Sociedade Brasileira de Química (SBQ)
34a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química
Byrsonima verbascifolia Rich ex Juss. e Byrsonima fagifolia Nied:
Análise química e atividade antiradicalar do extrato hidroalcoólico das folhas
José de Sousa Lima Neto* (PG) 1, Cláudia Q. da Rocha (PG)1, Wagner Vilegas (PQ)1
1 - UNESP – Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Campus Ararquara, Instituto de Química, Rua Francisco Degni, s/n, Bairro Quitandinha, CEP 14800-900, Araraquara - SP. *limaneto5@gmail.com
Palavras Chave: Byrsonima, Antiradicalar, DPPH
Introdução
Plantas do gênero Byrsonima são empregadas nas indústrias alimentícia, tinturaria e na medicina popular possuem emprego no tratamento de úlceras gástricas, inflamações, diurético, febrífuga, lanxante e doenças infecciosas. Estudos químicos dessas espécies revelaram a presença de catequinas e derivados, ácido gálico e derivados, flavonóis e flavonas1,2. O trabalho em questão representa o inicio dos estudos químicos sobre os extratos hidroalcoólicos padronizados das folhas de B.
verbascifolia e B. fagifolia bem como da atividade antiradicalar destes extratos.
Resultados e Discussão
Figura 1. Esquema dos procedimentos experimentais aplicados.
Figura 2 – (A) Gráfico em percentuais do consumo de DPPH;
TLC dos extratos hidroalcoólicos de B. verbascifolia (1) e B.
fagifolia (2), Eluente Acetona / Florestal; Reveladores: FeCl3 (B);
NP/PEG (C) DPPH 40g/mL (D).
A atividade antiradicalar foi evidenciada no teste com DPPH (40g/mL), pois ambos os extratos apresentaram compostos com capacidade de seqüestrar radicais livres tanto qualitativamente (Fig.2d) quanto quantitativamente, com EC50
aproximadamente de 64 g/mL (Fig 2a.). A análise por TLC confirmou a presença de ácidos fenólicos (Fig.2b), flavonóides (Fig.2c)3 e no HPLC-DAD dos extratos de B. verbascifolia e B. fagifolia (Fig.3) evidenciou presença de ácidos fenólicos (banda 220 nm) e flavonóides (bandas 280 e 340 nm).
Figura 3. Cromatograma HPLC-PAD dos constituintes presentes nos extratos hidroalcoólicos de B. verbascifolia (A: = 257nm e B: = 366 nm) e B. fagifolia (C: = 260nm e D: = 375nm)
Essas substâncias além de apresentarem a capacidade de sequestrar a radicais livres, também são responsáveis por reduzirem e/ou inibirem o desenvolvimento de doenças cardiovasculares, inflamatórias, cânceres e infecções3.
Conclusões
Os extratos de Byrsonima verbascifolia e Byrsonima fagifolia apresentaram variedades de compostos químicos, com presença predominante de compostos fenólicos que corroboram com sua atividade antiradicalar além de favorecerem a descoberta de novos compostos com diversificadas ações farmacológicas.
Agradecimentos
CNPq, CAPES, FCFAR e IQ-UNESP/Araraquara ___________________
1- Sannomiya, M.; Fonseca, V. B.; Silva, M. A.; Rocha, L. R. M;
Santos, L. C. dos; Hiruma-Lima, C. A.; Brito, A. R. M. S.; Vilegas, W et, at.. J. Ethnopharmacol., v. 97, n. 1, p. 1-6, 2005.
2 - Rinaldo, D.; Batista Jr., J. M.; Rodrigues, J.; Benfatti, A. C.;
Rodrigues, C. M.; Dos Santos, L. C.; Furlan, M.; Vilegas, W. Chirality, v. 22, 8, 726 – 733, 2010.
3- Wagner, H.; Bladt, S.; Zgainski, E.M. Plant Drug Analysis: A Thin Layer Chromatography Atlas, Springer, 2003, Berlin.
4 - Quideau, S.; Deffieux, D.; Douat-Casassus, C.; Pouységu, L.
Angewandte Chemie International Edition , 50, 586 – 621, 2011.
0 50 100 150 200
0 20 40 60 80 100
% reduçao do DPPH
Concentraçao (m/mL)
FPBV B. verbascifolia B. fagifolia Quertina Ac galico
Testes Antiradicalar (DPPH) 6 g de extrato
1. Ressupenso em MeOH: H2O 9:1 2. Partição em hexano 100 mL (5x)
Fase hexância Fase Polar
(FPBV)
Sephadex LH 20 38 frações agrupadas Clean up
EBV
2. Aplicação em cartuchos SPE e eluição em 15 mL de MeOH 1. Dissolução em 0.5 mLde MeOH
4. Ressuspensão MeOH/H2O 9:1 5. Filtração Membrana PTFE 0.22 m Análise por HPLC-PAD
3. Evaporação do solvente Sep Pak RP 18
LC-MS/MS HPLC-PAD
Folhas Byrsonima verbascifolia e Byrsonima. fagifolia
1. Percolação EtOH/H2O (7:3) 2. Filtração 3. Evaporação do solvente 4. Liofilização Extrato hidroalcoólico
(EBV e EBF)
Identificação
HPLC (Jasco®)
Coluna Phenomenex® Synergi Hydro RP18 (250 x 4.6 mm i.d; 4 mm ) Fluxo 1 mL/min
Solvente A = H2O , B = MeOH ambos com TFA 0.05%
Sistema de eluição gradiente linear 0 - 100% de B em 60 min
Qualitativos
TLC Eluente (Acetona / Florestal - 9:1) Revelador: DPPH em MeOH (40mg/mL) Quantitativos
Amostras e Padrões: Soluções de 6.25 - 200 mg/mL (TRIPLICATAS) Padrões: Ác. gálico e Quercetina (Sigma- Aldrich) Amostras: EBV, EBF e FPBV Espectrofotometro U.V BioTeK - c/ leitora de microplaca 96-well = 570 nm Agente radicalar: 2,2-difenil-1-picril-hidrazila -
DPPH (40mg/mL) Cada poço - 20 mL (Amostra +Padrões) +
DPPH 200 mL Branco - DPPH 200 L + 20 L MeOH
