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Quimiotipos, Extracción, Composición y Aplicaciones del Aceite Esencial de
Lippia
alba
LINDE, G.A.1; COLAUTO, N.B.1*; ALBERTÓ, E.2; GAZIM, Z.C.1
1Universidade Paranaense, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia Aplicada à Agricultura, Laboratório de Química de Produtos Naturais, Praça Mascarenhas de Moraes, 4282, Umuarama–PR, 87.502–210, Brasil. 2Universidad Nacional de General San Martín, Instituto de Investigaciones Biotecnológicas-Instituto Tecnológico de Chascomús, CC 164. 7130 Chascomús, Buenos Aires, Argentina. *Autor para correspondência: nbc@unipar.br
RESUMO: Quimiotipos, extração, composição e uso do óleo essencial de Lippia alba. Lippia alba é uma planta amplamente distribuída nas zonas tropicais, subtropicais e temperadas das Américas, África e Ásia. O óleo essencial de L. alba tem sido amplamente estudado, entretanto apresenta variações de produção. Portanto este estudo teve como objetivo realizar uma revisão dos principais quimiotipos, métodos de extração, composição e aplicação do óleo essencial de L. alba. Neste estudo são discutidos os principais quimiotipos e sua relação com fatores genéticos e características morfológicas. Também são discutidos os fatores que afetam o rendimento de produção, composição química, métodos de extração e do uso e da atividade biológica do óleo essencial de L. alba. Apesar da vasta literatura sobre os óleos essenciais de L. alba, ainda desenvolvimento de aplicações para a produção de cosméticos, fármacos e
alimentos, bem como faltam definições agronomicas sobre o cultivo e melhoramento desta
planta.
Palavras chave: Lippia alba, óleo essencial, quimiotipo, atividade biológica, método de extração.
ABSTRACT: Chemotypes, extraction, chemical composition and use of lippia alba essential oil. Lippia alba is a plant widely distributed in tropical, subtropical and temperate zones of the
Americas, Africa and Asia. The essential oil of L. alba has been widely studied and there are
many variations in the production process. Therefore, this study is aimed at conducting a review of the main chemotypes, extraction methods, composition and application of the essential oil
of L. alba. In this study, the main chemotypes and its relation to genetic and morphological
characteristics are discussed. It also discusses the factors that affect the yield, chemical composition, extraction methods and the use and the biological activity of the essential oil of L. alba. Despite the vast literature on the essential oils of L. alba, there is still a lack of development
in its application for the production of cosmetics, pharmaceuticals and food, as well as a lack of agronomic definitions for its cultivation and genetic improvement.
Key words: Lippia alba, essential oil, chemotype, biological activity, extraction method.
Recebido para publicação em 28/02/2015
Aceito para publicação em 19/10/2015 10.1590/1983-084X/15_037
Los aceites esenciales producidos por las plantas aromáticas son compuestos volátiles, naturales, complejos, que poseen un fuerte
olor característico (Bakkali et al., 2008). Las
plantas productoras de aceite esencial pertenecen principalmente a las familias Apiaceae, Lauraceae, Myristicaceae, Lamiaceae, Asteraceae, Myrtaceae, Rosaceae, Piperaceae, Verbenaceae y Rutaceae
(Simões & Spitzer, 2003).
El género Lippia comprende acerca de 200 especies distribuidas por las regiones tropicales, subtropicales y templadas de la América, África y Asia. Lippia alba (Mill.) N. E. Br. ex Britton y
P. Wilson (Verbenaceae), conocida en Brasil popularmente como falsa–melisa brasileña o erva– cidreira brasileira (hierba de limón brasileña), es un arbusto aromático comercialmente cultivado en la América Latina en México, Colombia, Paraguay,
Brasil, Uruguay y Argentina (Mamun-or-Rashid et al., 2013). También se la denomina con otros
de aceites esenciales. Los aceites esenciales se encuentra en las estructuras celulares de la
epidermis, más específicamente de las glándulas
secretoras especializadas conocidas como tricomas glandulares (Simões & Spitzer, 2003). Sus miembros tienen diferentes formas con ápice agudo, base cuneiforme o decumbente y bordes dentados o
irregulares (United Nations, 2005). El aceite esencial
de L. alba está compuesto principalmente por dos tipos de compuestos químicos, los terpenoides y los
fenilpropanoides (Hennebelle et al., 2008b). Este
estudio tuvo como objetivo realizar una revisión de los principales quimiotipos, métodos de extracción, composición y aplicación del aceite esencial de L. alba.
Quimiotipos de Lippia alba
La composición química del aceite esencial de L. alba es muy variable, lo que indica la existencia
de un gran número de quimiotipos. Atti et al. (2002)
reportaron tres tipos fundamentales de quimiotipos con actividad farmacológica distinta en función de la mayor concentración de citral–mirceno, citral–limoneno y carvona–limoneno. Tavares et
al. (2005) encontraran otros tres quimiotipos del
aceite esencial de L. alba de acuerdo con diferentes
regiones del Brasil. López et al. (2011) evaluaron la
composición del aceite esencial de quimiotipos de L. alba brasileñas y encontraron seis componentes principales: citral, geraniol, trans–β–cariofileno, carvona, limoneno y biciclosesquifelandreno.
Mesa–Arango et al. (2009) identificaran diversos
quimiotipos en diferentes regiones de Colombia,
tales como citral y carvona. No obstante Stashenko et al. (2003) identificaron los quimiotipos carvona y limoneno en Colombia y Lorenzo et al. (2001) hallaron el quimiotipo lilanol en el Uruguay.
Hennebelle et al. (2006) compararon la
composición química del aceite esencial de L. alba recogidas en diferentes territorios franceses
y sugirieron criterios para la clasificación de los
quimiotipos. Basado en estos criterios el aceite esencial de L. alba está constituido por siete quimiotipos. Pertenecen al quimiotipo I los aceites
que poseen citral, linalol, β-cariofileno como sus
principales componentes (cuatro subtipos dentro
de este quimiotipo). Los aceites incluidos en el
quimiotipo II tienen tagetenona como su principal constituyente. Aquellos que poseen limoneno en grandes cantidades y con una cantidad variable de carvona o cetonas monoterpénicas en lugar de carvona están incluidos en quimiotipo III (dos
subtipos). Los quimiotipos restantes se caracterizan por presentar componentes principales específicos
en su composición, tales como quimiotipo IV:
mirceno, V: γ-terpineno, VI: canfora-1,8-cineol y
VII: estragol.
A pesar que diversos autores propusieron
una única clasificación para los quimiotipos del aceite
esencial de L. alba, esto en la práctica no es posible debido a los diversos factores que pueden afectar la composición de los constituyentes del aceite. Esta variabilidad en la composición química del aceite
constituye una dificultad para la comercialización
de este producto.
Los quimiotipos y los factores genéticos
Zoghbi et al. (1998) analizaron los aceites
esenciales de las partes aéreas de especímenes de L. alba y clasificaron a las plantas en tres grupos.
La primera, que se caracteriza por 1,8-cineol (35%), limoneno (18%), carvona (9%) y sabineno (8%); la segunda por limoneno (32%), carvona (32%) y mirceno (11%); y la tercera por neral (14%), geranial (22%), germacreno D (25%) y β–cariofileno (10%).
Estos autores concluyeron que la diferencia en la composición química se debe a la diversidad
genética (cantidad de cromosomas diferentes) de
las plantas y sugirieron la ocurrencia de un proceso
de especiación. Jannuzzi et al. (2010) reportaron
variación fenotípica entre las plantas, sugiriendo una variabilidad genética, característica de plantas
que no han tenido un proceso de domesticación. Tavares et al. (2005) señalaron que la composición
química de los aceites esenciales de L. alba es determinada en gran parte por factores genéticos.
Por otra parte, Hennebelle et al. (2006) reportaron
que tres quimiotipos de L. alba conservaron la composición del aceite esencial citral, linalol y carvona en diferentes condiciones ambientales o edafoclimáticas y sugirieron que las características genéticas, más que los factores ambientales, son las responsables de la composición del aceite esencial. Pandeló et al. (2012) informaron que la producción del aceite esencial está relacionada con la expresión de tres genes de síntesis de terpeno putativos, clonados a partir del quimiotipo linalol de L. alba. Las plantas o quimiotipos de L. alba que
son genéticamente estables y tienen baja influencia
ambiental son los preferidos para el cultivo debido a la menor variación en los componentes químicos del aceite esencial.
Lima et al. (2015) proponen el uso de
Sin embargo, debido a la amplia variación fenotípica y genotípica entre los quimiotipos podría lograrse grandes avances en pocas generaciones de selección. Hay cerca de 200 especies descriptas para el género Lippia y 60 taxones infraespecíficos
(Pascual et al., 2001). Yamamoto et al. (2008) citan una relación inversa entre la producción de la hoja
y la producción de aceite esencial y sugieren un mejoramiento genético por la transferencia de la
producción de masa de hoja del genotipo citral
a otros quimiotipos o de la producción del aceite esencial para quimiotipos citral y mirceno/canfora en que es naturalmente más grande el tamaño de
la hoja. Rocha et al. (2015) definieron seis primers
de microsatélites y Santos et al. (2012) ocho primers
polimórficos. Ambos estudios son una contribución
importante para informar la diversidad genética y la variación de los alelos, proporcionando importantes
herramientas para caracterizar los bancos de
germoplasma y para los programas de mejoramiento genético.
Factores que afectan el rendimiento de la producción y la composición química del aceite esencial de L. alba
Otros factores, además de la diversidad genética, pueden afectar la producción de metabolitos secundarios que actúan como una interfaz química entre las plantas y el ambiente. Estímulos ambientales pueden redirigir la ruta de biosíntesis cambiando la composición química, producción y actividad biológica de los aceites esenciales en las plantas, tales como interacción planta–microorganismo, planta–insecto o planta– planta. Para L. alba, Teles et al. (2012) reportaron que las plantas son muy vulnerables al ataque de
hormigas como Atta spp. afectando la producción del aceite.
Yamamoto et al. (2008) evaluaron el
desempeño agronómico de diez genotipos de L. alba pertenecientes a cuatro grupos químicos en diferentes regiones de São Paulo, Brasil. Para estos autores los aspectos edafo-climáticos afectan la cantidad de compuestos del aceite esencial de L. alba, sin embargo no se detectó ninguna variación cualitativa, tal como una nueva sustancia o la pérdida de otros. Para estos autores el ambiente
afectó la cantidad de linalol y 1,8-cineol; limoneno y carvona; neral y β-mirceno; pero no fue así para β-mirceno, canfora, cariofileno, α-fenchene y
geranial. Idealmente, los principales componentes del aceite deben ser preferentemente de naturaleza genética, con baja interferencia del ambiente en sus alteraciones.
Zambrano-M et al. (2013) obtuvieron
resultados similares con L. alba cultivada en campo en que las diferencias observadas en composición
química de estos aceites estuvieron asociadas con las especies y con las accesiones dentro de éstas. En la accesión cítrica de L. alba los componentes
predominantes fueron el geranial (50%) y el neral (32%); mientras que el carvona (47%) y el limoneno (36%) predominaron en la accesión típica. Tavares et
al. (2005) analizaron el aceite esencial de las hojas
de L. alba en tres distintos quimiotipos brasileños concluyendo que la composición del aceite esencial obtenida de los quimiotipos estudiados no fue debido a factores ambientales. Estos resultados se
contraponen con los obtenidos por Teles et al. (2012) quienes verificaron el efecto del origen geográfico
del contenido y la composición del aceite esencial de L. alba. Para estos autores la carvona tuvo grandes variaciones en su contenido entre las diferentes regiones que van desde 25% a 60% y limoneno tuvo
entre 10% y 18%. Silva et al. (2006) encontraron
citral como el constituyente más abundante que van
desde 71% y 79%. Una vez más la origen geográfico
y las condiciones edafo-climáticas resultaron un factor crucial en la composición química de los aceites esenciales de L. alba.
Los factores ambientales y la etapa de
desarrollo de la planta pueden influir directamente
en la calidad y cantidad de los aceites esenciales.
Para Martins et al. (2000) el rendimiento de aceite
esencial de L. alba varió de 0,5% a 1,3% en la
primera cosecha y 0,6% a 0,9% en la segunda. También hubo variaciones de la productividad del aceite esencial desde 4,7 hasta 10,2 L/ha y de 2,4 a 3,2 L/ha después de la primera y segunda cosechas,
respectivamente. Los resultados muestran el mejor desempeño de la mayoría de los materiales genéticos de L. alba en las condiciones de verano del sur de Brasil. El análisis del aceite esencial de
las primeras muestras de la cosecha identificaron
cuatro componentes y después de la segunda
cosecha, ocho constituyentes. Linalol fue el principal constituyente en ambas cosechas del cual se obtuvo
de 72% a 92% después de la primera y de 46% a
76% después de la segunda cosecha.
Oliveira et al. (1998) señalan una menor
producción de aceite esencial al mediodía, indicando que la cantidad de componentes químicos de la planta varían en función del momento de recolección, indicando la mañana como el mejor momento para obtener mayor cantidad de aceite esencial (Simões &
Spitzer, 2003). Santos et al. (2004) caracterizaron la
anatomía de las estructuras secretoras y evaluaron
el efecto de diferentes tiempos de cosecha en el
h para ambas estaciones. El tiempo de la cosecha
también afectó la composición del aceite esencial para carvona que obtuvo el más alto contenido de
62% a las 9 h, mientras para limoneno el mas alto contenido fue a las 15 h.
Para L. alba recogida en Maranhão, Brasil,
donde el clima es cálido, Craveiro et al. (1981)
obtuvieron β-cariofileno (24%), geranial (13%), neral
(10%), 2-undecanona (9%) y mirceno (2%). Gomes et al. (1993) con hojas frescas de L. alba recogidas en Curitiba, Brasil, donde el clima es frío, obtuvieron
β-cariofileno (30%) y geranial (27%). Stefanini et al. (1998) trabajando con reguladores del crecimiento
de L. alba encontraron que el rendimiento del aceite
fue mejor en el verano para el tratamiento con GA3 de
50 mg/L y la segunda mejor estación fue en invierno
con GA3 de 100 mg/L. En la estación del verano
hay un aumento de las estructuras vegetativas de
la planta, ya en la estación fría o de lluvias ocurre la decadencia y la senescencia de estas estructuras.
Los factores ambientales ejercen una influencia
directa, especialmente debido a que L. alba posee
estructuras histológicas especializadas en el almacenamiento del aceite esencial en la superficie de las hojas como los tricomas glandulares (Santos et al., 2004).
La forma de procesamiento de las hojas
de L. alba también puede afectar la producción y la composición química del aceite esencial. Barbosa
et al. (2006) informaron que temperaturas de hasta
80 °C, empleadas en el proceso de secado de las
hojas de L. alba, han reducido entre 12% y 17% la cantidad de aceite esencial cuando se las compara
con las obtenidas en hojas frescas. La composición
química sufre variación con un incremento de 7%
sobre el contenido de citral (neral + geranial) cuando es extraído de hojas frescas en comparación a la extracción a partir de hojas secas. Por lo tanto, es
mejor extraer el aceite esencial de L. alba a partir de
hojas frescas, en pleno crecimiento vegetativo, sin flores y sin un pre procesamiento como el secado.
Debido a la alta variabilidad de la composición química del aceite esencial de L. alba, por diversos factores, es aconsejable el cultivo de clones, un control ambiental estricto, la
estandarización de la cosecha y del procesamiento.
Aún así, es necesario realizar análisis periódicos del aceite esencial obtenido de los diferentes lotes de L. alba con el objeto de formular un preparado final estándar, de uso comercial y con la menor variación posible de un año al otro.
Métodos de extracción del aceite esencial para L. alba
Diferentes métodos pueden ser utilizados para la extracción del aceite esencial de L. alba. Stashenko et al. (2004) compararon la
eficacia de la extracción de aceites esenciales de hojas y tallos frescos de L. alba colombiana por
hidrodestilación, destilación simultánea mediante extracción con solvente, hidrodestilación asistida
por microondas y extracción con CO2 supercrítico.
Los autores identificaron aproximadamente 40 componentes siendo la carvona el más abundante
(40–57%), seguido de limoneno (24–37%) y biciclosesquifelandreno (5–22%). Los principales
componentes del material aislado de la planta fresca
fueron limoneno (27–77%) y carvona (14–30%). Los
autores encontraron que el método de extracción afecta el rendimiento y la composición química del aceite obtenido. Para estos autores el mismo número de componentes se encuentra en los aceites
esenciales obtenidos por hidrodestilación (2 h) o por hidrodestilación asistida por microondas (30 min)
con rendimientos similares de 0,7%. La irradiación de microondas aceleró el proceso de extracción, pero sin causar considerables cambios en la composición del aceite esencial. Entre los cuatro métodos de extracción empleadas, la extracción
con solvente y la extracción de fluido supercrítico
(CO2) produjeron mayores rendimientos del aceite
esencial, aunque la extracción con solvente aisló
una mayor cantidad hidrocarburos de monoterpenos y la extracción por fluido supercrítico (CO2) aisló
una mayor cantidad de compuestos más pesados,
incluyendo sesquiterpenoides y hidrocarburos (Cn > 25). Braga et al. (2005) compararon la
extracción supercrítica con CO2 con los métodos
convencionales de extracción por hidrodestilación,
etanol a baja presión y etanol con calentamiento
(Soxhlet). Para estos autores el mayor rendimiento
se obtuvo con extracción con CO2 en condiciones
de 318 K y 100 bar. El método de extracción afectó el rendimiento de la extracción y la composición química del aceite esencial. Los autores observaron que sólo la extracción mediante el uso de CO2 puede
maximizar los niveles de carvona y limoneno. Aunque existen diversos métodos de
extracción, el método más habitual para obtener el
aceite esencial de L. alba es por hidrodestilación con
aparato tipo Clevenger (Tabla 1). Sin embargo, no
existe una estandarización del tiempo de extracción, en el uso de las distintas partes de la planta siendo
más común el uso de hojas, flores y tallos, tanto
secos como frescos. Otro aspecto a tener en cuenta es la falta de descripción o de estandarización de las condiciones del cultivo, del tipo de suelo,
régimen hídrico, altitud, tiempo de cosecha y otros
factores que pueden afectar la cantidad y la calidad de los aceites esenciales de L. alba. Así, con el
fin de obtener aceites esenciales de composición química con baja variación hay que hacer la
composición final del aceite esencial.
Uso y actividad biológica del aceite esencial de L. alba
El aceite esencial de L. alba tiene diversos usos comerciales y tradicionales asociados a su acción terapéutica empleándose como analgésico,
antiinflamatorio, antipirético sedante, antidiarreico,
antifúngico, en enfermedades intestinales y
hepaticas, anticolesterolémico, larvicida, repelente,
antimicrobiano, antiviral, antimalaria y molusquicida
(Pascual et al., 2001; Mamum-Or-Rashid et al., 2013). Estas propiedades permiten que los
constituyentes del aceite esencial de L. alba sean utilizados por diferentes sectores industriales, tales como la industria farmacéutica, de los cosméticos
y de los aditivos alimentarios. Frighetto et al. (1998) reportaron alta concentración de linalool (79%) en
el aceite esencial de L. alba indicando ser este un potencial sustituto del aceite de palo de rosa (rosewood en inglés).
Citotoxicidad
Debido al gran número de componentes, los aceites esenciales parecen no tener sitios celulares
específicos en las células animales y microbianas. Como lipófilos típicos, ellos pasan a través de la pared celular y la membrana citoplasmática, y muchas
veces alteran la estructura de sus diferentes capas de polisacáridos, ácidos grasos y fosfolípidos. El
efecto citotóxico de los quimiotipos de L. alba citral y carvona se ensayó con tetrazolio tinte, el cual mostró un efecto citotóxico dependiente de la dosis, contra
el carcinoma de cuello uterino de células humanas epitelioides (células HeLa) (Mesa–Arango et al., 2009). Una menor actividad citotóxica se observó para óxido de (+)-limoneno, óxido de (-)-limoneno, alfa–pineno, 1S-(-)-beta–pineno, (±)-linalool, (+)-dihydrocarvone, R(-)-carvona, S(+)-carvona, S(-)-limoneno y R(+)-limoneno. Los monoterpenos
mostraron una alta actividad citotóxica dependiente de la dosis. El quimiotipo citral mostró actividad citotóxica con un DL50 de 3,5 µg/mL. Esta magnitud
de la actividad citotóxica sobre células tumorales fue comparable a la actividad lograda por el pirogalol.
Estudios anteriores habían demostrado la actividad
citotóxica de citral en las células tumorales (Dudai et
al., 2005). El citral inhibe eficazmente el crecimiento
de una línea celular de leucemia de ratón con un valor de DL50 de 47 µg/mL, pero no es eficaz en
células de bazo normales. Además, 45 µg/mL de citral inducen la apoptosis de células leucémicas
de humanos y de ratones. Por el contrario, sus
derivados citronelal, citronelol y un producto de su metabolismo, geraniol, no tienen efecto alguno sobre la supervivencia de las células leucémicas
(Dudai et al., 2005). Segun Olivero-Verbel et al. (2010) la administración intraperitoneal del aceite
esencial de L. alba (quimiotipo citral) produce daños neurológicos en ratones a una dosis igual o superior
TABLA 1. Comparación de los métodos de extracción, rendimiento y análisis del aceite esencial de Lippia alba.
Parte de la planta Método de extracción Rendimiento
(%)
Método para
el análisis* Origen**
Hoja fresca o congelada H i d r o d e s t i l a c i ó n c o n e l a p a r a t o
Clevenger 0,2–0,6 CG/EM a, b, c, d
Hoja y flor fresca H i d r o d e s t i l a c i ó n c o n e l a p a r a t o
Clevenger por 1 h – CG/EM e
Hoja seca H i d r o d e s t i l a c i ó n c o n e l a p a r a t o
Clevenger por 1,5 h 0,4–2,8 CG/EM f
Hoja y/o flor fresca H i d r o d e s t i l a c i ó n c o n e l a p a r a t o
Clevenger por 2 h – CG/EM g, h, i, j
Hoja fresca H i d r o d e s t i l a c i ó n c o n e l a p a r a t o
Clevenger por 4 h 0,1 CG/EM k, l
Hoja y flor fresca Hidrodestilación con el aparato Clevenger
asistido por microondas por 40 min – – m
Tallo y hoja
H i d r o d e s t i l a c i ó n ; D e s t i l a c i ó n simultánea de extracción con solvente; Hidrodestilación asistida por microondas;
Fluido supercrítico
– CG/EM n
a 1500 mg/kg, mientras que a 1000 mg/kg, genera daño hepático leve. Esto sugiere preocupación
para el uso sistémico de este aceite esencial en aplicaciones clínicas.
Antigenotoxicidad
Las propiedades quimiopreventivas de terpenoides de L. alba, tales como carvona,
geraniol, limoneno, citral y alcohol perílico han sido bien documentadas (López et al., 2011).
Aceites esenciales de L. alba disminuyeron
significativamente la genotoxicidad inducida por
bleomicina en dosis entre 28 y 450 mg/mL. La
inhibición completa ocurrió en dosis superiores a
56 mg/mL de los dos quimiotipos citral y carvona/
limoneno (López et al., 2011). Además se comprobó
que estos dos quimiotipos no indujeron la lesión primaria del ADN en el SOS Chromotest y los componentes principales del aceite esencial como citral y carvona no resultaron genotóxicos. Esto está de acuerdo con estudios realizados previamente utilizando Salmonella/microsoma y Drosophila melanogaster (Franzios et al., 1997; Gomes–
Carneiro et al., 1998).
Los aceites esenciales de quimiotipos diferentes de L. alba tienen un alto potencial antigenotóxico contra la bleomicina clastógeno. El orden de actividad antigenotóxicas para los compuestos del aceite esencial de L. alba fueron
definidos por López et al. (2011) como citral > carvona > limoneno. Connor (1991) fue el primero
en indicar la potencialidad quimiopreventiva del citral contra la carcinogénesis química de la piel
en ratones. López et al. (2011) evidenciaron que
el citral tiene una capacidad de suprimir el estrés oxidativo, posiblemente mediante la inducción de
proteínas antioxidantes endógenas (Nakamura et al., 2003). Además, se ha demostrado que el citral puede prevenir la carcinogénesis gástrica (Shukla et al., 2009). López et al (2011) explican la actividad
del aceite esencial de L. alba mediante mecanismos eliminadores de radicales dentro de la molécula. A pesar del potencial quimiopreventivo descripto para el aceite esencial de L. alba es importante considerar que concentraciones por encima de 1% de citral
promueve la citotoxicidad en células de fibroblasto humano (Hayes & Markovic, 2002).
Actividad antioxidante
Chies et al. (2013) informaron que el aceite
esencial de L. alba tiene un contenido fenólico importante y actividad antioxidante. También informaron de que los principales flavonoides en siete accesiones fueron apigenina, luteolina,
naringina y rutina. Stashenko et al. (2004) - usando
un modelo in vitro para oxidación del ácido linoleico - describieron una actividad superior o similares a la
de la vitamina E y del hidroxibutilanisol (BHA) para
el aceite esencial en concentraciones mayores de
5 g/L. Azambuja et al. (2011) evaluaron la actividad
antioxidante del aceite esencial de L. alba en pez (Rhamdia quelen) durante el transporte en bolsas de plástico. Los autores encontraron que el aceite esencial de L. alba mejora el estado redox de
los tejidos evaluados en hiperoxia y hipoxia. Se
sugirió el uso del aceite esencial de L. alba a una concentración de 10 μL/L como antioxidante para
los breves períodos de hipoxia o hiperoxia que se
producen durante el transporte del pez desde las
estaciones de cría hasta su destino, mejorando
el bienestar de los animales, así como su calidad
para el consumo. Saccol et al. (2013) indicaran el
uso del aceite esencial de L. alba en la dieta de R. quelen para aumentar la respuesta antioxidante
de los peces. Para Veeck et al. (2013) el aceite
esencial de L. alba - utilizado como sedante en el agua para transportar los R. quelen puede retrasar
la oxidación de lípidos de filetes de peces durante
el almacenamiento congelado. Para estos autores L. alba puede ser una fuente de compuestos activos para uso en la acuicultura y la conservación de alimentos.
Los aceites esenciales de diferentes quimiotipos de L. alba fueron evaluados por su actividad antioxidante in vitro y se observó que la
actividad antioxidante fue fuertemente influenciada
por el quimiotipo y la composición del aceite esencial. Una muestra de aceite esencial con 61% de carvona tuvo actividades muy bajas (Puertas–
Mejía et al., 2002), en cambio otra muestra con 51% de carvona y 33% de limoneno inhibió la peroxidación del ácido linoleico inducido por FeSO4,
con mayor actividad que en los controles (Stashenko et al., 2004). La presencia de limoneno, con dobles
enlaces conjugados, puede explicar mejor la actividad antioxidante.
Actividad antimicrobiana, insecticida y acaricida
La actividad antimicrobiana del aceite esencial de L. alba ha sido citada por diversos
autores; segun Hennebelle et al. (2008b) contra
Bacillus subtilis, Lactobacillus casei, Enterococcus faecalis, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Serratia marcescens, Candida albicans, Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida parapsilosis, Cryptococcus neoformans, Fonsecaea pedrosoi y Trichophyton rubrum.
Machado et al. (2014) reportaron actividad contra
Salmonella choleraesuis, Listeria monocytogenes y Listeria innocua. Además Hennebelle et al.
(2008b) y Machado et al. (2014) reportaron actividad
Pseudomonas aeruginosa.
La actividad antifúngica de los aceites esenciales de L. alba contra hongos patógenos
de humanos tales como Candida albicans, C. guilliermondii, C. parapsilosis, C. neoformans y Trichophyton rubrum ha sido demostrada previamente para los quimiotipos citral y mirceno–
citral (Fun & Svendsen, 1990). La fungitoxicidad y antiaflatoxigenicitdad del aceite esencial de L. alba y de dos de sus componentes principales fueron evaluados contra Aspergillus flavus (Shukla et al.,
2009). La actividad antifúngica fue evaluada contra
cepas de Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus
flavus, A. niger y Candida albicans (Hennebelle
et al., 2008b). Los componentes geranial y neral han sido muy eficaces contra la producción de aflatoxina B1 por Aspergillus flavus (Shukla et al., 2009) y bacterias Gram-positivas, principalmente
Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa
(Alea et al., 1996).
Glamočlija et al. (2011) demostraron que el
aceite esencial de L. alba tiene actividad antifúngica
con una concentración mínima inhibitoria (MIC, de la sigla en Inglés) en el intervalo de 0,300–1,250 mg/
mL y una concentración fungicida mínima (MFC, de
la sigla en Inglés) en el intervalo de 0,600–1,250
mg/mL. Por otra parte el agente fungicida comercial Ketoconazol mostró MIC en un intervalo de 0,025– 0,500 mg/mL y MFC en un intervalo de 0,250–0,100 mg/mL. Otro agente fungicida, el Bifonazol, con menor actividad antifúngica, tuvo un MIC de 0,100–
0,200 mg/mL y MFC de 0,200–0,250 mg/mL. Shukla et al. (2009) informaron que el aceite esencial de L. alba ha causado 100% de inhibición del crecimiento
de 9 hongos en 17 ensayados. No obstante,
cuando se evaluó el geranial o neral aislado de este aceite esencial, causó 100% de inhibición del
crecimiento en 13 y 2 hongos en 17 ensayados,
respectivamente. Por lo tanto, el geranial parece ser el principal componente fungicida del aceite esencial de L. alba.
Geromini et al. (2015) reportaron actividad
antifúngica del aceite esencial de L. alba contra Pleurotus ostreatus. Otros estudios reportaran una gran capacidad de este aceite esencial para control
de otros hongos que causan enfermedades de
las plantas como Didymella bryoniae, Pyricularia grisea, Rhizoctonia solani y Sclerotium rolfsii
(Sarmento-Brum et al., 2014) o en los animales y en los seres humanos como Trichophyton mentagrophytes, Candida albicans, Trichophyton rubrum, Epidermophyton floccosum y Microsporum gypseum (Costa et al., 2014). El aceite esencial de L. alba también mostró actividad insecticida contra Tribolium castaneum en granos de trigo (Ringuelet
et al., 2014) y acción acaricida contra Rhipicephalus microplus (Peixoto et al., 2015).
Actividad neurosedante y analgésica Tres aceites esenciales de L. alba y sus mayores constituyentes fueron ensayados y
exhibieron actividades ansiolíticas y sedantes en ratones (Vale et al., 2002). Resultados similares fueran reportados por Heldwein et al. (2014) y Cunha et al. (2010) en peces; y por Sousa et al. (2015) en ratas. Compuestos polares puros
de L. alba demostraron que la planta tiene actividades débiles o moderadas en los receptores de benzodiazepinas y de γ–aminobutírico tipo A
(GABAA) que están relacionados con un grupo
de fármacos ansiolíticos usados como sedantes,
hipnóticos, relajantes musculares y para actividad anticonvulsiva (Hennebelle et al., 2008a).
Dos quimiotipos de este aceite esencial,
citral–limoneno y carvone–limonene, inhibieron hasta 80% de las contorciones infligidas por el
ensayo de retorcimiento con ácido acético en ratas. Adicionalmente, el quimiotipo citral–limonene (50
mg/kg) fue el único aceite esencial que aumentó
el tiempo de latencia al estímulo en el ensayo de
la placa caliente en la misma medida (52%) así como meperidina (56%) (Vale et al., 2002). El efecto inhibitorio del aceite esencial citral–limoneno se
invirtió por el antagonista opiáceo naloxona, lo que sugiere un mecanismo de acción semejante al de
la morfina, mientras que el efecto del quimiotipo
carvone–limonene no fue revertido por esta droga
(Viana et al., 1998).
En conclusión, el aceite esencial de L. alba está compuesto principalmente por dos tipos de compuestos químicos, los terpenoides y los fenilpropanoides siendo muy variable con la existencia de diversos quimiotipos. Lippia alba
cuenta con siete quimiotipos; diversos factores
tales como los genéticos, ambientales y de
procesamiento después de la cosecha, pueden
afectar la composición y rendimiento de los constituyentes del aceite. Esta variabilidad en la
composición y rendimiento constituye una dificultad
para la comercialización de este producto ya que varía su calidad y su actividad biológica. El uso de micropropagación de clones de L. alba y ambiente controlado de producción son formas de obtener aceites esenciales con menores variaciones. A pesar de los diversos estudios de producción y del potencial uso del aceite esencial de esta planta aún faltan estudios de desarrollo de aplicaciones en alimentos, medicamentos y cosméticos lo que explica la falta de patentes. Tanto los métodos como las condiciones de extracción afectan la composición y rendimiento del aceite esencial. Por lo tanto estos
deben ser definidos y estandarizados en cada caso
mejora genética. La base genética o la herencia
de estas sustancias del metabolismo secundario
no han sido completamente dilucidadas, lo que hace más difíciles lograr un incremento en la
producción, y en la calidad y composición de los aceites. El conocimiento agronómico de esta planta se encuentra en su etapa inicial focalizándose en el tiempo requerido para el cultivo de plántulas, los tipos de sustratos, los reguladores del crecimiento y los productos reforzadores de injertos. Por lo tanto,
hay importantes perspectivas para los estudios de
caracterización de bancos de germoplasma, los programas de mejora genética, el cultivo de tejidos, clonación y cultivos agronómicos que mejoren la produccíon y la calidad del aceite esencial de esta planta.
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