PARÂMETROS ENDOCRINOS EM RATOS TRATADOS CRONICAMENTE COM EXTRATO CONCENTRADO de Stevia
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r e b a u d i a n a (BEKT. ) BERTONI . ( *)Ri c a r d o M. Ol i v e i r a Fi l h o ( **) Ol í v i a A. Ue h a r a ( **)
Lu i z B. S. Va l l e ( **)
Co n c e i ç ã o A. S . A. Mi n e t t i ( **) Ev a M. A. Bo e c k h ( **)
RESUMO
Oi z^ zitoi dz pKi.ncLpizyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA.0i3 ativoò dz S .
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tiebaudüvna. òobfiz pafum zttoi zndõcnÁ.noò dz natoi f^ onam z&tudadoò apõò adm inÁÁtAaçao cKÔnica (60 dixu) dz zxÃAato aquoio bKuto(dzcocto) conc.zyvVw.do nai Colheu, dziia planta, com eçando e m idadz pKZ-pubzKZ ( 25 a 30 dÀxu, dz
idadz). Tonam ú&ítaò
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OÒ òzaihinteA dztzKm inacÕQA: gliezm -ia,nZvziò AZAÍCOÍ, dz
T^ ,z
Tj R, união dz [}H]R1&81 ã fiação citoiSlica dz pi5t>tata, tzon. dz zinco zm piÕitata, t&&_ tlculo, glândula, òativat òubm andibulan. z pâncAzaò, z c o n t e ú d o ru.dfu.co zm tzitlculo z
piw&tata. E4- Cu. dou- . se t a mb é m a cutva dz ganho dz pzòo coKponal z oò pz&oò teJurUnalb dz
tz&tZculo, plÕòtata, vziZcula òzm inal, glândula iubm andibulaA. z adtznat. Oò nzòu&tadoi
dzixafiam patzntz quz o g/ uipo zxpzfUm zntãZ não dÀ^ cúu do contAolz iigni^ -Lcativam zntz cm
ne nhum do6 panâm etnob anati&adoò, zxczto quanto ao pzio dz vzileula izm inal,quz dÁjniniúu e m 60é, tanto zm tzhm oi abiolutoà com o zm Kzüacâo ao pzÁO conpoial. Conclui-òZ quz 04 pafiâm ztAOA zndocAÁnot) zitudadoà no Kato não t >ão ^ undam zntalm zntz altzxadob poh. do-&e&
^ anm acológicai dz piinclpioò ativoò dz S . Kzbaudinna..
INTRODUÇÃO
Ent r e o s p r i n c í p i o s a t i v o s d a s f o l h a s de Stevia rebaudiana, p l a n t a n a t i v a d a Amé
-r i ca d o Su l , e n c o n t -r a - s e o e s t e v i o s f d e o , c u j o p o d e -r a d o ç a n t e - c e -r c a d e
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30 0 v e z e s s u p e -r i o-r a o da s a c a -r o s e - t e m d e s p e -r t a d o i nt e -r e s s e c ome -r c i a l c o mo s u b s t i t u t o d o c i c l a ma t o .Nas r e gi õe s o n d e a p l a n t a é n a t i v a , o b s e r v a ç õ e s e mp í r i c a s a t r i b u e m a o c h ã p r e p a r a d o c o m s uas f ol ha s p r o p r i e d a d e s t ô n i c a s e d i g e s t i v a s .
A mo l é c u l a d o e s t e v i o s f d e o a p r e s e n t a n ú c l e o d i t e r p ê n i c o t e t r a e f e l i c o ( e s t e vi ol ) e
(*) Fi n a n c i a d o p e l a FI NEP.
( **) USP/ I n s t i t u t o de Ci ê n c i a s Bi o mé d i c a s - De p a r t a me n t o de Fa r ma c o l o g i a . ,\
3
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mo l é c u l a s d e g l i c o s e ; s u a s e me l h a n ç a e s t r u t u r a l c o m h o r mô n i o s e s t e r o . d a i s c h a ma a a t e n ç i o pa r a u ma pos s í ve l a ç i o a ní ve l d e r e c e p t o r e s e m ó r g i o s - a Wo d e h o r mô n i o s s e xua i s .De f a t o , e m 1968 Pl a n a s e Ku c r e l a t a r a m me d i a de 57 a 7 9 % d e r e d u ç ã o d a f e r t i l i d a d e e m r a t os t r a t a dos c o m d e c o c t o a 5% d a s f o l h a s d e S . r e b a u d i a n a , p o r é m o b s e r v a ç õ e s p o s t e r i o
r e s n ã o c o n f i r ma r a m e s t e a c h a d o ( Sa ka guc hi & Ka n , \ 9 ÔÍ ) .
No s s o l a b o r a t ó r i o d e mo n s t r o u í n v í t r o q u e o e s t e v i o s í d e o p u r i f i c a d o t e m a c a p a c i da de d e d e s l o c a r a 5c t di hi dr ot e s t os t e r ona ( DH" 0 e s p e c i f i c a me n t e u n i d a a s í t i o s r e c e p t o
-r e s a n d -r o g ê n i c o s e m p -r ó s t a t a ( Ue ha -r a e t a l. , 1 9 8 2 ) . Es t e r e s u l t a d o f oi c o n f i r ma d o p o s t e r i o r me n t e u s a n d o o c o mp o s t o s i n t é t i c o n i o me t a b o l i z á v e l me t i I t r i e n o l o n a ( RI 8 8 1 ) , ma r c a
dor e s p e c í f i c o pa r a r e c e p t o r e s a n d r o g ê n i c o s ( Ue ha r a e t a l. , 1 9 8 3 ) . To d a v i a , a a l t a c o n c e n t r a ç ã o d e e s t e v i o s í d e o u s a d a n e s t e s e n s a i o s ( pe l o me n o s 500 v e z e s s u p e r i o r a o v a l o r
da da i nt e r a ç ã o DHT r e c e p t o r ) p o d e d i f i c u l t a r a i n t e r p r e t a ç ã o d e e f e i t o " a n t i a n d r o -g ê n i c o " que o c o mp o s t o p u d e s s e e x e r c e r s e a d mi n i s t r a d o ?n v i v o .As s i m, o p r e s e n t e t r a ba l h o
i nt r oduz a mo d i f i c a ç ã o d e v e r i f i c a r s e o s a n d r ó g e n o s a p r e s e n t a r i a m a l g u ma mo d i f i c a ç ã o e m s ua c a p a c i d a d e d e u n i ã o a ó r g ã o - a l v o d e r a t o s c r o n i c a me n t e t r a t a d o s c o m d o s e s e l e v a d a s
de e x t r a t o de S . r e b a u d i a n a . Pa r a l e l a me n t e , u ma s é r i e d e o u t r o s p a r â me t r o s e n d ó c r i n o s f or a m t a mbé m e s t u d a d o s .
MATERIAL
EMÉTODOS
Fo r a m u t i l i z a d o s 50 r a t os Wi s t a r ma c h o s d e
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25 a 30 d i a s de i d a d e( 50 a 6 0 g ) ma n t i d o s e m c o n d i ç õ e s u s u a i s de l a b o r a t ó r i o , c o m l i vr e a c e s s o a á g u a e r a ç ã o b a l a n c e a d a ( r a ç ã o" Pr o Bi o t é r i o G" , An d e r s o n Cl a y t o n , S. Pa u l o ) , e m c i c l o c l a r o - e s c u r o d e 12 h o r a s . Tr i n t a a ni ma i s f o r a m t r a t a d o s c o m d e c o c t o d e f o l h a s d e S t e v i a r e ba udi a na ( Be r t . ) Be r t oni ( Vi ve j _ r o Gu a r a n y , S. Pa ul o) c o r r e s p o n d e n d o a 60g d e f o l h a s / 9 0 ml d e s o l u ç ã o ( pr e pa r a do p e l a Dr ? Ne i l a Que ge ( I n s t i t u t o d e Pe s q u i s a s Te c n o l ó g i c a s , S. Pa u l o ) . A s o l u ç ã o e r a a d mi n i s t r a d a 2 v e z e s / d i a a t r a v é s de s o n d a g á s t r i c a ( 2 ml / r a t o ) d u r a n t e 60 d i a s ; o s a n i ma i s f o r a m man_ t i dos s e m a l i me n t o ou á g u a 1 h a n t e s e 30 mi n a p ó s a a d mi n i s t r a ç ã o da s o l u ç ã o . Vi n t e anj _ ma i s ma n t i d o s n a s me s ma s c o n d i ç õ e s e t r a t a d o s a p e n a s c o m s o l u ç ã o f i s i ol ógi c a ( Na Cl 0, 8 5%) c o n s t i t u í r a m o g r u p o c o n t r o l e . Pa r a e n s a i o s d e u n i ã o ( v. a b a i x o ) , 3 a n i ma i s d e c a d a g r u po f or a m c a s t r a d o s 3 d i a s a n t e s de u t i l i z a d o s . A e v o l u ç ã o d o c r e s c i me n t o f oi a c ompa nha _ da pe l o g a n h o de p e s o c o r p o r a l , me d i d o a c a d a 2 a 3 d i a s d u r a n t e t o d o o p e r í o d o e x p e r i me n t a l . Ap ó s o s a c r i f í c i o , por d e c a p i t a ç ã o , f o r a m c o l e t a d o s s a n g u e e a mo s t r a s de t e c i -d o s pa r a a d e t e r mi n a ç ã o d e g l i c e mi a , n í v e i s s é r i c o s d e T^ , T^ e T^ R, u n i ã o d e [3
H] Rl 8 8 l â f r a ç ã o c i t o s ó l i c a d e p r ó s t a t a , t e or de Zn e m p r ó s t a t a , t e s t í c u l o , g l â n d u l a s a l i v a r s u b ma n d i b u l a r e p â n c r e a s , e c o n t e ú d o h í d r i c o e m t e s t í c u l o e p r ó s t a t a .
Pa r a e n s a i o s d e u n i ã o h o r mô n i o - r e c e p t o r , a s p r ó s t a t a s f o r a m r a p i d a me n t e d i s s e c a d a s p e s a d a s c o m p r e c i s ã o de 0, 1 mg e h o mo g e n e i z a d a s a 0- 2° C na p r o p o r ç ã o 1: 16 ( p/ v) e m t a m-p ã o Tr i s - EDTA- me r c a m-p t o e t a n o l 50 mM m-pH
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7, k ( t a mpã o TEM) , c o m h o mo g e n e i z a d o r Po l y t r o nc ondi ç õe s d e s c r i t a s a n t e r i o r me n t e ( Bar aí í ao e t
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al.,zyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA
19 8 2 ) . Em r e s u mo , a l í q u o t a s d o s ci t osói s c o n t e n d o c e r c a d e 500 y g d e p r o t e í n a f o r a m i n c u b a d a s d u r a n t e l 8h a 8° C c o m con_cent r ações c r e s c e n t e s ( 2 a 10 nM) de 1 7ot - met i 1 t r i e n o l o n a r a d i o a t i v a ( [ 1 7 a - me t i 1- 3
H] - 1 , ^ , H- e s t r a t r i e n-3- o n a ; [3
H] Rl 8 8 l c o m a t i v i d a d e e s p e c í f i c a 8 7 , 0 Ci / mmol ( Ne w En g l a n d Nuc l e _ ar) na p r e s e n ç a o u a u s ê n c i a d e h o r mô n i o r a d i o i n e r t e , e m c o n c e n t r a ç ã o 500 a 10 0 0 v e z e s
super i or a o v a l o r d a d a u n i ã o a n d r õ g e n o - r e c e p t o r n e s t e t e c i d o . As i n c u b a ç õ e s f o r a m i nt er r ompi das p o r a d i ç ã o d e mi s t u r a c a r v ã o - d e x t r a n o ( 0 , 1- 0 , 0 1¾ ) e m t a mp ã o TEM e s u b s e -quent e c e n t r i f u g a ç ã o ( 2. 0 0 0 g,
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k ° Z , 10 mi n , c e n t r í f u g a Sor va l l RC- 5B) p a r a s e p a r a ç ã o d e hor môni os l i vr e s e l i g a d o s . Ao s s o b r e n a d a n t e s f oi a d i c i o n a d a mi s t u r a de c i n t Ha ç ã o ( PPOPOPOP e m t o l u e n o ) e a r a d i a t i v i d a d e p r e s e n t e d e t e r mi n a d a e m e s p e c t r ô me t r o Be c k ma n de c i n_ i l ação l í q u i d a . A d i f e r e n ç a e n t r e a s c o n t a g e n s o b t i d a s n o s t u b o s o n d e f oi u t i l i z a d o or môni o r a d i a t i v o u n i c a me n t e ( = " u n i ã o t o t a l " ) e a s c o n t a g e n s n o s t ubos o n d e f o r a m i n -cubados h o r mô n i o r a d i a t i v o + h o r mô n i o r a d i o i n e r t e ( = " u n i ã o i n e s p e c í f i c a " ) é t o ma d a c o mo
medi da da u n i ã o e s p e c í f i c a .
®
A g l i c e mí a f oi d e t e r mi n a d a p e l o mé t o d o d a g l i c o s e o x i d a s e ( Gl u c o s t a t Wo r t h i n g t o n Bi ochem. Co . ) . Os n í v e i s s é r i c o s d e e e o s v a l o r e s d e " T^ - r e s i n a " ( T^ R) f o r a m de_
t er mi nados c o m e mp r e g o de " k i t s " e s p e c í f i c o s ( Di a gnos t i c ) .
Pa r a a s d e t e r mi n a ç õ e s d e z i n c o , a mo s t r a s a p r o p r i a d a s d e t e c i d o s f o r a m l e va da s ã secur a ( d e t e r mi n a n d o - s e c o n c o mi t a n t e me n t e o c o n t e ú d o h í d r i c o ) e a s e gui r c a l c i n a d a s a
0°C dur a nt e 30 mi n . As c i n z a s r e s u l t a n t e s f o r a m d i s s o l v i d a s e m HC1 2 N. Di l u i ç õ e s
apr opr i adas ( 1: 2 5 ) d e s t a s o l u ç ã o f o r a m f e i t a s c o m á g u a d e s i o n i z a d a e a n a l i s a d a s e m e £ pect r of ot ômet r o d e a b s o r ç ã o a t ô mi c a ( Va r i a n Te c h t r o n AA- 12 0 ) c o n t r a c u r v a - p a d r ã o d e Zn .
l i mi t e de d e t e c ç ã o d o mé t o d o é d e 0 , 0 0 2 p p m d e Zn ; a f a i x a d e t r a b a l h o s i t u o u - s e e nt r e
, k
e 1,6 ppm do í o n .Pr ot e í na s f o r a m d e t e r mi n a d a s p e l o mé t o d o d e ( Lowr y e t a l . , 1 9 5 1 ) , u s a n d o s e a l b u -r oi na bovi na ( f -r a ç ã o V, Si g ma ) c o mo p a d -r ã o . Emp -r e g o u - s e o t e s t e " t " d e St u d e n t n a s c o
m-r ações e s t a t í s t i c a s .
RESULTADOS
A Fi g. 1 mo s t r a a e v o l u ç ã o d o g a n h o d e p e s o c o r p o r a l n o s d o i s g r u p o s d e r a t o s ; o
i nsert o mos t r a a t r a n s f o r ma ç ã o s e mi - l o g a r í t mi c a d o s me s mo s d a d o s e a r e t a d e r e g r e s s ã o r es ul t ant e, t o ma n d o d a d o s a p a r t i r d o 7o
d i a d e e x p e r i me n t a ç ã o . No t a s e e x e c e l e n t e r e
-t i l i near i dade ( c o e f i c i e n -t e de c o r r e l a ç ã o 0, 9 9 ) . As r e t a s c a l c u l a d a s p a r a g r u p o c o n t r o
-le (y = 0 ,0 0 7x + 0, 469) e g r u DO e x p e r i me n t o ( y = 0 , 0 0 7x + 0, 4 8 6 ) s ã o i n d ? s t i n g u í v e í s
( P>0,20).
A Ta be l a 1 l i s t a d a d o s p o n d e r a i s , c o r p o r a i s e de d i v e r s o s ó r g ã o s , n o mo me n t o d o
acr i f í ci o dos a n i ma i s . Nã o s e o b s e r v a m d i f e r e n ç a s s i g n i f i c a t i v a s d o s p e s o s ( a b s o l u t o s
ou r el at i vos ) e n t r e o s g r u p o s , e x c e ç ã o ã v e s í c u l a s e mi n a l , q u e a p r e s e n t o u r e d u ç ã o de 60¾
no gr upo t r a t a do c o m S t e v í a , t a n t o e m t e r mo s d e p e s o a b s o l u t o c o mo e m r e l a ç ã o a o p e s o cor por al .
Na Ta b e l a 2 a p a r e c e m o s d a d o s d e g l i c e mi a , h o r mo n a i s ( T^ , e T^ R s é r i c o s ) , i ô n i -c o ( t e or d e Zn e m v á r i o s t e -c i d o s ) e -c o n t e ú d o h í d r i -c o e m t e s t í -c u l o e p r ó s t a t a . Em n e n h u m
c a s o c o n s t a t o u - s e d i f e r e n ç a s i g n i f i c a t i v a e n t r e os g r u p o s .
A Fi g . 2 r e s u me os e n s a i o s d e u n i ã o d o a n d r ó g e n o s i n t é t i c o [
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3 H]RI 881 a o c i t o s o l d ep r ó s t a t a d e r a t os c o n t r o l e e t r a t a d o s c o m S t e v i a . A c a s t r a ç ã o d o s a n i ma i s 3 d i a s a n t e s d o e x p e r i me n t o ( v. Mé t o d o s ) f oi f e i t a p a r a q u e a c o n c e n t r a ç ã o de a n d r ó g e n o s c i r c u l a n t e s
b a i x a s s e e h o u v e s s e d e s o c u p a ç ã o d o s r e c e p t o r e s a n d r o g ê n i c o s p r o s t á t i c o s . As me d i d a s d e n ú me r o de s í t i o s de u n i ã o r e f l e t e m p o r t a n t o o n ú me r o d e s í t i o s d i s p o n í v e i s e m c o n d i ç ã o
d e b a i x a s t a x a s c i r c u l a n t e s de h o r mô n i o s e n d ó g e n o s ( o q u e s e a p r o x i ma mu i t o da d e t e r mi
-n a ç ã o d e s í t i o s r e c e p t o r e s t o t a i s p e l a t é c -n i c a de i -n t e r c â mb i o ; ( Ba r a -n a o e t a i .
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, 19 8 2 ) . Aa n á l i s e de Wi l k i n s o n d o s d a d o s mo s t r o u c e r t a d i f e r e n ç a na v a r i á v e l Q ( C • 1 1 3,8 ± 2 1 ,5 e E = 1*43, 7
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t 23, 6 n M) , q u e e n t r e t a n t o d e s a p a r e c e a o s e e x p r e s s a r e m o s v a l o r e s e m r e l a ç ã o a o t e or d e p r o t e í n a s da f r a ç ã o c i t o s ó l i c a ( C = 3 1, 0 í 2, 1 e E = 3 0, 9 ± 1, 8 f mo l / mg d e p r o t e í n a ) . A c o n s t a n t e d e a f i n i d a d e a p a r e n t e da u n i ã o h o r mô n i o - r e c e p t o r n ã o v a r i o u e nt r e o s g r u p o s ( C = 0, 22 ± 0, 07 e E = 0, 2¾ ± 0, 07 n M- 1 ) .
DISCUSSÃO
Es t a l i nha de i n v e s t i g a ç ã o t e m s i d o c e n t r a d a n a o b s e r v a ç ã o de s e me l h a n ç a s e s t r u t u r a i s e n t r e a mo l é c u l a d o e s t e v i o s í d e o o u s u a a g l i c o n a ( e s t e v i o l ) e a mo l é c u l a de h o r mô
-n i o s s e x u a i s , o q u e p o d e r i a e x p l i c a r e v e -n t u a l a f i -n i d a d e por s í t i o s r e c e p t o r e s p a r a e s t e s h o r mô n i o s e m ó r g ã o s - a l v o e p l a u s i v e l me n t e j u s t i f i c a r u ma " a ç ã o a n t i - a n d r o g ê n i c a " ( Pl a n a s
e Ku c , 1 9 6 8 ) . De f a t o , f oi o b s e r v a d o q u e o e s t e v i o s í d e o p u r i f i c a d o p o d e c o mp e t i r c o m a [3
H] 5 c t - d i h i d r o t e s t o s t e r o n a p e l o s s e u s r e c e p t o r e s e s p e c í f i c o s e m p r ó s t a t a d e c a mu n d o n g o s a d u l t o s , e m p r o p o r ç ã o a t é me s mo s u p e r i o r ã c o mp e t i ç ã o e x e r c i d a p e l o h o r mô n i o r a d i o i n e r t e
( Ue ha r a e t a i . 1 9 8 2 ) . 0 me s mo n ã o o c o r r e u a ní ve l d e g l â n d u l a s u b ma n d i b u l a r , ó r g ã o a l v o de a n d r ó g e n o s c u j o s r e c e p t o r e s t ê m me c a n i s mo s a p a r e n t e me n t e d i s t i n t o s de r e g u l a ç ã o ( 01i
v e i r a - Fi l h o e t a i . , 19 8 1). A ma r c a ç ã o d e r e c e p t o r e s c o m h o r mô n i o s d e o c o r r ê n c i a na t ur a l ( t e s t o s t e r o n a , d i h i d r o t e s t o s t e r o n a ) p o d e e v e n t u a l me n t e s u b e s t i ma r o n ú me r o de s í t i o s de
u n i ã o d e v i d o a q u e e s s e s c o mp o s t o s s ã o me t a b o l i z á v e i s , e i s t o l e v o u - n o s a o u s o d o a n d r ó g e n o s i n t é t i c o n ã o me t a b o l i z á v e l Rl 8 8 l , q u e ma r c a r e c e p t o r e s a n d r o g ê n i c o s c o m a l t a e s p e
c i f i c i d a d e e r e pr odut i bi 1 i da de ( Bonne & Ra y n a u d , 1 9 7 6 ) . As s i m, c o n f i r mo u - s e a a ç ã o d o e s t e v i o s í d e o de d e s l o c a r o a n d r ó g e n o e s p e c i f i c a me n t e u n i d o a s e u s r e c e p t o r e s , n ã o s ó a
ní ve l de p r ó s t a t a , c o mo t a mb é m de g l â n d u l a s u b ma n d i b u l a r de a n i ma i s a p ó s 1 a n o d e c a s -t r a ç ã o ( Ue ha r a e t a l. , 1 9 8 3 ; Mi n e t t i e t al . , 19 8 3, 1 9 8 4 ) . Em q u a l q u e r d o s r e l a t o s , e n
-t r e -t a n -t o , c a b i a a c r í -t i c a d e q u e d i f i c i l me n -t e a c o n c e n -t r a ç ã o d e e s -t e v i o s í d e o u s a d a ( 7 a 15 y M) s e r i a a l c a n ç a d a i n v i v o p o r a d mi n i s t r a ç ã o c o n v e n c i o n a l ; o p r e s e n t e t r a b a l h o e x a
mi n a d i r e t a me n t e e s t a q u e s t ã o .
El e g e r a m s e a n i ma i s p r é p ú b e r e s p a r a i ni c i a r o t r a t a me n t o c o n s i d e r a n d o q u e o s i s
pré- l
pr é- púber e ( Ne gr o- Vi l a r e t a l . ,
zyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA
19 7 3 ; Ba r a n a o e t a l . , 1 9 8 2 ) . Como s e o b s e r v a na Fi g . 1, a e v o l u ç ã o d o g a n h o de pe s o c or por a l n i o s o f r e u qua l -quer al t e r a ç ã o pe l o t r a t a me n t o ; a t r a n s f o r ma ç ã o s e mi - l og d o s d a d o s mo s t r a p r a t i c a me n t eúni ca r e t a d e r e g r e s s ã o p a r a o s doi s g r u p o s . Ou t r o s d a d o s ponde r a i s ( Ta be l a 1) evi _ enci am que o t r a t a me nt o c r ô n i c o c o m a l t a s d o s e s d e e x t r a t o de S . r e b a u d i a n a n ã o a f e t o u i f i c a t i va me nt e q u a l q u e r d o s ó r g ã o s e s t u d a d o s , c o m e x c e ç ã o da v e s f c u l a s e mi n a l . Ob s e r >use que o c o n t e ú d o l í qui do i n t r a v e s i c u l a r t e ve pa pe l f unda me nt a l n e s t a di f e r e n ç a ; e n -t r e-t an-t o, ni o s e s a b e a i n d a o me c a n i s mo d e -t al e f e i -t o .
Não houve i nf l uê nc i a do t r a t a me n t o s obr e o t e or d e g l i c o s e s a n g ü í n e a . A l i ge i r a do ní vel g l i c ê mi c o ( 1, 5¾) nã o f oi s i g n i f i c a t i v a , p o r é m pode r e f l e t i r a t e ndê nc i a hi pogl i cerni a nt e q u e o e s t e v i o s í d e o d e mo n s t r a ( Ovi e do e t al . , 1 9 7 1 ) , p o t e n c i a l me n t e út i l no est ado d i a b é t i c o . Ex p e r i me n t o s u s a n d o r a t os t or na dos d i a b é t i c o s c om e s t r e p t o z o t o c i n a
dem a uxi l i a r a e s c l a r e c e r me l h o r e s t e p o n t o .
A a va l i a ç ã o da f u n ç ã o t i r o i d r a n a ( pe l a me d i d a d o s n í v e i s c i r c u l a n t e s de T^ e T^) s í t i os 1i ga nt e s d i s p o n í v e i s e m p r o t e í n a s t r a n s p o r t a d o r a s de h o r mô n i o s t i r oi di a nos l o í ndi ce T^ R) mo s t r o u que o e s q u e ma d e t r a t a me n t o c o m St e v i a a qui e mp r e g a d o nã o i n
er i u ne s t e p a r â me t r o e n d ó c r i n o ( Ta be l a 2 ) . Es t a a v a l i a ç ã o é i mpor t a nt e p e l a s r e c o -i das c or r e l a ç õe s que a f u n ç ã o da t -i r ó -i d e ma n t é m c o m o c r e s c -i me n t o c or por a l , c om a f un_
çàoendócr i na do p a n c r e a s , e c o m o e i x o h i p o t á l a mo - h i p ó f i s e - t e s t i c ul a r ( Ka l l a nd e t a l . ,
zyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA
19 7 8 ) .Nes t e t r a ba l ho e mp r e g a mo s a d e t e r mi n a ç ã o da c o n c e n t r a ç ã o t e c i dua l d e z i n c o ( Ta be -l ai ) como ma i s um i ndi c a dor f i s i o -l ó q i c o d a a t i v i d a d e a n d r o g ê n i c a , uma ve z que e s t e í on
k
regul a ne ga t i va me nt e a a t i v i d a d e da A -3- o x o e s t e r o i d e - 5 c t - r e d u t a s e , e n z i ma q u e c onve r t e t os t er ona e m d i h i d r o t e s t o s t e r o n a , a l é m da r e gul a ç ã o a n d r o g ê n i c a da c o n c e n t r a ç ã o de Zn t es t í cul o e t e c i dos a l v o d e a n d r ó g e n o s ( Mons a l ve & Bl a q u i e r , 19 7 7 ) . Ad e ma i s . e s t u d o s l i mi nar es de s t e l a bor a t ór i o mo s t r a r a m que o t e or d e Zn e m g l â n d u l a s a l i va r s u b ma n d i -ar t ambém d e p e n d e da a t i v i d a d e a n d r o g ê n i c a , uma v e z que a c a s t r a ç ã o l e va a q u e d a da
ent r ação g l a n d u l a r d o í on e a r e pos i ç ã o hor mona l a r e s t a ur a ( r e s u l t a d o s nã o publ i ca_ . 0 t r a t a me nt o c o m St e v i a nã o mo d i f i c o u o t e or d e Zn e m t e s t í c ul o e ó r g ã o s - a l v o d e r
ge nos , ne m a ní ve l d e p â n c r e a s , o n d e t e m pa pe l i mpor t a nt e no a r ma z e n a me n t o d e mol é^ s de i ns ul i na n a s c é l u l a s (3 ( Bowma n & Ra n d , 19 8 0 ) .
Es t e t r a ba l ho mo s t r a q u e a a d mi n i s t r a ç ã o c r ô n i c a de a l t a s d o s e s de e x t r a t o t ot a l ent r ado de f ol ha s d e S. r e b a u d i a n a a r a t os nã o a l t e r o u o n ú me r o d e s í t i o s 1i ga nt e s es pecí f i cos p a r a a n d r ó g e n o s na p r ó s t a t a , n e m a c o n s t a n t e d e a f i n i d a d e a p a r e n t e da i n_ çi o hor môni o- r e c e pt or a e s t e ní ve l ( Fi g. 2 ) . Em v i s t a dos r e s ul t a dos a n t e r i o r e s , e m a var i ável Q_ e r a a f e t a d a pe l o e s t e v i o s í d e o ( Ue ha r a e t a l . , 19 8 3 ) , ê pl a us í ve l que o ent e r e s ul t a do s e j a d e v i d o i pe que na c o n c e n t r a ç ã o d e p r i n c í p i o s a t i v o s q u e a t i n g e m of as e. Vi s t o que a q u e s t ã o d a a b s o r ç ã o do e s t e v i o s í d e o e o u t r o s c o mp o n e n t e s n ã o
ai nda t ot a l me nt e r e s o l v i d a ( Wi nga r d e t a l . , 198 0) , a bi odi s poni bi 1 i da de dos p r i n c í da St e vi a d e v e d e s e mp e n h a r pa pe l l i mi t a nt e n e s s e p a r t i c u l a r .
Se bem os r e s u l t a d o s a qui d i s c u t i d o s f a l e m a f a v o r d e i noc ui da de d o e x t r a t o a quos o I das f ol ha s d e S. r e b a u d i a n a s obr e a f u n ç ã o e n d ó c r i n a do s i s t e ma r e pr odut or do r a t o
a e x p l i c a ç ã o p a r a a r e d u ç ã o da f e r t i l i d a d e e n c o n t r a d a por Pl a n a s & Ku c ( 1968) pode e nvol v e r a ç õ e s s obr e a f ê me a o u e v e n t u a l me n t e a o ní ve l ma i s c o mp l e x o de c o mp o r t a me n t o . São
a s p e c t o s c u j o e s t u d o v e m me r e c e n d o a t e n ç ã o e m n o s s o l a b o r a t ó r i o .
AGRADECIMENTOS
A v a l i o s a c o l a b o r a ç ã o d o Dr . J o ã o H. Roma l di ni ( Di r e t or d o Se r v i ç o de Endoc r i nol o g i a d o H. S. P. E. , S. Pa ul o) na a v a l i a ç ã o da f u n ç ã o t i r o i d i a n a é a qui r e c o n h e c i d a me n t e r e g i s t r a d a . C. A. S. A. Mi ne t t i é p ó s - g r a d u a n d a e m Fa r ma c o l o g i a d o I . C. B. / USP e b o l s i s t a da
FAPESP ( Pr oc . 8 2 . 0 ^ 9 5 - 0 ) . Pa r t e d o p r o g r a ma de p e s q u i s a s s o b r e a
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S. r e b a u d i a n a ne s t e l a b o r a t ó r i o s e b e n e f i c i o u d o a u x í l i ozyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA
^ 3. 8 2. 0 1 ^ 9 c o n c e d i d o p e l a FI NEP.SOMMARY
The eiiectò oi actÃve pnA.ncJ.plu oi StevÃo. lebaudiana {BeAt.) BeAtonl on òom t
endocnÁne. iunctiom tn lati uieAe òtudied aiten. chfionic adm lnlòtAcution [60 day&) oi a
concentnated aqueoiu extAacX oi the leaveA, òtaAttng' at pne-pubeAtal age ( 25- 30 dayò).
The. ioíZoiMing m eaòuAem entb have been canjxJied out: gllcem ia, and T^&eAum levefA,avatla
bit T3 bindLng òit&t ín plaòm a I Tj R) , [ 3
H] RI S S ? blnding to pioitate. cytoòol, In content
in ph.odtate, teAtü,, Aubm ax-MaAy gland and panc.Ke.at>, and hyd/ Uc content tn teAtiò and
pnoitate.
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AIÒO, it ha& be.en òtudied the cw ive. oi body uieÁght galn and the. ilnal w exghtoi teÁtu,, pioòtate, iem lnal veòicle, iubm axlltaAy gland and adnenal. Any òlgnlilcant
dliie/ ience betioeen expenÁjnental and contuol gnoupi uieAe òeen, except ÍOK the. w eÁght oi
sem inal veòicle uihlch decneat>ed by 60% both In tem i oi abòolute m lght and A.elatlvely
to the body m lght. Jt w aò conc.lu.ded that pham ac.ologlc.al doòeA oi actlve pfUnclpleò
oi S. Kthaixálana chn.onlc.ally adm lnlòteAed to iat& dld not eZicÂt any iundam ental
Tabel a I - Pe s os c o r p o r a i s e d e d i v e r s o s ó r g ã o s de r a t os c o n t r o l e e t r a t a dos c om d o s e f a r ma c o l ó g i c a d e S. r e b a u d i a n a d u r a n t e 60 d i a s ( mé di a s + E. P. M. )
CONTROLE TRATADOS Re l a t i v o Re l a t i v o Ab s o l u t o ( mg/ I OOg) Ab s o l u t o ( mg/ l OOg)
Corporal 1 9 4 , 0 ± 9 , 7 — 1 8 3 , 0 ± 14 „ 6 —
Te s t í c u l o 1118, 7 ± 5 0 , 0 0 , 5 9 ± 0 , 0 1 0 4 4 , 0
+
4 0 , 2 0, 5 8 ± 0 , 0 2Próst at a 18 7, 2 ± 6 3 , 3 8 8 , 7 ± 18, 4 1 3 2 , 7 + 19, 6 6 4 , 0 ± 13, 5
Vesícu l a s e m i n a l 6 4 8 , 3 ± 3 1, 5 3 , ^ 7 ± 0 , 1 6 3 8 8, 4 + 6 9 , 1 * 2 , 1 4 ± 0, 2 55
Gl. s u b m a n d i b u l a r 1 4 0 , 5 ± 6 , 4 7 3 , 9 6 í 2, 7 2 1 4 3 , 5 ± 8 , 5 7 9 , 9 8 ± 3, 6 0
Adrenal 13 , 2 ± 1 ,5 6 , 9 2 ± 0, 9 4 16, 6 ± 0 , 8 9 , 3 4 ± 0, 5 9
| 0 pes o c or por a l ê d a d o e m g; o s d e ma i s pe s os a b s o l u t o s e m mg„
* P < 0, 05 e m r e l a ç ã o a o g r u p o c o n t r o l e »
Tabel a 2 - Ef e i t os , do t r a t a me n t o c r ô n i c o de r a t os c o m d o s e f a r ma c o l ó g i c a de e x t r a t o d e S. r e b a u d i a n a
CO N T RO LE T RAT AD O S
Gli cem i a ( mg/ l OOml ) 13 2, 0 ± 13 0 , 0 ± 11, 2
T3 ( mg/ l OOml ) T^ ( ug/100ml)
3 7, 3 ± 17 , 7 5 8 , 0 ± 2 4, 5
T3 ( mg/ l OOml )
T^ ( ug/100ml) 2, 0 7 ± 0, 1 5 3, 13 ± 0, 36
Y (¾)
Zn ( mg/ g t e c . s e c o)
-1, 0 3 ± 0, 04 1, 3 7 ± 0 , 18
Y (¾)
Zn ( mg/ g t e c . s e c o) - p r ó s t a t a 0 , 16 ± 0 ,0 2 0 , 20 ± 0 , 0 2
-
t e s t í c u l o 0 , 19 ± 0, 06 0, 14 ± Q, 0 2-
g l . s ubma ndi bul a r 0 , 11 ± 0, 1 0 , 18 ± 0, 0 7-
p â n c r e a s 0, 93 ± 0, 70 0 ,58 ± 0, 21Cont eúdo hí dr i c o {%) - t e s t í c u l o - p r ó s t a t a
8 5, 4 ± 2, 1 8 3 , 3
í
\ A
2 0 0 r
2 0 3 0 4 0 5 0
Di os
zyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA
de experiment ação6 0
FIG. 1 - Evolução do ganho de peso corporal de ratos controle (o o) e tratados cromj camente com dose farmacológica de extrato de S. rebaudiana (o o ) . 0 inserto mostra a transformação semi-log dos mesmos dados e a análise de regressão cor
respondente. Na,o ha diferença estatística entre os grupos.
8 0
6 0
4 0
2 0
-• Oi.- o / ^ *
50
J
1- 6 - 4 - 2 0 2 4 6 6 10
zyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA
. FínM )
4 6 8 10
[3
H ] R1 8 8 1 i n cu b a d o ( n M )
FIG.
zyxwvutsrqponmlkjihgfedcbaZYXWVUTSRQPONMLKJIHGFEDCBA
2 - Curva de saturação do andrógeno sintético [3HJR1881 especificamente unido a fra çao citosolica de homogeneizados de próstatas de ratos controle (o o) e tra tados com dose farmacologicas de extrato de S. rebaudiana. 0 inserto mostra o gráfico de Eadie-Hofstee ("inversão de Wilkinson") para determinação da
quantidade total de sítios receptores (Q) e da constante de afinidade aparen- J
te (Ka) do complexo H-R, segundo a equação F/B = F/Q + Q/Ka (Rodbard & Feldman,,
1975). Abreviaturas: F (free = hormônio livre; B (bound) = hormônio unido. |
