 Hz, OCH2CH3, 2H), 2.31- 2.18 (m, CH2COOEtTMS, CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu, CH2CH2COO, CH2CH2COO, 10H), 1.90 (m, O2NCqCH2, 2H), 1.62 (m, O2NCqCH2CH2, 2H), 1.43 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.28-1.23 (m, CH2CH2COOEtTMS, 2H), 1.20 (t, J = 7.0 Hz, OCH2CH3, 3H), 0.97 (t, J = 8.5 Hz, CH2Si(CH3)3, 2H), 0.03 (s, Si(CH3)3, 9H). ¹³C NMR (CDCl3, 125 MHz), δ (ppm): 173.3 (COOEtTMS), 172.1 (COOCH2), 171.2 (COOtBu), 92.8 (O2NCq), 81.3 (COOC(CH3)3), 70.8 (CH2O), 69.9 (CH2O), 69.1 (COOCH2CH2O), 66.8 (OCH2CH3), 64.2 (COOCH2CH2O), 62.3 (COOCH2CH2Si(CH3)3), 35.3 (O2NCqCH2), 34.1, 30.6, 30.4, 30.0 and 28.8, (CH2COOEtTMS), CH2CH2COOtBu, CH2CH2COOtBu,

CH2CH2COOCH2, CH2CH2COOCH2), 28.2 (COOC(CH3)3), 25.0 (O2NCqCH2CH2), 23.3 (O2NCq(CH2)2CH2), 17.4 (CH2Si(CH3)3), 15.3 (OCH2CH3), -1.36 (Si(CH3)3). ESI-QTOF- MS [M+H2O]- m/z calcd for C27H51NO10Si: 595.3382, found: 595.3363.

Síntese do composto 11

Em um schelenk para hidrogenação foram adicionados 35 mg do nitrodendron trifuncional ( 9 ) ( 0.06 mmol ) e 50 mg do ácido pTS ( 0.3 mmol ) em 35 mL de etanol. Uma porção do catalisador de níquel foi adicionado e em seguida mais 20 mL de etanol foram adicionados. A solução ficou sob agitação por 24h e à 55ºC. A solução foi filtrada em celite com etanol para tirar o catalizador. O etanol foi rotoevaporado e o que restou foi colunado. O produto foi obtido puro.

1H NMR (CDCl3, 500 MHz), δ (ppm): 7.74 (d, J = 8.0 Hz, ArH, 2H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, ArH, 2H) 4.18 (t, J = 4.9 Hz, COOCH2CH2O, 2H), 4.12 (m, COOCH2CH2Si(CH3)3, 2H) 3.65 (t, J = 4.9 Hz, COOCH2CH2O, 2H), 3.62-3.60 (m, OCH2CH2O, 2H), 3.56-3.54 (m, OCH2CH2O, 2H), 3.50 (q, J = 7.0 Hz, OCH2CH3, 2H), 2.49 (m, 2H), 2.34 (m, 2H), 2.15 (t,

J = 7.6 Hz, 2H), 1.97-1.90 (m, 4H), 1.58 (m, 2H), 1.50 (m, 2H) (CH2CH2COO, CH2CH2COO, O2NCqCH2 and O2NCqCH2CH2), 1.44 (s, ArCH3, 3H), 1.40 (s, COOC(CH3)3, 9H), 1.32 (m, CH2CH2COOEtTMS, 2H), 1.19 (t, J = 7.0 Hz, OCH2CH3, 3H), 0.96 (m, CH2Si(CH3)3, 2H), -0.29 (s, CH2Si(CH3)3, 9H). ¹³C NMR (CDCl3, 125 MHz), δ (ppm): 173.6 (COOEtTMS), 172.9 (COOCH2), 172.3 (COOtBu), 141.7 (ArCq), 140.3 (ArCq), 129.0 (ArCH), 126.1 (ArCH), 81.0 (COOC(CH3)3), 70.7 and 69.9 (CH2O), 69.0 (COOCH2CH2O), 66.8 (OCH2CH3), 64.0 (COOCH2CH2O), 62.5 (COOCH2CH2Si(CH3)3), 58.3 (H3NCq), 35.6, 34.1, 30.7, 30.4, 29.8 and 29.2 (H3NCqCH2, CH2CH2COO, CH2CH2COO), 28.2 (COOC(CH3)3), 25.0 (O2NCqCH2CH2), 22.2 (O2NCq(CH2)2CH2), 21.4 (ArCH3) 17.4 (CH2Si(CH3)3), 15.3 (OCH2CH3), -1.4 (Si(CH3)3). ESI-QTOF-MS [M]+ m/z calcd for C27H54NO8Si+: 548.3613, found 548.3619.

Síntese do dendron nitrotriéster A

Em um schelenk de 100 mL sob atmosfera de N2, foram adicionados 15 mL de DME, 3 mL de nitrometano (60 mmol) e 3 mL de triton-B (6 mmol). A mistura foi colocada em um banho com a temperatura estabilizada em 63 oC. Em um funil de adição foram adicionados 27 mL de (180 mmol) de terc-butil acrilato. A adição foi feita lentamente durante duas horas. Após este período a temperatura do banho foi elevada para 75oC. Reação ficou sob agitação por mais 2h. O solvente foi rotoevaporado e o crude foi ressolubilizado em DCM. O produto passou por uma extração líquido-líquido com HCl 10%. Foi utilizado MgSO4 como agente secante. O solvente foi rotoevaporado. O produto foi cristalizado utilizando EtOH. O produto é um sólido branco. Rendimento de 33%.

Síntese do dendron nitrotriácido B

O nitrotriéster foi colocado sob agitação por 8h em uma mistura de ácido fórmico e água ( 9:1 ). Após este período o solvente foi rotoevaporado e o produto, nitrotriácido, foi lavado com éter. Foi obtido um sólido branco. Rendimento > 95%.

Síntese do dendron aminotriéster C

Foram solubilizados em etanol absoluto 664 mg do nitrotriéster (1.5 mol), dentro de um schelenk contendo níquel de Rainay. O schelenk foi enriquecido com gás hidrogênio e levado a 42 oC. Agitação continuou por 24h. A solução foi filtrada em celite com etanol. O etanol foi rotoevaporado e o produto foi ressolubilizado em diclorometano. Foi novamente filtrado em celite. O DCM foi rotoevaporado, sobrando o produto puro na forma de um sólido branco. Rendimento > 95%.

Síntese do dendron nitrononaéster D

Em um schelenk sob atmosfera de nitrogênio foram adicionados 1.6 g do aminotriester (4 mmol), 0.28 g do nitrotriéster (1 mmol), 20 mL de DMF e 1.15 g de HATU ( 3 mmol ). Por último foram adicionados 1.7 mL de DiPEA (9.5 mmol). Solução ficou sob agitação por 48 horas. O produto foi purificado por coluna cromatográfica com sílica gel. O produto saiu da coluna com 40% de acetato de etila em hexano. Sólido branco foi obtido com um rendimento de 91%.

1H NMR (MeOD, 400 MHz, δppm vs. TMS): 2.19 (t, J = 7.98 Hz, NO2CqCH2CH2 and CH2COOt Bu, 30H), 1.94 (m, CH2CH2COOt Bu, 18H), 1.45 (s, COO(CH3)3, 81H). MS- ESI (M+Na) + m/z calcd for C76H132N4O23: 1491.9, found 1491.6.

Síntese do dendron aminononaéster

Foram solubilizados em etanol absoluto 664 mg do nitrononaéster (1.5 mol), dentro de um schelenk contendo níquel de Rainay. O schelenk foi enriquecido com gás hidrogênio e levado a 42 oC. Agitação continuou por 24h. A solução foi filtrada em celite com etanol. O etanol foi rotoevaporado e o produto foi ressolubilizado em diclorometano. Foi novamente filtrado em celite. O DCM foi rotoevaporado, sobrando o produto puro na forma de um sólido branco. Rendimento 90%.

1 H NMR (MeOD, 400 MHz, δppm vs. TMS): 2.21 (t, CH2COOt Bu, 18H), 2.16 (t, CH2CONH, 6H), 1.95 (t, CH2CH2COOt Bu, 18H), 1.60 (t, NH2CqCH2, 6H), 1.45 (s, COO(CH3)3, 81H). MS-ESI (M+Na) + m/z calcd for C76H134N4O21Na: 1462.0, found 1462.1.

Síntese do dendrímero core protegido

Em um schelenk sob atmosfera de nitrogênio foram adicionados 872 mg do amino nonaéster (0.600 mmol) e 10 mL de THF. 79 mg (0.250 mmol) do linker, que estava disponível com 70% de pureza, foram solubilizados em 2 mL de THF e adicionado ao meio de reação. Por último foram adicionados 228 mg de HATU (0.600mmol) e 391 uL de DiPEA (2.125 mmol). Produto foi purificado por coluna cromatográfica preenchida com

sílica gel e eluído com 10% de metanol em diclorometano. O dendrímero foi obtido puro com 95% de rendimento.

1 H NMR (MeOD, 400 MHz, δppm vs. TMS): 7.37 (s, CONH, 8H), 3.97 (s, OCH2CONH, 4H), 3.75 (m, OCH2CH2O, 8H), 2.20 (m, CH2CH2CO, 48H), 1.95 (m, CH2CH2CO, 48H), 1.45 (s, C(CH3)3, 162H). 13C NMR (MeOD, 100 MHz, δppm vs. TMS): 175.3 and 174.5 (C=O), 81.7 (C(CH3)3), 72.4 (OCH2CO), 71.6 (OCH2CH2O), 58.9 (CONHCq), 32.5 (inner CH2CH2CONH), 32.2 (inner CH2CH2CONH), 30.8 (outer CH2CH2CONH), 30.6 (outer CH2CH2CONH), 28.6 (C(CH3)3). MALDI-TOF (M+H) + m/z calcd for C160H279N8O47: 3065.0, found 3070.2. Anal. calcd. for C160H278N8O47: C 62.68, H 9.14; found C 62.32, H 9.06.

Síntese do dendrímero dendri-(COOH)18

936 mg do dendrímero (1) foi adicionado em um balão de vidro contendo 9 mL de HCOOH e 1 mL de H2O. Ficou sob agitação por 12h. O solvente foi rotoevaporado. O Dendrímero (2) foi obtido puro com rendimento maior do que 95%.

1H NMR (CD3OD, 400 MHz), δ (ppm): 3.99 (s,OCH2CONH, 4H), 3.70-3.66 (m, OCH2CH2O, 8H), 2.28 (m, CH2COOH, 36H), 2.19 (m, CH2CH2CONH, 12H), 2.02 (m, CH2CH2CO, 48H). MALDI-TOF-MS [M+Na]+ m/z calcd for C88H134N8O47: 2077.8, found 2078.8.

Síntese do dendrímero trifuncional 16

Em um schelenk foram adicionados 2 mg do dendrímero (2) (0.001 mmol), 6 uL de N-Metilmorfolina (0.042 mmol) e 8 mg de HATU (0.021 mmol) em 3 mL de DMF. 30 mg do dendron trifuncional foram diluídos em 2 ml de DMF e adicionados ao meio reacional. Reação ficou sob agitação por 48h. O solvente foi rotoevaporado. Purificado por coluna cromatográfica preenchida por sílica gel. Produto eluiu com 10% de metanol em diclorometano.

1H NMR (CD3OD, 600 MHz), δ (ppm): 4.22-4.15 (m, COOCH2CH2O and COOCH2CH2Si(CH3)3), 3.96 (brs, OCH2 inner), 3.80 (br, OCH2 inner), 3.74 (br, OCH2 inner), 3.70 (t, OCH2), 3.66-3.45 (OCH2), 2.37-1.59 (br, CH2 inner and outer), 1.45 (s, COOC(CH3)3), 1.19 (t, OCH2CH3), 1.00 (m, CH2Si(CH3)3), 0.06 (s, CH2Si(CH3)3, 9H). ¹³C NMR (CD3OD, 100 MHz), δ (ppm): 175.6, 175.4, 175.1, 175.0. 174.5, and 159.9 (R1COR2), 81.6 (COOC(CH3)3), 71.6, 70.9, 70.1, 67.6, 64.8, and 63.6 (OCH2), 59.1, 58.9, and 58.7 (NHCq), 35.1, 34.8, 32.0, 30.7, 29.5, and 29,2 (CH2), 28.5 (COOC(CH3)3), CH2CH2COO), 26.8, 26.3, 26.0, and 23.6 (CH2), 18.2 (CH2Si(CH3)3), 15.6 (OCH2CH3), -1.3 (Si(CH3)3). MALDI-TOF-MS [M]2+ m/z calcd for C574H1052N26O173Si18: 5792, found 5793.

Síntese do dendrímero trifuncional desprotegido 17

Em um balão de vidro foram colocados 24 mg (0,002 mmol) do dendrímero trifuncional protegido, 10 ml de água e 90 ml de ácido fórmico. A solução foi agitada durante 24 h. O solvente foi removido sob baixa pressão. O produto foi lavado utilizando éter dietílico frio e depois seco sob alto vácuo. Obteve-se 17 mg de um sólido branco com 77,6% de rendimento.

1H NMR (CD3OD, 500 MHz), δ (ppm): 4.21-4.16 (m, COOCH2CH2O and COOCH2CH2Si(CH3)3), 3.98 (br, OCH2inner), 3.82 (br, OCH2inner), 3.74-3.51 (OCH2), 2.32- 1.98, 1.67-1.60, and 1.29 (br, CH2 inner and outer), 1.19 (t, OCH2CH3), 1.00 (m, CH2Si(CH3)3), 0.06 (s, CH2Si(CH3)3). ¹³C NMR (CD3OD, 125 MHz), δ (ppm): 175.4, 175.4, 175.1, and 175.1 (R1COR2), 71.6, 70.9, 70.1, 67.6, 64.8, and 63.6 (OCH2), 59.0 (NHCq), 35.1, 32.0, 31.0, 30.7, 29.8, 29.5, 29,3, 26.4, 26.3, and 23.6 (CH2 inner and outer), 18.2 (CH2Si(CH3)3), 15.56 (OCH2CH3), -1.4 (Si(CH3)3).

Síntese do dendrímero pentafuncional 18

Em um schlenk, sob atmosfera de nitrogênio e 25 ºC, foram colocados 14 mg do dendrímero desprotegido (0,001 mmol), 4 uL de DiPEA (0,021 mmol) e 8 mg de HATU (0,021 mmol) em 5 ml de DMF. Após 10 min de agitação, 9 mg de dendron (0,020 mmol) foram adicionados em solução. Mais 96h de agitação. O DMF foi evaporado sob pressão reduzida. O restante foi solubilizado em 300 ul de metanol e depois lentamente adicionado em 500 ml de água, sob agitação. A mistura foi filtrada em celite. O metanol foi usado para solubilizar o dendrímero. Todo o metanol foi evaporado a baixa pressão. Foram obtidos 17.090 mg de um sólido branco, fornecendo aproximadamente 72% de rendimento.

1H NMR (CD3OD, 500 MHz), δ (ppm): 4.41 (br, CONH, 1H), 4.09-4.04 (m, COOCH2CH2O and COOCH2CH2Si(CH3)3), 4.06 (br, CH(OCH3)2, 1H), 3.72 – 3.49 (m, , CH2O), 3.37 (s, CH(OCH3)2 and NHCH2), 2.33, 3.27, and 2.03 (br, CH2 inner and outer), 1.89 (s, OCCH3), 1.64 (br, CH2 inner and outer), 1.45 (s, COOC(CH3)3), 1.22-1.15 (m, OCH2CH3 and CH2 inner), 1.029-0.87 (m, CH2Si(CH3)3), 0.06 (s, CH2Si(CH3)3). ¹³C NMR (CDCl3, 125 MHz), δ (ppm): 179.4, 175.4, 173.0, and 165.0 (R1COR2), 103.8 (CH(OCH3)2), 70.9 and 65.6 (OCH2), 59.0 (NHCq), 54.4 (CH(OCH3)2), 42.14 (CONHCH2), 36.9, 35.2, and 31.6 (CH2 inner and outer), 30.7 (C(CH3)3), 28.7 (CH2 outer), 23.7 (CH2 inner and outer), 21.0 (COCH3), 18.2 (CH2Si(CH3)3-1.3 (Si(CH3)3).

Síntese do dímero do ácido tioglicólico

Em um balão em banho de gelo foram adicionados 5 ml de éter etílico, 1,3 g de ácido tioglicólico (14 mmol), 35 mg de iodo (0,14 mmol) e 2,4 ml de peróxido de hidrogênio (30%) gota a gota. Solução ficou sob agitação por uma hora. Após esse período o solvente foi rotoevaporado. O óleo inodoro obtido foi solubilizado em 2 ml de etanol. 2 ml de hexano foram adicionados à solução e agitado. A solução tinha duas fases. A fase superior de hexano foi retirada. Esse procedimento foi repetido mais duas vezes duas vezes. O produto ficou no vácuo por uma noite. Foram obtidos 97 mg de um óleo amarelado pálido com 76% de rendimento.

Síntese do tiodendrímero protegido 19

Em um schlenk contendo 5ml de DMF foram adicionados 182 mg do ácido 2,2’- dissulfetodiacético (1 mmol), 500 ul de trietilamina (3 mmol), 798 mg de HATU. Após 2 minutos de agitação foram adicionados 994 mg do dendron (2,5 mmol). A solução ficou sob agitação em atmosfera de nitrogênio por 12h. Todo solvente foi removido em baixa pressão. O produto foi ressolubilizado em diclorometano. Foi feita uma extração com água. A fase orgânica teve o solvente removido em baixa pressão. Foi feita uma coluna cromatográfica em sílica gel. O produto eluiu com a proporção 1 : 1, hexano : acetato de etila. O solvente foi rotoevaporado. Foram obtidos 648 mg de um sólido com 66% de rendimento.

Síntese do tiodendrímero desprotegido 20

Em um balão contendo 45 ml de ácido fórmico e 5 ml de água, foram adicionados 640 mg do dendrímero protegido. A solução ficou sob agitação por 8h. Todo solvente foi rotoevaporado. O sólido obtido foi lavado com éter. Ao final foram obtidos 407 mg do produto com 97% de rendimento.

Síntese do tiodendrímero trifuncional 21

Em um schlenk contendo 4 ml de DMF foram adicionados 40 mg do dendrímero desprotegido (0,063 mmol), 75 ul de metilmorfolina (0,630 mmol), 170 mg de HATU (0,441 mmol). Após agitação de 2 minutos foram adicionados 370 mg do dendron tri funcional (0,51 mmol) . A solução ficou em agitação por 48h. O solvente foi retirado em baixa pressão. O restante foi solubilizado em 800 ul de metanol. A solução foi adicionada lentamente em 500 ml de água sob agitação. Após o término da adição a mistura foi filtrada em celite. Ao final o celite foi lavado com 50 ml de água destilada. Então o celite foi lavado com metanol.153 mg de um sólido branco foram obtidos após evaporação do metanol, somando 64% de rendimento.

Síntese do tiodendrímero trifuncional 22

Em um schlenk contendo 4 ml de DMF foram adicionados 76 mg do dendrímero desprotegido (0,12 mmol), 173 ul de trietil amina (1,2 mmol), 296 mg de HATU (78 mmol). Após agitação de 2 minutos foram adicionados 334 mg do dendron tri funcional (0,83 mmol). A solução ficou em agitação por 48h. O solvente foi retirado em baixa pressão. O restante foi solubilizado em 800 ul de metanol. A solução foi adicionada lentamente em 500 ml de água sob agitação. Após o término da adição a mistura foi filtrada em celite. Ao final o celite foi lavado com 50 ml de água destilada. Então o celite foi lavado com metanol. 263 mg de um sólido branco foram obtidos após evaporação do metanol, somando 75% de rendimento.

Acoplamento Tiodendron-glicólico22 Nanoflores

Em 5 ml da solução das nanoflores foram adicionados 4 ml de uma solução contendo 150 mg do dendrímero e 4 ml de uma solução tampão de citrato 1 mol.l-1 pH 6,2. A mistura ficou em agitação por 48h. Depois desse período a solução foi adicionado em um tubo de diálise para centrifuga e foi centrifugado à 9000 rpm e 4ºC. O que passou para a parte inferior do tubo foi descartada. A parte superior foi ressolubilizada na solução tampão de citrato e dispersa em ultrassom. A purificação na centrífuga foi feita por mais duas vezes. Após serem novamente redispersas, as nanopartículas foram análisadas em DLS.

Acoplamento Tiodendrímero-1 - Nanoflores

Em 5 ml da solução das nanoflores foram adicionados 4 ml de uma solução contendo 100 mg do dendrímero, 1 ml de acetonitrila e 3 ml de uma solução tampão de citrato 1 mol.l-1 pH 6,2. A mistura ficou em agitação por 48h. Depois desse período a solução foi adicionado em um tubo de diálise para centrifuga e foi centrifugado à 9000 rpm

e 4ºC. O que passou para a parte inferior do tubo foi descartada. A parte superior foi ressolubilizada na solução tampão de citrato e dispersa em ultrassom. A purificação na centrífuga foi feita por mais duas vezes. Após serem novamente redispersas, as nanopartículas foram análisadas em DLS.

Acoplamento Tiodendrímero trifuncional 21 - Nanopartículas 40nm

Em 5 ml da solução das nanoflores foram adicionados 4 ml de uma solução contendo 150 mg do dendrímero, 1 ml de acetonitrila e 3 ml de uma solução tampão de citrato 1 mol.l-1 pH 6,2. A mistura ficou em agitação por 24h. Depois desse período a solução foi adicionado em um tubo de diálise para centrifuga e foi centrifugado à 9000 rpm e 4ºC. O que passou para a parte inferior do tubo foi descartada. A parte superior foi ressolubilizada na solução tampão de citrato e dispersa em ultrassom. A purificação na centrífuga foi feita por mais duas vezes. Após serem novamente redispersas, as nanopartículas foram analisadas em DLS.

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