4.4.1 Cromatogramas típicos
Existem seis amostras fortificadas para cada nível (LOQ e 100xLOQ) de forma a comprovar a precisão e exatidão do método. No entanto, para demonstrar o tempo de retenção dos compostos Y e Z e o cromatograma típico será demonstrado apenas uma amostra representativa de cada nível. São elas: LOQ1 do composto Y e do composto Z, 100xLOQ1 do composto Y e do composto Z. Os cromatograma típicos são apresentados nas figuras 25 a 28.
Figura 25 - Cromatograma típico de amostra fortificada no nível LOQ para o composto Y (LOQ1)
Figura 26 - Cromatograma típico de amostra fortificada no nível LOQ para o composto Z (LOQ1)
Fonte: Elaborado pela autora utilizando o Software Analyst 1.6.3.
Figura 27 - Cromatograma de amostra fortificada no nível 100xLOQ para o composto Y (100xLOQ1 diluída 100 vezes)
Figura 28 - Cromatograma de amostra fortificada no nível 100xLOQ para o composto Z (100xLOQ1 diluída 100 vezes)
Fonte: Elaborado pela autora utilizando o Software Analyst 1.6.3.
4.4.2 Cálculo de precisão
A precisão do método foi comprovada pelo coeficiente de variação menor que 20% para ambos os compostos. Um exemplo de cálculo de coeficiente de variação global para o composto Y pode ser visto na Figura 29 e um exemplo de cálculo de coeficiente de variação para o composto Z pode ser visto na Figura 30.
Figura 29 - Exemplo de cálculo de coeficiente de variação global para o composto Y
Figura 30 - Exemplo de cálculo de coeficiente de variação global para o composto Z
Fonte: Elaborado pela autora.
4.4.3 Cálculo de exatidão/recuperação
Como já explicado anteriormente, para um método ser exato, o valor analisado deve ser próximo do real. Assim, as amostras devem apresentar resultado dentro de um intervalo.
Nessa validação, todas as amostras fortificadas (seis repetições em cada nível) ficaram dentro da faixa esperada de recuperação (70-120%).
Um exemplo de cálculo usado para os resultados obtidos pode ser visto nas Figuras 31 e 32.
Figura 31 - Exemplo de cálculo de recuperação para a amostra fortificada LOQ1 do composto Y
Fonte: Elaborado pela autora.
Figura 32 - Exemplo de cálculo de recuperação para a amostra fortificada LOQ1 do composto Z
4.4.4 Recuperações obtidas, DP e CV
Todos os resultados das amostras LOQ (0,01 mg/kg) e 100xLOQ (1,0 mg/kg) dos compostos Y e Z podem ser verificados nas Figuras 33 e 34 respectivamente. As recuperações ficaram dentro da faixa esperada (70-120%). Além disso, o coeficiente de variação das amostras também ficou dentro do permitido (menor que 20%).
Figura 33 - Resultados das amostras LOQ e 100xLOQ para o composto Y
Fonte: Elaborado pela autora. Concentração adicionada (mg/kg) Concentração encontrada (mg/kg) Recuperação (%) Média das recuperações (%)
Desvio padrão Coeficiente de variação (%) 0,00795 79,5 0,00830 83,0 0,00790 79,0 0,00730 73,0 0,00805 80,5 0,00700 70,0 0,825 82,5 0,795 79,5 0,795 79,5 0,740 74,0 0,755 75,5 0,740 74,0 5,27 Coeficiente de variação global (%)
Média global das recuperações (%) 77,5 4,08 Desvio padrão global
0,01 77,5
1,0
4,94 6,37
Figura 34 - Resultados das amostras LOQ e 100xLOQ para o composto Z
Fonte: Elaborado pela autora. Concentração adicionada (mg/kg) Concentração encontrada (mg/kg) Recuperação (%) Média das recuperações (%)
Desvio padrão Coeficiente de variação (%)
0,0111 111 0,0101 101 0,00895 89,5 0,00900 90,0 0,00875 87,5 0,00785 78,5 0,800 80,0 0,850 85,0 0,735 73,5 0,810 81,0 0,765 76,5 0,735 73,5
Média global das recuperações (%) 85,6
Desvio padrão global 11,3
Coeficiente de variação global (%) 13,2
0,01 92,9 11,4 12,3
5 CONCLUSÃO
O método escolhido para a análise dos compostos Y e Z mostrou-se eficiente e robusto, uma vez que as seis amostras preparadas em cada nível (LOQ e 100xLOQ) apresentou variação menor que 20%, valor máximo permitido pela norma RDC nº4 /2012 (ANVISA). Além disso, o valor encontrado das amostras fortificadas também foi próximo do teórico estabelecido (entre 70-120% de recuperação), o que demonstrou a reprodutibilidade do método.
Assim, foi possível provar que os dados encontrados são confiáveis e robustos, uma vez que pequenas variações de condições no equipamento utilizado não prejudicaram os resultados obtidos.
Dessa forma, os resultados permitem afirmar que o método pode ser usado para posterior análise de resíduos dos compostos estudados na pesquisa, ou seja, para análise de amostras cujo valor de resíduo de agrotóxico se deseja descobrir.
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