O labirinto em T baseia-se na tendˆencia natural dos roedores em alternar a escolha do bra¸co, que reflete a motiva¸c˜ao do animal em explorar seu ambiente e localizar a presen¸ca de recursos (DEACON; RAWLINS, 2006).
O labirinto tem formato de um T (cada bra¸co mede 50X16) ´e um aparato fechado feito de madeira e revestido internamente com papel autoadesivo cinza escuro. O protocolo utilizado foi adaptado do descrito por Shoji et al. (2012). Os animais tiveram restri¸c˜ao alimentar que consistia de 15g da ra¸c˜ao que eles, costumeiramente, receberam no Biot´erio da Universidade Presbiteriana Mackenzie.
Figu r 5a : Labirinto em T
Fonte:http://www.cebiolog.com.br/comportamento–labirinto–rastreamento.html
Os ratos foram submetidos inicialmente a um jejum noturno e depois 3 dias de raciona-mento de comida. A recompensa (Nescau cereal) foi disponibilizada dentro das caixas moradia para os animais se habituarem com as mesmas em um ambiente familiar. O
teste foi realizado ap´os habitua¸c˜ao do animal com o aparato. Para habitua¸c˜ao, a
recompensa foi distribu´ıda no aparato para permitir que o animal deambulasse livremente para recolher as recompensas. Assim, no primeiro dia e segundo dias, em pares, os ani-mais deambularam livremente por 10 min ou at´e recolherem as recompensas. A partir do terceiro dia, os animais deambularam sozinhos. Foram considerados habituados quando deambularam sem hesita¸c˜ao, sem urinar ou defecar no aparato. O aparato foi limpo com
´
alcool 5% a cada troca de animal/ensaio. O teste foi dividido em 3 fases: alternˆancia for¸cada, discrimina¸c˜ao esquerda-direita e flexibilidade comportamental.
O teste de alternˆancia for¸cada foi utilizado para avaliar a mem´oria de trabalho e consiste de uma escolha for¸cada seguida por uma de livre escolha, quando o animal pode escolher entre os dois bra¸cos. A resposta ser´a considerada correta se o animal entrar no bra¸co oposto ao da alternˆancia for¸cada para coletar a recompensa (Nescau cereal). Caso o animal entrasse no mesmo bra¸co da escolha for¸cada ele foi confinado por 10 segundos.
Foram realizados 10 ensaios por dia por 4 dias consecutivos.
A discrimina¸c˜ao esquerda-direita, usada para avaliar a mem´oria de referˆencia, consiste de livre escolha, na qual os animais poderiam escolher entre os dois bra¸cos, mas somente um dos bra¸cos (bra¸co alvo) continha a recompensa. A resposta foi considerada correta quando o animal entrou no bra¸co alvo e considerada incorreta quando o animal alternou entre os bra¸cos. Foram realizados 10 ensaios por dia durante 4 dias.
A flexibilidade comportamental foi utilizada para avaliar comportamento persever-ante, considerando que a mem´oria de referˆencia est´a sujeita a consolida¸c˜ao. O teste foi semelhante ao anterior, por´em o bra¸co alvo foi o oposto do anterior. Ser˜ao realizados 10 ensaios/dia durante 5 dias. O crit´erio estabelecido foi de 80% de respostas corretas.
4 AN ´ ALISE ESTAT´ ISTICA
Os resultados foram expressos com m´edia± erro padr˜ao. Os parˆametros mensurados na caixa de condicionamento operante e no labirinto em T foram analisados empregando-se a ANOVA de 2 vias (2-way ANOVA) com medidas repetidas, empregando-seguido pelo p´os-teste de Bonferroni. O teste exato de Fisher foi utilizado para avaliar aprendizagem associativa visuo-espacial. As diferen¸cas foram consideradas significantes para um valor de p¡0,05.
As an´alises foram efetuadas utilizando-se o Prism vers˜ao comercial 5.03 paraWindows.
5 RESULTADOS
5.1 Condicionamento Operante
O n´umero de sess˜oes para aprender a tarefa n˜ao diferiu entre os grupos (t=0,4564, gl=12, p=0,6562), Gr´afico 6A. Contudo, observamos que alguns animais em ambos os grupos n˜ao atingiram os crit´erios de aprendizagem, mas a propor¸c˜ao entre os animais que aprenderam e n˜ao aprenderam n˜ao foi diferente entre os grupos (teste de Fisher, p=0,6285), Gr´afico 6B, sugerindo que o grupo experimental n˜ao exibiu preju´ızo na apren-dizagem associativa visuo-espacial. A frequˆencia de refor¸co cont´ınuo (CRF) aumentou progressivamente no decorrer das sess˜oes (F (3,36) = 9,515, p < 0,0001) e n˜ao diferiu entre os grupos (F (1,36) = 0,01855, p = 0,8939), Gr´afico 6C, sugerindo que houve a consolida¸c˜ao da mem´oria. O tempo para extin¸c˜ao do comportamento n˜ao foi estatistica-mente diferente entre os grupos, (t= 0,5968, gl= 12, p= 0,5434), sugerindo que o grupo experimental n˜ao apresentou comportamento perseverante.
1 o c i f á r
G : Condicionament o operante.
Os dados s˜ao expressos como m´edia + erro padr˜ao dos grupos CTR (n=6) e
experimental (n=8). O n´umero de sess˜oes para aquisi¸c˜ao do comportamento operante (A) e propor¸c˜ao de animais que alcan¸caram os crit´erios de aprendizagem (B) ao final das 15 sess˜oes para diferiu entre os grupos. O n´umero de press˜oes a barra no refor¸co cont´ınuo (C) e o tempo para extin¸c˜ao do comportamento operante (D) n˜ao diferiu entre os grupos.
No treinamento discriminativo, o percentual de respostas corretas ao longo das sess˜oes n˜ao diferiu entre os grupos (F[1, 108] = 2,12, p = 0,17) e aumentou gradualmente no decor-rer das sess˜oes (F[9, 108] = 9,148, p<0,0001), Gr´afico 7A. O n´umero de press˜oes corretas e incorretas `a barra foi mensurada ao longo das sess˜oes. As respostas corretas n˜ao foram estatisticamente diferentes entre os grupos (F[9, 108]= 0,99, p= 0,33) e aumentaram gradualmente ao longo das sess˜oes (F[9, 108]= 8,71, p < 0,0001) gr´afico 2B. Concomi-tantemente, as respostas incorretas reduziram gradualmente (F[9, 108]= 5,75, p<0,0001), mas n˜ao foram diferentes entre os grupos (F[9, 108] = 2,32, p = 0,15), gr´afico 2B. Os dados sugerem que os animais experimentais n˜ao apresentaram preju´ızo na mem´oria de
trabalho e nem comportamento perseverante.
2 o c i f á r
G : Condicionament o operant e n o treinament o discriminativo.
Os dados s˜ao expressos como m´edia + erro padr˜ao dos grupos CTR (n=6) e experi mental (n=8). O percentual de respostas corretas (A) aumentou progressivamente para ambos os grupos ao longo das sess˜oes. O n´umero de respostas corretas aumentou e de incorretas diminui (B) igualmente para ambos os grupos.
5.2 Labirinto em T
Na alternˆancia for¸cada, o percentual de respostas corretas aumentou no decorrer das sess˜oes (F(3,69)=4,32, p=0,0075), n˜ao diferiu entre os grupos (F(1,69) = 0,4582, p = 0,505) e n˜ao houve intera¸c˜ao entre os fatores (F(3,69) = 0,2936, p = 0,8299), Gr´afico 7A.
O n´umero de iscas coletas aumentou gradualmente no decorrer das sess˜oes ((F(3,69) = 13,89, p < 0,0001), n˜ao diferiu entre os grupos (F(1,69) = 1,052, p = 0,32) e n˜ao houve intera¸c˜ao entre os fatores (F(3,69) = 1,06, p = 0,3748), 7B. Os dados sugerem que a mem´oria de trabalho e a motiva¸c˜ao est˜ao preservadas nos animais experimentais.
3 o c i f á r
G : Labirinto em T – Alternˆancia for¸cada.
Os dados s˜ao expressos como m´edia + erro padr˜ao dos grupos CTR (n=11) e
experimental (n=14). Percentual de respostas corretas (A) e o n´umero de recompensas coletadas (B) n˜ao diferiram entre os grupos, mas aumentaram gradualmente ao longo das sess˜oes para ambos os grupos.
Na discrimina¸c˜ao esquerda – direita, o percentual de respostas corretas n˜ao diferiu en-tre os grupos (F(1,69)=1,58, p= 0,221) e aumentou gradualmente para ambos os grupos no decorrer das sess˜oes (F(9,69)=10,33, p<0,0001), Gr´afico 9A. O n´umero de iscas coletadas aumentou gradualmente entre as sess˜oes (F(9,69)=11,09, p¡0,0001) e n˜ao diferiu entre os grupos ((F(1,69) = 1,71, p=0,2036), Gr´afico 9B. N˜ao foram observadas diferen¸cas na propor¸c˜ao de animais entre os grupos que alcan¸caram os crit´erios de desempenho m´ınimo ao final das 4 sess˜oes (teste de Fisher, P=1000, NS), Gr´afico 9C. Os dados sugerem que a mem´oria de referˆencia e a motiva¸c˜ao est˜ao preservadas nos animais submetidos ao SE neonatal.
4 o c i f á r
G : Discrimina¸c˜ao esquerda-direita no labirinto em T.
Os dados s˜ao expressos como m´edia + erro padr˜ao dos grupos CTR (n = 11) e
experimental (n = 14). Percentual de respostas corretas (A) e o n´umero de recompensas coletadas (B) n˜ao diferiram entre os grupos, mas aumentaram gradualmente ao longo das sess˜oes. A propor¸c˜ao de animais que atingiram os crit´erios de aprendizagem n˜ao diferiu entre os grupos (C).
Esta etapa do teste ´e semelhante a anterior, contudo o bra¸co alvo passou a ser o extremo oposto. Considerando que a mem´oria de referˆencia est´a sujeita `a consolida¸c˜ao, ou seja, estabiliza¸c˜ao progressiva ao longo do tempo, avaliamos nesta etapa a flexibilidade comportamental frente `a nova rotina. O percentual de respostas corretas n˜ao diferiu entre os grupos (F(1,69)=3,877, p= 0,0611) e aumentou gradualmente para ambos os grupos no decorrer das sess˜oes (F(9,69)=37,21, p<0,0001), 10A. O n´umero de alimentos coletados aumentou gradualmente entre as sess˜oes (F(9,69)=25,90, p<0,0001), mas n˜ao diferiu entre os grupos ((F(1,69) = 1,53, p = 0,2365), tampouco se observou intera¸c˜ao entre os fatores
(F(9,69) = 1,047, p = 0,3773), Gr´afico 10B. N˜ao foram observadas diferen¸cas na propor¸c˜ao de animais entre os grupos que alcan¸caram crit´erio de desempenho m´ınimo ao final das sess˜oes (teste de Fisher, P=1000, NS), 10C. Os dados sugerem que os animais do grupo experimental n˜ao exibiram preju´ızo na flexibilidade cognitiva.
: 5 o c i f á r
G Flexibilidade cognitiva no labirinto em T.
Os dados s˜ao expressos como m´edia + erro padr˜ao dos grupos CTR (n = 11) e
experimental (n = 14). Percentual de respostas corretas (A) e o n´umero de recompensas coletas (B) n˜ao diferiram entre os grupos, mas aumentaram gradualmente ao longo das sess˜oes. A propor¸c˜ao de animais que atingiram os crit´erios de aprendizagem n˜ao diferiu entre os grupos (C).
6 DISCUSS ˜ AO
O objetivo deste estudo foi investigar a fun¸c˜ao cognitiva em ratos adultos machos submetidos a um ´unico epis´odio de SE neonatal. Os dados demonstraram claramente que um ´unico epis´odio de SE neonatal n˜ao interferiu na aprendizagem associativa, na mem´oria de longo prazo, nas mem´orias de trabalho e de referˆencia e na flexibilidade comportamental. Esses resultados corroboram com os de Kleen et al. (2011), que n˜ao observaram d´eficit na aprendizagem associada avaliada pela tarefa de condicionamento operante em animais sujeitos `as convuls˜oes induzidas por flurotil, mas encontraram um leve comprometimento da flexibilidade comportamental. No trabalho de Kleen et al.
(2011), a flexibilidade comportamental foi avaliada usando duas medidas: o n´umero de vezes que os ratos passaram de uma alavanca para outra (esquerda e direita) e o tempo gasto na alavanca de preferˆencia. Para o primeiro crit´erio n˜ao houve diferen¸ca entre os grupos, mas para o segundo, o grupo experimental exibiu uma assimetria de preferˆencia de alavanca, sugerindo comportamento perseverante. A diferen¸ca entre os resultados relatados por Kleen et al. (2011) com os do presente trabalho pode ser atribu´ıda a maior complexidade da tarefa, propiciada pelas caracter´ısticas do equipamento utilizado. O aparato utilizado por Kleen et al. (2011) possu´ıa duas barras de press˜ao, e o nosso aparato possui apenas uma barra.
O impacto das convuls˜oes no in´ıcio desenvolvimento sobre as fun¸c˜oes cognitivas em longo prazo ainda ´e motivo de controv´ersia. Por exemplo, (SOGAWA et al., 2001; SAN-TOS et al., 2000a; LANDROT et al., 2001; KARNAM et al., 2009; NISHIMURA; GU;
SWANN, 2011; LUGO; SWANN; ANDERSON, 2014) relataram preju´ızo na aprendiza-gem visuo-espacial no labirinto aqu´atico de Morris e no labirinto radial, ambas tarefas dependentes do hipocampo. No entanto, tamb´em foi relatado ausˆencia de d´eficits na aprendizagem visuo-espacial avaliada no labirinto aqu´atico de Morris (CORNEJO et al., 2007; BARRY et al., 2016), no reconhecimento de objeto e no condicionamento ao medo (CORNEJO et al., 2007). Levantamos o questionamento que o protocolo utilizado para a indu¸c˜ao das convuls˜oes tem um papel crucial na circuitaria cerebral, seja por efeito di-reto ou por adapta¸c˜ao ao insulto inicial, com consequˆencias tardias sobre a cogni¸c˜ao. Por exemplo, na pesquisa de Sogawa et al. (2001) os animais foram expostos a 45 crises induzi-das pelo flurotil de P0–P9. Al´em do preju´ızo cognitivo na aprendizagem visuo-espacial,
observou-se brotamento das fibras musgosas na regi˜ao CA3 e supragranular do giro den-teado e aumento da express˜ao dos receptores glutamat´ergicos (GluR1 e NMDA). Santos et al. (2000b) induziram trˆes epis´odios consecutivos de SE neonatal com pilocarpina em P7, P8 e P9. Neste estudo, os autores relataram que os animais controles aprenderam o condicionamento operante na caixa de Skinner em at´e 3 dias, e os animais experimentais n˜ao aprenderam.
Utilizando o mesmo protocolo de Santos et al. (2000b), Silva et al. (2005) observaram altera¸c˜ao do desenvolvimento da microcircuitaria cortical, revelado pela redu¸c˜ao do pro-cesso de apoptose na regi˜ao neocortical que foi acompanhado pelo aumento da imunore-atividade para parvalbumina nos interneurˆonios gaba´ergicos. Os autores levantaram a hip´otese que os interneurˆonios gaba´ergicos programados para serem eliminados pelo pro-cesso de poda neuronal foram preservados e poderiam estabelecer conex˜oes anˆomalas in-tracorticiais e com regi˜oes subcorticais, provocando um desequil´ıbrio da neurotransmiss˜ao excitat´oria e inibit´oria.
Landrot et al. (2001) submeteram os animais de P0 a P12 `a 55 crises induzidas pelo flurotil. A semelhan¸ca do observado por Sogawa et al. (2001), a an´alise histol´ogica revelou brotamento das fibras musgosas na regi˜ao CA3 da forma¸c˜ao hipocampal e na camada granular do giro denteado, bem como preju´ızo do desempenho no labirinto aqu´atico de Morris. Assim, se um ´unico epis´odio de SE produz disfun¸c˜ao cognitiva, o preju´ızo deve ser leve e os protocolos utilizados neste estudo n˜ao foram suficientemente sens´ıveis para captar o d´eficit ou que o d´eficit foi superado ao longo do tempo. Em rela¸c˜ao `a primeira possibilidade, Kleen et al. (2011) encontraram d´eficit de flexibilidade comportamental somente quando foi analisada a assimetria de preferˆencia de alavanca no condicionamento operante, sugerindo que s˜ao necess´arios protocolos mais sens´ıveis para a avalia¸c˜ao de d´eficits leves.
Em rela¸c˜ao `a segunda possibilidade, Nishimura, Gu e Swann (2011) relataram em animais submetidos ao status Epilepticus induzido por ´acido Ca´ınico em PN35, compro-metimento no labirinto aqu´atico de Morris quando os animais foram avaliados em PN46-49 ou PN60-PN63, mas sem d´eficits quando testados em idades mais avan¸cadas. Em nosso estudo, os testes comportamentais come¸caram em PN60 e terminaram em PN210, e se alguma disfun¸c˜ao cognitiva esteve presente, ela foi superada antes dos animais serem
testados.
No que se refere `as convuls˜oes neonatais, o protocolo mais utilizado emprega o flurotil e cobre todo o per´ıodo neonatal ou al´em dele, o que poderia contribuir para a disfun¸c˜ao cognitiva. Nesse sentido, levantou-se a suposi¸c˜ao de que um ´unico epis´odio de SE induzido por pilocarpina n˜ao afeta a fun¸c˜ao cognitiva, ou que o efeito ´e leve ou dif´ıcil de detectar, exceto sob uma tarefa cognitiva de alta demanda. Para testar essa hip´otese, estudos posteriores ser˜ao conduzidos em uma tarefa de maior complexidade cognitiva, tarefa de tempo de rea¸c˜ao de uma s´erie de 5 escolhas (5CSRT).
Apesar de n˜ao ter sido observado preju´ızo cognitivo mensur´avel, estudos anteriores do grupo, que utilizaram o mesmo tipo de animal, com a mesma idade, que submeteram seus animais com a mesma dose de pilocarpina mostraram que um ´unico epis´odio de SE produz preju´ızo na sociabilidade e comportamento do tipo ansioso (CASTELHANO et al., 2010; CASTELHANO et al., 2013; CASTELHANO et al., 2015; LEITE; CASTELHANO;
CYSNEIROS, 2016), sugerindo que a circuitaria envolvida com a sociabilidade ´e mais vulner´avel `as crises neonatais que aquela envolvida com a fun¸c˜ao cognitiva.
7 CONCLUS ˜ AO
Este estudo demonstrou que um ´unico epis´odio SE neonatal induzido pela pilocarpina n˜ao impactou a aprendizagem associativa, a mem´oria de longo prazo, as mem´orias de trabalho e de referˆencia e a flexibilidade comportamental.
REFERˆ ENCIAS BIBLIOGR ´ AFICAS
AMIET, C. et al. Does epilepsy in multiplex autism pedigrees define a different subgroup in terms of clinical characteristics and genetic risk? Molecular autism, BioMed Central, v. 4, n. 1, p. 47, 2013.
BARRY, J. M. et al. Spatial cognition following early-life seizures in rats: Performance deficits are dependent on task demands. Epilepsy & Behavior, Elsevier, v. 60, p. 1–6, 2016.
BEN-ARI, Y.; HOLMES, G. L. Effects of seizures on developmental processes in the immature brain.The Lancet Neurology, Elsevier, v. 5, n. 12, p. 1055–1063, 2006.
BERNARD, P. B.; BENKE, T. A. Early life seizures: evidence for chronic deficits linked to autism and intellectual disability across species and models. Experimental neurology, Elsevier, v. 263, p. 72–78, 2015.
BROOKS-KAYAL, A. Epilepsy and autism spectrum disorders: are there common developmental mechanisms? Brain and Development, Elsevier, v. 32, n. 9, p. 731–738, 2010.
CASTELHANO, A. S. S. et al. Altered anxiety-related and abnormal social behaviors in rats exposed to early life seizures. Frontiers in behavioral neuroscience, Frontiers Media SA, v. 7, 2013.
CASTELHANO, A. S. S. et al. Early life seizures in female rats lead to anxiety-related behavior and abnormal social behavior characterized by reduced motivation to novelty and deficit in social discrimination. Journal of Neural Transmission, Springer, v. 122, n. 3, p. 349–355, 2015.
CASTELHANO, A. S. S. et al. Social play impairment following status epilepticus during early development. Journal of neural transmission, Springer, v. 117, n. 10, p.
1155–1160, 2010.
CAVALHEIRO, E. et al. Spontaneous recurrent seizures in rats: amino acid and monoamine determination in the hippocampus. Epilepsia, Wiley Online Library, v. 35, n. 1, p. 1–11, 1994.
CHAPMAN, K. E.; RAOL, Y. H.; BROOKS-KAYAL, A. Neonatal seizures: controversies and challenges in translating new therapies from the lab to the isolette.European Journal of Neuroscience, Wiley Online Library, v. 35, n. 12, p. 1857–1865, 2012.
CORNEJO, B. J. et al. A single episode of neonatal seizures permanently alters glutamatergic synapses. Annals of neurology, Wiley Online Library, v. 61, n. 5, p.
411–426, 2007.
CRAWLEY, J. N. Mouse behavioral assays relevant to the symptoms of autism. Brain pathology, Wiley Online Library, v. 17, n. 4, p. 448–459, 2007.
CYSNEIROS, R. Autismo: uma abordagem experimental. in: Transtornos do espectro do autismo.S˜ao Paulo: Memnon, p. 144–150, 2011.
DEACON, R. M.; RAWLINS, J. N. P. T-maze alternation in the rodent. Nature protocols, Nature Publishing Group, v. 1, n. 1, p. 7–12, 2006.
DEPOSITARIO-CABACAR, D. F. T.; ZELLEKE, T.-G. Treatment of epilepsy in children with developmental disabilities. Developmental disabilities research reviews, Wiley Online Library, v. 16, n. 3, p. 239–247, 2010.
DIAMOND, A. Executive functions. Annual review of psychology, Annual Reviews, v. 64, p. 135–168, 2013.
DUNCAN, J. Disorganisation of behaviour after frontal lobe damage. Cognitive Neuropsychology, Taylor & Francis, v. 3, n. 3, p. 271–290, 1986.
FRIEDMAN, L.; HU, S. Early-life seizures in predisposing neuronal preconditioning: a critical review.Life sciences, Elsevier, v. 94, n. 1, p. 92–98, 2014.
GALVAN, A.; DEVERGNAS, A.; WICHMANN, T. Alterations in neuronal activity in basal ganglia-thalamocortical circuits in the parkinsonian state. Frontiers in neuroanatomy, Frontiers Media SA, v. 9, p. 1–22, 2015.
GARFINKLE, J.; SHEVELL, M. I. Predictors of outcome in term infants with
neonatal seizures subsequent to intrapartum asphyxia.Journal of child neurology, SAGE Publications Sage CA: Los Angeles, CA, v. 26, n. 4, p. 453–459, 2011.
HAMDAN, A. C.; PEREIRA, A. P. d. A. Avalia¸c˜ao neuropsicol´ogica das fun¸c˜oes executivas: considera¸c˜oes metodol´ogicas. Psicologia: Reflex˜ao e cr´ıtica, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, v. 22, n. 3, p. 386–393, 2009.
HERNAN, A. et al. Altered short-term plasticity in the prefrontal cortex after early life seizures.Neurobiology of disease, Elsevier, v. 50, p. 120–126, 2013.
HOLMES, G. L. Effects of seizures on brain development: lessons from the laboratory.
Pediatric neurology, Elsevier, v. 33, n. 1, p. 1–11, 2005.
HOLMES, G. L. The long-term effects of neonatal seizures. Clinics in perinatology, Elsevier, v. 36, n. 4, p. 901–914, 2009.
HOLMES, G. L. et al. Consequences of neonatal seizures in the rat: morphological and behavioral effects. Annals of neurology, Wiley Online Library, v. 44, n. 6, p. 845–857, 1998.
HOLMES, G. L. et al. Alterations in sociability and functional brain connectivity caused by early-life seizures are prevented by bumetanide. Neurobiology of disease, Elsevier, v. 77, p. 204–219, 2015.
HUANG, L.-T. et al. Long-term effects of neonatal seizures: a behavioral,
electrophysiological, and histological study. Developmental Brain Research, Elsevier, v. 118, n. 1, p. 99–107, 1999.
HUANG, Y.-H. et al. Risk factors and outcome of seizures after chronic subdural hematoma.Neurocritical care, Springer, v. 14, n. 2, p. 253–259, 2011.
ISAEVA, E. et al. Recurrent neonatal seizures result in long-term increases in neuronal network excitability in the rat neocortex. European Journal of Neuroscience, Wiley Online Library, v. 31, n. 8, p. 1446–1455, 2010.
KAADEN, S.; HELMSTAEDTER, C. Age at onset of epilepsy as a determinant of intellectual impairment in temporal lobe epilepsy. Epilepsy & Behavior, Elsevier, v. 15, n. 2, p. 213–217, 2009.
KARNAM, H. B. et al. Effect of age on cognitive sequelae following early life seizures in rats. Epilepsy research, Elsevier, v. 85, n. 2, p. 221–230, 2009.
KENT, G. P. et al. The effects of duration of intractable epilepsy on memory function.
Epilepsy & Behavior, Elsevier, v. 9, n. 3, p. 469–477, 2006.
KLEEN, J. K. et al. Enhanced oscillatory activity in the hippocampal–prefrontal network is related to short-term memory function after early-life seizures. Journal of Neuroscience, Soc Neuroscience, v. 31, n. 43, p. 15397–15406, 2011.
LAI, Y.-H. et al. Prognostic factors of developmental outcome in neonatal seizures in term infants.Pediatrics & Neonatology, Elsevier, v. 54, n. 3, p. 166–172, 2013.
LANDROT, I. de R. et al. Recurrent neonatal seizures: relationship of pathology to the electroencephalogram and cognition. Developmental Brain Research, Elsevier, v. 129, n. 1, p. 27–38, 2001.
LEITE, I. S.; CASTELHANO, A. S.; CYSNEIROS, R. M. Effect of diazepam on sociability of rats submitted to neonatal seizures.Data in brief, Elsevier, v. 7, p. 686–691, 2016.
LONG, N. S. M. H. A.; DELETERIOUS, T. As crises neonatais produzem efeitos neurol´ogicos delet´erios de longo prazo: Evidˆencias cl´ınicas e experimentais. Cadernos de P´os-Gradua¸c˜ao em Dist´urbios do Desenvolvimento, v. 14, n. 2, p. 85–94, 2014.
LUGO, J. N.; SWANN, J. W.; ANDERSON, A. E. Early-life seizures result in deficits in social behavior and learning.Experimental neurology, Elsevier, v. 256, p. 74–80, 2014.
LYNCH, M. et al. Long-term consequences of early postnatal seizures on hippocampal learning and plasticity.European Journal of Neuroscience, Wiley Online Library, v. 12, n. 7, p. 2252–2264, 2000.
MALLOY-DINIZ, L. F. et al. Neuropsicologia das fun¸c˜oes executivas. Neuropsicologia:
teoria e pr´atica. Porto Alegre: Artmed, v. 187, 2008.
MOREIRA, M. B.; MEDEIROS, C. A. de. Princ´ıpios b´asicos de an´alise do comportamento. [S.l.]: Artmed Editora, 2009.
MOSLEY, M. Neonatal seizures. Pediatrics in review, v. 31, n. 3, p. 127–128, 2010.
MOUR ˜AO-J ´UNIOR, C. A.; MELO, L. B. R. Integra¸c˜ao de trˆes conceitos: fun¸c˜ao executiva, mem´oria de trabalho e aprendizado. Psicologia: Teoria e Pesquisa, v. 27, n. 3, p. 309–314, 2011.
NADEL, L.; HARDT, O. Update on memory systems and processes.
NADEL, L.; HARDT, O. Update on memory systems and processes.