Casos de leishmaniose tegumentar americana por Leishmania (viannia) braziliensis nos municípios de cosmópolis e Indaiatuba - região de Campinas, estado de São Paulo, Brasil.

R e v is t a d a S o c i e d a d e B r as ile ir a d e M e d ic in a T r o p ic al 2 9 ( 5 ) :4 1 9 - 4 2 4 , se t - o u t , 1 9 9 6 .

CASOS DE LEISH MANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA

POR LEISH M A N IA (V IA N N IA ) B RA ZILIEN SIS NOS

MUNICÍPIOS DE COSMÓPOLIS E INDAIATUBA - REGIÃO

DE CAMPINAS, ESTADO DE SÃO PAULO, BRASIL

Selma Giorgio, Elisabeth R. Deberaldini, Raquel S. Pacheco, M arize Q.

Pires, Eliana M. Zanotti-M agalhâes, Nelson Cordeiro, Luis A. M agalhães,

M aria Leticia Cintra, Nair S.N. Guimarães e Nivea M.G.M. Stedile

C om o objetiiro de iden t ific ar a espécie de Leishm ania en v olv ida n as afec ç õ es c u t ân eas d e in div ídu os residen tes n os m u n icípios d e C osm ópolis e In daiat u ba, reg ião d e C am pin as, Estado d e São P au lo, c o rrelac io n am o s dado s clín icos, histopatológ icos e testes de bib r idiz aç ão in situ . Os ex pressiv os ín dices de in c idên c ia de leishm an iose teg u m en tar am e r ic an a o bsew ado s nesses m u n icípios n os lev aram a in ic iar esses estudos. N esse trabalho, ap resen t am o s os dado s relativ os a seis in div ídu os. A s carac terístic as das lesões, u lceradas, de dific il c ic at r iz aç ão e presen tes em locais ex postos do c orpo su g eriram qu adr o s de leishm an iose teg u m en tar am eric an a. Os testes d e in t raderm o reaç ão de M on ten egro, positiv os em c in c o dos seis p ac ien t es an alisado s t am bém refo rç aram a su speita d e leishm an iose teg u m en tar am eric an a. Os p adr õ e s histopatológ icos, c o m o r e aç ão ex su dativ a c elu lar e g ran u lo m at o sa e a dific u ldade de isolam en to dos p arasit as obtidos d e biópsias de lesões são com patív eis c o m aqu eles descritos p ar a Leishm ania (V ian nia) b raz iliensis. Em testes d e b ib r idiz aç ão in situ do DNA do cin etoplasto d e am astig otas das lesões dos seis pac ien tes, o bseiv am o s qu e qu at ro deles apresen tav am sin ais d e bib r idiz aç ão com a so n da deL. (V ian nia) b raz iliensis, c o n firm an do as suspeitas de qu e aLeishm ania respon sáv el p e las afec ç õ es c u tân eas nos p ac ie n t e s an alisado s era do su bg en êroV iannia e do c om plex ob raz iliensis.

P alav ras- c hav es: Leish m an ia (V ian n ia) b raz ilie n sis. L eishm an io se hu m an a. Leishm an iose teg u m en tar am eric an a.

A s leish m an io ses en c o n tram -se, seg u nd o a O rg aniz ação M und ial d a Saú d e, entre as seis d o enças infecto parasitárias d e m aio r impo rtância16. A leish m an io se teg u m entar am ericana (LTA ) o c o rre em p ratic am en te to d as as reg iõ es g eo g ráficas d o Brasil11, e n o Estad o d e São Pau lo tem m erec id o ate n ç ão n o s ú ltim o s ano s, tanto p ela su a in c id ênc ia c o m o p ela sua c ap ac id ad e d e d isp ersão 215.

D epartam entos de Parasitologia do Instituto de Biologia e A natomia Patológica da Faculdade de Ciências M édicas, Universidade Estadual de Campinas, D ireção Regional de Saúde XII, Cam pinas, SP, D epartam ento de Bioquímica e Biologia M o lecular, Fu n d ação O sw ald o C ruz, Rio d e Janeiro, RJ.

A poio Financeiro: Conselho N acional de D esenvolvimento Científico e Tecnológico e Fundação de A poio ao Ensino e à Pesquisa da UNICAMP.

E n dereç o p ar a c o rr esp o n dê n c ia: Pro f Selma G iorgio.

D epto. de Parasitologia/IB/UN ICA M í! Caixa Postal 6109,

13083-970 Campinas, SP. Fax: (0 1 9 2 ) 39-3124. Recebido para publicação em 0 2 / 0 9 / 9 5 .

D ev id o a im p o rtância ep id em io ló g ic a q u e a d o en ç a ad quiriu na reg ião d e C am p inas (Estad o d e São Pau lo ), alg u ns au to res realiz aram , r e c e n t e m e n t e , i n v e s t i g a ç õ e s d a f a u n a fleb o to m ín ea d etectand o L u t z o m y a m ig o n e i, L.

G iorg io S, D ebetaldim ER, P ac hec o RS, Pives MQ, Z an otti-M ag alhäes EM, C ordeiro N, M ag alhaes LA, CiHtra ML, G u im arães NSN, Stedile NMGM. C asos d e leishm an iose teg u m en tar am e r ic an a p o r Leishmania (V iannia) braziliensis nos m u n ic ípios de C osm ópolis e In daiat u ba - reg ião de C am pin as, Estado de São P au lo, Brasil. Rev ista d a So c iedade Brasileira de M edicin a T ropical 29 :419- 424, set-out, 1996.

resp o n sáv eis tam b ém p o r le sõ e s m u co sas m u tilantes'1 6. O d iag n ó stic o p re c o c e e a c arac teriz aç ão d o p arasita serão ú teis p ara o c o rreto p ro ced im en to terap êu tic o e as aç õ es futuras d e saú d e co letiv a.

Este trab alho inicial, tev e p o r o b jetiv o c o rrelac io nar d ad o s clín ic o s e h isto p ato ló g ico s co m a caracteriz ação p o r hib rid iz ação m o lecular in sit u d e am astíg o tas p ro v en ien tes d e le sõ es c u tân e as d e p ac ie n te s p ro v e n ie n te s d o s m u nicíp io s d e C o sm ó p o lis e Ind aiatu b a, reg ião d e C am p inas no Estad o d e São Pau lo . A e sc o lh a d o s m u n icíp io s d e C o sm ó p o lis e Ind aiatu b a d eco rreu tanto d a so lic itaç ão d e au xílio d o g ru p o d e m éd ic o s d a D ireção Reg io n al d e Saú d e d a reg ião d e Cam p inas, c o m o p e las in d ic aç õ e s d e u m a situ aç ão ep id êm ic a o co rrid a n o ano d e 1994 (Tab ela 1).

M ATERIAL E M ÉTO D O S

L o c a l i z a ç ã o d o s m u n ic íp io s . C o sm ó p o lis está lo c aliz ad o a 22°38’35” sul d e latitu d e e a 4 7 ° 1 1 *4 0 ” o e s te d e l o n g i tu d e . Su a á r e a c o m p reen d e l66k m 2 e a p o p u laç ão é d e 40.073 hab itantes. Ind aiatuba está lo caliz ad o a 23°05’ 12” su l d e latitu d e e a 47° 13’0 6 ” o e ste d e lo ng itu d e. A área d o m u n icíp io c o m p re en d e 299kin 2 e a p o p u la ç ã o é d e 1 1 6 .0 1 8 h ab itan te s. A m b o s lo c aliz am -se na reg ião d e C am p inas n o Estad o d e São Pau lo , Brasil.

P ac ie n t e s . Seis ind iv íd uo s d e am b o s o s sexo s, resid entes no s m unicíp io s d e C o sm ó p o lis e Ind aiatu b a, fo ram o b je to s d esse estu d o . To d o s o s p acientes ap resentav am lesõ es cu tâneas su g estiv as d e LTA. O s d ad o s, as características d as le sõ e s e o s resu ltad o s d o s testes realiz ad o s são m o strad o s nas Tab elas 2 e

3-R e a ç ã o In t r a d é r m ic a d e M o n t é n é g r o . O an tíg e n o d e M o n tén ég ro , c o n stitu íd o d e p ro m astig o tas d e L e is h m an ia sp. flu o retad o s e fen ic ad o s, fo i fo rn ec id o p elo Institu to A d o lfo Lutz, São Pau lo , SP, c o n ten d o 40m gN / m l. O an tíg en o fo i in o c u lad o intrad erm icam ente na fac e anterio r d o an te b raç o d ireito na d o se d e 0 ,lm l. A p ó s 72 ho ras fo ram feitas as leituras, id e n tif ic a n d o - s e a áre a d e e n d u ra ç ã o e m ed ind o -se o d iâm etro no sentid o transv erso , c o n fo rm e o M anu al d o C entro d e V igilância Ep id em io ló g ic a d a Sec retária d e Estad o d a Saú d e d e São Pau lo . Fo ram co nsid erad o s p o sitiv o s o s testes c o m área d e end u ração ig u al o u su p erio r a 5m m a.

H is t o p at o lo g ia d a s lesõ es. Bió p sias retirad as assep tic am en te d as b o rd as d as le sõ e s c u tâneas

fo ram fixad as em fo rm o l 10% e inclu íd as em p arafin a3. O s c o rte s fo ram c o rad o s p e lo m éto d o d e hem ato xilin a-eo sin a e exam inad o s em m ic ro sc ó p io ó p tic o . O s frag m ento s d as lesõ es fo ram tam bém exam inad o s p o r ap o sição .

C u lt iv o d e p a r a s i t a s . Frag m en to s d e b ió p sias d e le sõ es c u tân eas fo ram retirad o s assep tic am en te e m antid o s em m eio d e cultiv o b ifásico , q u e c o n siste d e fase só lid a NNN (ag ar c o m sang u e d esfib rinad o d e c o e lh o ) e fase liq u id a b r ain h e a r t in fu s io n 3,7% em so lu ç ão d e H anks3 9. A s cu lturas m antid as a 28°C em estu fa incu b ad o ra, fo ram exam inad as a p artir d o terceiro até o q u ad rag ésim o d ia.

H ib r id iz a ç ã o m o le c u lar . Frag m ento s d e b i ó p s i a d e l e s õ e s c u tâ n e a s r e tir a d a s assep ticam ente, fo ram p ressio nad o s d iretam ente e m m em b rana d e n y lo n (N y lo n -1, c at.n Q 11466-077, G ib c o BRL). A m astíg o tas co ntid o s

nas m em b ranas, ap ó s lise e d esn atu ração in

s i t u , f o r a m h ib r i d i z a d o s c o n tr a s o n d a s esp ec ífic as d e D NA d o c in eto p lasto (kD N A ) e m in ic írc u lo c lo n a d o d e L. ( V J b r a z i l i e n s i s m arcad as rad iativ am ente c o m *2p Ja T P p e lo m é to d o d e “ran d o m p rim er m o d ific ad o ” , seg u nd o p ro to c o lo d escrito p o r Pac h e c o e c o ls10. A m bas, h ib rid iz açõ es e lav ag ens d o s filtro s, fo ram realiz ad as so b c o n d iç õ e s d e alta estring ência e o s filtro s ex p o sto s a -70°C p o r 24 ho ras c o m tela am p lificad o ra d e sinal. KDN A s p u rificad o s d e c e p as referên c ia d e L. ( V .)

braz ilien sis (M 2903) e L. ( L.) am az o n e n s is (PH 8) fo ram p rev iam ente ad icio nad o s às m em b ranas e u sa d o s, re s p e c tiv a m e n te , c o m o c o n tro le s p o sitiv o e neg ativ o .

RESULTADOS

C o m b a s e n o s c a s o s d ia g n o s ti c a d o s e n o tificad o s na reg ião d e C am p inas, Estad o d e São Pau lo , q u e ab rang e d o z e m u n icíp io s, o n ú m e r o d e a f e c ç õ e s d e r m a t o l ó g i c a s p ro v o cad as p o r L e is h m an ia tev e inc rem ento d e 2,1 v ez es n o an o d e 1994 em relaç ão ao ano p re c e d en te . Em relaç ão ao s m u nicíp io s d e C o sm ó p o lis e Ind aiatu b a o s c o e fic ie n te s d e in c id ênc ia p ara o m esm o p erío d o au m entaram e m a p ro x im a d a m e n te c in c o e o ito v e z e s , r e s p e c tiv a m e n te ( T a b e la 1 ) . E s s e q u a d ro ep id em io ló g ic o e a transm issão au tó c to n e d a d o ença (95% ) sugeriram uma situ ação ep id êm ica no ano d e 1994 n esse s d o is m u nicíp io s.

G iorg io S, D eberaldin i ER, P ac he c o RS, P ires M Q, Z an otti- M ag alhães EM, C ordeiro N, M ag alhães LA, C intra ML, G u im arães NSN, Stedile NMGM. C asos de leishm an iose teg u m en tar am e r ic an a p o r Leishmania (V iannia) braziliensis n os m u n ic ípios de C osmópolis e Ln daiatu ba - reg ião d e C am pin as, Estado d e São P au lo, Brasil. Rev ista d a So c iedade Brasileira d e M edicin a T ropical 2 9:4 1 9 - 4 24 , set-out, 1996.

d e q u atro p ac ie n tes d e C o sm ó p o lis e d e d o is p ac ie n tes d e Ind aiatu b a. A Tab ela 2 m o stra o s d ad o s d o s p ac ie n tes e a d esc riç ão d as le sõ es c u tân eas. O s c aso s referem -se a ad u lto s d e am b o s o s se x o s c o m id ad e v ariand o d e 21 a 55 ano s. C linicam ente hav ia p red o m ínio d e lesão ú nic a e u lc erad a em áreas d esc o b ertas d o c o rp o (e m c in c o p a c ie n te s) , ap e n as u m p ac ie n te ap resen to u d uas le sõ es, am b as co m b o rd as u lcerad as (Tab ela 2). A s áreas d as le s õ e s d o s se is p a c ie n te s v ariav am d e 2 a 3,5c m 2 e o tem p o d e p ersistên c ia d as le sõ es até

a p rim e ira v isita a o C entro M éd ico v ario u d e 30 a 60 d ias.

Entre o s e x am es realiz ad o s (Tab ela 3), o b serv am o s q u e c in c o d o s seis p ac ie n tes r e s p o n d e r a m p o s i ti v a m e n te a o te s te

in trad érm ic o d e M o n te n e g ro . A p en as a

p a c ie n te M M PM B a p r e s e n to u r e s p o s ta neg ativ a ao an tíg en o d e M o nteneg ro (áre a d e en d u ração d e 4m m ). Em relaç ão ao s ex am es histo p ato ló g ico s realiz ad o s em b ió p sias d as le sõ e s c u tân eas o b serv am o s q u e o p ad rão d e reaç ão exsu d ativ a celular, c arac teriz ad o p o r um p ro c e sso inflam ató rio c rô n ic o in esp ec ífic o , estav a p resen te em le sõ e s d e q u atro p ac ientes. O q uad ro d e reação exsud ativ a e granulo m ato sa, u m a in f la m a ç ã o c r ô n ic a g r a n u lo m a to s a

' v y y i* 1 " C" oe-fic ie n t e in c id ê n c ia d e LTA d o s m u n ic íp io s d e C o sm ó p o lis e In d aiat u b a e d a r e g ião d e C am p in as. SP n o s an o s d e 1 9 9 3 e

Lo cal c r * d e 1993 Cl d e 1994 Taxa d e V ariação d o Cl d e 1994 em

relação ao Cl d e 1993

Co sm ó p o lis 7.70 37.4 4.90

Ind aiatuba 3.60 27.6 7.70

Reg ião d e Cam p inas*** 3,60 7.70 2.10

* Fo nte: G rup o d e Vigilância Ep id em io ló g ica-D IR XII-Cam p inas, SP.

** Cl = C o eficiente d e incid ência: calcu lad o co m b ase na estim ativ a d e p o p u lação d o SEA DE p ara 1993 e 1994. *“ Região d e Cam p inas ab rang e 12 m unicíp io s (antig o ERSA -27).

T ab e la 2 - D ado s e c ar ac t e r ís t ic as d as lesõ es d e in div ídu o s c o m LTA r es iden t e s n o s m u n ic íp io s d e I n d aiat u b a e C osm ópolis, SP.

Paciente Sexo Id ad e Características e lo caliz ação d as lesõ es cutâneas M unicíp io MECJ r 21 ulcerad a, fund o granu lo so bo rd as elev ad as (c o x a) Ind aiatuba TSF F 55 bo rd as ulcerad as (c o xa e p erna) Co sm ó p o lis RSR M 34 ulcerad a, fund o g ranu lo so b o rd as elev ad as (face) Co sm ó p o lis AT M 41 ulcerad a, fund o g ranu lo so (c o xa) Co sm ó p o lis MMPMB F 33 ulcerad a, fund o g ranulo so (anteb raço ) Ind aiatuba

PM M 43 ulcerad a (p erna) Co sm ó p o lis

M = m ascu lino ; F * fem inino .

d eso rg aniz ad a sem n ec ro se tecid u al, estav a p resen te em b ió p sia d o p ac ie n te A T (Tab ela 3). Em ap en as u m d o s c aso s o b serv am o s fo rm as am astig o tas em lâm inas d e ap o siç ão (p ac ie n te M ECJ). A s tentativ as d e cu ltiv o d e p ro m astig o tas d e L e is h m an ia, p ro v enientes d as lesõ es, em m eio b ifásic o fo ram neg ativ as n o s d o is c aso s tentad o s (p ac ie n tes TSF e RSR). V ale salientar q u e as tentativ as d e cu ltiv o d o s p arasitas d e frag m ento s d e le sõ e s cu tâneas d e

o u tro s p ac ie n te s n ão in c lu íd o s no g ru p o aq ui d e sc rito tam b é m fo ram na su a m aio ria n e g a tiv a s ( 8 d e 10 p a c ie n te s ) ( d a d o s n ão m o strad o s). N o s c aso s d e cu ltiv o p o sitiv o , o s p arasitas ap resentav am asp e c to característico d e p ro m astig o tas, m as ap ó s alg u ns d ias d e cu ltu ra a m o tilid ad e e o c resc im en to cessav am .

A s o b serv aç õ e s clínicas, a p o sitiv id ad e no s testes d e in trad erm o reação d e M o nteneg ro , as características histo p ato ló g icas e as o b serv aç õ es d as culturas d as b ió p sias su g eriam q u ad ro s d e LTA p o ssiv elm ente p ro v o cad o s p o r L e is h m an ia d o su b g en êro V ian n ia c o m p le x o b r az ilie n s is . O s testes d e h ib rid iz ação in situ co nfirm aram no ssas susp eitas. O teste fo i p o sitiv o em b ió p sias d e q u atro d o s seis p ac ie n tes analisad o s (A T, M M PM B, TSF e M ECJ), ind icand o q u e o p arasita resp o nsáv el p elas le sõ e s c u tân eas p erten c e ao su b g en êro V ian n ia c o m p le x o b r a z ilie n s is (Tab ela 3 e Fig ura 1). A s b ió p sias d o s p ac ientes PM e RSR m o straram -se neg ativ as m esm o ap ó s c in c o d ias d e e x p o siç ão . Sinais d e h ib rid iz ação f o r a m o b ti d o s c o m a s o n d a d e L. ( V . )

G io rgio S, D eb eralclini ER, P a ch e c o RS, P ires M Q , Z ano t t i- M agalhães EM , C o rdeiro N, M a ga lh ãe s LA , C int ra M L, G u im a rã e s NSN, Stedile N M G M . C aso s d e leis hm anio s e t e gum e n t a r a m e ric a n a p o r Leishmania (V iannia)

braziliensís no s m un icíp io s d e C o sm ó po lis e I n d a ia t u b a - re giã o d e C am p inas , Es t ado d e São P aulo , B ras il. R ev ista d a S o c ie d a d e B ras ileira d e M e d ic in a T ro p ical 2 9 :4 1 9 - 4 2 4 , set- o ut, 1 9 9 6 .

p ela to tal au sên c ia d e h ib rid iz açào c o m o kD N A d e L. (L .) a m a z o n e n s i s . O resu ltad o d e u m a d as au to -rad io g rafias é m o strad o na Fig u ra 1.

T abela 3 - Resu ltados dos testes p arasit ológ ic os realiz ado s em in div ídu os c o m LTA. residen tes n os m u n icípios d e In daiat u ba e C osmópolis, SP.

P ac ie n te R IM ' Pad rõ es h isto p ato **

T e ste d e h ib rid iz aç ão in sitif**

M ECJ + REC +

TSF + REC

RSR + REC

-A T + REG +

M iUPM B - REC +

PM + NR

-* RIM = R e aç ão In trad é rm ic a d e M o n te n e g ro

** P ad rõ e s h isto p ato = P ad rõ es h isto p ato ló ^ ic o s d as le sõ e s; REC * R e a ç ã o e x su d ativ a c e lu la r; REG = f te a ç a o e x su d ativ a e g ran u lo m ato sa: KR = n ão re aliz ad o .

F i g u ra 1 - H ib rid iz a ç à o in situ d e fra gm en t o s d e bió psia d e les ão c u t â n e a do p a c i e n t e A T. A aut o - ra dio gra fia m o s tra f o rt e s in a l (P ) apó s a h ib ri d iz a ç à o co m a s o nd a radio at iv a cie kD N A to tal d e L. (V .) braziliensís. O

co n t ro le (C ) in d ica a p o s it i v id a d e d a re a ç ã o co m o kD N A h o m ó lo go p u ri f i c a d o . A e s p e c ific id a d e d a s o n d a é c o m p ro v ad a p e l a a u s ê n c i a d e h ib ri d iz a ç ã o c ru z a d a co m o kD N A a e L. (L.) am azonensis.

D ISCUSSÃ O

C o m o au m en to d e c aso s d e LTA em m u n icíp io s d a reg ião d e C am p inas, n o Estad o d e São Pau lo , e e x p re ssiv o s ín d ic es d e in c id ê n c ia o b serv ad o s n o s m u n ic íp io s d e C o sm ó p o lis e Ind aiatu b a (Tab ela 1) d ecid im o s i n i c i a r a n á l i s e s d e a s p e c t o s c l í n i c o s e p arasito ló g ic o s d as le sõ e s d e ind iv íd uo s re s id e n te s n e s s a s c id a d e s . O o b je tiv o f o i id entificar o ag en te etio ló g ic o e n este trab alho analisam o s o s d ad o s d e seis p ac ientes. A s c aracterísticas d as le sõ es, u lcerad as (Tab ela 2), d e d ifícil c ic atriz aç ão e p resen tes em lo c ais

ex p o sto s d o c o rp o su g eriram q u ad ro s d e LTA. O s testes d e in trad erm o reação d e M o nteneg ro , p o sitiv o s em cinco d o s seis p acientes analisad o s, tam b ém refo rçaram a su sp eita d e LTA (Tab ela 3). Em relação as características histo p ato ló g icas o bserv ad as nas bió p sias d as lesõ es d o s p acientes (Tab ela 3), estas são co m p atív eis c o m aq u elas d efinid as p ara le sõ es cu tâneas p ro v o cad as p o r

L. ( V . ) b r a z i l i e n s i s 15 13. M ag a lh ã e s e c o l s 5 d escrev eram p ad rõ es h isto p ato ló g ic o s c o m o ; reaç ão exsu d ativ a celular, re aç ão exsu d ativ a e n e c ró tic a , re a ç ã o e x su d a tiv a e n e c ró tic o - granulo matosa, reação exsud ativa e granulomato sa e reaç ão exsu d ativ a e tu b erc u ló id e, e e sc assez o u au sên c ia d e p arasitas. Entretanto , esses p ad rõ es são tam b ém o b serv ad o s em o u tro s p ro cesso s p ato ló g ico s5, d ificu ltand o a o b ten ç ão d e um d iag nó stico d efinitiv o .

D entre o s c aso s se lec io n ad o s p ara este trab alho , ap enas d o is d eles fo ram exam inad o s q u anto à p resen ç a d e p arasitas nas le sõ e s e am b o s f o rn e c e ra m re s u lta d o s n e g a tiv o s. Tentativ as c o m b ió p sias d e le sõ e s d e o u tro s o ito ind iv íd uo s d o s m esm o s m u n icíp io s e c o m lesõ es su g estiv as d e LTA tam b ém ap resentaram resu ltad o s neg ativ o s (d ad o s nào m o strad o s) A d ificu ld ad e na o b te n ç ão e p ro liferação d o p arasita em m eio d e cultura é c o m p atív el c o m aq u elas o b serv ad as p ara o iso lam en to d e

L e is h m a n ia d o c o m p le x o b ra z ilie ns is ’' 11. L. (L .) a m a z o n e n s i s, ao co ntrário , p ro lifera b em em c o n d iç õ e s sem elh an tes1.

O s resultad o s d o s p arâm etro s analisad o s (características d as le sõ es, reaç ão intrad érm ica d e M o n te n e g ro , h is to p a to lo g ia e c u ltiv o celular) sugeriram q u e a L e is hm ania resp o nsáv el p elas afecçõ es cutâneas d o s p acientes analisad o s é d o c o m p le x o b raz iliens ís . Entretanto , ap enas testes mais sensíveis, que analisem características b io q u ím icas e m o lecu lares d o p arasita, c o m o p o r e x e m p l o , r e a ç õ e s c o m a n ti c o r p o s m o n o c lo nais, análises d e iso enz ím as e ex am es d o kD N A são u tiliz ad o s p ara id entificar, ineq u iv o cam ente, o su b g ên ero e a e sp é c ie d e

L e is h m a n ie f Em no sso s testes d e hib rid iz ação

G iorg ioS, D eberaldin i ER, P ac he c o RS, P ires M Q, Z an otti- M ag alhães EM, C ordeiro N, M ag alhães LA, C intra ML, G u im arães NSN, Stedile NMGM. C asos d e leishm an iose teg u m en tar am e r ic an a p o rLeishm ania (V ian nia) b raz ü iensis n os m u n ic ípios d e C osm öpolis e In daiat u ba - reg ião de C am pin as, Estado de São P au lo, Brasil. Rev ista d a So c iedade Brasileira d e M edic in a T ropical 2 9 :4 1 9- 4 2 4 , set-out, 1996.

nas le sõ e s fo i in su fic ien te p ara a d e te c ç ão co m as so nd as. Esta u ltim a h ip ó te se é ap o iad a p elo fato d e q u e o s d o is p ac ie n te s co m resultad o s neg ativ o s d e hib rid iz açâo in situ resp o nd eram p o s itiv a m e n te a o te s te i n tr a d é r m i c o d e M o nteneg ro .

Em co nclu são , o s d ad o s d o p resente trabalho ap o n tam a p re se n ç a d e L. ( V .) b r az ilie n s ís em áreas d a reg ião d e C am p inas, SP, co nfirm and o as s u s p e ita s d e P ig n a tti e c o l s 12. E s tu d o s in tensiv o s d esta natu rez a ju ntam ente c o m a elu c id aç ão d e características ep id em io ló g ic as e d o s m ec an ism o s d e transm issão (v eto res e reserv ató rio s) d a LTA, serão n ec essário s p ara e stab e le c im e n to d e m ed id as e fetiv as d e c o n tro le nas áreas atingid as.

SUM M ARY

A study iv as e ar n e d ou t to iden tify Leishm ania species in v olv ed in skin lesion s o f patien ts fr o m C osm õpolis an d In daiat u ba, State o f São P aulo, Braz il. Tlje ep idem io lo g ic al d at a o f c u t an eo u s leishm an iasis in tw o cities su g g ested a epidem ic situ atio n in 1 9 9 4 . The lesio n s w ere c lin ic ally charac teristic o f c u tan eo u s leishm an iasis an d fiv e ou t six p at ien t s resp o n ded positiv ely to M on ten eg ro’s in t raderm al test. The histopatholog y o f skin lesions w ere c har ac t e r iz e d by two pattern s: ex su dativ e-c ellu lar reae-c tio n an d ex su dativ e g ran u lo m ato u s r e a c t i o n . T he c l i n i c a l a n d h i s t o p a t h o l o g i c a l p a r a m e t e r s s u g g e s t e d L e is h m a n ia ( V ia n n ia ) b raz ilie n sis as t he p o s s ible et io lo g ic ag en t. In ag reem en t, it w as diffic u lt to isolate an d m an tain the p arasit e in the laboratory . C haracteriz ation by in situ hy bridiz ation w ith kDNA am astig otes fr o m lesion s fr ag m e n t s c o n fir m e d that Leishm ania (V ian nia) b raz ilien sis w as the p ar as it e respon sible f o r the stu died c u tan eo u s lesions.

K ey -w ords: Leishm ania (V ian nia) b raz iliensis. C u tan eou s leishm an iasis. H u m an leishm an iasis. D iagnosis.

REFERÊN CIA S BIBLIO G RÁ FICA S

1. Chang K-R W allace RE Leishmania In: Jensen JB

(ed) In v itro cultivation of Protozoan parasites. CRC Press, Boca Raton, Florida, p. 111-153,1983. 2. G alimberti RTI, Katz G. Leishmaniose Tegumentar

A mericana. D ivisão de doenças transmitidas por v e to re s / Z o o n o s e s - C e n tro d e V ig ilân cia Epidemiológica - Boletim Epidemiológico 3-5, 1994.

3. G oto H, Sotto MN, Corbett CEFJ Villaça-Neto CM, Laczynscki CMM, Shaw JJ. A case of multiple

lesion m ucocutaneous leishmaniasis caused by Leishm an ia ( V ian n ia) braz ilien sis infection.The Journal ofTropical M edicine and Hygiene

93:48-5 1 ,1 9 9 0 .

4. G rimaldi Jr G. Leishm anioses tegum entares: aspectos clínicos e im unopatológicos. M emórias do Instituto O swaldo Cruz 77:195-215,1982. 5. M agalhães A y M oraes MAP, Raick AN,

Llanos-Cuentas A, Costa JM L, Cuba CC, M arsden PD. Histopatologia da leishmaniose tegum entar por Leishm an ia braz ilien sis braz ilien sis. 1. Padrões histopatológicos e estudo evolutivo das lesões. Revista do Instituto de M edicina Tropical de São Paulo 28:2 5 3 - 2 6 2 ,1 9 8 6 .

6. M arsden PD. M ucosal leishmaniasis ( “espundia” Escomel, 1911).Transactions of the Royal Tropical M edicine and Hygiene 80:859-876,1986. 7. M ascarini LM, Casanova C, Cipolli EAR, M ayo RC.

C aracteriz ação do p erfil ep id em io ló g ico da leishmaniose tegum entar am ericana (LTA) na Bacia do Rio M ogi G uaçu, Estado de São Paulo. Revista de Patologia Tropical 23 (su p l.):336,1994. 8. M elo MN, M ayrink W, Costa CA, M agalhães PA,

Dias M, W illiams P, A raújo FG, Coelho MV; Batista SM. Padronização do antígeno de M ontenegro. Revista do Instituto de M edicina Tropical de São Paulo 19:161-164,1977.

9. O rganization M undial de la Salud, Informe de um Comité de expertos de la OMS-Las leishmaniasis. Série de Informes Técnicos 7 0 1 ,1 9 8 4 .

10. Pacheco RS, Brandão A, Sibajev A, Cupolillo E,

M omem H, D egrave W. The genus C rithidia:

G enotypic diversity' among species. Journal of Protozoology Research 4:71-82,1994.

11. Pereira G FM , Fo n seca HH R. Leishm aniose tegum entar americana: epidemiologia e controle. Revista da Sociedade Brasileira de M edicina Tropical 27 (supl. III):45-50,1994.

12. Pignatti MG, M ayo RC, Alves MJCP, Souza SSAL, M acedo F, Pereira RM. Leishmaniose tegum entar americana na região nordeste do Estado de São Paulo - Brasil. Revista da Sociedade Brasileira de M edicina Tropical 2 8 :2 4 3 - 2 4 7 ,1 9 9 5 .

13. Ridley DS. A histological classification o f cutaneous leishmaniasis and its geographical expression. Transactions of the Royal Tropical M edicine and Hygiene 74:515-521,1980.

G iorg io S, D eberaldin i ER, P ac he c o RS, P ires MQ, Z an otti- M ag alhães EM. C ordeiro N, M ag alhães LA, C intra ML, G u im arães NSN, Stedile NMGM. C asos de leishm an iose teg u m en tar am e r ic an a p o r Leishmania (V iannia) braziliensis nos m u n ic ípios d e C osm ópolis e In daiat u ba - reg ião de C am pin as, Estado de São P au lo, Brasil. Rev ista d a So c iedade Brasileira de M edicin a T ropical 2 9 :4 19 - 4 24 , set-out. 1996.

15. W anderley DMV Controle de flebotomíneos na v ig ilân cia ep id em io ló g ica da leishm aniose tegumentar am ericana no Estado de São Paulo. Revista de Patologia Tropical 23 (supl.): 157-160,

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994.