1(Trabalho 053-10). Recebido em: 18-02-2010. Aceito para publicação em:12-08-2010.
2Engº. Agrº MSc., Doutorando em Agronomia UFPR. Bolsista Capes. moesesandrigo@yahoo.com.br
3Engº. Agrº. Dr. em Agronomia. Programa de Pós-Graduação em Agronomia, UTFPR, Câmpus Pato Branco. Via do conhecimento, km 01. CEP: 85501-970. Pato Branco-PR. Emails: idemir@utfpr.edu.br, americowagner@utfpr.edu.br
4Engº. Agrº MSc. UTFPR, Câmpus Pato Branco. E-mail: iosasso@ibest.com.br
5Estudante de Agronomia. UTFPR, Câmpus Pato Branco. E-mail: rodrigoambrosio87@hotmail.com
VIABILIDADE DE SEMENTES DE JABUTICABEIRA
1MOESES ANDRIGO DANNER2, IDEMIR CITADIN3, SIMONE APARECIDA ZOLET SASSO4,
RODRIGO AMBROSIO5, AMÉRICO WAGNER JÚNIOR3
RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de sementes de jabuticabeira (Plinia cauliflora)
sob diferentes condições de armazenamento. Para isso, foram realizados dois experimentos. No primeiro, testou-se a viabilidade de sementes armazenadas sob três diferentes temperaturas (temperatura ambiente, 12°C e 6°C) e períodos de armazenamento (5; 10; 20; 40 e 80 dias após a extração das sementes). No segundo experimento, testou-se a viabilidade de sementes armazenadas a vácuo sob três condições (com água esterilizada, com tampão fosfato pH 7,0 e a seco) e períodos de armazenamento (5; 20; 35; 50 e 65 dias após a extração das sementes). Sob atmosfera normal, as sementes de jabuticabeira conservam viabilidade por apenas cinco dias, com maior emergência sob temperatura ambiente (83,35%). As sementes de jabuticabeira perdem totalmente a viabilidade com teor de umidade próximo a 10%. As sementes de jabuticabeira armazenadas a vácuo com tampão fosfato mantêm razoável viabilidade (41,6%) até 65 dias de armazenamento.
Termos para indexação: Plinia cauliflora, semente recalcitrante, teor de umidade, conservação da semente.
STORAGE IN VACUUM ENHANCE SEED VIABILITY OF
JABUTICABA TREE
ABSTRACT - The objective of this study was to evaluate the viability of seeds of jabuticaba tree (Plinia cauliflora) under different storage conditions. For this, two experiments were conducted. In the first was
tested the viability of seeds stored under three different temperatures (room temperature, 12°C and 6°C) and storage periods (5, 10, 20, 40 and 80 days after seeds extraction). In the second experiment was tested the viability of seeds stored in polypropylene bags in vacuum with three conditions (with sterile water, with phosphate buffer pH 7.0 and in dry) and storage periods (5, 20, 35, 50 and 65 days after seeds extraction). Under normal atmosphere, the seeds of jabuticaba tree kept viability for only five days, with higher emer-gence at room temperature (83.35%). Seeds of jabuticaba tree totally lose viability with water content near 10%. Seeds of jabuticaba tree stored in vacuum with phosphate buffer kept a reasonable viability (41.6%) up to 65 days of storage.
Index terms: Plinia cauliflora, recalcitrant seed, seed water content, seed conservation.
INTRODUÇÃO
A jabuticabeira é originária do centro-oeste/ sul/sudeste do Brasil e pertence à família Myrtace-ae. São conhecidas nove espécies de jabuticabeira, dentre as quais se destaca Plinia cauliflora (DC) Berg, conhecida como jabuticabeira paulista ou jabuticabeira-açu (MATTOS, 1983). Esta espécie apresenta dispersão natural em alguns municípios da região sudoeste do Paraná.
O potencial de comercialização da jabuti-caba é grande em função de suas características organolépticas (MAGALHÃES et al., 1996), sendo apreciada tanto para consumo in natura como para a
fabricação de geleia, suco, sorvete, bebidas fermen-tadas e licores. A casca dos frutos apresenta elevado conteúdo de antocianinas (TEIXEIRA et al., 2008), com potencial de utilização na indústria alimentícia, de cosméticos e farmacêutica.
Mesmo considerando os avanços obtidos na propagação assexuada da jabuticabeira (DUARTE et al., 1997; DANNER et al., 2006; SASSO et al., 2010), na prática, o principal método de obtenção de mudas da espécie ainda é por sementes, por ser uma espécie de difícil enraizamento de estacas (SCAR-PARE FILHO et al., 1999; SASSO, 2009).
Porém, as sementes da jabuticabeira perdem rapidamente a viabilidade (VALIO; FERREIRA,
1992), o que as caracteriza como sementes recal-citrantes. Como as sementes recalcitrantes se de-terioram rapidamente, mesmo com a manutenção da umidade, métodos especiais de conservação e armazenamento devem ser estudados.
Dessa forma, estudos para prolongar o perío-do de armazenamento das sementes de jabuticabeira assumem fundamental importância, visando a seu uso na obtenção de porta-enxertos, na manutenção da variabilidade para uso no melhoramento genético e para utilização em reflorestamentos e pomares co-merciais. Porém, esses estudos são escassos, o que dificulta a definição de estratégias para a conservação das sementes, mesmo por curtos períodos.
O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de sementes de jabuticabeira (Plinia cauliflora) sob diferentes condições de armazenamento.
MATERIAL E MÉTODOS
Foram realizados dois experimentos, visan-do a manter a viabilidade de sementes de jabuticabei-ra (Plinia cauliflojabuticabei-ra) sob armazenamento. Nos dois experimentos, as sementes foram extraídas de frutos totalmente maduros (coloração preto-arroxeada da casca), de plantas nativas localizadas em Vitorino-PR (26° 19’ S; 52° 46’ W; altitude 820 m). Após a extração, as sementes foram despolpadas com cal virgem, lavadas, submetidas à desinfestação com hipoclorito de sódio (1,25%), por 10 minutos, e colocadas sobre papel toalha durante 12 horas, para retirada do excesso de água.
Experimento 1
Para o experimento 1, os frutos foram cole-tados em setembro de 2006. Após extração, foram selecionadas as sementes de maior tamanho (massa média de 215 ± 25 mg), divididas em lotes de 15 sementes cada e colocadas em sacos de papel kraft. As sementes foram submetidas a diferentes temperaturas de armazenamento: temperatura am-biente (17°C ± 4°C), 12°C e 6°C. Para armazenamen-to em temperatura controlada, utilizaram-se estufas incubadoras tipo B.O.D. Os períodos de armazena-mento foram de 5; 10; 20; 40 e 80 dias após a ex-tração das sementes. Determinou-se o percentual de umidade de quatro amostras de 15 sementes, na data da coleta e após cada período de armazenamento, em estufa com circulação forçada de ar (a 50°C ± 3°C), até peso constante (aproximadamente sete dias).
Depois da retirada das sementes de cada condição de armazenamento, o experimento foi conduzido em casa de vegetação, na Universidade
Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR), Câmpus Pato Branco, em delineamento inteiramente casua-lizado, com quatro repetições de 15 sementes cada. A semeadura foi realizada a um cm de profundidade, em bandejas de isopor (células de 100 cm3), contendo
como substrato Plantmax® Hortaliças. Cada célula
recebeu uma semente. Isso foi efetuado também na data de coleta (sem armazenamento), visando a verificar a viabilidade inicial das sementes. A irriga-ção foi efetuada diariamente, mantendo o substrato sempre úmido.
Procedeu-se à contagem de plantas emergidas a cada cinco dias, a partir do início da emergência (35° ao 50° dia após semeadura) até aproximadamen-te o 150° dia da semeadura. Para o cálculo do índice de velocidade de emergência (IVE), consideraram-se os dados até a data de estabilização da emergência (aproximadamente aos 120 dias após semeadura). Efetuou-se também a avaliação do percentual de emergência (número de plantas emergidas/número de sementes semeadas) e do percentual de poliembrio-nia (número de sementes que deram origem a mais de uma planta/número de sementes que originaram plantas), ao final do experimento.
Os dados de emergência, IVE e poliem-brionia foram submetidos aos testes de adequação aos pressupostos do modelo matemático: teste de sequência, para verificar a aleatoriedade dos erros; teste de Lilliefors, para verificar a normalidade da dis-tribuição dos erros; e teste de Bartlett, para verificar a homogeneidade das variâncias residuais entre os tratamentos (STEEL; TORRIE, 1960). Em seguida foi procedida a análise de variância, considerando apenas os dados de cinco dias após armazenamento das sementes, visto que, nas demais datas, não houve emergência. As médias das diferentes temperaturas de armazenamento foram comparadas entre si, pelo teste de Scott-Knott (P≤0,05), utilizando o programa ‘Genes’ (CRUZ, 2006).
Experimento 2
Para o experimento 2, os frutos foram cole-tados em setembro de 2008. Após extração, foram selecionadas as sementes de maior tamanho (massa média de semente = 198 ± 18 mg) e divididas em subamostras de 15 sementes cada.
As sementes foram embaladas a vácuo, em sacos de polietileno (80 µ de espessura), sob três condições: com água destilada esterilizada (10 mL por saco), tampão fosfato pH 7,0 (10 mL por saco) ou mantidas a seco. As embalagens foram mantidas sob temperatura controlada de 12°C, em estufa in-cubadora tipo B.O.D. Testaram-se também períodos de armazenamento de 5; 20; 35; 50 e 65 dias após
extração das sementes. Determinou-se o percentual de umidade das sementes na data de extração e após cada período de armazenamento, da mesma forma que no primeiro experimento.
Depois da retirada das sementes de cada con-dição e período de armazenamento, o experimento foi conduzido no mesmo local e utilizando mesma metodologia do experimento anterior.
Os dados de emergência, IVE e poliembrionia foram submetidos aos testes de adequação aos pressu-postos do modelo matemático, da mesma forma que no primeiro experimento. Os dados de percentual de poliembrionia foram transformados em log10(x). Em seguida, foi procedida a análise de variância, em es-quema bifatorial (3 x 5), sendo três condições e cinco períodos de armazenamento das sementes. Quando adequado, foram ajustadas equações de regressão, utilizando o programa ‘Genes’ (CRUZ, 2006).
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Experimento 1
Para a avaliação dos dados de emergência, IVE e poliembrionia, não foi necessário utilização de transformação, pois os mesmos foram adequados a to-dos os pressupostos do modelo matemático.
Observou-se que as sementes de jabuticabeira perderam totalmente sua viabilidade quando arma-zenadas por mais de cinco dias, independentemente da temperatura utilizada, o que denota típico com-portamento de sementes recalcitrantes (ROBERTS, 1973a). Das sementes armazenadas por cinco dias, observou-se que aquelas submetidas a temperatura ambiente mantiveram maior viabilidade e vigor, pois tiveram emergência e índice de velocidade de emergência (IVE) significativamente superiores às temperaturas de armazenamento de 12°C e 6°C. A taxa de poliembrionia foi, em média, de 29,2% e não foi afetada significativamente pelas temperaturas, o que pode ser relacionado ao alto coeficiente de variação obtido, 112,4% (Tabela 1). Das sementes poliembriônicas, houve emergência de duas até cinco plantas, sendo mais frequente o menor número. Gur-gel e Soubihe Sobrinho (1951) observaram variação no percentual de poliembrionia entre genótipos de três espécies de jabuticabeira, coletados em diferentes locais de São Paulo, que foi de 15 a 72%, inclusive com variação entre anos de coleta para os mesmos genótipos. Isso indica a presença de forte influência ambiental na expressão da poliembrionia, o que pode explicar o alto CV(%) encontrado no presente experimento.
O teor inicial de água das sementes (sem
armazenamento) foi de 42,1%, proporcionando emergência de 100% e IVE de 0,56, quando a seme-adura foi efetuada logo após a extração dos frutos. No 5° dia de armazenamento, a umidade já estava reduzida, em média, a 16,4%, nas três temperaturas (Tabela 2). Portanto, observou-se que as sementes perderam rapidamente o teor de água.
Comparando as Tabelas 1 e 2, observa-se que a maior emergência (83,4%), obtida sob temperatura ambiente, coincide com o maior teor de umidade das sementes (19,6%). As sementes armazenadas por 5 dias a 6°C apresentaram menor percentual de emergência e IVE, devido a seu teor de umidade situar-se em torno de 13,7%. A partir do 10° dia de armazenamento, não houve emergência, coincidin-do com níveis de umidade das sementes abaixo de 10%. Valio e Ferreira (1992) também verificaram que a germinação de sementes de jabuticabeira está associada ao teor de água das mesmas. Porém, observaram que as sementes não germinaram com grau de umidade de 20,7%, o que difere do presente experimento. Isso pode ser explicado, pois os autores observaram a germinação das sementes apenas até o 12° dia da incubação em condições de temperatura controlada. Provavelmente, se a avaliação tivesse sido realizada por um período maior de tempo, haveria germinação, pois o IVE também é reduzido em sementes com baixo teor de umidade, ou seja, sua emergência é mais lenta. Os mesmos autores ob-servaram que a perda de eletrólitos e de substâncias orgânicas está relacionada de forma inversamente proporcional ao grau de umidade das sementes de jabuticabeira. A perda dessas substâncias indica que a dessecação causa irreversíveis danos às membranas das células e à consequente perda da viabilidade (ROBERTS, 1973b).
Observou-se que as sementes de jabutica-beira são moderadamente recalcitrantes (moderada tolerância à dessecação), segundo a classificação de Farrant et al. (1988), e que o grau de umidade letal, que representa o limite a partir do qual todas as se-mentes perdem a viabilidade (HONG; ELLIS, 1992), foi entre 10 e 13%. Para o camu-camu (Myrciaria
dubia), outra fruteira da família Myrtaceae, nativa
da Amazônia, Gentil e Ferreira (2000) observaram que o grau de umidade letal foi em torno de 19%.
Farrant et al. (1988) observaram que as se-mentes alta e moderadamente recalcitrantes são sen-síveis a baixas temperaturas. Isso foi demonstrado no presente trabalho, pois as sementes de jabuticabeira perderam a viabilidade mais rapidamente sob tem-peraturas mais baixas (12°C e 6°C) em comparação à temperatura ambiente (média de 17°C). Porém temperaturas altas também prejudicam a germinação,
pois Andrade e Martins (2003) observaram que a germinação de sementes de jabuticabeira foi maior quando submetidas a 15°C e 20°C, em comparação a temperaturas acima de 25°C.
Experimento 2
Para a emergência das plântulas, houve
interação significativa entre os fatores testados (condição de armazenamento x período de armaze-namento). Ocorreu redução linear da viabilidade das sementes com o armazenamento. Entretanto, até 35 dias do armazenamento, a emergência foi similar en-tre as condições de armazenamento (65%). A partir daí, o tratamento das sementes com tampão fosfato manteve maior viabilidade das sementes, que foi de 41,7% aos 65 dias de armazenamento, enquanto com água foi de 36,2%, e o pior tratamento foi a seco, no qual as sementes apresentaram emergência de apenas 8,3% aos 65 dias (Figura 1).
Pelas equações de regressão, pode-se pre-dizer que, se as sementes de jabuticabeira forem embaladas a vácuo com tampão fosfato, há redução de 0,68% de emergência a cada dia de armazena-mento; para o tratamento com água, essa redução é de 0,75% e, no tratamento a seco, é de 1,3% a cada dia de armazenamento.
O IVE também foi influenciado significa-tivamente pela interação entre os fatores testados. Houve redução linear do IVE com o passar dos dias de armazenamento, de forma semelhante à emergência, ou seja, a redução do IVE foi menor quando se utilizou o tratamento com tampão fosfato, intermediária com água e maior quando as sementes foram mantidas secas (Figura 2).
A emergência de sementes sem armaze-namento (na data de coleta) foi de 92 ± 1,8% e o IVE de 1,54 ± 0,05, valores superiores aos encon-trados por Danner et al. (2007). O valor de IVE das sementes do segundo experimento foi maior que das sementes utilizadas no primeiro experimento, o que pode ser explicado pelo fator genético, visto que foram coletadas de plantas diferentes, havendo diferença de vigor.
Apenas para a variável percentual de poliembrionia houve falta de homogeneidade da variância, a qual foi obtida após transformação dos dados originais à escala logarítmica. A taxa de poliembrionia das sementes armazenadas foi, em média, de 41,3% e não foi influenciada significati-vamente pelas condições e pelo tempo de armazena-mento. Isto evidencia que outros fatores influenciam na taxa de poliembrionia, podendo ser o principal a influência genética e as condições ambientais durante a embriogênese somática de sementes na
planta-matriz.
Nas sementes poliembriônicas, normalmente, há um embrião zigótico, formado pela fecundação, e um ou mais embriões assexuais, formados por apomixia (embriogênese somática), os quais geram plantas que são clones da planta-mãe. Gurgel e Sou-bihe Sobrinho (1951) observaram que o número de embriões por semente de jabuticabeira variou de 1,13 a 1,85 nos diversos genótipos avaliados. Esse proces-so apresenta grande potencial para o melhoramento genético, através da propagação clonal de genótipos superiores usando sementes. Porém, esse potencial ainda é pouco conhecido e explorado (Koltunow; GROSSNIKLAUS, 2003). No caso da jabuticabeira, primeiramente, é necessário desenvolver uma técnica para diferenciar precocemente a planta zigótica da-quelas não zigóticas.
A umidade inicial das sementes (sem arma-zenamento) foi de 46,6%. Quando armazenadas em água, as sementes aumentaram a umidade, em média, para 60,5% e, em tampão fosfato, para média de 57,3%, até o 65° dia de armazenamento. O armaze-namento das sementes a seco permitiu a manutenção da umidade das sementes, que foi de 46,6% em média, até os 65 dias de armazenamento.
Assim, observa-se que apenas a modificação da atmosfera, com embalagem a vácuo, permitiu a ma-nutenção da umidade das sementes. Isso porporcionou a manutenção de boa viabilidade (próximo de 65%) até o 35° dia de armazenamento, como já demonstrado (Figura 1). Entretanto, após esse período, mesmo com a manutenção da umidade das sementes, sua viabili-dade foi drasticamente reduzida na embalagem a seco, mas mantida em níveis razoáveis na presença de água e, principalmente, de tampão fosfato. Provavelmente, esses auxiliaram na manutenção da integridade da parede celular e da atividade enzimática, visto que o tampão fosfato é utilizado na determinação de atividade de enzimas, por favorecer a manutenção da integridade de proteínas (NSIMBA-LUBAKI et al., 1983). Valio e Ferreira (1992) também observaram que, após 20 dias de armazenamento a seco em sacos de polietileno, as sementes de jabuticabeira apresen-taram baixa germinação (10%), apesar de conter 50% de teor de água.
Os resultados apresentados neste trabalho demonstram que, quando for necessário o armazenamento de sementes de jabuticabeira (Plinia
cauliflora), esse deve ser feito em embalagem a vácuo
seco, até 35 dias, ou com tampão fosfato pH 7,0, se for por período maior. Esses resultados favorecem a eficiência no intercâmbio de germoplasma de jabuticabeira entre instituições de pesquisa e facilitam o escalonamento de semeadura em viveiros de mudas.
TABELA 1- Emergência, IVE e poliembrionia de sementes de jabuticabeira (Plinia cauliflora) após cinco
dias de armazenamento sob diferentes temperaturas.
Temperatura Emergência (%) IVE Poliembrionia (%) Ambiente 83,35 a 0,51 a 37,50NS
12°C 41,65 b 0,29 b 25,00 6°C 33,33 b 0,15 b 25,00 CV (%) 34,3 1,3 112,4
Médias seguidas de letras distintas diferem entre si, pelo teste de Scott-Knott (P≤0,05). NS: não significativo pelo teste F (P≤0,05).
TABELA 2 - Teor de água (%) de sementes de jabuticabeira (Plinia cauliflora) submetidas a diferentes
períodos e temperaturas de armazenamento.
Temperatura de armazenamento Período de armazenamento (dias) Ambiente 12°C 6°C
5 19,6 16,0 13,7
10 9,9 9,6 8,9
20 8,1 7,6 7,0
40 6,7 6,3 5,7
80 5,4 5,1 5,0
FIGURA 1 - Emergência de plântulas de jabuticabeira (Plinia cauliflora) em função das condições e do
FIGURA 2 - Índice de velocidade de emergência (IVE) de plântulas de jabuticabeira (Plinia cauliflora) em
função das condições e do período de armazenamento. CV(%) = 32,8.
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CONCLUSÕES
Nas condições experimentais testadas, conclui-se que:
1-Sob atmosfera normal, as sementes de jabu-ticabeira conservam-se por apenas cinco dias, man-tendo maior viabilidade sob temperatura ambiente.
2-As sementes de jabuticabeira perdem total-mente a viabilidade com teor de umidade próximo a 10%.
3-As sementes de jabuticabeira armazenadas a vácuo com tampão fosfato mantêm razoável viabi-lidade até 65 dias de armazenamento.
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