Anti-Human IgA
(α) AFF FITC
For In Vitro Diagnostic Use
Product Code: 504023, 504045
Intended Use
This product is intended to be used on INOVA’s Monkey Oesophagus slides to assist in the qualitative determination of autoantibodies in patient serum by indirect immunofluorescence. The identification of such autoantibodies aids in the diagnosis of autoimmune diseases. Suitability for use in other IFA combinations has not been assessed but use in such assays should not necessarily be excluded.
INOVA’s FITC IgA (Monkey Absorbed) Conjugate no EB (504015) is recommended specifically for use on monkey tissue.
Principles of the Procedure
An indirect immunofluorescence technique is used where patient samples and appropriate controls are incubated with substrate tissue. The unreacted antibodies are washed off and then the conjugate is applied. Unbound conjugate is washed off as before. Slides are viewed with a fluorescence microscope and positive samples are observed as apple green fluorescence which corresponds to the antibody of interest.1
Reagent
Antisera is prepared by immunizing goats with human IgA fragment purified from normal human serum. The resulting antiserum is delipidated. Affinity purified antibodies are isolated by binding to human IgA attached to agrarose beads, followed by a proprietary elution process. The purified antibody is then conjugated with fluorescein isothiocyanate (FITC) and unreacted fluorochrome is removed by gel filtration. This product is diluted to an optimal concentration for use in indirect immunofluorescence. Preservatives are added and the product 0.2µm filtered.
Warnings/Precautions
This product should only be used by suitably trained persons for the purposes stated. Adherence to the given procedure is recommended. This product contains sodium azide and must be handled with caution – do not ingest or allow contact with skin or mucous membranes. If contact does occur wash with a large volume of water and seek medical advice. Explosive metal azides may be formed with lead and copper plumbing; on disposal of reagent, flush with a large volume of water to prevent azide build up.
Storage Conditions
This product should be stored at 2-8°C. DO NOT FREEZE. It is stable until the expiry date given on the label. Slight precipitation can occur on storage which may be removed by centrifugation and should not affect the performance characteristics.
Procedure
Materials provided
• 15mL (504023) or 7mL (504045) Anti-Human IgA (α) AFF FITC (Prediluted Conjugate) • Product Insert
Additional Materials Required But Not Provided
1. Substrate slide
2. Phosphate buffer saline (PBS) 3. Humidity chamber for incubation steps 4. Negative and Positive control sera 5. Mounting media and coverslips
6. Fluorescence microscope with 495nm exciter filter and 515nm barrier filter
Test Procedure
(Refer to appropriate slide insert for full details.)
Limitations of the Procedure
The light source, filters and optics of different makes of fluorescence microscopes will influence the sensitivity of the assay. The performance of the microscope is significantly influenced by correct maintenance especially centring of the mercury vapour lamp and changing of the lamp after the recommended period of time.
References
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
Anti-Human-IgA-(
α)-AFF FITC
Nur für “In-Vitro Diagnostik”
Bestell-Nr.: 504023, 504045
Verwendungszweck
Dieses Produkt kann zusammen mit Affen-Oesophagus von INOVA‘s verwendet werden. Es dient zum qualitativen Nachweis von Autoantikörpern in Patientenseren durch die indirekte Immunfloreszenz. Die Identifikation dieser Autoantikörper unterstützt die Diagnose von Autoimmun-Erkrankungen. Die Verwendung dieses Produktes zusammen mit anderen Substraten wurde nicht geprüft, ist aber nicht zwangsläufig ausgeschlossen.
INOVA’s IgA FITC-Konjugat (Affen-adsorbiert) nicht EB (504015) wird spezifisch für die Verwendung auf Affengewebe empfohlen.
Informationen zum Test
Der Test beruht auf der indirekten Immunfluoreszenz-Technik. Das Patientenserum und entsprechende Kontrollen werden mit dem Substrat inkubiert. In einem Waschschritt werden die nicht reagierenden Antikörper entfernt und dann das Fluoreszein-Konjugat zugegeben. Überschüssiges Konjugat wird durch Waschen entfernt. Die Beurteilung der Objektträger erfolgt unter dem Fluoreszenzmikroskop. Positive Proben zeigen im Bereich der Bindungsstellen zwischen dem Substrat und den Antikörpern eine apfelgrüne Fluoreszenz.1
Reagenzien
Das Antiserum wird mittels Immunisierung von Ziege mit einem humanen IgA-Fragment (gereinigt aus normalem Humanserum) hergestellt. Das gewonnene Antiserum wird delipidiert. Affinitätsgereinigte Antikörper werden mittels Bindung an humanes IgA an Agarose-Beads isoliert, worauf ein eigenes Elutionsverfahren folgt. Hierauf werden der gereinigte Antikörper mit Fluoresceinisothiocyanat (FITC) konjugiert und unreagiertes Fluorochrom mittels Gelfiltrierung entfernt. Das Reaktionsprodukt (Konjugat) wird optimal für die Verwendung in der indirekten Immunfluoreszenz verdünnt, mit Konservierungsstoffen versetzt und durch einen 0,2µm Fliter filtriert.
Hinweise/Vorsichtsmaßnahmen
Dieses Produkt sollte nur von entsprechend geschultem Laborpersonal verwendet werden. Die Einhaltung der Arbeitsvorschrift wird empfohlen. Dieses Produkt enthält Natriumazid und muss mit den entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen behandelt werden. Verschlucken sowie Kontakt mit Haut oder Schleimhäuten vermeiden. Nach Kontakt Hautstelle mit viel Wasser abspülen und sich in ärztliche Behandlung geben. Natriumazid kann mit Blei- oder Kupferrohren explosive Metallazide bilden. Nach der Entsorgung mit ausreichender Menge Wasser nachspülen um Azidablagerungen zu vermeiden.
Lagerung
Dieses Produkt bei 2-8°C lagern. NICHT EINFRIEREN. Es ist so bis zum auf dem Etikett angegebenen Datum haltbar. Während der Lagerung kann eine leichte Präzipitatbildung auftreten. Das Präzipitat durch Zentrifugation entfernen, die Produktqualität wird dadurch nicht beeinträchtigt.
Testdurchführung
Gelieferte Materialien
• 15mL (504023) oder 7mL (504045) Anti-Human IgA (α) AFF-FITC ((Vorverdünntes Konjugat) • 1 x Arbeitsanleitung
Zusätzlich benötigte, nicht gelieferte Materialien
1. Substrat-Objektträger
2. Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung (PBS-Puffer) 3. Feuchte Kammer für die Inkubationen
4. Negativ- und Positivkontrollseren 5. Eindeckmedium und Deckgläschen
Testdurchführung
(Detailangaben siehe spezifische Arbeitsanleitung).
Je einen Tropfen 504023 oder 504045 auf jedes Well geben. Auftragsstellen nicht länger als 15 Sekunden unbedeckt lassen.
Einschränkungen des Tests
Die im Fluoreszenzmikroskop verwendete Lichtquelle, Filter und Optik beeinflussen die Sensitivität des Tests. Die Qualität des Mikroskops wird maßgeblich durch die korrekte Wartung, speziell durch Zentrieren der Quecksilberlampe und deren Austausch nach der empfohlenen Brenndauer, beeinflusst.
Referenzen
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
Anti-IgA Umane
(α) AFF FITC
Per uso diagnostico In Vitro
Codice Prodotto: 504023, 504045
Finalità d’uso
Questo prodotto è utilizzato sui vetrini INOVA’s di esofago di scimmia come prodotto complementare nella determinazione qualitativa degli autoanticorpi nel siero umano, mediante immunofluorescenza indiretta. L’identificazione di tali autoanticorpi costituisce un sussidio nella diagnosi delle malattie autoimmuni. L’idoneità all’uso in altre combinazioni IFA non è stata valutata ma l’utilizzo in tali dosaggi non deve essere necessariamente escluso.
L’antisiero INOVA’s Coniugato IgA FITC (Absorbito con tessuto di scimmia) no EB (504015) è particolarmente indicato per l’utilizzo su tessuto di scimmia.
Riassunto e Spiegazione del test
Viene impiegata una tecnica di immunofluorescenza indiretta in cui i campioni dei pazienti e i relativi controlli sono incubati con i tessuti. Gli anticorpi non specifici sono eliminati con il lavaggio, quindi viene applicato un coniugato fluoresceinato. I vetrini vengono poi lavati come prima per eliminare il coniugato non legato. Per la lettura dei vetrini si utilizza un microscopio a fluorescenza. I campioni positivi presentano una fluorescenza di colore verde brillante che corrisponde all’autoanticorpo che si vuole determinare.1
Reagenti
Gli antisieri vengono preparati immunizzando le capre con frammento delle IgA umane purificato tratto da normale siero umano. L’antisiero risultante viene delipidizzato. Gli anticorpi purificati per affinità vengono isolati mediante legame alle IgA umane attaccate alle perle di agarosio e successivo processo di eluizione proprietario. L’anticorpo purificato viene quindi coniugato con isotiocianato di fluoresceina (FITC) e il fluorocromo privo di reazione viene rimosso mediante filtrazione del gel. Il presente prodotto è stato diluito ad una concentrazione ottimale per l’utilizzo in immunofluorescenza indiretta. Vengono aggiunti infine dei conservanti ed il prodotto viene filtrato a 0,2μm.
Avvertenze/ Precauzioni
Il presente prodotto deve essere utilizzato da personale specializzato. Si raccomanda di osservare la procedura del test alla lettera. Il prodotto contiene sodio azide e deve essere trattato con cautela – non ingerire né permettere il contatto con la pelle o le mucose. In caso di contatto, lavare con molta acqua e rivolgersi al medico. Azotidrati metallici esplosivi si possono formare con il rame e il
iombo; per evitare l’accumulo di tali composti, far scorrere abbondante acqua sui reagenti eliminati. p
Condizioni di conservazione
Il prodotto deve essere conservato a 2-8°C ed è stabile fino alla data di scadenza indicata sull’etichetta. NON CONGELARE. In fase di conservazione si potrà osservare una lieve precipitazione eliminabile mediante centrifugazione, che non influirà sulle caratteristiche del dosaggio.
Procedura
Materiali forniti
• 15mL (504023) o 7mL (504045) Anti-IgA Umane (α) AFF FITC (coniugato prediluit) • Scheda tecnica
Materiale necessario ma non fornito
1. Vetrini con substrato 2. Tampone PBS
3. Camera umida per le fasi d’incubazione 4. Sieri di controllo positivi e negativi
5. Soluzioni di montaggio e vetrini coprioggetti
6. Microscopio a fluorescenza con filtro a 495nm (exciter) e filtro a 515nm (barrier)
Procedura del test
(Far riferimento alla metodica del vetrino per maggiori dettagli).
Limitazioni del test
La fonte luminosa, i filtri e l’ottica dei microscopi a fluorescenza di diverse marche influiranno sulla sensibilità del kit. La performance del microscopio è influenzata notevolmente da una corretta manutenzione, e in particolare dalla centratura e dalla sostituzione della lampada a vapori di mercurio dopo il periodo di tempo consigliato.
Bibliografia
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
IgA Anti-Humano (α) AFF FITC
Per uso diagnostico In Vitro
Codice Prodotto: 504023, 504045
Finalità d’uso
Este producto está diseñado para su uso en los portaobjetos de Esófago de Mono de INOVA’s como ayuda en la determinación cualitativa de autoanticuerpos en suero por inmunofluorescencia indirecta. La identificación de estos autoanticuerpos ayuda al diagnóstico de enfermedades autoinmunes. No se ha analizado su compatibilidad de uso con otras combinaciones IFA pero no son necesariamente excluibles entre sí.
Se recomienda el uso específico del Conjugado IgA FITC (Absorbido de Mono) no EB (504015) para uso en Tejido de Mono.
Sumario y Explicación de la prueba
Se usa una técnica de inmunofluorescencia indirecta mediante la que se incuban con tejido de substrato las muestras del paciente y los controles apropiados. Se eliminan los anticuerpos no reactivos y se aplica el conjugado. El conjugado no enlazado se elimina. Al examinar las placas con un microscopio de fluorescencia las muestras positivas se ven en color verde fluorescente correspondiente al anticuerpo en cuestión.1
Reactivos
El antisuero se prepara inmunizando cabras con el fragmento de IgA humana purificada a partir de suero humano normal. El antisuero resultante se deslipida. Los anticuerpos purificados por afinidad se aíslan uniéndolos a IgA humana fijada a lechos de agarosa y realizando después un proceso de elución patentado. A continuación, el anticuerpo purificado se conjuga con isotiocianato de fluoresceína (FITC) y el fluorocromo que no ha reaccionado se elimina mediante filtración en gel. Este producto se diluye a una concentración óptima para utilizarse en inmunofluorescencia indirecta. Se añaden conservantes al producto y se pasa a través de un filtro de 0,2μm.
Advertencias/Precauciones
Este producto sólo debe ser utilizado por personas con una formación adecuada para los propósitos establecidos. Se recomienda atenerse al procedimiento. Este producto contiene azida sódica y se debe manipular con precaución - no ingerir y evitar el contacto con piel o mucosas. En caso de contacto, lavar con agua abundante y consultar al médico. Las azidas de metal explosivo pueden contener metal o cobre; antes de desechar los reactivos, enjuáguelos con agua abundante para prevenir la formación de azida.
Condiciones de almacenamiento
Este producto se debe almacenar a 2-8°C. NO CONGELAR. Es estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Puede darse una ligera precipitación durante el almacenamiento que se puede eliminar por centrifugación y que no afecta a las características del funcionamiento.
Procedimiento
Materiales Suministrados
• 15ml (504023) o 7ml (504045) IgA Anti-Humano (α) AFF FITC (Conjugado prediluido) • Instrucciones del producto
Material necesario no incluido
1. Portaobjetos de sustrato
2. Solución salina tamponada con fosfato (PBS) 3. Cámara húmeda para las etapas de incubación 4. Sueros de control positivos y negativos 5. Medio de montaje y cubreobjetos
6. Microscopio de fluorescencia con un filtro de excitación de 495nm y un filtro barrera de 515nm
Procedimiento de ensayo.
(Consultar el folleto del portaobjetos correspondiente para obtener más detalles.)
Limitaciones del Procedimiento
La fuente de luz, los filtros y objetivos de los diferentes tipos de microscopios de fluorescencia influirán en la sensibilidad del ensayo. El funcionamiento del microscopio depende considerablemente de su correcto mantenimiento, en especial de la lámpara de vapor de mercurio.
Referencias
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
AFF FITC Anti IgA (α) Humaines
Uniquement pour “Diagnostics In-Vitro“
Références : 504023, 504045
Application
Ces conjugués doivent être utilisés en conjonction avec les lames INOVA’s suivantes œsophage de singe, pour la détermination qualitative des autoanticorps dans le sérum humain en immunofluorescence indirecte. L’identification de tels anticorps apporte une aide dans le diagnostic de maladies autoimmunes. L’utilisation de ces réactifs pour d’autres tests en immunofluorescence indirecte n’a pas été évaluée mais ne doit pas être nécessairement exclue.
Avec les lames de tissus de singe, il est recommandé d’utiliser le conjugué INOVA FITC IgA (Absorbé sur singe) non EB spécial singe (504015).
Informations concernant le test
Une technique d’immunofluorescence indirecte est utilisée lorque les sérums et les contrôles appropriés sont incubés avec les lames de tissus. Les anticorps non fixés sont éliminés par lavage et le conjugué est déposé. Le conjugué non lié est également éliminé par lavage. Les lames sont ensuite observées sous microscope. Les sérums positifs présentent une fluorescence verte qui correspond à l’anticorps recherché (réf 1 et 2).
Reactif
L’antisérum est préparé en immunisant des chèvres avec un fragment d’IgA humain purifié à partir de sérum humain sain. L’antisérum obtenu est délipidé. Les anticorps purifiés par affinité sont isolés en les liant à des IgA humaines fixées sur des billes d’agarose, puis en effectuant un processus d’élution exclusif. L’anticorps purifié est ensuite conjugué à de la fluorescéine-isothiocyanate (FITC), puis le fluorochrome inactivé est éliminé par filtration sur gel.
Le conjugué est dilué à une concentration optimale pour être utilisé en immunofluorescence indirecte. Des conservateurs sont ajoutés et le produit est filtré à 0,2µm.
Avertissements/Précautions
Ce produit doit être manipulé par des personnes compétentes en techniques de laboratoire. Il est recommandé de suivre scrupuleusement la procédure d’utilisation. Ce réactif contient de l’azide de sodium, il doit donc être utilisé avec précaution. Ne pas ingérer ou mettre en contact avec la peau ou les muqueuses. En cas de contact, laver à grande eau et consulter un médecin. Des azides de métaux explosifs peuvent se former avec le cuivre et le plomb, laver à grande eau les récipients afin d’éviter la formation des azides de métaux.
Conditions de conservation
Ces produits doivent être stockés à 2-8°C dès leur réception, ne pas congeler. Ils sont stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du flacon. De faibles précipitations peuvent avoir lieu lors du stockage qui peuvent être éliminées par centrifugation, ceci n’affecte en rien les performances des réactifs.
Procédure
Matériel fourni
• 15mL (504023) ou 7mL (504045) AFF FITC Anti IgA (α) Humaines • Fiche technique
Autre matériel nécessaire non fourni
1. Lames2. Tampon PBS
3. Chambre humide (pour les étapes d’incubation) 4. Contrôles négatif et positif
5. Milieu de montage et lamelles
Procédure
(cf. fiche technique des lames)
Ajouter une goutte de 504023 ou 504045 à chaque puits. Ne pas laisser les puits non couverts plus de 15 secondes.
Limites du test
La source lumineuse, les filtres et les optiques des microscopes influent sur la sensibilité du test. Les performances du microscope dépendent de la qualité de la maintenance (surtout le centrage et le changement de la lampe à vapeur de mercure).
Références
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
IgA Anti-Humana (
α) AFF com FITC
Para Diagnóstico In Vitro
Código do Produto:
504023, 504045
Aplicação Diagnóstica
Este controlo deve ser utilizado com lâminas contendo esófago de macaco da INOVA’s como auxiliar na determinação qualitativa de autoanticorpos no soro de doentes por imunofluorescência indirecta. A identificação destes autoanticorpos vai auxiliar o diagnóstico de doenças autoimunes. A utilização com outros métodos de I.F. não foi ainda verificada. Contudo não deve ser excluída a utilização neste tipo de testes.
O Conjugado FITC IgA (Absorvida Macaco) não EB da INOVA’s (504015) é recomendado para uso específico em tecido de macaco.
Princípio do Procedimento
Quando é utilizada a técnica de imunofluorescência indirecta, as amostras e os controlos são incubadas com substrato de tecido. Os anticorpos que não reagiram são removidos através de lavagem e é aplicado o conjugado. Em seguida, as lâminas são observadas ao microscópio de fluorescência. A positividade das lâminas manifesta-se através de uma fluorescência; são observadas amostras positivas onde a “verde-maçâ” que corresponde ao anticorpo relevante.1
Reagente
Os anti-soros são preparados através da imunização de cabras com IgA humana, fragmento purificado a partir de soro humano normal. O anti-soro resultante é deslipidado. Os anticorpos purificados por afinidade são isolados por ligação à IgA humana ligada a esferas de agarose, seguida de um processo de eluição proprietário. O anticorpo purificado é então conjugado com isotiacianato de fluoresceína (FITC) e o fluorocromo sem reacção é eliminado através de filtração em gel. A diluição deste produto é optimizada para ser utilizado em imunofluorescência indirecta. São adicionados conservantes e o produto é filtrado (0,2μm).
Advertências/ Precauções
Deve proceder-se a um manuseamento e métodos de inutilização adequados para todo o material potencialmente infectado e apenas a pessoal treinado adequadamente nestes métodos deverá ser permitida a execução destes procedimentos. Os componentes do kit contêm azida de sódio como conservante, pelo que terão que ser manuseados com precaução – não ingerir nem permitir o contacto com a pele ou membranas mucosas. Se ocorrer um contacto com o produto, deve-se lavar abundantemente com água e consultar um médico. Em contacto com canalizações de chumbo ou cobre, podem-se formar sais explosivos; para evitar que tal aconteça, fazer correr abundante quantidade de água aquando da inutilização dos reagentes.
Condições de Armazenamento
Este produto deve ser conservado entre 2-8°C. NÃO CONGELAR. Permanece estável até a data de validade indicada no rótulo. Pode ocorrer ligeira precipitação, esta pode ser removida através de centrifugação, o que não afecta as características da performance do produto.
Procedimento
Material fornecido
• 15mL (504023) ou 7mL (504045) IgA Anti-Humana (α) AFF com FITC (Conjugado Pré-diluído) • Folheto de Instruções
Material Adicional Necessário Mas Não Fornecidos
1. Lâminas com Substrato2. Tampão (PBS)
3. Câmara húmida para as etapas de incubação 4. Soro controlo negativo e positivo
5. Meio de Montagem e lamelas
6. Microscópio Fluorescente com filtro de excitação de 495nm e filtro de barreira de 515nm
Procedimento do Teste
(Consultar folheto de instruções das lâminas para mais detalhes).
Adicionar uma gota de 504023 ou 504045 a cada poço. Não deixar os poços descobertos por mais de 15 segundos.
Limitações
A fonte emissora de luz, filtros e ópticas de diferentes tipos de microscópicos fluorescentes podem influenciar a sensibilidade do teste. A performance do microscópio é influenciada de forma significativa pela manutenção correcta do microscópio principalmente no que diz respeito à lâmpada de vapor de mercúrio e mudar a mesma após a duração recomendada.
Referências
1. Bradwell A. R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
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Fabricado por:
INOVA Diagnostics, Inc.
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