E S T U D O D O S C A R A C T E R E S D E U M A A M O S T R A B O L IV IA N A D E
TRYPANOSOM A CRUZI *
Gentilda K. Funayama e J. C. Prado Jr. * *
A m o s tr a ãe T . c ru z i, m e d ia n te a in o cu la ç ã o e m c a m u n d o n g o s bran c os jo v e n s , fo i iso la da de fe z e s ãe e x e m p la r e s de T . in f e s ta n s c a p tu r a d o s e m V iti-c h i, B o lív ia e d e n o m in a d a a m o s tr a B o lív ia .
E ssa a m o s tr a , q u e s e c o m p o r ta ã e u m m o d o p e c u lia r e m re ações ãe a g lu tin a ç ã o , s e g u n d o Siq u e ira , R ib e ir o e F e r n a n d e s, e m 1973, m o s tr o u -s e p a to g ê n ic a p a ra c a m u n d o n g o s , in fe c ta n d o 100% dos a n im a is in o c u la d o s, qu er co m fo r m a s m e ta c íc lic a s de tr ia to m ín e o s , q u e r c om fo r m a s sa n g u íc o la s de d o a do re s c o m in fe c ç ã o a g u d a . A s fo r m a s sa n g u íc o la s, e m c a m u n d o n g o s , m e d e m 2 3 J 7 \id e c o m p r im e n to to ta l m é d io e te m ín d ic e n u c le a r ã e 0,94. N os c a m u n do ngo s m o r to s d u r a n te a fa s e a g u d a os n in h o s de le is h m â n ia s são a b u n d a n te s , s o b re tu ã o n o c oraçã o. A in fe c ç ã o dos c a m u n d o n g o s é g ra v e c o m c u r to pe río do p r e p a te n te , p a r a s ite m ia e le v a d a e a lta ta x a ãe le ta liã a ã e . A a m o s tr a B olív ia c o n fe r e , aos a n im a is q u e s o b re v iv e m , a lto g ra u ãe re sis tê n c ia c o n tr a re in fe c ç ã o p e la a m o s tr a Y . C u ltiv a -s e b e m e m m e io s líq u iã o s (W a r r e n ) e d ifá sic o s (N N N ) e e v o lu i r e g u la r m e n te e m v á ria s espéc ies de tr ia to m ín e o s te s ta d a s .
IN TR O D U Ç Ã O
E s tu d a n d o a s re la ç õ e s a n tig ê n ic a s de a lg u m a s a m o s tr a s d e T . c r u zi m e d ia n te a r e a ç ã o d e a g lu tin a ç ã o , S iq u e ira , R ib e iro e F e r n a n d e s (7) v e rif ic a ra m u m c o m p o r ta m e n to p e c u lia r d e u m a a m o s tr a iso la d a d e e x e m p la r e s d e T . i n fe s ta n s c a p tu r a d o s n a lo c a lid a d e d e V itic h i, B o lív ia , a m o s tr a e ssa q u e fo i d e n o m in a d a B o lív ia .
E ssa a m o s tr a d e u re a ç ã o d e a g lu tin a ç ã o p o s itiv a co m o a n tis o r o h o m ó lo g o , m a s re a g iu n e g a tiv a m e n te c o m a n tis o ro s h e - te ró lo g o s. P o r o u tro la d o , o u tr a s a m o s tr a s e s tu d a d a s n ã o d e ra m re a ç õ e s p o s itiv a s co m o so ro im u n e a n ti- B o lív ia .
D ia n te d isso , s u g e riu -n o s o D r. A sto l- p h o F e r r a z d e S iq u e ira q u e e s tu d á s s e m o s os c a r a c te r e s m o rfo ló g ic o s e b io ló g ico s d a
a m o s tr a B o lív ia , u s a n d o os c rité r io s a c e ito s p o r B a r r e tto (2) co m o e le m e n to s d e id e n tif ic a ç ã o do T . cruzi.
M A T E R IA L E M ÉTO D O S
A pós o iso la m e n to , a a m o s tr a B olív ia fo i m a n tid a e m c a m u n d o n g o s b ra n c o s com 22 d ia s d e id a d e , m e d ia n te in o c u la ç ã o in - tr a p e r ito n e a l d e s a n g u e d e d o a d o re s com in fe c ç ã o a g u d a . O s re p iq u e s fo ra m feito s co m 10 d ia s d e in te r v a lo .
Os m é to d o s u s a d o s p a r a o e s tu d o d a m o rfo lo g ia , b io lo g ia e p a to g e n ic id a d e d a a m o s tr a f o r a m a q u e le s d e s c rito s p o r A l b u q u e rq u e e B a r r e tto (1), e, p o r isso, d e i x a m o s d e e n t r a r e m m a io re s d e ta lh e s a r e s p e ito .
* T r a b a l h o r e a l i z a d o n o D e p a r t a m e n t o d e P a r a s i t o l o g i a , M i c r o b i s l o g i a e I m u n o l o g i a d a F a c u l d a d e d e M e d i c i n a d e R i b e i r ã o P r e t o d a U n i v e r s i d a d e d e S & o P a u l o .
** D e p a r t a m e n t o d e M i c r o b i o l o g i a e P a r a s i t o l o g i a d a F a c u l d a d e d e F a r m á c i a e O d o n t o l o g i a d e R i b e i r a » P r e t o .
R E SU LT A D O S E D ISC U SSÃ O
M orfologia dos trip a n o sso m o s sa n g u íc o -las. — O s trip a n o s s o m o s o b se rv a d o s ao a c a s o e m e sfre g a ç o s d e s a n g u e d e c a m u n - d o n g o s, e m b o ra d e a s p e c to u m p o u c o v a riá v e l, tê m os c a r a c te r e s g e ra is do T . cruzi, isto é, c o m p rim e n to m o d e ra d o , c in e to p la s - to v o lu m o so, a r r e d o n d a d o o u o v oíd e e s u b - te r m in a l, n ú c le o co m p o siç ã o s u b c e n tr a l, m e m b r a n a o n d u la n te d e lic a d a e co m p o u c a s o n d u la ç õ e s e fla g e lo r e la tiv a m e n te c u r t o .
E n tr e esses trip a n o s s o m o s h o u v e n ítid a p r e d o m in â n c ia d e f o rm a s e m C l a r g a s . R a r a m e n te f o ra m v is ta s f o rm a s lo n g a s e d e lg a d a s, m a s n u n c a tã o lo n g a s q u a n to a s o b se rv a d a s p o r F e rrio lli, B a r r e tto e C a rv a - Ih eiro (4) n a a m o s tr a Y d e o rig e m h u m a n a o u p o r F u n a y a m a e B a r r e tto (5) n a a m o s tr a iso la d a do m o rc e g o , D e sm o d u s r a -tu n d u s r o -tu n d u s ; c o m f re q ü ê n c ia o b s e rv a r a m - s e fo rm a s la r g a s co m o a s v is ta s p o r F u n a y a m a e B a r r e tto (6) n a a m o s tr a iso la d a d o sím io , A lo u a tta c araya .
N as fig s. 1-30 a p r e s e n ta m o s d e se n h o s d e trip a n o ss o m o s o b tid o s d e im a g e n s p r o je ta d a s p o r u m m ic r o p ro je to r L e itz . Os re s u lta d o s d a s m e d id a s , to m a d a s co m c u r - v ím e tro so b re esses d e se n h o s, sã o s u m a r ia do s n o Q u a d ro I .
E sses r e s u lta d o s , p r in c ip a lm e n te o c o m p r im e n to to ta l m éd io e o ín d ic e n u c le a r, ca em d e n tr o d o s lim ite s d e v a ria ç ã o o b s e r
v a d o s p o r F e rrio lli, B a r r e tto e C a r v a lh e ir o (4) e p o r B e ld a N e to (3) e m a m o s tr a s d e T . c r u zi iso la d a s d e c a so s h u m a n o s d a d o e n ç a d e C h a g a s .
M o rfo lo g ia d a s fo r m a s tis s u la r e s . — E x a m in a n d o c o rte s d e te c id o s e ó rg ã o s d e c a m u n d o n g o s e x p e r im e n ta lm e n te i n f e c ta d o s e m o rto s d u r a n te a fa s e a g u d a d a i n fecç ão , e n c o n tr a m o s m u ito s n in h o s d e le is h m â n ia s p r in c ip a lm e n te n o c o ra ç ã o . T a is f o rm a s o b s e rv a d a s p o ssu e m m o rfo lo g ia e d im e n sõ e s d a s le is h m â n ia s do T . cruzi.
In fe c ç ã o e m a n im a is d e la b o ra tó rio . — A a m o s tr a e m e s tu d o m o s tr o u -s e p a to g ê n ic a p a r a c a m u n d o n g o s jo v e n s b ra n c o s , in o c u la d o s p o r v ia p e r ito n e a l co m s a n g u e d e d o a d o re s co m in fe c ç ã o a g u d a .
P a r a o e s tu d o d o c o m p o r ta m e n to d e i n fe c ç ã o d e s tin a m o s u m t o ta l d e 30 c a m u n d o n g o s, d e n tr e os in o c u la d o s n o 19, 39 e 6? r e p iq u e s . O s c a r a c te r e s g e ra is d a in fe c ç ã o sã o a p re s e n ta d o s em re s u m o n o Q u a d ro II.
O e x a m e d esse q u a d ro m o s tr a q u e o p e río d o p r é - p a te n te v a rio u d e 2 a 5 d ias, co m m é d ia d e 4,06 d ia s . A p a r a s ite m ia v a r io u m u ito , m e sm o n o s a n im a is d e u m m e sm o lo te , os n ív e is p a r a s itá r io s m á x i m o s a tin g id o s te n d o o sc ila d o e n tr e 1148 e 27160 fla g e la d o s p o r m m 3 d e s a n g u e . T a is v a lo re s m o s tr a m q u e a p a r a s ite m ia foi e le v a d a , te n d o u ltr a p a s s a d o o n ív e l de 10 000 p a r a s ita s p o r m m 3 d e s a n g u e em
QU A D RO I. R e s u lta d o s d a m ic r o m e tr ia em trip a n o s s o m o s s a n g u íc o la s de c a m u n d o n g o s in fe c ta d o s co m a a m o s tra - B o lív ia d e T. cruzi.
M e d id a s em m ic r a s D im en sã o
M ín im a M á x im a M éd ia
C o m p rim e n to do fla g e lo 4,0 12,0 6,57
D is tâ n c ia N .A 6,0 12,0 8,10
D is tâ n c ia P .N 6,0 11,0 8,69
C o m p rim e n to 14,0 20,0 16,80
C o m p rim e n to T o ta l 19,1 26,3 23,37
L a r g u r a do C orp o 1,5 5,5 2,89
D iâ m e tro do C in e to p la sm a 0,8 1,2 0,94
Mar.-Abril, 1974
Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
77
Q u a d ro I I . C a r a c te r e s d a in fe c ç ã o d e c a m u n d o n g o s p e la a m o s tra - B o lív ia d e T. c ruzi.
N9 d o a n im a l
P e r ío d o p r e -
p a te n te (d ia s)
P a r a s ite m ia
N 9 /m m 3
m á x im a
D ia
D u ra ç ã o d a fa s e a g u d a
e m d ia s
O b se rv açõ es
C I-1 5 15.960 219 M o rre u n o 259 d ia
C I-2 5 25.865 289 30 S o b rev iv e u
C I-3 5 27.160 249 — M o rre u n o 349 d ia
C I-4 5 8.540 199 28 S o b rev iv e u
C I-5 5 17.570 199 28 S o b re v iv e u
C I-6 5 22.190 219 — M o rre u n o 259 d ia
C I-7 5 12.950 249 — M o rre u n o 259 d ia
C I-8 5 5.513 189 21 S o b re v iv eu
C I-9 5 13.650 249 28 S o b re v iv eu
C I-1 0 5 9.016 179 — M o rre u n o 189 d ia
C III-1 5 15.064 129 ____ M o rre u n o 249 d ia
C III-2 5 21.364 129 29 S o b re v iv eu
C III-3 5 25.830 199 32 S o b rev iv e u
C IH -4
5
20.030 339 32 S o b re v iv euC IH -5 5 14.280 199 — M o rre u n o 249 d ia
C I I I- 6 5 24.360 199 22 S o b re v iv e u
C III-7 5 1.148 179 22 S o b re v iv e u
cm -8
5 24.920 199 — M o rre u n o 259 d iaC III-9 5 24.486 269 34 S o b re v iv e u
C III-1 0 5 10.500 199 — M o rre u n o 259 d ia
C V I-1 2 11.760 169 ____ M o rre u n o 189 d ia
C V I-2 2 18.942 169 — M o rre u n o 189 d ia
C V I-3 2 13.874 149 — M o rre u n o 229 d ia
C V I-4 2 5.257 129 — M o rre u n o 139 d ia
C V I-5 5 5.460 149 — M o rre u n o 229 d ia
C V I-6 2 6.118 199 — M o rre u n o 229 d ia
C V I-7 2 18.536 169 — M o rre u n o 229 d ia
C V I-8 2 9 .6 88 149 — M o rre u n o 209 d ia
C V I-9 2 9.05 8 149 — M o rre u n o 189 d ia
C V I-10 5 11.928 169 — M o rre u n o 229 d ia
70% d os c a m u n d o n g o s . O s n ív e is p a r a s i tá r io s m á x im o s f o r a m a tin g id o s e n tr e o 129 e 339 d ia s a p ó s a in o c u la ç ã o .
D os c a m u n d o n g o s in o c u la d o s, a p e n a s o n ze c o n s e g u ira m s u p e r a r a fa s e a g u d a e p a s s a r a m p a r a a fa s e c r ô n ic a ; n o s d e m a is a m o r te so b re v e io q u a n d o os a n im a is e x ib ia m p a r a s i ta s m a is o u m e n o s n u m e r o so s n o s a n g u e p e rif é r ic o . V ale a c e n tu a r q u e e m a lg u n s c a so s o d ia d a m o r te c o in c id iu co m o d a p a r a s ite m ia m á x im a . E m o u tr o s a n im a is a m o r te o c o rre u q u a n d o a
p a r a s ite m ia j á se a c h a v a em d e c lín io . No g r á f ic o I a p re s e n ta m o s , a lé m d a c u rv a p a - r a s itê m ic a d e u m a n im a l c u ja in fe c ç ã o ev o lu iu p a r a a c ro n ic id a d e , o u tro s trê s tip o s d e c u rv a s o b s e rv a d a s .
O s n ív e is p a r a s itá r io s r e la tiv a m e n te a l to s, a lia d o s à p re c o c id a d e d e p a r a s ite m ia m á x im a e à e le v a d a t a x a d e le ta lid a d e , i n d ic a m q u e a a m o s tr a o r a em e s tu d o s é m u ito v ir u le n ta p a r a o c a m u n d o n g o .
Mar.-Abril, 1974
Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
79
DIAS APOS A INOCULAÇÁO
G r á f i c o I . T i p o s d e c u r v a s p a r a s i t é m i c a s o b s e r v a d a s e m c a m u n d o n g o s i n f e c t a d o s c o m a a m o s t r a B o l í v i a d o T . c r u z i .
tr ia to m ín e o s e m p re g a m o s n in f a s d e q u in t o e s tá g io d e P . m e g is tu s , T . v ittic e p s , T . só rd id a e R . p r o lix u s . E sse s tr ia to m ín e o s , em n ú m e r o d e 120, f o r a m d is tr ib u íd o s em lo te s e q u iv a le n te s e a lim e n ta d o s em c a m u n d o n g o s co m in fe c ç ã o a g u d a . O s r e s u l- ta d o sr d a p e s q u is a d a in fe c ç ã o , f e ita a p ó s 30 d ia s d e p o is n o c o n te ú d o d o in te s tin o
p o s te r io r o b tid o p o r d isse cç ão , são s u m a ria d o s n o Q u a d ro I I I .
E sse s r e s u lta d o s in d ic a m q u e, d a s e sp é cies te s ta d a s , a q u e se m o s tro u m a is su s c e p tív e l fo i o P . m e g i s t u s . .
-F i g s . 3 1 -3 3 . M l c r o f o t o s d e T . c r u z i d e c a m u n d o n g o s I n o c u l a d o s c o m a a m o s t r a B o l í v i a : f l g s . 31 e 32 — t r i p a n o s s o m o s s a n g u í c o l a s ( 1 2 0 0 x ) ; f l g . 33 — N i n h o d e l e l s h m a n l a s n o c o r a ç ã o ( 6 1 0 x ) .
Q u a d ro I I I . I n f e c tiv id a d e d e tr ia to m íd e o s p e la a m o s tr a B o lív ia d e T . c r u zi.
E sp é cie a lim e n ta d o sE x e m p la re s
E x e m p la re s p o sitiv o s
N ú m e ro %
P . m e g is tu s 30 18 66,6%
R . p ro lix u s 30 19 63,3%
T . sór did a 30 17 56,6%
T . v ittic e p s 30 16 53,3%
d o n g o s co m in fe c ç ã o c rô n ic a e e s te s f o ra m in o c u la d o s in tr a p e r lto n e a lm e n te co m 0,5 m l d e s a n g u e d e o u tro s c a m u n d o n g o s co m i n fe c ç ã o a g u d a p e la a m o s tr a Y . C om o t e s t e m u n h a to m a m o s 9 c a m u n d o n g o s lim p o s, co m id a d e e p eso e q u iv a le n te s a o s d o s d o lo te a n te r io r , c a m u n d o n g o s esses q u e r e c e b e ra m o m e sm o in ó c u lo p e la m e s m a v ia. O e x a m e do s a n im a is q u e s o b re v iv e ra m a u m a in fe c ç ã o p e la a m o s tr a B o lív ia e fo ra m re in o c u la d o s p e la a m o s tr a Y m o s tro u q u e to d o s p e r m a n e c e r a m n e g a tiv o s , e n q u a n to
q u e os c a m u n d o n g o s te s te m u n h a s a p r e s e n - t r a m in fe c ç ã o g r a v e .
CONCLUSÃO
Mar.-Abril, 1974
Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
81
S U M M A R Y
A s tr a in o f T . c ru z i w a s iso la te á in b a b y w h ite m ic e fr o m fe a c e s o f sp e ci-m e n s o f T r ia to m a in f e s ta n s c a p tu r e d a t V itic h i, B o lív ia .
T h is s tr a in , w h ic h b e h a v e s in a p e c u lia r w a y i n a g lu tin a tio n te s ts , a c c orãing to S iq u e ira , R ib e ir o a n d F e r n a n d e s (1973), is h ig h ly p a th o g e n ic fo r m ic e , i n fe c tin g o n e h u n d r e ã p e r c e n t o f t h e a n im a is in o c u la te d e ith e r w ith m e ta c y c lic try p a n o s o m e s fr o m tr ia to m in e s or w i t h blood fr o m donors w ith a c u te i n fe c tio n s . B lo od tr y p a n o s o m e s i n m ic e h a v e a m e a n t o ta l le n g h t o f 23.37 n a n d a m e a n n u c le a r in d e x o f 0,94. I n m ic e k ille d d u r in g t h e a c u te fa s e o f t h e in fe c tio n le is h m a n ia l fo r m s are a b u n d a n t, sp e c ia lly in t h e h e a r t. T h e in fe c tio n in m ic e is se v e re w i t h s h o r t p r e p a te n t p eriod , h ig h p a r a s ite m ia a n d h ig h m o r ta lity r a te . M ice re c o v e re d fr o m a n i n fe c tio n b y t h e B o lív ia n s tr a in h a v e a h ig h r e sis ta n c e a g a in s t r e in fe c tio n b y th e Y s tr a in o f T. cru zi. T h e B o liv ia -s tr a in is e a sily c u ltiv a te d i n m o n o p h a s ic a n ã d ip h a sic m e d ia a n d i n fe c ts r e g u la rly se v e ra l sp e cie s o f tr ia to m in e s te s te d .
R E FE R Ê N C IA S B IB L IO G R Á F IC A S
1. A LBU Q U ER Q U E, R .D .R . & B A R R E T TO , M .P . — E s tu d o s so b re r e s e r v a tó rio s e v e c to re s s ilv e s tre s d o T r y p a n o -so m a c r u z i. X X X . In fe c ç ã o n a tu r a l do c a c h o r r o - d o - m a to , C a rd o c y o n th o u s a za ra e — (W ied, 1824) p e lo T . cruzi. R e v . B r a s il. B io l., 28: 457-468, 1968.
2. B A R R E T T O , M .P . — T rip a n o so m o s s e m e lh a n te s ao T r y p a n o s o m a c ru zi em a n im a is s ilv e s tre s e s u a id e n tif ic a ç ã o com o a g e n te e tio ló g ic o d a D o e n ç a d e C h a g a s . R e v . I n s t . M e d . T r o p . S ão P a u lo , 7: 305-315, 1965.
3. BELDA N eto , F.M . — E stu d o s so b re a e x is tê n c ia d e c o rre la ç ã o e n tr e os d a d o s b io m é tric o s e o g r a u d e p a to g e n ic id a - d e d e a m o s tr a s h u m a n a s d e T r y p a n o so m a c ru zi C h a g a s, 1909. R e v . S o c. B ra s il. M ed . T r o p . 8: 27-36, 1974.
4. F E R R IO L L I F<?. F . B A R R E T T O , M .P. & CA R V A LH EIR O , J . R . — E s tu d o s so b re r e s e r v a tó r io s e v e c tc re s silv e s tre s d e T r y p a n o s o m a c r u zi. X X IV . V a ria ç õ e s d os d a d o s b io m é tric o s o b ti
d o s em a m o s tr a s d e T . c r u zi iso la d a s d e c a so s h u m a n o s , d a d o e n ç a d e C h a g a s . R e v . S o c. B r a s il. M e d . T r o p ., 2: 1-8, 1968.
5. FUNAYAM A, G .K . & B A R R E T T O , M . P . — E s tu d o s so b re re s e rv a tó rio s e v e c to re s silv e s tre s d o T ry p a n o s o m a c r u z i. In fe c ç ã o n a t u r a l d o m o rceg o , D e sm o d u s r o tu n d u s r o tu n d u s p elo T . c r u zi. R e v . B r a s il. B io l., 30: 13-19, 1970.
6 . FUNAYAM A, G .K . & B A R R E T T O , M . M . — E stu d o s so b re r e s e rv a tó rio s e v e c to re s s ilv e s tre s do T r y p a so n o m a c r u zi. X L II. In fe c ç ã o n a tu r a l d o sí- mioi, A lo u a tta c a ra y a (H u m b o ld t, 1812) p e lo T . c r u zi. R e v . I n s t . M ed . T ro p . S ã o P a u lo , 12: 257-265, 1970.
