Diagnóstico laboratorial de varíola: II. resultados do segundo ano de atividades, de maio de 1969 a maio de 1970.

(1)

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DE VARÍOLA:

II,

R e s u lta d o s

do segundo ano

d e a tiv id a d e s ,

de m aio de 1969

a maio de 1970 *

H.

G .

Schatzinayr

** o

J. A. M esquita ***

O s a u t o r e s r e l a t a m o s r e s u l t a d o s o b t i d o s n o d i a g n ó s t i c o l a b o r a t o r i a l d e v a r í o l a , d u r a n t e o s e g u n d o a n o d e f u n c i o n a m e 7 i t o d e u m a u n i d a d e m o n t a d a n o I n s t i t u t o P r e s i d e n t e C a s t e l l o B r a n c o , d a F u n d a ç ã o I n s t i t u t o O s w a l d o C r u s , n o R i o d e J a n e i r o .

O e x a m e d e 1 0 5 e s p é e i m e n s d e c r o s t a s e d e 7 6 d e l í q u i d o v e s i c u l a r f p u s -t u l a r , f o r n e c e u 3 9 e 3 4 a mo s t r a s d e v í r u s d a v a r í o l a , r e s p e c t i v a m e n t e ( T a b e l a 1 ) . A d e m o r a e m c h e g a r a o l a b o r a t ó r i o i n f l u e n c i a s i g n i f i c a t i v a m e n t e a t a x a d e i s o l a m e n t o d e v í r u s ( T a b e l a 2 ) .

F o i e n c o n t r a d a e s t r e i t a r e l a ç ã o e n t r e o s d i a g n ó s t i c o s c l í n i c o e l a b o r a t o r i a l ( T a b e l a 3 ) , q u a n d o p o s s í v e l c o m p a r á - l o s .

A i n o c u l a ç ã o e m o v o s e mb r i o n a d o s a p ó s 1 a 2 h o r a s d o a b a i x a m e n t o d a m e b r a n a c ó r i o - a l a n t ó i c a , f o i c o n s i d e r a d a c o m o a d e q u a d a à s c o n d i ç õ e s e m q u e í á o r e a l i z a d o s o s e x a m e s . O l a b o r a t ó r i o c o n t i n u a a r e c e b e r r e g u l a r m e n t e m a i s e s p e c i m e n s p a r a d i a g n ó s t i c o .

IN T R O D U Ç Ã O

A c o n t i n u i d a d e d a s a t i v i d a d e s d a C a m p a n h a d e E r r a d i c a ç ã o d a V a r i o l a n o B r a s i l r e f l e t e - s e n a m e l h o r i a d o s s e r v iç o s d e n o t i f i c a ç ã o d e c a s o s s u s p e i t o s e e s t u d o s e p i d e - m io ló g ic o s , a u m e n t a n d o a i m p o r t â n c i a d o l a b o r a t ó r i o d e d ia g n ó s ti c o .

O p r e s e n t e t r a b a l h o r e l a t a o s r e s u l t a d o s o b ti d o s d u r a n t e o s e g u n d o a n o d e a t i v id a d e s , n o l a b o r a t ó r i o m o n t a d o n o I n s t i t u t o P r e s i d e n t e C a s te l lo B r a n c o , F u n d a ç ã o I n s t i t u t o O s w a ld o C ru z , n o e x a m e d e 181 e s p é e i m e n s c o l e t a d o s e m d i f e r e n t e s p a r t e s d o B r a s i l , a t r a v é s d a C a m p a n h a d e E r r a d i c a ç ã o d a v a r í o l a e S e r v iç o s R e g io n a i s d e S a ú d e P ú b li c a .

N o l a b o r a t ó r i o j á f o r a m e x a m i n a d o s 271 e s p é e i m e n s , d o s q u a is o s p r i m e i r o s 90 r e s u l t a d o s f o r a m a lv o d e p u b l i c a ç ã o a n t e r i o r (5 ).

M A T E R IA L E M É T O D O S

1) D e 181 p a c i e n t e s , f o r a m e x a m i n a d o s 105 e s p é e i m e n s d e c r o s t a s e 76 d e lí q u id o v e s i c u i a r / p u s t u l a r .

E s s e n c i a l m e n t e f o r a m u s a d o s o s m é t o d o s d e t r a b a l h o p r e c o n i z a d o s p e l a O r g a n i z a ç ã o M u n d i a l d e S a ú d e e o s j á d e s c r i t o s (3, 5) c o m d u a s a l t e r a ç õ e s a q u i a p r e s e n t a d a s .

a ) T a m p ã o M c I l v a i n e 0,0 0 4 M p H 7 ,2 c o m a n t i b i ó t i c o s , e m s u b s t i t u i ç ã o a s a l i n a P B S n a s u s p e n s ã o d o s e s p é e i m e n s í ' 2 ) .

* T r a b a l h o d o L a b o r a t ó r i o d e V í r u s V e s i c u l a r e s e E x a n t e m á t i c o s , I n s t i t u t o P r e s i d e n t e C a s t e l l o B r a n c o ,

d a F u n d a ç ã o I n s t i t u t o O s w a l d o C r u z , C a i x a P o s t a l 16, Z C - 2 4 , G B .

** P r o f e s s o r - T i t u l a r , r e s p o n s á v e l p e l o s L a b o r a t ó r i o s i a V i r u s .

(2)

b ) A s m e m b r a n a s c ó r i o - a l a n t ó i - c a s (M C A ) i n o c u l a d a s , d e p o is d e e x a m i n a d a s f o r a m t r i t u r a d a s e m h o m e g e n e i z a d o r e l é t r i c o O m n i - m i x e r , s e m a d i ç ã o d e d i- l u e n t e , p a r a e s t o c a r a s a m o s t r a s d e v ír u s i s o la d a s . E s s a s s u s p e n s õ e s , c l a r i f i c a d a s p o r c e n t r i f u g a ç ã o , f o r a m u s a d a s c o m o a n t í g e - n o e m t e s t e d e c o n f i r m a ç ã o d e d i a g n ó s t i c o a t r a v é s p r e c i p i t a ç ã o e m a g a r - g e l , o u p a r a e v e n t u a i s r e i n o c u l a ç õ e s e m o v o s e m b r i o - n a d o s q u a n d o h a v i a d ú v i d a s n o d i a g n ó s tic o .

2) T e m p o d e a b a i x a m e n t o d a M C A e

s e n s i b i l i d a d e a o v í r u s d a v a r í o l a .

L o g o a p ó s o a b a i x a m e n t o d a s m e m b r a n a s c ó r i o - a l a n t ó i c a s e t a m b é m 1, 2, 3 e 4 h o r a s a p ó s , f o i i n o c u l a d a e m o v o s e m b r i o - n a d o s , u m a m e s m a d i l u i ç ã o d o v í r u s d a v a r í o l a . P a r a m e l h o r c o n s e r v a ç ã o d o t í t u lo d a s u s p e n s ã o d u r a n t e a s c in c o h o r a s n e c e s s á r i a s a o e x p e r i m e n t o , f o i u s a d o t a m p ã o M c I l v a i n e c o m l e i t e d e s n a t a d o a 20% (1 ). A s m e m b r a n a s f o r a m c o l e t a d a s , e x a m i n a d a s e c o n t a d a s a s le s õ e s p r o d u z i d a s p e lo s v í r u s ( p o c k s ) , c o m o a n t e r i o r m e n t e d e s c r i t o (5 ).

R E S U L T A D O S

1) I s o l a m e n t o d e a m o s t r a s d e v a r í o l a .

D e 181 e s p é c i m e n s e x a m i n a d o s n e s t e p e r í o d o , 73 a m o s t r a s d e v í r u s d a v a r í o l a f o r a m i s o l a d a s e m M C A e i d e n t i f i c a d a s s o r o - lò g i c a m e n t e a t r a v é s t e s t e s d e p r e c i p i t a ç ã o e m a g a r - g e l . A s t a x a s d e i s o l a m e n t o a l c a n ç a r a m 3 7 % e 4 3 % , r e s p e c t i v a m e n t e p a r a

e s p é c i m e n s d e c r o s t a s e lí q u id o v e s i c u l a r / p u s t u l a r ( T a b e l a 1).

A T a b e l a 2 a p r e s e n t a o s r e s u l t a d o s d e i s o l a m e n t o e m r e l a ç ã o à d e m o r a d o e s p é - c im e m e m c h e g a r a o l a b o r a t ó r i o e s e r e x a m i n a d o .

A T a b e l a 3 a p r e s e n t a a r e l a ç ã o e n t r e o r e s u l t a d o d o e x a m e l a b o r a t o r i a l e o d i a g n ó s tic o c lí n ic o , q u a n d o ê s t e ú l t i m o e s t a v a i n d i c a d o n a s f i c h a s d e i n f o r m a ç ã o q u e a c o m p a n h a m o s e s p é c i m e n s . N ã o n o s fo i p o s s ív e l i s o l a r v í r u s d e 15 c a s o s c o m d i a g n ó s t ic o c lí n ic o “ v a r í o l a ” e p o r o u t r o la d o . c o n s e g u i m o s i s o l a r v í r u s d a v a r í o l a d e d o is c a s o s c o m d i a g n ó s t i c o c lí n ic o “ n ã o é v a r í o l a ” .

O s c a s o s e m q u e o d i a g n ó s t i c o l a b o r a t o r i a l c o n f i r m o u o d i a g n ó s t i c o c lí n ic o , i n c lu e m o d e u m a g e s t a n t e e s e u f i lh o , o q u a l v e io a n a s c e r c o m v a r í o l a c l í n i c a e m f a s e d e v e s í c u la s , e n q u a n t o a m ã e a p r e s e n t a - v a - s e j á e m f a s e d e c r o s t a s .

2) T e s t e s d e p r e c i p i t a ç ã o e m a g a r - g e l .

O s t e s t e s d e p r e c i p i t a ç ã o e m a g a r - g e l , o s q u a i s r e s u l t a r a m p o s i ti v o s e m a p e n a s 23% d o s c a s o s a n t e r i o r m e n t e d e s c r i t o s (5) a s a n d o d i r e t a m e n t e c o m o a n t í g e n o o e s - p é c i m e m r e c e b i d o d o p a c i e n t e , f o r a m p o s i ti v o s e m t o d o s o s c a s o s e m q u e se u s o u t r i t u r a d o s d e M C A c o m a b u n d a n t e s le s õ e s t í p i c a s d e v a r í o l a .

3) S e n s i b i l i d a d e d a M C A a o v í r u s d a v a r í o la .

O s r e s u l t a d o s d e t r ê s e x p e r i m e n t o s , p r o p o s to s c o m o d e s c r i t o e m “ M a t e r i a l e M é

-T a b e l a 1

R E S U L T A D O S D O E X A M E D E E S P É C I M E S R E C E B ID O S D E M A IO D E 1969 A M A IO D E 1970

E s p é c im e n s

C r o s t a s

L íq u id o V e s i c u l a r / P u s t u l a r

T o t a l

V a r ío l a

39 (3 7 % )

34 (4 3 % )

73

N e g a tiv o

66

42

108

T o t a l

105

76

(3)

Nov.-Dezembro, 1970

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

373

T a b e l a 2

T A X A D E IS O L A M E N T O D E V IR U S D A V A R ÍO L A E M R E L A Ç Ã O A O N Ú M E R O D E D IA S E N T R E A C O L E T A E O E X A M E D O S E S P É C IM E N S

D ia s

0 a 5

6 a 8

9 a 11

12 a 14

15 o u m a i s

S / d a í a c o le t a

T o t a l

E s p é c im e n s *

41

22

60

141

A m o s t r a s d e V í r u s I s o l a d a s

30

9

4

1

25

4

73

(7 3 % )

(4 1 % )

( 4 4 % )

(2 5 % )

(4 1 % )

N ã o i n c l u i 4 0 e s p é c i m e n s c o m d i a g n ó s t i c o c l í n i c o ‘•N ã o é v a r í o l a " .

t o d o s ” , f o r a m a n a l i s a d o s e s t a t i s t i c a m e n te . O s r e s u l t a d o s d e s s a a n á l i s e f o r a m c o m p a r a d o s c o m t r a b a l h o s j á d e s c r i t o s ( 4 ) e m

q u e a c o n t a g e m d e p o c k s r e s u l t o u e m d i s t r i b u i ç ã o n o r m a l . A a n á l i s e d e v a r i â n c i a , c o m o n í v e l d e s i g n i f i c â n c i a d e 5 c; , d e m o n s t r o u s e r e m n o s s o s r e s u l t a d o s c o n s i s t e n t e s c o m o s d a q u e l e s a u t o r e s .

D IS C U S S Ã O

A t a x a d e i s o l a m e n t o d e v í r u s a p a r t i r d e e s p é c i m e n s d e lí q u id o v e s i c u l a r / p u s t u - l a r , m a i o r q u e a p a r t i r d e c r o s t a s ( T a b e l a 1 ), d e v e s e r i n t e r p r e t a d a t e n d o e m v i s t a q u e a m a i o r i a d o s e s p é c i m e n s d e lí q u id o v e s i c u l a r / p u s t u l a r fo i o r i u n d a d e á r e a s

T a b e l a 3

D IA G N Ó S T IC O L A B O R A T O R IA L E M R E L A Ç Ã O A O D IA G N Ó S T IC O C L ÍN I C O

D i a g n ó s t i c o L a b o r a t o r i a l

D i a g n ó s t i c o C lín ic o . T o t a l

V a r ío l a N e g a tiv o

V a r í c l a 31

₁₅

46

D u v id o s o 5 23 28

N ã o é v a r í o l a 2 40 42

N ã o i n d i c a d o 35 30 65

(4)

p r ó x i m a s a o l a b o r a t ó r i o , d e m o r a n d o m e n o r t e m p o e n t r e a c o l e t a e o e x a m e .

A T a b e l a 2 m o s t r a a i n f l u ê n c i a d o t e m p o q u e o s e s p é c i m e n s d e m o r a r a m p a r a c h e g a r a o l a b o r a t ó r i o , d e s d e q u e n ã o s ã o t r a n s p o r t a d o s s o b r e f r i g e r a ç ã o . É i m p o r t a n t e n o t a r q u e d o s 141 e s p é c i m e n s c o n s i d e r a d o s , s ò m e n t e 41 f o r a m e x a m i n a d o s c o m m e n o s d e 6 d i a s d a c o l e t a ,e a i n f l u ê n c i a d ê s t e f a t o n a t a x a d e i s o l a m e n t o d e v ír u s . F o r a m e x c lu í d o s 40 c a s o s c o m d ia g n ó s t i c o c lín ic o “ n ã o é v a r í o l a ” , p o is a l t e r a r i a m a o b s e r v a ç ã o j á r e g i s t r a d a e m d e s c r i ç ã o a n t e r i o r (5) e q u e é c o n f i r m a d a p r e s e n t e m e n t e c o m m a i o r n ú m e r o d e c a s o s .

A T a b e l a 3 é p o r si m e s m a r e s u l t a d c d e m e l h o r i a cias c o n d iç õ e s d e c o l e t a e e n vio d e e s p é c i m e n s p a r a e x a m e , in c l u s i v e c o m a i n c l u s ã o d a f i c h a e p id e m io l ó g ic a c o r r e s p o n d e n t e . A i n d i c a ç ã e d o d i a g n ó s t i c o c ií n ic o , p o r p a r t e d o m é d i c o e p id e m io - l o g i s í a q u e e x a m i n a o p a c i e n t e e r e m e t e o s e s p é c i m e n s p a r a e x a m e d e l a b o r a t ó r i o , n o s p e r m i t i u t e s t a r a e f i c i ê n c i a d o s m é t o

-T a b e l a 4

O R I G E M D O S E S P E C IM E N S E X A M IN A D O S

C e a r á 10

P e r n a m b u c o 9

S e r g i p e 10

A la g o a s 5

G o iá s 7

D i s t r i t o F e d e r a l 1

B a h i a 70

P a r a n á 1

E s p í r i t o S a n t o 13

R io d e J a n e i r o 15

G u a n a b a r a 32

N ã o a n o t a d o 3

T o ta l

181

d o s. D e 31 c a s o s c o m d i a g n ó s t i c o c lí n ic o “ v a r í o l a ” , n ã o n o s fo i p o s s ív e l i s o l a r v í r u s d e iõ : d e v e s c r n o t a d o q u e t o d o s ê s - s e s 15 e s p é c i m e n s c h e g a r a m a o l a b o r a t ó rio c o m m a i s d e 16 d i a s a p ó s a c o le t a . E m d o is c a s o s c o m d i a g n ó s t i c o c li n ic o “ n ã o é v a r í o l a ’’, f o i is o la d o v í r u s d o s e s p é c i - m e r .s ; n a s f i c h a s d e p e d id o tíe e x a m e h a v ia i n d i c a ç ã o d e c o n t a t o d o p a c i e n t e c o m p e s s o a s d o e n t e s c u jo d i a g n ó s t i c o e r a d u v i d o so .

A T a b e l a 4 t e m a i n t e n ç ã o d e m o s t r a r a s d i f i c u l d a d e s d e t r a n s p o r t e q u e d e v e m s e r v e n c i d a s p a r a q u e o s e s p é c i m e n s c h e g u e m a o l a b o r a t ó r i o e m te m p o v iá v e l a o is o l a m e n t o d e v í r u s , s e n d o m u i t o s o r i g i n á r i o s d e á r e a s r e m o t a s d o s r e s p e c ti v o s E s ta d o s .

O s r e s u l t a d o s d o s t r ê s e x p e r i m e n t o s p r o p o s t o s p a r a e s t u d a r a s e n s i b i l i d a d e d o s o v o s u s a d o s n a n o s s a r o t i n a d e t r a b a l h o , n ã o r e v e l a r a m d i f e r e n ç a s s i g n i f i c a t i v a s e n t r e o n ú m e r o d e p o c k s . O s d a d o s c o n s e g u i d o s m o s t r a m q u e a n o s s a r o t i n a u s a n d o o v o s e n t r e 1 e 2 h o r a s a p ó s o a b a i x a m e n t o d a m e m b r a n a c ó r i o - a l a n t ó i c a é a d e q u a d a .

A s u b s t i t u i ç ã o d e s a l i n a P B S p o r t a m p ã o M c l i v a i n e p a r a a s u s p e n s ã o d o s e s p é c i m e n s a e x a m i n a r , f o i a d o t a d a n e s t e s e g u n d o a n o . d e v id o a v a r i a ç õ e s d e t í t u lo s o b s e r v a d o s e m s u s p e n s õ e s d e v í r u s v a c c í n ic o m a n t i d a s n o l a b o r a t ó r i o p a r a p r o v a s d e s o r o n e u t r a l i z a ç ã o . E m r e v i s ã o b i b l i o g r á f i c a fo i e n c o n t r a d o u m t r a b a l h o

(2) o q u a l d e s c r e v e f e n ô m e n o s d e a g r e g a ç ã o d e p a r t í c u l a s d o s v í r u s d o g r u p o P o x , e m f u n ç ã o d a c o n c e n t r a ç ã o d e f o s f a t o s n o m e io .

N e s te s e g u n d o a n o , só c o n s i d e r a m o s c o m d i a g n ó s t i c o d e v a r í o l a , o s c a s o s e m q u e is o l a m o s v í r u s e m o v o s e m b r i o n a d o s (le s õ e s c a r a c t e r í s t i c a s n a m e m b r a n a c ó r i o - a l a n t ó i c a ) e q u e f o r a m c o n f i r m a d o s s o r o ló g i- e a m e n t e p o r t e s t e s d e p r e c i p i t a ç ã o e m a g a r .

A G R A D E C IM E N T O S

(5)

Nov.-Dezembro, 1970

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

375

S U M M A R Y

T h e a u t h o r s r e l a t e t h e r e s u l t s w h i c h h a v e b e e n ó b t a i n e d d u r i n ç ; t h e s e c o n d y e a r o f w o r k i n a u n i t s e t u p t o s u p p o r t t h e N a t i o n a l

S m a l l p o x E r r a

-d i c a t i o n C a m p a m g i n B r a z ü .

T h e e x a m i n a t i o n o f 1 0 5 c r u s t s a n ã 7 6 v e s l c u l a r / p u s t u l a r f l u i d s p e c i m e n s r e s u l t s i n t h e i s o l a l i o n o f 3 9 a n d 3 4 s m a l l p o x s t r a i n s , r e s p e c t i v e l y ( T a b l e i j . T h e t i m e o f a r r i v a l t o t h e l a b o r a t o r y , i u j l a e n c e d t h e v i r u s i s o l a l i o n r a t e ( T a b l e 2 ) .

C l o s e r e l a t i o n s h i p i v a s r e a c h e d b e t i o e e n c l i n i c a i d i a g n o s i s a n d v i r u s i s o l a t i o n r a t e ( T a b l e 3 ) w h e n b o i h d a t a w e r e a v a i l a b l e f o r c o m p a r i s i o n .

T h e i n o c u l a t l o n o f e g g s b e t w e n 1 t o 2 h o u r s a f t e r c h o r i o - a l l a n t o i c m e r n -b r a n e d r o p p i n g w a s s h o w n a s a d e q u a t e i n c o n d i t i o n s u n d e r w h i c h t e s t s w e r e c a r r i e d - o u t .

T h e l a b o r a t o r y i s g e t t i n g r e g u l a r l y m o r e s p e c i m e n s f o r d i a g n o s i s .

B I B L I O G R A F I A

1 — B O U T L E R , E.A. — T h e t i t r a t i o n of 4 v a c c in ia l n e u t r a liz in g a n tib o d y o n c h o r io - a l la n t o ic m e m b r a n e s , J . H yg., C a m b ., 5 5 :502-512, 1957.

2 — G A L A S SO , G .J. & S H A R P , D .G . — V íru s p a r ti c le a g g r e g a tio n a n d p la q u e f o r m in g u n it, J . Im m u n o l., 55:339-347, 0 1962.

3 — G u id e to t h e L a b o r a to r y D ia g n o s is of S m a llp o x W o rld H e a lth O rg a n iz a tio n ,

G e n e v a , 1969.

M c C A R T Y , K ., D O W N IE , A .W . & A R M IT A G E , P . — T h e A n tib o d y r e s p o n s e in m a n fo llo w in g in f e c tio n w ith v ir u s e s o f t h e p o x g ro u p , J . H yg., C a m b ., 56:84-100, 1958.