Profa. Patricia Dalzoto Departamento Patologia Básica Universidade Federal do Paraná

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Microbiologia da água

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Microbiologia da água

Águas naturais

Rios

Estuários

Oceanos

Água potável

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Análise microbiológica da água

Visa

investigar

a

presença

de

micro-organismos

potencialmente patogênicos em concentrações que

comprometam o uso da água para os fins a que se

destina:

Consumo humano e animal

Recreação

Navegação

Irrigação

Paisagismo

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Micro-organismos patogênicos presentes na

água

Bactérias Salmonella spp. Vibrio cholerae Shigella spp.

Yersinia enterocolitica: gastroenterite aguda Escherichia coli: linhagens patogênicas: enterites Clostridium perfringens: enterite, gangrena gasosa Vibrio parahaemolyticus: gastroenterites

Pseudomonas aeruginosa: infecções nos olhos, ouvidos Staphylococcus aureus: infecções cutâneas, garganta e

intoxicações alimentares

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Micro-organismos patogênicos presentes na

água

Fungos

aquáticos: saprófitas, parasitas de peixes oriundos do solo: leveduras

Candida albicans: infecções da pele, mucosas

fungos dermatófitos

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Micro-organismos patogênicos presentes na

água

Protozoários

ciliados

Giardia lamblia: esporos resistentes ao cloro

amebas

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Micro-organismos patogênicos presentes na

água

Vírus

–

Hepatites A e B

–

Gastroenterite infecciosa não bacteriana

–

Poliomielite

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Exame colimétrico da água

Objetivo

Avaliar as condições sanitárias da água, investigando a presença

de bactérias do grupo coliforme, que atuam como indicadores

de contaminação fecal.

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Contaminação fecal

Podem estar presentes nas fezes:

Bactérias patogênicas

Pseudomonas Enterococcus Salmonella Shigella Shigella Vibrio

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Contaminação fecal

Coliformes totais

Escherichia coli

Enterobacter

Klebsiella

Citrobacter

Coliformes fecais

Presentes nas fezes e em outros habitas

Coliformes fecais

E. coli

Coliformes termotolerantes

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Organismos indicadores

Coliformes totais , fecais e termotolerantes são

indicadores de contaminação fecal.

Características dos micro-organismos indicadores:

Ocorrência e desaparecimento concomitante com

patógenos;

Densidade populacional diretamente relacionada com o

grau de contaminação;

Maior sobrevida que os patógenos;

Ausência em água potável;

Fácil detecção e recuperação laboratorial;

Não prejudicial às pessoas e animais;

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Indicador ideal

A bactéria indicadora deve:

1. ser propícia para a análise de todos os tipos de água: torneira, rios,

subterrânea, barragens, estuários, oceanos, águas residuais.

2. estar presente sempre que microrganismos entéricos também estejam

presentes.

3. sobreviver mais tempo que os patogênicos entéricos mais resistentes. 4. não deve reproduzir-se na água contaminada (para não inflacionar os 4. não deve reproduzir-se na água contaminada (para não inflacionar os

resultados).

5. O método usado para detecção do indicador deve ser específico (i.e., a

presença de outras bactérias não deve gerar resultados positivos) e deve ser suficientemente sensível para detectar níveis baixos do indicador.

6. O método usado deve ser fácil de realizar.

7. O indicador deve ser inofensivo para o ser humano.

8. O nível da população da bactéria indicadora na água contaminada deve

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Coliformes totais

Bacilos gram-negativos;

Aeróbios ou anaeróbios facultativos;

Não formadores de esporos;

Oxidase negativos;

Capazes de se desenvolver na presença de sais biliares

ou agentes tensoativos;

Fermentam a lactose com produção de ácido, gás e

a;deído a

35,0 +_ 0,5

o

_{C em 24-48 horas}

_;

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Coliformes fecais – E.coli

Fermenta lactose e manitol, com produção de ácido e

gás a

44,5 +_ 0,2

o

_{C em 24 horas;}

Produz indol a partir do triptofano;

Oxidase negativa;

Não hidrolisa a uréia;

Atividade de B-galactosidase e B-glucoronidase;

Mais específico indicador de contaminação fecal recente

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Coliformes termotolerantes

Subgrupo dos coliformes.

Fermentam lactose a

44,5 +_ 0,2

o

C em 24 horas.

E. coli é o principal representante

Enterococcus – grupo dos estreptococos fecais

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1. Prova presuntiva para coliformes totais

Meio de cultura: Caldo Lactosado.

Temperatura e tempo de incubação: 35,0 +/- 0,5

o

C – 24

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2. Prova confirmatória para coliformes

totais

Meio de cultura: Caldo Lactosado Verde Bile Brilhante.

Temperatura e tempo de incubação: 35,0 +/- 0,5

o

C – 24

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3. Prova confirmatória para

coliformes

fecais

3.1. Quantitativa

Meio de cultura: Caldo EC.

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Prova confirmatória para coliformes fecais

3.2. Qualitativa

Ágar Teague (EMB – eosina azul de metileno)

Contém lactose e sucrose (mas não glicose). Azul de metileno inibe gram positivas.

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E. coli em ágar Teague

Colônias pequenas (2mm), negras, sem pigmento verde

metálico difundido no meio;

Colônias pequenas (2mm), negras com pigmento verde

metálico difundido no meio;

Colônias com centro negro e bordos róseos, com ou sem

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Resolução CONAMA 20/86 – Tabelas para

classificação de águas

Classes Especificações Balneabilidade Utilização

Especial Totais e fecais ausentes Excelente Abastecimento doméstico sem tratamento. Equilíbrio das comunidades aquáticas. I Até 200 fecais

Até 1000 totais

Excelente Abastecimento com tratamento simplificado. Proteção das comunidades aquáticas. Recreação primária.

Irrigação de hortaliças e frutas cruas. Aquicultura.

II Entre 200-1000 fecais Excelente Abastecimento com tratamento convencional. II Entre 200-1000 fecais

Entre 1000-5000 totais

Excelente Abastecimento com tratamento convencional. Proteção das comunidades aquáticas.

Recreação primária.

Irrigação de hortaliças e frutas cruas (fervida). Aquicultura.

III Entre 1000-4000 fecais Entre 5000-20000 totais

Imprópria Abastecimento com tratamento convencional. Irrigação de cereais e forrageiras.

Dessebentação de animais. Navegação.

Harmonia paisagística.

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Resolução CONAMA 274/00 – classificação das águas doces, salobras e salinas destinadas à balneabilidade (recreação de contato primário)

Categoria Coliformes fecais (NMP/100 mL) Escherichia coli (NMP/100 mL) Enterococos (NMP/100 mL) Própria Excelente <250 em 80% das amostras <200 em 80% das amostras <25 em 80% das amostras

Boa <500 em 80% das <400 em 80% das <50 em 80% das Boa <500 em 80% das amostras <400 em 80% das amostras <50 em 80% das amostras Satisfatória >1000 em mais de 20% das amostras >800 em mais de 20% das amostras >100 em mais de 20% das amostras Imprópria >1000 em mais de 20% das amostras >800 em mais de 20% das amostras >100 em mais de 20% das amostras