DETERMINAÇÃO DE NÍVEIS NORMAIS DE COLINESTERASE
PLASMÁTICA E ERITROCITÁRIA
Maria Elisa Pereira Bastos de Siqueira * Nilda Alícia Gallego Gándara de Fernícola* Eustáquio Linhares Borges**
RSPUB9/421
SIQUEIRA, M. E. P. B. de et al. Determinação de níveis normais de colinesterase plasmática e eritrocitária. Rev. Saúde públ., S. Paulo, 12:340-4, 1978.
RESUMO: Foram determinados níveis de colinesterase plasmática e eritro-citária em 57 indivíduos, de idades entre 18 a 37 anos, estudantes da Universi-dade de São Paulo (Brasil), por meio de dois métodos: o de Michel, H. O. e o de Caraway, W. T. para o estabelecimento de valores médios "normais". Pelo método de Michel, foi encontrado um valor médio de 0,83 r p H / h para a colinesterase eritrocitária e de 1,11 r p H / h para a enzima do plasma. Pelo método de Caraway, foi obtido um valor de 77 U.
UNITERMOS: Colinesterase. Estudantes.
* Do Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas da Faculdade de Ciências Farma-cêuticas da Universidade de São Paulo — Cidade Universitária — Bloco 17 — 05568 — São Paulo, SP — Brasil.
** Do Departamento de Toxicologia da Faculdade de Farmácia da Universidade Federal da Bahia — 40000 — Salvador, BA — Brasil.
I N T R O D U Ç Ã O
As colinesterases são enzimas do grupo das hidrolases que catalizam a hidrólise dos ésteres da colina. Duas enzimas têm sido designadas como colinesterases: a acetilcolina hidrolase (EC 3117) que pre-domina nos eritrócitos, neurônios, gânglios do sistema nervoso autônomo e placas motoras terminais e a acilcolina hidrolase (EC 3118) que predomina no plasma, fíga-do, neuróglias, pâncreas e paredes do tubo digestivo.2,5,13
Certas substâncias têm a propriedade de inibir estas enzimas como os inseticidas organofosforados, que tanto inibem a coli-nesterase plasmática como a eritrocitária. Devido ao vasto emprego destes compostos, grande número de pessoas estão
ocupacio-nalmente expostas, tanto na sua fase de produção como na de aplicação.
O controle laboratorial da exposição ocu-pacional é comumente realizado pela deter-minação da atividade colinesterásica no sangue dos trabalhadores, uma vez que a análise é simples e sensível, sendo empre-gada como um índice biológico satisfatório, pois sua variação é proporcional à intensi-dade e duração da exposição aos agentes anticolinesterásicos.2,4,7,12
Entre os diferentes métodos disponíveis para realizar tais determinações, escolhemos o de Michel8, por ser um método sensível
é indispensável para a avaliação do grau de exposição do indivíduo, uma vez que a colinesterase plasmática, afetada mais rapi-damente, reflete melhor a absorção do inseticida organofosforado, sendo a sua determinação bastante significativa no início da exposição (sendo também regene-rada mais prontamente). A coliesterase eritrocitária, afetada mais tardiamente, reflete o estado de inibição da enzima do sistema nervoso, ou seja, o efeito tóxico do inseticida.6,7
A atividade da colinesterase plasmática foi também avaliada nas mesmas amostras, pelo método de Caraway3, por ser um
método rápido, simples e preciso, que po-derá ser empregado quando o laboratório não dispuser da aparelhagem necessária para a realização do método de Michel.
Os valores da atividade enzimática em pessoas não expostas apresentam ampla variação, sendo aconselhável, portanto, a determinação individual da atividade enzi-mática no exame pré-ocupacional.4,7,13,15
Este controle nem sempre é realizado e a análise de indivíduos expostos é solicitada ao laboratório, carecendo dos valores indi-viduais anteriores à exposição. Nestes casos, poderia ser usado um valor médio da ati-vidade enzimática, obtido pelo estudo de uma população não exposta ocupacional-mente aos agentes anticolinesterásicos. A escolha desta população apresenta certas dificuldades devido às variações da ativi-dade enzimática com a iativi-dade, sexo, raça, nível sócio-econômico, entre outros fa-tores.4,10,13,14
Considerando estes aspectos, procuramos, numa primeira parte, estudar atividades enzimáticas de indivíduos do mesmo grupo étnico, com estreita variação da faixa etária, sabidamente não expostos a inseticidas organofosforados.
MATERIAL E MÉTODOS
Foi estudada uma população de 57 alu-nos, que ingressou na Universidade de São Paulo no ano de 1976, de diversas
proce-dências, de ambos os sexos, com idade média de 22 anos (intervalo de 18 a 37 anos), participantes do Plano Anual de Saúde promovido pela Coordenadoria do Serviço Social (COSEAS).
Desta população foi colhida amostra de 3 a 5 ml de sangue, coletados em tubos heparinizados, sendo o plasma separado por centrifugação, tão rápido quanto pos-sível.
As determinações das atividades de coli-nesterase plasmática e eritrocitária foram realizadas paralelamente por dois métodos: o espectrofotométrico de Caraway 3 para a
avaliação da colinesterase plasmática e o de Michel8 para a determinação da
colineste-rase plasmática e eritrocitária.
RESULTADOS
A Tabela mostra os valores individuais de colinesterase plasmática e eritrocitária obtidos na população estudada, bem como os valores médios, o desvio padrão e o intervalo de confiança 95%.
A distribuição dos valores da colineste-rase obtidos pelo método de Michel, para o plasma e eritrócitos, está representada pelas Figs. 1 e 2, respectivamente, e os dos obtidos pelo método de Caraway, para o plasma, pela Fig. 3.
DISCUSSÃO
Muitos investigadores têm avaliado a atividade da colinesterase no sangue de indivíduos considerados "normais", isto é, em indivíduos não expostos a inibidores desta enzima (agentes anticolinesterásicos). Todos eles encontraram grandes variações individuais.1,4,9,10,11,15 O valor médio de
atividade enzimática para os eritrócitos, encontrados em nosso trabalho, foi próximo do citado por outros autores9,10 enquanto
que para a colinesterase plasmática, ava-liada pelo método de Michel, foi ligei-ramente superior aos citados na lite-ratura 6,9,10,11,14,e pelo método de Caraway,
Como mostram as Figs. 1, 2 e 3, ocorreu grande variação individual da atividade enzimática na população por nós estudada, sendo maior a variação da colinesterase plasmática. As causas destas variações têm sido extensamente pesquisadas. Atual-mente, sabe-se que certos estados patoló-gicos interferem nas taxas da colinesterase, especialmente da plasmática, como: cirrose, hepatite e câncer do fígado, enfarte do miocárdio, úlcera duodenal, infecções agu-das e crônicas, toxemias da gravidez, dermatomiosites, anemia, malnutrição e caquexia.2,10,11 Outros fatores, tais como
certas substâncias, também têm sido respon-sabilizados por estas variações: os fluore-tos, citratos e oxalafluore-tos, derivados da amônea quaternária, fenotiazínicos, antibió-ticos, atropina, codeína e barbitúricos.2,11
por nós estudada, não foi verificada dife-rença significativa nos valores da colines-terase, de acordo com o sexo, o que tam-bém foi constatado por outros autores.6,14
Deste modo, podemos avaliar a dificulda-de em estabelecer um valor médio normal da atividade enzimática, que possa ser válido para qualquer tipo de população. O clínico poderá usar este valor, quando for impossível conhecer a taxa de atividade enzimática anterior à exposição, não dei-xando ainda de levar em consideração outras possíveis causas que possam estar alterando as enzimas.
CONCLUSÕES
O valor médio encontrado na população estudada, para a colinesterase plasmática determinada pelo método de Michel, foi de 1,11 rpH/h e pelo método de Caraway, de 77 U. Para a colinesterase eritrocitária, foi de 0,83 ApH/h. Não encontramos di-ferenças significativas quanto ao sexo para a atividade de ambas as enzimas. Os mé-todos utilizados para a determinação da atividade enzimática são sensíveis e de simples execução, podendo ser empregados no controle da exposição de trabalhadores à inseticidas organofosforados.
RSPUB9/421
SIQUEIRA, M. E. P. B. de et al. [Normal levels of plasmatic and red cells cholinesterase.] Rev. Saúde públ., S. Paulo, 12:340-4, 1978.
ABSTRACT: The plasmatic and red cell cholinesterase was determined in 57 individuals aged 18-37 years, all students from the University of S. Paulo (Brazil). In order to know the normal mean values, two methods were used: Michel's and Caraway's. Through Michel's method a mean value of 0.83 r p H / h was found for red cells cholinesterase and 1.11 r p H / h for plasmatic cholines-terase. Through Caraway's method the mean value obtained was 77 U.
UNITERMS: Cholinesterase. Students.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. AUGUSTINSSON, K. B. The normal varia-tion of human cholinesterase activity.
Acta psysiol. scand., 35:40-52, 1955. 2. BERGMEYER, V. T. Methods of enzimatic
analysis. 2nd ed. New York, Academic Press, 1974. v. 1, p. 831-54.
3. CARAWAY, W. T. Photometric determina-tion of serum cholinesterase activity.
Amer. J. clin. Path., 26:945-55, 1956. 4. GAGE, J. C. The significance of blood
cholinesterase activity measurements.
Res. and Rev., 18:159-72, 1967. 5. GOODMAN, L. S. & GILMAN, A. As bases
farmacológicas da terapêutica. 4a ed.
Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 1973.
6. HENRY, R. J. Química clínica: bases y princípios. Barcelona, Editorial Jims,
1969. v. 2, p. 600-8.
7. LONG, K. R. Cholinesterase activity as a biological indicator of exposure to pesticides. Int. Arch. occup. environ. Hlth, 36:75-86, 1975.
8. MICHEL, H. O. Electrometric method for the determination of red cells and plasma cholinesterase activity. J. Lab. clin. Med., 34:1564-8, 1949.
9. REINHOLD, J. G. Measurement of serum cholinesterase activity. Amer. J. clin. Path., 23:645-53, 1953.
10. RIDER, J. A. et al. Plasma and red cells cholinesterase in 800 "healthy" blood donors. J. Lab. clin. Med., 50:376-83, 1957.
11. SCUDAMORE, H. H. et al. Acethylcholine and cholinesterase in the blood of patients suffering with bronchi asthma.
J. Lab. clin. Med., 37:860-6, 1951. 12. SMITH, R. L. The estimation of serum
cholinesterase in presence of anti-cholinesterase inseticides. Clin. chim. Acta, 52:315-9, 1974.
13. SUNSHINE, I. Manual of analytical toxico-logy. Cleveland, CRC Press, 1975. p.
107-8.
14. VORHAUS, L. J. et al. Serum cholineste-rase in health and disease. Amer. J. Med., 14:707-19, 1953.
15. WILLS, J. H. The measurement and signi-ficance of changes in the cholinesterase activities of erythrocytes and plasma in man and animals. CRC Crit. Rev. Toxicol., 1:153-202, 1972.
