XXVIII Congresso de Iniciação Científica
Atividade transcricional de DNAs satélites no gafanhoto Abracris flavolineata com e sem a presença de cromossomo B
Lays Postali, Diogo Milani, Diogo Cavalcanti Cabral de Mello
UNESP – Univ Estadual Paulista, Campus de Rio Claro/SP, Instituto de Biociências, Departamento de Biologia, curso Ciências Biológicas (noturno) layspostali@hotmail.com, Programa de bolsa PIBIC/CNPq Palavras chave: gafanhoto, DNA satélite, cromossomo B.
Introdução
Durante muitos anos investigadores tentam compreender a complexidade dos DNAs repetitivos dos genomas, que foi considerado anteriormente por não revelar qualquer tipo de funcionalidade (1). Um tipo de DNA repetitivo que está sendo muito investigado são as sequencias de DNAs satélites que constituem a maior parte heterocromática dos genomas. Um elemento genômico característico por apresentar DNAs satélites são os cromossomos B, um componente adicional parasita capaz de segregar independente do genoma hospedeiro (2).
Existem pouquíssimos trabalhos com insetos relacionado à função de DNAs satélites em relação aos cromossomos B. Sendo assim, analisamos a possível transcrição de DNAs satélites em indivíduos da espécie Sul-americana Abracris flavolineata, que apresenta cromossomos B.
Objetivos
Verificar a possível atividade transcricional de DNAs satélites em Abracris flavolineata e sua relação na presença/ausência de cromossomo B.
Material e Métodos
Foram extraídos RNAs do tecido das patas e testículos de dois indivíduos sem (0B) e de um com a presença de cromossomo B (1B) pelo método de Trizol. Através da reação de transcriptase reversa obtiveram-se os DNAs complementares (cDNA) que foram usados como moldes para a amplificação por PCR dos DNAs satélites previamente isolados. Os fragmentos foram confirmados por eletroforese em agarose 1%.
Resultados e Discussão
Foi observado que todas as sequências de satélites testadas mostraram sinais de transcrição para o indivíduo 2-0B em ambos os tecidos, no entanto para os indivíduos 1-0B e 1-1B, não foi observado sinais de transcrição para o satélite 204 em ambos os tecidos e para o tecido da pata com o satélite 220 (Figura 1). Os resultados obtidos mostram que os DNAs satélites analisados apresentam uma variação transcricional dentre os indivíduos, pois 3 repetições aparecem transcritas independente dos tecidos e da presença do cromossomo B, e as outras 2
aparecem somente para um indivíduo sem a presença do cromossomo B.
Figura 1. Eletroforese da PCR dos distintos DNAs satélites usando como molde os cDNAs obtidos das patas e testículos de indivíduos 0B (2) e 1B (1).
Conclusões
Concluiu-se que existe uma variação intra-individual independente de tecido e da presença do cromossomo B. O próximo passo na continuação do projeto é realizar uma PCR em tempo para verificar o nível de transcrição dos satélites para entender melhor a dinâmica funcional dessas sequências no organismo de Abracris flavolineata com e sem o cromossomo B.
Agradecimentos
O apoio financeiro foi fornecido pela FAPESP, CNPq e a bolsa de estudos concedida pelo programa PIBIC.
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1 Orgel, L. E.; Crick, F.H.C; Nature. 1980, 284. 604-607.
2 Camacho, J. P. M; .In: Gregory TR, ed. The Evolution of the Genome.
2005, 223-286.
