Sociedade Brasileira de Química ( SBQ)
31a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química
Aplicação da Espectrometria de Massas (ESI – MS/MS) na Derreplicação de Compostos com Atividade Fitotóxica
Ana Flávia Canovas Martinez1* (PG), Bruna Colombo1 (IC), Flávia Mandolesi Pereira de Melo3 (PG), Luis Henrique Souza Guimarães2 (PQ), Itamar Soares de Melo3 (PQ) e Luiz Alberto Beraldo de
Moraes1 (PQ).
anaflavia@pg.ffclrp.usp.br
1 Departamento de Química-FFCLRP; 2Departamento de Biologia-FFCLRP; 3Laboratório de Microbiologia Ambiental Embrapa-Jaguariúna.
Palavras Chave: Bioherbicidas, Espectrometria de Massas, Fitotoxidade, Derreplicação.
Introdução
O uso de herbicidas sintéticos, embora seja considerado um método de controle eficaz para um número considerável de espécies de plantas daninhas, tem sido questionado quanto ao seu impacto ambiental1. Metabólitos secundários produzidos por microrganismos apresentam um amplo espectro de atividade biológica, incluindo a fitotoxicidade.Vários destes compostos apresentam potencial para serem usados diretamente como herbicidas (micoherbicidas ou bioherbicidas) ou como modelo para o desenvolvimento de novos herbicidas sintéticos. Herbicidas naturais provenientes de microrganismos se apresentam como uma poderosa fonte alternativa a utilização de herbicidas sintéticos.
Esses bioherbicidas apresentam uma grande vantagem sobre os herbicidas sintéticos por serem biodegradáveis e por servirem como modelo para o desenvolvimento de novos herbicidas sintéticos menos agressivos ao meio ambiente.
O objetivo desse trabalho consiste em aplicar a versatilidade da espectrometria de massas (ESI- MS/MS), para uma análise rápida e eficiente das fitotoxinas provenientes de processos de fermentação de actinomicetos isolados da rizosfera do milho.
Resultados e Discussão
Foram isolados 360 microrganismos da Rizosfera do Milho (Zea mays L.), dos quais 54 deles foram submetidos à bioensaios de fitotoxicidade com Lemna minnor e análises por espectrometria de massas (ESI-MS/MS). Os microrganismos foram isolados pelo grupo coordenado pelo prof. Dr. Itamar Soares de Melo, da Embrapa. Após feito o isolamento dos microrganismos, os mesmos foram fermentados em meio BD (batata-dextrose), por 10 dias com agitação de 130 rpm e temperatura de 27°C. Dos extrados testados, 19 deles não apresentaram atividade herbicida, 29 tiveram pouca atividade, 5 deles tiveram bons resultados e apenas 1 mostrou uma excepcional atividade herbicida (Figura 1 e 2).
A derreplicação do extrato ativo possibilitou a identificação da presença da leucinostatina.
400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 950 1000 1050 1100 1150 1200 1250 m/z
0 100
%
ana-36_scan 58 (1.163) Cm (31:58) TOF MS ES+
232 1104.7671
391.2961
595.3746
415.2180 573.2930
455.1299
523.3299 655.3884 699.3950
743.4244771.4380 1090.7013
854.5724
1204.8159
1105.7809
1118.7662
1134.7491 1135.7764 1190.8126
1136.7648 1205.7932
1218.8600
1219.8430
1220.8260
1221.8510 1235.8700
Figura 1. Espectro de Massas (ESI) do extrato ativo.
Figura 2. Estrutura da Leucinostatina.
Conclusões
A espectrometria de massas mostrou-se uma técnica bastante eficiente para a derreplicação do extrato.
Isso se deve aos bancos de dados disponíveis a ao grande número de compostos já estudados, além de se ser necessário uma pequena quantidade de amostra para sua realização, sendo este um fator de fundamental importância para a sua escolha.
Foi detectada a presença das Leucinostatinas: T, F, D, N, H. B2, L, R, B, S, U e K, que são lipopeptídeos de cadeia linear composto por 11 aminoácidos, conhecidos por suas propriedades antibióticas2 e citotóxicas.
Agradecimentos
CAPES e FAPESP.
__________________
1 Beckie, H.J., Morrison, I.N., Weed Technol. 1993, 7, 6.
2 Kimiko I. ,Tadashi A. , Antimicrobial Agents and Chemothrapy 1976, 9, 893.
1100 1150 1200 1250m/z
0 100
%
1104.7671 232
1090.7013
1204.8159 1105.7809
1118.7662
1134.7491 1190.8126 1149.8112
1205.7932
1218.8600
1220.8260
1221.8510
